生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定

（如：洋葱鳞片叶表皮细胞，人的口腔上皮细胞等。
该实验不宜选用绿色植物的叶肉细胞。）
本实验的注意事项 • (1)几种液体在实验中的作用 • ①0.9%的NaCl溶液：保持口腔上皮细胞正常 形态 • ②8%的盐酸： • a.改变细胞膜的通透性 • b．使染色体中DNA与蛋白质分离 • ③蒸馏水：a.配制染色剂；b.冲洗载玻片
• 2．实验流程
• 冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10 s
• 3．实验现象及相关结论 现象 绿色明显集中且接 近细胞中央 绿色周围的红色范 围较广 结论 DNA主要分布于 细胞核中 RNA广泛分布于 细胞质中
实验结果示例
材料选择 1.生物实验选材基本要求: ①符合实验要求②易获取的原则③不对实验结果产生干扰 2.本实验选材初步分析： 真核细胞
紫色
双缩脲（NH2-CO-NH-CO-NH2）是两个分子脲（即尿 素）经180℃左右加热，放出一个分子氨（NH3）后 得到的产物。
双缩脲反应即在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲能与铜 离子（Cu2+）作用，形成紫红色络合物。 双缩脲试剂用于通过双缩脲反应检测双缩脲，因蛋 白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质，与蛋白
比较 斐林试剂 项目 使用 甲液和乙液混合均匀后方可 方法 使用，且现配现用 呈色 反应 需水浴加热 不 条件 同 反应 还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧 点 化,Cu(OH)2被还原为Cu2O 原理 颜色 浓度 相同点
双缩脲试剂
使用时先加A液再加B液 不需加热即可反应
具有肽键的化合物在碱 性条件下与Cu2+反应生 成络合物 砖红色 紫色 B液CuSO4浓度为0.01 乙液CuSO4浓度为0.05g/mL g/mL相同点 都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH浓度都是 0.1g/mL
(2)关于甲基绿和吡罗红溶液的配制：甲基绿 吡罗红染色液包括A液和B液，使用时现用现 配。
结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或被苏丹Ⅳ染成红色
（3）蛋白质的鉴定
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3.实验注意问题
（1）实验材料的选择 在物质的鉴定实验中,选择无色或颜色较浅的材，以 避免材料本身颜色的干扰。 （2）物质鉴定的实验一般不设立对照组（自身前后对
照），若设立，对照组应加入成分已知的物质（标准对
照）。
辨析比较 斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析
实验：观察DNA和RNA在细胞中的分布
1.实验原理 (1)甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同： DNA甲基绿 ――→ 绿色；RNA吡罗红 ――→ 红色 利用甲基绿吡罗红混合染色剂可显示DNA和RNA在细胞 中的分布。
• (2)盐酸可改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细 胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于 DNA 与染色剂结合。
生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定
1.实验原理
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的 颜色反应。
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（1）还原糖+斐林试剂
水浴加热
砖红色沉淀
（现用现配） 还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖（蔗糖、淀粉等是非还原糖） （2）脂肪+ 苏丹Ⅲ染液 镜检 橘黄色 苏丹Ⅳ染液 镜检 红色
（3）蛋白质+双缩脲试剂
质接触后的颜色呈紫色。
（4）淀粉+碘液 蓝色
2.实验步骤：
（1）还原糖的鉴定
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（2）脂肪的鉴定
取材：花生种子浸泡3～4 h，将子叶削成薄片
①取最理想的薄片 制片 ②染色：滴2～3滴苏丹Ⅲ染色3 min或苏丹Ⅳ1min ③去浮色： 1～2滴50%的酒精 ④制成临时装片：吸、滴、盖 镜检：在低倍镜下找到已着色的花生子叶最薄处 然后用高倍镜观察