骨髓造血干细胞

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hematopoietic stem cell
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12/5/2005
造血干细胞移植进展 4
干细胞移植进展
第一部分 基础理论 第二部分 实验技术 第三部分 临床移植
1．骨髓造血干细胞的基本概念
骨髓造血干细胞(hematopoietic
造血干细胞移植进展
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1.体外培养原理
1.
骨髓造血干细胞的体外培养指 在模拟体内生理环境等特定的 体外条件下，进行干细胞的孵 育培养，使之生存并生长。造 血干细胞体外培养呈悬浮状生 长，无需底物支持。
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3.动物取材
在置备细胞悬液之前须将目
的细胞所在组织材料分散成 单细胞。 机械分离和酶学解离是将组 织分散成单细胞最常用的方 法。
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3.1细胞悬液的制备

介绍两种方法：
–①在无菌条件下利用穿刺法从髂骨抽
取骨髓，缓慢加入到比重为1.077g/㎝ 3的淋巴细胞分离液中，经密度梯度离 心吸取白细胞层，多次离心后可得到 骨髓单个核细胞（BMNC），重新悬浮 在含有10U/ml肝素的RPMI-1640液中， 制成细胞悬液。

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（HSC）向神经细胞（NC）分化 及其治疗脊髓损伤的研究
NSC分离提纯技术尚未成熟，想要得到一 定数量一定纯度的NSC困难较大。 NSC较脆弱，易受各种因素的影响，即使 分离提纯出NSC，也很难断定这些神经干 细胞仍具有正常功能和特性，以及将这 些“神经干细胞”注入神经系统后能否 分化为一定数量的神经细胞。

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（HSC）向神经细胞（NC）分化 及其治疗脊髓损伤的研究

3）对干细胞的认识首先从HSC开始，因 此关于HSC的研究较NSC要深入得多。

4）HSC呈悬浮状态，再采集和培养等过 程中损伤较小。
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（HSC）向神经细胞（NC）分化 及其治疗脊髓损伤的研究
临床价值 可将HSC培养分化出“神经细胞” 的特 性及功能，将这些“神经细胞”注入神 经系统病变局部，从而替代或部分替代 受损神经细胞的功能治疗神经系统疾病。 HSC源自患者本人，既可以避免移植后免 疫排斥反应，年龄的限制也可延长。

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（HSC）向神经细胞（NC）分化 及其治疗脊髓损伤的研究

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预期研究成果

1、骨髓干细胞可诱导分化为具有神经细 胞功能的细胞
2、骨髓干细胞诱导分化的神经细胞对脊 髓损伤有治疗作用
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第二部分
实验技术
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1.问题
①如何取得干细胞 ②如何体外培养干细胞 ③如何保持体外培养干细胞的生物学 特性
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神经性疾病 我们与昆医神经科学研究 所的合作研究表明，骨髓的 CD34+细胞移植对恢复全脊髓 损伤有治疗作用，相关论文 正在审稿之中。
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（HSC）向神经细胞（NC）分化 及其治疗脊髓损伤的研究
干细胞移植成为治疗神经系统退行性疾 病唯一可能有效的手段。但是，目前NSC 移植还未广泛用于临床实践中，原因主 要有3点： NSC取材困难，需做开颅手术，对患者创 伤较大，给患者带来较大痛苦。再加上 神经系统退行性疾病患者多为高龄者， 故患者已经受不住神经干细胞移植。
造血干细胞移植
进展
云南省肿瘤医院血液科 何明生 博士
1999年12月美国《SCIENCE》
人类干细胞研究
列入人类十大科学成就
榜首
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2003年度
十大科学进展中同样涉及了干 细胞，即鼠的胚胎干细胞在培养 皿中既能发育成精子也能发育成 卵子，有望发展出新一代的试管 婴儿技术。
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有高度的自我更新能力和 多向分化潜能，不断的产 生髓系、红系和淋巴系细 胞。
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神经性疾病 南佛罗里达医学院和佐治 亚医学院的研究人员在2003 年美国神经年会上报告，将 血液中的干细胞移植到卒中 大鼠的大脑中能大大促进大 脑的功能恢复。
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神经性疾病 巴西圣保罗大学的研究小 组从30例脊椎损伤所致瘫痪 患者的血液中抽取干细胞， 再注入患者脊椎动脉血管， 几个月后，12例患者的瘫痪 肢体恢复了知觉。
stem cell,HSC)是指存在于骨髓 中的一小群具有无限或较长期的 自我更新能力,并具有多向分化
潜能的原始造血细胞
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1．骨髓造血干细胞的基本概念

传统观念认为HSC的生物学特征是： –①具有高度增殖分裂能力； –②能多向分化产生各系血细胞； –③可移植性； –④能自我更新(self-renew) ，持久地 维持正常造血功能。
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2.骨髓造血干细胞的研究历史
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2.骨髓造血干细胞的研究历史
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造血干细胞移植 在近30年里迅猛发展壮大至今 1990年，美国的Thomas因在骨 髓移植中做出重要贡献，从而共 同获得该年度的诺贝尔生理奖和 医学奖，这是临床医学首次获得 此项殊荣。
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4．造血干细胞的体内特性
骨髓造血干细胞来源于胚胎干细胞
的成血－血管内皮细胞，经由卵黄 囊、胎肝、胸腺、脾、最后到骨髓， 在体内不断增殖发育，产生髓系、 红细胞系和淋巴细胞系，逐步分化 至各系成熟血细胞。
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4．造血干细胞的体内特性
骨髓造血干细胞在体内具

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（HSC）向神经细胞（NC）分化 及其治疗脊髓损伤的研究
与NSC相比HSC具有以下优点： 1）HSC取材容易，无论是骨髓HSC还是外 周血HSC的采集都具有创口小、患者痛苦 小、安全性高的特点。 2）HSC的分离提纯技术已较为成熟，可 较容易的得到一定数量一定纯度的HSC。
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3. 造血干细胞的体外研究
造血干细胞向红细胞分化 造血干细胞向粒细胞分化 造血干细胞向单核细胞分化 造血干细胞向淋巴细胞分化 造血干细胞向血小板分化 造血干细胞向NK细胞分化

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3. 造血干细胞的体外研究
造血干细胞还可向心肌
细胞分化、肝细胞、神经组 织细胞、血管内皮细胞等非 血液细胞分化