高蛋白、高脂肪类人参食品中人参皂苷的检测方法研究
人参食品中6种人参皂苷含量测定研究
现代食品XIANDAISHIPIN 219/分析检测Analysis and Testing doi:10.16736/41-1434/ts.2020.13.071人参食品中6种人参皂苷含量测定研究Study on Determination of Six Ginsenosides in Panax ginseng C. A. Mey Foods◎ 闫向竹,赵宏宇,刘恬佳(东北师范大学人文学院,吉林 长春 130117)Yan Xiangzhu, Zhao Hongyu, Liu Tianjia (College of Humanities & Sciences of Northeast Normal University, Changchun 130117, China)摘 要:目的:建立同时测定人参食品中Rb 1、Rb 2、Rc 、Rd 、Re 及Rg 16种人参皂苷成分含量的方法,为人参食品的质量控制提供依据。
方法:采用超高效液相色谱法,使用Supelco Discovery C 18色谱柱(5 cm ×3.0 mm ,2.7 μm ),以乙腈(A )-水(B )为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min -1,柱温30 ℃,波长为203 nm 。
结果:采用所建立的方法,6个皂苷成分分离度良好,平均加样回收率为97.01%~99.74%,符合定量分析要求。
3批人参食品中人参皂苷Rb 1、Rb 2、Rc 、Rd 、Re 及Rg 1平均含量分别为2.34、5.22、4.24、2.34、2.45 mg·g -1和1.52 mg·g -1。
结论:本方法重复性良好,准确度高,可应用于人参食品的质量控制。
关键词:人参食品;人参皂苷;含量测定Abstract :Objective: To establish a method for simultaneous determination of six components of Rb1, Rb 2, Rc, Rd, Re and Rg 1 in Panax ginseng foods, and to provide a basis for the establishment of quality standards. Methods: UPLCmethod was used, the separation was performed on Supelco Discovery C 18 column (5 cm ×3.0 mm, 2.7 μm). The mobile phase consisted of acetonitrile-water solution with gradient elution at a flow rate of 0.4 mL ·min -1. The column temperature was 30 ℃, and the detection wavelength was 203 nm. Results: The six ginsenosides were well separated the average recovery rates were 97.01%~99.74% , which met the requirements of quantitative analysis. The content ranges of Rb 1, Rb 2, Rc, Rd, Re and Rg 1 in 3 samples were .2.34, 5.22, 4.24, 2.34, 2.45 mg ·g -1 and 1.52 mg ·g -1. Conclusions: The established analytical method is suitable for the quality control and evaluation of Panax ginseng foods.Key words:Panax ginseng C. A. Mey foods; Ginsenosides; Determination 中图分类号:TS213.22人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey )的干燥根和根茎,首载于《神农本草经》。
实验六 人参中人参皂苷的提取分离及鉴定(共享)
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定(共享)一、实验介绍人参是一种传统的中药材,具有滋补强壮、改善免疫功能、抗氧化、抗疲劳等保健作用。
人参中的主要活性成分为人参皂苷,是一类四环倍半萜类化合物,已经被证明具有多种药理活性,包括治疗心血管疾病、神经系统疾病、肿瘤等。
本实验将通过浸提、分离纯化和质谱鉴定等方法,提取并鉴定人参中的人参皂苷。
二、实验原理1、浸提法浸提法是将药材浸入某种合适的溶剂中,使药材中的有效成分与溶剂发生物理或化学变化,达到提取目的的一种分离方法。
2、硅胶柱层析法硅胶柱层析法是将样品溶液通过硅胶柱,利用在硅胶表面的物理吸附或化学吸附作用,将混杂在一起的化合物分离开的方法。
3、质谱鉴定质谱鉴定是一种能够确定样品化学结构和分子质量的分析技术。
常用的质谱仪有基质辅助激光解吸/电离质谱仪(MALDI-TOF MS)、毛细管电泳-电喷雾离子化质谱仪(CE-ESI-MS)、气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)等。
三、实验步骤1、人参皂苷的浸提提取取50克粉碎后的人参,加入500 mL纯水,加热至60℃灌装入烧杯中,自然冷却至室温,用纱布过滤液体,重复浸提两次,将过滤液集合并浓缩至100 mL,抽取所有成分并将溶剂蒸干,得到人参的浸提液。
将人参浸提液溶于甲醇,用硅胶柱层析法进行分离。
在硅胶柱中注满硅胶,静置,再用甲醇将硅胶冲洗至洗液pH值小于7,并流至平衡,用稀甲酸使硅胶柱的pH值保持在4.5左右,注入30 ml的样品溶液后,按照乙醇-水(5:95)逐步更换溶剂进行洗提。
收集各部分2 mL溶液,检测其皂苷浓度。
将含有人参皂苷的溶液分别离子化并进入质谱仪,分别进行质谱分析,并比对和参考相关文献,确定人参皂苷的种类及分子质量。
四、实验结果浸提液得率为12.5%,色深浅不一,澄清程度良好。
利用硅胶柱进行层析分离,得到了包含人参皂苷的溶液。
收集了各部分的溶液,并测定了其皂苷浓度,得到各部分的含人参皂苷浓度、总皂苷脂含量和分离效果。
人参中总皂苷含量测定的研究
人参中总皂苷含量测定的研究作者:陈薇薇来源:《食品界》2017年第06期药材与试剂5年生园参,样品经50℃烘干粉碎后(过40目筛),密封保存备用。
甲醇、乙醚、无水乙醇、正丁醇、浓硫酸、香草醛、氯仿;以上试剂均为国产分析纯,实验用水均为蒸馏水。
人参皂苷 Re 对照品购自中国药品生物制品检验所。
仪器与设备TU-1810 型紫外分光光度计(北京普析通用仪器)。
方法对照品溶液的制备。
取人参皂苷 Re 对照品 20mg,精密称定,加甲醇溶解,定容至10ml,摇匀、滤过,即得。
供试品溶液的制备。
取供试品粉末约 1.0g(细粉),精密称定,用中性滤纸包好,置索氏提取器中,加入乙醚47左右微沸回流提取1h,弃去乙醚液,供试品药包挥干溶剂,加入甲醇浸泡过夜,次日再加入适量甲醇,90℃微沸回流提取,控制滴速 100~120滴/min,虹吸次数5~6次/h,回流3次,每次2h,以人参皂苷提尽为准(定性鉴别为阴性),合并甲醇提取液,回收溶剂,少量甲醇提取液置蒸发皿中,水浴蒸干。
蒸馏水溶解提取物,加水30ml置分液漏斗中,用水饱和正丁醇50ml进行萃取,共4次。
取上层液蒸干,加甲醇溶解后,转移至10ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀、滤过即得。
人参总皂苷提取定性鉴别。
供试品回流提取3次以后,取索式提取器中载供试品瓶中的溶液少量点于硅胶G薄层后的下层溶液,用10%硫酸乙醇显色,将薄层板置通风橱内,喷10% 硫酸乙醇溶液,105℃加热。
标准曲线的绘制。
精密吸取人参皂苷Re对照品10μl、20μl、30μl、40μl、60μl 置具塞玻璃试管中,水浴挥干甲醇。
分别加入8%香草醛无水乙醇试液0.5ml,72%硫酸试液 5ml,充分振荡摇匀后置60℃恒温水浴锅上加热10min,立即用冰水冷却10min,摇匀。
以试剂做空白,照分光光度法于544nm处分别测定吸光度,以吸光度为纵坐标,对照品取样量为横坐标绘制标准曲线。
稳定性考察。
精密吸取样品溶液20μl,按3.4项下方法显色,并分别在显色后0、10、20、30min测定吸光度,计算样品中的总皂苷含量。
HPLC法测定保健食品中人参皂甙的研究
【研究报告】〔文章编号〕100428685(2003)052560202HPLC法测定保健食品中人参皂甙的研究沈向红1,任一平1,陈翊2(1.浙江省疾病预防控制中心,杭州 310009;2.温州医学院,浙江 325000)摘 要 〔目的〕采用高效液相色谱法测定保健食品中人参皂甙的含量。
〔方法〕样品用甲醇水溶液浸提法处理,采用短色谱柱,低乙晴体积分数,非线性梯度洗脱对6种主要人参皂甙Rg1,Rb1,Re,Rb2,Rc Rd进行分析。
液相色谱条件: ODS-C18(4.6mm3150mm,5μm,);流动相:乙腈-水,流速1.0ml/min;166-A紫外检测器;波长:203nm。
〔结果〕6种人参皂甙和总皂甙的相对标准偏差为0.9%-4.4%。
最低检出浓度5.5μg/g,回收率95.56%-98.52%。
〔结论〕该方法快捷、简便,适用于保健食品中人参皂甙的测定。
关键词 保健食品;人参皂甙;HP LC;Detection of ginsenoside in health foods by HP LCShen Xianghong,Ren Yiping,Chen Yi.Zhejiang Provincial Center for Disease Control,Hangzhou310009,China Abstract Application of HP LC to determine G insenoside in s ome Healthy foods The samples were distilled with60percent methanol s olution.Main ginsenoside Rg1,Rb1,Re,Rb2,Rc.Rd were separated with shorter chromatogram column、lower acetaldehyde v olume and nonlinearity grads elution.The conditions of HP LC were as follows:ODS-C18:4.6nm3150mm,5μm,;the m obile is pure water-acetomitrile,its speed is1.0ml/min;166-AΜV-detector with203nm wave length.The results showed that:the relative stan2 dard deviation of six ginsenosides and total ginsenosides were0.91%-4.4%,that the minimum detection limit was5.5μg/g and the recovery of Rg1was95.56%-98.52%.It has the advantage of simplicity,repeatablility and was the same with determination in health foods.K ey Word Healthy Foods;G inseno side;HPLC〔中图分类号〕O657.7+2 〔文献标识码〕A 人参是一种传统的名贵中草药,祖国传统医学认为人参能大补元气,复脉固脱,补脾益肺。
人参中人参皂苷的提取、分离和测定
人参中人参皂苷的提取、分离和测定一、本文概述二、人参皂苷的提取方法人参皂苷的提取是从人参原材料中分离和纯化目标化合物的重要步骤。
提取方法的选择直接影响皂苷的得率和纯度。
常用的提取方法包括溶剂提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法以及超临界流体提取法等。
溶剂提取法:这是最常见且相对简单的方法,主要利用人参皂苷在不同溶剂中的溶解度差异进行提取。
常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮等。
通过浸泡、回流或渗漉等方式,使人参皂苷从原材料中溶解到溶剂中,再通过蒸发溶剂得到粗提物。
微波辅助提取法:微波提取是利用微波对溶剂和原材料的加热作用,提高提取效率和速度。
微波产生的热能可以使细胞壁破裂,加速溶剂对人参皂苷的渗透和溶解,从而缩短提取时间。
超声波辅助提取法:超声波提取是通过超声波产生的空化效应、机械效应和热效应等作用,增加溶剂对原材料的穿透力,提高人参皂苷的提取率。
同时,超声波还可以破坏细胞结构,使皂苷更容易释放到溶剂中。
超临界流体提取法:超临界流体提取是利用超临界状态下的流体(如二氧化碳)作为溶剂,通过调节压力和温度来控制流体的溶解能力,从而实现对人参皂苷的高效提取。
这种方法具有提取效率高、操作温度低、对原料破坏小等优点。
在实际应用中,可以根据人参原材料的性质、目标皂苷的特点以及实验条件等因素,选择最合适的提取方法。
为了提高提取效果,还可以结合使用多种提取方法,如先用溶剂提取法得到粗提物,再用超声波或微波辅助提取法进行进一步的纯化。
三、人参皂苷的分离技术人参皂苷的分离是提取过程后的关键步骤,其主要目标是从复杂的混合物中分离出单一或特定类型的人参皂苷。
这通常涉及到一系列的色谱技术,包括液-液分配色谱、固相萃取、柱色谱、薄层色谱以及高效液相色谱(HPLC)等。
液-液分配色谱,也称为液-液萃取,是基于不同物质在两种不相溶溶剂中的溶解度差异进行分离的。
这种方法对于初步分离人参皂苷和其他杂质非常有效。
固相萃取是一种基于吸附和解吸原理的分离技术。
保健食品中人参皂苷的检测方法[发明专利]
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010922832.4(22)申请日 2020.09.04(71)申请人 广东省中药研究所地址 510653 广东省广州市天河区高唐路229号4栋301房(72)发明人 陈树东 冯锐 梁土金 崔媛媛 钟满霞 (74)专利代理机构 广州广典知识产权代理事务所(普通合伙) 44365代理人 万志香 曾银凤(51)Int.Cl.G01N 30/02(2006.01)G01N 30/06(2006.01)G01N 30/30(2006.01)G01N 30/32(2006.01)G01N 30/34(2006.01)G01N 30/72(2006.01)(54)发明名称保健食品中人参皂苷的检测方法(57)摘要本发明涉及一种保健食品中人参皂苷的检测方法,包括如下步骤:(1)提取:取待测样品,用溶剂提取,得样品提取溶液;(2)净化:将所述样品提取溶液用固相萃取柱净化,收集净化后的洗脱液,用溶剂定容,得待测样品溶液;所述固相萃取柱中的填料为中性氧化铝和XAD ‑2大孔树脂复合填料;(3)检测:将所述待测样品溶液注入高效液相色谱‑串联质谱仪进行检测,其中,液相色谱的条件包括:色谱柱:C18键合硅胶色谱柱;流动相:A为含甲酸的乙酸铵溶液,B为乙腈,梯度洗脱。
该方法消除了复杂基质下杂质峰对人参皂苷定性定量的影响,人参皂苷定性定量的准确率高,并且可以同时对保健食品中9种最主要的人参皂苷进行检测。
权利要求书3页 说明书18页 附图3页CN 112098551 A 2020.12.18C N 112098551A1.一种保健食品中人参皂苷的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)提取:取待测样品,用溶剂提取,得样品提取溶液;(2)净化:将所述样品提取溶液用固相萃取柱净化,收集净化后的洗脱液,用溶剂定容,得待测样品溶液;所述固相萃取柱中的填料为中性氧化铝和XAD-2大孔树脂复合填料;(3)检测:将所述待测样品溶液注入高效液相色谱-串联质谱仪进行检测,其中,液相色谱的条件包括:色谱柱:C18键合硅胶色谱柱;流动相:A为含甲酸的乙酸铵溶液,B为乙腈,梯度洗脱。
人参皂苷国际标准
人参皂苷国际标准
人参皂苷是一种天然产物,是从人参中提取的一种活性成分。
人参皂苷具有多种药理活性,如抗炎、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用,因此在药物和保健品领域有广泛的应用。
目前,人参皂苷的国际标准是根据其化学结构和含量进行评估的。
以下是人参皂苷国际标准的详细内容:
1. 化学结构:人参皂苷是一种三萜类化合物,其结构由糖基和萜环组成。
主要的人参皂苷包括Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rg3等。
2. 含量测定方法:人参皂苷的含量可以通过高效液相色谱法(HPLC)进行测定。
该方法可以同时测定多种人参皂苷的含量,并且具有高灵敏度和准确性。
3. 含量标准:根据不同的人参品种和用途,人参皂苷的含量标准有所差异。
一般来说,人参皂苷的含量应在人参总皂苷中占比较高,且主要成分Rg1和Rb1的含量应符合一定的比例关系。
4. 质量控制:人参皂苷的质量控制包括原料药的选择和加工工艺的控制。
合格的人参皂苷应采用优质的人参作为原料,并且在提取和纯化过程中要控制温度、时间、溶剂等因素,以保证人参皂苷的质量和稳定性。
需要注意的是,人参皂苷的国际标准可能会因不同国家或
地区的法规和标准而有所差异。
因此,在具体应用中,需要根据当地的法规和标准进行评估和判定。
HPLC法测定保健食品中人参皂苷Rh_2的含量
用甲醇作为提取剂 ,对同一样品分别用 10、15、20、25、30、 35、40 m in 进行超声提取测定 ,其测定值分别为 1187、1110、 1111、1112、1111、1113 g/100 g,测定结果表明 ,在 20 m in 后 , 测定结果基本稳定 ,为保证不同样品的提取效果 ,本文采用 30 m in 超声提取 。 218 样品测定
样品中人参皂甙 Rh2 含量通过外标法定量 , 人参皂甙 Rh2 含量按以下公式计算 :
R = C ×V ×D ×100 /M 式中 :
R —样品中人参皂甙 Rh2 含量 , g/100 g C—样品中待测组分的浓度 , g/m l M —检测样品取样量 , g V —样品溶液定溶体积 , m l D —样品溶液的稀释倍数
1 材料与方法 111 仪器与试剂
岛津高效液相色谱仪配备 SIL - 10ADvp 自动进样器 ; LC - 10ATvp高压泵 ; SPD - 10Avp 紫外 - 可见光检测器 , SPD M10Avp二极管阵列检测器 ; 2200超声波清洗器 。甲醇 、乙腈 为色谱纯 ;乙醇为分析纯 ;水为二蒸水 ;人参皂甙 Rh2 标准 (中 国药品生物制品检定所提供 , 111748 - 200501) 。 112 标准溶液配置
D eterm ina tion of g in senoside Rh2 in hea lth food by HPLC
人参中人参皂苷类成分含量测定方法优化
1176 环球中医药2015年10月第8卷第10期 Global Traditional Chinese Medicine,October2015,Vol.8,No.10 and ginsenoside Rb1in ginseng.Methods Four factors including extraction method,extraction solvent,solvent volume and extraction time were studied through single⁃factor test method.And HPLC method wasadopted to analyze the determination results of ginsenoside Rg1,ginsenoside Re and ginsenoside Rb1.Results The best sample preparation conditions for the content determination of ginsenosides were50times70%methanol,reflux extraction and duration of2.5h.Conclusions The improved method issimple,accurate,and reproducible which could supply a better method for the content determination of gin⁃senosides.【Key words】 Ginsenosides; Determination; Improvement 人参为五加科植物人参Panax gineseng C.A. Mey的干燥根和根茎,为常用名贵药材㊂人参具有大补元气㊁复脉固脱㊁补脾益肺㊁生津养血和安神益智的功效,临床上用于体虚欲脱,脾虚食少,肺虚喘咳,津伤口渴,气血亏虚㊂人参中主要含有皂苷㊁多糖㊁挥发油等化学成分[1],‘中华人民共和国药典“(一部)[2]中,以人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re㊁人参皂苷Rb1为含量测定指标性成分,对其进行质量控制㊂在‘中华人民共和国药典“(一部)人参 含量测定”项下供试品溶液制备方法中,人参药材粉末采用氯仿连续回流提取,药渣挥去氯仿,再用水饱和正丁醇浸泡,放置过夜后超声处理提取皂苷类成分㊂‘中华人民共和国药典“(一部)中规定人参中人参皂苷含量限度为含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量不得少于0.30%,人参皂苷Rb1不得少于0.20%㊂在采用人参含量测定项下方法进行供试品溶液制备时,发现该方法存在以下问题:(1)该方法中,氯仿回流提取的目的是为了除去脂溶性杂质,而实际工作中发现,人参药材粉末采用氯仿连续回流提取后,氯仿提取液几乎无色,且蒸干后残渣量很少,此步骤未除去脂溶性杂质;(2)采用水饱和正丁醇提取人参皂苷时,先放置过夜(约12小时),再超声处理,此过程所需时间太长,且无实际意义,故 放置过夜”步骤可以省略;超声处理提取皂苷类成分时,发现所得正丁醇提取液颜色较浅,溶液蒸干后,所得残渣量较少,且平行操作两份差距较大㊂综合分析实验现象和结果,并结合文献[3⁃5]中方法推测,采用正丁醇作为提取溶剂进行超声处理,未能把人参中皂苷类成分提取完全,故导致含量测定结果偏低且误差较大㊂其原因可能在于正丁醇为脂溶性有机溶剂,在提取过程中,不能有效穿透细胞膜,因而不能将皂苷类成分完全溶出㊂中药指标性成分含量测定方法的正确性㊁合理性是中药质量控制和开发应用的基础㊂针对人参中人参皂苷类成分含量测定方法中供试品溶液制备过程的不合理问题,本文拟对人参中皂苷类成分含量测定中供试品制备方法进行优化,以保证人参含量测定结果的真实可靠,结果可信㊂改进后人参中皂苷类成分含量测定方法中供试品溶液制备方法简单㊁适用,结果准确可靠,重复性好,为人参科学的质量控制与评价及进一步开发应用提供科学依据㊂1 材料与仪器1.1 药材与试剂人参药材购自河北安国药材市场(三批样批号分别是1:140201CP390,2:301002041,3:20140416,经北京中医药大学生药系张贵君教授鉴定为人参Panax ginseng C.A.Mey),甲醇㊁三氯甲烷㊁正丁醇㊁乙醇(分析纯,北京化工试剂厂),乙腈(色谱纯,塞默飞世尔科技有限公司),水(娃哈哈纯净水),人参皂苷Rg1对照品(中国食品药品检定研究院,批号: 110703⁃201529),人参皂苷Re对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110754⁃201324),人参皂苷Rb1对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110704⁃201424)㊂1.2 仪器Waters1525⁃2489高效液相色谱系统,Breeze2色谱工作站(美国Waters公司),Sartorius BT25S型十万分之一电子分析天平(北京赛多利斯仪器有限公司),EQ⁃100DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),HH⁃S2二孔智控水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)㊂2 方法与结果2.1 色谱条件参照‘中华人民共和国药典“(一部)中人参含量测定项下方法色谱条件㊂SunFireC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),检测波长:203nm,流速:1.0mL/min,流动相A为乙腈,B为水,按表1中环球中医药2015年10月第8卷第10期 Global Traditional Chinese Medicine,October2015,Vol.8,No.101177规定进行梯度洗脱,理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000㊂表1 流动相梯度洗脱表时间(min)流动相A(%)流动相B(%)0~35198135~5519→2981→7155~70297170~10029→4071→602.2 对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品7.89mg,人参皂苷Re对照品8.03mg和人参皂苷Rb1对照品8.61mg,分别置于10mL量瓶中,甲醇溶解㊁稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液㊂分别精密量取人参皂苷Rg1对照品储备液2.5mL,人参皂苷Re对照品储备液2.5mL和人参皂苷Rb1对照品储备液2.3mL,置于同一10mL量瓶中,甲醇稀释至刻度,摇匀,即得㊂2.3 供试品溶液制备方法的建立2.3.1 提取方式考察 (1)药典方法[2]:取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷,加热回流3小时,弃去三氯甲烷,药渣挥干溶剂,连同滤纸筒移入100mL锥形瓶中,精密加入水饱和正丁醇50mL,密塞,放置过夜,超声处理30分钟,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂(2)回流提取:取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,密塞,称定重量,加热回流2小时,取出,密塞,放冷,补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂(3)超声处理:取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,密塞,称定重量,超声处理1小时,取出,密塞,放冷,补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂依上述色谱条件,精密吸取对照品溶液10μL 和上述供试品溶液20μL,分别进样分析,测定色谱峰峰面积,计算含量㊂由表2可见,采用回流提取方式,所测人参皂苷Rg1,人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量最高,故确定提取方式为回流提取㊂表2 提取方式考察结果提取方法人参皂苷Rg1含量(%)人参皂苷Re含量(%)人参皂苷Rb1含量(%)药典方法0.410.190.37回流提取0.960.53 1.60超声处理0.770.46 1.04 2.3.2 提取溶剂考察 取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具锥形瓶中,分别精密加入甲醇㊁70%甲醇㊁50%甲醇和乙醇50mL,密塞,称定重量,加热回流2小时,取出,补足减失的重量,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣分别加甲醇㊁70%甲醇㊁50%甲醇和乙醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂由表3可见,以70%甲醇作为提取溶剂,所测人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re和人参皂苷Rb1含量高于其他提取溶剂结果,故选择提取溶剂为70%甲醇㊂表3 提取溶剂考察结果提取溶剂人参皂苷Rg1含量(%)人参皂苷Re含量(%)人参皂苷Rb1含量(%)甲醇0.900.50 1.61 70%甲醇 1.260.54 2.18 50%甲醇 1.260.54 2.06乙醇0.760.45 1.22 2.3.3 提取时间考察 取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,分别精密加入70%甲醇50mL,称定重量,加热回流1小时,1.5小时,2小时,2.5小时,3小时,取出,放冷,补足减失的重量,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加70%甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂由表4可见,加热回流2.5小时后人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re和人参皂苷Rb1总含量基本不再增加,故选用2.5小时作为提取时间㊂表4 提取时间考察结果提取时间人参皂苷Rg1含量(%)人参皂苷Re含量(%)人参皂苷Rb1含量(%) 1小时 1.350.66 1.98 1.5小时 1.350.67 2.122小时 1.370.65 2.23 2.5小时 1.360.67 2.553小时 1.360.67 2.591178 环球中医药2015年10月第8卷第10期 Global Traditional Chinese Medicine,October2015,Vol.8,No.10 2.3.4 溶剂倍量考察 取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,分别精密加入70%甲醇30mL(30倍量),40mL(40倍量),50mL(50倍量),60mL(60倍量),称定重量,加热回流2.5小时,取出,补足减失的重量,过滤,分别取续滤液15mL㊁20mL㊁25mL㊁30mL置蒸发皿中蒸干,残渣加70%甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂表5数据说明,采用50倍和60倍70%甲醇提取,所测人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re和人参皂苷Rb1总含量基本相当,故选择50倍作为提取倍量㊂表5 溶剂倍量考察结果溶剂倍量(ml/g)人参皂苷Rg1含量(%)人参皂苷Re含量(%)人参皂苷Rb1含量(%)30 1.370.66 2.1640 1.370.66 2.1850 1.380.65 2.2760 1.400.66 2.24综上,人参中皂苷类成分含量测定供试品溶液制备最佳方法为:取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇50mL,密塞,称定重量,加热回流2.5小时,取出,密塞,放冷,补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂2.4 样品测定取市售三批人参药材样品,按样品供试品溶液制备方法制备,测定色谱峰峰面积,计算含量㊂结果见表6㊂表6 三批样品测定结果(n=3)批号人参皂苷Rg1含量(%)RSD(%)人参皂苷Re含量(%)RSD(%)人参皂苷Rb1含量(%)RSD(%)1 1.39 2.440.70 2.70 2.22 2.082 3.05 1.09 1.480.86 4.12 1.393 1.110.900.800.38 1.53 1.303 讨论3.1 提取方式选择通过比较药典方法㊁回流提取和超声处理的含量测定结果,发现药典方法测定结果明显偏低㊂采用回流提取不仅可以缩短样品处理时间,省去氯仿除杂环节,节省有机溶剂,减少实验步骤,同时可以提高人参皂苷提取率,保证实验结果的准确度和重复性㊂3.2 提取溶剂选择比较甲醇溶液提取与乙醇溶液提取的含量测定结果,乙醇提取率明显较低㊂进一步研究发现70%甲醇提取率略高于50%甲醇溶液提取率,且在实验中发现,采用50%甲醇作为提取溶剂,提取得到的水溶性杂质较多,故选择提取溶剂为70%甲醇溶液㊂3.3 提取时间选择比较1小时㊁1.5小时㊁2小时㊁2.5小时和3小时回流提取含量测定的结果,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量基本不变,人参皂苷Rb1的含量随时间延长明显增加,2.5小时后基本不再增加,故选2.5小时作为提取时间㊂3.4 溶剂倍量选择实验中采用50倍量和60倍量70%甲醇提取时,人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re和人参皂苷Rb1总含量大致相同,考虑节省成本,本实验采用50倍量70%甲醇提取㊂此外,研究过程中还发现采用本方法处理样品,人参皂苷提取率会明显增加,若以此法测定人参中人参皂苷的含量,其含量限度的制订尚待进一步深入研究㊂参考文献[1] 徐静,贾力,赵余庆.人参的化学成分与人参产品的质量评价[J].药物评价研究,2011,34(3):199⁃203.[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:8.[3] 曲帅.人参有效活性成分的提取分离及含量测定[D].长春:吉林大学,2013.[4] 杨雨,郑斯文,金银萍,等.人参皂苷的提取分离方法研究进展[J].江苏农业科学,2014,42(5):214⁃217.[5] 乔雪,李月茹.黑参中7种人参皂苷含量测定[J].人参研究,2012,24(1):10⁃12.(收稿日期:2015⁃05⁃28)(本文编辑:董历华)。
人参中人参皂苷检测的固相萃取方法
人参中人参皂苷检测的固相萃取方法(Copure®D101大孔树脂净化柱)人参皂苷(Ginsenoside)是一类固醇类化合物,又称三萜皂苷。
主要存在于人参属药材中。
人参皂苷被视为是人参中的活性成分,具有增加白细胞数量、提高人体免疫力、促进物质代谢、抗疲劳、抗衰老等作用,因而成为研究的目标。
本方法可用于检测人参、西洋参、花旗参等参类及其制品中的人参皂苷,方法简单,易于操作。
一、样品提取称取经Copure®旋风磨粉碎后的1 g人参样品,加水50 mL,超声20 min,取出,离心后取上清液于另一干净试管,重复提取一遍,合并提取液,摇匀,取10 mL,待净化。
备注:加标样品为经预处理不含本底的空白样品。
二、样品净化(Copure®D101大孔树脂净化柱)活化:向大孔树脂净化柱中加入10 mL甲醇活化,10 mL水平衡大孔树脂净化柱。
上样和洗脱:将待净化液的样品加入已经活化好的大孔树脂净化柱中,用加入10 mL 水淋洗大孔树脂净化柱,弃去淋洗液。
用25 mL 70%甲醇水溶液洗脱大孔树脂净化柱,收集洗脱液,水浴蒸干,残渣以甲醇溶液定容至1mL,过PTFE滤膜,上机。
三、仪器条件仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)流动相:A:水B:乙腈洗脱方式:梯度洗脱,见表1流速:1.0 mL/min柱温:35℃进样量:20 μL检测器:紫外检测器检测波长:203 nm表1 梯度洗脱程序四、实验结果(1)加标回收实验结果表2 三种人参皂苷的加标回收结果(2)三种人参皂苷色谱图图1 三种人参皂苷的色谱图五、订购信息货号描述包装COD101124000Copure®D101大孔树脂净化柱,4g/12mL 50支/盒BN24biocomma® 智能水浴氮吹仪1台/箱TWM160BIOCOMMA®旋风磨1台/箱SF130-22-PTFE PTFE针式过滤器,直径13 mm,孔径0.22 μm,有机系100个/盒SC2-1 2 mL蓝色聚丙烯盖,白色PTFE/红色硅胶垫,9-425100个/盒V2-AL 2 mL螺纹棕色样品瓶,带书写处11.6*32 mm,9-425100个/盒。
保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究
保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究摘要】目的建立保健食品中人参总皂苷含量的测定方法。
方法用水提取人参总皂苷类成分,经水饱和正丁醇萃取、氨试液洗涤除杂后,试样中的人参皂苷类成分在高氯酸的作用下与香草醛反应,产生特征的紫红色,在560nm下测定吸光度。
结果人参总皂苷在0.0722~0.2165mg质量范围内与吸光度线呈良好的线性关系,平均回收率为95.9%。
结论本文建立的方法简单、便捷,准确性、重复性好,可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。
【关键词】保健食品人参总皂苷分光光度法【中图分类号】R93 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)20-0217-02皂苷类成分是参类中的主要活性物质, 具有滋补强壮,增强免疫,抗疲劳的功效[1],常用的检测方法为紫外分光光度法[2-5]。
目前市售含参类的保健食品有片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液等,均是以总皂苷含量来评价其产品的质量和功效。
其测定方法大多都是按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的方法检测[6],在实际应用中,主要存在以下问题:1、固定的树脂柱载样量与不确定的样品总皂苷含量之间的矛盾,部分样品存在柱容量超载的情况,测定结果偏差严重。
2、部分样品经过大孔树脂柱除杂后,仍存在干扰比色测定的杂质。
3、操作步骤欠规范,导致测定结果重现性差。
本文针对总皂苷的提取方式、以及测定过程中的参数进行研究,建立了保健食品中人参总皂苷的测定方法。
1 仪器、材料与试药岛津UV2450紫外分光光度计;瑞士梅特勒XS105DU电子天平;上海一恒电热恒温水浴锅;人参皂苷Re(中检所,批号110754-200822,含量88.8%);儿童装高丽红参液,舒灵胶囊,舒慰快牌胃肠液均购自市场;水为蒸馏水,其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果2.1供试品溶液的制备固体试样:称取1 g样品,置100 mL容量瓶中,加水80 mL,超声提取30 min,放冷至室温,用水定容至刻度,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25 mL,进行萃取。
人参皂甙的测定药典法
在线脱气机(选配): DM-101 自动进样器(选配): AS-401
-1-
图 1 皂甙标样(30µg/mL)谱图
组分名称 Re Rg1 Rf Rb1 Rc Rb2
图 2 人参样品谱图
保留时间(min) 43.46 45.26 63.64 80.25 83.40 87.03
实验所需设备
设备名称 超声波水浴
溶剂过滤器 电子天平
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规格 ——
—— 精度 0.0001g
设备名称 C18 色谱柱
针式过滤器 一次性无针头注射器
规格
250 mm×4.6 mm, 5 μm
0.45μm, 有机系 5mL/1mL
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参照标准:2010 中国药典 样品溶液制备: 准确称取人参粉末样品 1g 左右(精确至 0.0001g)于 50mL 容量
瓶中,加入甲醇超声 45min,定容,过 0.45μm 滤膜,待测。色谱条件来自色谱柱:流动相:
C18 柱,250 mm×4.6 mm,5 μm 流动相 A:乙腈 流动相 B:水(0.45 μm 滤膜过滤)
人参皂甙的测定(药典法)
人参是多年生草本植物,是众所周知的名贵药材。有强身健体、益寿延年的功效。经现 代医学研究及化验分析表明,人参内含有一种叫人参皂甙的化学物质,它对调节人的中枢神 经系统、强心、抗疲劳、调节物质代谢等有明显功效,是人参的主要活性成分。现已明确知 道的 GS 单体约有 40 余种,如 Re、Rc、Rb、Rg 等等。
梯度洗脱时间表
时间(min) 0 35 55 70 100
流速: 柱温: 检测波长: 进样量:
仪器配置
高压泵: 柱温箱: 检测器: 工作站:
流动相 A(%) 19 19 29 29 40 1.0 mL/min 35 ℃ 203nm 20 μL
高效液相色谱法分离测定人参保健制品中的人参皂甙
高效液相色谱法分离测定人参保健制品中的人参皂甙任一平;黄百芬;沈向红;王彤宇【期刊名称】《浙江科技学院学报》【年(卷),期】2003(015)0z1【摘要】样品经60%的甲醇水溶液溶解,超声提取30 min.冷却至室温后,用60%甲醇溶液准确定容.再经15000r/min离心10min,取上清液经高效液相反相色谱法测定,以乙腈-水为流动相,经梯度洗脱分离测定人参保健制品中的6种主要的人参皂甙.使用紫外检测器在203 nm波长处检测.应用方法对皂甙Rb1进行线性范围测定,测得其在0~378 μg/mL浓度范围内有良好的线性,测得其回收率在95%以上,最低检测限为2.2 ng.【总页数】4页(P64-67)【作者】任一平;黄百芬;沈向红;王彤宇【作者单位】浙江省疾病预防控制中心,浙江,杭州,310009;浙江省疾病预防控制中心,浙江,杭州,310009;浙江省疾病预防控制中心,浙江,杭州,310009;浙江省疾病预防控制中心,浙江,杭州,310009【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.高效液相色谱法同时测定人参口服液中6种人参皂甙 [J], 叶日金;潘雪静;陈茹2.高效液相色谱法分离测定人参中的6种人参皂甙 [J], 陈薇;胡广林;王翊如;王小如3.高效液相色谱法测定人参单体皂甙的研究——醋酸铵对人参皂甙分离的色谱改性[J], 顾光华;周蕾;赵贵文4.高效液相色谱法分离测定人参保健制品中的人参皂甙 [J], 任一平;黄百芬;沈向红;王彤宇5.中华人民共和国国家标准《人参加工产品分等质量标准》(二)对人参中总皂甙含量及人参皂甙Rb<sub>1</sub>含量标准的研究与讨论 [J], 汤美兰;徐颖;庞亚清;秦静;梁雪芹;朱飞;朱妙英;许莹;赵秋萍;王晓萍;鞠萍;丁贵忠;王琳;初正云;王瑞江;郭安;富力;何晓秋;李树殿;赵晓松;魏春雁;徐绥绪因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
人参皂苷检测方法和标准
人参皂苷检测方法和标准嘿,朋友!今天咱来唠唠人参皂苷检测方法和标准那些事儿哈,这可是我的独家秘籍哦!首先呢,咱得准备好工具,就像上战场得有趁手的兵器一样。
这工具可不能马虎,得靠谱才行。
然后咱就开始检测啦!第一步,把要检测的东西弄出来一点,就像从大蛋糕上切下一小块儿似的。
可别切多了哈,不然就浪费啦!接着,把这小块儿放到一个特别的仪器里,这个仪器就像一个超级厉害的“侦探”,能把人参皂苷给找出来。
在这过程中啊,你得耐心等待,可别像那猴子屁股坐不住似的。
想象一下,就好像等着开奖一样,心里有点小期待呢!等啊等,终于出结果啦!这时候就得仔细看看啦,可别像近视眼没戴眼镜似的看不清。
看看这结果是不是符合标准。
说到标准,这可就重要啦!就好比跑步比赛,得有个终点线,不然都不知道跑多远算赢。
这标准就是那个终点线,得清楚明白才行。
我跟你说哈,我有次检测的时候,紧张得手都有点抖,心想着可千万别出错啊。
结果还真闹了个笑话,我把那小块儿放错地方啦,哎呀妈呀,可把我给尴尬的。
还好我及时发现,不然就白折腾啦!还有啊,检测的时候周围环境也得注意,可别像那菜市场似的乱糟糟的。
得找个安静的地儿,让咱能专心检测。
另外,操作的时候可别粗心大意,就像那马大哈似的。
每个步骤都得认真对待,不然一步错步步错,那可就麻烦啦!检测完了,也别忘了把工具收拾好,就像咱打完仗得把兵器放好一样。
可别乱丢乱放,下次要用找不到可就傻眼啦。
总之呢,人参皂苷检测方法和标准就是这么回事儿。
只要你按照我说的一步一步来,肯定没问题。
记住啦,准备好工具,认真操作,注意标准,保管好结果。
好啦,朋友,赶紧去试试吧!哈哈!。
保健食品中人参皂甙的测定(高效液相色谱法)
保健食品中人参皂甙的测定(高效液相色谱法)1 适用范围本方法规定了人参含片、人参冲剂、人参茶、人参胶囊等以人参为主要原料的保健食品中人参皂甙的含量的HPLC的测定方法。
本方法适用于人参含片、人参冲剂、人参茶、人参胶囊等以人参为主要原料的保健食品中人参皂甙的含量的HPLC的测定方法。
本方法的六种皂甙的最低检出量为:10mg/kg。
本方法的六种皂甙的最佳线性范围:0.1mg/mL~1mg/mL。
2 原理将试样中的人参皂甙溶解、提取、经净化处理后,使用梯度洗脱反相高效液相色谱进行分离,紫外检测器(UV)检测,根据色谱峰的保留时间定性,外标定量,适用于保健食品中人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd的同时定量分析。
3 试剂试验用水为去离子水。
3.1乙腈:色谱纯,200nm吸光度值为0.021。
3.2甲醇:分析纯。
3.3101大孔吸附树脂。
3.4高效液相色谱流动相:梯度淋洗A液为乙腈,B液为水。
3.5人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准品:含量大于98%(HPLC)。
3.6人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准溶液的配制:配制人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准储备液,浓度分别为10mg/mL;再以此储备液配制成混合标准系列溶液,浓度范围为0.1mg/mL~1mg/mL;所有标准溶液均用甲醇配制。
4 仪器设备4.1高效液相色谱仪:双高压输液泵,附紫外检测器。
4.2超声波清洗器。
4.3离心机。
4.4水浴锅。
5 分析步骤5.1固体试样处理取片剂或胶囊内容物研成粉末,并过20目筛;精确称取该粉末样适量于50mL具塞试管中,加水50mL于超声波清洗器中超声提取30min,取出,待溶液恢复常温后,准确取出10mL,通过D-101大孔吸附树脂净化柱(大孔吸附树脂使用前先经甲醇浸泡,水洗,装成10cm长小柱),小柱先用10mL水冲洗,弃去水液之后,用70%甲醇25mL洗脱皂甙,收集甲醇溶液,水浴上蒸干,残留以甲醇溶解并定容至5mL,该样液离心后过0.5µm 膜,滤液进行色谱分析。
人参中高极性人参皂苷类成分的研究
人参中高极性人参皂苷类成分的研究人参(Panax ginseng C.A.Mey.)为五加科(Araliaceae)人参属(Panax)植物,具有大补元气,生津安神,复脉固脱,补脾益肺等功效。
人参中主要药效成分为人参皂苷,属于三萜皂苷类化合物,也是人参属植物西洋参、三七等的主要药效成分。
现代药理学研究证明,人参皂苷具有抗肿瘤、调节免疫系统、调节中枢神经系统、调节循环系统及抗衰老等多种药理作用。
截至目前,国内外关于人参皂苷类化学成分与药理作用的研究报道很多,大部分都集中在中、低极性的常见人参皂苷及稀有人参皂苷,如人参皂苷Rb<sub>1</sub>、Rb<sub>2</sub>、Rb<sub>3</sub>、Rc、Rd、Re、Rg<sub>1</sub>、Rg<sub>2</sub>、Rg<sub>3</sub>、Rh<sub>1</sub>、Rh<sub>2</sub>、Rk<sub>1</sub>、Rg<sub>5</sub>、PPD、PPT等等,而关于高极性人参皂苷如R0、Ra<sub>1</sub>、Ra<sub>2</sub>、Ra<sub>3</sub>等的研究报道则很少。
为填补高极性人参皂苷在人参属植物中的含量以及生物活性方面的研究空白,本文对人参中高极性人参皂苷进行了提取、分离、结构鉴定、含量测定以及生物活性的系统研究。
本文首先从人参根80%的乙醇提取物中分离得到6个高极性人参皂苷单体,根据1H NMR、13C NMR、MS等波谱数据并结合理化性质,鉴定了它们的化学结构,它们分别为人参皂苷Ra<sub>1</sub>、Ra<sub>2</sub>、Ra<sub>3</sub>、Rb<sub>1</sub>、Rb<sub>2</sub>和R0。
高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量
高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量皂苷类是人参的主要成分和药效成分,采用高效液相色谱法可准确测定人参中各皂苷类成分,本文主要介绍采用液相色谱测定在超微粉碎技术下得到不同粒度的粉末中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。
标签:高效液相色谱法,人参,人参皂昔本品为五加科植物人参Pana:c ginseng C.A.Mey.的干燥根和根茎。
它具有大补元气,补脾益肺,生津养血,安神益智等之功效。
临床用于体虚欲脱,肺虚气喘,肢冷脉微,脾虚食少,口渴少津,内热消渴,气血不足等[1]。
皂苷类成分是人参的主要活性物质和药效成分,因此提高它的提取率就可增强其生物利用率,以下将介绍同一批次的人参,在样品经过振动磨型超微粉碎机粉碎后得到不同粒度的粉体的皂苷含量进行测量[2]。
1 实验仪器与材料1.1 实验仪器AEL-200电子天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司),AB204-N精密分析天平(METTLER TOLEDO),Agilent 1260型HPLC(Agilent Technologies),TKCD-1006超声波清洗仪(南昌科昌达超声波设备厂),Heal Force final Filter 超纯水機(上海浦东分析仪器设备厂),HH-4数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司),SQW-25系列超微粉碎机(山东济南三清易辰)。
1.2 实验材料人参皂苷标准品Rb1,Re,Rg1:中国药品生物制品检定所;乙腈(HPLC)。
1.3 样品制备同一批次人参(吉林省长白山):人参粗粉(过40目筛);人参样品经过超微振动磨型得到粒径分别为76.006~86.348 μm、29.963~30.025 μm、25.088~25.488 μm、22.163 μm。
1.4 对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品适量,精密称定,加甲醇定容;分别精密量取上述对照品溶液各1 mL,置于同一10 mL 容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
试验人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止,文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型:①人参二醇型-A 型,②人参三醇型-B型,③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷,其皂苷元为达马烷型四环三萜,A型皂甙元称为20(S)-原人参二醇[20(S)-protopanaxadiol]。
B型皂甙元称为20(S)-原人参三醇[20(S)-protopanaxatriol]。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物,其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求]1.通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2.学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能。
[实验原理]人参的主要成分为人参皂苷,总皂苷含量约4%,人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶,味微甘苦,具有吸湿性。
人参皂苷易溶于水,甲醇、乙醇,可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯,不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
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人参研究GINSENG RESEARCH 2019年第5期、郭畅冰,徐芳菲,李蕾,杨怀雷,谢丽娟,王国明,曹志强*(吉林人参研究院·吉林通化·134001)摘要:Rg1、Re、Rb1,,、。
-,Rg1、Re、Rb1。
-3,85%。
、,、。
关键词:、;;基金项目:、,[2015]48。
作者简介:,,:。
*通信作者:,,,:、、、、。
E-mail:th5161@.(Panax ginseng C.A.Mey),“”,《》,,,,,[1]。
、,[2]。
,,,2012,,[3~4]。
3g,,。
、,,,。
,、。
-、,、,[5]。
1仪器与材料1.1、()。
1.2Rg1、Re、Rb1,≥98%。
、、、、、、,,,:D101,。
Abstract:Objective:The content of ginsenoside Rg1,Re and Rb1in ginseng food was extracted by comparingdifferent pretreatment methods,and a method for detecting the content of ginsenoside in high protein and high fat ginseng food was established.Method:The ethanol extraction-macroporous resin method was compared with the traditional pharmacopoeia method,and the content of ginsenoside Rg1,Re,Rb1and the recovery rate of the sample were determined.Results:The content of Saponins Extracted by ethanol extraction-macroporous resin method is about three times as much as that by pharmacopoeia method,and the recovery rate can reach more than 85%.Conclusion:The above method is operability and stability,and is suitable for the detection of ginsenosides in high protein and high fat ginseng foods.Keywords:high fat、high protein;ginseng food;ginsenosideStudy on detection methods of ginsenosides in high proteinand high fat ginseng foodsGUO Chang-bing ,XU Fang-fei,LI Lei,YANG Huai-lei,XIE Li-juan,WANG Guo-ming,CAO Zhi-qiang*(Jilin Ginseng Research Institute,Jilin Province 130033,China)DOI:10.19403/ki.1671-1521.2019.05.006181.3(Thermo UltiMate 3000,);(BT125D,);(KQ-500DE,);(ELGA(DI);(UK));(HH-6,)。
2实验方法2.1表1供试品溶液的制备2.2Rg1、Re 、Rb1,1ml 0.2mg ,,。
2.3Rg1+Re、Rb12.3.1;A,B,;203nm。
Rg15000。
2。
表2色谱条件2.3.210μL,, 2.4.1,。
3结果与分析3.1,,“2.1”,,Rg1、Re、Rb1,3,1、2、3。
表3对比两种前处理方法检测不同皂苷含量,2(-)1()。
图1人参皂苷Rg1、Re、Rb1混合标准品HPLC 色谱图图2方法1供试品溶液HPLC 色谱图图3方法2供试品溶液HPLC 色谱图115g,,150ml 3h,,,,150ml,,30min(250W,50kHz),,,75ml,,5ml ,,,。
(《》2015)215g,,150ml 3h,,。
3,。
100ml ,D101( 1.5cm,15cm),100ml ,10%150ml ,。
80%200ml ,,,5ml ,,,。
()A(%)B(%)0~30198130~3519→2981→7135~70297170~7129→9071→1071~1009010100~10190→1910→81101~1101981(g)Rg1(mg/g)Re(mg/g)Rb1(mg/g)Rg1+Re (mg/g)Rb1(mg/g)115.160.0280.0990.0480.1230.04615.150.0290.1020.04914.980.0240.0870.041216.100.0890.3100.3710.3520.30214.450.0780.2560.26714.490.0890.2590.261人参研究GINSENG RESEARCH 2019年第5期3.6,6(Rg1+Re =0.352mg/g,Rg10.085mg/g,Re 0.275mg/g,Rb10.302mg/g),7.5g,1ml(:Rg16.52mg、Re20.25mg、Rb122.09mg,10ml ,), 2.12,5ml ,,10μl ,,9。
结果表明:供试品溶液在0~24h 内,基本稳定,具较好的稳定性。
3.5,5,“2.1”2,8。
3.4,“2.1”20、3、6、20、24h ,7。
12345RSD(%)Rg113.92513.88813.74313.75014.12513.886 1.125Re 46.66946.00146.47146.44447.27946.5730.997Rb135.37235.41235.42935.31835.49435.4050.1853.2600mg,,“2.1”2,,4、5。
表4人参药材中人参皂苷的含量表5人参蛋糕的药材转移率注:每克蛋糕中含人参药材0.04g ,>85%,(2:-),。
3.3,“2.1”25,6。
Rg1+Re(mg/g)Rb1(mg/g)g 0.3520.302g 10.228.77(%)86.0885.97(mg)Rg1(mg/g)Re(mg/g)Rb1(mg/g)g1+e (mg/g)b1(mg/g)1639.75 2.158.419.5610.228.772632.68 2.027.989.033611.542.108.037.72表6精密度实验(n=5)结果表明:RSD<3%,仪器精密度良好。
表7稳定性实验(n=5)(h)0362024RSD(%)Rg113.92513.53313.87714.03613.57713.7896 1.612Re 46.66945.16947.08546.53445.99846.291 1.594Rb135.37236.10535.98534.66235.51635.5281.614表8重现性实验(n=5)12345RSD(%)Rg113.92513.25414.0713.44113.22413.5828 2.878Re 46.66945.11247.26346.10545.99846.2294 1.737Rb135.37234.21336.11735.58334.95235.24742.027结果表明:RSD<3%,本法重现性良好。
20人参研究GINSENG RESEARCH2019年第5期结果表明:回收率均>85%,RSD<5%,可见回收率良好。
4结论、、,,D101、。
,Rg1+Re、Rb1,,3。
,,。
85%。
、,。
参考文献[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部) [S].2015版.北京:中国医药科技出版社,2015:8~9.[2]吴晓民,赵丹,等.人参皂苷分析测定方法的研究进展[J].上海中医药杂志,2018,52(5):94~99. [3]魏建华,杨文志.人参饼干中人参总皂苷、人参单体皂苷Rb1、及Re+Rg1含量测定及人参饼干中人参皂苷的定性鉴别[J].人参研究,2013,(1):31~33. [4]李青,刘思浩,石矛.食品中人参总皂苷的测定方法研究[J].人参研究,2014,(3):17~19. [5]孙成鹏,高维平,等.D101大孔吸附树脂分离提取原人参二醇组皂苷研究[N].东北农业大学学报, 2013-6-25(6).表9各成分的回收率实验(g)(mg)(mg)(mg)(%)(%)RSD(%)Rg117.450.63320.652 1.186584.7986.55 2.72 27.520.63920.652 1.201886.2937.560.64260.652 1.200785.6047.490.63670.652 1.225390.2857.560.64260.652 1.190283.9967.430.63160.652 1.207788.36Re 17.45 2.0488 2.025 3.904191.6287.34 2.79 27.52 2.0680 2.025 3.804585.7537.56 2.0790 2.025 3.798584.9147.49 2.060 2.025 3.833087.5657.56 2.0790 2.025 3.819485.9567.43 2.0432 2.025 3.830788.27Rb117.45 2.2499 2.209 4.127485.0086.90 3.59 27.52 2.2710 2.209 4.129284.1237.56 2.2831 2.209 4.183786.0447.49 2.2620 2.209 4.307792.6157.56 2.2831 2.209 4.169885.4167.43 2.2439 2.209 4.192088.1921。