微生物学实验201310
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微生物学实验
适用于生物科学、生物技术等专业
暨南大学生命科学技术学院
生物工程学系微生物学实验室
参考教材： 沈萍 陈向东 《微生物学实验》（第四版）
高等教育出版社
实验一 环境微生物的检测（P5-8）
实验项目号：80000039101 实验类型： 验证性
一．实验目的： 1. 2. 3. 学习检测环境中微生物的方法； 观察不同类群微生物的菌落形态特征，比 较不同环境中微生物的类型和数量； 体会无菌操作的重要性。
一．实验目的： 1. 2. 3. 学习微生物制片、染色的基本技术； 了解革兰氏染色的原理，掌握革兰氏染 色的方法； 巩固油镜的使用方法，熟练观察细菌的 个体形态。
二．基本原理： 简单染色：
简单染色法是只用一种染料使细菌着色
以显示其形态。染料主要有碱性染料、酸
性染料和中性染料三大类，通常采用碱性
染料进行染色。因细菌在中性、碱性或弱
一．实验目的： 1. 2. 学习放线菌、酵母菌、霉菌的制片方法， 观察其个体形态 了解四大类微生物的菌落特点，学会从 菌落形态区分四大类微生物。
二．基本原理：
1. 放线菌（P72-73）：
印片法：用于观察气生菌丝、孢子丝的形态、孢子
的排列方式及形态。
2. 酵母菌（P73）：
用吕氏碱性美兰染色做水浸片，可区分死活细胞：
显微镜的放大倍数和分辨率
1. 放大倍数=接物镜放大倍数×
接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 是表示显微 镜辨析物体（两端）两点之间距 离的能力，可用公式表示为： D=λ/2n·sin(α/2 ) 式中D：物镜分辨出物体两点间 的最短距离。 ：可见光的波长（平均0.55m) n: 物镜和被检标本间介质的折 射率。 ：镜口角（即入射角）。
二．基本原理：
微生物的个体很小，必须要借助显微镜才能看清其形态。
显微镜的构造
1.光学部分:接目镜 、
接物镜 、 照明装置(聚光镜、 虹彩光圈、 反光镜等). 它 使检视物放大,造成物象.
2.机械部分:镜座、镜
臂、镜筒、物镜转换器、 载物台、载物台转移器、 粗调节器、细调节器等部 件.它起着支持 调节 固定 等作用.
死细胞→ → →蓝色
活细胞→ → →无色
3. 霉菌（根霉）（P74）：挑菌做水浸片直接观察。
细黄链霉菌（放线菌）
酵母菌
青霉
根霉
曲霉
三． 实验材料：
菌种：细黄链霉菌（平板）、酿酒酵母（试管斜 面）、黑根霉（平板） 玻片标本：青霉、黑曲霉 菌落标本： 细菌（大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌） 放线菌（细黄链霉菌） 酵母菌（酿酒酵母） 霉菌（黑曲霉、黑根霉） 染料：石碳酸复红、吕氏碱性美兰、乳酸酚 其他器材：
六． 分析及讨论：
七．思考题： 通过本次实验，在防止微生物污染 与扩散方面，你学到了些什么？有何体 会？
实验二 显微镜的使用和细菌基本形态的观察 （P40-47）
实验项目号：80000039101 实验类型： 验证性
一．实验目的： 1. 2. 学习并掌握显微镜，特别是油镜的工作原 理和使用方法 ； 熟练使用显微镜观察细菌的个体形态 。
3. 你的革兰氏染色是否成功？有哪些问题需要 注意，为什么？P84—(1) 4. 现有一株未知杆菌，个体明显大于大肠杆菌， 请你鉴定杆菌是G+还是G-，如何确定你的染 色结果的正确性？P84—(2)
实验四 放线菌、酵母菌、霉菌个体形态的观察 四大类微生物菌落形态的观察
实验项目号：80000039103 实验类型 ： 验证性
四． 实验方法和步骤：（P44-45）
主要是油镜的使用
1. 2. 3. 4. 5. 用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。 调节光亮度 低倍镜观察：粗调、细调 高倍观察 ：细调 油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，旋开高倍镜， 在标本中央滴一滴香柏油，转过油镜，使油镜镜头浸 入香柏油中，细调至看清物象为止。 6. 换片：另换新片，必须从“3”开始操作。 7. 标本片的清洁： 8. 用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜 头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量清洁剂擦去残留 的油，最后用擦镜纸擦去残留的清洁剂，后将镜体全 部复原。
2. 微生物大小的测定：（菌种：枯草杆菌）
做枯草杆菌的简单染色片 安装目镜测微尺（已安装好）并用镜台测微尺在各
物镜下校正目镜测微尺 在油镜下测定菌体大小：分别测10个菌的宽和长， 求平均值，再将所测格数乘以目镜测微尺（油镜） 下每格代表的长度，即得该菌的实际大小。
三． 实验材料：
菌种：酿酒酵母菌悬液，枯草杆菌斜面
其他器材：血球计数板，目镜测微尺，镜台
测微尺，显微镜，盖玻片，载玻片，染色液 等
四． 实验方法和步骤：
1. 显微镜直接计数法：（菌种：酿酒酵母）
镜检计数室→加样品→静止5分钟→显微镜计数（每个 计数室选5个中格） →记录结果→清洗血球计数板
二．基本原理： 环境中的微生物在营养丰富的培养 基平板中经过培养即可长成肉眼可见的 菌落，从而可检测到环境中存在的微生 物的类型和数量。 三．实验材料： 营养琼脂平板、 灭菌棉签、 恒温培养箱等
四． 实验方法和步骤：（P6-7）
每四个同学为一组，每个同学一个营养琼脂平板，每人各选取以下其 中一种处理方法（或你感兴趣的其他方法），写好标签：
处理完成后，盖好皿盖，倒置培养皿，置于37℃温箱培养1-2天观察，记录实验结果。
五． 实验结果： 将实验结果记录于下表（P8）：
表1：微生物检测的结果记录表
处理方法 菌落数量 菌落特征
（大小、形状、透明 度、颜色等）
（ 1）
（ 2）
（ 3）
（ 4）
简要说明
菌落数量可用“+”和“-”来表示，从多到少依次表示为++++，+++，++，+，-
四． 实验方法和步骤：
1.
放线菌（菌种：细黄链霉菌平板） 印片法：用接种铲取一小块菌苔（连同培
养基）放在一块载玻片上→取另一块载玻片 稍加热并在其上轻压→固定→用石碳酸复红 做简单染色片→油镜检→绘图
2. 酵母菌（菌种：酿酒酵母）
在载玻片上滴一滴美兰→用接种环取少量酵母菌 与染料混匀→盖上盖玻片（注意防止气泡的产生） →镜检（高倍镜） →绘图
油镜使用的原理
1. 香柏油的折射率 与玻璃接近，提高 了视野的照明度。
2 . 提高了显微镜的 分辨率
三． 实验材料：
玻片标本：
球状：四联球菌（Micrococcus tetragenus ） 杆状：枯草杆菌（ Bacillus subtilis ） 螺旋状：水弧菌（Vibrio aquatilis） 示范片：溶血链球菌（Streptococcus hemolyticus） 其他器材：显微镜、香柏油、清洁剂、擦镜纸 等
观察标本片
菌名
枯草杆菌
（Bacillus subtilis）
细胞结构
芽胞
染色方法
芽胞染色法
图例
鞭毛
变形杆菌
(Proteus vulgaris)
鞭毛染色法
荚膜
圆褐固氮菌 （褐球固氮菌）
（Azotobacter chroococcum）
负染色法
五． 实验结果:
革兰氏染色的结果
菌名 大肠杆菌 枯草杆菌 形状 简图 颜色 革兰氏染色结果
细菌基本形态的观察
利用油镜，观察细菌的基本形态（球状、杆状和螺旋状），边观察边绘图。
四联球菌
链球菌
枯草杆菌
水弧菌
五． 观察结果（绘图）P46
绘出在油镜下观察到的形态图，注意菌体的形态、大小比例、排列， 同时标明菌名(包括拉丁学名)和放大倍数（物镜的放大倍数×目镜的 放大倍数）
菌名 拉丁学名 放大倍数
酸性的溶液中时常带负电荷，而染料电离
后的染色部分带正电荷，易与细胞结合使
其着色。
革兰氏染色法（细菌学上最常用的鉴别染色法）：
根据细胞壁结构和成分的不同
三． 实验材料：
菌种：
枯草杆菌（Bacillus subtilis） 大肠杆菌（Escherichia coli） 染色液和试剂：革兰氏染色液、简单染色液等 芽胞、鞭毛、荚膜的示范片 其他器材：显微镜、香柏油、清洁剂、擦镜 纸等
二．基本原理：
1. 显微镜直接计数法: (P52)
每一个大方格边长为1mm， 则每一大方格的面积为 1mm2，盖上盖玻片后，载 玻片与盖玻片之间的高度为 0.1mm，所以计数室的容积 为0.1mm3。
设五个中方格中总菌数为A， 菌液Baidu Nhomakorabea释倍数为B，
2. 微生物大小的测定： (P48)
采用目镜测微尺 和镜台测微尺测量 微生物细胞的大小。 镜台测微尺一般是 将1mm等分为100格， 因此每格长10μm， 而目镜测微尺在不 同放大倍数下的每 格所代表的长度是 不同的，使用前须 用镜台测微尺校正， 以求得在一定放大 倍数下的实际长度。
1. 实验室空气中的微生物：比较培养基暴露于空气不同时间的区别：
打开皿盖，把培养基平板暴露于空气中10min，盖好皿盖； 打开皿盖，把培养基平板暴露于空气中30min，盖好皿盖；
2. 比较洗手前后手指上微生物的区别：在培养皿底部用记号笔分四个区（A、B、C、 D区），洗手前后分别用手指在培养基表面轻按。（注意不要按碎培养基。） 盖好皿盖。 3.口气中的微生物：打开皿盖，对着培养基吹气。 4.实验台面的微生物：用灭菌棉签揩拭实验台面，再用此棉签在培养基表面滚动一 下，也可用同样方法检测你所感兴趣的其他地方或物品。
六．分析及讨论：
七．思考题：（P47）
1. 用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜 头之间滴加香柏油有什么作用？
2. 镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是 直接用高倍镜或油镜观察？ 3. 影响显微镜分辨率的因素有哪些？
实验三 细菌简单染色及革兰氏染色
实验项目号：80000039102 实验类型 ： 验证性
绘图
牙垢中的细菌 100×10
枯草杆菌（示芽胞） 拉丁学名 放大倍数
变形杆菌（示鞭毛） 拉丁学名 放大倍数
圆褐固氮菌（示荚膜） 拉丁学名 放大倍数
六．分析及讨论： 七．思考题：（P47）
1. 在进行细菌涂片时应注意哪些环节？P75—(1) 2. 进行细菌制片时为什么要进行加热固定？在 加热固定时应注意什么？P76—(2)
显微镜保养和使用中的注意事项：
1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁 度 3.观察标本时，必须依次用低、高倍镜，最后用油镜。当 目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节 器，以免压碎玻片或损伤镜面。 4.观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的习惯，以 免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘图。 5.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单 手拿，更不可倾斜拿。 6.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐蚀 镜片。
2. 黑曲霉和黑根霉在个体形态和菌落形态上有何区 别？P76-（12）
实验五 显微镜直接计数法 及微生物大小的测定 （P47-56)
实验项目号：80000039104 实验类型 ： 验证性
一．实验目的：
1. 2. 了解血球计数板的构造和使用方法，学会用血 球计数板对酵母菌悬液进行计数。 学习并掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方 法。
四． 实验方法和步骤：
简单染色：（材料：牙垢） 涂片 →干燥 →固定 →染色（1-2min）→水 洗→干燥→油镜检→绘图 革兰氏染色：（材料：大肠杆菌、枯草杆菌） 涂片→干燥→固定→结晶紫初染（1-2min） → 水洗 →碘液媒染（1min）→ 水洗 →酒 精脱色（30s内）→ 水洗 →番红复染（2min） → 水洗 →干燥→油镜检，判断菌体的革兰 氏染色结果→绘图
菌名 拉丁学名 放大倍数
2.
列表比较四大类微生物的菌落特征
四大类微生物的菌落特征
类群 细菌
放线菌 酵母菌 霉菌
菌名
菌落大小
干湿
颜色
表面
边缘
厚薄
致密度
气味
六．分析及讨论： 七．思考题：
1. 根据你的观察结果，吕氏碱性美兰染色的作用时 间与酵母菌死活细胞的比例的变化是否有关系？ 试分析原因。P76-（10）
3. 霉菌（菌种：根霉）
在载玻片上滴一滴乳酸酚→用解剖针小心挑取少 许根霉的菌丝放在染料中→盖上盖玻片（注意防 止气泡的产生） →镜检（低倍镜或高倍镜） →绘 图
4. 标本片的观察：（青霉、曲霉） 5. 菌落形态的观察：
五． 实验结果:
1. 绘出所观察微生物的个体形态图（细黄链霉菌、酿酒
酵母、根霉、青霉、曲霉 ，注意标注清楚各部分结构的名 称）
适用于生物科学、生物技术等专业
暨南大学生命科学技术学院
生物工程学系微生物学实验室
参考教材： 沈萍 陈向东 《微生物学实验》（第四版）
高等教育出版社
实验一 环境微生物的检测（P5-8）
实验项目号：80000039101 实验类型： 验证性
一．实验目的： 1. 2. 3. 学习检测环境中微生物的方法； 观察不同类群微生物的菌落形态特征，比 较不同环境中微生物的类型和数量； 体会无菌操作的重要性。
一．实验目的： 1. 2. 3. 学习微生物制片、染色的基本技术； 了解革兰氏染色的原理，掌握革兰氏染 色的方法； 巩固油镜的使用方法，熟练观察细菌的 个体形态。
二．基本原理： 简单染色：
简单染色法是只用一种染料使细菌着色
以显示其形态。染料主要有碱性染料、酸
性染料和中性染料三大类，通常采用碱性
染料进行染色。因细菌在中性、碱性或弱
一．实验目的： 1. 2. 学习放线菌、酵母菌、霉菌的制片方法， 观察其个体形态 了解四大类微生物的菌落特点，学会从 菌落形态区分四大类微生物。
二．基本原理：
1. 放线菌（P72-73）：
印片法：用于观察气生菌丝、孢子丝的形态、孢子
的排列方式及形态。
2. 酵母菌（P73）：
用吕氏碱性美兰染色做水浸片，可区分死活细胞：
显微镜的放大倍数和分辨率
1. 放大倍数=接物镜放大倍数×
接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 是表示显微 镜辨析物体（两端）两点之间距 离的能力，可用公式表示为： D=λ/2n·sin(α/2 ) 式中D：物镜分辨出物体两点间 的最短距离。 ：可见光的波长（平均0.55m) n: 物镜和被检标本间介质的折 射率。 ：镜口角（即入射角）。
二．基本原理：
微生物的个体很小，必须要借助显微镜才能看清其形态。
显微镜的构造
1.光学部分:接目镜 、
接物镜 、 照明装置(聚光镜、 虹彩光圈、 反光镜等). 它 使检视物放大,造成物象.
2.机械部分:镜座、镜
臂、镜筒、物镜转换器、 载物台、载物台转移器、 粗调节器、细调节器等部 件.它起着支持 调节 固定 等作用.
死细胞→ → →蓝色
活细胞→ → →无色
3. 霉菌（根霉）（P74）：挑菌做水浸片直接观察。
细黄链霉菌（放线菌）
酵母菌
青霉
根霉
曲霉
三． 实验材料：
菌种：细黄链霉菌（平板）、酿酒酵母（试管斜 面）、黑根霉（平板） 玻片标本：青霉、黑曲霉 菌落标本： 细菌（大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌） 放线菌（细黄链霉菌） 酵母菌（酿酒酵母） 霉菌（黑曲霉、黑根霉） 染料：石碳酸复红、吕氏碱性美兰、乳酸酚 其他器材：
六． 分析及讨论：
七．思考题： 通过本次实验，在防止微生物污染 与扩散方面，你学到了些什么？有何体 会？
实验二 显微镜的使用和细菌基本形态的观察 （P40-47）
实验项目号：80000039101 实验类型： 验证性
一．实验目的： 1. 2. 学习并掌握显微镜，特别是油镜的工作原 理和使用方法 ； 熟练使用显微镜观察细菌的个体形态 。
3. 你的革兰氏染色是否成功？有哪些问题需要 注意，为什么？P84—(1) 4. 现有一株未知杆菌，个体明显大于大肠杆菌， 请你鉴定杆菌是G+还是G-，如何确定你的染 色结果的正确性？P84—(2)
实验四 放线菌、酵母菌、霉菌个体形态的观察 四大类微生物菌落形态的观察
实验项目号：80000039103 实验类型 ： 验证性
四． 实验方法和步骤：（P44-45）
主要是油镜的使用
1. 2. 3. 4. 5. 用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。 调节光亮度 低倍镜观察：粗调、细调 高倍观察 ：细调 油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，旋开高倍镜， 在标本中央滴一滴香柏油，转过油镜，使油镜镜头浸 入香柏油中，细调至看清物象为止。 6. 换片：另换新片，必须从“3”开始操作。 7. 标本片的清洁： 8. 用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜 头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量清洁剂擦去残留 的油，最后用擦镜纸擦去残留的清洁剂，后将镜体全 部复原。
2. 微生物大小的测定：（菌种：枯草杆菌）
做枯草杆菌的简单染色片 安装目镜测微尺（已安装好）并用镜台测微尺在各
物镜下校正目镜测微尺 在油镜下测定菌体大小：分别测10个菌的宽和长， 求平均值，再将所测格数乘以目镜测微尺（油镜） 下每格代表的长度，即得该菌的实际大小。
三． 实验材料：
菌种：酿酒酵母菌悬液，枯草杆菌斜面
其他器材：血球计数板，目镜测微尺，镜台
测微尺，显微镜，盖玻片，载玻片，染色液 等
四． 实验方法和步骤：
1. 显微镜直接计数法：（菌种：酿酒酵母）
镜检计数室→加样品→静止5分钟→显微镜计数（每个 计数室选5个中格） →记录结果→清洗血球计数板
二．基本原理： 环境中的微生物在营养丰富的培养 基平板中经过培养即可长成肉眼可见的 菌落，从而可检测到环境中存在的微生 物的类型和数量。 三．实验材料： 营养琼脂平板、 灭菌棉签、 恒温培养箱等
四． 实验方法和步骤：（P6-7）
每四个同学为一组，每个同学一个营养琼脂平板，每人各选取以下其 中一种处理方法（或你感兴趣的其他方法），写好标签：
处理完成后，盖好皿盖，倒置培养皿，置于37℃温箱培养1-2天观察，记录实验结果。
五． 实验结果： 将实验结果记录于下表（P8）：
表1：微生物检测的结果记录表
处理方法 菌落数量 菌落特征
（大小、形状、透明 度、颜色等）
（ 1）
（ 2）
（ 3）
（ 4）
简要说明
菌落数量可用“+”和“-”来表示，从多到少依次表示为++++，+++，++，+，-
四． 实验方法和步骤：
1.
放线菌（菌种：细黄链霉菌平板） 印片法：用接种铲取一小块菌苔（连同培
养基）放在一块载玻片上→取另一块载玻片 稍加热并在其上轻压→固定→用石碳酸复红 做简单染色片→油镜检→绘图
2. 酵母菌（菌种：酿酒酵母）
在载玻片上滴一滴美兰→用接种环取少量酵母菌 与染料混匀→盖上盖玻片（注意防止气泡的产生） →镜检（高倍镜） →绘图
油镜使用的原理
1. 香柏油的折射率 与玻璃接近，提高 了视野的照明度。
2 . 提高了显微镜的 分辨率
三． 实验材料：
玻片标本：
球状：四联球菌（Micrococcus tetragenus ） 杆状：枯草杆菌（ Bacillus subtilis ） 螺旋状：水弧菌（Vibrio aquatilis） 示范片：溶血链球菌（Streptococcus hemolyticus） 其他器材：显微镜、香柏油、清洁剂、擦镜纸 等
观察标本片
菌名
枯草杆菌
（Bacillus subtilis）
细胞结构
芽胞
染色方法
芽胞染色法
图例
鞭毛
变形杆菌
(Proteus vulgaris)
鞭毛染色法
荚膜
圆褐固氮菌 （褐球固氮菌）
（Azotobacter chroococcum）
负染色法
五． 实验结果:
革兰氏染色的结果
菌名 大肠杆菌 枯草杆菌 形状 简图 颜色 革兰氏染色结果
细菌基本形态的观察
利用油镜，观察细菌的基本形态（球状、杆状和螺旋状），边观察边绘图。
四联球菌
链球菌
枯草杆菌
水弧菌
五． 观察结果（绘图）P46
绘出在油镜下观察到的形态图，注意菌体的形态、大小比例、排列， 同时标明菌名(包括拉丁学名)和放大倍数（物镜的放大倍数×目镜的 放大倍数）
菌名 拉丁学名 放大倍数
酸性的溶液中时常带负电荷，而染料电离
后的染色部分带正电荷，易与细胞结合使
其着色。
革兰氏染色法（细菌学上最常用的鉴别染色法）：
根据细胞壁结构和成分的不同
三． 实验材料：
菌种：
枯草杆菌（Bacillus subtilis） 大肠杆菌（Escherichia coli） 染色液和试剂：革兰氏染色液、简单染色液等 芽胞、鞭毛、荚膜的示范片 其他器材：显微镜、香柏油、清洁剂、擦镜 纸等
二．基本原理：
1. 显微镜直接计数法: (P52)
每一个大方格边长为1mm， 则每一大方格的面积为 1mm2，盖上盖玻片后，载 玻片与盖玻片之间的高度为 0.1mm，所以计数室的容积 为0.1mm3。
设五个中方格中总菌数为A， 菌液Baidu Nhomakorabea释倍数为B，
2. 微生物大小的测定： (P48)
采用目镜测微尺 和镜台测微尺测量 微生物细胞的大小。 镜台测微尺一般是 将1mm等分为100格， 因此每格长10μm， 而目镜测微尺在不 同放大倍数下的每 格所代表的长度是 不同的，使用前须 用镜台测微尺校正， 以求得在一定放大 倍数下的实际长度。
1. 实验室空气中的微生物：比较培养基暴露于空气不同时间的区别：
打开皿盖，把培养基平板暴露于空气中10min，盖好皿盖； 打开皿盖，把培养基平板暴露于空气中30min，盖好皿盖；
2. 比较洗手前后手指上微生物的区别：在培养皿底部用记号笔分四个区（A、B、C、 D区），洗手前后分别用手指在培养基表面轻按。（注意不要按碎培养基。） 盖好皿盖。 3.口气中的微生物：打开皿盖，对着培养基吹气。 4.实验台面的微生物：用灭菌棉签揩拭实验台面，再用此棉签在培养基表面滚动一 下，也可用同样方法检测你所感兴趣的其他地方或物品。
六．分析及讨论：
七．思考题：（P47）
1. 用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜 头之间滴加香柏油有什么作用？
2. 镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是 直接用高倍镜或油镜观察？ 3. 影响显微镜分辨率的因素有哪些？
实验三 细菌简单染色及革兰氏染色
实验项目号：80000039102 实验类型 ： 验证性
绘图
牙垢中的细菌 100×10
枯草杆菌（示芽胞） 拉丁学名 放大倍数
变形杆菌（示鞭毛） 拉丁学名 放大倍数
圆褐固氮菌（示荚膜） 拉丁学名 放大倍数
六．分析及讨论： 七．思考题：（P47）
1. 在进行细菌涂片时应注意哪些环节？P75—(1) 2. 进行细菌制片时为什么要进行加热固定？在 加热固定时应注意什么？P76—(2)
显微镜保养和使用中的注意事项：
1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁 度 3.观察标本时，必须依次用低、高倍镜，最后用油镜。当 目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节 器，以免压碎玻片或损伤镜面。 4.观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的习惯，以 免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘图。 5.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单 手拿，更不可倾斜拿。 6.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐蚀 镜片。
2. 黑曲霉和黑根霉在个体形态和菌落形态上有何区 别？P76-（12）
实验五 显微镜直接计数法 及微生物大小的测定 （P47-56)
实验项目号：80000039104 实验类型 ： 验证性
一．实验目的：
1. 2. 了解血球计数板的构造和使用方法，学会用血 球计数板对酵母菌悬液进行计数。 学习并掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方 法。
四． 实验方法和步骤：
简单染色：（材料：牙垢） 涂片 →干燥 →固定 →染色（1-2min）→水 洗→干燥→油镜检→绘图 革兰氏染色：（材料：大肠杆菌、枯草杆菌） 涂片→干燥→固定→结晶紫初染（1-2min） → 水洗 →碘液媒染（1min）→ 水洗 →酒 精脱色（30s内）→ 水洗 →番红复染（2min） → 水洗 →干燥→油镜检，判断菌体的革兰 氏染色结果→绘图
菌名 拉丁学名 放大倍数
2.
列表比较四大类微生物的菌落特征
四大类微生物的菌落特征
类群 细菌
放线菌 酵母菌 霉菌
菌名
菌落大小
干湿
颜色
表面
边缘
厚薄
致密度
气味
六．分析及讨论： 七．思考题：
1. 根据你的观察结果，吕氏碱性美兰染色的作用时 间与酵母菌死活细胞的比例的变化是否有关系？ 试分析原因。P76-（10）
3. 霉菌（菌种：根霉）
在载玻片上滴一滴乳酸酚→用解剖针小心挑取少 许根霉的菌丝放在染料中→盖上盖玻片（注意防 止气泡的产生） →镜检（低倍镜或高倍镜） →绘 图
4. 标本片的观察：（青霉、曲霉） 5. 菌落形态的观察：
五． 实验结果:
1. 绘出所观察微生物的个体形态图（细黄链霉菌、酿酒
酵母、根霉、青霉、曲霉 ，注意标注清楚各部分结构的名 称）