红细胞微柱凝胶试

应用与操作（三）
• . 不完全抗体筛检和鉴定 • (1)将筛检红细胞或红细胞谱细胞(0.8% －1.2% 红细胞生理盐水悬液)分别加入 标记好的微管反应腔中各50µl。 • (2) 然后分别立即加入被检血清25µl。 • (3 )将己加好反应物的凝胶卡放入37 度 孵育15 min。 • (4) 取出凝胶卡立即用水平离心1 000 r/min 10 min 后，观察结果。
红细பைடு நூலகம்微柱凝胶试验
桓台妇幼保健医院特检科
原理
• 在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相应 抗体结合，利用凝胶的空间位阻，经低 速离心，凝集的红细胞悬浮在凝胶上层， 而未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶低 部(管底尖部)。微柱凝胶实验(又名微柱 凝胶血型卡法) 比传统的玻片和试管液 体介质中凝集实验更准确，更简单，结 果可较长期保存。
结果
• 1.若对照管细胞沉淀在管底，检测管凝 集块在胶上或胶中判读为阳性。 • 2. 若对照管和检测管的细胞沉淀均在管 底判读为阴性。 • 3. 若对照管细胞在胶上或胶中说明试验 失败，应重新试验。
附注
• 1.每种微柱凝胶卡部分为反应腔和凝胶分离柱两部分， 操作时，向反应腔内要先加红细胞，后加血清或抗体。 • 2. 离心机选择 一般使用微性凝胶卡专用水平离心机。 因为水平转子离心机离心力和凝胶微柱中红细胞离心 力是同一方向(同轴线)，这样阳性结果的红细胞抗原 抗体凝集复合物不偏向凝胶表面一侧和胶中一侧; 阴 性结果的红细胞不偏向管底之一侧而是沉淀于凝胶微 柱管尖底部。而角离心机由于其离心力和凝胶微柱中 红细胞离心力轴向不一致，可能造成凝集复合物偏向 管一侧，特是阴性结果位于管底之一侧，而不是管底 尖部，易造成弱阳性假象。
应用与操作（一）
• 1.血型检测 • ( 1 )将被检者红细胞(不用洗涤)配成2% －3% • 生理盐水悬液向己标记好的微管反应腔 内加50µl。 • (2) 再加已知抗体(IgG 抗D 或抗C ，抗E 等)50µl 于被检者红细胞上。 • (3) 立即水平离心1 000 r/min , 10 min 观察结果。
试剂
• 1. 中性凝胶微柱卡 不含任何抗体。， 应用于IgG 类不完全抗体检测。注意向 反应腔内要先加红细胞，后加血清或抗 体。 • 2. 特异性凝胶微柱卡 含特异性抗体， 如抗A 、抗B 、抗D 。 • 3. 抗人球蛋白凝胶微柱卡 含有抗人球 蛋白(抗IgG +C3)
结果判断
• 红细胞抗原抗体在凝胶介质中反应，未 凝集的红细胞通过离心后沉降于管底， 为阴性反应。红细胞抗原与相应的不完 全抗体结合后(致敏红细胞)，凝胶中的 抗人球蛋白形成凝集块，离心后仍滞留 在胶上或胶中，为阳性反应。 • 凝股微管抗人球蛋白试验，可省去传统 的抗人球蛋白试验的复杂洗涤红细胞过 程，使试验更简单、更规
应用与操作（二）
• 2. 交叉配血试验 • (1)取凝胶抗人球蛋白微柱卡，标记1 号("主侧") ，2 号( "次侧" )。 • (2 )将献血者红细胞(不用洗涤)配成0.8% －1. 2% 生 理盐水悬液50µl 轻轻滴入l 号微管中，再加25µl 受血 者血清。 • (3 )将受血者红细胞(不用洗涤)配成0.8% －1. 2% 生 理盐水悬液50µl 轻轻滴入2 号微管中，再加25µl 献 血者血清。 • (4) 将1 号、2 号已加好反应物的凝肢卡放入37 度孵 育15 min。 • (5) 取出凝胶卡立即用水平离心1 000 r/min(80 － 100 g) 10 min 后，观察结果。
组成与应用
• 微柱凝胶分中性胶、特异性胶和抗人球蛋白胶， 分别用于不同的血型血清试验。在中性凝胶实 验中，凝胶不含抗体，可用于检测IgM 类抗 体和红细胞抗原的反应，如ABO 血剧正反定 型等;在特异性凝胶试验中，凝胶中含有特异 性血型抗体，可用于血型抗原检测；在抗人球 蛋白凝胶试验中，凝胶中含有球蛋白抗体，可 用于检测IgG 类不完全抗体和相应红细胞抗原 的反应，如交叉配血、不规则抗体检定和鉴定， 以及用于人血清抗D 血型筛查等。