1.碘量法测定还原糖操作规程

1.碘量法测定还原糖操作规程

6.1仪器：1000w可调节电炉，50ml碱式滴定管.5ml移液管,10ml移液管，250ml容量瓶,250ml 三角瓶，500ml碘量瓶。

6.2试剂：A,B,C,D,E溶液。市售浓盐酸，0.1N标准重铬酸钾标准溶液，分析纯碘化钾，碳酸氢钠，无菌水，2%可溶性淀粉指示剂

6.3溶液配制及标定

6.31 A.B.C.DE溶液，按下表配制，采用直接法配制，准确称取一定量的纯物质，溶解后准确稀释定容至10升。

溶液代号溶液名称分子式重量（g/1L）

A 硫酸铜Cu2SO469.2

B 酒石酸钾钠KNaC4H4O6.4H2O 346

氢氧化钠NaOH 103.2

C 碘化钾KI 300

D 硫酸H2SO4142ml

E 硫代硫酸钠Na2S2O325.2

碳酸钠Na2CO3 1.0

6.32 0.1mol/L的E溶液的标定

于500ml的碘量瓶中加入2g分析纯碘化钾（KI）.3g 碳酸氢钠（NaHCO3）.2g分析纯碘化钾（KI）.200ml无菌水，20ml市售浓盐酸（35%HCL），准确量取25ml0.1N标准重铬酸钾标准溶液。（4.903g定容到1000ml）摇匀置于暗处静止5分钟以上。用E溶液进行滴定，临近终点时加入2%可溶性淀粉指示剂数滴，终点颜色的判断：紫色-----淡绿色（30秒不反色）

6.33 计算公式：E系数=25/K

25----25ml0.1N标准重铬酸钾标准溶液。

K------E溶液的滴定量

6.4 还原糖的检验

6.41原理：试剂A和B溶液混合时产生天蓝色的氢氧化铜沉淀，此沉淀立即与酒石酸钾钠反应生成深蓝色的络合物---酒石酸钾钠铜，酒石酸钾钠铜倍还原糖还原，生成红色的氧化铜沉淀。在酸性条件下。剩余的酒石酸钾钠铜能析出Cu2+，而与碘化钾中的I-反应生成I2，可用硫代硫酸钠标准溶液滴定之.

6.42 样品稀释：浓糖（干物45%以上的样品稀释20倍，干物为30%左右的样品稀释10倍）6.43空白滴定

分别吸取10mlA溶液和B溶液于250 ml三角瓶中，加入30ml蒸馏水。加入3各玻璃珠。放在电炉上煮至沸腾。沸腾后继续煮2min.之后取下三角瓶冷却至室温，加入C溶液和D溶液各10ml.摇匀，用E溶液滴定，临近终点时加入2%可溶性淀粉指示剂数滴，继续滴定，滴定至溶液颜色呈白色（30秒不反色）为至。

6.44样品测定

吸取一定量已经稀释后的葡萄糖样品于250ml三角瓶中，再分别吸取10mlA溶液和B溶液于250 ml三角瓶中，加入30ml蒸馏水。加入3各玻璃珠。放在电炉上煮至沸腾。沸腾后继续煮2min.之后取下三角瓶冷却至室温，加入C溶液和D溶液各10ml.摇匀，用E溶液滴定，临近终点时加入2%可溶性淀粉指示剂数滴，继续滴定，滴定至溶液颜色呈淡粉色（30秒不反色）为至。

6.5计算：

D=(V0-V)*E

V0---空白体积

V----样品滴定体积

6.6查表

由滴定结果计算得出D值，查表查出G值数据。G值对应的数据即为该葡萄糖样品的还原糖。