ANCA相关小血管炎(AAV)检测和意义和治疗

ANCA的抗体谱
以对中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原
中性粒细胞为主、单核细胞比重很少 实质是胞质中的颗粒蛋白酶
中性粒细胞胞浆的嗜天青颗粒(azurophil granules) 单核细胞胞浆中的溶菌酶(lysozyme)
少部分 中性粒细胞特异性颗粒、胞浆和核质
ANCA靶抗原在中性粒细胞胞浆中的分布
2. Churg-Strauss综合征*（变应性肉芽肿性血管炎）累及呼吸道的高嗜酸细胞肉 芽肿性炎症，涉及到小到中等大小血管的坏死性血管炎，并伴有哮喘和高嗜酸细 胞血症。
3. 显微镜下多血管炎* 累及小血管（毛细血管、微小静脉、或微小动脉）的坏 死性血管炎，很少或无免疫物沉积，也可能涉及小及中等动脉。坏死性肾小球肾 炎很多见，肺的毛细血管炎也常发生。
欧洲血管炎疾病的相对构成比
巨细胞动脉炎占21.4% 结节性多动脉炎（包括经典型PAN和MPA）占11.8% 过敏性紫癜占9.3% 韦格纳肉芽肿和白细胞碎裂性血管炎各占8.5% 多发性大动脉炎占6.3% 川崎病占5.2% 变应性肉芽肿性血管炎占2.0% 其他（包括其他类型血管炎和未分类的血管炎）占27.0%
1951年描述了变应性肉芽肿性血管炎 (ChurgStrauss syndrome, CSS)
血管炎的分类模拟图
血管炎的分类树状图
Chapel Hill 会议关于系统性血管炎的命名及其定义
三．小血管的血管炎
1. 韦格纳肉芽肿* 累及呼吸道的肉芽肿性炎症，涉及到小到中血管的坏死性血 管炎（如毛细血管、微小静脉、微小动脉、动脉），坏死性肾小球肾炎多见。
注：箭头处为淋巴细胞
C-ANCA靶抗原
蛋白水解酶3（PR3） 杀菌/通透性增高蛋白（BPI） 弹性蛋白酶（HLE） 组织蛋白酶G（CG） 天青杀素（Azu）
P-ANCA
P-ANCA
中性粒细胞呈环绕细 胞核周围的胞质亮染， 表现为粒细胞核周的 阳性荧光染色者称为 P-ANCA，其靶抗原 主要是MPO。
ANCA相关小血管炎 (AAV)检测和意义和治疗
内容
血管炎的定义和分类 ANCA的检测和意义 AAV的概述
WG CSS MPA
AAV的治疗
定义:血管炎是发生在血管壁的炎症，炎症细 胞可以是中性粒细胞、淋巴细胞或者肉芽肿形成
系统性血管炎
临床表现因受累血管的类型、大小、部位及病 理特点不同而表现各异。其常累及全身多个系 统，引起多系统多脏器功能障碍，但也可局限 于某一脏器。系统性血管炎常累及的部位为皮 肤、肾脏、肺、神经系统等。
6. 皮肤白细胞破碎性血管炎 局限性皮肤白细胞破碎性血管炎，无系统性血管炎 或肾小球肾炎
*：和ANCA密切相关
疾病分布
流行病学调查的主要资料都是来源于欧洲，亚洲、 非洲等的相关资料较少 各地总的年发病率为39～141.54/百万成年人口 欧美资料显示最常见的原发性血管炎为GCA、WG、 MPA和CSS
ANCA相关荧光模型的鉴别
乙醇固定片 C
P
P P或 H P 和 H P和 H
甲醛固定片 C
C
C
HEp-2片
结果判定
cANCA pANCA aANCA ANA
胞浆
a-烯醇酶 催化酶(Catalase) 肌动蛋白(actin)
应用乙醇固定的白细胞制备的抗原底物片， IIF主要表现两种阳性荧光模型：
C-ANCA
P-ANCA
C-ANCA
C-ANCA
胞浆弥漫性分布均匀的 颗粒样染色，并在核叶 之间有重染者称之为胞 浆型，其靶抗原主要是 PR3(85-90%)
P-ANCA
两种荧光模型的成因
应用乙醇固定的白细胞制备的抗原底物片， 主要表现两种阳性荧光染色型：
cANCA
pANCA
间接免疫荧光检测的判定-1
N
M
L
E
•pANCA仅识别N和M，而 ANA还同时识别L。 •如pANCA和ANA同时阳性， 只有借助ELISA鉴定。 •以E天然荧光为基础，可以 确定ANCA亮度的分级。 •E可判定制片是否成功，细 胞形态是否满意。
内容
血管炎的定义和分类 ANCA的检测和意义 AAV的概述
WG CSS MPA
AAV的治疗
抗中性粒细胞胞浆抗体
Antineutrophil cytoplasmic antibody ANCA
1982年，Davies，节段性坏死性肾小球肾炎 1985年，van der Wouder，韦格纳肉芽肿 1988年，Falk，系统性血管炎和坏死性新月体肾小 球肾炎 1989年，Targen，炎性肠病 2005年，12th International ANCA Workshop
本组疾病临床表现复杂多样，变化多样，大多 数属疑难杂症。
历史
1936年描述了韦格纳肉芽肿 (Wegener‘s granulomatosis, WG)
1948年提及“显微镜下的动脉周围炎” (microscopic form of polyarteritis nodosa)，即现在的显微镜下多血管炎 (Microscopic Polyangiitis，MPA)
P-ANCA靶抗原
髓过氧化物酶（MPO） 溶酶体(Lys) 组织蛋白酶G (CG) 乳铁蛋白（LF） 天青杀素（Azu）
荧光素标记的抗免疫球蛋白
血清抗体 细胞核
载 细胞浆 片
间接免疫荧光检测的原理
甲醛固定 C-ANCA
酒精固定
强阳离子蛋白，如 MPO 弱阳离子或中性蛋 白，如PR3
C-ANCA
嗜天青颗粒
特异性颗粒
蛋白酶3(PR3)
乳铁蛋白(LF)
髓过氧化物酶(MPO)
溶菌酶(LYS)
杀菌/通透性增高蛋白(BPI)
人白细胞弹性蛋白酶(HLE) 组织蛋白酶G(CG)
溶菌酶(LYS)
天青杀素(AZU)
防御素(DEF)
b-葡萄糖醛酸酶(b-glucuronidase)
人溶酶体相关膜蛋白2wenku.baidu.comH-LAMP2)
4. 过敏性紫癜 (Henoch-Schönlein purpura) 累及小血管（毛细血管、微小静脉、 微小动脉）的、伴有IgA免疫物沉积为主的血管炎，典型的累及皮肤、肠道及肾 小球，伴有关节痛或关节炎
5. 原发性冷球蛋白血症血管炎 累及小血管（毛细血管、微小静脉、微小动脉） 的、伴有冷球蛋白免疫物沉积和冷球蛋白血症的血管炎。皮肤及肾小球常被累及。