裸鼠成瘤
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关于肿瘤细胞株的选择,确实是一个很麻烦的问题,各类文献中提到过的细胞株有很多,但是一般而言,我觉得,对于我们做裸鼠肿瘤模型,细胞株的选择应该考虑一下几个方面:
1. 国际公认度,虽然SFDA的指导原则上表示只要是建株细胞株均可以,但是一般来说,还是应该尽量考虑国际上比较公认的细胞株。
2. 体内生长情况,很多细胞株,在文献中有很高的出镜率,但是实际上,基本都是从体外开始有名,所以很多人就硬生生的往体内套,结果就是吃力不讨好,比如楼主提到的A549,还有MCF-7,都是很有名气的细胞株,但是在体内却不是一个好的试验对象,成瘤率低,生长慢,均一度差。现在国内的很多研发单位,特别是一些公司的领导们,缺乏这方面的认识,动不动就把这些著名的细胞株挂在嘴边,硬压着一线的研究人员去花功夫做这些细胞株,作的不好,就怀疑大家的水平如何如何的,奶奶的,对此非常生气!
3. 药物的敏感性,这一点常常被大家忽视,大部分的裸鼠肿瘤模型都是为抗肿瘤药物的筛选以及研究服务的,但是常常大家只考虑了这个细胞株是不是好做,但是没有考虑到细胞株本身对于药物的敏感性,比如Lovo细胞,国际公认度也还可以,体内生长情况也很棒,但是对于药物的敏感性不佳,大部分的常规化疗药物到了它这里,抑瘤率都会下降,显而易见,对于抗肿瘤药物的筛选来说,它不是一个好的选择。
另外说一点,体内与体外的关系,现在做体内的人,常常被体外的人牵着鼻子走,体外做出来什么什么细胞株敏感,体内的人就得吭哧吭哧的去做这个,但是却死活做不好,其实,现在我和一些老前辈们的观点是,体内和体外应该协调好细胞株的选择问题,体外的人手上有大把的细胞株可以选择,如果,体内的人不去和他们协调,那么将永远被牵着鼻子走,受累还不讨好,应该大家坐下来,一起选择20~30种细胞株作为常规的筛选细胞株,这就足够了,细胞株选择的时候考虑好方向(胃癌、肝癌、肺癌什么的)、靶点(EGF、vEGF等等),不能漫无边际的抓着哪个体内就的做哪个,谁也没有这个本事啊。
以下给出一些细胞株供大家参考:
头颈部肿瘤
没有特别好的细胞株,Hep2(喉癌)、CNE(鼻咽癌)凑活,比较慢,但是可以接受。
肺癌
不要和我提什么A549,不好伺候,NCI-H460(大细胞肺癌)还不错,生长速度快,成瘤率好,但是技术不好的话,均一度会差一些,水平过关的话,开始试验的时候SD应该为平均值的1/3,对药物很敏感,特别是紫杉醇,非常敏感。
SPC-A-1(肺腺癌),马马虎虎过得去,速度不是很快,但是也还能接受。
胃癌
MNK-45,日本细胞株,公认度也可以,比较好。
BGC-823,很好的公认度,生长有些慢。
食道癌
Eca-109,我们找不到其他的东西,只能用它,一般般,有点不好伺候。
前列腺癌
PC-3、DU-145,都是不错的细胞株,用它们没错的。
结肠癌
HT-29吧,生长还可以,Lovo对药物的敏感性差了点。
肝癌
这个是比较头痛的一个领域,Bel-7402,SMMC7721只能说凑活,还有国内自己建株的QGY生长特性不错,但是公认度差了点。
白血病
我自己都没有做出来过,嘿嘿,K562和HL60都不好整。
表皮癌
A431,这家伙,棒极了,在我手上,每次试验只需要淘汰一两只,剩下的SD小于平均值的1/4,我很喜欢它,主要是EGFR高表达,做这方面的药物,少不了它!
乳腺癌
不要用MCF-7,MDA-MB-435、MDA-MB-468、Bcap-37都不错,其中Bcap-37也是EGFR高表达。
卵巢癌
SK-ov-3不错的。
宫颈癌
比较麻烦,Hela细胞株自身的生长特性就不佳,另外安全性方面也很不好,女生勿近,我们以前做过一个C33A,还可以,对药物很敏感,生长比较慢,成瘤率也偏差,用的人也不多,但是没有办法阿。
1。今年开始,FDA关于细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究技术指导原则中指出,体内实验主要用人癌移植瘤模型,而且应包括二期临床实验中拟筛选的肿瘤组织类型,文献报道现在我考察的药物对肝癌有较好的疗效,也就是说,我需要建立人肝癌移植瘤模型。现在我正在尝试HepG2,但成瘤率仅70-80%,而且传代次数多了以后,肿瘤生长缓慢,哪位大侠尝试过HepG2,有何经验?请赐教。
2。另外,哪位大侠尝试过其它人肝癌移植瘤模型,成瘤率如何?亦望赐教。
3。哪位大侠准备过细胞毒类抗肿瘤药物的新药报批材料,材料中都需要包含什吗内容?还有写作格式,请分享你的经验,多谢。
4。从Anticancer drug development guide:preclinical screening, clinical trials and approval, second edition edited by Beverly A Teicher and Paul A Andrews, 2004 书中知道,对于美国癌症中心的60株瘤株,其中多数瘤株的生长速度较快,成瘤率高(大于90%),但对于成瘤率在70-80%的A549, UACC-62, SK-MEL-2等,他们也枪毙了,大家对这个问题如何看待?目前大家尝试的瘤株都有哪些?成瘤率又如何?希望大家能共享这些宝贵的资源(大家都知道建立裸鼠移植瘤模型不但时间成本高,而且费用成本也高)有时花了大量的人力物力,结果发现该肿瘤细胞系不适合人移植瘤模型,岂不是对大家金钱和时间的极大浪费(这些信息从文献中通常查不到),因此我恳求大家能把自己的经验和体会写出来以便大家共享,以便大家少走弯路。
首先我介绍一下我们目前的模型情况。到目前为止,我们尝试了肝癌HepG2, 乳腺癌MCF-7, 肺癌A549 和
喉癌Hep2,整体来看,成瘤率仅有70-80%不等。如大家尝试过这些瘤株,如有好的建议,恳请赐教。愿我们大家能互帮互助。
我也正要进行裸鼠试验,也有类似的顾虑,初步确定使用乳腺癌MCF-7, 肺癌A549 和结肠癌HT29,我想成瘤率不高应当是每一株人癌细胞株的共性吧,关键要掌握3个方面:
1.裸鼠的状态
裸鼠的年龄,比如5-7w比9w容易成瘤,因为这时免疫系统不够强;或者如果裸鼠由于试验系统染菌而长毛或感染,则成瘤率可能会受影响
2.细胞接种量
动物肿瘤一般接种2~600万/只就100%成瘤,而人癌则需要1000万以上才能较高的成瘤
3.细胞状态
肿瘤细胞的活力,生长状态,是否对数生长期,有无污染也对成瘤影响很大
抛砖引玉,请大家指正
人肝癌移植瘤模型用Balb/c裸鼠,Bel-7402(AFP+),SMMC7721(AFP-),体内皮下成瘤率可90-100%
我用的是胰腺癌的Aspc-1和Panc-1细胞系,右肋缘皮下注射,100%成瘤率啊(共10只)。
个人感觉细胞要处于对数生长期,细胞数量在1000W为好,不过文献上也有5*100W左右的。而且裸鼠的体重在16g为佳。