外植体采集时期与冷藏处理对马尾松愈伤组织诱导的影响
马尾松幼胚培养及幼茎愈伤组织诱导研究
马尾松幼胚培养及幼茎愈伤组织诱导研究马尾松(Pinus massoniana Lamb.)是重要的乡土速生针叶树种,有较高的综合利用价值,探索该树种的离体繁殖技术,建立快速繁殖体系,对该树种的遗传改良研究和开展基因工程研究工作奠定良好的理论和技术基础。
本文以马尾松幼胚、实生苗的幼嫩茎段为外植体,进行器官发生和愈伤组织培养研究,探讨了不同因素对器官发生或愈伤组织产生的影响。
主要研究结果如下:1.本研究分别采用了马尾松幼胚和幼嫩茎段作为外植体,在灭菌过程中,我们分别对它们进行了不同的处理,并比较分析了它们各自的灭菌效果,结果表明:在两种外植体的不同处理中,酒精在灭菌过程中作用比较显著,灭菌时间过短,灭菌不彻底,外植体容易受到感染;灭菌时间过长,虽然灭菌效果好,但由于外植体比较幼嫩容易受到损伤,导致外植体死亡。
在对马尾松幼胚的灭菌过程中,最佳的消毒方法为:75%酒精表面灭菌30s,之后再用0.1%升汞浸泡8min,最后用无菌水冲洗5~6次;对马尾松幼苗灭菌最好的方法是采用75%的酒精浸泡20s,0.1%的升汞浸泡8min,最后用无菌水冲洗5~6次,其污染率和死亡率均最低,仅为3.71%。
2.在马尾松的直接器官发生的培养中,防治褐化的有效途径是在培养基中添加0.15g/LVc,且两天转接一次,以缩短外植体在原来培养基上的停留时间,减少褐化的几率。
同时通过大量的比较分析,得出:在起始培养阶段,WPM培养基中的萌发率高于培养基GD和DCR,且其生长状况较好。
BA、KT和NAA最适合的浓度水平分别为1mg/L、0.5mgm和0.15mg/L,NAA浓度过高使愈伤化程度加大。
具体的来说,比较适合马尾松丛芽诱导的培养基组合为WPM+lmg/L BA+0.5mg/L KT+0.15mg/L NAA+0.15g/L Vc;在丛生芽的增殖和伸长培养中,最适宜的培养基组合是WPM+0.15mg/L NAA+0.15g/L Vc+0.5g/L Ac;生根培养中,效果最好的培养基组合为WPM+2mg/L IBA+0.15mg/L NAA+0.5g/L Ac,且生根培养基中添加蔗糖的浓度以20g/L为宜。
外生菌根真菌提高马尾松幼苗的抗旱性研究进展
外生菌根真菌提高马尾松幼苗的抗旱性研究进展【摘要】外生菌根真菌是一种重要的共生微生物,对植物的生长发育和环境适应能力起着重要作用。
本文主要探讨外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的研究进展。
从外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的影响、提高水分利用效率的机制、与植物激素的互作关系、抗氧化能力的研究以及在改善土壤环境中的作用等方面进行了综述。
研究结果表明,外生菌根真菌能显著提高马尾松幼苗的抗旱性,通过调节植物的生长发育和代谢过程,增强植物的抗氧化能力,提高水分利用效率等方式来帮助植物应对干旱胁迫。
未来的研究应进一步深入探讨外生菌根真菌在马尾松幼苗抗旱性中的应用潜力,为改善植物干旱适应能力提供理论和实验支持。
【关键词】外生菌根真菌、马尾松幼苗、抗旱性、水分利用效率、植物激素、抗氧化能力、土壤环境、应用潜力1. 引言1.1 研究背景马尾松(Pinus massoniana)是我国南方常见的树种,具有较强的生态适应性和经济价值。
由于气候变化等因素的影响,马尾松幼苗常常面临干旱压力,导致幼苗生长受限及林木大量死亡。
寻找提高马尾松幼苗抗旱性的有效途径成为当前研究的热点之一。
外生菌根真菌是一种与植物共生的微生物,能够通过与植物根系形成共生结构,提供水分和养分供给,进而增强植物对干旱的抵抗能力。
已有研究表明,外生菌根真菌可以有效改善植物的生长状况,提高抗旱能力。
关于外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的影响及机制仍有待深入研究。
为了深入了解外生菌根真菌在提高马尾松幼苗抗旱性中的作用机制,本研究将系统探讨外生菌根真菌与马尾松幼苗之间的互动关系,以期为解决马尾松苗木生长受限问题提供科学依据和技术支持。
1.2 研究目的本研究旨在探讨外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的影响机制,为改善马尾松幼苗的抗旱能力提供有效途径。
具体目的包括:1. 研究外生菌根真菌对马尾松幼苗抗旱性的影响:通过实验观察外生菌根真菌接种对马尾松幼苗生长情况、生理指标和抗旱性能的影响,揭示外生菌根真菌在提高马尾松幼苗抗旱性方面的作用机制。
激素和外植体类型对新疆雪莲愈伤组织诱导的影响
杨林 等 L、 雪梅 等 _建 立 了新 疆 雪 莲组 织 培 养 体 行 变量分析 ( oa , 7胡 ] 8 ] Av v)在确定 F值 下 , 00 1 平 以 .0 水
收 稿 日期 :0 90 —5 修 回 日期 :0 91—2 2 0 —50 ; 2 0 —10
* 国家 自然科 学 基 金 ( 0 6 0 2 0 6 0 4 、 3 9 0 9 ,3 9 0 4 ) 科技 部援 疆 计 划 项 目 ( 0 8 0 0—9 、 疆 维 吾 尔 自治 区 高 校 科 研计 划 重 点项 目 2 0 4 1 23 ) 新 ( J DU2 0 S 7 、 XE 0 7 2 ) 新疆维吾尔 自治区重点实验室开放课题 ( YS 2 320 —1 、 XJ 0 0 —0 80 ) 新疆师 范大学研究生创新基金资助 **通讯作者. - i in ig i@tm.o E ma :j bn qn o cr l a n 庞红霞 , ,9 3年生 , 女 18 硕士研究生.研究方 向: 植物分 子生物学.Ema :10 5 5 9 q cr - i 5 0 9 9 @q.o l n
无 节制地 毁灭性 盗 采 和非 法 收购 , 成 野 生新 疆 雪 0 1 的 Hg 1消 毒 1 n 再 用 无 菌 蒸 馏 水 冲洗 造 . C。 0mi,
~5 接种 到铺 有 3层 滤 纸 的 培 养 皿 中, 皿 加 每 莲 生长速度 远远 低 于采 挖 速 度 , 这 一 珍 贵物 种 资 3 次 , 使 源遭 受严重 破坏 , 原生 地资源 日益枯 竭 , 区域性 资源 无菌蒸 馏水 7mL, (5 )o 发 , 将 萌发 在 2 ±2 C萌 7d后 / o 枯萎 , 难以满足市场 的需求。随着组织培养技术 的 后 的种子接 种到 12MS培 养基 上生 长 。新 疆 雪莲 不断 成熟 , 为新疆 雪莲 快 速 繁 殖 和种 质 资 源 的保 存 成苗后 , 取无菌苗 叶片 , 和根 , 叶柄 剪成 0 3 . m2 . ~O 4c 提供 了行之有 效 的途径 。因此 , 展 新疆 雪 莲 组 织 大小的外植体 , 到 MS附加 不 同激素 的诱导 培养 开 接种 (5 )C暗培养 ,8d 1 左右统计诱导 率 。 培养 技术 的研 究 , 索 适 合 新疆 雪 莲 植株 再 生 的 培 基 上 ,2±2 o 探 诱导率( )= 产生愈伤组织的外植体块数/ =( = 总 养条件 , 对实 现新疆 雪 莲 合 理开 发 利 用具 有 重 要 的
马尾松幼胚胚性愈伤组织诱导的研究
41 04, un n, 00 H a Chi na;2. p r m e tofPlnt Soi a De a t n a , l nd Env r nm e tSce e , n v r iy o io n inc s U i e st f
摘
要 : 利 用 马 尾 松 未 成 熟 胚 为 外植 体 , 预 备 实 验 的基 础 上 . 过 对 不 同 时 期 不 同 家 系 马 尾 松 幼 胚 的采 集 、 任 通 接
种 , 导 产 生 胚 性 愈 伤 组 织 , 算 实 验 数 据 , 用 S S 1 行 数 据 分 析 。结 果 表 明 : L 诱 计 利 P S 3进 以 P为 基 本 培 养 基 , 易 诱 最
21 0 0年 4月
马尾 松 幼 胚 胚 性 愈 伤 组 织 诱 导 的 研 究
靳 小 翠 , 志 辉 杨 模 华 张 冬 林 。 丁 贵 杰 李 , 。 ,
( . 中 南林 业 科技 大 学 林 学 院 ,湖 南 长 沙 4 0 0 ; .美 国缅 因 大 学 植 物 、 1 10 4 2 土壤 和 环 境 科 学 系 Man , A,澳 元 露 4 6 ;3 ie US 4 9 .贵 州 大 学 林 学 院 ,贵 州 贵 阳 5 0 2 ) 5 0 5
Ab t a t Ba e n t elm i r xp r m e s w e c lct h m m at r m br s ofPi usm asoni a r sr c : s d o he pr i na y e e i nt , ol e ed t e i ue e yo n s an fom 3 s e r esa f e e e i e d te tdif r ntp rods t en i oc l t d t em n b c sa c di o t if r n eso ee r e nd c — ,h n uae h i athe c or ng t he d f e e c fs d t e sa ol lctd— rod he LP e i c l u a e a d nays d t n c i iis of e br on c c lu wih SPS s t e e pe i son t m d a; a c l t d n a l e he i du tv te m y i a l s t S1 3 of - war Th e uls s w t tThe m os s ia e tm e o i duc t e. e r s t ho ha t u t bl i t n e he em br oni a ls y c c lu wa r s f om m i Aprlt l e d— i o at M a i hi ero he dif r nc s e w e n f m ii a n y,n t s p i d t f e e e b t e a l esw s onsgniia . i fc nt The i u i tesw e e d ln ng s e y nd ctvii r eci i t p b
不同处理方式对红松愈伤组织诱导及增殖的影响
பைடு நூலகம்NO . 021 V2
Vo. 4 N . 12 o 6
不 同处理方式对红松愈伤组织诱导及增殖的影响
曹 焱 戴伟男 戴凤海
(. 2 黑龙江林业科学研 究所 , 哈尔滨 10 8 ;. 5 0 22 黑龙江省林木种苗管理总站 , 哈尔滨 10 9 ) 5 00
摘
一
要: 以红松成 熟合 子胚 为外植体 , 用不同的处理 方式进行愈 伤组 织的诱导及增殖研 究 , 出以下结论 : 得 经过
关键词 : 红松 ; 有效愈 伤组 织; 增殖 中图分 类号 :7 227 ¥9 .4 文献标 志码 : A 文章编号 :6 4— 3 1 2 2 )6— 0 5— 3 17 6 4 (0 1 0 00 0 伤组织增殖 的影 响。 12 3 添加 A A、E 甘露醇 处理 .. B P G、
则成为针 叶 树 体 细胞 胚 胎 发 生 的 一个 关 键 环 节 _ 。根据 1 J Am so g r t n 标准将得到 的愈伤组 织分为 3类 : 型 , r I 结构 致密 、 复杂多样 、 生长缓慢 , 通过器官发生途 径分化 芽和根 , 产生胚 状 体较少 , 不易长 期继 代 ; Ⅱ型 , 构松 散 、 结 易碎 、 呈颗粒 状 、
有胚 性感 受态 的细胞组织 , 因此有 效愈伤 组织 的增 殖与更新
在红松愈 伤组 织增 殖培养 阶段 , 究 A A、E O 0和 研 B P G6 O 甘露醇对 愈伤 组织及 有效 愈伤 组织 增殖 的影响。分别添 加
2 3 5、 0、 5 、 、 2 2 g・L~ AB 2 2 2 4 、 0 g ・L~ P 0 0; A; 0、 5、 0、 0 7 EG 6 0
溶液 ( 0 2 、O 5 、0 L ) P G 6 0 ( 0 7 、0 、0 、 1 、0 3 、0 7 g・ 、 E 0 0 5 、0 20 2 0
贮藏温度和时间对马尾松花粉保护酶活性及萌发率的影响
2 C r s e tv l . Du i g t r g p ro O o e p ciey rn s o a e e i d t e e mi a i n r p ri n f o l n e r a e s g i c n l wh n h h g r n t p o o o o p l d c e s d i n f a ty o t e i e t e
Ta i n u n Ja h i
( u n x oe r c n eA a e y N n ig 5 0 0 ) G a g i rs yS i c c d m a nn 3 0 2 F t e
Ab ta t I hsp p r n et ae mp cso o rs rg e eaue ( o m tmp rtr , C ,一1 ℃ a d sr c : n ti a e ,Iiv s g td i a t ffu t a etmp rtrs ro e eaue 4 o i o 0 n
a tv t s o OD , c i ii f S e POD n a d CAT. Re u t h we h t P. ma s n a a p le o l e i i h g r n t n p o o to s ls s o d t a so i n o l n c u d r ma n a h g e mi a i r p ri n o a d sr n e it n e t x d t n f r 7 d y t t e r o t mp r t r 2 6 a s a C n 8 a s a —l C r n to g r s sa c o o i a i o 2 a s a h o m e o e a u e. 1 d y t 4 o a d 2 6 d y t O o o
不同外植体和激素对银杏愈伤组织诱导和生长的影响
Ma .0o r2 8
第2 3卷
第 1 期
V0 . 3 N0. 12 1
不 同外 植 体 和 激 素 对 银 杏 愈伤 组 织诱 导 和 生长 的影 响 *
杜希华 一 孙秀玲 郝 岗平 侯福林 )
(1山东师范大学生命科学学 院, 0 1, ) 2 04 济南 ; 2泰 山医学院生物技术教研室 , 1 0 山东泰安∥第一作者 4 岁 , , 5 ) 2 0 , 7 0 2 男 副教授 )
统研究 了外 植体类 型、 性别 、 生理状 态 、 培养基激素配比及培养条件等 因素对银杏愈伤组织诱 导和生长 的影响 , 为探讨愈伤组 织生长与银杏黄酮和内酯类合成之间的相互关 系打下 了基础 , 并可 为进一步 的工业化生产 提供实验依据 .
1 材 料与方 法
11 材 料 银杏种 子购 自山东省郯城县银杏生产基地 . . 银杏茎段和叶片采 自山东师大校园内的成树 ( 树龄约 5 年 , 5 按雌 雄树定株采集 ) . 12 外植体消毒、 . 接种和培养 12 1 胚不 同区段 .. 剥去种子的骨质中种皮 , 7 %乙醇中浸泡 1 , 在 5 5s再用 0 1 g1灭菌 8mn 无菌水冲洗 4— .%H C2 i, 5次 , 于无 菌条件下剥离胚 , 接种 于不含激素的 MS 培养基上使其萌发 , 后切取萌发胚的不 同区段 , 5d 分别 将子叶 、 芽、 胚 胚轴 、 胚根 接种 于诱导培养基上 , 培养 . 122 茎段和 叶片 从雌 、 .. 雄株上剪取生长旺盛 的当年生枝条 , 将幼嫩枝梢 和叶片分开 , 流水冲洗后 , 灭菌( 方法 同上 ) 在超 , 净工作 台上将茎段切成 08 . c . ~10 m的小段 ( 不带腋芽) 叶片切成 0 5c , . m×10c . m的小块 , 分别接种于诱导培养基 中. 13 愈伤组织的继 代培 养 培养 3 . 0d左右, 将诱导形 成的愈伤组织转入适宜的继代培养基中, 进行 扩大培养 . 14 培养条件 .
不同外植体及冷藏处理对华中枸骨组织培养的影响
不同外植体及冷藏处理对华中枸骨组织培养的影响作者:范淑芳来源:《安徽农业科学》2014年第07期摘要[目的]研究不同外植体及冷藏处理对华中枸骨组织培养的影响。
[方法]以华中枸骨带芽新梢茎段为外植体,考察外植体的取材时间、部位以及4 ℃冷藏处理对其初代培养的影响。
[结果]华中枸骨以带芽的新梢茎段作为外植体进行组织培养时,以春季采取植株中上部枝条为宜,其中春季萌条的芽增殖倍数可达到4,中上部萌条的芽萌动率可达到45%。
适当的冷藏处理对外植体的消毒以及芽的萌动有利,4 ℃冷藏处理14 h后的消毒成功率最高,可达到92%;冷藏处理22 h的芽萌动率最高,可达到18%。
[结论]华中枸骨组织培养中外植体最好于春季选取植株中上部萌发的新梢顶芽;华中枸骨芽的萌动率随冷藏时间的增加呈线性增长,可能与低温打破休眠有关。
关键词华中枸骨(Ilex centrochinensis);组织培养;外植体;冷藏处理中图分类号S188文献标识码A文章编号0517-6611(2014)07-02000-02(Ilex)植物,又称针齿冬青、小果冬青,因其形态特征及其功用又被形象地称为苦荆茶[1]。
该植物枝叶繁茂,碧绿常青,黄花红果,是一种优良的园林绿化植物;同时,该植物富含多种营养元素,可以药茶两用,具有较高的保健功能。
该植物资源稀少,种子繁殖困难,扦插繁殖也难生根,关于其组培快繁的研究鲜有报道。
笔者主要针对带芽新梢茎段的取材季节、部位以及外植体冷藏处理展开系统地试验,以期找到最佳的取材方法和处理技术,提高初代培养的成功率,为其组培快繁服务。
1材料与方法1.1材料1.1.1 研究对象。
华中枸骨,经鉴定为为冬青科(Aquifoliaceae)冬青属(Ilex)植物华中枸骨(Ilex centrochinensis)。
1.1.2 主要试剂。
所用试剂均为国产分析纯,市售。
1.2方法1.2.1 不同时间外植体的采集[2]。
华中枸骨每年春季和秋季均会萌发新梢,分别于4月初和9月末采取植株中上部长约5~10 cm、未木质化的新梢作为外植体,采取相同的消毒方法和培养方法,在继代培养中分春季萌条和秋季萌条进行后期生长对比,每处理10瓶,每瓶3芽,重复3次。
不同因素对中华卷柏愈伤组织诱导的影响
不同因素对中华卷柏愈伤组织诱导的影响作者:付伟叶嘉张浩纪光思来源:《江苏农业科学》2014年第01期摘要:以中华卷柏为试验材料,比较不同外植体、不同光照条件、不同激素组合对愈伤组织诱导率的影响。
结果表明:(1)茎尖是诱导中华卷柏愈伤组织的最佳外植体;(2)黑暗培养能够明显促进愈伤组织的发生;(3)茎尖在 1/2MS+6-BA 0. 5 mg/L+2,4-D 2 mg/L的培养基中诱导率最高,达55.6%。
同时研究了不同继代时间对愈伤组织褐化的影响,结果表明:25 d继代1次可使褐化率降至33.3%。
关键词:中华卷柏;愈伤组织;诱导中图分类号: S567.23+9.043文献标志码: A文章编号:1002-1302(2014)01-0039-02收稿日期:2013-08-12基金项目:河北省科技支撑计划(编号:06220111D-1);邯郸市科学技术研究与发展计划(编号:1223109092-10)。
作者简介:付伟(1978—),女,硕士,讲师,主要研究方向为植物生物技术。
E-mail:fwximei@。
通信作者:叶嘉,硕士,教授,从事资源植物开发和利用。
E-mail:yejia630819@。
中华卷柏[Selaginella sinensis (Desv.) Spring]为卷柏科(Selaginellaceae)卷柏属多年生草本植物,别称地柏枝,主要分布于我国东北、华北等温带地区,是我国特有的药用植物。
中华卷柏含有穗花杉双黄酮、罗伯斯特杉双黄酮、银杏双黄酮等多种双黄酮类化合物[1-2]。
其全草为民间常用草药,有清热利尿、解毒散寒、消炎止血的功效,用于肝炎、胆囊炎、慢性气管炎、慢性肾炎、湿疹、烧伤烫伤等的治疗[3]。
目前对中华卷柏的研究多集中在孢子形态学[4-5]、化学成分研究[5-6]、药用价值[7-9]等方面。
迄今在国内未见有关中华卷柏愈伤组织诱导的报道。
愈伤组织诱导是植物生物反应器规模化生产植物次生代谢产物的重要环节[10]。
外植体不同长度及接种方式对马尾松愈伤组织诱导的影响
m a o j i a n G r o u p i n H e n a n P r o v i n c e )
Abs t r ac t To s t u d y t h e e f f e c t o f e x p l a n t l e n g t h a n d i n o c u l a t i o n me t h o d o n c a l l u s i n d uc t i o n o f P/ nu s ma s s o n i a n a La mb . . Ex p l a n t s o f P/ n w ma s s o n i a n a La mb.we r e d i v i d e d i n t o d i f f e r e n t g r o u ps a c c o r di n g t o e x pl a n t s l e n g t h a n d i n c u l c a t i o n me t ho d, t h e d i f f e r e nc e s b e t we e n t h e g r o u p s we r e c o mpa r e d . Th e r e s ul t s s h o we d t h a t whe n i n o c ul a t e d. t he be s t e x pl a n t s l e n g t h we r e 0. 1 ~O. 2 c m. A l a r g e q ua n t i t y o f c a l l u s c e i l s i n i t i a t e d o n t h e s u r f a c e o f
摘 要 为研 究 外植体 不 同 长度及 接种 方 式对 马尾松 愈 伤组 织诱 导 率的 影响 . 将 马尾 松 的外 植体 按 照 长度 与接 种 方式 的不 同分别将 其 分组, 比较 组 间差 异。 结 果表 明 : 外植 体最 佳接 种 长度 为 O . 1 ~ 0 . 2 c m, 愈 伤 组织 细胞 在切 口处大 量增 殖和 生 长 , 外植 体 全部 分化 成愈 伤组 织 , 愈 伤 组织 诱导 率 高达 8 4 . O 0 %, 几乎 没有 褐化 和 污 染现 象发 生 ; 外植 体 最佳 接 种 方式 为竖 直接 种 , 竖 直接 种 的外植 体 愈 伤组 织形 成较 早 , 且
外植体取样时间和消毒方式对沙子空心李诱导培养的影响
基金项目科研机构创新能力建设专项资金“铜仁市沙子空心李工程技术研究中心创新能力建设”(黔科合服企〔2019〕4013);农业领域“沙子空心李提质增效关键技术研究”(黔科合支撑N 〔2020〕1Y023号);基础研究计划“铜仁市精品果树组织培养技术研究”(铜市科研〔2019〕115号)。
作者简介任菲宏(1992—),女,贵州铜仁人,硕士,农艺师,从事果树栽培与育种研究工作。
*通信作者收稿日期2022-11-11外植体取样时间和消毒方式对沙子空心李诱导培养的影响任菲宏1王姣1李晓松1石丽姝1任红艳1吴茂宏2*(1铜仁市农业科学院,贵州铜仁554200;2铜仁市林业科学院,贵州铜仁554300)摘要为研究外植体取样时间和消毒方式对沙子空心李诱导培养的影响,本试验以不同时间段取样的沙子空心李半木质化茎段为外植体,分别采用2种消毒方式处理后进行诱导培养。
结果表明:与2%次氯酸钠消毒相比,使用0.1%氯化汞进行消毒时,外植体污染率较低、成活率较高;随着外植体取样时间的推移,诱导死亡率总体上逐渐降低,4月25日取样的外植体死亡率最低、成活率最高。
综合分析可知,沙子空心李外植体适宜的消毒方式是75%乙醇消毒10s+0.1%氯化汞消毒5min ,适宜的取样时间是4月下旬。
该条件下,外植体诱导污染率达到最低(4%),成活率达到最高(86%)。
关键词沙子空心李;外植体;取样时间;消毒方式;诱导培养中图分类号S662.3文献标识码A文章编号1007-5739(2023)12-0077-03DOI :10.3969/j.issn.1007-5739.2023.12.017开放科学(资源服务)标识码(OSID ):Effects of Explant Sampling Time and Disinfection Methods on Induction Culture ofShazi Kongxin PlumREN Feihong 1WANG Jiao 1LI Xiaosong 1SHI Lishu 1REN Hongyan 1WU Maohong 2*(1Tongren Academy of Agricultural Sciences,Tongren Guizhou 554200;2Tongren Academy of Forestry Sciences,Tongren Guizhou 554300)Abstract To study the effects of explant sampling time and disinfection methods on induction culture of ShaziKongxin plum,this experiment used semi-lignified stem segments of Shazi Kongxin plum sampled at different timeperiods as explants,and treated them with two disinfection methods before induction culture.The results showed that compared with 2%NaClO disinfection,using 0.1%HgCl 2for disinfection resulted in a lower pollution rate and a higher survival rate of the explants.As the sampling time of the explants progressed,the induced mortality rate gradually decreased overall.The explants sampled on April 25th had the lowest mortality rate and the highest survival rate.Comprehensive analysis showed that the appropriate disinfection method for Shazi Kongxin plum was 75%ethanol disinfection for 10seconds and 0.1%HgCl 2disinfection for 5minutes,the appropriate sampling time was late April.Under this condition,the induced pollution rate of explants was the lowest (4%),the survival rate reached the highest(86%).KeywordsShazi Kongxin plum;explant;sampling time;disinfection method;induction culture20231277202312沙子空心李是贵州省地域特征明显的果树作物[1],因成熟时果肉与果核分离而得名。
外植体选择和灭菌对杧果组织培养影响的初步研究
响 在超净工作台里,分别采用以下的灭菌方法对不同 类型杧果外植体进行灭菌:(1)75%酒精浸泡 30s,振荡, 弃去浸泡液,无菌水冲洗 1 次,加有吐温的 0.1%HgCl2 的 溶液浸泡加摇晃 7min,弃去浸泡液,无菌水冲洗 5 次;(2) 75%酒精浸泡 30s,振荡,弃去浸泡液,无菌水冲洗 1 次,加 有吐温的 0.1%HgCl2 的溶液浸泡加摇晃 8min,弃去浸泡 液,无菌水冲洗 5 次;(3)75%酒精浸泡 30s,振荡,弃去浸 泡液,无菌水冲洗 1 次,加有吐温的 0.1%HgCl2 的溶液浸 泡加摇晃 9min,弃去浸泡液,无菌水冲洗 5 次。 1.2.4 培养基及培养条件 将已进行灭菌处理的茎段切 成约芽上 0.5cm,芽下 1cm,叶柄 0.5cm 的单芽茎段,分别 接种至 MS 培养基中。试验材料均在 25±5℃的培养室中 培养,每天光照 10h,光照强度 1 600~2 000lx。7d 后开始 观察外植体污染及腋芽萌发情况,并统计污染率及萌发 率。计算公式如下:
16
安徽农学通报,Anhui Agri.Sci.Bull.2016,22(02)
外植体选择和灭菌对杧果组织培养影响的初步研究
岑湘涛 沈 伟*
(百色学院,广西百色 533000)
Байду номын сангаас
摘 要:该文以杧果为试验材料,研究了不同外植体与不同灭菌方法对杧果组织培养的影响。试验结果表
明:杧果组织培养适宜外植体为室内沙培杧果带腋芽茎段;最适灭菌处理为酒精 30s+0.1%HgCl2灭菌 8min。 关键词:杧果;外植体;组织培养;灭菌
中图分类号 S66
文献标识码 A
文章编号 1007-7731(2016)02-16-02
杧果(Mangifera indica Linnaeus)为漆树科(Anacar⁃ diaceae)杧果属(Mangifera Linnaeus)植物,是我国重要的 热带果树之一。其果实芒果具有独特的风味,富含维生 素,被誉为“热带水果之王”,已在热带、亚热带多个国家 及地区广泛种植[1]。杧果种子在贮藏时极易失去生活力, 所以一般多采用无性繁殖[2]。利用组织培养技术建立杧 果快速繁殖体系,能在较短时间和较小空间内获得大量 纯合无性系组培苗,对加速杧果良种繁育推广有着积极 的意义。本文就杧果茎段离体培养中的外植体选择和灭 菌进行了探索性的研究,以期为杧果组培快繁体系的完 善提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 本研究供试品种为桂七杧,品种来源及 特征特性如下:桂七杧又名桂热 82 号,树势中等,枝条开 张花期较迟,属晚熟品种,成熟期 8 月中、下旬。丰产稳 产。桂热杧 82 号主要在百色市田东县及南宁市种植。 2014 年百色市杧果种植面积 8.66 万 hm2,投产面积 1.43 万 hm2,年产量 17.43 万 t,杧果总产值 6.28 亿元[3]。本试验以 桂七杧带腋芽茎段为外植体。 1.2 试验方法 1.2.1 取材地点和取材天气 取材地点设:A 室外基地 植株,B 实验室沙盆植株,共 2 个地点。取材天气设:a 连 续阴天的一天,b 雨后第二天,c 连续晴天的一天,取材时 间都为中午 14:30 左右。 1.2.2 外植体的预处理 从室外基地及室内沙盆植株中 选择生长良好的枝条,剪取距幼嫩植株顶端约 15cm 长的 茎段,去除顶端 3 节,剪去叶片,留 1cm 叶柄。将材料用洗 衣粉溶液浸泡 10~15min,再用自来水冲洗 10~15min,放 在超净工作台上。 1.2.3 不同灭菌处理对不同类型外植体灭菌效果的影
外植体类型和植物生长调节剂浓度对红金银花愈伤组织诱导的影响
外植体类型和植物生长调节剂浓度对红金银花愈伤组织诱导的影响摘要:以红金银花(Lonicera japonica var. chinensis)顶芽、当年生幼茎和叶片为试验材料,利用仿自然气候的培养条件,采用L9(34)正交试验设计,考察了外植体类型和培养基中添加植物生长调节剂的浓度对愈伤组织诱导的影响。
结果表明,外植体类型对红金银花组织培养的污染率及愈伤组织的诱导率均有影响,以顶芽为外植体时污染率低,愈伤组织诱导率高,为最佳外植体。
优化后的愈伤组织诱导培养基中KT、6—BA、α—NAA浓度分别为1.5、1.5、0.5 mg/L。
关键词:红金银花(Lonicera japonica var. chinensis);外植体类型;植物生长调节剂;愈伤组织;正交试验金银花(Lonicera japonica Thund.)又名忍冬,是忍冬科忍冬属多年生半常绿藤本植物,是一种珍贵的观赏树种和绿化材料,也是临床常用中草药,具有清热解毒、凉散风热之功效[1]。
红金银花(L. japonica var. chinensis)为忍冬科忍冬属木本植物,是金银花的野生变种。
其枝、叶、茎淡紫色,叶久寒而不落,花蕾红色,香味浓郁,且生长快、适应性强、耐旱、耐涝、耐寒、耐瘠薄,是集药用、观赏、水土保持于一体的优良品种[2]。
目前,生产上金银花和红金银花的主要繁殖方式是扦插,也可用种子繁殖,关于金银花的组织快繁已有少量报道[3—5],而红金银花相关方面的研究则较少[6,7]。
为加快红金银花的繁育,探讨了外植体类型和植物生长调节剂浓度对红金银花愈伤组织诱导的影响,旨在优化红金银花的组培快繁技术,为红金银花工厂化育苗和规模化栽培提供技术参考。
1 材料与方法1.1 供试材料红金银花当年生幼嫩枝条采自河南省封丘县金银花基地。
1.2 实验方法将取回的红金银花枝条置于水槽中,用软毛刷刷洗表面尘土,无菌水反复冲洗干净,剪取顶芽部位,保留幼茎和叶片。
抗松材线虫病马尾松胚性愈伤组织超低温保存
抗松材线虫病马尾松胚性愈伤组织超低温保存Shen Liyuan;Wu Xiaoqin;Chen Tingting;Sun Tingyu;Wang Yanli【摘要】为使抗松材线虫病马尾松(Pinus massoniana Lamb.)胚性细胞保留幼年特征,阻止长期继代发生遗传变异,以抗松材线虫病马尾松马7-6及全172-1-1细胞系胚性愈伤组织为材料,通过正交试验及单因素试验探讨超低温保存(冷冻保护剂、预处理时间、解冻温度)对愈伤组织存活的影响,并对恢复生长的愈伤胚性维持状况进行评估.结果表明:预处理36~48 h,以2.5%~10.0%DMSO、0.4~0.5 mol·L-1蔗糖和15%PEG作为冷冻保护剂,经30~35℃ 解冻后,两细胞系的胚性愈伤组织细胞活性较高,愈伤恢复生长率达100%,所需恢复生长的时间也相对较短(马7-6细胞系23 d;全172-1-1细胞系15~19 d).超低温保存后的愈伤与正常增殖的愈伤组织在外观及显微结构上无明显差异,且低温保存后的愈伤组织仍具有分化的能力.【期刊名称】《东北林业大学学报》【年(卷),期】2019(047)007【总页数】5页(P108-112)【关键词】抗病马尾松;超低温保存;预处理时间;冷冻保护剂;解冻温度【作者】Shen Liyuan;Wu Xiaoqin;Chen Tingting;Sun Tingyu;Wang Yanli 【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】S722.3+6;S791.248马尾松(Pinus massoniana Lamb.)在我国分布广泛[1],是我国最主要的用材树种之一。
松材线虫病是由松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)引起的一种毁灭性松树病害[2],该病害自发现以来对我国生态及经济造成了巨大损害[3]。
国内外对于松材线虫病的防治工作已取得成效,但抗病育种是从根本上解决松材线虫病的重要途径之一。
外植体预处理对胡桃楸成熟胚不定芽的诱导
外植体预处理对胡桃楸成熟胚不定芽的诱导张建瑛;殷东生;葛文志;田新华;李京;祁永会【摘要】以胡桃楸成熟胚为外植体,研究了外植体消毒及培养预处理(低温、暗培养)对胡桃楸不定芽诱导的影响.结果表明:外植体消毒处理中以紫外线直射5 min+0.1%HgCl28 min处理效果好于其他处理,染菌率为13.45%,褐化率为22.78%.培养预处理中暗培养随着时间延长愈伤组织诱导率增加.低温处理是随着时间延长呈现抛物线形式,先升后降,低温14 d的愈伤组织诱导率最高,为42.71%.经过预处理后,在低温处理14 d的不定芽诱导率最高,为42.8%.随着种子贮存年限的延长,胡桃楸发芽率、愈伤组织诱导率、不定芽诱导率越低.【期刊名称】《东北林业大学学报》【年(卷),期】2019(047)002【总页数】4页(P21-24)【关键词】胡桃楸;外植体预处理;成熟胚;不定芽【作者】张建瑛;殷东生;葛文志;田新华;李京;祁永会【作者单位】黑龙江省林业科学研究所,哈尔滨,150081;黑龙江省林业科学研究所,哈尔滨,150081;黑龙江省林业科学研究所,哈尔滨,150081;黑龙江省林业科学研究所,哈尔滨,150081;黑龙江省林业科学研究所,哈尔滨,150081;黑龙江省林业科学研究所,哈尔滨,150081【正文语种】中文【中图分类】S718.3胡桃楸(Juglans mandshurica Maxim.),为胡桃科胡桃属落叶乔木[1-2],是我国北方地区珍贵的用材林和经济林树种,木材材性优良,利用价值高;果实营养丰富,食用价值高;树体(根、茎、叶等)化学成分丰富,药用价值高。
被列为国家Ⅱ级珍稀树种和中国珍稀濒危树种的三级保护植物[3]。
近些年,随着人们对胡桃楸制作的家具、果实外表皮青衣的药用、果仁营养的重视,人工栽植面积开始不断增加。
胡桃楸育苗的传统生产模式还是以播种繁殖为主,由于胡桃楸属于深休眠种子,存在着休眠处理方法、出苗率、变异性等多种问题。
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2 .D e p a r t m e n t o f H o r t i c u l t u r e ,U n i v e r s i t y o f G e o r g i a , A t h e n s .G A 3 0 6 0 2 ,U S A)
Ab s t r a c t :P i n u s m a s s o n i a n a(ma s s o n p i n e)i s h e a r d t o b e p r o p a g a t e d v e g e t a t i v e l y a n d s o m a t i c e m b r y —
并去 除鳞 片和针 叶 ,能有效 降低外植 体污 染率 ;外植 体经 流水 冲洗 2~3 h 、去 除鳞片 和针 叶后切成 长约 0 . 2~ 0 . 5 c m的薄片后接种 ,能大大降低培养过程 中外植 体的褐化率。
关键 词 :马尾松 ;组织 培养 ;愈 伤组织 ;冷藏处 理 ;采 集时期
Ex p l a n t s we r e i n o c u l a t e d o n t o i mp r o v e d GD me di um wh i c h c o n t a i ne d v a  ̄o u s h o r mo ne s,t h e n c u hu r e d i n t he d a r k c o n d i t i o n a t 2 4 ~2 5 o C.Th e in f d i n g s we r e t h a t :S t o r a g e d u r a t i o n h a d no s i g n i ic f a n t i n f l u e n c e o n
摘 要 :马尾松 ( P i n u s m a s s o n i a n a)无性繁殖 困难 ,研究常采用体细胞胚胎 发生和器官发 生的方式繁殖 ,外植
体采集时期是实验成功 的关键 。本实 验采 用 2 0 1 1 年 1 O月 至 2 0 1 2年 1 0月期间 ( 每周或每两周 采集 1 次 )采集的 马尾松枝梢顶端分生组织为外植体 ,并将外植体 置于 4 ℃ 冰箱冷藏做不 同冷 藏时间处理 ( 4~I 1 4天 ) 。处 理后的 外植体接种在添加不 同激素浓度 的改 良 G D培养基 中,2 4— 2 5 ℃条件 下暗培养。实验结果 表明 :冷 藏时间对马尾 松愈伤组织诱导没有显 著影 响 ;2 0 1 2年 3月 中旬至 4月底采集 的马尾松外植体 ,愈伤组织诱导率最高达 8 9 . 8 %, 其平均诱导率达 到 8 0 % 以上 ;外植体经流水 冲洗 2~ 3 h 、7 5 %的酒精处理 2 0— 3 0 S 、0 . 1 % 的升汞处理 9—1 0 m i n
外 植 体 采集 时期 与 冷 藏处 理对 马尾 松 愈 伤 组 织 诱 导 的影 响
伊 书亮 ,张冬林 ,杨模华 ,李志辉 ,王 茜 ,史 昆
( 1 .中南林 业科技 大学林 学 院 ,湖 南 长 沙 4 1 0 0 0 4; 2 .乔 治亚 大学 园艺 系,美 国 乔 治亚 州 雅 典 市 3 0 6 0 2 )
(1 .C o l l e g e o f F o r e s t y, r C e n t r a l S o u t h U n i v e r s i t y o f F o r e s t y r a n d T e c h n o l o g y ,C h a n g s h a 4 1 0 0 0 4, C h i n a ;
第4 2卷 第 1 期 2 0 1 3年 3月
文 章 编 号 :1 0 0 6—1 1 2 6— 2 0 1 3( 1 ) 一 0 0 0 8— 0 6
广 西
林
业
科
学
Vo 1 . 4ห้องสมุดไป่ตู้ No .1 Ma r . 2 O1 3
G u a n g x i F o r e s t r y S c i e n c e
Pi n u s ma s s o n i a n a wa s c o l l e c t e d mo n t h l y,b i — we e k l y ,o r w e e k l y a n d r e f ig r e r a t e d a t 4 ℃ f o r 4 t o 1 1 4 d a y s .
中 图 分 类 号 :¥ 7 9 1 . 2 4 8 文 献 标 识 码 :A
Ef fe c t s o f Ex p l a n t Co l l e c t i n g Ti me a n d S t o r a g e Dur a t i o n o n
o g e n e s i s a n d o r g a n o g e n e s i s a r e u s u a l l y a p pl i e d b y r e s e a r c he r s .Ho we v e r ,wh e n t o c o l l e c t e x pl a n t s i s t h e ke y t o s uc c e s s f u l l y mi c r o - p r o pa g a t e d i t . Du ing r Oc t o b e r 2 01 1 t o Oc t o b e r 2 01 2, s h o o t a p i c a l me r i s t e m o f
Ca l l u s I n d u c t i O n O f Pi n u s ma s s o n i a n a
YI S h u . 1 i a n g ,Z HANG Do n g . 1 i n t ,rANG Mo — h u a ‘
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L I Z h i . h u i ,WA N G Q i a n , S H I K u n