禽呼肠孤病毒σNS和σC基因shRNA载体构建及其干扰效果测定

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禽呼肠孤病毒ｃＳ和（ｒＮ】ｒ因ｓＲＡ载体Ｃ基ｈＮ
构建及其干扰效果测定
熊文婕谢芝勋，加波２庞耀姗２谢志勤２邓显文２谢丽基２，刘，，，，
（．Ｉ防城港市动物疫病预防控制中心，广西防城港５８０；．３０１２广西壮族自治区兽医研究所，广西南宁５００）３０１
摘要：呼肠孤病毒基因是病毒粘附蛋白，ｓ基因具有结合单链ＲＡ活性。根据ｓＮ禽ＮｉＡ靶序列设计原则设计￣ｄ＃Ｒ－ｔｓＮｉＡ模板并克隆到ｓＲＡ表达载体ｐｉｎｅ－Ｍ．ｎｏＲｈＮＳｅｅｒＶ４１ｅ。分别构建了针对ｃ基因的ｓＲＡ载体ｃ、２ｃｌＣｈＮ１ｃ、３和针对ｓ基
Ａｂｓｒｃ：ｉｎｒｏｉａｔａｔＡｖａｅｖｒｓ口ＣｇｎＳｒｍｓａｈｓｏｒｔｉｓ．ｎｒｅｅｈｄｔｅａｔｉｆｉｄｎｉｇｅｓｒｎｅｅＷａｉｄｅｉｎｐｏｅｎａｄｃＮＳｇｎａｃｉｔｏｎｉｇｓｎｌｔｄＲＮＡ．Ａｃｏｄｎｇｔｅｈｖｙｂａｃｒｉｔｏｈ
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２１０２年２５卷２期
Ｖｏ５Ｌ２Ｎ０２．
西
南
农
业
学源自文库
报
ＳｕｈｅｔＣｈｎｏｍＭｆＡｇｉｕｔｒｌＳｉｎｅｏｔｗｓｉａＪｎｏｒｃｌａｃｅｃｓｕ
文章编号：０１４２（０２０ｏ９Ｏ１０ — ８９２１）２一６７一６
ｔＣｉＰＲ检测结果表明，３和Ｎ１外干扰病毒复制的效果最佳。ｍｅＣＳ体关键词：呼肠孤病毒；ｈＮ干扰禽ｓＲＡ；
中围分类号：８１３．Ｓ５．４７２
文献标识码：Ａ
ＣｏｓｒｃｉｎｏｈｒｉｐｎＲＮＡｃｏｆＡｖａｏｉｕｒｅｉｇｎｔｕｔｏｆＳｏｔＨａｒｉＶｅｔｒｏｉｎＲｅｖｒｓＴａｇｔｎ＆ｏＧｅｅｎｔｒｎｔｏｆＩｓＩｔｒｅｅｃＣｎｓａｄＤｅｅｍｉａｉｎｏｔｎｅｆｒｎｅＥｃｔ
，
因的ｓＲＡ载体ＮＳ、ＳＮ３ｈＮＩＮ２、Ｓ。将构建的８ＲＡ载体和阴性对照分别与表达ｃ和Ｓ基因的融合蛋自的真核表达载体ｐＧｈＮＥ．
Ｆ ‘Ｃ及ｐＣＰｃＳＰＥＦ・Ｎ共转染Ｄ一细胞。荧光显微镜观察结果表明，个ｓＲＡ片段不同程度地抑制各自ｒＦ１６ｈＮ融合蛋白的表达。Ｒａ．ｅ１