槐花米中芸香苷的提取及

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槐花米中芸香的提取及槲皮素的制备与检识

芸香苷、槲皮素及糖的检识芸香苷、
4、三氯化铝反应：、三氯化铝反应：取样品1 溶于甲醇中，取样品 mg溶于甲醇中，加1%三氯化铝甲醇溶液溶于甲醇中三氯化铝甲醇溶液 2~3滴，黄酮类呈鲜黄色，并有荧光。滴黄酮类呈鲜黄色，并有荧光。 5、锆-柠檬酸反应：、柠檬酸反应柠檬酸反应：取样品1 取样品 mg，加甲醇 ml，在水浴上加热溶解，，加甲醇2 ，在水浴上加热溶解，再加2%二氯氧锆甲醇溶液二氯氧锆甲醇溶液3~4滴，凡有羟基或再加二氯氧锆甲醇溶液滴凡有3-羟基或 5-羟基的黄酮即呈鲜黄色。然后加羟基的黄酮即呈鲜黄色。羟基的黄酮即呈鲜黄色然后加2%柠檬酸甲醇柠檬酸甲醇溶液3~4滴，有3-羟基的黄酮黄色不褪。比较芸香羟基的黄酮黄色不褪。溶液滴羟基的黄酮黄色不褪苷和槲皮素的不同。苷和槲皮素的不同。
芸香苷、槲皮素及糖的检识芸香苷、
3、盐酸镁粉反应：、盐酸-镁粉反应镁粉反应：取芸香苷1 取芸香苷 mg，加乙醇 ml，在水浴上加热，加乙醇2 ，溶解，加镁粉约50 溶解，加镁粉约 mg，滴加数滴浓盐酸，溶液由，滴加数滴浓盐酸，黄色渐变红色者表示有黄酮类化合物。黄色渐变红色者表示有黄酮类化合物。以同法试验槲皮素。验槲皮素。如用锌粉代替镁粉，则芸香苷（羟基与糖结如用锌粉代替镁粉，则芸香苷（3-羟基与糖结合成苷）仍有作用，而槲皮素（黄酮醇类）合成苷）仍有作用，而槲皮素（黄酮醇类）不呈还原显色反应。因此可区别两者。还原显色反应。因此可区别两者。

实验芸香苷的提起

实验芸⾹苷的提起

【实验材料】

槐花⽶、⽯灰乳、0.4%硼砂⽔溶液、浓盐酸、正丁醇、醋酸、氨⽔、⼄醇、70%⼄醇、1%氢氧化钠溶液、1%三氯化铝⼄醇溶液、2%氯氧化锆甲醇溶液、2%枸椽酸甲醇溶液、10% α-萘酚⼄醇溶液、浓硫酸、2%硫酸溶液、葡萄糖标准品、⿏李糖标准品、芸⾹苷标准品、槲⽪素标准品、碳酸钡、氨制硝酸银试液、⼴泛pH试纸、中速层析滤纸（4cm×15cm）。

【实验原理】

（⼀）芸⾹苷

⼜名芦丁（Rutin），维⽣素P，紫槲⽪苷。分⼦式C27H30O16，分⼦量610.51。浅黄⾊针晶（⽔），mp.176℃～178℃，[]23

α+13.82°(⼄醇)，[]23Dα-39.43°（吡啶）。在各种溶剂中的溶解度为：难溶于冷⽔（1∶8000～10000）、可溶于热⽔

（1∶200）、热甲醇（1∶7）、冷甲醇（1∶100）、热⼄醇（1∶60）、冷⼄醇（1∶650）、可溶于吡啶及碱性溶剂，⼏乎不溶于苯、⼄醚、氯仿及⽯油醚等溶剂。由于分⼦中含有多个酚羟基，易被氧化，在空⽓中久置会使芸⾹苷颜⾊加深，尤其在碱性溶液中更易氧化。

O glu OH

O rha

芦丁

（⼆）槲⽪素（Quercetin）

⼜名栎精，槲⽪黄素。分⼦式C15H10O2，分⼦量 302.23。为黄⾊针状结晶（稀⼄醇），含2分⼦结晶⽔，在95℃～97℃成为⽆⽔物。mp.314℃（分解）。能溶于冷⼄醇（1∶290），易溶于沸⼄醇（1∶23），可溶于甲醇、丙酮、⼄酸⼄酯、冰醋酸及吡啶等溶剂，不溶于⽔、苯、⼄醚、氯仿及⽯油醚等溶剂。

芸香苷的提取、精制、水解和鉴定

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• 实验器材： • 试药：槐花米、0.4%硼砂水溶液、石灰乳、蒸馏水、浓盐酸、2%硫酸、乙醇、1%氢氧化钠溶液、 1%盐酸溶液、10%α-萘酚溶液、浓硫酸、镁粉、 1%醋酸镁甲醇溶液、正丁醇、醋酸 • 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管
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实验内容与方法：
• 一、芸香苷的提取 • 取槐花米20g（研碎），置于1000ml圆底烧瓶中，加0.4%硼砂水溶液200ml，在搅拌下加石灰乳调PH8，加热微沸30分钟，静置几分钟倾出上清液，用棉花过滤，药渣同上重复一次。合并滤液用6N盐酸调 PH2~3，放置冰箱中析晶（一夜以上），待全部结晶析出，抽滤，得粗芸香苷（滤饼用水洗3~4次），放置空气中自然干燥得粗品，称重、计算提取率。
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实验二芸香苷的提取、精制、水解和鉴定
OH
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O OH O
OH O Glc-Rha
Rutinose
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实验二芸香苷的提取、精制、水解和鉴定
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实验原理：
1.芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，在碱水中成盐增大溶解能力，用碱水为溶剂煮沸提取，提取液加酸酸化后又成为游离的芸香苷而析出。并利用芸香苷对冷水和热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。 2.黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。

槐花米中芸香苷和槲皮素的提取

槐花米是一种常见的食材，不仅味道鲜美，还具有一定的药用价值。槐花米中含有丰富的芸香苷和槲皮素，这两种化合物具有多种保健功效。

芸香苷是一种天然的植物化合物，常见于多种植物中，如槐花、白芍、黄连等。芸香苷具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生理活性。研究发现，芸香苷能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散，并对肿瘤细胞产生凋亡作用。此外，芸香苷还能够抑制炎症反应，减轻炎症症状，并具有一定的抗菌作用。芸香苷还能够增强机体免疫力，提高抵抗力，对预防和治疗感染性疾病有一定的作用。

槲皮素是一种黄酮类化合物，广泛存在于植物中，如槐花、栀子花、葡萄皮等。槲皮素具有很强的抗氧化作用，可以清除体内自由基，减少氧化应激对身体的损害。此外，槲皮素还具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生理活性。研究发现，槲皮素可以抑制炎症反应，减轻炎症症状，并具有一定的抗菌作用。槲皮素还能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散，并对肿瘤细胞产生凋亡作用。此外，槲皮素还能够降低血糖、降脂、保护心脑血管等，对预防和治疗心血管疾病有一定的作用。

槐花米中芸香苷和槲皮素的提取主要通过水提、醇提等工艺过程进行。首先，将槐花米研磨成粉末，然后采用水或醇溶液浸泡槐花米

粉末，通过搅拌、加热等操作，使芸香苷和槲皮素溶解于水或醇中。接着，对溶液进行过滤、浓缩、干燥等步骤，最终得到芸香苷和槲皮素的提取物。提取物可以作为保健品、药品等的原料，也可以应用于食品、化妆品等工业领域。

槐花米中芸香苷和槲皮素的提取具有一定的应用前景。芸香苷和槲皮素的药理活性及其在疾病治疗中的作用机制已经得到了广泛的研究。因此，进一步开展槐花米中芸香苷和槲皮素的研究，探索其在药物开发、保健品制备等方面的应用，具有重要的意义。此外，槐花米作为一种常见的食材，可作为日常饮食中的调味品，摄入适量的芸香苷和槲皮素，有助于增强机体免疫力，预防疾病的发生。

【正式版】芸香苷的提取分离和鉴定PPT

取粗制芸香苷2 g，加蒸馏水400 ml，煮沸至芸香苷全部溶解，趁热抽滤，冷却后即可析出晶体，抽滤，得芸香苷精制品，置空气中干燥后，称重。
取精制芸香苷1g，研细后置于250ml圆底烧瓶中，加入2% 硫酸100ml，加热回流30min，瓶中混浊液逐渐变为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀。放冷沉淀，抽滤，保存滤液（应为澄清无色液体），用做糖的检查，沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用蒸馏水洗至中性，抽干水分，晾干，称重。粗制槲皮素再用50%乙醇重结晶得精制的含2分子结晶水的槲皮素。
待芸全香部苷析的出提后取，－减水压提抽取滤法，用蒸馏水洗涤芸香苷结晶，抽干，得粗制芸香苷，置空气中干燥后，称重。醋糖酸的镁色纸谱片鉴反定应取两张滤纸条，分别滴两滴芸香苷、槲皮素的乙醇溶液，然后各加1％醋酸镁甲醇溶液两滴，于紫外光灯下观察荧光
展ml开，剂加：2～乙3醇m－l乙水醇（溶7解:3），或作甲为醇糖－的水供（试8液:2。）。芸5 m香l，苷振和摇槲后皮斜素置的试纸管色，谱沿管壁滴加0.
展开剂：正丁醇－醋酸－水（4:1:5）上层溶液。称点取样槐：花提米取粗的粉槲2皮0 g素（承压芸碎香）苷，的加乙沸醇水溶30液0 和ml对，照加品热的煮乙沸醇30溶m液in，。纱布趁热过滤，残渣同法再操作一次，合并两次滤液，室温放置析晶，
称取槐花米粗粉20 g（压碎），加沸水300 ml，加热煮沸30 min，纱布趁热过滤，残渣同法再操作一次，合并两次滤液，室温放置析晶，

芸香苷的提取、精制、水解和鉴定

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实验二芸香苷的提取、精制、水解和鉴定
实验原理：
1.芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，在碱水中成盐增大溶解能力，用碱水为溶剂煮沸提取，提取液加酸酸化后又成为游离的芸香苷而析出。并利用芸香苷对冷水和热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。 2.黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。
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• 四、芸香苷的检识反应 • 1．成盐反应取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰箱中冷冻一定时间后再观察）。
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实验内容与方法：
• 二、芸香苷的精制 • 取2g加蒸馏水400ml，加热煮沸溶解，趁热抽滤，滤液放置过夜，析晶，抽滤，得精制芸香甙。烘干。
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实验内容与方法：
• 三、芸香苷的水解 • 取精制芸香甙1g，置250ml圆底烧瓶中，加 2%H2SO4溶液80ml，加热回流30分钟至1小时，开始加热10分钟为澄清液，逐渐析出黄色小针状结晶，即为槲皮素。放冷抽滤得结晶，滤液保留作为糖的检查，沉淀物用蒸馏水洗至中性，抽干水份，晾干称重，得粗制槲皮素。必要时可用稀乙醇重结晶。

芸香苷的提取、精制、水解和鉴定

• 3、水解时应随时加水，避免蒸干。
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实验内容与方法：
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• 一、芸香苷的提取 • 取槐花米20g（研碎），置于1000ml圆底烧瓶中，
加0.4%硼砂水溶液200ml，在搅拌下加石灰乳调PH8，加热微沸30分钟，静置几分钟倾出上清液，用棉花过滤，药渣同上重复一次。合并滤液用6N盐酸调 PH2~3，放置冰箱中析晶（一夜以上），待全部结晶析出，抽滤，得粗芸香苷（滤饼用水洗3~4次），放置空气中自然干燥得粗品，称重、计算提取率。
2.黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。
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• 实验器材： • 试药：槐花米、0.4%硼砂水溶液、石灰乳、蒸馏
水、浓盐酸、2%硫酸、乙醇、1%氢氧化钠溶液、 1%盐酸溶液、10%α-萘酚溶液、浓硫酸、镁粉、 1%醋酸镁甲醇溶液、正丁醇、醋酸 • 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管
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• 2．呈色反应 • 取芸香苷和槲皮素约10mg，各用5ml乙醇溶解，制成样品
溶液，按下列方法进行试验，比较苷元和苷的反应情况。 • （1）Molish反应取样品溶液1ml，加10%α-萘酚溶液
1ml，振摇后斜置试管，沿管壁滴加0.5ml浓硫酸，静置，观察并记录液面交界处颜色变化。 • （2）盐酸镁粉反应芸香甙与槲皮素溶液分别置于试管中，加入金属镁粉少许，浓盐酸2~3滴，观察并记录颜色变化。 • （3）醋酸镁纸片反应取两张滤纸条，分别滴两滴芸香苷、槲皮素的乙醇溶液，然后各加1%醋酸镁甲醇溶液两滴，于紫外灯下观察荧光变化，记录现象。

芸香苷的提取、分离和鉴定

五、思考题 1．黄酮类化合物还有哪些提取方法?芸香苷的提取还可用什么方法? 2．酸水解常用什么酸?为什么用硫酸比用盐酸水解后处理更方便? 3．本实验中各种色谱的原理是什么?解释化合物结构与Rf值的关系。
芸香苷的提取、芸香苷的提取、分离和鉴定
一、实验目的 1.熟悉利用化合物的物理、化学性质对其进行分析和鉴定的方法。 2.掌握紫外光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的方法和应用。
二、实验原理主要是利用芸香苷的物理化学性质对其进行提取分离。三、操作要点 1.芸香苷的提取－水提取法芸香苷的提取－芸香苷的提取称取槐花米粗粉20 g（压碎），加沸水300 ml，加热煮沸 30 min，纱布趁热过滤，残渣同法再操作一次，合并两次滤液，室温放置析晶，待全部析出后，减压抽滤，用蒸馏水洗涤芸香苷结晶，抽干，得粗制芸香苷，置空气中பைடு நூலகம்燥后，称重。 2.芸香苷的精制芸香苷的精制取粗制芸香苷2 g，加蒸馏水400 ml，煮沸至芸香苷全部溶解，趁热抽滤，冷却后即可析出晶体，抽滤，得芸香苷精制品，置空气中干燥后，称重。
点样：提取的芸香苷与槲皮素的乙醇溶液和对照品的乙醇溶液。展开剂：乙醇－水（7:3）或甲醇－水（8:2）。展开方式：上行展开。显色：喷洒三氯化铝试剂前后，置日光及紫外灯光（365nm）下检视色斑的变化。观察记录：记录图谱及斑色颜色。 c. 糖的色谱鉴定层析材料：定性滤纸。点样：糖的供试液及葡萄糖、鼠李糖对照品溶液。展开剂：正丁醇－醋酸－水（4:1:5）上层溶液。展开方式：上行展开。显色：苯胺－邻苯二甲酸试液，喷洒后先用电吹风冷吹至于，再吹热风至出现斑点为止。观察记录：记录图谱及斑点颜色。

芸香苷和槲皮素

槐花米中芸香苷提取及槲皮素的分离与检识

[适用对象]药学专业

[实验学时]18学时

一、实验目的

自学黄酮类化合物的抽取、拆分和检识，通过实验建议：

（1）通过芸香苷提取与精制，掌握沸水提取黄酮类化合物的原理和操作。

（2）掌控由芸香苷水解制备槲皮素的方法。

（3）掌握黄酮苷和黄酮苷元的分离。

（4）掌控黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的检识方法。

二、实验原理

由槐花中抽取芸香苷的方法很多，本实验就是根据芸香苷在冷水和热水中的溶解度差

异的特性展开抽取和精制，或根据芸香苷分子中具备酚羟基，显出弱酸性，能够与碱成盐

而减小溶解度，以碱水为溶剂煮熟抽取，其提取液加酸酸化后则芸香苷游离划出。

三、仪器设备

单口园底烧瓶，冷凝管，铁架台，烧杯，电炉，烘箱、水浴锅、三角烧瓶，微量扣滤器，布氏漏斗，滤纸，试管，层析槽，石棉网，毛细管等。

四、相关知识点

槐花为豆科植物槐sophorajaponical.的干燥花及花蕾，主要不含

芸香苷（芦丁），含量高达12~20%，水解生成槲皮素、葡萄糖及鼠李糖。

芸香苷（rutoside），分子式c27h30o16，分子量610.51，淡黄色针状结晶，

mp.177~178℃。容易溶冷水（1s8000），略溶热水（1s200），溶热甲醇（1s7），热甲醇（1s100），热乙醇（1s30），热乙醇（1s650），容易溶乙酸乙酯、丙酮，不溶苯、乙醚、乙醚、石油醚等，易溶于吡啶及叶唇柱碱液中。

槲皮素（quercetin），分子式c15h10o7，分子量302.23，黄色针状结晶，mp.314℃（分解）。溶于热乙醇（1s23），冷乙醇（1s300），可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、冰

实验一槐花米中芸香甙的提取

实验一槐花米中芸香甙的提取、精制和检识

芸香甙亦称芦丁（Rutin），普遍存在于植物界，已发现的芦丁植物至少在70种以上，以槐米、荞麦叶、蒲公英和烟叶中含量较多，本实验以槐花米作为提取芦丁的原料。槐花米系豆科植物Sophora joponia L的未开放花蕾，其中芦丁含量高达23.5%，槐花开放后降至13.0%。

芦丁除用作医治毛细管脆弱引发的出血症和高血病的辅助医治剂外，还可作为制药原料，用于制造槲皮素（Ruercetin）、羧乙基槲皮素、羧乙基芦丁、二羧丙基芦丁、-乙基吗啉芦丁、6-二乙胺基芦丁等。

槐花米中除含有芦丁外，还含有白桦脂醇（Betulin）、槐二醇（Sophoradiol）、皂甙和槐花米甲、乙、丙素（Sophorin A、B、C）和多糖粘液质等。

芸香甙的结构

一、槐花米主要成份的理化性质

1. 芦丁：是槲皮素3位羧基与芸香糖（Rutinose）脱水缩合成的甙。浅黄色粉末或极细的针状结晶，含3分子结晶水（C27H36O16·3H2O），mp ll7~178℃。在110℃ 10mmHg下真空干燥12小时变成无水物，无水物易吸湿，可从大气中吸收约

2.5分子水分。无水芦丁在125℃变褐，在190~192℃变成胶状，当温度升至214~215℃发泡分解。

芦丁溶解度在冷水中1∶10000，热水中1∶200，冷乙醇中1∶300，热乙醇中1∶30，沸甲醇中1∶7，冷吡啶中1∶12，微溶于丙酮、乙醇乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚。UV λmax nm：259，266（sh），299（sh）。

芸香苷的提取精制水解和鉴定PPT课件

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• 2．呈色反应 • 取芸香苷和槲皮素约10mg，各用5ml乙醇溶解，制成
样品溶液，按下列方法进行试验，比较苷元和苷的反应情况。 • （1）Molish反应取样品溶液1ml，加10%α-萘酚溶液1ml，振摇后斜置试管，沿管壁滴加0.5ml浓硫酸，静置，观察并记录液面交界处颜色变化。 • （2）盐酸镁粉反应芸香甙与槲皮素溶液分别置于试管中，加入金属镁粉少许，浓盐酸2~3滴，观察并记录颜色变化。 • （3）醋酸镁纸片反应取两张滤纸条，分别滴两滴芸香苷、槲皮素的乙醇溶液，然后各加1%醋酸镁甲醇溶液两滴，于紫外灯下观察荧光变化，记录现象。
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实验二芸香苷的提取、精制、水解和鉴定
实验wenku.baidu.com理：
1.芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，在碱水中成盐增大溶解能力，用碱水为溶剂煮沸提取，提取液加酸酸化后又成为游离的芸香苷而析出。并利用芸香苷对冷水和热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。
2.黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。
• 3、水解时应随时加水，避免蒸干。
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• 四、芸香苷的检识反应 • 1．成盐反应取芸香甙10mg左右，置试管中
加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加 1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰箱中冷冻一定时间后再观察）。

槐花米中芦丁

天然药物化学实验

槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定

芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophora japonica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。

槐花米为豆科植物槐花的未开放花蕾。味苦性凉，具清热、凉血、止血之功。槐花的主要化学成分为芦丁，又名芸香甙，含量可达12-16%。

芦丁又名芸香苷，是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。

芦丁具有维生素P样作用。可降低毛细管前壁的脆性和调节渗透性，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，临床上用作毛细管脆性引起的出血症，并常用作防治高血压病的辅助治疗剂。现在国处也常用芦丁作食品及饮料的染色剂。

一、实验目的

1．学习黄酮化合物的提取分离方法。

2．学习芦丁的一种提取、精制方法

3. 学习黄酮甙水解生成甙元的方法及二者之间的分离。

4．熟悉芦丁、槲皮素的结构性质、检识方法和层析鉴定方法。

二、实验原理

本实验主要是利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行提取分离精制。芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。芦丁及槲皮素还可通过化学反应及紫外光谱鉴定。

芸香苷和槲皮素

槐花米中芸香苷提取及槲皮素的分离与检识
[适用对象]药学专业
[实验学时] 18学时
、实验目的
学习黄酮类化合物的提取、分离和检识，通过实验要求：
1）通过芸香苷提取与精制，掌握沸水提取黄酮类化合物的原理
和操作。
2）掌握由芸香苷水解制取槲皮素的方法。
3）掌握黄酮苷和黄酮苷元的分离。
4）掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的检
可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶等，不溶于石油醚、苯、
氯仿、乙醚中，几不溶于水。
OH O
芸香苷R=-葡萄糖-鼠李糖
槲皮素R= H
五、实验步骤
（一）芸香苷的提取（水提取法）
称取槐花米50克，置1000ml烧杯中，加沸水800ml,加热保
持微沸1小时，趁热用棉花过滤，滤渣再加600ml水煮沸1小时,
端约2cm处用铅笔画一直线，间隔2cm分别点上下列样品或标准溶液：
标准葡萄糖溶液
槲皮素标准品溶液
:200），溶于热甲醇（1:7）,冷甲醇（1:100）,热乙醇（1:30）,
冷乙醇（1:650）,难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、
石油醚等，易溶于吡啶及稀碱液中。
槲皮素（quercetin）,分子式务已。O7,分子量302.23,黄色针状结晶，mp.314C（分解）。溶于热乙醇（1:23）,冷乙醇（1:300）,

芸香苷的提取

芸香苷的提取、芸香苷的提取、分离和鉴定
一、实验目的 1.熟悉利用化合物的物理、化学性质对其进行分析和鉴定的方法。 2.掌握紫外光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的方法和应用。
二、实验原理主要是利用芸香苷的物理化学性质对其进行提取分离。三、操作要点 1.芸香苷的提取－水提取法芸香苷的提取－芸香苷的提取称取槐花米粗粉20 g（压碎），加沸水300 ml，加热煮沸 30 min，纱布趁热过滤，残渣同法再操作一次，合并两次滤液，室温放置析晶，待全部析出后，减压抽滤，用蒸馏水洗涤芸香苷结晶，抽干，得粗制芸香苷，置空气中干燥后，称重。 2.芸香苷的精制芸香苷的精制取粗制芸香苷2 g，加蒸馏水400 ml，煮沸至芸香苷全部溶解，趁热抽滤，冷却后即可析出晶体，抽滤，得芸香苷精制品，置空气中干燥后，称重。
五、思考题 1．黄酮类化合物还有哪些提取方法?芸香苷的提取还可用什么方法? 2．酸水解常用什么酸?为什么用硫酸比用盐酸水解后处理更方便? 3．本实验中各种色谱的原理是什么?解释化合物结构与Rf值的关系。
2.色谱鉴定 a. 芸香苷和槲皮素的纸色谱层析材料：定性滤纸。点液。展开剂：正丁醇－醋酸－水（4:1:5）上层溶液。展开方式：预饱和后，上行展开。显色：喷洒三氯化铝试剂前后，置日光及紫外光灯、（365nm）下检视色斑的变化。观察记录：记录图谱及斑点颜色。 b. 芸香苷与槲皮素的聚酰胺色谱层析材料：聚酰胺薄膜。样：提取的槲皮素承芸香苷的乙醇溶液和对照品的乙醇溶

实验四槐米中芸香苷的提取分离与鉴定

芦丁（Rutin）亦称芸香甙（Rutisude）,广泛存在于植物界中。现已发现含芦丁的植物约有70余种，如烟叶、槐花米、养麦叶、蒲公英中均含有大量的芦丁。尤以槐花米和养麦叶中含量最高，可作为提取芦丁的原料，使用最多的是槐花米。

槐花米为豆科植物槐（Sophora japonica L）的花蕾，所含主要成分为芦丁，含量可达12%~ 16%，其次含有槲皮素、三萜皂甙、槐花米甲素、乙素、丙素等。芦丁具有维生素P样作用，可降低毛细血管前壁的脆性和调节渗透性。临床上用于毛细血管脆性引起的出血症，并常作高血压症的辅助治疗药。

槐花米中主要化学成分的结构及性质：

1. 芦丁（Rutin）

淡黄色细小针状结晶，C ~178C （含三分子结晶），188C （无水物）。

溶解度：

水：1:100（冷），1:200（热）

甲醇：1:100（冷），1:9（热）

乙醇：1:650（冷），1:60（热）

吡啶：1:（冷），易溶（热）

不溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，易溶于碱液中呈黄色，酸化后复析出。可溶于浓硫酸、浓盐酸，加水稀释复析出。

2. 槲皮素（Quercetin）

即芸香甙甙元，为黄色结晶，mp.313C ~314C （含2分子结晶水），316C （无水物）。溶解度：

乙醇：1:290（无水乙醇），1:23（热）

可溶于甲醇、乙酸乙酯、丙酮、吡啶、冰醋酸。不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚等。

3. 皂甙

粗品为白色粉末，mp.210C ~220C （分解）。易溶于水、吡啶，能溶于200咅的甲醇中。酸水解后得白桦脂醇、槐二醇二种皂甙元及葡萄糖，葡萄糖醛酸及葡萄糖

槐花米中芸香苷的提取实验方案

以槐花米为原料提取芸香苷，有多种提取工艺，如水提法、碱提酸沉法、醇提法、超声与微波交替提取法。考虑到实验器材和成本。碱提酸沉法是较为理想方法。它有操作简单，经济、安全、技术成熟的特点。但提取率没有超声与微波交替提取法高，其产率受诸多因素的影响( 药材的粉碎度、水溶液的pH、水溶液的用量、提取次数、提取时间、酸沉pH 值、结晶时间)。我们小组通过查找文献，对影响芸香苷提取收得率的诸因素进行了优选。即: 药材为细粉、提取3 次、提取水溶液的pH9、酸沉pH 值4、结晶时间12 小时、提取时间30 分钟、水溶液的用量1: 30 倍。

1.称取槐花米5g与250ml圆底烧瓶，加0. 4%的硼砂水溶液150ml，

加入饱和石灰水调剂PH为9，微沸30min，趁热抽滤，残渣同时在加150ml水煮沸，趁热抽滤，重复三次，合并三次提取液，水浴至90℃，加15％盐酸调PH为4，搅匀，放置12小时，沉淀完全。抽滤，用10ml水洗涤2~3次，得到粗产品，干燥称重。

2.粗产品放置400ml烧杯中加200 倍量蒸馏水加热煮沸溶解，趁热

抽滤，滤液放置12小时结晶，析出淡黄色沉淀，减压抽滤。将晶体干燥，称重，计算收率。收率大概11％

文献来源：正交试验法优选槐花米中芸香苷水提取工艺（楚雄医药高等专科学校药学系）

槲皮素的制备

取1g精制芦丁，在250ml圆底烧杯中加入80mL 0.5%稀硫酸（大于

该浓度会造成较多酸液浪费），加热回流水解1h，冷却，过滤，沉淀用蒸馏水冲洗至中性。把沉淀加入到95%乙醇中，加热使完全溶解，趁热抽滤。滤液加入等量蒸馏水重结晶，抽滤，干燥，得槲皮素精品。（收率为79.4%）