人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒酶联免疫法

人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒酶联免疫法

试剂厂家：英科新创（厦门）科技有限公司本试剂盒采用抗原夹心两步法检测人血清或血浆中的HIV1/HIV2型抗体。在微孔板预包被基因重组HIV（1+2）抗原，当加入的待检测样本中存在HIV抗体时，将反应形成抗原抗体复合物，再与加入的酶标记基因工程HIV（1+2）抗原反应，最后形成“固相HIV抗原-HIV抗体-酶标记HIV 抗原”的免疫，复合物，加入底物后形成显色反应。

标本要求；

1采用血清或血浆样本，血浆样本可以使用常规用量的肝素，枸橼酸钠或者EDTA抗凝。

2样本不能用叠氮钠防腐，以免抑制酶的活性。

3样本保存在2-8C。如需长期保存，需置-15-20C冻存，并避免样本反复冻融。

4高血脂，高胆红素及溶血样本可能会影响试验结果的准确性，建议不使用。

检验方法：1.平衡：将试剂合各组分从盒中取出，平衡至室温（18-25℃），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存。

2配液：浓缩洗涤液配前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。

3.编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。

4.加样：按顺序分别在相应孔中加入50ul待测样本及阴.阳性

对照。

5.温育：覆上封板膜，置37℃温育60分钟。

6.洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。

7.加酶：分别在每孔中加酶标抗原30分钟。

8.温育：覆上封板膜，置37℃温育30分钟。

9.洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。

10.显色：每孔加底物A，B和50ul,轻拍混匀，37℃暗置30分钟。

11.终止：每孔加入终止液50ul,混匀。

12测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时，需用空白对照孔调零），并记录结果。

结果判定；1.样本OD值S/CO≧1者为HIV抗体反应初筛阳性

样本OD值<1者，为HIV抗体反应阴性。

2.阴性对照OD均值>0.1或阳性对照OD均值≤0.6时，实验无效，应重新试验。

初筛阳性者应重新取样进行双孔复试，复试阳性者应按照“全国HIV检测管理规范”送HIV确认实验室进行相关确认试验。

参考值：临界值（C.O.）的计算：

临界值=阴性对照OD均值+0.10

阴性对照OD均值小于0.05时以0.05计算