第二章 卫生样品的采集与处理
样品的采集与处理
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• 固相萃取 • 原理：样品中被分离组分和其他组分与萃
取柱中固定相的作用力不同
• SFE • 超临界流体：易溶解其他物质，易进入样
品基体内 • 常用超临界流体：CO2 • 蒸馏：常压，减压，水蒸气 • 挥发：顶空，气体萃取
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• 膜分离法：透析，超滤，液膜 • 原理：选择性渗透 • 动力：外界能量或化学位差
有机溶剂浸出法：易溶于有机溶剂的成分
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• 结合态——分解法
• • 全部分解法——无机成分
• • 干灰化法 • （1）高温灰化，450~550℃。
（2）低温灰化，高频等离子体技术。
• 湿消化法 • 硝酸、硫酸、高氯酸、高锰酸钾、过氧化氢 • 硝酸—硫酸消化、 • 硝酸-高氯酸或硝酸-过氧化氢消化 • 硝酸-硫酸-高氯酸消化
.
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• 密封加压消化法 • 密闭罐消化，防止挥发性元素损失 • 微波溶样法
• 部分分解法——有机成分 • 酸水解、碱水解、酶水解 • eg：食品中结合态脂肪的测定
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• 常用的分离与富集方法 溶剂萃取 固相萃取 固相微萃取 超临界流体萃取 蒸馏与挥发 膜分离
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• 溶剂萃取： • 液-液萃取，液-固萃取，液-气萃取 • 原理：物质在互不相溶的两相中分配系数
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3
• 对化学事故（或中毒事件）可供采集的 样品有现场样品（环境、食品、化学品 及其它用品等）及患者的生物材料（血、 尿、胃内容物、组织）。采样时机可以 选在事发现场救助时、医院抢救和治疗 时、甚至在病人恢复时，某些中毒甚至 可在事件发生后数十天仍有可能采集到 有价值的样品。现场遗留的食物、化学 品、盛装的容器是首先应采集的样品
第二章 样品采集与处理
随机取样：随机中有规律：查随机数表、抓阄法、
微机确定等。海关、收货方查看食品质量；卖方也
利用此法查库存的产品质量
六、 样品的处理方法：测定微生物指标时样品的处理 方法 液体直接 吸取25毫升到225毫升无菌水中配制为10-1
样品液。
粉状称取25克到225毫升无菌水中大于25rpm振荡。
固体称取25克，在灭菌的均质器内均质后到入225毫
样品必须标记清楚(如品名、来源、数量、采样地点、 采样人及采样年、月、日)。
5）、送检
3、无菌取样的要求 １）无菌样品的采集在收集过程中，本身应避免污染，然后放入消毒容 器中。 2）取样、检验前的准备工作 包装无菌取样的工具 其它准备 盒子或制冷皿、灭菌容器、取样工具、灭菌手套、灭菌全包装袋。
当采集无菌样品时，一条最重要的规则是：千万别污染样品。
４、固体样品
使用双套回转取样管，对大仓装的袋（或件）进行抽样， 将样品合并混匀，按四次法或用分样器分取平均小样。小 袋装样品按规定取样数量直接拣取小袋样品。
５、液体样品
一般可采用虹吸法，或者用简单的玻璃管按不同深度分 层取样。对于粘稠或含有固体悬浮或非均匀液体应充分搅 匀，然后再进行取样。
６、小包装、玻璃瓶装和盒装样品
按取样数量将内容物连同包装一起采样。取样时，玻璃 广口瓶应预先洗净、烘干，按取样的品种、生产日期、班 次、批号及类别写在标签上，封贴在广口瓶上。
五、常见的抽样方法 选择性取样：生产的全过程任意环节取样。实 验室留样分析原因，改进生产。
客观性取样一般按班次或批次取样， 因产品而定。跟踪产品质量监督。
二、样品种类
1、检样大小分类：样品种类可分为大样、中样、小样三种。大样系指一整批，中样 是从样品各部分取得的混合样品，小样系指做分析用，称为检样。检样一般以25g为 准，中样以200g为准。
第二章样品预处理方法【共57张PPT】
由于试剂未经纯化致使色谱分析中往往呈现额外的杂质峰。 ☞更严重的是干扰物在每批溶剂或试剂中有所不同，而影响不同实验室间、各分析人员间的实验结果。 0.
（3）温度 常用的溶剂有水、稀酸、稀碱、稀盐等，也可以采用不同比例的有机溶剂，如：乙醇、丙酮、氯仿、四氯化碳
使用方法
❖可先用6到10倍柱体积的去离子水或弱缓冲液平 微透析技术：实质上是一种膜分离技术，它利用膜透析原理，微量地对细胞液进行流动性连续采样的新型采样和色谱样品制备技术。
衡， 影响盐析的条件 盐的饱和浓度
动物体内—药物及代谢产物、糖类及有关化合物、脂类、维生素、核甘、核甘酸及其衍生物、磷酸酯类化合物、固醇类化合物、氨基酸、多肽、蛋
使用方法 ❖可先用6到10倍柱体积的甲醇或乙腈活化，再用 6到10倍柱体积的水或缓冲液平衡，不要让小柱 干了
❖样品溶解在强一些极性的溶剂中 ❖加入样品
❖用强极性溶剂洗脱不想要的组份
❖用极性弱些的溶剂洗脱第一组感兴趣的组份
❖用极性更弱的溶剂洗脱剩下的感兴趣的组份
确认回收率
各种SPE小柱（三）
❖ 离子交换
❖变离子型化合物为非离子型，用反相方法分离 ❖ 典型的例子
氨基酸分析
加速溶剂萃取（ASE）
ASE 是用溶剂对固体、半固体的样品进行萃取的技术.
ASE 的原理是选择合适的溶剂、通过增加温度和压力来提高 萃取过程的效率.
ASE 可用来替代索氏提取、超声萃取、手工振摇、煮沸法和 其他萃取方法
三种不同型号的ASE
组感兴趣的组份 以1～5ml/min流速洗脱样品
❖用更强的缓冲液洗脱剩下的感兴趣的组份
确认回收率
采样、样品制备和预处理
复检样品：在对检验结果有争议或分歧时作
复检用 保留样品：需封存保留一段时间（通常一个
月），以备有争议时再作验证，但易变质 食品不作保留。
4.采样的一般方法
随机抽样
代表性取样
按照随机原则，从大批 初料中抽取部分样品。
所有初料的各个部分都 有被抽到的机会
用系统抽样法进行采样，根据 样品随空间（位置）、时间变 化的规律，采集能代表其相应 部分的组成和质量的样品。 （如分层取样、随生产过程流 动定时取样、按组批取样、定 期抽取货架商品等 ）
10）感官不合格产品不必进行理化检验，直接判为 不合格产品。
二、样品制备
（一）样品制备
按采样规程采取的样品往往数量过多，颗粒太大， 组成不均匀。
必须对样品进行粉碎、混匀、缩分——样品制备
1.样品制备的总原则
要防止易挥发性成分的逸散 、避免样品组成和 理化性质发生变化 ；
做微生物检验的样品，要按照无菌操作规程制 备
（8）超声波辅助萃取（Ultrasonic Assisted Extraction，UAE）
超声波发生器能发出高频振荡讯号，通过换 能器可以转换成高频机械振荡而传播到介质 中，超声波在介质中疏密相间地向前辐射， 使介质流动而产生数以万计的微小气泡，由 空化效应而形成超过1000个大气压的瞬间 高压，从而加速了溶剂萃取过程。
亚临界水与常温常压下的水在性质上有 较大差别，它类似于有机溶剂
水在250℃时介电常数为27，介于常温 常压下乙醇(ε=24)和甲醇(ε=33)之间
对中等极性和非极性有机物具有一定的 溶解能力
适用：处理各种固体和半固体样品中的 挥发性和半挥发性有机物
静态SBWE主要是通过控制加热的温度， 压力和时间等因素来到达最优萃取条件。
卫生化学样品分析的一般步骤
3）化学保存法：向样品加酸、碱或其他化学试剂作为调节 剂、抑制剂或防腐剂等。（控制pH、加防腐剂、稳定剂、 冷冻）
如血样加抗凝剂；尿样中加少量浓HNO3防腐。
注意：选择合适样品存放的器皿，避光，金属离子溶出。
不论何种方法保存，采样后都应及时尽快分析。间
隔越短结果越准确。
保存方法、保存时间整理需课通件 过实验确定。
b 要正确地确定总体，采样才具代表性。总体为被检 验的具相同属性的一批物质。不同属性的物料不能构 成一个总体。
例：调查西安市人口的高血压发病率，采样要不同年
龄，不同性别设定多个采整样理课点件
5
2.典型性：
针对检验目的，采集能充分说明此目的典型样品。
如：掺假食品、假烟、假酒等，应挑选可疑部分送检。
如：食物中毒，应采吃剩食品、餐具、呕吐物等检验。
4. 硝酸-硫酸- 因高氯酸高温下易爆炸，应注意：
用于消化难
高氯酸
① 通风橱常清洗；
消化的样品
（或H2O2） ② 补加时应将消化液冷却至50~60 C°，
切记不可高温下加入。
整理课件
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第三章 样品分析的一般步骤
湿消化法注意事项：
① 消化必须在通风橱中进行，因消化过程 中产生大量的酸雾、氮和硫的氧化物，有很强 的刺激性、腐蚀性和毒性。
整理课件
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方法
原理
溶剂萃取法 利用物质在两种互不相溶的 （液液萃取 溶剂中分配情况不同而进行
法） 分离
适用范围
从液体中分离 有机物，也可分 离金属离子
用超临界流体作萃取剂，从 超临界流体 复杂样品中分离提取待测组
萃取 分的提取分析技术。
利用色谱柱固定相保留被测 固相萃取法 组分，然后少量溶剂将其洗 （液固萃取 脱下来，达到分离、富集的
公共卫生基本操作技能——第二章 样品的采集与现场检测
公共卫生基本操作技能——第二章样品的采集与现场检测考情分析本章样品采集与现场检测是在第三站第一题的位置，分为样品采集和现场检测两部分内容。
题目为两者之一。
样品采集为三部分：环境样品、食品样品、医院消毒效果检测。
这部分内容较多，考生遇见的可能性大。
现场检测主要为仪器的使用方法和注意事项等，这部分内容相对少，但是要注意仪器使用细节，容易丢分。
考试大纲样品采集1.环境样品◆水样品采集◆空气样品采集◆公共用品采集2.食品样品散装食品（固态、液态）的微生物样品采集3.医院消毒效果检测空气、手、物体表面、医疗用品、消毒剂的样品采集现场检测仪器的操作：噪声测定仪、风速仪、照度仪、紫外辐照计水样品采集采样前准备采样容器的选择水样采集一般要求类型▲水源水（河流、湖泊、水库水、地下水）▲出厂水▲末梢水（龙头水）▲二次供水▲分散式供水1.水源水（河流、湖泊、水库水、地下水）采样工具：河流、湖泊、水库水和自涌泉---水桶直接采集一定深度的水---直立式采水器非自涌泉水、深井水---充分抽汲后采集（1）河水样品的采集河流不同深度的采样点（垂直）不同规模河流的采样点（断面）河流采样断面的设置（2）湖泊、水库水样品的采集采样断面的设置①进入湖泊、水库的河流汇合口处。
②在生活污水和工业污水的排污口、城乡生活饮用水源取水口的辐射线上设置弧形采样断面。
③在湖泊、水库中心和沿水流流向以及滞流区分别设置采样断面。
④风景游览区、游泳场、排灌站、不同鱼类的回游产卵区和水生生物经济区等处设置采样断面。
（3）地下水样品的采集地下结构复杂，调查与监测点的设置受到限制1）浅层地下水监测点：目标井及周围30m范围的井及河流。
2）深层地下水和泉水：结合情况在补给水源范围内的井及河流布点。
3）机井水、手压泵井：泵抽水、压水15min后采集水样。
2.出厂水的采集出厂水：集中式供水单位水处理工艺完成的水采样点：水出厂进入输配水管网前监测点：集中式供水单位的出水口处采样点数=水厂出水口数末梢水采样点数公共卫生基本操作技能---末梢水样品采集一、测定一般理化指标的水样采集1.选择采样容器——5000ml（5L）的聚乙烯采样桶。
食品卫生微生物检验样品的采集和处理
食品卫生微生物检验样品的采集和处理食品卫生微生物检验样品的采集和处理食品卫生微生物检验样品的采集和处理一、范围适用于各类食品样品的采样。
二、采样用品灭菌探子、铲子、匙、采样器、试管、吸管、广口瓶、剪子、开罐器等。
三、样品的采集在食品检验中，所采集的样品必须有代表性。
食品中因其加工批号、原料情况（来源、种类、地区、季节等）、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节（例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防鼠等设备）及销售人员的责任心和卫生认识水平等均可影响食品卫生质量，因此必须考虑周密。
1、采样数量每批样品要在容器的不同部位采取，一般定型包装食品采取一袋/瓶（不少于250g）及散装食品采取250g.2、采样方法(1) 采样必须在无菌操作下进行。
(2) 根据样品种类，袋装、瓶装和罐装食品，应采完整的未开封的样品。
如果样品很大，则需要无菌采样器取样；固体粉末样品，应边取边混合；液体样品通过振摇混匀；冷冻食品应保持冷冻状态（可放在冰内、冰箱的冷盒内或低温冰箱内保存），非冷冻食品需在1℃～5℃中保存。
3、采样标签采样前或后应贴上标签，每件样品必须标记清楚(如品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间等)。
四、送检样品送到微生物检验室应越快越好。
如果路途遥远，可将不需冷冻样品保持在1℃～5℃环境中(如冰壶)。
如需保持冷冻状态，则需保存在泡沫塑料隔热箱内（箱内有干冰可维持在0℃以下）。
送检时，必须认真填写申请单，以供检验人员参考。
五、检验微生物检验室接到送检申请单，应立即登记，填写实验序号，并按检验要求，立即将样品放在冰箱或冰盒中，积极准备条件进行检验。
各食品微生物检验室必须备有专用冰箱存放样品。
一般阳性样品，发出报告后3d(特殊情况适当延长)，方能处理样品。
进口食品的阳性样品，需保存6个月，方能处理。
阴性样品可及时处理。
检验完后，检验人员应及时填写原始记录，签名后，送质控办出具检验报告。
第二章 样品采集与检测结果报告
食品安全快速检测技术 食品安全快速检测技术
食品安全快速检测技术 食品安全快速检测技术
八、采样的具体方法
均匀固体物料，如粮食、 粉状食品等
八、采样的具体方法
均匀固体物料，如粮食、 粉状食品等
第一节 样品的采集与保存 第一节 样品的采集与保存 第一节 样品的采集与保存
确定采样件数 综合检样获得（ 原始样品 ）
二、采样的意义
尽管一系列检验工作非常精密、准确，但如 果采取的样品不足以代表全部物料的组成成 分，则其检验结果也将毫无价值，甚至得出 错误结论，造成重大经济损失以至误伤人 命，酿成大祸。
采样的正确与否，是检验工作成败的关键！
食品安全快速检测技术 食品安全快速检测技术
食品安全快速检测技术 食品安全快速检测技术
较稠的半固体物料，如 奶油、果酱等
液体物料，如植物油、 鲜乳等
组成不均匀的固体食 品，如肉、鱼、果蔬等
五点法取样 取样数=5+3 （ n-1） 取样数=5+3（
食品安全快速检测技术 食品安全快速检测技术
食品安全快速检测技术 食品安全快速检测技术
八、采样的具体方法
均匀固体物料，如粮食、 粉状食品等
八、采样的具体方法
第一节 样品的采集与保存 第一节 样品的采集与保存 第一节 样品的采集与保存
第一节 样品的采集与保存
较稠的半固体物料，如 奶油、果酱等 液体物料，如植物油、 鲜乳等
组成不均匀的固体食 品，如肉、鱼、果蔬等
较稠的半固体物料，如 奶油、果酱等 液体物料，如植物油、 鲜乳等 组成不均匀的固体食 品，如肉、鱼、果蔬等
可疑不合格的食品及食品原料 可疑不合格的食品容器、餐具、包装材料、运输工具等 发生食物中毒的可疑食物、病人呕吐物、排泄物、血液等 超过保质期限的食品及原料 为仲裁需检验的食品
卫生化学笔记：样品的采集 样品的预处理
样品的采集一、卫生分析样品的特点1.品种繁多（空气、水、土壤、食品、日用化学品、生物材料样品）2.待测物质众多（无机物、有机物；毒物、营养物质）3.样品基体复杂，干扰物多（有机物与无机物混杂）4.待测组分含量低。
（待测物含量水平为微量、痕量、超痕量）二、样品的采集概述采样的三原则1.代表性2.典型性3.稳定性固体样品的采集：四分法将样品按照测定要求磨细，过一定孔径的筛子，然后混合，平铺成圆形，分成四等分，取相对的两份混合，然后再平分，直到达到自己的要求液体样品的采集：化学成分易受化学、物理及生理条件变化的影响。
气体样品的采集：样品的温度和压力是十分重要的参数三、各类样品的采集与保存（一）空气样品的采集与保存v 待测物质在空气中存在状态：气体和蒸气气溶胶（颗粒物质，尘、烟、雾）v 采集方法可分为两大类：直接采集法浓缩采集法v 方法选择依据：待测物状态待测物浓度测定方法灵敏度1.采集方法直接采样法：注射器采样法；塑料袋采样法；真空采样法；置换采样法不适用于采集气溶胶状态的污染物浓缩采样法：固体吸附法；液体吸收法；滤纸和滤膜阻流法；冷阱收集法固体吸附法：气态、蒸汽态物质。
吸附剂有硅胶、活性炭、分子筛等。
液体吸收法：气泡吸收管：气态、蒸汽态多孔玻板吸收管：气态、蒸汽态、雾态冲击式吸收管：烟、尘、气溶胶滤纸和滤膜阻流法：气溶胶，烟、尘样品微孔滤膜，超细玻璃纤维滤纸，定量滤纸冷阱收集法：低沸点物质冷冻剂：冰，冰-食盐，干冰-乙醇，干冰，液氮等2.采集仪器收集器流量计抽气动力装置3.采集点的布设大气监测布点原则：选择有代表性区域；选风向的上风口；选不同污染物的地；采集高度离地1.5-2.0m；采集条件尽量一致。
作业场所采集点：选有代表性工作地点；尽可能靠近劳动者；正常工作状态；有害物浓度最高时段；一般不超过15min。
室内空气采样点：数量依面积定；避开通风口；离墙50cm以上，离门窗家具1m以上；室外1-2个点对照。
第二章样品的采集与预处理
（二）分配色谱
利用不同组分在两相中的不同分配系数来进行分离。 （溶解度的不同） 固定相——固体支持剂（担体）+固定液 流动相——气体或液体（与固定相不相溶） 纸层析： 纸是支持剂，结合水为固定相，溶剂作为流动相。
（一）浸提法 （从固体中萃取有效成分） 用适当的溶剂将固体样品中某种待测成分浸提 出来，又称“液——固萃取法”。
1. 提取剂的选择 由相似相溶原理选择
选溶剂沸点在45～80℃之间的，低，易挥发； 高， 不易提纯，浓缩，溶剂与提取物不好分离。
选稳定性好的溶剂。
2. 提取方法： 1）振荡浸渍法 2）捣碎法 3）索氏提取法
1. 硫酸磺化法（磺化法）
用浓硫酸处理样品，引进典型的极性官能团 SO3使脂肪、色素、蜡质等干扰物质变成极性较 大，能溶于水和酸的化合物，与那些溶于有机溶 剂的待测成分分开。
主要用于有机氯农药残留物的测定。
2. 皂化法
原理: 酯 + 碱
酸或脂肪酸盐 + 醇
（1） 用于白酒中总酯的测定，用过量的NaOH 将酯皂化掉，过量的碱再用酸滴定，最后由用 碱量来计算总酯。
③有机物分解彻底，操作简单。
缺点
①所需时间长。 ②因温度高易造成易挥发元素的损失。 ③坩埚对被测组分有吸留作用，使测定结 果和回收率降低。
2. 湿法消化
原理：样品中加入强氧化剂，并加热消煮，使 样品中的有机物质完全分解、氧化，呈气态逸 出，待测组分转化为无机物状态存在于消化液 中。
常用的强氧化剂有浓硝酸、浓硫酸、高氯酸、 高锰酸钾、过氧化氢等。
第二章-样品的采集保存和预处理
2.1样品的采集和保存
正确取样应满足以下要求： 1. 大批试样(总体)中所有组成部分都有同等的被采集的几率
；
2. 根据给定的准确度，采取有次序的或随机的取样，使取样 费用尽可能低；
3. 将 n 个单元的试样彻底混合后，再分成若干份，每份分
析一次。
第六页，编辑于星期三：二十三点 十五分。
4、采集的样品至少三份，分别供检验、复查和仲裁之 用。
第八页，编辑于星期三：二十三点 十五分。
2.1样品的采集和保存
2.1.2 样品采集方法简介
空气
在进行大气监测、作业场所空气中有害成分的监测、室内 空气和公共场所空气质量的监测，需要采集空气样品。
由于空气污染物的种类及来源不同，它们的物理化学
性质及在空气中的存在状态也不同，有的以气态（ NOX 、SO2 、CO、 O3 等）或蒸气状态（苯、甲醛、丙烯醛等
直接采集法
应用前提：用于空气中被测组分含量较高或分析方法较灵敏 的情况，反映瞬间浓度。
工具：注射器、塑料袋、真空瓶等
第十页，编辑于星期三：二十三点 十五分。
2.1样品的采集和保存
浓缩采集法 应用前提：当空气中被测物质的浓度较低或所用分析方法不 能直接测定出其含量。
仪器：收集器、流量计和抽气动力
按收集器的不同分为四类: （1）溶液吸收法 （2）固体吸附剂法 （3）滤纸滤膜阻留法 （4）冷阱收集:也叫低温浓缩
第十一页，编辑于星期三：二十三点 十五分。
2.1样品的采集和保存
（1）溶液吸收法 适用范围：吸收气态、蒸气、气溶胶物质 吸收液：水、水溶液、有机溶剂
❖ 吸收液要求 1）应对被测物有较大的溶解度 2）与其发生化学反应的速度快，吸收率高 3）与后续的分析测定方法相匹配 例：测定空气中的氨气，使用稀硫酸作为吸收液
第二章 样品的采集处理与初步检验
第二章样品的采集处理与初步检验食品分析的对象不仅包括我们熟悉的大宗农副产品（粮食、果蔬、水产品）、生产原料、生产辅料、包装材料、产成品及半成品。
无论食品分析对象是什么，都遵循同样的样品采集程序：即样品的采集、制备和保存、样品预处理、样品分析、原始数据记录及整理和撰写分析报告。
第一节样品采集一、采样：指在大量产品（分析对象中）抽取有一定代表性样品，供分析化验用，此项工作简称采样。
尽管检验工作精密而准确，但采样准确决定着结论的谬误与否。
正确采样原则包括：（1）采集的样品要均匀、有代表性，能反映全部被检食品的组成、质量和卫生状况。
（2）采样方法要与分析目的一致。
（3）采样过程要设法保持原有的理化指标，防止成分逸散（如水分、气味、挥发性酸等）。
（4）防止带入杂质或污染。
（5）采样方法要尽量简单，处理装置尺寸适当。
二、样品的分类检样：指由整批食物的各个部分采取的少量样品，称为检样。
检样的量一般按产品标准的规定。
按照检样的程序，分为原始样品和平均样品。
原始样品——是把许多份检样综合在一起称为原始样品。
平均样品——是原始样品经过处理再抽取其中一部分作检验用者称为平均样品。
原始样品应至少一式三份,分别供检验、复验及备查使用。
而且每份样品数量一般不少于0.5kg。
三、采样的一般方法分为随机抽样和代表性抽样，两者均有广泛应用。
随机抽样：均衡地、不加选择地从全部产品的各个部分取样。
随机指保证所有物料的各个部分被抽到的可能性均等，随机≠随意。
因此采样时应避免加入主观印象取样，如依外观、个人意愿等。
随机抽样的方法有多种，如：掷骰子：简便易行，适于生产现场用；采用随机数表：见P376页附表；用计算器或计算机产生随机数；用抽奖机产生。
代表性抽样：用系统抽样法根据样品随空间位置、时间变化规律，采集能代表其相应部分组成和质量的样品。
如：分层取样法、定时取样法、按批取样法等。
也因分析对象不同而异。
如：粘稠不易混匀的液体，从包装内上、中、下部位分别取样；全蔬菜的营养成分测定要从茎、枝、叶分别取，粉碎后混匀；测鱼头的二甲胺就取鱼头部位。
第二章 卫生样品的采集与处理
22:06:54
（二）固相萃取法
Solid phase extraction，SPE
固相萃取： 液-固分离 分离载体： 一般为硅氧基甲烷， 颗粒直径40-80 μm
分离原理:
利用样品中被分离组
分与萃取柱中固定相的作用力（吸
附、分配和离子交换等）不同而进
行分离。
22:06:54
固相萃取柱
固相萃取装置：
解:一次萃取
20 m1 20 ( ) 0.454 mg 43 20 20
20 0.454 E 100 % 97.7% 20
22:06:54
两次萃取
20 2 m2 20 ( ) 0.0395 mg 43 10 20
20 0.0395 E% 100 % 99.8% 20
22:06:54
（3）萃取率E
溶质 A在有机相中的总量 E 100% 溶质 A的总量
萃取效率和分配比的关系是：
coVo E% 100% coVo c wVw D 100% Vw D Vo
式中Vw/Vo称为相比。 萃取率由分配比和相比决定
22:06:54
在实ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ分离工作中，萃取率E 最有意义。
22:06:55
（四）超临界流体萃取法 1.原理 超临界流体萃取: 气-固萃取 萃取剂: 超临界条件下的气体 特 点：粘度低，接近零的表面张力，比 很多液体容易渗透固体颗粒，易于除去。
22:06:55
超临界萃取分离设备组成及流程：
22:06:55
内容选择：
第一节 样品的采取和制备
第二节 样品的处理
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浓缩采集
1. 直接采集法 容器预先抽真空，在现场采集样品；或 通过采样泵将气体样品直接引进容器。 2. 浓缩采集法（富集法） 空气样品中待测组分浓度较低时，使用 此法。 溶液吸收法 固体吸收剂阻留法 滤纸滤膜阻留法 冷阱收集法
卫生理化检验第二章 样品采集
第二章样品采集样本采集（sampling）方法与技术直接影响检验结果的可靠性，即如果样本采集不合理，后续的分析方法和仪器即使很先进，也仍然得不到可靠的结果。
目前状况是，分析方法和分析仪器比较先进，相对而言，对采样方法和采样技术（包括采样仪器）的研究更应给予重视。
第一节样品的代表性采样时要求所采集的样本有代表性（representative），才能以其测量的结果进行统计分析。
采样的基本原则是随机抽样。
即样本应代表所来自的总体，将定义的总体划分为若干独立的采样单位，再按随机的原则从所有这些抽样单位中抽样一部份实测，此抽取的一些单位就组成了该总体的一个随机样本。
由于卫生检验工作中样本的种类多，取样条件变化大，用一般的随机抽样方法有时存在困难，应按不同的实际情况采用不同的组成随机样本的方法。
一、单纯随机抽样法（random sampling）当所要监测的样本其总体各部份之间分布比较均匀时可采用单纯随机抽样的方法。
将总体划分为若干采样单位，把全部抽样单位编上号，然后用抽签的方法或应用随机数字表在编号范围内抽取一些数，编号代表的抽样单位就组成一个随机样本。
例如在某地区范围内抽样时可以将该地区划分为面积相等的抽样单位，把每块截取的面积编上号(查阅随机数字表)。
如果该地区是长方形的，可将该地区看作是一个平面直角坐标系中的一个象限(例如第一象限)。
如此地区的长度共等分为100段，宽度共分为30段，则可用随机数字表中读出的从00到99的数字表示长度段上的编号，再将读出的从00到29的数字表示宽度段上的编号(一个相当于x轴，另一个相当于Y轴)，这两个数合在一起就决定了所抽得的格子的位置。
当样本的总体由几个不同特征的部分所构成(如有的地段其污染物的浓度很高而另一些地段又很低时)而采集的样本数又较小时，用这种方法组成的样本对总体的代表性有时可能很差。
二、分层抽样法（layer-sampling）分层抽样法也称为分组抽样法（group-sampling）。
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硝酸-硫酸法
湿消化法 硝酸-高氯酸（H2O2)法 硝酸-硫酸-高氯酸法
密封加压消化法
微波溶样法
部分分解法
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三、常用的分离与富集方法
问题的提出
实际样品的复杂性
分析方法灵敏度的 局限性
干扰的消除
满足对灵敏 度的要求
控制实验条件
使用掩蔽剂 分离
选择灵敏度高 的方法
富集
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2.样品处理的要求 ① 必须使样品分解完全，回收率足够高 ② 不能引入干扰测定的物质和待测物质 ③ 方法简单易行，速度快
二、样品溶液的制备方法
1.溶解法
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水溶法 酸浸出法 碱浸出法 有机溶剂浸出法
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2.分解法
高温灰化法（450-550℃）
干灰化法 低温灰化法（高频等离子 体技术)
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造成肌溶解的原因有很多，常见的 是酗酒、外伤、癫痫、机体过劳、肌肉 缺血性萎缩、遗传原因等等，但某些药 物也可能造成这种病，几乎每个地方都 提 到 的 是 降 胆 固 醇 药 statins 、 可 卡 因 、安非他明、海洛因，等等。
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龙虾中毒引发的肌肉损伤和肌红蛋
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四个步骤： 活化 装样 清洗 洗脱
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图 2-3 固相萃取过程
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固相萃取法一般程序为：
选适宜SPE管 润湿载体
加入样品溶液到载体 洗涤除去共存物 洗脱待分离物质
固相萃取柱
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（三）固相微萃取技术
始于1992年，加拿大的Janusz Pawliszyn
萃取效率和分配比的关系是：
E% coVo 10% 0 D 10% 0
coVocwVw
DVw
Vo
式中Vw/Vo称为相比。
萃取率由分配比和相比决定
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在实际分离工作中，萃取率E 最有意义。
最常采用--等体积溶剂进行萃取，即相比为1， 此时萃取率可写成:
E D 10% 0 D1
一次萃取：E > 90%以上，D>10 E > 90%以上，D>100
二、治疗效果：如果非典真的是衣原体造成的，那就 一点也不可怕了。因为只要正确使用抗菌素，衣原体感染 是可以控制的。当时那么多国内甚至国际一流的专家会不 考虑到这个？
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后来的发展证实了我的看法，相信国内很多医务人员 也经历过和我一样的疑惑。
那么，为什么在非典的病人标本上会发现衣原体“包涵 体”呢？这其实是病原学研究时，最基本的需要分辨的， 即“宿主”还是“过客”这一最基本的问题。
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例：
海水中 U （IV） 的测定
C = 1 ~ 3 g / L
难以测定
富集为 C = 100 ~ 200 g / L 可以测定
分离效果
干扰成分减少至不再干扰 待测组分有效回收
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分离效果的好坏用回收率衡量
回收率 %） （ 分原 离始 后含 测量 量 10% 0值
常量组分，含量 > 1%， 回收率 > 99 % 以上
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例. 8-羟基喹啉-CHCl3对Al 3+ 的萃取
A l(H 2O )63++
N 3
O H
N Al+ H + 3+ H 2 6O
O3
亲水
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水合离子的正电 疏水 性被中和，亲水 的水分子被疏水 有机大分子取代
溶于CHCl3
8-羟基喹啉 萃取剂
CHCl3
溶剂
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• 例2. 用8-羟基喹啉氯仿溶液，于pH=7.0时从 水溶液中萃取La3+，已知它在两相中的分配比 D=43。现取含La3+为lmg·mL-1的水溶液 20.00mL，用20.00mL萃取液，计算一次萃取 和分两次萃取（每次10.00mL）的萃取效率。
解:一次萃取
m 12(0 4 32 2 0 02)00.45 m 4g
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三、各类样品的采集方法
（一）空气
大气监测 工作场所空气中有害成分监测 室内空气质量监测 公共场所空气质量监测
直接采集 样品的采集方法 浓缩采集
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1. 直接采集法 容器预先抽真空，在现场采集样品；或
通过采样泵将气体样品直接引进容器。
2. 浓缩采集法（富集法）
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2.尿
24小时混合尿 取样方法 晨尿
某时间的一次尿
采样仪器：聚乙烯瓶或用硝酸溶液
浸泡过的玻璃瓶 3.毛发
取样方法：枕部距头皮2cm左右的发段
4.组织
取样：肝、肾、肺等脏器，冷冻保存
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第二节 样品的处理
一、样品处理的目的和要求
1.样品处理的目的 ① 使被测组分从复杂样品中分离出来，制成 可被测定的形式。 ② 去除干扰测定的物质 ③ 必要时进行浓缩富集 ④ 可通过衍生化使难测定物质转化为易于测 定的物质形式
“宿主”是指病原体是造成疾病的病因；“过客”是指 病原体只是在疾病出现后，由于环境的改变，适合它在此 繁殖，即上面文章中所说的“继发感染”。
具体到上述的在非典的病人标本上会发现衣原体“包涵 体”的原因是这样：非典病人受到冠状病毒的侵犯后，肺 部环境发生了巨大的变化。原来衣原体无法生存的地方变 成衣原体生长的“沃土”，从而出现了继发衣原体感染。
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结束
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1. 萃取分离的基本原理
亲水性 离子型化合物 极性
物质
相互转换
疏水性 共价键化合物 弱极性或非极性
萃取分离的实质
将待萃取组分由亲水性转化为疏水性，使其萃
入有机相中。 反萃取
例. 8-羟基喹啉-CHCl3 对Al 3+ 的萃取
萃取的反过程（将组分从有机溶液中萃取到水 溶液中）。
第二章
第一节 样品的采取
样品的采集与处理 和制备
第二节 样品的处理2020/4/27 NhomakorabeaB
1
卫生样品分析的一般程序： 影响结果
样品的采集和保存
准确度
样品的预处理*
分析方法的选择及试样的测定
分析数据的处理
分析报告的撰写
卫生分析工作的第一步：样品的采集
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第一节 样品的采取和保存
一、几个基本概念
(1)分配系数
有机溶剂从水相中萃取溶质A，若A在两相 中的存在形态相同，平衡时，在有机相的浓度
为[A]o, 水相的浓度为[A]w之比，用KD表示。
萃取平衡 A (w)
A (o)
分配定律
KD
[HA]o [HA]w
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(2)分配比 如果溶质A在两相中存在多种型体，如离
解、缔合、络合、聚合等，则把溶质A在两相 中各种型体的浓度之和相比，称为分配比D。
微量组分，含量 < 0.01 %， 回收率 > 95 % 或更低
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常用分离方法
沉淀与共沉淀分离法
溶剂萃取分离法
固相萃取与微萃取法
色谱分超临界流体萃取法
挥发和蒸馏分离法
膜分离法
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（一）溶剂萃取分离法
在含有被分离物质的水 溶液中，加入萃取剂和与水 不相混溶的有机溶剂，振荡， 利用物质在两相中的分配不 同的性质，使一些组分进入 有机相中，使另一些组分仍 留在水相中，从而达到分离 的目的。
总体：分析对象的全体 样品：从总体中抽出部分个体，代表全部待 分析物料的平均组成。
采样：按一定规则，从总体中抽取分析样品 的过程。
采样目的：获得能代表全部待分析总体平均 组成的样品。
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二、样品采集的原则
代表性、典型性和适时性
1.代表性 采集的样品必须能充分代表被分析总
体的性质 2.典型性
E2 00.451 40 % 09.7% 20
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两次萃取
m 22(0 4 3 1 2 0 02)0 20.03m 9g 5 E % 2 0 0.03 1 90 % 5 0 9.8 9 %
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上例结果说明，用同样数量的萃取液， 分多次萃取比一次萃取的效率高。
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（四）超临界流体萃取法 1.原理 超临界流体萃取: 气-固萃取
萃取剂: 超临界条件下的气体
特 点：粘度低，接近零的表面张力，比 很多液体容易渗透固体颗粒，易于除去。
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超临界萃取分离设备组成及流程：
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内容选择：
第一节 样品的采取和制备 第二节 样品的处理
空气样品中待测组分浓度较低时，使用
此法。
溶液吸收法
固体吸收剂阻留法
滤纸滤膜阻留法
冷阱收集法
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3. 采样装置 基本组成