培养基的配制
培养基配方

1. LB培养基:10 g/L胰蛋白胨(进口),5 g/L酵母提取物(进口),10 g/L NaCl。
若配制固体培养基,加入15 g琼脂粉;
2. YPD培养基:22 g/L的一水合葡萄糖,20 g/L胰蛋白胨(进口),10 g/L酵母提取物(进口)。
若配制固体培养基,加入20 g琼脂粉;
3. SC-Ura培养基:22 g/L含一水合葡萄糖,6.7 g/L YNB(无氨基酸酵母氮源),1.224g/L 氨基酸粉末(除Leu , Trp , His , Ura, Ade, Lys, Met以外的),配制相应缺陷型则补加其他7种氨基酸。
4. YPX 培养基:蛋白胨,20 g/L;酵母粉,10 g/L;木糖,20 g/L或50 g/L。
5. YPD+G418:G418:1ml/L
Leu(亮氨酸)0.38 g/L,
Ura(尿嘧啶)0.076 g/L,
100xHis(组氨酸)7.6g/L,加入10mL/L
100xTrp(色氨酸)7.6g/L, 加入10mL/L
100xAde(鸟嘌呤)7.6g/L 加入10mL/L
100xLys(赖氨酸)7.6g/L 加入10mL/L
100xMet(甲硫氨酸、蛋氨酸)7.6g/L 加入10mL/L
加入碱液调节pH至6.10左右。
若配制固体培养基,加入20 g琼脂粉;
全部氨基酸:。
培养基配方

1、PDA培养基(用于分离、培养植物内生真菌):马铃薯(去皮)200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。
用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 µ g/ml,用于抑制细菌的生长。
2、NA培养基(用于分离、培养植物内生细菌):牛肉膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖2.5g,琼脂粉15g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。
用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50µg/ml,用于抑制真菌生长。
115℃,20min 灭菌。
3、LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;4、DSM1培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,胰蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;5、DSM2培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,细菌学蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;6、Msgg培养基:磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0),MOPs 100 mmoL/L(pH7.0),MgCl2 2 mmoL/L,CaCl2 700 mmoL/L,MnCl2 50 µM,FeCl3 50 µM,ZnCl2 1 µM,VB1 2 µM,甘油0.5 %,谷氨酸0.5 %,色氨酸50 µg/mL,苯丙氨酸50 µg/mL,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。
7、N%NA培养基:牛肉膏3.0 g,细菌学蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂粉N*10 g,8、BGM1培养基:牛肉膏3 g,胰蛋白胨10 g,NaCl 5 g,磷酸三钾26.631 g(pH7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,葡萄糖1 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。
各种培养基配方

146种培养基配方【1】1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4121查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100mL琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制: (1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。
培养基配方及配置

培养基配方及配置
一般来说,培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。
基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分,包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。
常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。
添加剂是指用于满足特定实验需求的成分,如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。
添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。
调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分,如缓冲液、pH调节剂等。
以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置:
1.基础培养基成分:
- 水:900ml
-蛋白胨:10g
-酵母提取物:5g
-NaCl:5g
2.添加剂:(可根据实验需求进行必要的添加)
- 抗生素(如氨苄青霉素):100μg/ml
- 抗菌剂(如氯霉素):25μg/ml
3.配制方法:
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中,并搅拌混合均匀。
- 将培养基溶液倒入容量瓶中,加水至1000ml,并混合均匀。
-调节pH值至7.0-7.2(一般使用缓冲液进行调节)。
-用自制滤纸过滤器滤过,将溶液分装至培养皿或试管中。
-如需添加抗生素或抗菌剂,将相应的药物加入培养基中,并充分溶解。
-培养基装瓶后可以高温高压灭菌,或使用滤器过滤进行无菌处理。
以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程,不同实验需要可能
会有所调整和变化。
在设计培养基配方时,需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度,并注意配制和保管过程中的无菌操作,以确保培养基的质量和有效性。
各种培养基配方范文

各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质,能够为微生物提供所需的营养和环境条件。
不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件,因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。
下面是几种常见的培养基配方。
1.大肠杆菌液体培养基配方:-蛋白胨或复合氮源:10g-酵母浸出物:5g-葡萄糖:1g-NaCl:5g-K2HPO4:2g-MgSO4:0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方:-牛心提取物:3g-高级琼脂糖:15g-葡萄糖:10g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方:-玉米浸出物:4g-高级琼脂糖:15g-酵母浸出物:1g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方:-液体LB培养基:10mL-高级琼脂糖:15g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方:-羊血:50mL-肉浸出物:3g-酵母浸出物:3g-肉汤培养基:1L-红细胞素:5g-高级琼脂糖:3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方:-肉浸出物:5g-酵母浸出物:5g-NaCl:5g-蒸馏水:900mL- 加入0.1%的L-cysteine:10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项:-培养基中的成分应严格按照配方比例加入,并保持无菌。
-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。
-不同的微生物可能对一些成分非常敏感,需要根据实际情况进行微调。
-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整,一般在7.0左右。
-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中,避免阳光直射以防止成分分解。
这只是一些常见的培养基配方,不同的微生物有不同的需求,可以根据具体的情况进行配方的调整。
在实际使用中,还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。
培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法:1. LB培养基(Luria-Bertani)LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基,其配方包括:- 1% 蛋白胨(tryptone): 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉(yeast extract): 提供维生素和生长因子-1%NaCl(氯化钠):调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基(Yeast extract-Peptone-Dextrose)YPD培养基常用于酵母菌的培养,其配方包括:- 1% 酵母提取物(yeast extract): 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨(peptone): 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖(dextrose): 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基,其配方包括:-10%胎牛血清(FBS):提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution): 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺(L-Glutamine): 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中,调整pH值至7.4,混合均匀即可。
培养基配方

培养基配方一、LB培养基:Yeast extract 5 g/LTryptone 10g/LNacl 10g/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。
二、YEB培养基:Yeast extract1 g/LPeptone(或Tryptone) 5 g/LBeef extract 5 g/LSucrose 5 g/LMgSO4 2 mmol/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。
三、N6D2培养基(2,4D浓度2mg/L):① N6大量母液1:20×大量元素(1L)50ml KNO356.6g(NH4)2SO49.26gKH2PO48g②N6大量母液2:40×大量元素(500ml) 25ml2·2H2O 3.32g③N6大量母液3:40×大量元素(500ml) 25ml MgSO4?7H2O 3.7g④B5微量元素I:100×微量元素(1L) 10ml溶液A:MnSO4?H2O 781mgZnSO4?7H2O 200mg溶于400ml无菌水溶液B:H 3BO3300mgKI 75mg溶于400ml无菌水然后缓慢将溶液A和溶液B混合,定容至1L⑤B5微量元素II:1000×微量元素(500ml) 1ml Na2MoO42O 125mgCuSO4·5H2O 12.5mgCoCl2·6H2O 12.5mg⑥B5维生素I:100×维生素(500ml) 10ml盐酸硫胺素 500mg盐酸吡哆醇 50mg烟酸 50mg⑦B5维生素II:100×维生素(500ml)10ml甘氨酸 100mg⑧200×铁盐(500ml) 5mlNa2-EDTA 3730mgFeSO4·7H2O 2780mg⑨ 2,4 D:100×2,4 D10ml200mg 2,4 D,先溶于1ml 无水乙醇中,再定容到1L。
常用培养基的配制

常用培养基的配制常用培养基的配制〔一〕营养琼脂培养基【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基根底之用。
【成分】牛肉膏 3gNaCl 5g 蛋白胨 10g 琼脂 20g±0.2℃ 30min高压灭菌备用。
〔二〕蛋白胨水培养基【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。
【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g℃ 20min高压灭菌备用。
〔三〕半固体培养基【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。
【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g 琼脂 2.5~3g【pH值】7.6℃ 20min高压灭菌备用。
〔四〕营养肉汤培养基【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等,也可用于消毒效果的测定。
【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g牛肉粉〔牛肉浸汁〕 3g±℃ 20min 高压灭菌备用。
〔五〕葡萄糖蛋白胨水培养基【用途】供甲基红试验及V-P试验之用。
【成分】蛋白胨 5g葡萄糖 5g K2HPO4 (K2HPO4·3H2O) 5g (0.65g)【pH值】7.0~7.2【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装试管,每管2~3ml,经112.6 ℃ 20min高压灭菌备用。
〔六〕伊红美蓝培养基〔EMB培养基〕【用途】弱选择性培养基,用于别离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。
【成分】蛋白胨 10g乳糖 10g 伊红 0.4g美兰 0.065g 琼脂 14g K2HPO4 2g±0.4℃ 15min高压灭菌,待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。
〔七〕S-S琼脂培养基【用途】供沙门氏菌、志贺氏菌的选择性别离培养之用。
【成分】蛋白胨 5g 乳糖 10g 牛肉粉 5g三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 柠檬酸钠 8.5g 柠檬酸铁 1g 硫代硫酸钠 8.5g 中性红 0.025g 煌绿 0.00033g±0.1【制法】上述成分称取60g加蒸馏水1000ml,加热煮沸至完全溶解,待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。
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培养基:
培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。
培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。
培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基;根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基;根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等;根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。
培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌。
培养基由于富含营养物质,易被污染或变质。
配好后不宜久置,最好现配现用。
培养基的配制:
一、配制用水
培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。
按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的
双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。
二、培养基
培养基有天然、人工两种。
一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。
NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,
若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。
RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。
三、血清
培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。
血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。
配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。
由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。
四、抗菌素
为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当抗菌素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。
五、植物血凝素(PHA)
非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。
经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。
PHA有粘多糖,蛋白质两种重要成分。
粘多糖促使有丝分裂,蛋白质起凝集作用。
PHA激活的细胞数随其浓度而增加,直至全部免疫活性细胞均
被激活为止,但PHA浓度过高会引起凝集,一般采用4%浓度为好。