药物分析：第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
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第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类
第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类 局麻药物的分析
主讲人 肖国君
一、结构、性质与分析方法
O
（一）对氨基苯甲酸酯类
H R 1N
C OR2
盐酸普鲁卡因 (procaine hydrochloride)
苯佐卡因(benzocaine)
盐酸氯普鲁卡因 (chloroprocaine hydrochloride)
2010年版：检查对氨基苯甲酸，离子对色谱法 盐酸普鲁卡因注射液 均检查对氨基苯甲酸 ChP 2005年版：TLC法 2010年版：离子对色谱法
2005年版盐酸普鲁卡因注射液中检查“对氨基苯甲酸”
方法：——杂质对照品法
硅胶H薄层板
TLC法
展开剂：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4） 对二甲氨基苯甲醛显黄色
3 指示终点的方法
（1）永停滴定法： ChP、BP多采用
主要原理：
NaNO2滴定时，达终点前， NaNO2产
生的HNO2用于重氮化反应，不与电极作
用，检流计无电流通过不偏转；达到终点
时，溶液中微量HNO2即会使电极起氧化 还原反应，检流计指针突然偏转，且不再 回复。
阳极：NO + H2O
HNO2 + H+ + e
乳白色
（二）与重金属离子反应
1、 与CuSO4反应 盐酸利多卡因 Na CO 蓝紫色
2 3
CuSO4
CHCl3
CHCl3层黄色
盐酸普鲁卡因、丁卡因、苯佐卡因，同样条件下不发生此反应。
2、 与CoCl2反应
盐酸利多卡因
CoCl2 H+
亮绿色细小
3、与Hg2+反应
主讲人 肖国君
一、结构、性质与分析方法
O
（一）对氨基苯甲酸酯类
H R 1N
C OR2
盐酸普鲁卡因 (procaine hydrochloride)
苯佐卡因(benzocaine)
盐酸氯普鲁卡因 (chloroprocaine hydrochloride)
2010年版：检查对氨基苯甲酸，离子对色谱法 盐酸普鲁卡因注射液 均检查对氨基苯甲酸 ChP 2005年版：TLC法 2010年版：离子对色谱法
2005年版盐酸普鲁卡因注射液中检查“对氨基苯甲酸”
方法：——杂质对照品法
硅胶H薄层板
TLC法
展开剂：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4） 对二甲氨基苯甲醛显黄色
3 指示终点的方法
（1）永停滴定法： ChP、BP多采用
主要原理：
NaNO2滴定时，达终点前， NaNO2产
生的HNO2用于重氮化反应，不与电极作
用，检流计无电流通过不偏转；达到终点
时，溶液中微量HNO2即会使电极起氧化 还原反应，检流计指针突然偏转，且不再 回复。
阳极：NO + H2O
HNO2 + H+ + e
乳白色
（二）与重金属离子反应
1、 与CuSO4反应 盐酸利多卡因 Na CO 蓝紫色
2 3
CuSO4
CHCl3
CHCl3层黄色
盐酸普鲁卡因、丁卡因、苯佐卡因，同样条件下不发生此反应。
2、 与CoCl2反应
盐酸利多卡因
CoCl2 H+
亮绿色细小
3、与Hg2+反应
8第八章对氨基苯甲酸和酰苯胺类局麻药的分析
三、UV
注射用盐酸丁卡因的含量
【含量测定】 取本品10瓶，分别加水溶解，并分别定量转移至 250ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取 盐酸丁卡因对照品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1mL 中约含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与 对照品溶液各3mL，分别置于100mL量瓶中，加盐酸溶液（1200）5mL与磷酸盐缓冲液（pH 6.0）10mL，用水稀释至刻度， 摇匀，照紫外-可见分光光度法，在310nm的波长处分别测定吸 光度，计算每瓶的含量，求出平均含量，即得。
Fe + 3HCl
CO NCH2CH2N(C2H5)2 3 O
酯键的水解，可以区 分下述两种药物
五、吸收光谱特征 1、UV：结构中均含有苯环
盐酸布比卡因的鉴别：在263nm与271nm的波长处有最大 吸收；其吸光度分别为0.53~0.58与0.43~0.48. 盐酸普鲁卡因胺片的鉴别：在280nm的波长处有最大吸收。
盐酸利多卡因与对氨基苯 甲酸酯类药物的区别
二、与重金属离子反应
2、盐酸普鲁卡因胺
2
NH2
+ H 2O 2
+ H 2O
在过氧化氢的存在 下能被氧化成羟肟 酸，再与铁配位
CO NHCH2CH2N(C2H5)2 NH2
3
+ FeCl3
CO NCH2CH2N(C2H5)2 OH
CO NCH2CH2N(C2H5)2 OH NH2
CH3
CH3
高氯酸非水滴定
2
NHCOCH2N(C2H5)2· HCl+Hg(Ac)2 2
NHCOCH2N(C2H5)2· HAc+HgCl2
CH3 CH3
注射用盐酸丁卡因的含量
【含量测定】 取本品10瓶，分别加水溶解，并分别定量转移至 250ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取 盐酸丁卡因对照品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1mL 中约含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与 对照品溶液各3mL，分别置于100mL量瓶中，加盐酸溶液（1200）5mL与磷酸盐缓冲液（pH 6.0）10mL，用水稀释至刻度， 摇匀，照紫外-可见分光光度法，在310nm的波长处分别测定吸 光度，计算每瓶的含量，求出平均含量，即得。
Fe + 3HCl
CO NCH2CH2N(C2H5)2 3 O
酯键的水解，可以区 分下述两种药物
五、吸收光谱特征 1、UV：结构中均含有苯环
盐酸布比卡因的鉴别：在263nm与271nm的波长处有最大 吸收；其吸光度分别为0.53~0.58与0.43~0.48. 盐酸普鲁卡因胺片的鉴别：在280nm的波长处有最大吸收。
盐酸利多卡因与对氨基苯 甲酸酯类药物的区别
二、与重金属离子反应
2、盐酸普鲁卡因胺
2
NH2
+ H 2O 2
+ H 2O
在过氧化氢的存在 下能被氧化成羟肟 酸，再与铁配位
CO NHCH2CH2N(C2H5)2 NH2
3
+ FeCl3
CO NCH2CH2N(C2H5)2 OH
CO NCH2CH2N(C2H5)2 OH NH2
CH3
CH3
高氯酸非水滴定
2
NHCOCH2N(C2H5)2· HCl+Hg(Ac)2 2
NHCOCH2N(C2H5)2· HAc+HgCl2
CH3 CH3
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析汇编
对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析（一）基本结构局麻药的化学结构通常包括三部分：1. 亲脂性芳香环2. 中间连接功能基3.亲水性胺基 NH 2中间连接功能基 药物类别 典型药物 酯键 对氨基苯甲酸酯 盐酸普鲁卡因 酰胺键酰苯胺盐酸利多卡因药物类别 基本结构 典型药物及结构 对氨基苯甲酸酯盐酸普鲁卡因酰苯胺类盐酸利多卡因（二）性质+ 中间连接功能基+ NH 21. 吸收光谱特性+脂肪胺侧链（UV+IR ）2. 弱碱性 NH 2（成盐，与生物碱沉淀剂发生沉淀）3. 芳伯胺基特性 NH 2（重氮化-偶合反应，与芳醛缩合成Schiff 碱反应，易氧化变形）4. 水解特性 酯键及酰胺键5. 与重金属离子反应特性 酰胺键 （与铜离子或钴离子络合，生成有色的配合物沉淀，该沉淀可溶于有机溶剂而呈色。
（三）鉴别试验1. 化学鉴别法① 重氮化-偶合反应原理：分子结构中具有芳伯胺基或潜在芳伯胺基的药物，均可发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。
直接： 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺（在酸性溶液中与亚硝酸钠作用，生成重氮盐；再与碱性β-萘酚偶合，产生红色偶氮化合物。
）间接： 盐酸丁卡因（分子中的芳仲胺基，在酸性溶液中可与亚硝酸钠作用，生成乳白色的N-亚硝基化合物沉淀。
） ② 水解反应盐酸普鲁卡因 Ch.P （2010）【鉴别】取本品约0.1g ，加水2ml 溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml ，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。
苯佐卡因 ChP （2010）【鉴别】取本品约0.1g ，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成； 加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。
③ 与重金属反应a. 盐酸利多卡因 1）与铜离子反应 盐酸利多卡因+硫酸铜 →→→蓝紫色→→→黄色2）与钴离子反应在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。
南医大药物分析第08章 对氨基苯甲酸酯类药物的分析ppt
苯佐卡因 NaOH 乙醇 乙醇 I2 NaOH CHI（3 碘仿臭气，黄色 ）
（四）制备衍生物测熔点
1．三硝基苯酚衍生物
盐酸利多卡因 ChP（2010） [鉴别] 取本品0.2g，加水20ml溶解。 （ 1 ） 取 溶 液 10ml ， 加 三 硝 基 苯 酚 试 液 10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤 后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点 为228～232℃，熔融时同时分解。
如酰氨基邻位存在甲基，空间位阻难 于水解，较稳定。
（二） 酯键或酰胺键易水解 （三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与 生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴 别或非水碱量法测定含量。 水溶液无 法直接滴定，需用非水滴定。 （四）游离碱难溶于水，易溶于有机 溶剂，其盐可溶于水。
（五） 盐酸利多卡因（布比卡因，罗 哌卡因）分子结构酰胺基氮可在水溶 液中与铜离子或钴离子络合，生成有 色配位化合物沉淀，沉淀可溶于氯仿 显色。
m/z:253,盐酸羟普鲁卡因[M+1]+ ，盐酸氯普鲁卡因光水解产物 m/z:172,[M+1]+ 4-氨基-2-氯苯甲酸准分子离子峰
四、含量测定
（一）亚硝酸钠滴定法 1. 原理 具芳伯氨基的药物
Ar NH2 + NaNO2 + 2 HCl
+ Ar CNl- N+ NaCl+ 2 H2O
ChP(2010年):
氯仿
黄色
苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等 不发生此反应。
盐酸利多卡因 CoCl 2 H 亮绿色细小
与汞离子的反应
盐酸利多卡因 Hg（NO3）2 HNO3、黄色
对氨基苯甲酸酯类 Hg（NO3）2 HNO3、红色或橙黄色
（四）制备衍生物测熔点
1．三硝基苯酚衍生物
盐酸利多卡因 ChP（2010） [鉴别] 取本品0.2g，加水20ml溶解。 （ 1 ） 取 溶 液 10ml ， 加 三 硝 基 苯 酚 试 液 10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤 后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点 为228～232℃，熔融时同时分解。
如酰氨基邻位存在甲基，空间位阻难 于水解，较稳定。
（二） 酯键或酰胺键易水解 （三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与 生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴 别或非水碱量法测定含量。 水溶液无 法直接滴定，需用非水滴定。 （四）游离碱难溶于水，易溶于有机 溶剂，其盐可溶于水。
（五） 盐酸利多卡因（布比卡因，罗 哌卡因）分子结构酰胺基氮可在水溶 液中与铜离子或钴离子络合，生成有 色配位化合物沉淀，沉淀可溶于氯仿 显色。
m/z:253,盐酸羟普鲁卡因[M+1]+ ，盐酸氯普鲁卡因光水解产物 m/z:172,[M+1]+ 4-氨基-2-氯苯甲酸准分子离子峰
四、含量测定
（一）亚硝酸钠滴定法 1. 原理 具芳伯氨基的药物
Ar NH2 + NaNO2 + 2 HCl
+ Ar CNl- N+ NaCl+ 2 H2O
ChP(2010年):
氯仿
黄色
苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等 不发生此反应。
盐酸利多卡因 CoCl 2 H 亮绿色细小
与汞离子的反应
盐酸利多卡因 Hg（NO3）2 HNO3、黄色
对氨基苯甲酸酯类 Hg（NO3）2 HNO3、红色或橙黄色
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
四、含量测定
（一）亚硝酸钠滴定法 (2) 加过量HCl加速反应：
①重氮化速度加快； ②重氮盐在酸性介质中稳定； ③防止生成氨基偶氮化合物。
Ar-N2+Cl- + H2N-Ar
Ar-N=N-NH-Ar + HCl
一般摩尔比为Ar-NH2 : HCl = 1 : 2.5~6 。
Ch.P2010中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸 普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜 及注射液水解后用本法。
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
NHCOR + H2O
H+ △
还原
NO2 + 6[H]
NH2 + RCOOH
NH2 + 2H2O
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
药物分析
第八章
对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
游奎一
湘潭大学化工学院
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
本章主要内容
第一节 结构与性质 第二节 鉴别试验 第三节 特殊杂质与检查 第四节 含量测定
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
学习要求
一、掌握对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药 物的结构和性质，代表性药物的鉴别、检查和 含量测定的基本原理与方法。
Ar-NH2
HCl NaNO2
重氮盐 OH-
-萘酚
橙黄~猩红色
生成偶氮染料
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（一）重氮化-偶合反应 直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺、
医学课件第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
1、盐酸利多卡因 三硝基苯酚 盐酸布比卡因
三硝基苯酚利多卡因 （mp. 228~232℃） 三硝基苯酚布比卡因
（mp. 194℃）
25％硫氰酸铵溶液
2、盐酸丁卡
丁卡因硫氰酸盐
因
5％醋酸钠溶液 （ mp. 131℃ ）
(六)UV
药物 对乙酰氨基酚
苯佐卡因 盐酸丁卡因
溶剂
浓度 (μg/ml)
稀HCl-甲醇(1:99) 10
在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：
NaNO2+HCl→HNO2+NaCl
HNO2+HCl→NOCl（亚硝酰氯）+H2O
Ar NH2 NO Ar NH NO Ar N N OH Ar N2Cl
慢
快
快
加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重 氮化反应速度。
（2）酸的种类及其浓度
4. 弱碱性：叔胺氮原子＋生物沉淀剂→沉淀
5. 酰胺氮原子与金属离子络合显色
第二节 鉴别试验
(一)重氮化-偶合反应
分子中存在芳伯胺基或存在潜在芳伯胺基的药物，均可 与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β-萘酚 偶合生成有色的偶氮染料。
NH2
+ NaNO2
R
N2+Cl-
+
R
H+
N2+Cl-
1.原理
Ar NH2 + NaNO2+ 2 HCl
+ Ar CNl- N+ NaCl+ 2 H2O
具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯
氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，
芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
相关练习题
95：75．中国药典所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点 的方法为（ ）
A. 电位法 B. 永停法 C. 外指示剂法 D. 内指示剂法 E. 自身指示剂法
相关练习题
96：127．亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有 （）
A. 自身指示剂法 B. 内指示剂法 C. 永停法 D. 外指示剂法 E. 电位法
CH3 O
NH C
C3H7 N
. HCl 盐酸罗哌卡因
CH3
NH2 NH
O
. HCl
盐酸妥卡尼
三、主要理化性质
1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易 氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。
2. 水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸 丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均 为对氨基苯甲酸。
H N NO
快
N N OH
快
N N+Cl-
重氮化的反应历程为：
KBr + HCl
HBr + KCl
HNO2 + HBr
NOBr + H2O
∵ KHBr 比KHCl大300倍
∴生成NOBr量大得多
∴加快反应速度
(2) 加过量HCl加速反应： ①重氮化速度加快； ②重氮盐在酸性介质中稳定； ③防止生成氨基偶氮化合物。
Ar-NH2 + NaNO2 + 2HCl
Ar-N2+Cl- + NaCl + 2H2O
2. 测定主要条件：
(1) 加KBr增加反应速度
重氮化的反应历程为：
NaNO2 + HCl
HNO2 + NaCl
HNO2 + HCl
第八对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
工作电压：20 KV
检测波长：220 nm
38
分析样品的处理：
血浆→碱化→（乙醚：二
氯甲烷）萃取→离心→挥
干有机溶剂→缓冲溶液溶 解残渣→进样分析
39
离子对的浓度：是控制反相离子对色谱溶质保留值的主要因 素，通常对离子的浓度为320mmol/L。 流动相pH的选择：调解流动相的pH值可在较大范围内，改变 弱酸或弱碱样品的保留值和分离选择性。通常测定酸性物质
时调至pH77.5；测定碱性药物时调至pH33.5。
二、盐酸普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查：LC-
标准溶液在液面下加入，可避免HNO2挥发。
到近终点时把滴定管提出液面，用水冲 洗后再继续滴定至终点。
33
3. 指示终点的方法
重氮化滴定法指示终点的方法有:
永停法
电位法
外指示剂法 内指示剂法
我国药典主要采用永停滴定法指示终点
34
+
R1 R2
(1) 永停滴定法 溶液 终点前： 无过量 HNO2 终点时：有过量 HNO2 (2) 外指示剂法 用KI-淀粉指示剂 指示终点的原理： 2NaNO2 + 2KI + 4HCl
11
盐酸普鲁卡因胺的鉴别反应-羟肟酸铁的反应
具有芳酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与 FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕 黑色。如盐酸普鲁卡因胺。
NH2 H2O2 NH2 FeCl3 NH2 Fe CONOCH2CH2N(C2H5)2
CONHCH2CH2N(C2H5)2
CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2
NHCOCH2N(C2H5)2 CH3 O2N
OH
NO2 NO2
药物分析第(8)章
H2N
COO(C2H5)2 + NaOH
H2N
COONa + CH3CH2OH
CH3CH2OH+ 4I2 + 6NaOH
22
CHI3 + 5NaI + HCOONa + 5H2O
四、 制备衍生物测熔点 1. 三硝基苯酚衍生物的制备： 利多卡因和布比卡因
NHCOCH2N(C2H5)2 O N 2 CH3
醋氨苯砜
CH3 NHCO CH3 C4H9 N
.
HCl
盐酸布比卡因
5
三、主要理化性质
1. 芳伯氨基特性: 显重氮化-偶合反应; 与芳醛缩合 成Schiff碱的反应；易氧化变色 。(盐酸丁卡因， 无) 2. 水解性：因分子结构中有酯键。 3. 弱碱性：能与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应；在 非水溶剂中能滴定。
28
注射用盐酸丁卡因
(2)
取含量测定项下的溶液，照紫外-可见分光 A)测定，在227nm与310nm
光度法(附录Ⅳ
的波长处有最大吸收。
29
盐酸普鲁卡因胺注射液
【鉴别】
(1)
取本品适量，加水制成每1ml
中含盐酸普鲁卡因胺5μg的溶液，照紫外-可见 分光光度法(附录Ⅳ 长处有最大吸收。 A)测定，在280nm的波
【鉴别】 (1) 取本品0.2g，加水20ml
溶解后，取溶液2ml，加硫酸铜试液0.2ml与碳 酸钠试液1ml，即显蓝紫色；加三氯甲烷2ml， 振摇后放置，三氯甲烷层显黄色。
15
盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴试液作用， 生成亮绿色钴盐沉淀。
CH3 NHCOCH2N(C2H5)2 + CoCl2 CH3
药物成分：对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
概述
局麻药物是一类能在用药部位局部可逆性地阻 断感觉神经冲动发生与传导的药物
亲酯性芳 香环
对氨酰基苯苯胺甲类酸酯类
R3
R1HRN1
O
局麻药物H 的 结构N C CR2 OR2
O
R4
亲水性胺 基
中间连接 功能基
主要内容
1
结构与性质
2
鉴别试验
3
特殊杂质与检查
4
含量测定
5
体内药物分析
第一节 结构与性质
盐酸丁卡因的鉴别
取本品0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰 酸铵溶液1ml，即析出白色沉淀；滤过，结晶用水洗涤，在 80℃干燥后，熔点约为131 ℃ 。
五、吸收光谱特征
1 紫外吸收光谱
药物
溶剂 浓度
盐酸布比卡因 0.01mol/L盐酸 0.40mg/mL
盐酸普鲁卡因胺
水
5μg/mL
峰 位(cm-1)
1645 1604，1520 1271，1170，1115
归属
δN-H (胺基) νC=C (苯环) νC-O (酯基)
酯基
盐酸普鲁卡因
CH3
CH3 O
N ● HCl C4H9
盐酸布比卡因(Bupivacaine Hydrochloride)
NH C CH3 O
N
● HCl
C3H7
盐酸罗哌卡因(Ropivacaine Hydrochloride)
主要理化性质
1. 芳伯氨基特性
(1) 重氮化－偶合反应；(2)与芳醛缩合成Schiff碱；(3) 易氧化变色等
CH3 NH C CH2N(C2H5)2 Co 2+
CH3 O
第8章对氨基苯甲酸酯类药物分析(2012)
加入溴化钾（ChP2010规定加入2g）
KBr + HCl
HNO2 + HBr HNO2 + HCl
HBr + KCl
NOBr + H2O NOCl + H2O
KHBr KHCl
∵ KHBr 比KHCl大300倍 ∴生成NOBr量大得多 ∴加快重氮化反应速度
(2)加过量盐酸加速反应： 因胺类药物盐酸盐溶解度﹥硫酸盐 ①重氮化反应速度加快 ②重氮盐在酸性溶液中稳定 ③防止生成偶氮氨基化合物
密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水 40ml与盐酸溶液（1→2）15ml，置电磁搅拌器 上，搅拌使溶液，再加溴化钾2g，插入铂-铂电 极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用 亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速 滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的 尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入 溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏 转，并不再回复，即为滴定终点。
H2N
CONCH2CH2N(C 2H5)2 + H2O OH
FeCl3
H 2N
CONCH 2CH 2N(C 2H 5)2 O
Fe + 3 HCl
3
紫红色
暗棕色
棕黑色
三、水解产物反应 1.盐酸普鲁卡因的鉴别
盐酸普鲁卡因+NaOH→白色↓（普鲁卡因）
H2N COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl
NaOH
N2+Cl
_
+ NaCl + 2H2O COOCH2CH2N(C2H5)2
HO
_ + N2 Cl
N N OH + + NaOH
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第八章
对氨基苯甲酸酯和 酰苯胺类局麻药物的分析
主要内容：
结构与性质 鉴别试验 杂质检查 含量测定 体内药物分析
芳胺类——氨基直接与苯环相连的药物 芳烃胺类——氨基在烃基侧链上的药物
第一节 结构与性质
一、对氨基苯甲酸酯类
（一）基本结构与典型药物
O丁卡因
盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺
2.IR
特征性强，专属性好
盐酸普鲁卡因 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱 （光谱集397图）一致 。
第三节 特殊杂质检查
一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查
来源：水解产物 方法：HPLC
杂质对照品法
对氨基苯甲酸 取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制
成每lml中含0.2mg的溶液，作为供试品溶液；另取对氨基
间接反应（潜在芳伯氨基） 对乙酰氨基酚、醋氨苯砜、贝诺酯
对乙酰氨基酚 ChP（2010） 取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，置水浴中加
热40分钟，放冷；取0.5ml，滴加亚硝酸钠试液5 滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液
2ml，振摇，即显红色。
（二）芳香第二胺反应 盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）
（六）光谱法
1.UV －－含有苯环
盐酸布比卡因 ChP（2010） 取本品，精密称定，按干燥品计算，加 0.01mol/L 盐 酸 溶 液 制 成 每 1ml 中 含 0.40mg 的 溶 液，照紫外-可见分光光度法测定，在263nm与 271nm的波长处有最大吸收；其吸光度分别为 0.53～0.58与0.43～0.48。
加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过， 沉 淀 用 水 洗 涤 后 ， 105℃ 干 燥 ， 熔 点 为 228 ～ 232℃，熔融时同时分解。
盐酸布比卡因 ChP（2010）
2. 硫氰酸盐衍生物
盐酸丁卡因 ChP（2010）
取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解 后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶； 滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，熔点约为 131℃。
（二）性质
1.具有芳伯氨基——重氮化-偶合反应。
（盐酸丁卡因除外）
2.具有酯结构——易水解
3.具有脂烃胺侧链——弱碱性(叔胺氮原子) 与酸成盐，与生物碱试剂反应
4.具有苯环结构——紫外吸收
5.溶解性——游离碱难溶于水，易溶于有机溶 剂；盐酸盐易溶于水，难溶于有机溶剂。
二、酰胺类
（一）基本结构与典型药物
Q1 苯甲酸对照品，精密称定，加水溶解并定量制成每lml中含
1μg的溶液，作为对照品溶液；取供试品溶液lml与对照品
溶 液9ml混合均匀，作为系统适用性试验溶液。照高效液
Q2
相色谱法（附录VD)试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂；以 含0. 1%庚烷磺酸钠的0. 05mol/L磷酸二氢钾溶液
（用磷酸 调节pH值至3.0)-甲醇（68 :32)为流动相；检测波
（四）水解产物反应
－－酯键水解生成的水解产物
（盐酸普鲁卡因、苯佐卡因）
1. 盐酸普鲁卡因 ChP（2010） 取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧
化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油 状物；继续加热，发生的蒸气，能使湿润的红色 石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷， 加盐酸酸化，即析出白色沉淀。
NH2
NH2
NaOH
NaOH
COOCH2CH2N(C2H5)2.HCl
COOCH2CH2N(C2H5)2
NH2
+ HOCH2CH2N(C2H5)2
可使湿润的红色石蕊试纸变蓝
COONa
HCl
NH2
NH2.HCl
HCl
COOH 白色
COOH
2. 苯佐卡因 ChP（2010） 取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮
与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀
NH(CH2)3CH3
NaNO2 H+
COOCH2CH2N(CH3)2
NO
N(CH2)3CH3
乳
白 色
COOCH2CH2N(CH3)2
（三）与金属离子反应
1. 与铜和钴离子反应 （盐酸利多卡因/布比卡因/罗哌卡因）
2．羟肟酸铁盐反应 （盐酸普鲁卡因胺）
具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物
Ar
NH2
HCl NaNO2
重氮盐
OH- 橙黄～猩红色
萘酚
直接反应（游离芳伯氨基） 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺、对氨基水杨酸钠
苯佐卡因和盐酸普鲁卡因 ChP（2010）
本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ） （通则0301）
取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓 缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液 数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同， 生成由橙黄到猩红色沉淀。
R3
R1
NH C R2
O R4
盐酸利多卡因
盐酸布比卡因
盐酸罗哌卡因（USP）
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
（二）性质
1.具酰胺结构－－水解后的重氮化-偶合反应 水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应
利多卡因、布比卡因、罗哌卡因等因邻位 有2个甲基，受空间位阻的影响，较难水解。
2.具叔胺氮原子－－弱碱性 能与酸成盐 能与生物碱沉淀试剂反应
3.重金属离子反应－－酰胺的氮与铜/钴离 子生成配位化合物
4.苯环结构－－紫外吸收
5.溶解性－－游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂； 盐易溶于水，难溶于有机溶剂。
结构特点
对氨基苯甲酸酯类： 具有游离的芳伯氨(或仲胺)基， 对位有取代
酰苯胺类： 芳伯氨基被酰化，对位有取代
第二节 鉴别试验
（一）重氮化—偶合反应 (芳香第一胺类的鉴别反应)
沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生 成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。
NH2
NH2
+ NaOH
+ C2H5OH
COOC2H5
C2H5OH + I2 +NaOH
COONa
CH3I + HCOONa + H2O 黄色
（五）制备衍生物测定熔点
1.三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因 ChP（2010） 取本品2g，加水20ml溶解后，取溶液10ml，
Q3
长为 279nm。取系统适用性试验溶液10μ1，注入液相色谱 仪，理论板数按对氨基苯甲酸峰计算不低于2000，盐酸普
鲁卡因峰和对氨基苯甲酸峰的分离度应大于2.0。取对照品
溶液l0 μ1, 注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰
髙约为满量程 的20%。精密量取供试品溶液与对照品溶液
对氨基苯甲酸酯和 酰苯胺类局麻药物的分析
主要内容：
结构与性质 鉴别试验 杂质检查 含量测定 体内药物分析
芳胺类——氨基直接与苯环相连的药物 芳烃胺类——氨基在烃基侧链上的药物
第一节 结构与性质
一、对氨基苯甲酸酯类
（一）基本结构与典型药物
O丁卡因
盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺
2.IR
特征性强，专属性好
盐酸普鲁卡因 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱 （光谱集397图）一致 。
第三节 特殊杂质检查
一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查
来源：水解产物 方法：HPLC
杂质对照品法
对氨基苯甲酸 取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制
成每lml中含0.2mg的溶液，作为供试品溶液；另取对氨基
间接反应（潜在芳伯氨基） 对乙酰氨基酚、醋氨苯砜、贝诺酯
对乙酰氨基酚 ChP（2010） 取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，置水浴中加
热40分钟，放冷；取0.5ml，滴加亚硝酸钠试液5 滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液
2ml，振摇，即显红色。
（二）芳香第二胺反应 盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）
（六）光谱法
1.UV －－含有苯环
盐酸布比卡因 ChP（2010） 取本品，精密称定，按干燥品计算，加 0.01mol/L 盐 酸 溶 液 制 成 每 1ml 中 含 0.40mg 的 溶 液，照紫外-可见分光光度法测定，在263nm与 271nm的波长处有最大吸收；其吸光度分别为 0.53～0.58与0.43～0.48。
加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过， 沉 淀 用 水 洗 涤 后 ， 105℃ 干 燥 ， 熔 点 为 228 ～ 232℃，熔融时同时分解。
盐酸布比卡因 ChP（2010）
2. 硫氰酸盐衍生物
盐酸丁卡因 ChP（2010）
取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解 后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶； 滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，熔点约为 131℃。
（二）性质
1.具有芳伯氨基——重氮化-偶合反应。
（盐酸丁卡因除外）
2.具有酯结构——易水解
3.具有脂烃胺侧链——弱碱性(叔胺氮原子) 与酸成盐，与生物碱试剂反应
4.具有苯环结构——紫外吸收
5.溶解性——游离碱难溶于水，易溶于有机溶 剂；盐酸盐易溶于水，难溶于有机溶剂。
二、酰胺类
（一）基本结构与典型药物
Q1 苯甲酸对照品，精密称定，加水溶解并定量制成每lml中含
1μg的溶液，作为对照品溶液；取供试品溶液lml与对照品
溶 液9ml混合均匀，作为系统适用性试验溶液。照高效液
Q2
相色谱法（附录VD)试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂；以 含0. 1%庚烷磺酸钠的0. 05mol/L磷酸二氢钾溶液
（用磷酸 调节pH值至3.0)-甲醇（68 :32)为流动相；检测波
（四）水解产物反应
－－酯键水解生成的水解产物
（盐酸普鲁卡因、苯佐卡因）
1. 盐酸普鲁卡因 ChP（2010） 取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧
化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油 状物；继续加热，发生的蒸气，能使湿润的红色 石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷， 加盐酸酸化，即析出白色沉淀。
NH2
NH2
NaOH
NaOH
COOCH2CH2N(C2H5)2.HCl
COOCH2CH2N(C2H5)2
NH2
+ HOCH2CH2N(C2H5)2
可使湿润的红色石蕊试纸变蓝
COONa
HCl
NH2
NH2.HCl
HCl
COOH 白色
COOH
2. 苯佐卡因 ChP（2010） 取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮
与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀
NH(CH2)3CH3
NaNO2 H+
COOCH2CH2N(CH3)2
NO
N(CH2)3CH3
乳
白 色
COOCH2CH2N(CH3)2
（三）与金属离子反应
1. 与铜和钴离子反应 （盐酸利多卡因/布比卡因/罗哌卡因）
2．羟肟酸铁盐反应 （盐酸普鲁卡因胺）
具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物
Ar
NH2
HCl NaNO2
重氮盐
OH- 橙黄～猩红色
萘酚
直接反应（游离芳伯氨基） 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺、对氨基水杨酸钠
苯佐卡因和盐酸普鲁卡因 ChP（2010）
本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ） （通则0301）
取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓 缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液 数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同， 生成由橙黄到猩红色沉淀。
R3
R1
NH C R2
O R4
盐酸利多卡因
盐酸布比卡因
盐酸罗哌卡因（USP）
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
（二）性质
1.具酰胺结构－－水解后的重氮化-偶合反应 水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应
利多卡因、布比卡因、罗哌卡因等因邻位 有2个甲基，受空间位阻的影响，较难水解。
2.具叔胺氮原子－－弱碱性 能与酸成盐 能与生物碱沉淀试剂反应
3.重金属离子反应－－酰胺的氮与铜/钴离 子生成配位化合物
4.苯环结构－－紫外吸收
5.溶解性－－游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂； 盐易溶于水，难溶于有机溶剂。
结构特点
对氨基苯甲酸酯类： 具有游离的芳伯氨(或仲胺)基， 对位有取代
酰苯胺类： 芳伯氨基被酰化，对位有取代
第二节 鉴别试验
（一）重氮化—偶合反应 (芳香第一胺类的鉴别反应)
沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生 成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。
NH2
NH2
+ NaOH
+ C2H5OH
COOC2H5
C2H5OH + I2 +NaOH
COONa
CH3I + HCOONa + H2O 黄色
（五）制备衍生物测定熔点
1.三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因 ChP（2010） 取本品2g，加水20ml溶解后，取溶液10ml，
Q3
长为 279nm。取系统适用性试验溶液10μ1，注入液相色谱 仪，理论板数按对氨基苯甲酸峰计算不低于2000，盐酸普
鲁卡因峰和对氨基苯甲酸峰的分离度应大于2.0。取对照品
溶液l0 μ1, 注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰
髙约为满量程 的20%。精密量取供试品溶液与对照品溶液