世界级染色技巧专业资料
各种染色技术总结
一、原理：1、革兰氏染色原理：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
2、芽孢染色法的原理:芽孢又叫内生孢子(endosopre)，是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，通常呈圆形或椭圆形。
细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽孢在芽孢囊内的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。
芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲和力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。
芽孢壁厚、透性低，着色、脱色均较困难，因此，当先用弱碱性染料，如孔雀绿（malachite green）或碱性品红（basic fuchsin）在加热条件下进行染色时，此染料不仅可进入菌体，而且也可进入芽孢，进入菌体的染料可经水洗脱色，而进入芽孢的染料则难以透出，若再用复染液（如番红液）或衬托溶液（如黑色素溶液）处理，则菌体和芽孢易于区分。
用着色力强的染色剂孔雀绿或石炭酸复红，在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体更易于区分。
3、荚膜染色法的原理:荚膜是包围在细菌细胞外面的一层粘液性物质，其主要成分是多糖类，不易染色，故常用衬托染色法，即将菌体和背景着色，而把不着色且透明的荚膜衬托出来。
简单染色法步骤
简单染色法步骤一、引言染色是一种常见的实验方法，广泛应用于生物学、化学、医学等领域。
其中，简单染色法是最基础、最常用的染色方法之一。
本文将介绍简单染色法的步骤及其应用。
二、准备实验材料和设备1. 实验材料：待染色的样本（如细胞、组织切片等）、染色剂（如甲苯胺染料、嗜酸性染料等）、脱水、透明和固定剂（如乙醇、木质醋酸等）。
2. 实验设备：玻璃片、显微镜、显微镜镜头、显微镜载玻片、显微镜载玻片盖片、显微镜载玻片夹。
三、固定样本1. 取一小片待染色的样本，放置在玻璃片上。
2. 用透明剂和固定剂依次浸泡样本，使其固定在玻璃片上。
3. 将固定后的样本置于通风处晾干。
四、脱水处理1. 取一盛有乙醇的容器，将固定的样本放入其中。
2. 逐渐增加乙醇浓度，例如从浓度较低的乙醇（如70%）开始，逐渐转移到浓度较高的乙醇（如95%）中，最后转移到绝对乙醇中。
3. 每次转移样本之前，需在乙醇中浸泡一段时间，使其充分脱水。
五、染色处理1. 取一盛有染色剂的容器，将脱水后的样本放入其中。
2. 根据染色目的选择适当的染色剂，如甲苯胺染料用于碱性染色，嗜酸性染料用于酸性染色。
3. 将样本在染色剂中浸泡一段时间，使其充分染色。
六、清洗和封片1. 用脱离剂清洗染色后的样本，去除多余的染色剂。
2. 取一片干净的玻璃片，将样本置于其上。
3. 滴加一滴显微镜载玻片夹中的透明剂，将玻璃片盖在样本上。
4. 轻轻压平，使样本均匀分布在玻璃片上。
七、观察和分析1. 将封好的玻璃片放置在显微镜载玻片上。
2. 装上显微镜载玻片盖片，并用夹子夹紧。
3. 将载玻片放入显微镜镜头下，调节放大倍率和焦距，观察样本的染色情况。
4. 根据观察结果，进行分析和记录。
八、实验注意事项1. 在实验过程中，需佩戴手套和口罩，做好个人防护。
2. 实验材料和设备要保持清洁，避免污染。
3. 染色剂的选择要根据不同样本和染色目的来确定。
4. 染色时间和温度要控制适当，避免过度染色或不足染色。
简单染色法
简单染色法：快速上手染色技巧染色是一种很有趣的手工艺，但是初学者常常因为染色技巧不熟练而导致染出来的颜色不理想。
本文将介绍一种简单染色法，让你轻松掌握染色技巧，染出漂亮的颜色。
步骤一：准备材料
你需要准备染料、要染色的布料、醋和热水。
染料可以根据自己的喜好选择，但是建议选择易于上手的天然染料，比如玫瑰、茶叶、红枣等。
步骤二：制作染料
把染料放在锅里加水煮沸，然后加入一点点醋，这可以帮助布料染色更均匀。
煮沸的时间应该视具体的染料而定，一般来说，30分钟是一个不错的时间。
步骤三：准备布料
把布料洗干净，然后浸泡在热水中5分钟。
这可以帮助布料更好地吸收染料。
然后用手挤干多余的水分。
步骤四：染色
把布料放进染料中，确保全部被染料浸泡。
然后将染料煮沸时所用的锅洗干净，用它来盖住浸泡的布料。
这样做有助于保持布料的温度，并且让染料更容易渗透。
步骤五：漂洗
将染出来的颜色漂洗，以确保颜色不会褪色。
把布料放进冷水中，然后用清水洗掉多余的染料。
步骤六：晾干
把染好的布料晾干，最好不要在阳光下晒，以免颜色受损。
这样
做以后，你就成功染色啦！
这种简单染色法不仅可以让你上手染色技巧，还可以让你通过不
同的染料创造出各种各样的颜色。
快来试试吧！。
染色基础知识
染色基础知识一、染色理论概述把纤维浸入一定温度下的染料水溶液中，染料就从水相向纤维中移动，此时水中的染料量逐渐减少，经过一段时间以后，就达到平衡状态。
水中减少的染料，就是向纤维上移动的染料。
在任意时间取出纤维，即使绞拧，染料也仍留在纤维中，并不能简单地使染料完全脱离纤维，这种染料结合在纤维中的现象，就称为染色。
若把海绵浸入染液中，染料溶液也能进入海绵内部，可是即使时间长，染料溶液的浓度也不变化，将海绵取出绞拧时，染料和水同时又从海绵内挤出来，所以说海绵并未被染色。
(一)染色基本过程按照现代的染色理论的观点，染料之所以能够上染纤维，并在纤维织物上具有一定牢度，是因为染料分子与纤维分子之间存在着各种引力的缘故，各类染料的染色原理和染色工艺，因染料和纤维各自的特性而有很大差别，不能一概而论，但就其染色过程而言，大致都可以分为三个基本阶段。
1.吸附当纤维投入染浴以后，染料先扩散到纤维表面，然后渐渐地由溶液转移到纤维表面，这个过程称为吸附。
随着时间的推移，纤维上的染料浓度逐渐增加，而溶液中的染料浓度却逐渐减少，经过一段时间后，达到平衡状态。
吸附的逆过程为解吸，在上染过程中吸附和解吸是同时存在的。
2.扩散吸附在纤维表面的染料向纤维内部扩散，直到纤维各部分的染料浓度趋向一致。
由于吸附在纤维表面的染料浓度大于纤维内部的染料浓度，促使染料由纤维表面向纤维内部扩散。
此时，染料的扩散破坏了最初建立的吸附平衡，溶液中的染料又会不断地吸附到纤维表面，吸附和解吸再次达到平衡。
3.固着是染料与纤维结合的过程，随染料和纤维不同，其结合方式也各不相同。
上述三个阶段在染色过程中往往是同时存在，不能截然分开。
只是在染色的某一段时间某个过程占优势而已。
(二)染料在纤维内的固着方式染料在纤维内固着，可认为是染料保持在纤维上的过程。
不同的染料与不同的纤维，它们之间固着的原理也不同，一般来说，染料被固着在纤维上存在着两种类型。
1.纯粹化学性固色指染料与纤维发生化学反应，而使染料固着在纤维上。
常用染色方法 ppt课件
2020/10/28
瑞氏染色法
❖ 二、细胞着色原理： 既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞
成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。如血 红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合 ，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、 嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合， 染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态 与伊红和美蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质、 原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染 成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物 质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻 底消失后，染成粉红色。
6、染色过深可用水冲洗或浸泡水中一定时间，也可用 甲醇脱色。
7、染色偏酸或偏碱时，均应更换缓冲液再重染。 8、瑞氏染液的质量好坏除了用血涂片实际染色效果评 价外，还可采用吸光度比值RA评价。瑞氏染液的成熟指数 以RA（A650nm/A525nm）=1.3±0.1为宜。
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中性杆状核粒细胞 中性分叶核粒细胞
嗜酸性粒细胞
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嗜碱性粒细胞
单核细胞
淋巴细胞
网织红细胞染色方法
❖ 一、概述： 根据网织红细胞的形态特征和成熟程度将其分为五型：
花冠型、丝球型、网型、破网型、点粒型。网织红细胞经 体外活体染色后，显微镜下凡含有两个以上的深染颗粒或 具有线网状结构的无核红细胞，即为网织红细胞。WHO 推荐使用新亚甲蓝染色液，因其对网织红细胞染色力强且 稳定而被首推。
2、染色的时间与染液浓度、染色时温度成反比；而与细 胞数量成正比。
3、冲洗时不能先倒掉染液，应用流水冲去，以防染料沉 淀在血膜上。
染色方法总结
染色方法总结AgNOR染色法:1、试剂配制：（1）AgNOR染色液：甲液：明胶2 g 溶于双蒸水至99 ml，在60℃使之完全溶解，再加入纯甲酸1 ml 摇匀待用。
乙液：硝酸银50 g 溶解于双蒸水中至100 ml，4℃冰箱保存。
（2）AgNOR工作液取甲液10 ml，乙液20 ml 临用前混合。
2、步骤：（1）切片脱蜡至水（2）双蒸水洗2次（3）AgNOR 工作液中（25℃）浸染30分钟（暗处进行）（镜下观察）（4）双蒸水洗3次（5）脱水,透明,封固3、结果：油镜观察，细胞核及胞质背景为淡黄色，AgNOR呈棕黑色颗粒状。
B鞭毛染色法:１．试剂配制：甲液：丹宁酸５克氯化铁（ＦｅＣｌ3）１．５克福尔马林（１５％）２．０毫升氢氧化钠（ＮａＯＨ）１％１．０毫升乙液：硝酸银（ＡｇＮＯ3）２克蒸馏水１００毫升制备乙液时，待硝酸银溶解后，取出１０毫升备用，向余下的９０毫升硝酸银液中滴加浓氢氧化铵，先呈很浓厚的沉淀，再继续滴加至刚刚溶解沉淀成澄清液为止。
再将备用的硝酸银溶液慢慢逐滴加入澄清液中，先呈现薄雾，但轻摇则消失，继续边滴加边摇动，待澄清液呈现略有轻微不消散的薄雾状为止。
如雾重，则银盐沉淀，不宜使用。
２．染色方法：（１）将待检菌接种在新制备的肉汤琼脂斜面上，置３７°培养１６—２０小时，备用。
（２）在载玻片的中部相隔一厘米处，用接种环各沾一滴蒸馏水，然后用接种环挑取湿润处的菌苔少许于一端的水滴中，倾斜玻片使培养物流至另一水滴中，两水滴自然相通，菌体从上位自然扩散到下位水滴中，待干燥后染色。
（３）在干燥涂片上加甲液３—５分钟，用蒸馏水冲洗。
将残水沥干或用乙液冲去残水后，加适量乙液保持３０—６０秒钟。
染色时在酒精灯上稍加热，使染液出现蒸汽即可，用蒸馏水冲洗。
（４）镜检：菌体及鞭毛皆染成茶色。
３．注意事项：（１）染液最好随用随配，存放至次日效果则差。
（２）一定要充分洗净甲液后再加乙液，否则背景较脏。
（３）防止水及培养物沾有氯化物。
染色技术
1、用碱性染料结晶紫对菌 液涂片进行初染 2、用碘溶液进行媒染，其 作用是提高染料和细胞间 的相互作用从而使二者结 合得更牢固。 3、用乙醇或丙酮冲洗进行 脱色。在经历脱色后仍将结 晶紫保留在细胞内的为革兰 氏阳性细菌，而革兰氏阴性 细菌的结晶紫被洗掉，细胞 呈无色。 4、用一种与结晶紫具有不 同颜色的碱性染料对涂片进 行复染。例如沙黄，它使原 来无色的革兰氏阴性细菌最 后呈现桃红到红色，而革兰 氏阳性细菌继续保持深紫色
影响染色的其它因素:
• 菌体细胞的构造
• 外膜的通透性
• 此外，培养基的组成、菌龄、染色液中的电 解质含量和pH、温度、药物的作用等，也都 能影响细菌的染色。
二、染料的种类和选择
染料分为天然染料和人工染料两种。
天然染料有:胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏 木素等，它们多从植物体中提取得到，其成分 复杂，有些至今还未搞清楚。
一、染色的基本原理
微生物染色的基本原理，是借助物理因素和 化学因素的作用而进行的。
物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗 透、吸附作用等。
化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发 生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附， 且吸附作用稳固；同样，碱性物质对酸性染料较易于吸 附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化学亲和力， 易于吸附。
8、干燥 着色标本洗净后，将标本晾干，或用吸 水纸把多余的水吸去，然后晾干或微热烘干， 用吸水纸时，切勿使载玻片翻转，以免将菌 体擦掉。
9、镜检 干燥后的标本可用显微镜观察。
综上所述，染色的基本程序如下：
制片→固定→媒染→染色→脱色→复染 →水洗→干燥→镜检。
四、染色方法
微生物染色方法一般分为单染色法和复染 色法两种。前者用一种染料使微生物染色，但 不能鉴别微生物。复染色法是用两种或两种以 上染料，有协助鉴别微生物的作用。故亦称鉴 别染色法。常用的复染色法有革兰氏染色法和 抗酸性染色法，此外还有鉴别细胞各部分结构 的（如芽胞、鞭毛、细胞核等）特殊染色法。 食品微生物检验中常用的是单染色法和革兰氏 染色法。
染色方法总结
第一节结缔组织和肌纤维染色Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)用途：VG法用于区分胶原纤维和肌纤维。
原理：酸性复红和苦味酸对这两种纤维都具有较强的亲合力，结果胶原纤维被酸性复红染成红色，肌肉被苦味酸染成黄色。
此方法是一种优良的传统方法。
固定：10%福尔马林切片：4-6微米试剂：Weigert铁苏木精液：A液：苏木精1g，无水酒精100 ml。
一般配制后需要数周或数月自然氧化，成熟后使用。
B液：29%三氯化铁水溶液4 ml，蒸馏水95 ml，盐酸1 ml。
两液分别配制，临用时A、B液等量混合，过滤后使用。
24h后失去染色能力。
Van Gieson液：1%酸性复红水溶液 10 ml苦味酸饱和水溶液 90 ml临用时1:9混合过虑后使用。
Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)步骤：1．石蜡切片脱蜡至水。
2． Weigert苏木精液5-10 min。
3．充分水洗。
4． Van Gieson液1-5 min。
5． 95%酒精迅速分化数秒。
6．无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果：胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色、细胞核呈黑色或棕蓝色。
体会与说明：由于酸性复红退色较快，染色结果不能长期保存，一般只能保存3～6个月。
二 Masson三色法试剂：Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。
将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。
Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液：冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。
苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液：光绿 1g，蒸馏水100 ml。
Masson三色法步骤1．石蜡切片脱蜡至水。
2．铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。
常用染色方法课件
抗酸染色法是通过使用染料如石炭酸 复红或碱性品红，对细菌进行染色， 以鉴定分枝杆菌。分枝杆菌被染成红 色，而其他细菌则不被染色。
荧光染色法
总结词
一种高灵敏度的细菌染色方法
详细描述
荧光染色法使用荧光染料，如荧光素或吖啶橙，对细菌进行染色。在荧光显微镜 下观察，细菌发出荧光，使得观察更为敏感和准确。
02
细菌染色方法
革兰氏染色法
总结词
一种区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的经典染色方法
详细描述
革兰氏染色法是通过使用结晶紫、碘液和酒精等染料，对细菌进行染色，以区 分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。革兰氏阳性菌被染成紫色，而革兰氏阴性菌 被染成红色。
抗酸染色法
总结词
一种用于鉴定分枝杆菌的特异性染色 方法
常用染色方法课件
目录
• 染色方法概述 • 细菌染色方法 • 组织染色方法 • 荧光染色方法 • 免疫染色方法
01
染色方法概述
染色的定义与目的
01
染色定义
02
染色目的
染色是通过化学或物理方法将色素、染料等物质与纤维结合，使纤维 材料获得所需颜色的过程。
染色主要用于纺织品的加工，使纺织品具有美观的外观和良好的使用 性能，同时还可以赋予纺织品一些特殊功能，如抗菌、防紫外线等。
缺点
操作复杂，需要精确的配比和时间控 制，可能会产生染色干扰。
05
免疫染色方法
免疫荧光染色法
总结词
一种高灵敏度、高特异性的染色技术
详细描述
利用荧光物质标记抗体，与抗原结合后发出荧光，在荧光显 微镜下观察，可对细胞或组织内的抗原进行定位和定性分析 。
免疫酶染色法
总结词
一种高灵敏度、高特异性的染色技术
染色知识总结
第一讲工作的意义好的开始是成功的一半。
培养的是“技术型人才”干好工作的基本条件⑴态度：态度决定一切，敬业精神，不服输精神⑵技能：靠勤奋培养，学习和积累。
较真的精神！刨根问底！⑶身体：“细节决定成败”“简单的招式练到极致就是绝招”不可好高骛远！第二讲颜色的形成及基本理论知识染色是指用染料按一定的方法使纤维、纺织品获得颜色的加工过程。
一、若要看到一个物体的颜色，必须满足三个条件：（1）由光源把物体照亮（漆黑的晚上，没有光，世界漆黑一片，没有色彩）（2）物体把照射到其表面的一部分光散射出来（3）物体散射出来的光投射到人的眼睛中（电脑屏幕在有点角度看，是看不见东西的）二、光是一种电磁波，其具有波粒二象性。
电磁波波长短的小于1nm，长的超过103km。
一般来说，可见光的波长在380～780nm。
可见光的波长在整个电磁波中，仅仅占据其中很小的一段。
三、主要设备灯箱：（5万元）美国Gretag Mibeth测处方的机子（20万元）美国Verivide 四、光源：①D65：人造日光daylight②TL84或TL83是欧亚地区典型办公室零售照明③CWF冷白光，美国办公，柜窗④A或F白炽灯⑤uv：紫外光，用于检测荧光染料，增白剂⑥H：水平日光，检测用光注：色温（colo(u)r temperature）是表示光源光色的尺度，单位为K（开尔文）。
光源的色温是通过对比它的色彩和理论的热黑体辐射体来确定的。
热黑体辐射体与光源的色彩相匹配时的开尔文温度就是那个光源的色温，它直接和普朗克黑体辐射定律相联系。
一些常用光源的色温为：标准烛光为1930K（开尔文温度单位）；钨丝灯为2760-2900K；荧光灯为3000K；闪光灯为3800K；中午阳光为5400K；电子闪光灯为6000K；蓝天为12000-18000K。
详解：D65 ：色温6500K-平均北方日自然日光(或北窗光),代替自然光对色, 适合普通要求,大部分客户均指定用D65对色；TL84 ：三基色荧光光源：色温4000K-欧洲商店灯光，欧洲及日本客户通常会指定用TL84对色;CWF ：色温4200K-美国商店或办公光源（或称冷白光），美国客户常用；F 光源：色温2700K-亦称A 光源,为钨丝灯。
各种染色方法及应用课件
各种染色方法及应用课件
三、骨髓铁染色
【原理】正常人骨髓中的贮存铁主要存在于骨髓 小粒和幼红细胞中，骨髓中的铁在酸性环境下与亚 铁氰化钾作用，形成普鲁士蓝反应，形成蓝色的亚 铁氰化铁沉淀，定位于含铁的部位，从而反映骨髓 中铁的储存量。
理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合 的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧 光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织 细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定 性及定量的研究。
各种染色方法及应用课件
各种染色方法及应用课件
免疫组化步骤
1.阻断内源性过氧化物酶活性 2.加封闭液： 3.加入一抗（保存液稀释） 4.加入二抗（即免疫组化试剂盒里的） 5.显色 6.封片
各种染色方法及应用课件
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L1 PAS(+)
AML-M6
各种染色方法及应用课件
PAS(+)
【临床意义】
（1）M6与巨幼贫的鉴别 M6的幼红细胞PAS可呈强阳性，积分明
显增高，巨贫、再障、溶贫时PAS反应为阴 性。
（2）急性白血病的类型鉴别 ALL，PAS呈大块状阳性，也可是阴性，
(阈值:20x109/L)
各种染色方法及应用课件
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谢谢！
各种染色方法及应用课件
各种染色方法及应用课件
▪ 3、普鲁士蓝法：细胞内、外铁与酸性亚铁 氰化钾作用，形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。
▪ 4、雪夫反应：过碘酸氧化细胞内糖类中乙 二醇基形成乙醛基，醛基与雪夫试剂作用， 使无色品红形成红色沉淀。
▪ 5、金属沉着法 ▪ 其他尚有物理学方法，如脂溶性染料染色
常用染色方法
性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被误认为是革兰氏阳性菌。因此必须严格把握脱色时间。
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G-菌
G+菌
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抗酸染色法
• 一、基本原理： 分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，主要是分枝菌酸，它包围在肽聚糖的外面，所以分枝杆菌一般
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Miller窥盘法
由于目测计数误差较大,用 Miller窥盘法可减低标准误,特 别是RBC较少时.
盘:厚1mm,直径19mm,圆玻片 上划出格子:大方格内Ret/(小方 格内RBCx9)X100%
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网织红细胞
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革兰染色法
• 一、基本原理： 革兰染色是细菌最基本的染色法，可用于标本涂片或菌落涂片。细菌的等电点较低，约在PH2-5，
瑞氏染色法
• 一、概述： 瑞氏染色法是目前最常用的血涂片染色方法。其染料由酸性伊红和碱性美蓝组成，美蓝和伊红的水
溶液混合后，产生一种不溶于水的伊红化美蓝中性沉淀（ME），即瑞氏染料。将适量的ME溶解于甲醇中， 即成为瑞氏染液。
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瑞氏染色法
• 二、细胞着色原理： 既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一
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抗酸染色法
• 二、方法： 1、涂片经火焰固定后，加石炭酸复红溶液2-3滴，徐徐加热至有蒸汽出现，切不可沸腾。染5min，冷
却后水洗。 2、加脱色剂（3%盐酸酒精）30s-1min，不时摇动玻片至红色脱落为止，水洗。 3、加复染液（碱性美兰溶液），染，水洗。 4、干后镜检。
染色技术专业资料模板
1。
染色1, 1浴比的控制: 据印染机械生产企业的产品说明书上介绍浴比似乎越小越能吸引客户, 其实不然, 无论何种溢流喷射染色机的浴比不是由机械生产企业规定的, 而是应该由染整企业根据加工的产品在制订工艺时確定, 如染60~100g/m2重量的轻薄的涤纶织物, 浴比一般控制在1∶12~1∶15之间, 因为轻薄织物的体积大, 相对长度也长, 因此浴比宜大一些, 反之, 如加工250g/m2重量的涤/棉(或粘胶)混纺交织物浴比宜控制在1∶10左右。
一般浴比的大小要视织物在机内运转一回(r)大约需花 1.5~2min之间的时间, 实践证明, 对轻薄型织物来说, 如果转速太快, 织物接触导布辊的几率越多, 织物交织点往往会因此而产生滑移(纰裂), 可是相反, 则容易产生色花, 就是对一般的织物来说, 也要注意超载, 它不但是因织物在储布槽内堆积时间长, 加之织物在机内滯留过程中难免受热不勻而导致色花, 而且往往还会因机内的染液流向快慢引起织物打结和堵布等现象。
现在的溢流喷射染色机最小的浴比有1∶6, 多数均为1∶10, 总的来说, 染色的质量优劣不能孤立地看浴比大小, 更重要的看整机设计得是否合理, 它的机械可控性等而定。
从染整角度而言, 要做到浴比定得恰当与否, 还是要看整体的染色质量。
1, 2升温、保温与降温: 这个问题总的也要看具体产品而定, 它和染色时采用的染料品质以及助剂的合理使用有一定关系。
我在这里可提供一个普通的溢流喷射染色机染一般性的涤纶及其混纺交织物的升温、保温与降温的工艺曲线(见图1), 从快慢速度来讲一般可在0.5℃范围去调节, 如原来是以1℃/min, 考虑到其它因素, 则能够加快或延缓0.5℃, 即为1.5℃/min或0.5℃/min℃, 切忌大起大落。
并因溢流机上的温度与压力也要符合物理常数(见表2)。
溢流喷射染色机常规染色工艺曲线图1(保溫染色)130℃45~60min2℃/min2℃/min⑥85℃×15min还原清洗后, 注入冷水进行溢流水洗。
染色工艺基础知识
剂，染深色也仅需加少量助染剂。
Nylonthrene B染料主要用于卷染。
2021/6/16
N N C C CH3 CN
HO N Cl
Cl SO3Na
弱酸性黄3GS
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酸性染料染色机理
酸性染料的主要结构：
D–SO3–Na+ → D–SO3– + Na+
N H 3+ H +
H N
O H -
C O O -
因此一般选用弱酸性染料染锦纶。其键结主要是靠纤维分子在酸性条件下末端带正电 的氨基与染料的磺酸基团的离子结合以及分子彼此间形成的范德华力和氢键结合。
2021/6/16
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染色工艺过程
染物于50~60℃入染，以1℃/1.5min的速率升温至70℃ ，再以 1℃/2~4min的速率升温至沸，再沸染45~75min，然后水洗烘干。
冷水洗、热水洗、 皂洗、热水洗、冷水洗
K型 60 85
2021/6/16
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2.轧染（pad） 一浴法
浸轧染液 → 烘干 → 汽蒸 → 后处理
室温
染料 NaHCO3 防泳移剂 尿素
预+烘
100-104℃ 1-5min
二浴法 浸轧染液 → 烘干 → 轧碱 → 汽蒸 → 后处理
染料 防泳移剂 尿素
(K)NaOH （时间短）
反应性弱，适于高温（90℃以 上）染色，可在碱性较强的条 件下与纤维反应，又称热固型 活性染料，染料不易水解，贮 存稳定性较好，“染料－纤 维”共价键的水解稳定性比X 型染料好。
（1）反应性：X型＞KN型＞K 型，染色温度50～70℃，在弱 碱性条件下固色； （2）“染料－纤维”共价键的 耐酸稳定性较好，耐碱的水解稳 定性差； （3）染料溶解性好，色泽鲜 艳。
实验时间各种染色方法大荟萃
实验时间各种染色方法大荟萃
大家在实验过程中，是不是经常会用到各种染色法？
但是染色方法如此之多，其具体方法与步骤又有什么区别？
学霸君非常的贴心，帮大家整理了各种染色方法，并作了汇总。
以下是从 A 至 V 的染色大法一览表
AgNOR 染色法
毛染色法
CAE 染色步骤
HID 染色法
HP（硝酸银法）
六胺银染色法
Mallory 三色法
Masson 三色染色法
粘液染色
脂肪（苏旦Ⅲ）法
TTC 方法
Van Gieson 法
Grimelius 硝酸银反应法（嗜银反应）Highman 甲醇刚果红染色法
Mallory 磷钨酸～苏木素染色法（PTAH）甲基绿派洛宁法（改良 Cook，1974）
高碘酸-六胺银-马休黄染色法
Trypan blue（台盘兰）排斥实验
想了解以上每种染色法的详细实验步骤吗？。
十五种细胞染色技术
1、酸性品红：酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容於水,略溶於酒精(0.3%).是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
它跟甲基绿同染，能显示线粒体.组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红：刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状,能溶於水和酒精，遇酸呈蓝色。
它能作染料，也用作指示剂.它在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。
用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色.在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。
刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由於它能溶於水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速3、甲基蓝：甲基蓝是弱酸性染料，能溶於水和酒精。
甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。
它跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。
它的水溶液是原生动物的活体染色剂.甲基蓝极易氧化，因此用它染色后不能长久保存。
4、固绿：固绿是酸性染料,能溶於水(溶解度为4%)和酒精（溶解度为9％）。
固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂,在染细胞和植物组织上应用极广。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
5.苯胺蓝：是一种混合酸性染料，平常所用很难有一定的标准。
此染料一般很难溶於水，也不易溶於酒精（1。
5%）。
植物制片中可与番红合用，作为组织染色；也可作藻类植物染色。
因为这种染料的成分很不一致，染色效果不易掌握。
6、苏丹Ⅲ:苏丹Ⅲ是弱酸性染料，不溶解於水，呈红色粉末状，易溶於脂肪和酒精(溶解度为0。
15％)。
常用70％酒精中的饱和溶液。
苏丹Ⅲ是脂肪染色剂.7、苏丹Ⅳ：苏丹Ⅳ是弱酸性染料,也是很好的染脂肪染料，现在多用以代替苏丹Ⅲ，可染树脂、乳汁管、蜡质以及角质等结构，也可使叶绿体染成暗红色。
特殊染色法
特殊染色法一，抗酸杆菌染色1，试剂配制：（1）碱性品红乙醇液：碱性品红5g，无水乙醇100ml（2）5%苯酚水溶液：苯酚（稍加温使共溶解）5ml，蒸馏水95ml（3）苯酚碱性品红液：碱性品红乙醇液1ml，5%苯酚水溶液9ml（4）20%硫酸水溶液：浓硫酸20ml，蒸馏水80ml（5）汽油松节油液：航空汽油（也可为普通汽油）1份，松节油1份2，染色程序：（1）切片用汽油松节油脱蜡2次，每次5-10min。
（2）不经乙醇洗，只用纱布将切片周围余液擦干。
（3）流水稍洗。
（4）滴入苯酚碱性品红液，于室温下染15—30min。
（5）流水去多余液体。
（6）用20%硫酸水溶液分化至适当为止（一般需1—5min）（7）流水充分冲洗。
（8）用Mayer苏木精液浅染细胞核。
（9）洗流水冲洗10—15min。
（10）用风扇把切片吹干，随即二甲苯透明，中性树胶封固。
3，结果：抗酸杆菌（包括麻风杆菌和结核杆菌）呈鲜红色，胞核呈蓝色。
二，奥新兰过碘酸雪夫代染色简称（AB—PAS染色）（溶液配制）1，0.3%的奥辛兰醋酸液：奥新兰0.3g，蒸馏水97ml，冰醋酸3ml2，1%过碘酸水溶液，schitf代试剂及亚硫酸冲洗液配发同。
（染色方法）1，切片按常规脱蜡水洗，再入蒸馏水洗。
2，染于0.3%或1%奥新兰醋酸液中10—30分钟。
3，用蒸馏水充分洗，至少洗4次。
4，1%过碘酸水溶液氧化5—10分钟。
5，用蒸馏水从分洗，至少3—4次。
6，Schiff代试剂染10—30分钟。
7，直接用亚硫酸冲洗3次，每次2分钟。
（有固定的作用，把多余的schiff试液洗净）8，流动自来水洗5分钟后蒸馏水洗。
9，苏木素染核。
必要时盐酸究竟稍分化后充分用自来水洗。
10，95%酒精，无水酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固。
（结果）酸性粘多糖呈靛兰色，中性粘旦白呈鲜紫红色或品红色，中性及酸性粘蛋白混合物呈紫兰色。
软骨紫蓝核呈蓝色。
三，改良Hale胶状铁染色液的配制和应用（溶液配制）29%氯化铁4.4ml，蒸馏水250ml将蒸馏水置于烧杯内煮沸，然后滴加氯化铁不断搅动直至溶液变成暗红色。
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国际染色技巧染发剂被头皮吸收多了，会有损人的身体健康。
其实，只要染发的方法运用恰当，就可以在最大程度上减少染发剂被头皮吸收的可能。
倘若稍微改变一下方式，就能降低头发“吸收”染料的机率，方法是：染发前准备一些与所染头发长度相等的箔纸，然后把需染的发丝分成一小撮一小撮的铺放在一张张箔纸上，用小刷子沾上染料均匀地涂在箔纸内的头发上，涂光后，把箔纸连头发一齐卷起、用小别针固定即可。
这样，沾了染料的小刷子不易接触到头皮，上了染料的头皮上，无论是在美发店蒸薰，或是在家里染发，都能保证头皮不易被玷污。
或是箔纸不易找到，不渗水的油纸可代替箔纸，目的都是把染料和头皮隔开。
染绿色，最佳法常用的方法颜色不正，而且掉色快。
有种方法不错，就是把头发先漂到8度，然后上基色，3的基色出来是墨绿，随后4.0的出来的绿稍微浅一些，很不错的，颜色正，而且掉的慢。
漂白发经验纯白的和色卡上的一模一样！过程：把原发漂到11----12度。
呈现透明的颜色，切记最后两次漂时用3%或者6%的双氧。
然后用蓝+紫+精华素+水比例1：1：3：5 洗想做白的头发，先是灰色的，大概5分钟就变白了，而且越洗越白！大家可以用剪下来的头发做做看效果很好的！用双氧12％的是可以！记住要有耐心！一次不行可以多漂几次！千万不可以加热！会断的！必须要用低中度的双氧9%的。
多加精华液不可以加热，多做几遍达到10度左右，之后用6%双样对精华液再加0/00再加一点紫色一定要是纯紫对冲就好了。
可以做的象雪一样白。
烟灰做青铜色~效果不错1 ：头发原来是4度的底色我就用双氧9%+12%加漂粉以2：1的比例退色到7——8度2：用不含护发素的洗发水彻底的冲洗3：大量的烟灰+4/0+6%+绿色的加强色以10：1：6：1.2的比例涂抹上透明感较强的银白色先将头发作褪色处理至一定的基色，然后用专业染发剂做出理想的色彩效果。
方法1：先将原发色褪浅至9度，再用韩国汽化剂，兑入漂粉，再次漂发，即可完成。
方法2：先将原发色褪浅至9度，再用含有蓝色的液体洗发多次，可接近白色（如清水中兑入一些蓝墨水清洗头发）。
方法3：先将原发色褪浅至8—9度，再用碱性烫发水1剂刷一遍也可接近白色。
方法4：先将原发色褪浅至10度，再用紫色调彩+0/00褪色膏（20%），调配10vol或20vol 的双氧对冲。
时间：3-5分钟左右就出现银白了！其原理是先将原发色褪浅，然后用紫色将黄色素对冲掉。
PS：在冲色时要看好时间，时间不可以超过5分钟（全过程）方法5：先用蓝色漂粉调配40vol双氧作两次漂浅！再用紫色+0/00+40vol双氧，！或用0/00 + 20vol双氧。
以上几个方法做出的效果接近透明银白色，但由于对发质的伤害程度比较大，不建议在长发上操作，或只做挑染。
银灰色；做法漂色到10度后用8/1+0/1+0/66+6%比例30:10:1:41烟灰色；漂到极浅后用7/1+0/19+0/66+6%比例30:10:1:41蓝黑色；漂色到10 度后：1。
威娜染膏2/8（60ML）+0/88（10ML）+6%双氧水（70ML），时间25分钟；2。
柔迪雅或者肯达是或者黑人头2/1（30ML）+0/88（10ML）+6%（40ML），时间25分钟：3。
没有蓝黑染膏的杂牌子用2/0+0/88+0/66+6%比例30：15：2：47，单位（克），时间25分钟。
天蓝色;漂到10度后用0/88+0/66+6%+水比例2:1:3:20冲色后再上0/88+110/0+6%比例3:1:4时间5-8分钟,粉色:威娜0/65+110/0+6%比例3：1：4在10漂浅的头发上上色。
退红色的两种方法！第一种方法是针对那些并不是很红的颜色，比如棕红，或暗红色。
一，用1份漂粉+2份20度的双氧奶+三分之一份的绿色第二种是针对相对较红的颜色，但太得太利害就没办法保证百分之百能退掉。
二，1份漂粉+2份20度的双氧奶+1份1号冷烫药水+少许洗发水.如何染灰色、银白色首先，要把头发漂至8度以上〈银白色要漂至9度以上〉，因顾客的发况不同，所需要漂的次数也不同，1~3次左右，不要用漂的次数来评估颜色，必须要用眼睛仔细来判别，底色是否已达到所须的度数与底色的颜色。
然后：1.a.调同度数的“蓝紫色”来抵消黄色。
〈可用加强蓝+加强红+大量增亮剂，调成浅蓝紫色、或淡蓝紫色〉b.也可以用灰色系加一些红色或紫红色来抵消黄色。
〈如果单用灰色系来染，一般灰色系蓝色粒子的百分比〈%〉占的比较多，会呈现带灰绿的色调，而不是纯灰色调，所以加一些红色或紫红色，可以抵销绿色，灰色的效果才会很干净〉。
2.在抵销时用双氧水5vol、或10vol的低双氧水，时间用目测，黄色一抵消没有了，就要赶快冲水，时间停太久，会变浅灰紫〈灰里面带一点点淡紫色〉。
3.抵销成灰白色后，再用低双氧水+灰色染膏或银白色染膏再上一次色，约15~20分冲水，如此即完成，颜色也会留存的比较久。
〈此时所选的灰色度数可以用5度、6度、7度、8度、9度、10度，染出想要的深灰色、中灰色、浅灰色、或淡灰色〉。
在整个过程中必须注意：1.每次漂、染都必须做好头皮的防护。
2.每次漂与上色都必须做好头发的保护，补充氨基酸、蛋白质加强对头发的支撑力。
3.除了短发，尽量用区块染、片染、挑染、、、局部来呈现，较不伤发质。
最后，并不是每一个人染灰色都会很酷、很炫、很好看，有些人染完灰色后，反而看起来很苍老，没有精神的感觉，那是因为没有搭配他们的肤色，用错灰色的明暗度。
色彩基因是暖色调的人：适合做浅灰色、淡灰色、银白色，不适合深灰色、暗灰色，除了看起来没精神、苍老以外、有些皮肤较腊黄还会呈现灰灰脏脏的感觉。
色彩基因是冷色调的人：则都可以使用，尤其深灰色、暗灰色更能把它脱俗的灰色味、时尚感，淋漓尽致表达出来。
如何染梦幻般的淡蓝色“梦幻般的淡蓝色”是属于“高明度”的颜色，故要染淡蓝色一定要去掉头发里面大量的蓝、红、黄麦拉宁色素粒子，才能染出视觉效果很纯净、梦幻般的淡蓝色。
首先，要把头发漂至9度，因顾客的发况不同，所需要漂的次数也不同，1~3次左右，不要用漂的次数来评估颜色，必须要用眼睛仔细来判别，底色是否已达到所须的度数与底色的颜色。
然后：1. 调9度的“淡淡蓝紫色”上在9度淡淡的黄色。
可用加强蓝+一点加强红+大量增亮剂，调成淡淡的蓝紫色，蓝色粒子的百分比〈%〉占的比加强红较多，会呈现淡淡的淡蓝色调。
2.在上色时用双氧水5vol、或10vol的低双氧水，且时间要够，如果时间不够会呈现出淡淡的灰蓝色。
此外增亮剂使用的量也要够，否则很容易就变成高彩度的蓝色，而不是高明度的淡蓝色。
3.染成淡蓝色后，再用低双氧水+淡淡的蓝色再上一次色，约15~20分冲水，如此即完成，颜色也会留存的比较久。
因为淡淡的蓝色其色料很少，所以必须上两次才会使色调更饱满，并减缓退色时间。
〈此时所调的蓝色度数可以用7度、8度、9度，除了染出想要的淡淡的梦幻蓝色，还可以染出浅蓝色、天空篮、明蓝、鲜蓝色、、〉。
在整个过程中必须注意：如果不是要做淡蓝、浅蓝色，而是要做蓝色、暗蓝色等，底色则不用漂太浅，以免让发质过度受损，甚至有些顾客的发色已有7度者，可以不用再处理就可以染出很漂亮的蓝色。
若是要做蓝黑色、或深暗蓝色，也是可以不用漂就可以完成。
所以染不同的蓝色调，必须用不同的处理方式，才能达到最佳呈色效果。
注：以上两种方法对做过离子红色无效。
白发染发技巧一。
掉色问题解决这个问题，关键在：技术+色膏品质+发质基础1,要让人工色素充分氧化，附于头发，着色时间要求30-45分钟2,正确选择双氧奶的度数----------如需要，请用最温和的方式洗出所需要的色彩。
3,正确的操作流程：a,发质的判断→染前护理→调配染剂（选用电子秤）→充分氧化着色→水染加强（目标色加2倍水调配）→水疗护理二，白发比例的染发问题当白发与自然发色度差达7度以上，我们选择先把二者均色：即先把白发与自然发的颜色统一在目标色的色度。
例如：有30％的白发，自然发色3度，目标色5度的红木色。
解决方案：5。
1的灰色基色＋6％的双氧奶1：1调配，经过30－45分钟的稳定着色，然后：《【目标色（5度的红本色）＋红色工具色】＋6％双氧奶》1：1再着色30分钟下面来探讨白发染发它问题：1 2 3 4 5 6 7 8 9 10国际色系以十个色度来表达，以7度为透光点，6，5，4，3，2，1色度的头发，光线照射下将光反射。
8，9，10色度的头发而将光透过。
所以，当目标色在6度以下要做好白发复盖然后再染目标色。
盖白发的基色选择：亚麻色系选自然色系的N系红、紫选灰色色系的A系这样可以避免颜色着色被干扰！三，目标色不准确1，（处女染发）原因：自然发染发的目标色是否与天然麦拉宁色素干扰？天然麦拉宁色素的色层结构：1 2 3 4 5 6 7 8 9 101兰黑2黑褐3紫红4红紫5红6橙红7橙8黄橙9黄10金黄A，当第一次染发，目标色在4度的→选紫色色系B，当第一次染发，目标色在5－6度的→选红色或橙红色系色系C，当第一次染发，目标色在7度的→选橙色色系D，当第一次染发，目标色在8度的→选亚麻或金黄色色系2，已经染过的头发，再染新的颜色，产生色干扰为导致目标色不准确。
a，例：头发现存色彩，经过对光检查是6度红色系，而顾客选择5度的紫色。
如果直接染，结果得到：紫红色b，例：头发现存色彩，经过对光检查是8度黄色系，而顾客选择5度的紫色。
如果直接染，结果得到：3度的自然黑色c，例：头发现存色彩，经过对光检查是8度黄色系，而顾客选择6度的红色。
如果直接染，结果得到：6度的红橙色我们知道了这些，再了解色膏本身的含量与技术要求，运用以上技术操作，就不会出现问题了。