畜产品中盐酸克伦特罗残留检测方法优缺点比较
猪肉中“瘦肉精”盐酸克伦特罗残留危害及检测方法
猪肉中“瘦肉精”盐酸克伦特罗残留危害及检测方法摘要:本文介绍了盐酸克伦特罗(瘦肉精)的性质、危害性以及主要的检测方法。
关键词:盐酸克伦特罗残留检测方法1 盐酸克伦特罗的性质盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CLB)俗称瘦肉精,又名氨哮素、克喘素,化学名为“4-氨基-α-[(叔丁基氨基)甲基]-3,5-二氯苄醇盐酸盐”,常温下为白色或微黄粉末状固体,熔点为170℃~176℃,极易溶于水、甲醇和乙醇,微溶于氯仿,不溶于苯,是一种β2一肾上腺素能激动剂。
20世纪70年代末,美国等发达国家进行了盐酸克伦特罗实用性开发研究工作。
80年代,由于盐酸克伦特罗能促进猪生长,提高瘦肉率,而被作为饲料添加剂广泛应用到猪的生产中。
但是近年来,因食用被盐酸克伦特罗污染的猪肉导致中毒事件屡有发生,且后果极其严重,引起了世界各国的高度重视,为了保证猪肉产品质量安全,保护人类健康,许多国家都禁止在食用动物源性的生产中使用盐酸克伦特罗[1]。
2 危害性2.1 对猪的影响在饲用初期会在短期内出现血压升高、血管扩张、呼吸加剧、体温上升等症状,并出现采食下降、行为动作失调、神经紧张不安甚至全身震颤等症状。
后期会使猪体内糖降解作用不足,导致猪肉品质下降,同时容易发生蹄损伤和跛行,大运动量或高温条件会造成死亡。
2.2 对人的影响人食用含残留盐酸克伦特罗猪肉后对肝、肾等内脏器官会产生毒害作用,出现心悸、头痛、目眩、恶心、呕吐、心率加快、肌肉振颤等症状,特别是对高血压、心脏病、甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更大,严重的可导致死亡。
3 国内外对盐酸克伦特罗的禁用规定由于盐酸克伦特罗对猪具有加强脂肪分解,促进蛋白质合成,实现动物营养再分配,提高胴体瘦肉率,加快猪的生长等作用,盐酸克伦特罗曾作为科研成果推广,从而使多起摄入残留“瘦肉精”的消费者中毒案件发生,严重的甚至导致了死亡。
就国内而言,自1998年以来,每年都有数起类似中毒事件发生。
今年双汇“瘦肉精”事件更是引起了广泛的关注。
盐酸克伦特罗检测方法的研究进展
盐酸克伦特罗检测方法的研究进展盐酸克伦特罗是一种临床常用的药物,常用于治疗心血管疾病和高血压。
克伦特罗也被用于研究细胞的信号传导途径。
为了定量检测盐酸克伦特罗的含量,需要建立可靠的分析方法。
本文将综述盐酸克伦特罗检测方法的研究进展。
盐酸克伦特罗的检测方法主要包括物理化学方法和生物化学方法两大类。
物理化学方法包括高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法等;生物化学方法主要包括酶联免疫吸附法、免疫荧光法、生物传感器等。
高效液相色谱法(HPLC)是目前最常用的分析方法之一。
该方法具有分离能力强、分析速度快、检测灵敏度高等优点。
HPLC检测盐酸克伦特罗的条件包括流动相的选择、柱温的控制、流速和检测波长等参数的优化。
近年来,研究者通过改进色谱柱材料和液相色谱柱填料,进一步提高了方法的分离能力和分析速度。
毛细管电泳法(CE)是一种电分离技术,其分离效率取决于使用的毛细管和电场强度。
CE检测盐酸克伦特罗的关键是控制pH值和缓冲液浓度,以增强样品的分离效果。
研究人员还通过改进偏析电泳、等温电泳等技术,提高了方法的分离效率和检测灵敏度。
酶联免疫吸附法(ELISA)是一种高度选择性和灵敏度的生物化学方法。
通过将特异性抗体固定在酶标板上,可以与盐酸克伦特罗结合并形成可检测的复合物。
ELISA检测盐酸克伦特罗的关键是选择适当的抗体和酶,以及优化反应条件。
近年来,研究人员采用改进的ELISA技术,如发光ELISA和荧光ELISA,提高了方法的检测灵敏度和准确性。
生物传感器是一种新兴的生物化学方法,可以直接测量盐酸克伦特罗与生物分子的相互作用过程。
生物传感器检测盐酸克伦特罗的关键是选择合适的生物分子,如酶、抗体或DNA探针,以及优化传感器的构建和检测条件。
研究者近年来发展了多种类型的生物传感器,如电化学传感器、光学传感器和电子传感器。
盐酸克伦特罗检测方法的研究进展包括物理化学方法和生物化学方法两大类。
未来的研究方向包括提高方法的分析速度、灵敏度和选择性,并探索新的检测技术和应用领域。
优化试验条件测定动物性食品中盐酸克伦特罗残留含量
21 提取 .
称 取 (0400) 试 料 , 02m lL盐 1 - .1g 用 . o /
酸溶 液 2 L匀浆 , 于离 心管 超声 振 荡 3 i, 0m 置 0mn 取 出 ,0 8 ℃水 浴加 热 2 i, 却后 40 mn离心 2 5mn冷 50r i / 5 mn取上 清 液 , 淀 用 0 2m lL盐 酸 5m i, 沉 . o / L洗 涤 , 40 mn离心 1 i, 并 上 清 液 。用 1m lL氢 50r i / 5mn合 o / 氧化 钠调 p H值 至 9 5 0 1若 有 沉淀 产 生 , 50 . ., - 4 再 00 rmn离 心 1 i, /i 0mn 取上 清液 加人 1 0g氯化 钠 , 混匀 , 加人 2 L异丙 醇 一乙酸 乙酯 (06 )振荡 提 取 2 5 m 4 :0 , 0
1 材 料与 方 法
分 别用 5m L水 和 3m L乙醇 冲洗 柱子 , 去流 出液 , 弃 用 6m L乙 醇 一浓 氨 水 (8 2 冲 洗 柱 子 , 集 流 出 9 :) 收 液 , 流 出液浓 缩 至干 。于 净化 、 干 的残 渣 中加 人 将 吹 0 1m lL 盐 酸 10 , 残 渣 充 分 溶 解 。 用 . o / 0 使 04  ̄ ' 膜 过滤 , .5mn L 滤 收集 滤液 作 为供试 液 。 2 3 色谱 条 件 色 谱 柱 : D . O S—C 8 20 n l 1,5 l × n
mn i 。提取 完毕 , 放置 5mn 若有 乳化 层再离 心 ) i( 。 用 1 L异 丙 醇 一乙 酸 乙 酯 ( :0 再 重 复 萃 取 1 5m 0 4 6)
次 , 并 有 机 相 ,0 合 6 ℃旋 转 蒸 发 仪 浓 缩 至 近 干 。用
酶联免疫吸附法(ELISA)检测猪肉中盐酸克伦特罗
BB 0×100%百分吸光度值(%)=酶联免疫吸附法(ELISA )检测猪肉中盐酸克伦特罗薛金英(山东省诸城市畜牧兽医管理局山东诸城262200)盐酸克伦特罗(俗称瘦肉精)为一种人工合成的β-肾上腺素兴奋剂,具有扩张支气管的作用,常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。
当其应用量达到治疗量的5~10倍时,其有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉积减少,因此俗称为“瘦肉精”。
在畜牧业生产中一些非法使用者将其作为一种和生长促进剂添加到动物饲料中,用以改善胴体的品质,同时也造成食品中盐酸克伦特罗(瘦肉精)的残留。
当人们食用盐酸克伦特罗残留的产品后会出现一系列的中毒症状。
动物源性食品药物残留问题逐渐引起人们的重视。
本法用于定量、定性检测猪肉中盐酸克伦特罗的残留。
1试验原理采用间接竞争ELISA 法,在微孔板上包被抗盐酸克伦特罗检测抗原,样品中的盐酸克伦特罗将和酶标板上的盐酸克伦特罗检测抗原竞争结合盐酸克伦特罗抗体,盐酸克伦特罗检测抗原结合的盐酸克伦特罗抗体再与同时加入的酶标二抗结合,洗涤后,用TMB 底物系统显色,微孔板吸光值与样品中盐酸克伦特罗含量成负相关,与标准曲线比较再乘以浓度比值即可得出盐酸克伦特罗在样品的实际含量。
2试验方法(稀释倍数为4倍)称取1.0g (±0.05g )均质样品于50mL 聚苯乙烯离心管中,加入1mL 0.1M 盐酸,再加入2mL 提取工作液,充分振荡混匀5min ,4000rpm (20~25℃)离心10min 。
取1mL 上清液加入约25μL 1M 氢氧化钠调节pH 至6.5~7.5之间,充分振荡混匀,取50μL 用于分析。
如果上层中存在白色脂肪层,取样时应避开。
试剂准备:将10×浓缩洗涤液和蒸馏水(或去离子水)按1∶9充分混匀,即为1×洗涤液。
编号:将盐酸克伦特罗标准溶液和待测样品对应微孔按序编号,建议每个标准溶液和待测样品均做重复孔。
盐酸克伦特罗检测方法的比较和应用
现 代农 业 科技
21 年第 1 01 5期
农 业基础 科 学
盐 酸克伦特罗检测方法的比较和应用
黄 小洁 朱永仁
( 深 圳 市 易 普 乐 化 工 有 限 公 司 , 东 深 圳 5 80 ; 深 圳 市 龙 岗 区 南 湾街 道 办 事处 ) 广 10 1
摘 要 综述 了 目前 盐酸 克伦特 罗( 肉精 ) 瘦 的检 测 方法 , 对各 种检 测 方法进 行 了比较 , 以及分 析 了各 种检 测方 法的应 用 。 关键 词 盐 酸克伦 特 罗 ; 测 方 法 ; 检 比较 ; 用 应 中图分 类 号 0 5 文献 标识 码 A 文章 编 号 1 0 — 7 9 2 1 )5 0 3 — 1 62 0 7 5 3 (0 1 1— 0 7 0
测 方 法 的研 究 具有 十分 重 要意 义 。 P C) 气相 色谱 一 谱 法 ( C— ) 检 测 方 HL 、 质 G MS 等 法 进行 了探 讨 , 并对 各种 检测 方法 进 行 了比较 。
盐酸克伦特罗快速检测原理
盐酸克伦特罗快速检测原理哎,你听说过盐酸克伦特罗吗?这个名字一听就感觉高大上,但其实它是一种常被用来提高动物生长速度的药物。
尤其是在养殖业,它可以让牲畜长得又快又壮。
不过,这种药物在一些地方是不允许用的,原因嘛,大家可以猜猜,当然是担心它对人体健康有影响啦。
如果不小心吃到含有这种物质的肉,可能就会出现心跳加速、失眠、恶心等不良反应,甚至长期食用可能对健康造成更严重的伤害。
咳咳,反正呢,这个盐酸克伦特罗的检测就变得特别重要了。
因为,它不可能只是“咦,我突然想知道有没有这个东西”,而是要真正能够准确地知道牲畜是不是被“调皮”地喂了这种药物。
那你肯定会问:怎么知道它是不是含盐酸克伦特罗呢?哎呦,这可就需要一套快准狠的检测手段了。
说到检测原理,别着急,我给你讲讲,简单点说就是通过一些特殊的方法,快速找出它的“蛛丝马迹”。
这个检测的基本原理啊,基本上是通过一种叫做免疫分析的方法来完成的。
别看名字有点吓人,其实这个免疫分析法就像是找“特工”,找出来那些潜藏在样本里的“间谍”——也就是盐酸克伦特罗的成分。
这个过程呢,简单的说就是找一种能够和克伦特罗发生反应的“侦探分子”。
就像你找东西的时候,有个特别厉害的眼睛看出来哪里不对劲,这个侦探分子就是眼尖的那位。
如果样本里有盐酸克伦特罗,它们一接触,就会产生反应,结果就显而易见了。
哎,说到这里,你肯定好奇,免疫分析怎么操作?哈哈,别急,我这就告诉你。
免疫分析其实就像个小小的化学反应实验,它通过特定的试剂盒,反应非常敏感,能把你藏在大海中的那颗“盐酸克伦特罗的珍珠”给找出来。
像是常见的免疫层析法,它是一种十分常见的检测方法。
简单来说,就是用一条测试条,把样本放上去,看它是不是能发生颜色变化。
就像你做试卷时,如果答案填对了,颜色就会变,嘿,这不就“命中目标”了吗?如果盐酸克伦特罗存在,这个测试条上就会显示出红线或蓝线的变化。
这种变化就像在纸上画了一条“通向真相”的路,立马就能知道问题所在,简单又高效。
猪内脏中盐酸克伦特罗的毛细管电泳电导检测
支气 管炎 、肺 气肿 等 呼 吸系 统疾 病 ,当高 剂量 添 加 于动 物饲 料 中时 ,可 以减 缓 蛋 白质 分解 代 谢 ,提 高 脂 肪 分 解 ,可 作 为 生 长 促 进 剂 提 高 畜 牧 生 产 效 益 … 。但 由于 C L对 热 稳 定 ,使 用 后 会 在 动 物 组 织
定 量 的盐 酸 克 伦 特 罗 标 准 品 ) ,加 入 3 L = 0m
6 %乙 醇 ,超 声 震 荡 3 i,400 r i 心 2 0 0 mn 0 / n离 m 0 mn i,将 上清 液 移入 15m 2 L分 液 漏 斗 中 。将 残 渣 按 上述 过 程 再 处 理 1次 ,合 并 2次 上 清 夜 。 分 别 用 6 ,4 L乙醚萃 取 2次 ,分 出有 机 相 ,水 浴 蒸 干 , o 0m 用 甲醇 溶 解 并 定 容 至 2m ,然后 经 05 L .
一
永 年 光导 纤 维 厂 。
所 用 试 剂 :乙酸 ( R) A ,广 州 化 学 试 剂 厂 ;乙 酸铵 ( R) A ,广 州 化 学 试 剂 厂 ;乙 酸 钠 ( R) A ,广
般 用其 盐 酸 盐 即 a[叔 丁氨 基 ) .( 甲基 ] 氨 基 ., 4 35
一
二 氯苯 甲醇 盐 酸 盐 。 c L常 用 于 防 治 哮 喘性 慢 性
维普资讯
笫4卷 第 5 l 期
20 02年 9月
中山大学 学报 ( 自然科 学版 )
AC I S E l RU I CI NT A M N r RA J f A A U II M UN V S 、 1 S S I ER 兀 A 1 UNY T E I A S N
摘 要 :建立了可用于检测猪内脏中盐酸克伦特罗含量的毛细管电泳电导检测方法,考察了实验参数对分离 、
动物性食品中盐酸克伦特罗(瘦肉精)残留的检测
阴性 : C线条显色, T线条肉眼可见, 无论颜色深浅均判
人( 女性) 经口T L ( D o 最低中毒剂量)460 gk 。小鼠静 : 0 /g n 脉 L S( D 0半数致死剂量) 2 60v /g :7 0 gk 。所 以盐酸克伦特 罗早期仅在医学上用于急救和肺科病( 主要是平喘) 。因副 作用较大已被禁用。 2 样品快速判断方法 看该猪肉是否具有脂肪( 猪油)如该猪肉在皮下就是瘦 , 肉或仅有少量脂肪, 则该猪肉就存在含有“ 精” 瘦肉 的可能。 喂过“ 瘦肉精” 的瘦肉外观特别鲜红, 后臀较大, 纤维比 较疏松, 切成 2 指宽的猪肉比较软, ~3 不能立于案, 瘦肉与 脂肪间有黄色液体流出, 脂肪特别薄; 而一般健康的瘦猪肉 是淡红色, 肉质弹性好, 瘦肉与脂肪间没有任何液体流出。
为阴性。
对高血压、 心脏病、 甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更
大, 严重的可导致死亡。
112 预防方法 : .. 控制源头, 加强法规的宣传, 禁止在饲料
阳性 : C线条显色, T线条不显色, 判为阳性。 无效 : C线条不显色 , 无论 T线条是否显色, 该试纸均
食 品 质 量 与 安 全
4 g次, 次/ 儿童 5 0 / 3 日; v 岁以上 5 ~2 g次, 次/ g O i b / 3 日。
达到提高瘦 肉率的效果。它用量大、 使用的时间长、 代谢 慢, 所以在屠宰前到上市, 在猪体内的残留量都很大。这个
残留量通过食物进入人体, 就使人体渐渐地, 积蓄中毒。如 果一次摄入量过大, 就会产生异常生理反应的中毒现象, 因 此而被禁用。国内养猪户不顾农业部的规定, 为了使猪肉 不长肥膘, 在饲料中掺入瘦肉精。猪食用后在代谢过程中 促进蛋白质合成, 加速脂肪的转化和分解, 提高了猪肉的瘦
待宰猪盐酸克伦特罗残留的检测实践
含 有盐 酸克伦 特罗 的生 猪 产 品不 断 流 向市场 , 导致 者 的身体 健康 。
目前 应 用于盐 酸克 伦特 罗 的检测方 法 主要 有 以
主要 用 于 对可 盐 酸克伦 特 罗 中毒 事 故 频 繁发 生 , 重 威 胁 到 消 费 下 3种 。一是 金标 检 测 卡 定性 检 测 , 严 疑 生猪 的初步 检测 , 方法 成 本 较 低 、 测速 度 快 、 该 检 猪 肉是 我 国人 民 的主要 肉食 消 费 品 , 同时 生猪 操作 简便 , 结果 不 易 保 存 。二 是 酶联 免 疫 法 定 量 但 生 产又是 当前 添加 盐 酸 克 伦 特 罗 的重 灾 区 , 因此 加 检 测 , 于金 标卡 测试 后 的确认 , 用 该方 法检测 灵敏 度 大 与普及 对生 猪 ( 别是 商 品猪 ) 酸克 伦特 罗 的检 高 , 特 盐 可保 存结 果 , 易受 到交叉 反 映干扰 。三是气 相 但 测力 度刻 不容 缓 。国家 兽 医卫 生行 政监 督机构 为确 色 谱 一质谱联 用法 定量 确证 检测 , 该方 法用 于终 审 , 保人 民的 肉食 品安 全 工 作 , 大 了 以生 猪 为 重 点 的 但 投人 大 , 测成本 高 , 加 检 适用 于专业 实验 室 。笔者所
违禁 药 品中 以盐 酸克 伦特 罗 的应用最 为广 泛 。由于 产 品作为饲 料 土法饲 养 , 少存 在 “ 肉精 ” 很 瘦 的问题 ,
检测 的重 点 主要 集 中在 外 调 生 猪上 。全 县 共 生猪 中盐 酸克伦 特 罗 的 添加 具 有 用 量大 、 用 时 间 因此 , 使 较长 、 代谢 慢等特 点 , 以当猪 屠宰 上市后 残 留量 一 有 1 县级 生猪 定 点 屠 宰点 和 4个 生 猪交 易 市 场 , 所 个 般都 会很 大 , 有盐 酸 克 伦 特 罗 的猪 肉和 内脏 ( 含 特 生猪 交易较 发 达 , 别 是 4个 生猪 交 易 市 场 已经 逐 特 从 别是 肝脏 、 肺脏 ), 食用 后会 出现 恶心 、 人 头晕 、 四肢 步形 成 为江苏 省黑 毛 猪 交 易 的集 散 地 , 此 中 转发 无力 、 肉颤抖 、 肌 心悸 等 中毒症 状 。盐酸 克伦特 罗特 往南 京等 地 , 因此对 外 调 生 猪 的盐 酸克 伦 特 罗检 测
应用酶免疫法检测盐酸克伦特罗
E需 饲 料 款 : 3~3 8 元 , 头 每 E利 润 : 2 5—3 元 , l ( .) 每 l (. )
经( 4~5 个 月 催 肥 , 获 利 (0 ) 可 3 0~4 0 元 / 。 本 文 探 0) 头 讨 闽 南 黄 牛 肥 育 技 术 1 肥 育 牛 分 类 牛 的 肥 育 分 为 肉 牛 肥 育 和 退 役 牛 肥
2 3 向 酶 联 板 条 微 孔 中 加 入 1 0 l 缓 冲 液 稀 释 的 . 0u 用 抗 体 ( 1: 1 释 , 释 前 轻 轻 摇 匀 抗 体 , 免 猛 烈 振 按 1稀 稀 避 荡 ) 用 封 口膜 封 好 , 温 孵 育 1 mi。 , 室 5 n 2 4 将 酶 结 合 物 浓 缩 液 仔 细 摇 匀 ,用 缓 冲 液 以 1:1 . 1
k / , 格 : 6 6— . ) / g 重 ( 行 价 ) 每 头 每 g头 价 (. 6 8 元 k 毛 现 ,
重 点对 生 猪屠 宰场 和生产 基地 场 的猪 只进行 抽检 。 1 仪器 设 备和材 料 酶标 仪并 带 40 m波 长滤光 片 ; 5n 德 国生产检 测 盐酸 克伦特 罗试 剂盒 ; 鲜 猪尿 样 品 。 新 2 操 作 步 骤 2 1 因 平 时 试 剂 盒 是 冷 冻 保 存 , 验 . 实
积 21 . 3×l h 农 林 间 隙 地 3 3 0 m, . 7×1 m 。 草 场 载 0h
畜 量达 1 黄 牛单 位 , 年还 生产 4 1万 每 0万 t 种 农 作 物 各
盐酸克伦特罗的免疫层析检测方法研究
盐酸克伦特罗的免疫层析检测方法研究盐酸克伦特罗(CL),是一种β-肾上腺素受体激动剂。
由于其可以改变动物体内的代谢途径,加快脂肪的分解和转化,加速蛋白质合成,20世纪80年代开始盐酸克伦特罗被用作饲料添加剂以提高动物的瘦肉率。
然而,盐酸克伦特罗性质稳定、半衰期长,很容易在动物体内造成积累,人一旦食用残留过多CL的动物制品,就会造成食物中毒,严重者甚至导致死亡,世界各国已纷纷禁止将CL用作兽用饲料添加剂。
尽管如此,目前仍有许多不法分子违规使用,对食品安全造成了重大隐患。
因此,为确保食品安全,维护消费者的健康,急需建立快速、可靠的CL检测方法。
本研究以CL为检测目标物,制备了抗盐酸克伦特罗单克隆抗体,基于该抗体建立了两种免疫层析检测方法,实现了猪肉、培根、牛奶等食品中CL的快速检测。
本论文的研究成果如下:(1)抗CL单克隆抗体的制备及性能评价:采用小鼠体内诱生法制备含有抗盐酸克伦特罗单克隆抗体(mAb)的腹水,纯化后得到单克隆抗体。
之后对抗体进行鉴定,结果表明抗体的效价为1:32000,抗体对CL 的50%抑制浓度(IC<sub>50</sub>)为0.69 ng mL<sup>-1</sup>,该抗体为后续免疫层析试纸条的制备提供了核心材料。
(2)基于金纳米颗粒的盐酸克伦特罗免疫层析试纸条的研制及性能鉴定:将制备的金纳米颗粒(15 nm)作为信号标签,标记抗盐酸克伦特罗单克隆抗体,从而制备GNP-mAb探针。
通过一系列的优化,确定了探针中抗体的最佳标记量,NC膜上抗原的最佳包被浓度,样品垫的最佳封闭液成分和探针的最佳使用量。
在最佳状态下,该试纸条对盐酸克伦特罗标准溶液的可视化检出限(VDL)为5 ng mL<sup>-1</sup>,特异性测定表明试纸条与其它五种盐酸克伦特罗结构类似物无交叉反应,特异性强。
将该试纸条用于实际样品(猪肉、培根和牛奶)中盐酸克伦特罗的残留监测,结果发现,其可视化检出限分别为10 ng g<sup>-1</sup>、10 ng g<sup>-1</sup>和10 ng mL<sup>-1</sup>。
猪尿液中盐酸克伦特罗(瘦肉精)检测方法比较试验
用 于 定 量 分 析 [11。
测 孔 板 条 平 衡 固 定 于 检 测 板 ,并与试
2 . 1 . 2 测试过程
纸 共 同 置 于 25 °C的冰箱中,注意不要
把 待 检 尿 液 2 000 g 离 心 10 min 将试纸条插入样品;1 5 ~ 2 0 min, 将试
后 留 用 上 层 清 液 。 测前把所有试剂与 纸条一起置于检测板孔中;同样,此时
4结语通过此次试验笔者认为为确保测试的精确性利用elisa方法对样本猪尿液中的盐酸克伦特罗进行检测后再利用gcms分析方法对可疑的呈阳性的样本进行确证这样检测的效果相比盐酸克伦特罗快速检测试纸条法更好同时也节约了人力与成本
利描
分析与检测
猪 尿 液 中 &酸 克 伦 特 罗 (瘦 肉 精 )检测方法比较试验
③ 样本保存:零 下 20 °(:冰箱储藏备用。 2丄 3 鉴定测试结果
④ 试剂准备:竞争酶标免疫试剂盒(包
检 测 结 果 多 5 ng/L,判 定 为 阳 性
含 试 剂 与 标 准 品 ) ,于 北京望尔生物 < 5 ng/L,检 测 结 果 ,判 定 为 阴 性 ,
技 术 有 限 公 司 购 买 。 盐 酸克伦特罗快 盐 酸 克 伦 特 罗 的 检 出 限 为 0.5 ng/L。
测试尿液放置室温19~25°C; 把足量 再次把检测固定板和试纸一起平衡放入
标 准 品 / 样 本 2 0 piL导入微孔中,再加 4 °C的冰箱之中。切勿将试纸取出检测
入 酶 标 二 抗 5〇nL/ 孔。 标 准 品 与 样 本 孔 ,还要保证试纸是平放在检测孔底面
进 行 2 个 平 行 实 验 。 记 录 各 自 位 置 ; 的 ;放 置 8~10m in后开始判定结果。
盐酸克伦特罗检测方法的研究进展
盐酸克伦特罗检测方法的研究进展盐酸克伦特罗(Clenbuterol hydrochloride)是一种常用于家畜生产中促进生长的禁用药物。
由于其具有潜在的危害性,如导致肌肉颤抖、心脏病、甚至死亡,各国纷纷禁止其在畜禽养殖中的使用。
准确检测盐酸克伦特罗的方法具有重要意义。
本文将对盐酸克伦特罗的检测方法的研究进展进行综述。
目前,盐酸克伦特罗的检测方法主要包括生物学方法、免疫学方法和化学方法。
生物学方法是最早应用于盐酸克伦特罗检测的方法之一。
其原理是利用生物学特性,如细胞生长抑制、酶活性变化等来间接检测盐酸克伦特罗。
生物学方法的优点是简单、快速且成本较低,但缺点是操作复杂、结果受到干扰因素较多,如微量元素的影响等。
免疫学方法是一种高灵敏度、高特异性的检测方法。
常用的免疫学方法包括酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫荧光法。
这些方法基于克伦特罗与抗体之间的特异性结合,通过测定克伦特罗与标记物质之间的信号变化来检测克伦特罗的存在。
免疫学方法具有灵敏度高、特异性强、操作简单等优点,但也存在标记物质稳定性差、批号差异等问题。
化学方法是通过分析克伦特罗的化学性质来进行检测的方法。
常用的化学方法包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)等。
这些方法通过对样品进行提取、分离和定量分析,可以精确、快速地确定克伦特罗的含量。
化学方法具有灵敏度高、精确度高等优点,但也存在样品处理过程繁琐、耗时长等问题。
除了以上三种方法外,近年来还出现了一些新的检测方法。
质谱法结合气相色谱法(GC-MS)、液相色谱法(LC-MS)等,可以在分子水平上检测克伦特罗,并具有高灵敏度、高特异性的优点。
近红外光谱法、表面增强拉曼光谱法等也被应用于克伦特罗的检测领域。
盐酸克伦特罗的检测方法研究取得了一定的进展。
不同的方法各有优缺点,应根据具体情况选择合适的方法。
未来的研究方向可以进一步提高检测方法的灵敏度、特异性和准确性,以满足不断提高的检测需求。
盐酸克伦特罗检测标准
盐酸克伦特罗检测标准盐酸克伦特罗是一种常用的药物成分,广泛应用于医药和化工领域。
为了确保盐酸克伦特罗产品的质量和安全性,需要进行严格的检测和监管。
本文将介绍盐酸克伦特罗的检测标准,以及相关的检测方法和技术要求。
一、盐酸克伦特罗的检测标准。
1.外观和性状检测。
盐酸克伦特罗的外观和性状是其质量的重要指标之一。
在检测过程中,需要对其外观、颜色、气味、溶解性等进行全面的检验,确保符合相关标准要求。
2.纯度检测。
盐酸克伦特罗的纯度直接影响其药效和安全性。
常用的检测方法包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)等,通过检测其主要成分的含量来评估其纯度。
3.杂质检测。
杂质是影响盐酸克伦特罗质量的重要因素之一。
常见的杂质包括重金属、有机物和微生物等,需要通过相关的检测方法进行分析和鉴定,确保符合卫生标准和药品质量要求。
4.稳定性检测。
盐酸克伦特罗在储存和运输过程中容易受到光、热、氧等因素的影响,导致其稳定性下降。
因此,需要对其在不同条件下的稳定性进行测试,确保其在规定的有效期内保持稳定。
二、盐酸克伦特罗的检测方法和技术要求。
1.样品的制备。
在进行盐酸克伦特罗的检测前,需要对样品进行适当的制备和前处理工作,以确保检测结果的准确性和可靠性。
2.检测设备和仪器。
常用的盐酸克伦特罗检测设备和仪器包括高效液相色谱仪、气相色谱仪、紫外-可见分光光度计等,需要保证其性能稳定、准确度高,符合相关的检测标准和要求。
3.操作规程和方法。
在进行盐酸克伦特罗的检测过程中,需要严格按照操作规程和方法进行操作,确保检测过程的准确性和可重复性。
4.质量控制和数据处理。
在检测过程中,需要建立严格的质量控制体系,对实验数据进行及时、准确的处理和分析,确保检测结果的可靠性和准确性。
三、结论。
盐酸克伦特罗的检测标准是保障其质量和安全的重要手段,通过严格的检测和监管,可以有效地控制产品质量,保障人民群众的用药安全。
我们应该不断完善相关的检测方法和技术要求,提高检测的准确性和效率,为盐酸克伦特罗产品的质量和安全提供有力的保障。
浅谈动物源性食品中盐酸克伦特罗的残留及危害
浅谈动物源性食品中盐酸克伦特罗的残留及危害作者:陈秋玲,聂婉,伍晓红等来源:《江西饲料》 2016年第2期陈秋玲聂婉伍晓红周柳王琤韡*(1.江西科技师范大学南昌330013;2.华东交通大学理工学院南昌330100)摘要:简要介绍了盐酸克伦特罗的理化性质、作用机理及残留特性,阐述了动物源性食品中盐酸克伦特罗残留物对动物及人体的危害。
关键词:动物源性食品;盐酸克伦特罗;残留;危害中图分类号:S859.84 文献标识码:A 文章编号:1008-6137(2016)02-0027-030 引言近年来,国内外食品安全事故层出不穷,食品安全已经成为全社会广泛关注的重要的公共安全问题。
盐酸克伦特罗在动物体内极易残留,给动物源性食品和人类的健康带来极大的隐患。
本文就动物源性食品中盐酸克伦特罗的残留及其危害作一概述。
1 盐酸克伦特罗概况动物源性食品安全事关人民群众的身心健康,也关系到畜禽养殖业的健康发展[1-3]。
20世纪80年代初,美国脂胺公司在研究中发现,将一定量的盐酸克伦特罗添加在动物饲料中能够改善动物体内脂肪和蛋白质等的代谢途径,表现为促进脂肪分解,加快蛋白质合成从而促进动物生长,起到提高瘦肉率及降低脂肪量的作用,从而使瘦肉率增加9%~16%[4]。
盐酸克伦特罗属于β-兴奋剂,药理性质稳定,一般情况下不易分解,进入动物体内后残留在肌肉组织和内脏中的主要是原药,动物食用超量盐酸克伦特罗严重影响畜牧业健康发展和畜产品质量安全,人类长期食用残留盐酸克伦特罗的动物源性食品,会给健康带来很大的危害[5]。
1.1 盐酸克伦特罗的理化性质盐酸克伦特罗英文表示有Clenbuterol、Spiro?pent、Planipart,简写为CLB,化学名是“2[(叔丁氨基)甲基]-4-氨基-3,5-二氯苯甲醇盐酸盐”,药品名是“克喘素、舒喘宁、双氯醇胺”等。
盐酸克伦特罗属于苯乙醇胺类衍生物,熔点为61℃,在100℃的沸水中稳定,在260℃的热油中不稳定,半衰期为5min;可以溶于水和乙醇,微溶于丙酮且不溶于乙醚;其制剂通常为盐酸盐,呈白色结晶粉末,无臭、有苦味[6]。
盐酸克伦特罗在动物组织中的残留分布及其毒性的研究
摘要本试验用酶联免疫吸附法(ELISA)研究了盐酸克伦特罗(CLB)在动物各组织的残留状况及对动物的毒性。
试验采用小白鼠和猪两种动物。
采用单因子试验设计,小白鼠试验分为4个试验组,猪分为3个试验组,分别灌注不同剂量的CLB后,观察动物服用CLB后的异常表现,并在小自鼠试验30d,猪试验35d后,进行解剖病理分析和残留检测。
试验结果显示:用酶联免疫吸附法(ELISA)对CLB进行检测,方法简单,容易掌握,耗时少(5~6h),可满足县级以下单位对CLB的检测。
CLB在动物各组织的残留规律为:小白鼠的肌肉组织和肝脏、肺脏、肾脏等内脏器官的CLB残留量与用药剂量呈极显著正相关(P<O.01),猪肌肉组织和各内脏器官的CLB残留量有随用药剂量增大而增大的趋势。
不论cLB剂量的高低,同一剂量组机体的组织器官中肺脏和肝脏有较高的残留。
小白鼠试验3组的肺脏和肝脏残留量分别为:263.3ng/g和242.8ng/g;猪试验2组的肺脏和肝脏残留量分别为:415.5ng/g和350.8ng/g;肝脏、肺脏都具有残留量高,体积大,采样既方便又容易,运送与处理都较方便的优点,是可食组织中检测盐酸克伦特罗残留的主要器官。
CLB对动物造成了行为、体态的异常,同时造成肝脏、肺脏、脾脏、肾脏和淋巴结等组织器官发生轻微肿大、膨胀、间质水肿,出血和炎症等肉眼可见的病理变化。
上述结果可以用于屠宰过程,通过观察动物是否发生体态、行为的异常和肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、淋巴结等组织器官的病理变化,剔除可疑胴体,再辅以EusA检测,能有效地防止漏检错判和中毒事件的发生。
关键词:酶联免疫吸附法ELISA盐酸克伦特罗残留中毒前言盐酸克伦特罗(cLB)是在1972年,由美国氨晴公司经化学方法首次合成的~种苯已醇胺类衍生物。
此后对它的研究和使用大体可先后分为三个阶段。
‘第一阶段是将盐酸克伦特罗作为兽药在动物治疗方面的研究应用。
Sasse(1977)研究表明盐酸克伦特罗对马的呼吸道疾病有治疗作用;Ballarini(1978)研究表明了盐酸克伦特罗有松弛子宫,缓和子宫痉挛及安胎作用。
盐酸克伦特罗
盐酸克伦特罗
盐酸克伦特罗,商品名称为咳喘素、舒喘宁、瘦肉精,成品为白色或类白色晶体粉状,无嗅、味微苦,是一种人工合成的选择性β-肾上腺素受体兴奋剂。
盐酸克伦特罗既不是兽药,也不属于饲料添加剂,是一种名副其实的激素类物质。
由于盐酸克伦特罗添加于饲料中饲喂猪可疑显著提高瘦肉率,促进肌肉的生长,从20世纪80年代国外开始使用,我国从90年代后期开始在猪饲料中添加,它的添加给经营者带来巨大的利润,但是由于其在畜产品中的残留,给广大消费者也造成了极大危害。
2、盐酸克伦特罗的危害
盐酸克伦特罗的理化性质和作用特点,决定了其一旦饲用,难以代谢排出,会大量蓄积在动物体内,维持较高的残留量。
2.1盐酸克伦特罗的易残留性
盐酸克伦特罗的饲用特点:少量短期难以见效,大量长期应用会出现畜产品残留的问题。
在家畜生产中使用的有效剂量一般是哮喘剂量的5-10倍,有较强的药性,溶解代谢率低,不易大量代谢排出,残留量较高。
盐酸克伦特罗化学性质稳定,一般高温难以分解,作为一类激素,通过腺体深入到组织细胞膜内发挥作用,难以代谢清除。
2.2盐酸克伦特罗对人畜的危害
盐酸克伦特罗的应用对动物有害,盐酸克伦特罗在动物血管系统中发生作用,使气管扩张,影响肌肉蛋白质代谢、脂肪代谢及肝脏中的糖代谢,严重影响动物正常的生长发育。
人食用含有盐酸克伦特罗
残留的肉,可引起血压升高、血管扩张、心跳加快、呼吸加剧,产生恶心、呕吐、头晕、乏力和肌肉颤抖甚至不能站立等现象,给患者的精神、健康及正常生活造成严重危害。
动物源性食品中盐酸克伦特罗的残留及危害
2.3.1 火候 火候大小是烹饪的关键因素之一,勾芡的主要原
理就是利用淀粉遇热糊化可吸水、粘性强及吸水润滑 的特点,因此在勾芡时油温不能过低、火候不能过小, 否则不能使淀粉糊化,导致勾芡失败,油温过高会使 淀粉糊化过快,使芡汁不够均匀,出现结块现象。 2.3.2 时间
一般在菜肴九成熟时进行勾芡,过早勾芡会影响 卤汁的色泽,使卤汁发灰、发焦,勾芡过迟又不利于 芡汁的形成,同时菜肴受热时间过长会影响口感。另 外在勾芡时应求快不求慢,勾芡时间不宜过长,否则 会使菜肴带有苦感。 2.3.3 芡汁的浓稠度
为 61 ℃,在 100 ℃的沸水中能稳定存在。盐酸克伦特 食用含有盐酸克伦特罗的动物源性食品后,容易引发
罗是一种拟交感神经药物,有支管扩张、平滑肌松弛 肌肉震颤、心律失常、头晕无力等现象,甚至导致死亡。
等方面的作用,并且盐酸克伦特罗在使用方面,具有
根据相关调查,人们食用大量含有盐酸克伦特罗
一定的选择性,可以作用于肾上腺素受体,可以有效 的动物源性食品后,可在 15 ~ 360 min 内发病,主要病
要根据菜肴的具体要求调整芡汁的浓稠度,适当 改变淀粉和水的比例,调制浓芡、糊芡、薄芡和流芡等。 参考文献: [1] 黄亚平 . 谈挂糊、上浆和勾芡的作用 [J]. 科技资讯, 2008(21):204. [2] 王建斌,许桂荣 . 中式烹饪科学上浆挂糊与勾芡 的技能分析 [J]. 赤子,2014(17):233. [3] 孙秉江 . 菜肴烹饪中勾芡的技术要领探讨 [J]. 黑 龙江科技信息,2017(3):102.
Key words:Clenbuterol hydrochloride; Animal-derived food; Residues; Hazards
中图分类号:S859.84
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E L I S A是利用免疫 学抗原抗体特异
性结合反应和酶 的高效催化作用 , 通过化学方法将植物辣根
作者 简介 : 王世 山( 1 9 6 3  ̄ ) , 高级 兽 医师 , 从 事 畜产品 、 饲料 、
兽 药质 量 监 测 检 验 工 作
过氧化物酶 ( H R P ) 与克伦特罗 ( C L ) 结合, 形成酶偶联克伦特
金免疫层 析法 ( G I C A) 因其 不需 要高精仪器 、 操作简便 、 准确 率较高等 , 适合基层大面积筛查。
1 检测畜产品中盐酸克伦特 罗残 留采用的主要方法
制了E L I S A在基层工作 中的应用 。G I C A与 E L I S A相 比不 需 要仪 器设 备 , 操作 更简单 , 检测 时 间更 短 , 试 剂耗 材价值 更 低, 且不需 要高专业 知识 的操 作人员 , 不仅适 用于基层大 规 模 的检测 活动 , 也适用于长期 的每次小批量检测活动 。但 是
罗, 将固相载体上已包被的抗体( 羊抗 兔 I g G抗体 ) 与特异性
的抗克伦特罗抗体结合 , 然后加入待测克伦特罗和酶偶联克
★通讯作者
[ 1 】殷运收. 疏血通注射液 的药理作 用及 临床应用进展[ J ] . 临 床医学工程, 2 0 1 1 , 3 8 ( 3 ) : 4 7 2 — 4 7 3 . 【 2 】王萌 , 等. 疏血通注射液 的质量工艺与用药安全的相关性
有L C/ MS 、 G C/ MS 、 HP L C、 CE 、 E L I S A和 GI C A等 6种检 测方法 的优 缺点 , 对E L I S A和 G I C A 实验原 理、 实验 室操
作步骤 、 样品处理方法 、 特点等进行综合 分析 , 结论是 用 GI C A初 筛, 对检 测结果为 阳性 的样 品用 E L I S A进行再次检
试 验 研 究
畜产 品 中盐 酸克 伦特 罗残 留检 测 方法优缺 点 比较
王世 山 , 柴
摘
磊★ , 靳 玉珠
( 河 南省 焦作 市 畜产 品质量 安全 监测 中心 ,焦作 4 5 4 0 0 3)
要: 为探 讨适合基层 大面积检 测畜产品 中盐酸克伦特 罗残 留的方法 , 作 者比对 了检测盐 酸克伦特 罗的主要方 法
量检测方 法 , E L I S A、 G I C A是农 业部发布 的盐酸克 伦特 罗定
性和半定量检测方法 。 1 . 2 常用检测方 法的优 劣 比较 L C / MS和 G 性 的优点 , 但存在仪器贵重 、 操作烦琐 、 试
2 . 1 . 1 E L I S A测定原理
( E L I S A) 、 胶体金免疫层析法 ( G I C A) 等六种方法 。除此之外 ,
优缺 点分别介 于 L C / M S 、 G C / MS与 E L I S A、 G I C A之间 ,既 缺
乏 L C / MS 、 G C / M S具有 的高灵 敏 、 高 准确 、 高特 异的优点 , 不 能确证畜 产品 中含盐酸克伦 特罗 , 又缺 乏 E L I S A、 G I C A的操 作简单 , 检测时间短的优点 , 各项 缺点显得更 明显 , 在实 际工 作 中已很少应用了。 2 E L I S A与 GI C A在 检测畜产 品中盐酸克伦特 罗残 留的应 用 比较
种 1 3肾上腺受体兴奋剂 , 因其 在动物体 内代谢慢 , 人食用
含有盐酸克伦特 罗的畜产品 , 可积蓄 中毒 , 导致呕吐 、 心跳骤
然加 速等异 常生理反应 , 严重 者导致死 亡 , 因此我 国禁 止使
般需 要几分钟 到几小 时 , 操作 和需要仪器设 备简单 , 仪器 设 备也 比较便宜 , 但是 E L I S A准确性和特异 性稍差 , 需进一 步
盐酸 克伦 特罗 ( C l e n b u t e r o l , 简写 C L ) 俗称“ 瘦 肉精 ” , 是
一
剂耗材 昂贵 、 前 处理耗费 时间长 , 且 需要较 高知识水平 的操 作人员等 问题 ,限制了 L C / M S和 G C / M S在基层工作 中的应
用 。E L I S A与 L C / M S或 G C / MS相 比, 检测时间大大 缩短 , 一
G I C A灵敏度 、 特异性较差 , 必需进一 步确证 。H P L C和 C E的
1 . 1 畜产 品 中盐酸克伦特 罗残 留检 测的主要 方法
液 相色
谱 一质谱 法( L C / MS ) 、 气相色谱 一质谱法 ( G C / M S ) 高效 液相 色谱法( H P L C ) 、 毛细管 区带 电泳法 ( C E) 、 酶联免疫吸一 附法
确证 , 且 因其检测试 剂盒检测 数量大 ( 一般为 9 6孔板 ) 稍 显 贵重 , 较适 用于 大规 模多批次 的检测活动 , 在 一定程度上 限
用 。为打击非法贩卖使用 “ 瘦 肉精 ” , 近几年 国家连续 出台 了
多种检测 标准方法 , 但 仅有酶联免 疫吸 附法 ( E L I S A) 与胶体
测的联合检测方法 , 适 用 于基 层 部 门开展 畜产 品 中 盐酸 克 伦 特 罗残 留 的检 测 。 关键词 : 畜产 品: 盐 酸 克伦 特 罗; 检测方法; 优 缺点; 比较 DO l : 1 0 . 3 9 6 9 / J . I SSN. 1 6 7 1 - 6 0 2 7. 2 0 1 3 . 0 7. 01 7
2 . 1 E uS A与 G I C A 测 定 原 理
还有运用共振光散射 和免疫传感技术 等建 立的检测方法 , 但
有 国家或 行业 标准 的 只有 L C / MS 、 G C / M S 、 HP L C 、 E L I S A和 G I C A五种方法 。L C / MS 和 G C / MS 是农业 部发 布的盐酸克伦 特罗确证 检测方法 , H P L C是农业部 发布 的盐 酸克伦特 罗定