从番茄中提取番茄红素实验报告

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二 实验原理
1、番茄红素属于类胡萝卜素,是由异戊二烯残基为单元组成的长链共轭双键结构的多 烯色素。大多类胡萝卜素可以看作番茄红素的衍生物其分子为 C40H56,结构如下:
2、根据番茄红素不溶于水,难溶于甲醇、乙醇,可溶于石油醚、己烷、丙酮,易溶于 氯仿、苯等有机溶剂的性质,可利用亲油性有机溶剂来提取番茄红素;
能有气泡和裂缝。氧化铝柱表面放上 0.5 厘米 黄色,一个底部是红色。
厚的石英砂,放走多余的溶剂直到液面刚刚
达到石英砂表面。
将提取的色素溶于 1 毫升洗脱液中,用滴
管加入柱顶。打开活塞,让色素流到氧化铝
柱上,如此反复几次色素完全移入层析柱。
用滴管沿四周加洗脱液,将柱壁上的色素洗
下(多次洗脱)当液面降至石英砂表面时,
番茄红素经石油醚溶解定容至 10ml 后, 颜色变浅,测其吸光度,由于分光光度计的 量程要求,如果吸光度不在 0.1 和 0.8 之间, 小于 0.1 的增加浓度,大于 0.8 的稀释一定倍 数。
β胡萝卜素可直接测其吸光度。
4 薄层色谱 将 10 克硅胶 G 加 20 毫升 0.3%羧甲基纤维素 溶液,调成浆糊状,平铺于波片上,自然干 燥。在烘箱 105-110 摄氏度中活化 1 小时取 出,保存在干燥器皿中备用。 分别柱层析分离得到的胡萝卜素和番茄红素 三个样品在薄板上点样。放入装有环己烷-石 油醚展开剂或其他展开剂的层析缸中,测出 值,比较三点样品的关系。
稀释倍数
10
水分(%)
90.9
M=(吸光度*倍数)/(质量*(1-水分%))
0.816
薄层色谱
展开剂(环己烷:石油醚:氯仿=4 : 4 : 1.5)
a=两线间距 b=番茄红素跑出的距离 b’=β胡萝卜素跑出的距离
第一组 a=5.90cm b=2.82cm b’=4.58cm
番茄红素的 Rf=b/a=0.478 β胡萝卜素的 Rf=b’/a=0.776
6
实验做到第二天的时候操作已经基本上熟练,但是将抽滤液分液时发现色素很少,没 有追究原因欲以重做,老师指出色素残留在抽滤瓶中,经过润洗得到少量色素,得以进行 接下去的实验操作,柱层析时色素下去太慢,经过指导,在洗脱液中加入少量氯仿,色素 下去速度明显加快。
实验的第三天,基本上所有的流程都能很顺利的进行了,实验进程加快,能够更好的 合作了。
3
2、柱层析
层析时,随着洗脱液的加入,注重两种
层析柱中塞好棉花,加入十几毫米洗脱液, 颜色,由于之前了解可知,跑得较快的黄色
边倒入氧化铝边轻叩层析柱,直到得到十厘 色素为β胡萝卜素,先收集完成,用氯仿洗
米高的氧化铝柱。装柱时保持洗脱液面高于 脱,后跑出的是橙红色的番茄红素。两者收
氧化铝,需要时可添加洗脱液。装好的柱不 集完成后,水浴蒸干,圆底烧瓶一个底部为
第二组 a=5.75cm b=2.65 cm b’=4.70cm
番茄红素的 Rf=b/a=0.461 β胡萝卜素的 Rf=b’/a=0.817
综合求平均: 番茄红素的 Rf=0.470 β胡萝卜素的 Rf=0.797
八 结果分析及讨论
1 三种萃取剂最后得到的 M 值大小是环己烷>乙酸乙酯>石油醚, 与实际应得结果乙酸乙 酯>石油醚>环己烷有所出入。 分析原因一:长时间没有进行实验操作,生手操作中产生的误差
即加环己烷-石油醚 1:1 洗脱。黄色的胡萝
卜素在柱中移动较快,红色的番茄红素则较
慢,收集洗脱液至胡萝卜素在柱中完全消失。
然后用极性较大的氯仿做洗脱液洗出番茄红
素。将收集到的两个部分用水浴蒸干,待用。
3.光谱测定 番茄红素用石油醚溶解,定量转移 10 毫升容 量瓶中,定容。测定在 300-600 处的吸收光 谱,以及在最大吸收波处的吸光度。红外光 谱的测定,分析峰与相应官能团的关
三 试剂
批号
三氯甲烷 T20070319
石油醚
F20090421
环己烷
T20090227
二氯甲烷 20080521
乙醇
20080714
厂家均为国药集团化学试剂有限公司,规格都为 AR
石英砂,氧化铝
四 实验仪器
色谱仪 分光光度计 搅拌机 抽滤机 电子称 圆底烧瓶 三口瓶 锥形瓶 烧杯 铁架台 玻璃棒 滴管
有机化学创新实验
从番茄中提取番茄红素 姓名:龚礼瑾 班级:制药 0802
合作组员姓名:茅海亚,李慧 指导老师:孙培冬 实验地点:化工学院
1
从番茄中提取番茄红素
一 实验目的
1、了解番茄红素中的基本成分和结构,以及其各种已被发现的功效 2、熟悉从天然植物中提取分离色素的直接方法和操作技能 3、掌握天然色素的简单定性和定量测量方法 4、通过实验分析比较不同萃取剂对色素提取的影响 5、能观察区别番茄红素和β胡萝卜素,了解两种色素的异同点
5
时间:7 月 8 号
萃取剂:环己烷
水分测定:
样品 a
样品 b
烘干前质量(g)
5.13
5.07
烘干后质量(g)
0.54
0.39
水分(g)
4.59
4.68
水分百分比(%)
89.5
92.3
水分平均值(%)
90.9
注:记录数据已去除烧杯的质量
其余所测数据及处理
用于提取的番茄质量(g)
31.1
吸光度
0.231
铺胶的过程胶需铺的均匀光滑,在完成 的玻片上用铅笔在距一端 1cm 处画一条直 线,距另一端 0.5cm 处画一条直线,点样的 时候,毛细管头加热用镊子拉长取样,点样 在 1cm 直线处。经过浓缩的β胡萝卜素与两 色素混合物点样进行对比,番茄红素与两色 素混合物点样进行对比,前者有一条浅黄色 条带与两个色素的红黄混合条带,后者有一 条红色条带与两个色素的红黄混合条带。
七 数据记录及处理
时间:7 月 6 号 水分测定:
萃取剂:乙酸乙酯
样品 a
烘干前质量(g)
5.10
样品 b 5.17
4
烘干后质量(g)
0.45
水分(g)
4.65
水分百分比(%)
91.2
水分平均值(%)
注:记录数据已去除烧杯的质量
其余所测数据及处理
用于提取的番茄质量(g)
吸光度
稀释倍数
水分(%)
M=(吸光度*倍数)/(质量*(1-水分%))
7
九 整体实验的进程及思考
在做这个实验之前,我只是大体的看了一下做的是什么实验,可能是短学期的前两周 过的比较松散,没有对这个实验引起足够的重视,未做任何准备。所以老师第一天讲解时 理解起来有点困难。
实验前一天粗略看了一下实验操作,以为可以临阵磨枪,不料第二天刚开始做第一个 抽滤时就因为润洗不干净,使颜色出现偏差,重做。后面的过程也做得磕磕绊绊,由于对 实验的不理解,很多地方出现疏漏,实验操作也经常错误,比如蒸馏时不加沸石之类的。
二:温度的影响 三:一组第二天借用了搅拌器,搅拌器转速被改变,第三天的转速有所增加,未 加以注意,搅拌器速率增加对色素提取有促进作用,可能也对实验结果产生了一定程度上 的影响。 2 番茄红素红外光谱测定,番茄红素的红外光谱最高值比理想的 502 小了点,可能原因是 其中掺杂了胡萝卜素,导致最高峰值变小。 3 薄层色谱两组实验测得值,可进一步了解两个色素的性质不同导致的差异
实验现象 水浴搅拌过程中,随着搅拌的时间加长, 以及水浴的温度升高,加入圆底烧瓶内的无 色萃取剂变成橙黄色,并且不断有气泡产生。 不同萃取剂抽滤过程所得液颜色呈浅黄 色到橙红色,程度不等,所得液经过萃取剂 润洗倒入分液漏斗,液面呈现分层,上层为 有机层,呈橙色(颜色有差别,有些萃取剂 润洗时加入偏多,该颜色仅作参考),下层为 水层,静置一段时间后,颜色逐渐变浅,为 淡黄色。 水浴蒸干加入洗脱液后,三个萃取剂得出 色素的橙色由浅入深顺序为,石油醚,乙酸 乙酯,环己烷。
番茄红素红外光谱测定
0.47 4.70 90.9 91.1
30.10 0.168
10 91.1 0.627
样品 b 5.06 0.49 4.57 90.3
90.3
30.80 0.260
5 90.3 0.435
序号 1 2 3
峰/谷 峰 峰 峰
波长(nm) 498.00 467.00 359.00
Abs 0.436 0.550 -0.003
2
五 实验装置图
图 a 搅拌回流装置
图 b 抽滤装置
图 c 水浴蒸馏装置
六 实验步骤及现象
实验步骤 1、提取 回流搅拌法:称取 30g 新鲜番茄,捣碎,放入 100 毫升三角瓶中,加入 15 毫升无水乙醇, 装上搅拌装置和回流冷凝管,搅拌回流 5 分 钟,抽滤。残渣中加入 15 毫升萃取剂,搅拌 回流 5 分钟,抽滤。合并抽滤所得液,倒入 分液漏斗,加入几滴饱和氯化钠,摇震,静 置分层。分出提取液,用无水硫酸钠干燥, 水浴蒸干待用。
整个实验坐下来最大的感受就是,技能不用就会很快退化,对有机实验的操作实在太 生疏,做什么事情,如果想要做好,就要事先做好足够的了解和准备。最大的收获就是可 以练习到了各种实验操作,增强了自己做事动脑的意识,学会了如何与他人合作。
参考文献: 1、杨春文 番茄红素的提取及纯化条件的研究 甘肃联合大学学报(自然科学版)第 23 卷第 1 期 2、侯纯明,刘德志,谢颖,李文泽 番茄红素提取及优化研究 辽宁化工 第33卷第8期
3、实验采取直接打浆,直接打浆的方法提取量最大,提取速度快,提取次数少,提取 效高;
4、柱层析时,当液体流经吸附柱时,各组分同时被吸附在柱的上端,然后从柱顶加入 洗脱剂洗脱,当洗脱剂流下时,由于固定相对各组分吸附能力不同,各组分以不同速度沿 柱下移,若是有色物质,则在柱上可以直接看到色带。
5、薄层色谱时,当展开剂在吸附剂上展开时,由于吸附剂对各组分吸附能力不同,展 开剂对各组分的解吸能力也不同,各组分向前移动的速度会不同。
时间:7 月 7 号 水分测定:
萃取剂:石油醚
样品 a
烘干前质量(g)
4.98
烘干后质量(g)
0.49
水分(g)
4.49
水分百分比(%)
90.2
水分平均值(%)
注:记录数据已去除烧杯的质量
其余所测数据及处理
用于提取的番茄质量(g)
吸光度
稀释倍数
水源自文库(%)
M=(吸光度*倍数)/(质量*(1-水分%))
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