槐花米中芸香苷的提取及
槐花米中芸香苷和槲皮素的提取全解
有机综合实验综述编号有机综合实验综述题目：槐花米中芸香苷及槲皮素的提取食品学院食品科学与工程专业学号**********学生姓名赵维阳指导教师毛明富二〇一六年六月目录目录摘要 (1)第1章槐花米 (1)1.1 简介及来源 (1)第2章芸香苷 (1)2.1 简介及来源 (1)2.2 功能 (2)2.3 提取方法 (3)2.3.1 碱提取法 (3)2.3.2 醇提取法 (3)2.3.3 回流提取 (3)2.3.4微波与超声交替提取法 (4)2.3.5超临界CO2萃取法..................................................................................... 错误!未定义书签。
第3章槲皮素 . (4)3.1 简介及来源 (4)3.2 功效 (5)3.3 芸香苷水解制槲皮素 (5)3.3.1 中药动态提取法 (5)3.3.2酸水解法 (5)3.3.3 星点设计效应面法 (5)参考文献 (9)芸香苷槐花米中芸香苷及槲皮素的提取摘要本文就槐花米中芸香苷和槲皮素的提取展开讨论，介绍了槐花米、芸香苷以及槲皮素的来源和性能。
通过查找资料，深入了解了芸香苷及槲皮素的提取方法：芸香苷的提取方法主要有水提取法、碱提取法、微波法、超声波法、超临界二氧化碳提取法等。
分析比较各个方法的优缺点，选取收益较高的提取方法。
槲皮素是芸香苷的水解产物，也属于黄酮类化合物。
第一章槐花米1.1 简介及来源槐米广义是为豆科植物槐（Sophora japonica L.）的干燥花蕾及花。
中国各地区产，以黄土高原和华北平原为多。
夏季花未开放时采收其花蕾，称为“槐米”；花开放时采收，称为“槐花”。
采收后除去花序的枝、梗及杂质，及时干燥，生用、炒用或炒炭用。
花蕾卵形或椭圆形，长2—6mm，直径约2mm。
花萼黄绿色，下部有数条纵纹。
萼的上方为黄白色未开放的花瓣。
花梗细小。
槐米中芦丁(芸香苷)的提取分离及检识
结晶
静置液减压抽滤在 60-70温度下烘干 得粗品芸香苷 置于300ml蒸馏水 煮沸至芸香苷全部溶解 趁热抽滤 滤液放冷析晶
天然产物化学
水解 取精制芸香苷1g 置250ml圆底烧瓶中 加2%H2SO4溶液80ml 加热回流30分钟至1小时， 开始加热10分钟为澄清液，逐渐析出黄色小针状结晶， 即为槲皮素。放冷抽滤 沉淀物用蒸馏水洗至中性， 抽干水份，晾干称重，得粗制槲皮素
天然产物化学
提取
碱溶酸沉法
芸香苷分子中含有酚羟基，显弱酸性，能与 碱成盐而溶于碱液中加酸酸化后又可以沉淀 析出，因此可用碱溶酸沉法提取芸香苷。
天然产物化学
实验步骤
重复以上操作， 硼砂水150ml,时 间20min
加0.4%硼砂水200ml 加热微沸30min,用石 灰乳保持pH8-9
结晶
天然产物化学
天然产物化学
聚酰胺薄层色谱检识
点 样：（1）自制1%芸香苷乙醇溶液 （2）自制1%槲皮素乙醇溶液 对照品：1%芸香苷对照品乙醇溶液乙酯（3∶1∶0.5）
显色：（1）先在可见光下观察斑点颜色，然后在紫 外灯下观察斑点颜色 （2）用氨水熏，记录斑点颜色和位置 结果：记录图谱，斑点颜色，计算芸香苷和槲皮素 Rf
天然产物化学
槐米中芦丁（芸香苷）的提取、分离和检识
天然产物化学
芦 丁
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含 有三分子的结晶水，熔点为174~178℃， 无水物188~190℃。 溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200； 冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。 微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、 氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
天然产物化学
化学检识
• 取芸香苷和槲皮素约10mg，各用5ml乙醇溶解，制成样 品溶液，按下列方法进行试验，比较苷元和苷的反应情况。 • （1）Molish反应 取样品溶液1ml，加10%α-萘酚溶液 1ml，振摇后斜置试管，沿管壁滴加0.5ml浓硫酸，静置， 观察并记录液面交界处颜色变化。 • （2）盐酸镁粉反应 芸香甙与槲皮素溶液分别置于试管 中，加入金属镁粉少许，浓盐酸2~3滴，观察并记录颜色 变化。
槐花米中芸香苷和槲皮素的提取
槐花米中芸香苷和槲皮素的提取槐花米是一种常见的食材，不仅味道鲜美，还具有一定的药用价值。
槐花米中含有丰富的芸香苷和槲皮素，这两种化合物具有多种保健功效。
芸香苷是一种天然的植物化合物，常见于多种植物中，如槐花、白芍、黄连等。
芸香苷具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生理活性。
研究发现，芸香苷能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散，并对肿瘤细胞产生凋亡作用。
此外，芸香苷还能够抑制炎症反应，减轻炎症症状，并具有一定的抗菌作用。
芸香苷还能够增强机体免疫力，提高抵抗力，对预防和治疗感染性疾病有一定的作用。
槲皮素是一种黄酮类化合物，广泛存在于植物中，如槐花、栀子花、葡萄皮等。
槲皮素具有很强的抗氧化作用，可以清除体内自由基，减少氧化应激对身体的损害。
此外，槲皮素还具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生理活性。
研究发现，槲皮素可以抑制炎症反应，减轻炎症症状，并具有一定的抗菌作用。
槲皮素还能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散，并对肿瘤细胞产生凋亡作用。
此外，槲皮素还能够降低血糖、降脂、保护心脑血管等，对预防和治疗心血管疾病有一定的作用。
槐花米中芸香苷和槲皮素的提取主要通过水提、醇提等工艺过程进行。
首先，将槐花米研磨成粉末，然后采用水或醇溶液浸泡槐花米粉末，通过搅拌、加热等操作，使芸香苷和槲皮素溶解于水或醇中。
接着，对溶液进行过滤、浓缩、干燥等步骤，最终得到芸香苷和槲皮素的提取物。
提取物可以作为保健品、药品等的原料，也可以应用于食品、化妆品等工业领域。
槐花米中芸香苷和槲皮素的提取具有一定的应用前景。
芸香苷和槲皮素的药理活性及其在疾病治疗中的作用机制已经得到了广泛的研究。
因此，进一步开展槐花米中芸香苷和槲皮素的研究，探索其在药物开发、保健品制备等方面的应用，具有重要的意义。
此外，槐花米作为一种常见的食材，可作为日常饮食中的调味品，摄入适量的芸香苷和槲皮素，有助于增强机体免疫力，预防疾病的发生。
槐花米中芸香苷和槲皮素的提取具有多种保健功效。
芸香苷和槲皮素的药理活性已经得到了广泛的研究，具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生理活性。
实验三中药化学成分提取槐米
实验三槐米中芸香苷的提取、精制和检识
一、目的要求
掌握芸香苷的主要性质及提取、分离精制和检识方法。
二、实验原理
根据芸香苷可溶于碱水，在酸性条件下又可沉淀析出，采用碱溶酸沉法提取。
根据芸香苷在冷水和热水中溶解度相差较大，以水为溶剂,采用结晶法进行精制。
三、实验方法
（一）芸香苷的提取
1.不锈钢锅中加500毫升水，加热至沸后加入槐米50克，
用石灰乳调pH值8-9，继续加热20分钟，随时补充损失的水分，趁热用纱布过滤，药渣再提取一次，两次滤液合并。
2.用浓盐酸调提取液使pH值2-3，放置过夜。
3.抽滤，将沉淀抽干，置于室温中自然干燥，得芸香苷粗品。
（二）芸香苷的精制
1.取芸香苷粗品2克置800毫升的烧杯中，加水约400毫升，
加热至沸，使芸香苷完全溶解，趁热抽滤，滤液放置过夜，析晶。
2.抽滤，自然干燥，得芸香苷精制品。
（三）芸香苷的检识(要求写出反应现象)
1.氢氧化钠实验
取芸香苷少许置于试管中，加入2ml蒸馏水，振摇。
滴加2-3滴氢氧化钠溶液，芸香苷溶解，呈黄色澄明溶液。
再滴加盐酸溶液2-3滴，观察是否有沉淀生成。
2.α-萘酚—浓硫酸实验（Molish反应）
取芸香苷少许置干燥试管中，加2ml无水乙醇，振摇。
再滴加2-3滴α-萘酚溶液，振摇。
将试管倾斜，沿管壁滴加1ml 浓硫酸，观察两液面交界处颜色变化。
3.盐酸-镁粉实验
取芸香苷少许置于试管中，加入2ml 50%的乙醇，水浴加热溶解。
加入少许镁粉，再加入盐酸数滴，观察颜色变化。
槐米中芸香苷
槐米中芸香苷（芦丁）的提取与鉴定【实验目的】1、学会运用碱溶酸沉法，从槐米中提取、精制芦丁，并进行水解。
2、学会用显色反应及纸色谱法检识黄酮类化合物。
【实验原理】采用碱溶酸沉法提取，其原理是芸香苷结构中含有酚羟基，具酸性，能溶于碱水，当加入酸溶液后，则芸香苷沉淀析出。
芸香苷的精制是利用其可溶于热水，难溶于冷水的性质与杂质分离。
【实验材料】设备：电炉、托盘天平、500 ml烧杯、量筒、玻璃棒、移液管、纱布、温度计、滴管、抽滤装置、研钵、250 ml圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、pH 试纸、新华色谱滤纸、紫外灯、展开筒、试管、试管架。
药品：槐米粗粉、浓盐酸、蒸馏水、0.4%硼砂、石灰乳、2%硫酸、95%乙醇、氢氧化钡、葡萄糖标准品水溶液、鼠李糖标准品水溶液、正丁醇、醋酸、芦丁标准品、槲皮素标准品、氨水、三氯化铝、浓硫酸、α–萘酚、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、镁粉、苯胺-邻苯二甲酸、醋酸镁【实验步骤】实验1、芸香苷的提取：称取槐米粗粉20g，置500 ml烧杯中，加入0.4%硼砂沸水溶液200 ml，在搅拌下加石灰乳，调至pH8～9，加热微沸20分钟（注意保持pH8～9），并随时补充蒸发掉的水分，趁热用四层纱布滤过。
滤渣同样操作再提取一次，合并两次滤液。
滤液在60℃～70℃用浓盐酸调至pH5左右，静置过夜使沉淀完全，抽滤，沉淀用蒸馏水洗2～3次至中性，抽干，置空气中晾干，得芸香苷粗品。
实验2、芸香苷的精制：称一定重量的粗品，按约1∶200的比例悬浮于蒸馏水中，煮沸10分钟使其全部溶解，趁热抽滤，冷却滤液，静置析晶。
抽滤，置空气中晾干或60℃～70℃干燥，得精制芸香苷，称重，计算得率。
实验3、芸香苷的水解和鉴定：取芸香苷1g，研细后置于250 ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸溶液100 ml，直火微沸回流约40分钟，至析出鲜黄色沉淀不再增加为止，放冷抽滤，滤液保留作糖检查，沉淀用少量水洗去酸，抽干水分，晾干称重，得粗制槲皮素，然后用乙醇（95%乙醇约15 ml）重结晶即得精制槲皮素。
槐米中芸香苷提取分离及检识
色谱方法：聚酰胺色谱
展开剂：乙醇 : 水 : 乙酸乙酯（3:1:0.5）约4ml，上行展开。 展距：6cm。
显色剂：①在可见光下观察斑点颜色，再在紫外灯下观察斑点颜色。 ②用氨水熏，记录斑点颜色和位置。 结果：记录图谱，斑点颜色，并计算芸香苷和槲皮素的Rf值。
聚酰胺色谱法是利用作为固定相的聚酰胺 分子内存在的许多酰胺基，能与酚类的羟
葡萄糖和鼠李糖
OH OH
H+
HO
O OH OH O
芸香苷
CH2OH O OH OH OH OH OH OH OH O CH3
槲皮素
+
OH
葡萄糖
鼠李糖
芸香苷和槲皮素的检识
OH HO O OH H2C OH O O O OH OH OH 槲皮素 葡萄糖 芸香糖 芸香苷 鼠李糖 O OH O
OH CH3
芸香苷的精制
将上次实验静置液减压抽滤，在60～70℃烘干，
得粗品芸香苷，称重，计算得率。将粗制芸香苷 悬浮于300ml蒸馏水中，煮沸至芸香苷全部溶解， 趁热抽滤，滤液放冷析晶。
芸香苷冷热溶解度差别大
芸香苷的水解
将上次实验所得溶液抽滤，在60～70℃烘干，得精制芸香 苷。 取精制芸香苷1g，置250ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸80ml，
薄层色谱
play
基、酸类的羧基及醌类的醌基形成氢键而
产生吸附，是混合物中各成分得到相互分
离的方法。
CH2
O C NH
n
聚酰胺与各种化合物形成氢键的能力不同，决定 了聚酰胺对其吸附力的强弱。形成氢键的能力首 先与溶剂的种类有关，在水中最强，在有机溶剂 中较弱，在碱性溶剂中最弱。
在聚酰胺色谱中常用作洗脱剂的各种洗脱能力顺
芸香苷的提取、分离和鉴定优秀文档
层析材料：定c性.滤醋纸。酸镁纸片反应 取两张滤纸条，分别滴两滴芸香苷、槲皮素的乙醇 点展开样方溶：式糖：液的上供，行试展液然开及。后葡萄各糖、加鼠1李％糖对醋照品酸溶镁液。甲醇溶液两滴，于紫外光灯下观察荧光变化，记 录现象。 层析材料：定性滤纸。
芸香苷的提取、分离和鉴定
观粗察制记 槲录皮：素记再d录用. 图5三0谱%乙及氯醇斑化重色结颜铝晶色得。纸精片制的反含2应分子结在晶水两的槲张皮滤素。纸条上分别滴加芸香苷、槲皮素醇溶液 层展析开材 剂后料：：乙，定醇各性－滤水加纸（。71:3%）或三甲氯醇－化水（铝8:乙2）。醇溶液两滴，观察颜色变化，记录现象。
粗制槲皮素再用50%乙醇重结晶得精制的含2分子结晶水的槲皮素。
展开浴剂：6乙0醇℃－水浓（7:3缩）或至甲醇2－～水（38:2）m。l，加2～3 ml乙醇溶解，作为糖的供试液。
四、鉴定
取芸香苷及槲皮素精品约10 mg，各用5 ml乙醇溶解，制成样品溶液， 展开方按式：下上列行展方开。法进行试验，比较苷元和苷的反应情况。
点 样：提取的芸香苷与槲皮素的乙醇溶液和对照品的乙醇溶液。 展开剂：乙醇－水（7:3）或甲醇－水（8:2）。 展开方式：上行展开。 显 色：喷洒三氯化铝试剂前后，置日光及紫外灯光（365nm）下检视色斑 的变化。 观察记录：记录图谱及斑色颜色。 c. 糖的色谱鉴定 层析材料：定性滤纸。 点 样：糖的供试液及葡萄糖、鼠李糖对照品溶液。 展开剂：正丁醇－醋酸－水（4:1:5）上层溶液。 展开方式：上行展开。 显 色：苯胺－邻苯二甲酸试液，喷洒后先用电吹风冷吹至于，再吹热风 至出现斑点为止。 观察记录：记录图谱及斑点颜色。
液（应为澄清无色液体），用做糖的检查，沉淀物为芸香苷
取粗制芸香苷2 g，加蒸馏水400 ml，煮沸至芸香苷全部溶解，趁热抽滤，冷却后即可析出晶体，抽滤，得芸香苷精制品，置空气中干
实验四--槐米中芸香苷的提取分离与鉴定
实验四槐米中芸香苷的提取分离与鉴定芦丁(Rutin)亦称芸香甙(Rutisude)，广泛存在于植物界中。
现已发现含芦丁的植物约有70余种，如烟叶、槐花米、荞麦叶、蒲公英中均含有大量的芦丁。
尤以槐花米和荞麦叶中含量最高，可作为提取芦丁的原料，使用最多的是槐花米。
槐花米为豆科植物槐(Sophora japonica L。
)的花蕾，所含主要成分为芦丁，含量可达12%~16%，其次含有槲皮素、三萜皂甙、槐花米甲素、乙素、丙素等。
芦丁具有维生素P样作用，可降低毛细血管前壁的脆性和调节渗透性。
临床上用于毛细血管脆性引起的出血症，并常作高血压症的辅助治疗药。
槐花米中主要化学成分的结构及性质：1.芦丁(Rutin)淡黄色细小针状结晶，mp.174℃~178℃(含三分子结晶)，188℃(无水物)。
溶解度：水：1:100(冷)，1:200(热)甲醇：1:100(冷)，1:9(热)乙醇：1:650(冷)，1:60(热)吡啶：1:11.7(冷)，易溶(热)不溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，易溶于碱液中呈黄色，酸化后复析出。
可溶于浓硫酸、浓盐酸，加水稀释复析出。
2. 槲皮素(Quercetin)即芸香甙甙元，为黄色结晶，mp.313℃~314℃(含2分子结晶水)，316℃(无水物)。
溶解度：乙醇：1:290(无水乙醇)，1:23(热)可溶于甲醇、乙酸乙酯、丙酮、吡啶、冰醋酸。
不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚等。
3. 皂甙粗品为白色粉末，mp.210℃~220℃(分解)。
易溶于水、吡啶，能溶于200倍的甲醇中。
酸水解后得白桦脂醇、槐二醇二种皂甙元及葡萄糖，葡萄糖醛酸及葡萄糖醛酸内酯。
(1) 白桦脂醇(Betulin)无色针晶，mp.251℃~252℃。
能溶于醋酸、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯、乙醚等溶剂，难溶于石油醚及水。
(2) 槐二醇(Sophoradiol)无色针晶，mp.219℃~220℃或224℃。
能溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇中，难溶于水。
实验一槐花米中芸香甙的提取
实验一槐花米中芸香甙的提取、精制和检识芸香甙亦称芦丁（Rutin），普遍存在于植物界，已发现的芦丁植物至少在70种以上，以槐米、荞麦叶、蒲公英和烟叶中含量较多，本实验以槐花米作为提取芦丁的原料。
槐花米系豆科植物Sophora joponia L的未开放花蕾，其中芦丁含量高达23.5%，槐花开放后降至13.0%。
芦丁除用作医治毛细管脆弱引发的出血症和高血病的辅助医治剂外，还可作为制药原料，用于制造槲皮素（Ruercetin）、羧乙基槲皮素、羧乙基芦丁、二羧丙基芦丁、-乙基吗啉芦丁、6-二乙胺基芦丁等。
槐花米中除含有芦丁外，还含有白桦脂醇（Betulin）、槐二醇（Sophoradiol）、皂甙和槐花米甲、乙、丙素（Sophorin A、B、C）和多糖粘液质等。
芸香甙的结构一、槐花米主要成份的理化性质1. 芦丁：是槲皮素3位羧基与芸香糖（Rutinose）脱水缩合成的甙。
浅黄色粉末或极细的针状结晶，含3分子结晶水（C27H36O16·3H2O），mp ll7~178℃。
在110℃ 10mmHg下真空干燥12小时变成无水物，无水物易吸湿，可从大气中吸收约2.5分子水分。
无水芦丁在125℃变褐，在190~192℃变成胶状，当温度升至214~215℃发泡分解。
芦丁溶解度在冷水中1∶10000，热水中1∶200，冷乙醇中1∶300，热乙醇中1∶30，沸甲醇中1∶7，冷吡啶中1∶12，微溶于丙酮、乙醇乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚。
UV λmax nm：259，266（sh），299（sh）。
芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液中，酸化后又析出，因此可以用碱溶液沉的方式提取芦丁。
芦丁分子因含有邻二酚羟基，性质不太稳定，暴露空气中，在光的作用下，能缓缓分解，变成暗褐色，在碱性条件下更易被氧化分解，硼酸盐能与邻二酚羟基结合，达到保护的目的，故在碱性条件溶液中加热提取芦丁时，往往在加入少量硼砂，就是保护芦丁减少氧化分解。
实验一槐米中芸香苷粗品的提取
实验一槐米中芸香苷粗品的提取
【实验目的】
1、学会运用碱溶酸沉法,从槐米中提取芸香苷
【实验原理】
采用碱溶酸沉法提取,其原理是芸香苷结构中含有酚羟基,具酸性,能溶于碱水,当加入酸溶液后,则芸香苷沉淀析出
【实验材料】
设备:电炉、托盘天平、500 ml烧杯、量筒、玻璃棒、纱布、温度计、滴管、抽滤装置、研钵、pH试纸、新华色谱滤纸
药品:槐米粗粉、浓盐酸、蒸馏水、0.4%硼砂、石灰乳
【实验步骤】
1、芸香苷的提取:
称取槐米粗粉20g,置500 ml烧杯中,加入0.4 %硼砂沸水溶液200 ml,在搅拌下加石灰乳,调至pH 8～9,加热微沸20分钟 (注意保持pH 8～9),并随时补充蒸发掉的水分,趁热用两层纱布滤过.滤渣同样操作再提取一次,合并两次滤液.滤液在60～
70 ℃用浓盐酸调至pH 5左右,静置过夜使沉淀完全,抽滤,沉淀用蒸馏水洗2～3次至中性,抽干,置空气中晾干,得芸香苷粗品。
【实验注意】
1、硼砂的作用，芸香苷分子中因含有邻二酚羟基，性质不太稳定，暴露在空气中能缓缓氧化变为暗褐色，在碱性条件下更容易被氧化分解。
硼酸盐能与邻二酚羟基结合，达到保护的目的。
但其价格较高，工业上用较大量的石灰加少量硼砂，同样达到提高质量要求。
2、加入石灰乳，使pH 8～9，既可以达到碱溶解芸香苷的目的，又可以除去槐米中含有的大量多糖黏液质。
但pH不能过高，碱处理时间尽短，以减少酚类氧化分解。
3、用浓盐酸调pH 4～5, pH过低会使芸香苷降低得率。
4、提取时也可以不加碱,直接用沸水提取,得率也比较高。
【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。
槐香米中芸香苷和槲皮素的提取
槐花米中芸香苷和槲皮素的提取The Extracting of Rutin and Quercetin inSophora japonica姓名：实验小组成员：班级：学号：1指导老师：实验室编号：实验时间：2015. 6.23-2015.6.26槐花米中芸香苷和槲皮素的提取（江南大学食品学院，江苏，无锡214000）摘要：芸香苷槲皮素是一种具有生理活性的黄酮类化合物。
槐花米自古用做止血药物，可作为提取芸香苷的原料，而通过对芸香苷的水解和重结晶可以得到槲皮素。
本实验通过醇提取法从槐花米中提取芸香苷，收率为3.13 % 。
进一步水解芸香苷制得槲皮素，得由槐花米提取槲皮素的收率为0.66%。
关键词：槐花米；黄酮类化合物；芸香苷；槲皮素；提取随着人们生活水平的提高，人们对天然化合物的保健功能与临床治疗功能愈发重视，黄酮类化合物（flavonoids）具有显著的抗氧化性能，可应用于食品、化妆品中，提高人体抗氧化能力；其在临床上是治疗心血管疾病以及预防癌症的良药，具有很大的应用价值。
1 芸香苷和槲皮素芸香苷（rutin）又名芦丁，主要存在于槐花米中，含量约为15 %的，是一种具有生理活性的黄酮类化合物，有调节毛细管壁渗透性的作用，临床上用作毛细管止血药，也用作高血压症的辅助治疗药物。
槲皮素（quercetin）是一种以游离态形式存在的黄酮类化合物，可通过对芸香苷进行水解和重结晶得到槲皮素。
槲皮素及其衍生物有抗癌作用，对一些致突剂致癌物有拮抗作用。
近年来，心脑血管疾病和癌症的发病率逐渐上升[1]，因此对治疗和预防心脑血管疾病以及癌症的药品与保健品的开发研究就显得尤为重要，使得芸香苷与槲皮素的需求量进一步扩大，因此，对槐花米中芸香苷和槲皮素的提取具有重大意义。
2 芸香苷和槲皮素的物理性质及提取原理2.1芸香苷的物理性质及提取原理芸香苷（rutoin），分子式C27 H30 O16，分子量610.51，淡黄色针状结晶，熔点177~178℃。
槐米中芸香苷的提取分离及鉴定
盐酸－镁粉反应
溶液置于试管 中1-2ml，加入 金属镁粉少许 ，浓盐酸2-3滴 ，观察并记录 颜色变化。
三氯化铝反应
取一张滤纸片， 分别滴两滴芸 香苷的乙醇溶 液，然后各加 1%三氯化铝醇 溶液两滴，于 紫外光灯下观 察荧光变化
氨熏试验
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
取一张滤纸片， 分别滴两滴芸 香苷的乙醇溶 液，然后将滴 有供试液的部 位分别倒扣在 盛有氨水的瓶 口，观察颜色 变化
槐米中芸香苷的提取分离及鉴定
天然药物教研室：朱仝飞
Contents
1 2 3 4
槐米中芸香苷的理化性质 槐米中芸香苷的提取分离 芸香苷的化学鉴定 重难点小结
Hot Tip 日常生活中的提取分离?
Hot Tip
槐米
槐花
一、槐米中芸香苷的理化性质
槐米的相关知识
(1)豆科植物槐的干燥花蕾 ★芸香苷的结构特点★
一、槐米中芸香苷的理化性质
性状
溶解性
酸碱性
溶解性及酸碱性为选择提取 分离方法的关键因素
二、槐米中芸香苷的提取分离
以下三种提取方法的名称是什么？
渗漉法
煎煮法
回流提 取法
二、槐米中芸香苷的提取分离
以下哪一种提取方法最适宜提取槐米中的芸香苷？
渗漉法
提取范围：遇 热易分解成分 优点：保持良 好的浓度差 缺点：溶剂消 耗多，时间长
沉淀热水或乙醇重结晶芸香苷结晶滤液为何加入石为何ph不能小于2为何使用硼砂水液碱溶酸沉法提取分离槐米中芸香苷的流程图重结晶分离三芸香苷的化学鉴定三芸香苷的化学鉴定取一张滤纸片分别滴两滴芸香苷的乙醇溶液然后将滴有供试液的部位分别倒扣在盛有氨水的瓶口观察颜色变化取一张滤纸片分别滴两滴芸香苷的乙醇溶液然后各加1三氯化铝醇溶液两滴于紫外光灯下观察荧光变化溶液置于试管中12ml加入金属镁粉少许浓盐酸23滴观察并记录颜色变化
槐花米中芸香苷的提取实验方案
槐花米中芸香苷的提取实验方案以槐花米为原料提取芸香苷，有多种提取工艺，如水提法、碱提酸沉法、醇提法、超声与微波交替提取法。
考虑到实验器材和成本。
碱提酸沉法是较为理想方法。
它有操作简单，经济、安全、技术成熟的特点。
但提取率没有超声与微波交替提取法高，其产率受诸多因素的影响( 药材的粉碎度、水溶液的pH、水溶液的用量、提取次数、提取时间、酸沉pH 值、结晶时间)。
我们小组通过查找文献，对影响芸香苷提取收得率的诸因素进行了优选。
即: 药材为细粉、提取3 次、提取水溶液的pH9、酸沉pH 值4、结晶时间12 小时、提取时间30 分钟、水溶液的用量1: 30 倍。
1.称取槐花米5g与250ml圆底烧瓶，加0. 4%的硼砂水溶液150ml，加入饱和石灰水调剂PH为9，微沸30min，趁热抽滤，残渣同时在加150ml水煮沸，趁热抽滤，重复三次，合并三次提取液，水浴至90℃，加15％盐酸调PH为4，搅匀，放置12小时，沉淀完全。
抽滤，用10ml水洗涤2~3次，得到粗产品，干燥称重。
2.粗产品放置400ml烧杯中加200 倍量蒸馏水加热煮沸溶解，趁热抽滤，滤液放置12小时结晶，析出淡黄色沉淀，减压抽滤。
将晶体干燥，称重，计算收率。
收率大概11％文献来源：正交试验法优选槐花米中芸香苷水提取工艺（楚雄医药高等专科学校药学系）槲皮素的制备取1g精制芦丁，在250ml圆底烧杯中加入80mL 0.5%稀硫酸（大于该浓度会造成较多酸液浪费），加热回流水解1h，冷却，过滤，沉淀用蒸馏水冲洗至中性。
把沉淀加入到95%乙醇中，加热使完全溶解，趁热抽滤。
滤液加入等量蒸馏水重结晶，抽滤，干燥，得槲皮素精品。
（收率为79.4%）文献来源：芦丁水解制备槲皮素的实验条件比较研究，郑州大学。
芸香苷属黄酮类化合物，有较高的药用价值，是治疗高血压、心血管疾病、胃病、皮肤病、糖尿病等多种疾病的良药，此外它还有抗菌和抗放射作用。
槲皮素的抗肿瘤, 抗炎, 抗血小板聚集, 抗氧自由基, 抗多种病毒。
实验芸香苷的提起
【实验材料】槐花米、石灰乳、0.4%硼砂水溶液、浓盐酸、正丁醇、醋酸、氨水、乙醇、70%乙醇、1%氢氧化钠溶液、1%三氯化铝乙醇溶液、2%氯氧化锆甲醇溶液、2%枸椽酸甲醇溶液、10% α-萘酚乙醇溶液、浓硫酸、2%硫酸溶液、葡萄糖标准品、鼠李糖标准品、芸香苷标准品、槲皮素标准品、碳酸钡、氨制硝酸银试液、广泛pH试纸、中速层析滤纸（4cm×15cm）。
【实验原理】（一）芸香苷又名芦丁（Rutin），维生素P，紫槲皮苷。
分子式C27H30O16，分子量610.51。
浅黄色针晶（水），mp.176℃～178℃，[]23Dα+13.82°(乙醇)，[]23Dα-39.43°（吡啶）。
在各种溶剂中的溶解度为：难溶于冷水（1∶8000～10000）、可溶于热水（1∶200）、热甲醇（1∶7）、冷甲醇（1∶100）、热乙醇（1∶60）、冷乙醇（1∶650）、可溶于吡啶及碱性溶剂，几乎不溶于苯、乙醚、氯仿及石油醚等溶剂。
由于分子中含有多个酚羟基，易被氧化，在空气中久置会使芸香苷颜色加深，尤其在碱性溶液中更易氧化。
OHOO glu OHOHO rha芦丁（二）槲皮素（Quercetin）又名栎精，槲皮黄素。
分子式C15H10O2，分子量 302.23。
为黄色针状结晶（稀乙醇），含2分子结晶水，在95℃～97℃成为无水物。
mp.314℃（分解）。
能溶于冷乙醇（1∶290），易溶于沸乙醇（1∶23），可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、冰醋酸及吡啶等溶剂，不溶于水、苯、乙醚、氯仿及石油醚等溶剂。
（三）其他成分槐花米甲、乙、丙素（Sophorin A、B、C）、白桦脂醇（Betulin）、槐二醇（Sophoradiol）、单宁等。
本实验利用芸香苷分子结构中含有多个酚羟基，显弱酸性，能与碱作用生成盐而溶于碱水，加酸酸化后又能沉淀析出的性质，采用碱溶酸沉淀法进行提取。
利用芸香苷在热水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性质，用水作溶剂进行重结晶精制。
槐花米中芸香的提取及槲皮素的制备与检识
实验原理
芦丁具有维生素P样作用。有助于保持 及恢复毛细血管的正常弹性，主要用作防 治高血压病的辅助治疗（但不能降压）剂， 亦可防治因缺芦丁所致的其它出血症。多 作口服，也可作注射用。
实验原理
提取芦丁的方法很多，目前我国多采 用碱提取- 酸沉淀法。该法的提取原理是依 据芦丁结构中含有酚羟基，能与碱反应生 成盐而溶于水中，向此盐溶液中加入酸， 则芦丁游离析出。此外，还可以采用水或 醇提取法。
思考
1、苷类水解有几种催化方法？ 2 、黄酮类化合物还有哪些提取方法？芸香苷 的提取还可用什么方法？ 3 、酸水解常用什么酸？为什么用硫酸比用盐
酸水解后处理更方便？
芸香苷、槲皮素及糖的检识
3、盐酸-镁粉反应：
取芸香苷1 mg，加乙醇2 ml，在水浴上加热 溶解，加镁粉约50 mg，滴加数滴浓盐酸，溶液由 黄色渐变红色者表示有黄酮类化合物。以同法试 验槲皮素。
如用锌粉代替镁粉，则芸香苷（ 3- 羟基与糖结 合成苷）仍有作用，而槲皮素（黄酮醇类）不呈 还原显色反应。因此可区别两者。
目的要求
学习和掌握芸香苷的提取及检测
技术
学会利用芸香苷的水解作用制备
糖类及苷元
实验原理
芸香苷俗称芦丁。广泛存在于植物界中，现 已发现含芦丁的植物至少在 70 种以上，如烟叶、 槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为 植物槐树的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高， 可作为大量提取芦丁的原料。
芦丁是由槲皮素（ Quercetin ） 3 位上的羟基 与芸香糖脱水缩合形成的苷。[芸香糖（Rutinose） 为葡萄糖（ Glucose ）与鼠李糖（ Rhamnose ）组 成的双糖。
芸香苷、槲皮素及糖的检识
6、Fehling试验：
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槲皮素粗品 槲皮素精制品
95％乙醇 重结晶
硫酸钡沉淀
滤液 浓缩至干，加 2～3ml乙醇溶解Hale Waihona Puke 糖供试液注：抽滤瓶的使用：
①开始顺序：减滤纸（大 小应合适）→安装分液漏斗 （分液漏斗下斜口应对准抽气 口）→连接真空泵→打开真空 泵→抽滤。 ②结束时顺序：先拔掉抽 滤瓶上与真空泵连接的像皮管， 再拆除装置。否则真空泵中的 水回因为压力较抽滤瓶中空气 的压力大而流入抽滤瓶。
实验四 槐花米中芸香苷的提取及 槲皮素的制备与检识
（一）实验原理
由槐花米中提取芸香苷的方法很多， 本实验是根据芸香苷在冷水和热水中的溶 解度差异的特性进行提取和精制，或根据 芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，能 与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮 沸提取，其提取液加酸酸化后则芸香苷游 离析出。
（二）芸香苷的提取
（五）芸香苷、槲皮素及糖的检识
实验名称 Molish反应 实验试剂 现象 芸香苷 槲皮素 紫色环 无现象
10%α-萘酚乙醇 溶液-浓硫酸 盐酸-镁粉反应 盐酸-镁粉 红色～紫红色 醋酸镁反应 1％醋酸镁甲醇 黄色荧光（紫外灯） 溶液（滤纸） 三氯化铝反应 1％三氯化铝乙 黄色荧光 醇溶液（紫外灯） 锆-柠檬酸反应 2％二氯氧锆甲醇溶液 黄色并 黄色 2％柠檬酸甲醇溶液3～4滴 褪色 不褪色
（三）芸香苷的精制
芸香苷粗品2g 加蒸馏水400ml，煮沸溶 解10min趁热抽滤 滤液 静置析晶，抽滤 滤液 药渣
结晶 室温下晾干 精制芸香苷
（四）芸香苷的水解
精制芸香苷 加2％硫酸100ml，加热回流30min， 至沉淀不再增加为止，放冷抽滤 沉淀
用少量水洗去余酸，晾干
滤液
加氢氧化钡中和至中性，滤过
（六）注意事项
1．在提取前应将槐花米略捣碎，使芸 香苷易于被热水溶出。 2．在提取过程中，加入硼砂的目的是 使其与芸香苷分子中的邻二酚羟基发生络 合，既保护了邻二酚羟基不被氧化破坏， 又避免了邻二酚羟基与钙离子络合（芸香 苷的钙络合物不溶于水），使芸香苷不受 损失，提高收得率。
3．本实验直接用沸水由槐花米中提取 芸香苷，收得率稳定，且操作简便。如用 碱溶酸沉法提取，加入石灰乳可以达到碱 性溶解的目的，又可除去槐花7米中所含的 大量粘液质，但应严格控制其碱性pH8～9， 不可超过pH10。如pH值过高，加热提取过 程中芸香苷可被水解破坏，降低收得率。 加酸沉淀时，控制pH3～4,不宜过低，否则 芸香苷可生成yang盐而溶于水，也降低收 得率。
方法Ⅰ：水提取法
槐花米粗粉20g 加10倍量沸水煮沸20min，反 复2次，趁热脱脂棉滤过 药渣 滤液 静置过夜，滤过 滤液 芸香苷粗品
方法Ⅱ ：碱溶酸沉法
槐花米粗粉20g 加0.4％硼砂水200ml，石灰乳调pH8～9 煮沸20min，4层纱布滤过，反复2次 滤液 药渣 放冷至60～70℃，浓盐酸调 pH3～4，冰箱中析晶，滤过 滤液 沉淀 室温下晾干 芸香苷粗品