高二生物微生物数量的测定PPT优秀课件

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高中生物同步课件：1.3 测定微生物的数量(中图版选修1)

30～300 培养皿内有__________个菌落为宜。霉菌以
10～100 每个培养皿内有__________个菌落为宜。
栏目导引
第一章
微生物培养技术
②同一稀释倍数各个重复的菌落数相差不要太悬殊。 ③计算每克样品菌数公式为：每克土壤样品某稀释倍数的菌落平均数菌数＝ ×稀释细菌培养时所用的稀释液体积倍数。
下观察的载玻片，样品就滴在计数室内。计数室由25×16＝400个小室组成，容纳液体总
体积为0.1 mm3。某同学操作时将1 mL酵母
菌样品加99 mL无菌水稀释，用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室，盖上盖玻片并用滤纸吸去多余菌液，进行观察计数。
栏目导引
第一章
微生物培养技术
Байду номын сангаас
(1)在实验中，某同学的部分实验操作过程是这样的：①从静置试管中吸取酵母菌培养液
第一章
微生物培养技术
第3节测定微生物的数量
栏目导引
第一章
微生物培养技术
学习导航
1.概述微生物计数的基本方法。
2.运用稀释平板法测定样品中微生物的数量。 [重、难点]
栏目导引
第一章
微生物培养技术
新知初探思维启动
一、直接计数法 1.常用方法：显微镜直接计数法。 2.具体步骤：将待测样品制成悬液→取一定量的悬液放在显微镜下进行计数→观察并计算出单位体积内的微生物总数。
第一章
微生物培养技术
【解析】
实验结论是否正确与是否设置对
照有直接关系，但实验结果与是否设计对照无关。
【答案】
A
栏目导引
第一章
微生物培养技术
变式训练下列调查活动或实验中，计算所得数值与实

《微生物检验技术》课件

食品中常见的微生物种类：细菌、霉菌、酵母菌等。
微生物在食品中的分布特点：食品的种类、加工方式、储存条件等对微生物的分布有显著影响。
微生物的来源：食品生产、加工、运输、储存等环节中可能引入
的微生物。
食品中微生物的检测方法与操作
01
02
03
04
传统检测方法
培养法、镜检法等。
现代检测技术
免疫分析法、PCR技术、生物传感器等。
消毒灭菌效果的监测
对医院环境、医疗器械等进行微生物学检测，评估消毒灭菌效果，确保医疗安全。
抗菌药物敏感性试验
通过抗菌药物敏感性试验，指导临床医生合理选用抗菌药物，降低耐药性的产生。
感染暴发调查
在发生医院感染暴发时，进行流行病学调查和溯源分析，查找感染源和传播途径，采取有
效控制措施。
疫苗的研究与开发
病原微生物的分离与鉴定
从患者体内分离出病原微生物，并进行鉴定，为疫苗的研制提供基础资料。
疫苗株的筛选
通过微生物检验技术对病原微生物进行筛选，选择适合作为疫苗株的菌株或病毒株。
疫苗制备过程的监控
在疫苗制备过程中，对原材料、半成品和成品进行质量检验和安全性评估，确保疫苗的安全性和有效性。
疫苗效果评价
微生物的生长与繁殖
微生物的生长
微生物生长是指微生物细胞数目的增加和质量的增加。其生长过程分为迟缓期、对数生长期、稳定期和衰亡期。
微生物的繁殖
微生物繁殖是微生物生长的必然结果，繁殖方式包括二分裂、出芽生殖、孢子生殖等。繁殖过程中，微生物的遗传物质会复制并传递给后代。
微生物的生理生化特性
微生物的代谢
利用微生物降解污染物，处理废水、废气等，降低环境污染。

《微生物检测》课件

检测与鉴定
形态观察
通过显微镜观察微生物的形态、大小、染色等特征，初步判断微
生物种类。
生化试验
对微生物进行生化试验，检测其代谢产物和酶活性，进一步确定微生物种类。
分子生物学方法
采用分子生物学方法，如PCR、基因测序等，对微生物进行分子水平上的检测和鉴定。
结果报告
报告内容
包括采样时间、地点、样品来源、检测方法、结果及结论等。
总结词：染色技术
详细描述：采用不同的染色技术对微生物进行染色，以便更好地观察其形态和结构。
培养分离技术
在此添加您的文本17字
总结词：培养基
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详细描述：选择适宜的培养基，根据微生物的生理特性进行培养，促进微生物的生长繁殖。
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总结词：分离纯化
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详细描述：从样本中提取微生物的DNA或RNA，作为后续检测的基础。
详细描述：利用PCR技术对提取的DNA或RNA进行扩增，获得足够的目标片段。
详细描述：将扩增后的DNA或RNA进行电泳分离，通过凝胶上的条带判断微生物种类。
03
微生物检测流程
采样
采样原则
根据检测目的和要求，选择具有代表性的样品进行采集。
临床样本中微生物检测案例
案例概述
临床样本中微生物检测是诊断感染性疾病的重要手段，通过检测临床样本中的病原
微生物，为临床医生提供诊断依据。
案例分析
分析临床样本中微生物检测的难点和挑战，如微生物的多样性和变异，以及检测方
法的灵敏度和特异性。
案例内容
介绍临床样本中常见的病原微生物种类，如细菌、病毒、真菌等，以及检测这些微生物的方法和流程。

微生物数量的测定

❖ 计算：
➢ 1mL菌液中总菌数 =A/5*25*104*B=50000*A*B
➢ 1mL菌液中总菌数 =A/5*16*104*B=32000*A*B
其中B为稀释倍数。
注意事项
❖ 对于出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。
❖ 对于压线酵母，按照数上不数下、数左不数右的原则计数
❖无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是 400个。每一个大方格边长为lmm，则每一个大方格的面积为 lmm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为0.lmm ，所以计数室的容积为0.lmm3(万分之一毫升)。
计数方法
❖使用血球计数板计数时，通常数5个中方格的总菌数A，然后求每个中方格的平均值，再乘上大方格（计数室）中方格的数量，就得出一个大方格中的总菌数。数两个大方格总菌数，平均后，再换算成每毫升菌液中微生物细胞的数量。
光电比浊计数法优缺点
❖ 优点：简便、快速、连续测定、适合自动化。
❖ 缺点：
➢ 光密度受细胞大小、形态、培养液成分以及选用的波长的影响；
➢ 对于不同微生物的菌悬液要选择相应的菌株和培养条件制作标准曲线；
➢ 对于颜色太深的样品或含其它具有吸光值的物质不能用此法。
器材
❖菌种酿酒酵母培养液
❖仪器或其他用具分光光度计，血细胞计数板，显微镜，试管，吸水纸，无菌吸管，无菌生理盐水等。
➢ 不能区分死菌与活菌，所得为总数； ➢ 不适于对运动细菌的计数。
常用计菌器
❖常用计数器有血球计数板(血细胞计数板) 、Petroff-Hauser计菌器以及Hawksley 计菌器等。
❖各种计数板的计数原理相同，只是血球计数板较厚，不能使用油镜观察，只能计数较大的霉菌孢子和酵母菌；而后两种计菌器细菌，可以使用油镜观察，因此可以直接计数细菌。

微生物的鉴定ppt课件

烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人
微生物的鉴定（identification）:
借助于现有的微生物分类系统，通过特征测定，确定未知的、或新发现的、或未明确分类地位的微生物所应归属分类群的过程。
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人
该法常用于肠道菌、噬菌体和病毒的分类鉴定。利用此法，已将伤寒杆菌、肺炎双球菌等菌分成数十种菌型。
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人
4．生态学特征
生态学特征主要包括它与其它生物之间的关系（是寄生还是共生？寄主范围以及致病的情况）、在自然界的分布情况（pH情况、水分程度等）、渗透压情况（是否耐高渗、是否有嗜盐性等）。
在具体鉴定时，可参看中国科学院微生物研究所细菌分类组编著的《一般细菌常用鉴定方法》一书。
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人
3．要有合适的鉴定方法
微生物种类繁多，特征各异，性状有主次之分。因此，在鉴定某种微生物时，要选用合适的鉴定方法，确定主要的测试项目。

微生物实验五微生物数量的测定

实验五微生物数验目的
1、明确血球计数板计数的原理 2、掌握测定酵母细胞总数、出芽率和死亡率的技术
二、实验原理
镜检计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌泡子可采用血球计数板；一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petroff Hausser)细菌计数板。两种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。而血球计数板较厚，不能使用油镜，故细菌不易看清。
二、实验原理
血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个方格网。每个方格网共分9大格，其中间的一大格(又称为计数室)常被用作微生物的计数。计数室的刻度有两种：一种是大方格分为16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即每个大方格都由400个小方格组成。
3、加样品将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细滴
管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，用吸水纸吸去多余菌液。样品要均匀充满计数室，不可有气泡。
4、显微镜计数加样后静止5min，然后将血球计数板置于显微镜载物台
上，先用低倍物镜寻找计数室的位置，然后换成高倍物镜（40倍）进行计数。显微镜视野中的光线要暗一些，否则，不容易看清计数室的方格线。计数时，对位于线上的酵母菌，可采取只计数两条边的办法，即遵循查上不查下，查左不查右的原则。当酵母菌芽体达到母细胞大小1/2时，即可计作两个细胞。
死细胞数
死亡率=
×100%

高中生物同步课件：13测定微生物的数量中图版选修

流式细胞术
利用流式细胞仪对微生物进行快速计数，通过荧光染色或电阻抗检测等技术对微生物进行标记和计数。
间接计数法
菌落计数法
将微生物样品稀释后涂布在琼脂培养基上，经过培养后形成的单个菌落进行计数，从而推算出原始样品中的微生物数量。
比浊法
利用微生物悬液的光密度与其浓度之间的线性关系，通过比浊仪测定光密度值，从而推算出微生物的数量。
01
将血球计数板放在载物台上，用低倍镜找到方格，然后换用高倍镜观察，找到微生物后进行计数。
02
计数时需要按照一定的顺序进行，避免重复或遗漏。每个小格内的微生物数量需要进行统计，并计算出总数量。
注意事项
血球计数板使用前需要检查是否有污渍、划痕等缺陷，确保其清洁度。
计数时需要保持一定的光线强度和角度，以确保能够清晰地观察到微生物。同时，为了避免误差，需要多次重复计数并取平均值。
实验器材
显微镜、血球计数板、盖玻片、吸管、无菌水、无菌棉签等。
实验试剂
无菌生理盐水、无菌培养基等。
实验材料
待测微生物样品。
实验操作
制作血球计数板
在血球计数板上制作计数室，并标记好区域。
培养微生物
将血球计数板放在适宜的温度和湿度条件下培养一段时间，使微生物生长繁殖。
稀释样品
将待测微生物样品进行稀释，以便于计数。
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或化学物质，使目的微生物产生特定的代谢产物，从而使其表现出特定的颜色或沉淀等特征反应，以便于鉴别和筛选。例如，在鉴别土壤中某种细菌时，可在培养基中加入该种细菌能分解的
糖类并使其产生酸，从而使培养基pH下降，可用指示剂显示酸性反应。

常见微生物数量测定方法比较(共12张PPT)

总结与比较
血细胞计数板和细菌计数板常用于测定单细胞或孢子, 相对比较准确;
膜过滤用于测定细胞浓度很低的样品,平板菌落计数对多数微生物的测定都适用, 但是相对其他计数法要复杂;
比浊法相对准确,但需要作标准曲线; 对于丝状微生物的数量测定,国际上有明确的标准; 而凯氏定氮法和DNA 含量测定法都是通过对微生物细胞内含量相对稳定的物质进行定量测定, 再算出细胞的数量,操作相对复杂.
2.活细胞计数法
2.3 霉菌计数法
对于霉菌的计数一般比较困难,由于霉菌生长快, 菌丝叠加导致无法准确计数.国标霉菌计数法的原理是:将待测菌液进行10 倍梯度系列稀释,利用高盐察氏培养基(CAO)与待测菌液混匀后倒平板,25 一28℃下培养3d 后开始计数,选择菌落数在10150 之间的平板进行计数,取同稀释度的两个平板的菌落平均数乘以稀释倍数,即为每g(或 mL)检样中所含霉菌数。
常见微生物数量测定方法比较
ห้องสมุดไป่ตู้
微生物主要包括原核微生物,真核微生物,病毒等三大类,由于多数微生物的个体较小,肉眼无法观察, 对其计数一般比较困难.在目前的微生物实验教学中,对微生物计数的方法主要有三大类:总细胞计数法,活细胞计数法和微生物生长量测定法.并不是每种方法都是通用的,不同的微生物种类需要不同的计数方法,目前多用以下8 种方法进行计数:
1.总细胞计数法
1.3 膜过滤计数法
利用计数板对高浓度的菌液测定比较准确,但当样品中细菌的数量很低时,如湖水, 海水或饮用水等,用膜过滤计数法更精确些,可以将一定体积样品溶液加结晶紫染色,再用0.22mm的聚偏二氟乙烯膜负压过滤,再用无菌水冲洗至无色后,将过滤的膜进行抽干,将膜放到载玻片上,滴加甘油,盖上盖玻片,即可在显微镜下计数.一般随机抽取20个视野进行计数,最后算平均数, 计算整个滤膜上的菌的数量,得到原菌液中的微生物数量. 此测定方法一般只能用于样品中细菌数量很低的。

微生物实验微生物数量和大小测定ppt课件

培养时间（h）
4 8 12 16
20 24
光密度值
OD600
比色皿经蒸馏水清洗后，光面只
能用吸水纸吸干，以免光面被划破。
四、实验结果
记录不同大肠杆菌培养液的OD600值，并绘制大肠杆菌的生长曲线。
五、思考题 p88 2(1)
目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度。目镜测微尺每小格所代表的实际长度不一样，需将其放在接目镜中的隔板上，测量前，必须先用镜台测微尺进行校正。
目镜测微尺镜台测微尺
1.利用镜台测微尺测定目镜测微尺的每格绝对值
2.目镜测微尺每格长度（um）＝两重合线间镜台测微尺格数×10/两重合线间目镜测微尺格数
➢盖好样品室盖，在T MODE下，按0%T键调零透射比。
➢取出档光体，按100%T/OA键调100%透射比。
2.样品测定
➢将参比溶液（未接种的LB液体培养基）以及被测溶液倒入比色皿中。
➢打开样品室盖，将参比溶液放在样品架的第一个槽位中，将被测溶液依次放入其它槽位。
➢将参比溶液推入光路，按100%T/OA键调满度。
➢按 MODE ，将测试方式调至吸光度方式（A）。此时,显示器显示“0.000”。
➢将被测溶液推入光路，显示器显示为被测样品的吸光值。
在600 nm波长下，用未接种的LB液体培养基作空白对照，分别对培养了0、4、8、12、 16和20 h的大肠杆菌培养液，进行光电比浊测定。对于高浓度的大肠杆菌培养液,要用未接种的LB培养基进行稀释，使其吸光值不超过1。
➢了解光电比浊计数法的原理。 ➢学习、掌握光电比浊计数法的操作方法。
二、实验原理

微生物的选择培养和计数课件高二下学期生物人教版选择性必修3

培养基一
牛肉膏
5.0g
蛋白胨 NaCl
10.0g 5.0g
琼脂
20.0g
蒸馏水定容到1000ml
培养基二
KH2PO4 NaH2PO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g
尿素CO(NH2)2 琼脂
1.0g 15.0g
蒸馏水
定容到1000ml
（二）微生物的选择培养
操作步骤: 1.土壤取样
细菌宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分布在距地表3~8cm的土壤层。铲去表层土3cm左右，取样，将样品装入事先准备好的信封中。
注意取土样时用的铁铲和取样
袋在使用前都需要灭菌。操作完成后，一定要洗手。
二、微生物的选择培养
2.样品的稀释（梯度稀释菌液） ②将10 g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。
原因是______2_1_与__另__外__两__组__数__值__相__差__太__大__，__应__舍__去。
二、微生物的选择培养常用微生物分离方法比较
比较
工具
平板划线法
接种环
稀释涂布平板法
涂布器
在数次划线后培养，可以分离在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起原理到由一个细菌细胞繁殖而来的的微生物将被分散成单个细菌细胞，从
温培养箱中，培养1-2d。
稀释103倍
稀释104 倍
恒温培养箱
空白对照
稀释105倍
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
3.实验步骤（4）微生物的培养与观察
① 培养条件：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2d。

微生物学实验课件-微生物数量的测定

4、加樣後靜止5min，將計數板置顯微鏡載物臺上，先用
低倍鏡找到計數區，然後換高倍鏡計數。（光不宜太強，
需要使用濾光片）
清洗時切勿用刷子等硬物，
也不可用酒精燈火焰烘烤
5、計數完畢，將血球計數板在水龍頭下流水沖洗乾淨，用
電吹風吹幹，鏡檢確認計數區無殘留菌體或其他沉澱。
6.作業：結果（填表） P55
光電比濁計數法目的要求
Hawksley計菌器
❖❖計血數球室計的數刻板度是一一般塊有特兩製種的規載格玻：片一，種其是上一由個四大條方槽格構分成成三2個5個平中方格每臺，個；而方中每格間個網較中共寬方分的格為平又九臺分個又成大被1方一6個格短小，橫方中槽格間隔；的成另大兩一方半種格，是即每一為一個計邊大數的方室平格。臺分成 1上6個各中列方有格一，個而方每格個網中。方格又分成25個小方格。 ❖無論是哪一種規格的計數板，每一個大方格中的小方格都是 400個。每一個大方格邊長為lmm，則每一個大方格的面積為 lmm2，蓋上蓋玻片後，蓋玻片與載玻片之間的高度為0.lmm，所以計數室的容積為0.lmm3(萬分之一毫升)。
❖ 選擇波長：將靈敏度開關調至“1”檔（若零點調節器調不到 “0”時，需選用較高檔）。選擇合適的波長。
❖ 調零：將空白液倒入比色皿中（不少於3/4），用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，光面對準光路。將吸光度設置為0％，確認；將透光度設置為100％，確認。
❖ 測定：將樣品加入另一個比色皿，放入樣品室，讀取吸光度。 ❖ 關機：測定完畢，關上電源，取出比色皿洗淨，樣品室用軟
1、稀釋：將待測菌懸液用無菌生理鹽水適當稀釋。 2、測定：在560nm波長測定稀釋後菌懸液的吸光度。 3、計算：根據所測得的吸光值，從標準曲線查得每
毫升的含菌數，乘以稀釋倍數就得到原液中細菌數。 4、作業：繪製標準曲線，將比濁法所測結果同直接

微生物检验ppt课件

微生物检验ppt课件
目录
• 微生物检验概述 • 微生物检验的基本原理与方法 • 微生物检验的样品采集与处理 • 微生物检验的常用技术与操作 • 微生物检验的质量控制与保证 • 微生物检验的挑战与发展趋势
01
微生物检验概述
微生物检验的定义与重要性
定义
微生物检验是对环境中的微生物进行定性、定量和鉴定的一种技术，通过特定的方法和技术手段，对微生物的种类、数量、生理生化特性、遗传物质等进行分析和研究。
。
04
微生物检验的常用技术与操作
显微镜技术
光学显微镜
01
利用可见光和光学透镜成像，可观察细菌、真菌等微生物的形
态和结构。
电子显微镜
02
利用电子束成像，能够观察更细微的结构，如病毒、细菌的超
微结构等。
相差显微镜
03
利用光的相位差原理，可观察无色透明的微生物，如支原体、
衣原体等。
培养基制备技术
01
补体结合试验
利用补体参与抗原抗体反应，形成复合物并激活补体系统，用于检测微生物抗原或抗体。
微生物的分子生物学检测方法
PCR技术
应用聚合酶链式反应（PCR）技术扩增微生物特异性基因片段，实现快速、灵敏的微生物检测。
生物信息学分析
应用生物信息学方法对微生物基因组数据进行挖掘和分析，揭示微生物种类、进化关系等信息。
脱羧酶试验等。
酶活性检测
检测微生物产生的特定酶活性，如过氧化氢酶试验、氧化酶
试验等。
抗生素敏感性试验
检测微生物对抗生素的敏感性，以指导临床用药。
微生物的血清学试验
凝集试验
应用特异性抗体与微生物抗原结合，形成可见的凝集现象，用于鉴定微生物种类。

微生物检验(PPT)

第一页，共十六页。
第二页，共十六页。
第三页，共十六页。
细胞(xìbāo)数量的测定方法----七种方法
测定微生物生长的方法很多，各种方法均有其优缺点，也不是在任何情况下都适用。在微生物学(wēi shēnɡ wù xué)工作中一般常用的是平皿菌落计数法、计数器法和比浊法。至于哪种方法比较适合你，得根据你的具体条件而定。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法
第十页，共十六页。
4、比浊法
比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。
此法简便快捷，但只能(zhī nénɡ)检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。
第四页，共十六胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。由于(yóuyú)计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。本法简便易行，可立即得出结果。本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数
第十二页，共十六页。
6、测定(cèdìng)细胞总氮量或总碳量
氮、碳是细胞的主要成分，含量较稳定，测定(cèdìng)氮、碳的含量可以推知细胞的质量。此法适于细胞浓度较高的样品。
第十三页，共十六页。
7、颜色(yánsè)改变单位法〔colour change unit,简称CCU〕
这种方法通常用于很小，用一般的比浊法无法计数的微生物，比方支原体等，因为支原体的液体培养物是完全透明的，呈现为清亮透明红色，因此无法用比浊法来计数，由于支原体固体(gùtǐ)培养很困难，用cfu法也不容易计数，因此需要用特殊的计数方法，即CCU法。它是以微生物在培养基中的代谢活力为指标，来计数微生物的相对含量的，下面以解脲脲原体为例，简单介绍其操作：

微生物学最完整经典 ppt课件

的核糖体为70S
提示：很重要的部分，要牢记
原核细胞与真核细胞的不同，表现在：
A. 原核细胞基因组的大小仅有真核生物基因组大小的一半 B．原核细胞具有单链的DNA分子 C．原核细胞中与DNA结合的蛋白质较少，而且没有核膜包裹 D．原核细胞具有RNA而不是DNA
原核生物
A．具有细胞器，但不具有细胞核 B．能产生ATP，能独立进行生命过程 C．细胞壁含几丁质 D．大多具有环状DNA E．都是厌氧生物
微生物分布
微生物无处不在，我们无时不生活在“微生物的海洋”中
✓ 细菌数亿/g土壤 ✓ 每张纸币带细菌：900万个 ✓ 人体体表及体内存在大量的微生物
➢ 口腔：细菌种类超过500种 ➢ 肠道：微生物总量达100万亿 ➢ 皮肤表面：平均10万个细菌/cm2 ➢ 粪便干重的1/3是细菌，每克粪便的细菌总数为：1000亿个
✓ 第一步：采用生黑葡萄糖杆菌或弱氧化醋杆菌，将D山梨醇转化为L-山梨糖
✓ 第二步：采用氧化葡萄糖杆菌和芽孢杆菌混合发酵，将L-山梨糖转化为1-酮基-L-古龙酸，再经化学转化为维生素C
2019年，泉生热孢菌全基因组序列测定
微生物特点
个体微小
✓ 杆菌的平均长度：2 微米 ✓ 面积/体积比：人 = 1，大肠杆菌 = 30万 ✓ 这样大的比表面积特别有利于它们和周围环境进行物
病毒
亚病毒
拟病毒
类病毒
朊病毒
古细菌
（真）细菌
真菌
酵母菌
霉菌
蕈菌
藻类
原生动物
下列各项中属于原核生物的是＿＿。
A、蓝藻，支原体 B、衣原体，噬菌体 C、衣藻，金鱼藻 D、放线菌，霉菌真菌通常是指＿＿。 A、所有的真核微生物 B、具有丝状体的微生物 C、霉菌、酵母菌和蕈菌 D、霉菌和酵母菌下列物种之间相似程度最大的一组是＿＿。 A、疟原虫，血吸虫，蚊子 B、痢疾杆菌，酵母菌，青霉菌 C、蓝藻，硝化细菌，硫细菌 D、水稻，水蛭，水绵

微生物大小和数量的测定

数量的测定
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微生物大小和数量的测定
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血球计数板计数
微生物大小和数量的测定
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计数时，通常数五个中格总菌数，然后求得每个中格平均值，然后再换算成lml菌液中总菌数。
假如是25个中方格计数板, 1mL菌液中总菌数=A/5×25×104×B=50000A·B（个） A为五个中方格中总菌数，B为菌液稀释倍数.
镜测微尺轻轻放在目镜隔板上，使有刻度一面朝下。将镜台测微尺放在显微镜载物台上，使有刻度一面朝上。先用低倍镜观察，调焦距，待看清镜台测微尺刻度后，转动目镜，使目镜测微尺刻度与镜台测微尺刻度相平行，并使两尺左边一条线重合，向右寻找另外一条两尺相重合直线。
2．标定公式：计算两刻度间目镜测微尺格数和镜台测微尺格数。因为镜台测微尺刻度每格长10µm，所以可得：
微生物大小和数量的测定
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假如是16个中方格计数板， 1mL菌液中总菌数=A/5×16×104×B=3A·B（个）
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（三）器材 1．菌种酿酒酵母 2．仪器或其它用具血球计数板，显微镜，盖玻片，无
菌毛细滴管。（四）操作步骤 l．菌悬液制备以无菌生理盐水将酿酒酵母制成浓度适当菌悬液。 2．镜检计数室在加样前，先对计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数。 3．加样品将清洁干燥血细胞计数板盖上盖玻片，再用无菌毛细滴管将摇匀酿酒酵母菌悬液由盖玻片边缘凹槽滴加,菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，普通计数室均能充满菌液。取样时先要摇匀菌液；加样时计数室不可有气泡产生。
镜台测微尺玻片很薄，如需标定油镜头时，要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头。
思索题为何不一样放大倍数目镜和物镜必须分别进行标定？

高中生物第1章微生物培养技术第3节测定微生物的数量学案中图版选修1

第三节测定微生物的数量一、测定微生物数量的方法测定微生物数量的方法可分为两类：直接计数法和间接计数法.前者常用的是显微镜直接计数法，这种方法是先将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。

该方法适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。

后者最常用的是稀释平板计数法，需要将待测样品配制成均匀的系列稀释液并使其均匀分布于平板中的培养基内，经培养后统计培养基中出现的菌落数，从而推算出样品中的活菌数。

利用血球计数板测出的菌体数与平板计数法相比哪个多些？【提示】血球计数板测出的是全部菌体数,而平板计数法只能测出活菌数，而且比实际数偏少。

二、间接计数法的实验设计1．制备土壤稀释液取土壤表层5~10 cm处的土样.准确称取1 g土样，放入盛有99 mL无菌水的锥形瓶中，振荡20 min后制成102倍的稀释液.然后进行系列稀释,得到103、104、105、106倍的系列稀释菌液。

2．取样及倒平板3．培养4．观察记录（1）计数时对于细菌、放线菌以每个培养皿内有30～300个菌落为宜，霉菌以每个培养皿内有10～100个菌落为宜。

（2）计算每克样品菌数公式为：每克土壤样品菌数＝错误!×稀释倍数.预习完成后，请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中问题1问题2问题3问题4一、微生物生长量的测定1.测重量法干重法：将单位体积待测的培养液离心后，用清水洗涤1～5次，放入干燥器中加热干燥，加热温度一般在100～105 ℃之间,再称重。

以细菌为例,一个细胞一般重约10－12～10－13g，也可在较低温度（如40 ℃)下进行真空干燥。

湿重法：将一定量的菌悬液离心或过滤，得到菌体，反复洗涤后称湿重，干重一般为湿重的20%~25％。

2．计数法(1)直接计数法这种方法是利用特定细菌计数板或血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。

此法的缺点是不能区分死菌与活菌。

计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积1 mm2和高0。