培养基的配制

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培养基配方

培养基配方

1. LB培养基:10 g/L胰蛋白胨(进口),5 g/L酵母提取物(进口),10 g/L NaCl。

若配制固体培养基,加入15 g琼脂粉;
2. YPD培养基:22 g/L的一水合葡萄糖,20 g/L胰蛋白胨(进口),10 g/L酵母提取物(进口)。

若配制固体培养基,加入20 g琼脂粉;
3. SC-Ura培养基:22 g/L含一水合葡萄糖,6.7 g/L YNB(无氨基酸酵母氮源),1.224g/L 氨基酸粉末(除Leu , Trp , His , Ura, Ade, Lys, Met以外的),配制相应缺陷型则补加其他7种氨基酸。

4. YPX 培养基:蛋白胨,20 g/L;酵母粉,10 g/L;木糖,20 g/L或50 g/L。

5. YPD+G418:G418:1ml/L
Leu(亮氨酸)0.38 g/L,
Ura(尿嘧啶)0.076 g/L,
100xHis(组氨酸)7.6g/L,加入10mL/L
100xTrp(色氨酸)7.6g/L, 加入10mL/L
100xAde(鸟嘌呤)7.6g/L 加入10mL/L
100xLys(赖氨酸)7.6g/L 加入10mL/L
100xMet(甲硫氨酸、蛋氨酸)7.6g/L 加入10mL/L
加入碱液调节pH至6.10左右。

若配制固体培养基,加入20 g琼脂粉;
全部氨基酸:。

培养基配方

培养基配方

1、PDA培养基(用于分离、培养植物内生真菌):马铃薯(去皮)200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。

用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 µ g/ml,用于抑制细菌的生长。

2、NA培养基(用于分离、培养植物内生细菌):牛肉膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖2.5g,琼脂粉15g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。

用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50µg/ml,用于抑制真菌生长。

115℃,20min 灭菌。

3、LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;4、DSM1培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,胰蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;5、DSM2培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,细菌学蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;6、Msgg培养基:磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0),MOPs 100 mmoL/L(pH7.0),MgCl2 2 mmoL/L,CaCl2 700 mmoL/L,MnCl2 50 µM,FeCl3 50 µM,ZnCl2 1 µM,VB1 2 µM,甘油0.5 %,谷氨酸0.5 %,色氨酸50 µg/mL,苯丙氨酸50 µg/mL,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

7、N%NA培养基:牛肉膏3.0 g,细菌学蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂粉N*10 g,8、BGM1培养基:牛肉膏3 g,胰蛋白胨10 g,NaCl 5 g,磷酸三钾26.631 g(pH7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,葡萄糖1 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

各种培养基配方

各种培养基配方

146种培养基配方【1】1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4121查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100mL琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制: (1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。

培养基配方及配置

培养基配方及配置

培养基配方及配置
一般来说,培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。

基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分,包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。

常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。

添加剂是指用于满足特定实验需求的成分,如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。

添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。

调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分,如缓冲液、pH调节剂等。

以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置:
1.基础培养基成分:
- 水:900ml
-蛋白胨:10g
-酵母提取物:5g
-NaCl:5g
2.添加剂:(可根据实验需求进行必要的添加)
- 抗生素(如氨苄青霉素):100μg/ml
- 抗菌剂(如氯霉素):25μg/ml
3.配制方法:
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中,并搅拌混合均匀。

- 将培养基溶液倒入容量瓶中,加水至1000ml,并混合均匀。

-调节pH值至7.0-7.2(一般使用缓冲液进行调节)。

-用自制滤纸过滤器滤过,将溶液分装至培养皿或试管中。

-如需添加抗生素或抗菌剂,将相应的药物加入培养基中,并充分溶解。

-培养基装瓶后可以高温高压灭菌,或使用滤器过滤进行无菌处理。

以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程,不同实验需要可能
会有所调整和变化。

在设计培养基配方时,需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度,并注意配制和保管过程中的无菌操作,以确保培养基的质量和有效性。

各种培养基配方范文

各种培养基配方范文

各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质,能够为微生物提供所需的营养和环境条件。

不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件,因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。

下面是几种常见的培养基配方。

1.大肠杆菌液体培养基配方:-蛋白胨或复合氮源:10g-酵母浸出物:5g-葡萄糖:1g-NaCl:5g-K2HPO4:2g-MgSO4:0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方:-牛心提取物:3g-高级琼脂糖:15g-葡萄糖:10g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方:-玉米浸出物:4g-高级琼脂糖:15g-酵母浸出物:1g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方:-液体LB培养基:10mL-高级琼脂糖:15g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方:-羊血:50mL-肉浸出物:3g-酵母浸出物:3g-肉汤培养基:1L-红细胞素:5g-高级琼脂糖:3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方:-肉浸出物:5g-酵母浸出物:5g-NaCl:5g-蒸馏水:900mL- 加入0.1%的L-cysteine:10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项:-培养基中的成分应严格按照配方比例加入,并保持无菌。

-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。

-不同的微生物可能对一些成分非常敏感,需要根据实际情况进行微调。

-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整,一般在7.0左右。

-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中,避免阳光直射以防止成分分解。

这只是一些常见的培养基配方,不同的微生物有不同的需求,可以根据具体的情况进行配方的调整。

在实际使用中,还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。

其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。

以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法:1. LB培养基(Luria-Bertani)LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基,其配方包括:- 1% 蛋白胨(tryptone): 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉(yeast extract): 提供维生素和生长因子-1%NaCl(氯化钠):调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入1.5%的琼脂。

2. YPD培养基(Yeast extract-Peptone-Dextrose)YPD培养基常用于酵母菌的培养,其配方包括:- 1% 酵母提取物(yeast extract): 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨(peptone): 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖(dextrose): 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入2%的琼脂。

3. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基,其配方包括:-10%胎牛血清(FBS):提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution): 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺(L-Glutamine): 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中,调整pH值至7.4,混合均匀即可。

培养基配方

培养基配方

培养基配方一、LB培养基:Yeast extract 5 g/LTryptone 10g/LNacl 10g/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

二、YEB培养基:Yeast extract1 g/LPeptone(或Tryptone) 5 g/LBeef extract 5 g/LSucrose 5 g/LMgSO4 2 mmol/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

三、N6D2培养基(2,4D浓度2mg/L):① N6大量母液1:20×大量元素(1L)50ml KNO356.6g(NH4)2SO49.26gKH2PO48g②N6大量母液2:40×大量元素(500ml) 25ml2·2H2O 3.32g③N6大量母液3:40×大量元素(500ml) 25ml MgSO4?7H2O 3.7g④B5微量元素I:100×微量元素(1L) 10ml溶液A:MnSO4?H2O 781mgZnSO4?7H2O 200mg溶于400ml无菌水溶液B:H 3BO3300mgKI 75mg溶于400ml无菌水然后缓慢将溶液A和溶液B混合,定容至1L⑤B5微量元素II:1000×微量元素(500ml) 1ml Na2MoO42O 125mgCuSO4·5H2O 12.5mgCoCl2·6H2O 12.5mg⑥B5维生素I:100×维生素(500ml) 10ml盐酸硫胺素 500mg盐酸吡哆醇 50mg烟酸 50mg⑦B5维生素II:100×维生素(500ml)10ml甘氨酸 100mg⑧200×铁盐(500ml) 5mlNa2-EDTA 3730mgFeSO4·7H2O 2780mg⑨ 2,4 D:100×2,4 D10ml200mg 2,4 D,先溶于1ml 无水乙醇中,再定容到1L。

常用培养基的配制

常用培养基的配制

常用培养基的配制常用培养基的配制〔一〕营养琼脂培养基【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基根底之用。

【成分】牛肉膏 3gNaCl 5g 蛋白胨 10g 琼脂 20g±0.2℃ 30min高压灭菌备用。

〔二〕蛋白胨水培养基【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g℃ 20min高压灭菌备用。

〔三〕半固体培养基【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g 琼脂 2.5~3g【pH值】7.6℃ 20min高压灭菌备用。

〔四〕营养肉汤培养基【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等,也可用于消毒效果的测定。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g牛肉粉〔牛肉浸汁〕 3g±℃ 20min 高压灭菌备用。

〔五〕葡萄糖蛋白胨水培养基【用途】供甲基红试验及V-P试验之用。

【成分】蛋白胨 5g葡萄糖 5g K2HPO4 (K2HPO4·3H2O) 5g (0.65g)【pH值】7.0~7.2【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装试管,每管2~3ml,经112.6 ℃ 20min高压灭菌备用。

〔六〕伊红美蓝培养基〔EMB培养基〕【用途】弱选择性培养基,用于别离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。

【成分】蛋白胨 10g乳糖 10g 伊红 0.4g美兰 0.065g 琼脂 14g K2HPO4 2g±0.4℃ 15min高压灭菌,待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。

〔七〕S-S琼脂培养基【用途】供沙门氏菌、志贺氏菌的选择性别离培养之用。

【成分】蛋白胨 5g 乳糖 10g 牛肉粉 5g三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 柠檬酸钠 8.5g 柠檬酸铁 1g 硫代硫酸钠 8.5g 中性红 0.025g 煌绿 0.00033g±0.1【制法】上述成分称取60g加蒸馏水1000ml,加热煮沸至完全溶解,待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。

实验室36种微生物培养基配制方法

实验室36种微生物培养基配制方法

实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。

不同微生物对培养基的要求各不相同,因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。

下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。

一、通用培养基1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于大多数微生物的培养。

其配方为:蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。

2. 营养肉膏培养基(Nutrient Broth)营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基,适用于大多数微生物的培养。

其配方为:蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,高压灭菌,分装,即可使用。

3. 大肠杆菌选择性培养基(MacConkey Agar)大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基,用于选择和鉴定大肠杆菌。

其配方为:蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。

4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基(Sabouraud Dextrose Agar)Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。

其配方为:脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。

二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基(Vogel-Johnson Agar)VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属(如克雷伯菌)的培养基。

其配方为:葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、加热煮沸,冷却至55-60°C,加入胆盐酯高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。

培养基的配制方法

培养基的配制方法

培养基的配制方法培养基的配制方法是在实验室中作为微生物培养的基础,可以提供适当的营养物质和环境条件来促进微生物的生长和繁殖。

正确的配制培养基是进行微生物实验和研究的关键步骤之一。

下面将详细介绍培养基的配制方法。

1. 准备配制培养基所需的原料和仪器:- 食品级蛋白胨粉或胨蛋白水解物:提供微生物所需的氨基酸和营养物质。

- 食品级琼脂:用于凝固培养基。

- 蔗糖或葡萄糖:提供微生物的碳源。

- 盐:提供微生物生长所需的必需离子,如钠、钾、镁等。

- pH试纸或pH计:用于调节培养基的酸碱度。

- 常温和高温灭菌器:用于灭菌培养基。

- 烧杯、容器、磁力搅拌器和称量仪器:用于容器和搅拌培养基。

2. 测量和称量:- 根据所需的培养基成分和浓度,测量所需的蛋白胨量、琼脂量、蔗糖或葡萄糖量以及盐的量。

- 将测量好的原料放入烧杯中。

3. 加入适量的水:- 加入适量的去离子水或纯净水,将配方溶解。

4. 调节酸碱度:- 使用pH试纸或pH计来检测培养基的酸碱度。

- 如果需要调节酸碱度,则可以使用盐酸或氢氧化钠等脆性酸碱溶液加入培养基中以达到目标pH值。

5. 搅拌混合:- 将培养基溶液放入磁力搅拌器中。

- 开启搅拌器并搅拌溶液直到完全混合。

6. 灭菌:- 将配制好的培养基倒入适当容器中,如烧杯或琼脂培养皿。

- 对于常见的液体培养基,使用常温灭菌器在121摄氏度下高压灭菌20-30分钟。

- 对于琼脂培养基,使用高温灭菌器在121摄氏度下高压灭菌15-20分钟。

7. 倒盖和保存:- 等待培养基凝固后,盖上并标记培养基的名称、配方和配制日期。

- 将培养基保存在冰箱中或冷藏库中,在4摄氏度下保存。

总结一下,培养基的配制方法包括准备原料和仪器,测量和称量原料,加入适量的水,调节酸碱度,搅拌混合,灭菌和保存。

注意对于不同的微生物,培养基的配方可能会有所不同,需要根据具体的实验目的和需求进行调整。

正确配制培养基对于获得准确的微生物培养结果至关重要。

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法:(1)基础盐培养基(MSM):(NH4)2SO42.0g,MgSO4·7H2O0.2g,CaCl2·2H2O 0.01g,FeSO4·7H2O0.001g,Na2HPO4·12H2O1.5g,KH2PO41.5g,蒸馏水1000 mL。

(2)LB培养基:蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠5g,蒸馏水1000 mL,pH7.5。

(3)高氏合成1号培养基:硝酸钾1g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸镁0.5g,氯化钠0.5g,硫酸亚铁0.01g,可溶性淀粉20g,蒸馏水1000mL。

(4)查彼氏培养基:硝酸钠2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,蒸馏水1000mL。

(5)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20 g,蒸馏水1000mL。

将无病马铃薯洗净去皮切碎,加蒸馏水1000mL,煮沸0.5 h,纱布过滤,滤液加蒸馏水补足1000mL,再加入葡萄糖,然后分装三角瓶灭菌备用。

(6)铵察氏琼脂培养基:氯化铵2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000 mL。

(7)克氏合成1号琼脂培养基:磷酸氢二钾1g,碳酸镁0.3g,氯化钠0.2 g,硝酸钾1g,硫酸亚铁0.01g,碳酸钙0.5g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(8)葡萄糖天门冬素琼脂培养基:葡萄糖10g,天门冬素0.5g,磷酸氢二钾0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(9)葡萄糖酵母膏琼脂培养基:葡萄糖10g,酵母膏10g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(10)瓦氏肉汁琼脂培养基:蛋白胨5g,葡萄糖10g,牛肉膏10g,氯化钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(11)淀粉琼脂培养基:可溶性淀粉10g,碳酸镁1g,磷酸氢二钾0.3g,氯化钠0.5g,硝酸钠1g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法一、培养基配方常用的培养基是复合培养基,包含有机成分和无机成分两部分。

其中,有机成分提供微生物所需的碳源、氮源和能源等,无机成分提供微生物所需的无机盐和微量元素等。

以下是一个典型的复合培养基配方:有机成分:1.蛋白胨:提供氮源和碳源;2.葡萄糖:提供碳源和能源;3.酵母提取物:提供维生素和微量元素。

无机成分:1.磷酸盐缓冲液:提供pH缓冲效果;2.硝酸盐:提供氮源和无机盐;3.氯化钠:提供无机盐;4.磷酸氢二钾:提供缓冲效果和无机盐;5.硫酸镁:提供镁离子。

二、培养基配制方法1.准备容器:使用无菌烧瓶、试管、培养皿等容器,并用高压蒸汽灭菌器进行灭菌处理。

2.称量成分:按照配方中的比例,准确称量有机成分和无机成分。

3.溶解有机成分:将蛋白胨、葡萄糖和酵母提取物分别加入适量的蒸馏水中,通过搅拌或加热溶解均匀。

4.准备无机成分溶液:将磷酸盐缓冲液、硝酸盐、氯化钠、磷酸氢二钾和硫酸镁按照配方中的比例加入适量的蒸馏水中,通过搅拌溶解均匀。

5.校正pH值:使用pH计测定培养基的pH值,如有需要,可以用盐酸或氢氧化钠调节pH值至合适的范围。

6.加入蛋白胨溶液:将溶解好的蛋白胨溶液加入无机成分溶液中,并通过搅拌均匀。

7.加入葡萄糖溶液:将溶解好的葡萄糖溶液加入已配制好的培养基中,并通过搅拌均匀。

8.加入酵母提取物:将酵母提取物溶液加入培养基中,并通过搅拌均匀。

9.调节体积:根据实验需要,可以添加蒸馏水或其他添加剂来调节培养基的体积和浓度。

10.灭菌处理:将配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌处理,保证培养基的无菌状态。

以上就是一个典型的培养基配方及配制方法的示例,只是其中的一个例子,不同的微生物可能需要不同的培养基配方和配制方法。

在实验中,根据具体的需求调整培养基的配方,确保能满足微生物的生长需求,并通过灭菌处理保证培养基的无菌状态。

各种培养基的配方

各种培养基的配方

各种培养基的配方在微生物学中,培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物,可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。

不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖,为了获得最佳的生长效果,需根据微生物的特性制备相应的培养基。

下面介绍几种常用的培养基及其配方。

1. 加尔沙基培养基(Luria-Bertani,LB培养基)LB培养基是一种常用的细菌培养基,适用于大多数细菌的培养。

其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠,PH为7.0。

配方:- 水:1000ml-氯化钠:10g-酵母提取物:5g-牛肉浸出物:10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源,适合于细菌的快速生长。

2. PDA培养基(Potato Dextrose Agar)PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基,成分简单易得。

它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。

PDA培养基是一种半固体培养基,适合于真菌的产孢。

配方:-马铃薯提取物:200g-葡萄糖:20g-琼脂:20g-静置180s后,灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长,常用于菌落计数和生长的研究中。

3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于多种微生物的培养。

它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。

配方:-蛋白水解物:5g-酵母提取物:1g-氯化钠:5g-琼脂:15g- 水:1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长,是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基(Mannitol-Salt Agar,MSA)MSA培养基是一种选择性培养基,主要用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的分离和鉴定。

它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。

配方:-马尼托尔:5g-氯化钠:75g-酵母提取物:1g-琼脂:15g- 水:1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中,可以通过红色菌落的形成来进行识别。

培养基的配置

培养基的配置

3.调节适宜的PH值
细菌7.0-8.0,放线菌7.5-8.5,酵母菌3.8-6.0,霉
菌4.0-5.8,藻类6.0-7.0,原生动物6.0-8.0;
微生物在培养过程中会引起pH变化,为了保持培
养基中有恒定的pH值,要加入一些磷酸缓冲剂
或不溶性的碳酸盐。
4. 控制渗透压和水活度
培养基是与微生物细胞渗透压相等的等渗溶液; 微 生 物 生 长 环 境 中 水 的 有 效 性 常 以 水 活 度
含量与粗蛋白质含量的比值。
不同微生物所需的C/N不同:
细菌 5/1、酵母菌 5/1、 氮源
霉菌 10/1;
C/N小,若碳源不足,易引起菌体衰老和自溶;
过多,会使菌体生长过于旺盛,pH偏高,不利于代谢
产物的积累。
C/N大
,若碳源过多,则容易形成较低的pH;氮源不
足,则菌体繁殖量少,从而影响产量。
培养自养型微生物,培养基只需简单的无机物;
培养异养型微生物,培养基应有≥1种有机物; 对营养缺陷型微生物,要加所需的生长素或氨基
酸或碱基等有机化合物;
若要分离培养某种特异的微生物要根据特殊要求
配制培养基。
2. 注意营养物质的浓度比和C/N比
C/N:一般指元素C/N的比值,也指培养基中还原糖的
培养基的配置实验
实验目的
1. 明确培养基的配制原理。每个小组配制200ml的牛肉膏蛋白胨固体培养基 2. 通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤。
仪器和试剂
烧杯(500ml、50ml)、三角烧瓶(250ml)、量筒、玻璃棒、玻璃漏斗、酒精灯、培 养皿、牛皮纸、纱绳、托盘天平、灭菌锅、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、10%NaOH、 10%盐酸、精密PH试纸、超净工作台

146种常见培养基的配方

146种常见培养基的配方

146种常见培养基的配方培养基是微生物学实验中常用的一种重要实验工具,通过调配合适的培养基,可以提供微生物生长所需的营养物质,从而促进微生物菌落的繁殖和生长。

下面将介绍一些常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。

1.琼脂肉汤培养基(NB)-牛肉脱脂粉5g-酵母提取物2.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml2.大肠杆菌复合培养基(LB)-液体培养基-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g- 蒸馏水 1000ml-琼脂板-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml3. 肠杆菌选择性琼脂培养基(MacConkey琼脂培养基)-蛋白胨17g-紫胆汁盐1.5g-普鲁士蓝盐1.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml4. 脱氧胆盐琼脂培养基(Deoxycholate Agar)-脱氧胆酸钠20g-普鲁士蓝盐0.8g-蛋白胨7.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml5.阿米巴选择性琼脂培养基(KV培养基)- 鸡蛋清 20ml- 中性红溶液 12ml-NaCl0.5g-纤维素0.25g- 盐酸 1ml-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml6. 革兰氏阳性菌选择性琼脂培养基(Mannitol Salt Agar)-蔗糖10g-氯化钠75g-酵母提取物5g-麦芽提取物1g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml7. 维生素富集琼脂培养基(Burkholder's Basal Salt Medium)-NaNO31g-KCl0.5g-MgSO4·7H2O0.2g-CaCl2·2H2O0.02g-FeSO4·7H2O0.01g-琼脂14g- 蒸馏水 1000ml8. 三氯化铁琼脂培养基(Cetrimide Agar)-硫酸镁0.8g-氯化钴0.05g-氯化锌0.01g-氯化亚铁0.03g-三氯化铁0.03g-比色琼脂糖15g- 过滤蒸馏水 1000ml9. 库氏四甲基铵琼脂培养基(Chapman Agar)-高氯酸钠5g-脲7.5g-酵母提取物2g-海藻酸钠20g-紫胆汁盐0.25g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml10. 还原格兰氏琼脂培养基(Reduced Gram-negative Broth)-蛋氨酸0.5g-异亮氨酸0.5g-半胱氨酸0.5g-菜碱0.5g-胀氨酸0.5g-琼脂7g- 蒸馏水 1000ml这些是其中的一部分常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。

培养基的配制

培养基的配制

一. 细胞培养所需基本器皿、试剂等1.玻璃器皿培养瓶、培养皿、称量瓶、小烧杯、青霉素瓶、盐水瓶(100、250、500)毫升、吸管刻度离心管2.试剂Hanks液. D-Hanks液. 培养基小牛血清、胎牛血清、胰蛋白酶(0.125%、0.25%)、7.5%碳酸氢钠10%醋酸、青霉素、链霉素3.器械.眼科剪(直头、弯头)、眼科镊(直头、弯头)、中号剪刀、中号镊子、金属滤网、小毛笔4.其他Zeiss滤器滤膜微量加样器、枪头、滤纸、饭盒吸管筒酒精棉球75%酒精新洁尔灭‰三蒸水双蒸水血球记数板盖片(20×20、24×24) 载玻片PBS二.试剂配方1.Hanks液称量NaCl 8.0gKCl 0.4gMgSO • 7H2O 0.2gCaCl2 0.14gNa2HPO4 •1 2H2O 0.06gKH2PO4 0.06gGlukose 1.0gAqua dest 1000.0ml先将(1)CaCl2溶解在100ml三蒸水中,(2)其他成分于750ml三蒸水中(应待前一种试剂完全溶解后,再溶解下一种试剂);.再将(1)缓慢倒入(2)中,并边加边搅动。

最后补足水到1000ml。

分装盐水瓶中,8磅10分钟高压蒸汽灭菌。

冷却后用75%碳酸氢钠调整pH7.2-7.4,4℃保存。

2.D-Hanks液只需从Hanks液配法中去掉MgSO4 CaCl2的量,其他步骤同上。

2.不完全培养基先将1000ml粉剂培养基完全溶解于少许水中,然后加水至1000ml。

抽滤消毒并分装于250ml 盐水瓶中,4℃或低温保存。

(注如果粉剂培养基没有碳酸氢钠则需按要求加上)25%胰蛋白酶(多用于传代)胰蛋白酶0.25gD—Hanks100ml先称取0.25克胰蛋白酶,用少许.D—Hanks液溶解,然后补足D—Hanks到100ml。

PH7.2~7.4,抽滤消毒。

分装于青霉素小瓶,低温保存。

4.0.125%胰蛋白酶(本实验室多用于原代)胰蛋白酶0.125gD—Hanks100ml配制方法同上。

培养基的配制

培养基的配制

培养基的配制一、原理大多数微生物均可用人工方法培养。

以人工方法配制成的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,称为培养基,培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。

另外, 培养基还应具有适宜的ph值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。

二、培养基的种类培养基按物理状态分为固体、半固体和液体培养基;按组成成分分为天然、合成和半合成培养基;按其作用分为基础、加富、选择、鉴别、厌氧和活体培养基等。

1、基础培养基:含有微生物所需要的基本营养成分,如肉汤培养基。

2、加富培养基:在基础培养基中再加入葡萄糖。

血液、血清或酵母浸膏等物质,可供营养要求较高的微生物生长,如血平板、血清肉汤等。

3、选择培养基:是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对—些物理。

化学条件的抗性而设计的培养基。

利用这种培养基可以把所需要的微生物从混杂的其他微生物中分离出来。

4、鉴别培养基:在培养基中加入某种试剂或化学药品,使培养后发生某种化学变化从而鉴别不同类型的微生物。

如伊红■美蓝;EMB )培养基、糖发酵管、醋酸铅培养基等。

5、厌氧培养基:专性厌氧菌不能在有氧的条件下生长,所以必须将培养基与环境中的空气隔绝,或降低培养基中的氧化还原电位,如在液体培养基的表面加盖凡士林或醋,或在液体培养基中加入碎肉快制成庖肉培养基等。

此外,也可以利用物理或化学的方法除去培养环境中的氧,以保证厌氧环境。

&活体培养基:有一些微生物可以在活的动植物体或离体的活组织细胞内生长繁殖,因此,某些活的动植物体或离体的活组织细胞对这些微生物来说,是很好的培养基。

三、培养基的主要成分1、营养物质:有蛋白月东、肉浸汁和牛肉膏、糖(醇)类、血液、鸡蛋与动物血清、生长因子、无机盐类。

2、水分:制备培养基常用蒸馆水(因蒸催水中不含杂质),也可用自来水、井水等,但需先经煮沸,使部分盐类沉淀,再经过滤方可使用。

3、凝固物质:配制固体培养基的凝固物质有琼脂、明胶和卵白蛋白及血清等。

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培养基:
培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。

一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。

培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。

培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基;根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基;根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等;根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。

培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌。

培养基由于富含营养物质,易被污染或变质。

配好后不宜久置,最好现配现用。

培养基的配制:
一、配制用水
培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。

按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的
双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。

二、培养基
培养基有天然、人工两种。

一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。

NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,
若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。

RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。

三、血清
培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。

血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。

配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。

由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。

四、抗菌素
为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当抗菌素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。

五、植物血凝素(PHA)
非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。

经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。

PHA有粘多糖,蛋白质两种重要成分。

粘多糖促使有丝分裂,蛋白质起凝集作用。

PHA激活的细胞数随其浓度而增加,直至全部免疫活性细胞均
被激活为止,但PHA浓度过高会引起凝集,一般采用4%浓度为好。

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