凯氏定氮仪操作步骤

凯氏定氮仪操作步骤 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020

凯氏定氮仪操作步骤

凯氏定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理，通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。

1.原理：

将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵。在这一步中，经常会向混合物中加入硫酸钾来提高中间产物的沸点。样本的分析过程的终点很好判断，因为这时混合物会变得无色且透明(开始时很暗)。

在得到的溶液中加入少量氢氧化钠，然后蒸馏，这一步会将铵盐转化成氨。而总氨量(由样本的含氮量直接决定)会由反滴定法确定:冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中。氨会和酸反应，而过量的酸则会在甲基橙的指示剂下变色，用碳酸钠滴定所得的结果乘以特定的转换因子就可以得到结果。

2.适用范围：

凯氏定氮仪仪器用凯氏方法检测谷物、食品、饲料、水、土壤、淤泥、沉淀物和化学品中的氨、蛋白质氮含量、酚、挥发性脂肪酸、氰化物、二氧化硫、乙醇等含量。具有相当好的性价比，仅仅滴定过程需要人工操作一下，非常适合实验室及检验机构常规检测。广泛用于食品、农作物、种子、土壤、肥料等样品的含氮量或蛋白质含量分析。

3.操作步骤：

配制溶液

1、L HCl 溶液（浓盐酸溶于1000mL蒸馏水）

2、硼酸溶液 10g/L (20g硼酸于2L蒸馏水)

3、溴甲酚绿指示剂（%，无水乙醇，每L硼酸指示剂加入10mL）

4、甲基红指示剂（%，无水乙醇，每L硼酸指示剂指示剂加入7mL）

5、400g/L NaOH 溶液（800g NaOH 固体于2L 蒸馏水，实验室外通风处配制）

6、硼酸指示剂配——将溶液2、3、4混匀搅拌，配制成硼酸指示剂。

样品消化

在通风橱进行样品消化实验，在样品中加入10ml浓硫酸和催化剂→长按开关开机→将样品放入消化炉→盖上盖子，并通水→4小时后，完成消化→长按开关键关机→将样品冷却后放在海绵上→结束

样品测定

开关→开冷凝水→调整盐酸浓度（根据标定值）→恢复操作界面→按左右方向键选择Blank，Blank<时才可开始→按左右方向键选择栏目，如mg(样品中含有多少mg蛋白质)；mgN(样品中的N含量) →空管洗空白【程序5下操作，洗到小于】→Blank【程序1下操作，Result调到“blank”，洗到小于】→测定样品【程序1下操作，Result调到“mgN”（酒红色→绿色→酒红色）】→清洗机器（测定完样品后，调到程序5下操作，Result调到“mgN”，洗到以下）

操作注意事项

程序5——清洗；

程序1——检测；

用完后，往电极中加入蒸馏水，保护电极；

在操过程中，若出现错误，排除故障，按enter键即可继续操作；

会有少许漏液现象，加样品时需向上推紧；

开冷凝水；

若机器中出现积液，需将排液管抖一抖。