微生物实验酵母菌的计数形态观察

微生物学实验开课时间： 2015 年3 月20 日实验名称：功能微生物的形态观察（三）酵母菌的形态观察、大小测定和直接计数

1.实验记录（包括实验现象和原始记录）

1）观察酵母菌形态。

①取一干净的载玻片，滴一滴蒸馏水，轻轻挑取老师准备好的酵母菌适量，蘸于蒸馏水上制成水玻片，盖上盖玻片，直接在显微镜下观察

②先在10倍镜下找到酵母菌，然后40倍镜拍照

下图为酵母菌的形态

（放大倍数：15×40）

2）酵母菌的大小测定

①将盒子里的镜台测微尺置于载物台上，注意刻度朝上，分别在4、10、40倍下数出它与目镜测微尺的重合格数，完成目镜测微尺的校正

②记录观察到的酵母菌大小，主要数酵母菌的长与宽所占的格数，注意尽量找大小不同，范围较大的酵母菌10个

③酵母菌的数量计数

取清洁无油的血细胞计数板，盖上盖玻片，将酵母菌液摇匀，在盖玻片边缘滴几小滴，注意让菌液自行渗入计数室内，静置5min，在40倍镜下计数，选取9宫格中央的小室，计数如下（只数上边和左边的酵母菌）

A室

注：上面的图片均摄于2015 年4月10 日。

2.结果与分析

1）酵母菌在显微镜下要比细菌大得多，不具有鞭毛，明显有细胞核，在显微镜下形成一个明亮的光圈

2）校正目镜测微尺后，根据公式：目镜测微尺每格长度（um）=两重和线间镜台测微尺格数*10/两重合线间目镜测微尺格数，计算出每格长度分别是4倍（25）、10倍（10）、40倍（2.5），即酵母菌大小计算每格为2.5um

因此菌体大小范围为（4.8—9.5）×（5.3-11.8）um

3）酵母菌的计数结果如下图

3.结论

1）酵母菌的形态特征：

对比细菌，酵母菌要大得多，并且酵母菌细胞核而细菌只有拟核，有些细菌还有鞭毛而酵母菌没有，呈椭圆状

2）酵母菌的大小：

酵母菌的大小经实验得出，大概范围为（4.8—9.5）×（5.3-11.8）um

3）酵母菌数量：

本实验中酵母菌的数量大致为7.9×108 个/ml

4.思考题

1）当接目镜不变，目镜测微尺也不变，只改变接物镜，目镜测微尺每格所量的镜台上物体的实际长度是否相同？为什么？

答：不同，物镜成实像于目镜前方，标尺即位于物镜所成实像的位置（在对好焦

后），目镜成虚像于明视距离，所以物镜倍数增大以后，原来占一个单位长度的实像现在会占不同的单位，即测微尺每格所代表的长度不同

2）结合你的实验体会，总结哪些因素会造成血细胞计数板的计数误差，应如避免？

答：1.活细胞和死细胞不易分开，数出来的是活死细胞的总和

2.细胞溶液必须均匀，再用之前要震荡均匀，否则细胞沉在试管底部，容易出现误差

应该避免操作误差，实验时每次使用细胞溶液都要震荡均匀

5.认识与体会

1）熟练操作显微镜，并可以在观察时计数

2）掌握了血细胞计数法的使用

3）了解了酵母菌一般的大小和形态特征