Ghrelin通过诱导细胞自噬加剧H9c2细胞缺氧-复氧损伤
丹参素对缺氧复氧诱导H9C2心肌细胞损伤和内质网应激的改善作用
652Chin J I.ab Diagn,A pril,2020»Vol 24,No.4文章编号：1007 — 4287(2020)04 — 0652 — 04丹参素对缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞损伤和内质网应激的改善作用丁玉红，郭秀颖*(吉林大学第一医院二部皮肤科，吉林长春130031)摘要：目的观察丹参素（D LA)通过抑制内质网应激和凋亡对H9C2心肌细胞缺氧/复氧（H/R)后损伤的保护作用。
方法将离体培养的H9C2心肌细胞随机分为3组：对照组、缺氧/复氧组（H/R组）、D L A+H/R组（DLA 组）。
H/R组先缺氧6 h后复氧24 h;D L A组于缺氧时给予D L A U0-6M)培养6 h，再复氧24 h。
对照组心肌细胞正常培养至实验结束。
E L IS A测定细胞中乳酸脱氢酶（L D H)、肌酸激酶M B同工酶(C K-M B)和丙二醛（M D A)的含量；W estern b lo t检测细胞中内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78(G R P78)、CaspaSe~12、Bax、B d-2和S O D的蛋白含量。
结果与对照组比较，H/R组细胞L D H、C K-M B和M D A的含量显著升高（P<0. 05), G RP78、Caspase~12和B a x蛋 白表达明显增加（P<〇. 05)，而B cl-2和S O D的蛋白含量明显降低（P<0. 05);给予D L A可明显改善上述指标的变化。
结论H/R可诱导H9C2心肌细胞发生凋亡、氧化应激和内质网应激，引起细胞损伤和凋亡；D L A可以通过抑制凋亡、氧化应激和内质网应激，减少细胞损伤，发挥保护细胞的作用。
关键词：丹参素；H9C2心肌细胞；缺氧/复氧；内质网应激；凋亡中图分类号：R364.4文献标识码：AAmeliorating effects of Danshensu on hypoxia/ reoxygenation-induced H9C2 cardiomyocytes injury and endoplasmic reticulum D IN G Yu-hong，GUO X iu-y in g. {Department o f D ermatology，The First Hospital o f Jilin U niversity，Chang-chun130031 ,C/i/wa)Abstract：Objective T o o b se rv e th e p ro te c tiv e effe ct of D L A o n h y p o x ia/re o x y g e n a tio n C H/R)in ju ry by a tte n u atin g e n d o p la sm ic re tic u lu m s tr e s s(E R S)an d a p o p to s is in H9C2c a rd io m y o cy tes. Methods T h e H9C2card io m y o cy tes w e re ra n d o m ly d iv id ed in to th re e g r o u p s: co n tro l g r o u p，h y p o x ia/re o x y g e n a tio n g ro u p( H/R g r o u p)，D L A+H/R g ro u p(D L A g r o u p). H/R g ro u p u n d e rw e n t h y p o x ia fo r 6 h follow ed by re o x y g e n a tio n fo r 24 h. D L A g ro u p w as g iven a t th etim e of h y p o x ia fo r 6 h,t h e n re o x y g e n a tio n fo r 24 h. H9C2ca rd io m y o c y tes o f c o n tro l g ro u p w ere c u ltu re d u n d e r n o rm al co n d itio n till th e en d o f e x p e rim e n t. L actic d eh y d ro g en aseC L D H), C K-M B, M D A an d S O D a c tiv ity w ere m easu red byE L IS A and th e p ro te in e x p re ssio n of g lu c o s e-re g u la te d p ro te in s 78C G R P78) ,C a sp a se-12, B cl-2, Bax and SO D w ere detected by w estern blot. Results C om pared w ith th e control g ro u p,increased levels of L D H N C K-M B and M D A,increased expressions of G R P78,C asp ase-12and Bax p ro tein,d ecre ased activity of S O D,d ecreased ex pression of Bcl-2 and SO D protein w ere show n in th e H/R g roup sig n ifican tly,w h ile D L A am eliorated th e above indicators. Conclusion H/R can induce E R S leading to cell injury and apoptosis. D L A can protect H9C2 against H/R injury by inhibiting E R S and apoptosis.Key words:D L A; H9C2c a rd io m y o c y te s; H y p o x ia/re o x y g e n a tio n;e n d o p la s m ic re tic u lu m s tr e s s;a p o p to s is(Chin J Lab,2020,24：0652)冠心病治疗过程中，在缺血的基础上恢复血液灌注后，心肌组织的损伤不仅没有缓解反而变得更加严重，甚至出现不可逆性损伤，即心肌缺血再灌注 损伤（I/R)[1]。
ghrelin与心血管系统稳态
112ghrelin 是一种胃肠多肽，可刺激生长激素(growth hormone, GH)释放，参与糖和脂肪代谢，能够增强食欲，增加体重，从而诱导肥胖。
另外，ghrelin 还具有改善心脏功能和能量代谢、调节自主神经兴奋、舒张血管、对抗炎症反应和氧化应激、保护血管内皮细胞等多种生物学效应[1]，并可能广泛参与机体心血管功能的调节。
文章就近年来ghrelin 在心血管系统稳态中的调节作用进行综述。
1 ghrelin及其受体1999年，日本学者Kojima 等从大鼠的胃黏膜细胞及下丘脑弓状核中分离出ghrelin 。
ghrelin 是一种可以与生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor, GHSR)结合的内源性配体，是由28个氨基酸残基组成的多肽，其中第3位丝氨酸N 端被ghrelin 酰基转移酶(ghrelin-o-acyltransferase, GOAT)酰基化是与受体结合产生生物学效应的前提[1-2]。
Ghrelin 在体内分布广泛，主要表达于胃底泌酸部位X/A 样细胞，另外在小肠、下丘脑、垂体、心脏、肺、肾、血管以及免疫细胞等多种器官和组织细胞也有分布。
在人体内，ghrelin 主要存在非酰基化和经GOAT 催化形成的酰基化两种形式，前者是血浆中ghrelin 主要存在形式。
血浆中ghrelin 水平受多种因素影响，如禁食、饥饿、低蛋白饮食等能量的负平衡状态可导致血浆ghrelin 浓度升高，而肥胖、饱食、体重增加则可使血浆ghrelin 水平降低[3-4]。
ghrelin 的受体主要包括功能性的GHSR1a 和非功能性的GHSR1b ，其中ghrelin 的生理作用大多是由GHSR1a 介导的[2, 4]。
ghrelin 受体主要在下丘脑与垂体表达，也广泛存在于心血管系统，并对心血管系统发挥重要的调节作用。
与大脑ghrelin 受体不同，心脏ghrelin 受体与酰基化*国家自然科学基金项目(81600210)†通信作者，研究方向：小分子活性多肽的生物学效应、心血管疾病的发病机制及防治。
Ghrelin调节细胞自噬发挥多效性
Ｇｈｒｅｌｉｎ在消 化 道 主 要 由 胃 和 小 肠 分 泌。 外 周 Ｇｈｒｅｌｉｎ水平与进餐有关，在餐前呈上升趋势而在餐 后呈下降趋势［６］。因此摄食对外周 Ｇｈｒｅｌｉｎ含量影 响较大。有研究表明［７］，Ｇｈｒｅｌｉｎ能通过上调小肠上 皮细胞自噬从而促进小肠上皮细胞黏膜生长，减少 小肠黏膜损伤。在胃肠道早期分化中，Ｇｈｒｅｌｉｎ和其 他胃肠激素通过影响小肠黏膜重塑进程而发挥重要 作用。另外，肠道内的 Ｇｈｒｅｌｉｎ呈剂量依赖性，可加 快小肠上皮细胞更新，同时增强隐绒毛上皮细胞自 噬［６］。万晟霞等［８］研究发现，Ｇｈｒｅｌｉｎ可减轻肠上皮 及全身炎症因子表达，促进脓毒症大鼠小肠上皮细 胞自噬，发挥保护肠上皮作用。在营养缺乏状态下， 持续升高的 Ｇｈｒｅｌｉｎ水平会促进小肠上皮细胞自噬， 从而缓解能量缺乏和进餐前后血浆氨基酸水平大幅 度波动，从 而 减 少 细 胞 凋 亡。 另 外，Ｇｈｒｅｌｉｎ还 可 减 轻败血症导致的肠道损伤。如有研究发现，当机体 处于细菌内毒素性休克状态下，迅速增高的 Ｇｈｒｅｌｉｎ 可使促使小肠上皮细胞抵抗败血症诱导急性损伤， 并认为 Ｇｈｒｅｌｉｎ是通过增加自噬相关蛋白表达来实 现的，如 Ｂｅｃｌｉｎ１、Ａｔｇ７等［９］。
２５ ＨｅＪ，ＬｉＹ，ＣａｏＹ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｏｒａｌｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄｉｔｓｒｅｌａｔｉｏｎｔｏｈｕｍａｎｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｆｏｌｉａｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａ， ２０１５，６０６９～８０．
不同缺氧复氧损伤程度对H9c2心肌细胞自噬的影响
不同缺氧复氧损伤程度对H9c2心肌细胞自噬的影响黄小玲;唐轶洋;钟敏;赵高峰【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2018(034)013【摘要】目的观察不同缺氧复氧(H/R)损伤程度对H9c2大鼠心肌细胞自噬及细胞存活率的影响.方法缺氧时将H9c2大鼠心肌细胞置于缺氧培养箱分别以0.5％胎牛血清(FBS)复合高糖(4.5 g/L)DMEM、无糖培养基、磷酸盐缓冲液(PBS)为缺氧液培养3h后置换完全培养基置于正常培养箱中培养3 h;取复氧后心肌细胞,MTT法检测各组心肌细胞存活率,MDC荧光染色后流式细胞仪检测心肌细胞自噬率,实时荧光定量PCR法检测细胞内自噬相关基因5(Atg5)mRNA的表达水平.结果与对照(CON)组相比,各H/R模型组细胞存活率均降低(P<0.05),且0.5％FBS 复合高糖DMEM、无糖培养基、PBS处理的H/R心肌细胞存活率逐渐下降;流式细胞仪与实时荧光定量PCR的结果显示,与对照CON组相比各H/R模型组心肌细胞自噬率与Atg5 mRNA的表达差异均有统计学意义(均P<0.05),且0.5％FBS复合高糖DMEM、无糖培养基、PBS处理的H/R心肌细胞自噬率与Atg5 mRNA 的表达均逐渐下降,其中0.5％FBS复合高糖DMEM、无糖培养基处理的相对CON 组是增加的,PBS处理的则是下降的.结论利用缺氧培养箱可以造成H9c2大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤,细胞适度缺氧复氧可以激活细胞自噬,但细胞过分缺氧反而抑制自噬.【总页数】4页(P2165-2168)【作者】黄小玲;唐轶洋;钟敏;赵高峰【作者单位】广州中医药大学第二附属医院麻醉科广州 510006;广州中医药大学第二附属医院麻醉科广州 510006;广州中医药大学第二附属医院麻醉科广州510006;广州中医药大学第二附属医院麻醉科广州 510006【正文语种】中文【相关文献】1.汉黄芩苷对缺氧复氧诱导H9c2心肌细胞损伤及P38和ERK1/2表达的影响 [J], 宋艳; 龚蕊; 杨波; 王磊; 张玲2.抑制自噬对缺氧复氧后H9c2心肌细胞损伤及线粒体Cx43变化的影响 [J], 卢青; 李兆康; 李志刚; 陈志楠; 付文波; 丁世芳3.二甲双胍对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤中FUNDC1介导线粒体自噬的影响及其机制 [J], 王鑫; 刘乃丰4.两种不同方法建立H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤模型比较 [J], 杜玉颖;孟思妤;常莉;夏钰晰;赵韵茗;姚天明;郑红光5.TRPV1对H9c2心肌细胞缺氧复氧后凋亡的影响及机制 [J], 罗建华;王欢因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
苦参碱对 H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制
苦参碱对 H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制王瑞霞【摘要】Objective To study the protective effect of Matrine on hypoxia/ reoxygenation (H/ R) injury in rat H9c2 cells. Methods Cultured rat H9c2 cells were randomly divided into four groups: control group, hypoxia/ reoxygenation (H/ R) group, H/ R with low dose Matrine treated (10 μmol/ L) group and H/ R with high dose Matrine treated (30 μmol/ L) group. After Matrine treated for 12 hours, the H9c2 cells were put into humidified hypoxia chamber for 12 hours and then reoxygenated for 6 hours. Cell viability was determined by MTT assay. The changes of apoptosis in H9c2 cells were quantitatively assayed with Annexin V/ PI double staining by FSC and Tunnel assay. The release of MDA and activity of SOD were simultaneously measured. The ROS was detected by FSC. The expressions of ASK1, JNK and Bcl-2 were detected by western blotting. Results Cell viability in Matrine treated group was significantly increased from 47. 7% ± 3. 4% of H/ R group to 59. 3% ± 3. 1% of low dosage group and 70. 6% ± 2. 7% of high dosage group (all P ﹤ 0. 05); the release of MDA decreased from 2. 17 ± 0. 19 nmol/ mgprot to 1. 14 ± 0. 21 nmol/ mgprot of low dosage group and 0. 83 ± 0. 14 nmol/ mgprot of high dosage group (all P ﹤ 0. 05); the activity of SOD de creased from 128. 45 ± 9. 34 U/ mgprot of H/ R group to 147. 54 ± 6. 47 U/ mgprot of low dosage group and 179. 76 ± 5. 85 U/ mgprot of high dosage group(all P ﹤ 0. 05); the fluorescence value of ROS decreased from 935 ± 73 to 1 165 ± 75 of lowdosage group and 1 535 ± 123 of high dosage group ( all P ﹤ 0. 05); the relative expression of JNK and ASK1 was elevated from 0. 212 ± 0. 015 and 0. 343 ± 0. 025 of H/ R group to 0. 408 ± 0. 027 and 0. 428 ± 0. 027 of low dosage group and 0. 729 ± 0. 085 and 0. 759 ± 0. 067 of high dosage group (all P ﹤ 0. 05); the relative expression of Bcl-2 decreased from 0. 821 ± 0. 055 of H/ R group to 0. 597 ± 0. 047 of low dosage group and 0. 329 ± 0. 037 of high dosage group. Conclusions Matrine could effectively protect H9c2 cells from hypoxia/ reoxygenation injury, which may be related with its anti-oxidant and anti-apoptosis effects through the JNK signal transduction pathway.%目的：探讨苦参碱对 H9c2细胞缺血再灌注损伤的保护作用及机制。
黄连素预处理对H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤保护作用的机制研究
背景介绍
心肌梗死是心血管疾病中的一种常见病症，其发病机制与心肌细胞缺氧复氧损 伤密切相关。目前，尽管心肌梗死的治疗方法不断进步，但如何有效地保护心 肌细胞免受缺氧复氧损伤的侵害仍然是心血管领域的研究热点。黄连素作为一 种传统中药，因其具有抗氧化、抗炎、抗凋亡等多重药理作用而备受。
然而，黄连素预处理对H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其机制仍不清 楚。因此，本研究旨在探讨黄连素在此方面的作用，以期为心肌梗死的治疗提 供新的思路和方法。
黄连素预处理对H9C2心肌细 胞缺氧复氧损伤保护作用的机
制研究
01 摘要
03 研究方法 05 参考内容
目录
02 背景介绍 04 研究结果
摘要
黄连素是一种具有多种药理作用的中药提取物，近年来研究发现其对心血管系 统具有保护作用。本研究旨在探讨黄连素预处理对H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤 的保护作用及其可能机制。
在今后的研究中，需要进一步探讨黄连素预处理的最佳剂量和给药时间，以优 化其治疗效果并揭示其作用机制的更多细节。此外，还需要进行体内实验和临 床研究，以验证黄连素在人体中的保护作用及其潜在的治疗效果。
参考内容
丹酚酸B对NI介导的线粒体自噬及H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用
随着生物医学的不断发展，对心脏疾病的研究和治疗成为了一个热门领域。其 中，心肌细胞的缺氧复氧损伤是心脏疾病发生发展的重要机制之一，因此，寻 找有效的保护剂成为了研究的重要目标。本次演示旨在探讨丹酚酸B调控NI介 导的线粒体自噬保护H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的作用机制。
总之，本次演示的研究结果表明，丹酚酸B对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤具有 明显的保护作用，其机制可能与调控NI介导的线粒体自噬有关。这为进一步探 讨心脏疾病的发病机制和治疗提供了新的思路和靶点。当然，为了更好地应用 于临床实践，还需要进行更为深入的研究和实验验证。
钴原卟啉对H9c2心肌细胞缺氧_复氧损伤的保护作用
gr oup s and the contr ol gr oup under hypoxic conditi on was detected by the real2ti m e fluorescence quantitative RT2PCR.Results Exp ressi on of H I F21αwas signifi2 cantly increased under hypoxia conditi on.H I F21αhad no change after treat m ent with e modin al one.The ex2 p ressi on level of K U70/K U80was induced by radia2 ti pared with radiati on al one gr oup,radiati on combined hypoxia gr oup obvi ously enhanced the ex2 p ressi on of K U70/K U80.K U70/K U80mRNA exp res2 si on significantly reduced after radiati on combined with e modin under hypoxic conditi on.Conclusi on I n the hypoxic envir onment,e modin combined with radi other2 apy can effectively inhibit the exp ressi on of H I F21αand DNA double2strand break repair genes(K U70/ K U80),which may be its mechanis m of radi osensitiza2 ti on.Key words:e modin;hypoxia;repair gene;real2ti m e fluorescence quantitative RT2PCR;nas opharyngeal car2 cinoma钴原卟啉对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用朱晓洁,梁 飞,王秀宏,赵炜明,高 旭(哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室,黑龙江哈尔滨 150086)中国图书分类号:R2332;R322111;R32912;R342122; R345141;R54212;R845122;R97713文献标识码:A文章编号:1001-1978(2009)03-0352-05摘要:目的 研究钴原卟啉(C OPP)预处理在H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用及分子机制。
irisin对h9c2心肌细胞缺氧复氧损伤后的保护作用
高于对照组渊P 约 0.01冤曰缺氧复氧+Irisin 组 ROS 水平低于缺氧复氧组渊P 约 0.05冤遥 缺氧复氧组线粒体膜电位 JC-1
水平低于对照组渊P 约 0.05冤曰缺氧复氧+Irisin 组线粒体膜电位 JC-1 水平高于缺氧复氧组渊P 约 0.05冤遥 缺氧复氧组
caspase-3 及 caspase-9 的 mRNA 水平高于对照组渊P 约 0.05冤曰缺氧复氧+Irisin 组 caspase-3 及 caspase-9 的 mRNA
中国医药导报 2019 年 10 月第 16 卷第 30 期
窑论 著窑
Irisin 对 H9C2 心肌细胞缺氧复氧损伤后的 保护作用
吴 娟 1 张晓萌 1 常 盼 1 朱肖星 2 李 静 1 王西辉 1 王建榜 1 于 军 3 1.西安医学院第二附属医院全科医学科暨陕西省心血管内科疾病临床研究分中心袁陕西西安 710038曰 2.空军军医大学西京医院超声科袁陕西西安 710036曰3.西安国际医学中心临床实验中心袁陕西西安 710100
[Abstract] Objective To observe the protective effect of Irisin on H9C2 cardiomyocytes after hypoxia reoxygenation.
Methods Rat H9C2 cardiomyocytes were divided into control group, control+Irisin group, hypoxia-reoxygenation group,
水平低于缺氧复氧组渊P 约 0.05冤遥 结论 Irisin 可提高心肌细胞缺氧复氧处理后的细胞活力袁减少 ROS 生成袁恢复
自噬在高糖高脂引起心肌细胞系H9C2凋亡中的影响
研 究 论 文
自噬在 高糖 高 脂 引起 心 肌 细胞 系 Ｈ ９ Ｃ ２ 凋 亡 中的影 响
崔 桂 丽 ，王瑞 玲 ，马 琴 ，闫佳 敏 ，王亚 静ｈ
（ 山西医科大学 １ ．基 础 医 学 院 ； ２ ． 晋 祠 学 院 ，山 西 太 原 ０ ３ ０ ０ ０ ０ ）
摘要 ： 目的 探究 自噬在高糖高脂（ Ｈ Ｇ Ｈ Ｌ ） 引起的心肌细胞系 Ｈ ９ Ｃ ２ 凋亡中的影响。方法 不 同浓度高糖高脂处
Ｈ Ｇ Ｈ Ｌ 处 理后 Ｈ ９ Ｃ ２ 心肌 细胞肥大呈浓 度和时 间依 赖性 ， ３ ６ ｈ 最显著 （ Ｐ ＜ ０ ． ０ ０ １ ） ； 细胞凋亡呈 浓度和 时间依 赖性
增高， ３ ６ ｈ 凋 亡率约 ５ ０ ％（ Ｐ ＜ ０ ． ０ ０ １ ） ； 与对 照组 相 比 ， Ｈ Ｇ ＨＬ诱 导 ２ ４ ｈ时 Ｌ Ｃ ３ Ｉ Ｉ 蛋 白水平 显著 增 加 （ Ｐ ＜ ０ ． ０ １ ） ，
Ｃ Ｕ Ｉ Ｇ ｕ ｉ ． １ ｉ ， ＷＡ Ｎ Ｇ Ｒ ｕ ｉ — ｌ ｉ ｎ ｇ ，ＭＡ Ｑ ｉ ｎ ， Ｙ Ａ Ｎ Ｊ ｉ ａ ． ｍｉ ｎ ， ＷＡ Ｎ Ｇ Ｙ ａ － ｊ ｉ ｎ ｇ
（ １ ． Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｂ ａ ｓ ｉ ｃ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ；２ ． Ｊ ｉ ｎ ｃ ｉ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｓ ｈ ａ ｎ ｘ ｉ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｔ ａ ｉ ｙ ｕ ａ ｎ ０ ３ ０ ０ ０ ０ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：０ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ａ ｕ ｔ ｏ ｐ ｈ ａ ｇ ｙ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ Ｈ９ Ｃ ２ ｃ ａ ｒ ｄ ｉ ｏ ｍｙ ｏ ｃ ｙ ｔ ｅ ｓ ．Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ
褪黑素对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其机制
基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１９７１３３０）；陕西省教育厅重点实验室项目（１９ＪＳ０６１）；西安医学院大学生创新创业项目（２０１８ＤＣ－２６） 作者简介：杨吉平，男，１９８０－１２生，博士，副教授，Ｅ ｍａｉｌ：ｊｅｅｐ０３６９＠１２６．ｃｏｍ 收稿日期：２０２０－０４－２１褪黑素对Ｈ９ｃ２心肌细胞缺氧／复氧损伤的保护作用及其机制杨吉平１，费 琳２，钟钰西１，余 蕾１，苟兴春１ （１西安医学院基础医学研究所，陕西省缺血性心血管疾病重点实验室，西安 ７１００２１；２西安交通大学第一附属医院精神科； 通讯作者，Ｅ ｍａｉｌ：４４７９６２７３６＠ｑｑ．ｃｏｍ）摘要： 目的 研究褪黑素（ＭＬＴ）对Ｈ９ｃ２心肌细胞缺氧／复氧（Ｈ／Ｒ）损伤的保护作用，并探讨其机制。
方法 将Ｈ９ｃ２心肌细胞随机分为对照组、Ｈ／Ｒ组、ＭＬＴ组和受体相互作用蛋白激酶３抑制剂（ＧＳＫ ８７２）组。
对照组用不含药物的ＤＭＥＭ处理，Ｈ／Ｒ组对Ｈ９ｃ２细胞进行缺氧４ｈ／复氧６ｈ处理，ＭＬＴ组和ＧＳＫ ８７２组细胞在Ｈ／Ｒ前２ｈ分别给予１００μｍｏｌ／ＬＭＬＴ和５μｍｏｌ／ＬＧＳＫ ８７２预处理。
采用ＣＣＫ ８法检测细胞活力，试剂盒测定培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的活性，碘化丙啶（ＰＩ）染色观察细胞坏死情况，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ＲＩＰＫ３和磷酸化钙离子／钙调蛋白依赖蛋白激酶（ｐ ＣａＭＫ）Ⅱ的表达。
结果 与对照组比较，Ｈ／Ｒ组细胞存活率显著下降（Ｐ＜０ ０１），培养液中ＬＤＨ含量明显升高（Ｐ＜０ ０１），坏死细胞数量显著增多（Ｐ＜０ ０１），ＲＩＰＫ３和ｐ ＣａＭＫⅡ蛋白表达水平显著升高（Ｐ＜０ ０１）。
与Ｈ／Ｒ组比较，ＭＬＴ组和ＧＳＫ ８７２组细胞存活率明显提高（Ｐ＜０ ０１），ＬＤＨ含量显著降低（Ｐ＜０ ０１），坏死细胞明显减少（Ｐ＜０ ０１），ＲＩＰＫ３和ｐ ＣａＭＫⅡ蛋白的表达明显下调（Ｐ＜０ ０１）。
而ＭＬＴ组与ＧＳＫ ８７２组上述指标比较差异均无统计学意义（Ｐ＞０ ０５）。
Ghrelin活化人T细胞翻译起始分子通过mTOR信号转导通路
Ghrelin活化人T细胞翻译起始分子通过mTOR信号转导通路崔天盆;胡必成【期刊名称】《中国免疫学杂志》【年(卷),期】2010(026)003【摘要】目的:探讨Ghrelin活化人T细胞翻译起始分子的信号转导机理.方法:采用微柱法分离人外周血T细胞,采用Western blot方法检测mTOR信号通路分子和蛋白质翻译调控分子的磷酸化状态和含量.采用mTOR抑制剂:雷帕霉素,PI3KⅠ抑制剂:LY294002,PI3K Ⅲ抑制剂:3-甲基腺嘌呤,Ghrelin拮抗剂:Des-Lys-3-GHRP6和AKT抑制剂:A443654和Ghrelin研究相应信号通路.结果:①人T细胞表面有Ghrelin受体(GHSR1a)表达.②Ghrelin与GHSR1a结合后可活化mTOR.③Ghrelin磷酸化两个mTOR下游靶分子4E-BP-1 和P70 S6K,P70 S6K 进一步磷酸化核糖体S6蛋白.④Ghrelin磷酸化蛋白质翻译起始帽子结构的两个重要分子eIF4E和eIF4G.结论:Ghrelin促进人T细胞mRNA翻译起始的机理是活化mTOR信号转导通路.【总页数】5页(P205-209)【作者】崔天盆;胡必成【作者单位】武汉市第一医院临床免疫学实验室,武汉,430022;武汉市第一医院临床免疫学实验室,武汉,430022【正文语种】中文【中图分类】R392【相关文献】1.Ghrelin 通过激活 mTOR 通路减轻小鼠肠缺血/再灌注损伤 [J],2.游离脂肪酸激活HaCaT细胞表面TLR对NF-KB信号转导通路的影响 [J], 韩勇彬;胡大海;高宗科;黄松涛;周骥;樊萍;李艳秋3.儿童重型再生障碍性贫血T细胞内调控因子GAS5和mTOR信号途径分子的表达研究 [J], 孙豫兰;路丛;何广胜;朱明清;岑建农;展世宏;何海龙4.大鼠脊髓损伤早期PI3K/Akt/mTOR信号转导通路的活性改变及其与后肢运动功能恢复的关系 [J], 刘杨;苗宇船5.新城疫病毒在感染早期通过Akt/mTOR/4E-BP1和p38/Erk/Mnk1通路激活宿主真核翻译起始因子eIF4E的研究 [J], 詹媛;仇旭升;曲昱蓉;孙英杰;谭磊;宋翠萍;丁铲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Ghrelin通过抑制内质网应激反应减轻心肌缺血再灌注损伤的开题报告
Ghrelin通过抑制内质网应激反应减轻心肌缺血再灌注损伤的开题报告摘要：心肌缺血再灌注（I/R）损伤是临床上常见的心血管疾病。
抑制内质网应激（ER stress）的方法被认为是一种治疗I/R损伤的有效途径。
Ghrelin是一种食欲调节激素，具有多种生物学功能。
本文通过文献调研，综述了Ghrelin对心肌缺血再灌注损伤的保护作用，并阐述了其通过抑制内质网应激反应减轻心肌I/R损伤的机制。
关键词：Ghrelin；I/R损伤；内质网应激一、研究背景心肌缺血再灌注（I/R）损伤是临床上常见的心血管疾病，其发生机制与病理生理学复杂，常伴随有炎症反应、氧化应激和细胞凋亡等过程（1）。
抑制内质网应激（ER stress）被认为是一种治疗I/R损伤的有效途径（2）。
Ghrelin是一种由胃部分泌的肽类激素，被认为是促进食欲的重要因素。
近年来，研究发现Ghrelin具有多种生物学功能，包括调节胃肠道功能、促进生长激素分泌、抗炎作用等（3）。
此外，Ghrelin对心血管系统也具有保护作用，可以减轻心肌缺血再灌注损伤（4）。
二、研究进展1. Ghrelin对心肌I/R损伤的保护作用Ghrelin对心肌I/R损伤具有保护作用，可以减轻心肌梗死面积、降低心肌酶的释放、改善心脏功能（5）。
研究表明，Ghrelin的保护作用与其受体GHS-R1a的激活有关（6）。
2. Ghrelin通过抑制内质网应激减轻心肌I/R损伤内质网应激是一种细胞应对各种压力的保护机制，但当压力过大时，内质网应激会引起细胞凋亡和炎症反应等损伤。
研究表明，Ghrelin可以通过抑制内质网应激减轻心肌I/R损伤（7）。
具体机制包括：Ghrelin可以下调内质网应激信号通路上游蛋白PERK、IRE1和ATF6的表达，减少内质网应激引起的细胞凋亡；Ghrelin可以调节内质网应激对NF-κB信号通路的影响，减轻炎症反应（8）。
三、研究展望Ghrelin的保护作用及其通过抑制内质网应激对心肌I/R损伤的减轻已经得到初步研究，但相关机制尚需进一步深入研究。
Ghrelin对高糖诱导心肌细胞凋亡的影响的开题报告
Ghrelin对高糖诱导心肌细胞凋亡的影响的开题报告
引言：
糖尿病是一种全球性的代谢性疾病，而心肌细胞凋亡是其中最主要的心脏并发症之一。
高血糖是糖尿病的主要症状之一，高糖可导致心肌细胞凋亡。
Ghrelin是一种神经肽激素，可通过其作用于食欲控制和代谢的发挥其防治心肌细胞凋亡的作用。
因此，本文旨在探讨Ghrelin对高糖诱导心肌细胞凋亡的影响到底是什么。
研究目的：
本文的研究目的是了解Ghrelin对高糖诱导心肌细胞凋亡的影响，并为探究心肌细胞凋亡的阈下分子机制提供参考。
研究方法：
该研究将采用体外细胞培养方法。
Rat骨骼肌细胞将在高糖浓度中进行培养，同时添加Ghrelin。
使用流式细胞术来检测心肌细胞凋亡。
研究结果：
数据将通过数值统计分析获得。
预计Ghrelin的添加可减少高糖诱导的心肌细胞凋亡，因为Ghrelin已被证明可以通过其影响细胞死亡的信号途径来抑制心肌细胞的凋亡。
讨论：
Ghrelin在体内可以抑制心肌细胞凋亡。
本研究结果表明，对高糖诱导心肌细胞凋亡的贡献，与Ghrelin水平有关，Ghrelin的添加可以在一定程度上减少心肌细胞凋亡。
这表明，Ghrelin可能成为糖尿病患者心脏并发症的防治新药。
Ghrelin对AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡的影响及机制
Ghrelin对AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡的影响及机制杨春艳;冯朝晖;杨萍;任平【摘要】Objective To clarify the effect and possible mechanism of ghrelin on H9c2 cardiomyocytes apoptosis induced by Angiotensin Ⅱ (Ang Ⅱ).Methods H9c2 cells were cultured and divided into blank control group,group of Ang Ⅱ and Ang Ⅱ + Ghrelin and Ghrelin group.MTT was used to detect cell survival,TUNEL staining was used to observe the apoptosis of H9c2 cells,and the RT-PCR was used to detect the mRNA expression of bcl-2,Bax,Caspase3,type 1 and type 2 Ang Ⅱ receptors (AT1R,AT2R).Results Compared with the control group,the survival rate of H9c2 cells decreased significantly in Ang Ⅱ group.The number of apoptosis was significantly increased.The expression of Caspase-3 and Bax was significantly increased,while the expression of bcl-2 was significantly decreased.AT1R and AT2R were significantly increased,especiallyAT1R.However,ghrelin could significantly increase the survival rate of myocardial cells,reduce the number of apoptosis,down-regulate the expression of Caspase-3,Bax and AT1R,and upregulate the expression of bcl-2.Interestingly,there was no significant change in AT2R expression.Conclusion AT1R and AT2R were both involved in the induction of myocardial apoptosis in Ang Ⅱ.Ghrelin inhibited the apoptosis of myocardia l cells induced by Ang Ⅱ,and its mechanism could be related to the down-regulation of AT1R.%目的阐明Ghrelin对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌细胞凋亡的影响及其可能机制.方法体外培养H9C2心肌细胞,分为空白对照组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+Ghrelin组及单纯Ghrelin组,采用MTT法检测细胞存活率,TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况,并应用RT-PCR法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、1型及2型Ang Ⅱ受体(AT1R,AT2R)mRNA表达.结果与空白对照组相比,Ang Ⅱ组心肌细胞存活率明显下降;细胞凋亡数目明显增加;Caspase-3及促凋亡分子Bax表达明显增加,而抗凋亡分子Bcl-2表达明显减少;AT1R及AT2R 表达均明显增加,AT1R增加尤为显著.与Ang Ⅱ组相比,Ghrelin+ AngⅡ组心肌细胞存活率明显增加;细胞凋亡数目明显减少;Caspase-3及促凋亡分子Bax表达明显减少,而抗凋亡分子Bcl-2表达明显增加;AT1R表达明显减少,而AT2R表达无明显变化.结论 AT1R及AT2R均参与AngⅡ诱导心肌细胞凋亡进程,Ghrelin可抑制Ang Ⅱ诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与Ghrelin下调通过下调AT1R表达有关.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2017(021)011【总页数】6页(P1982-1987)【关键词】Ghrelin;血管紧张素Ⅱ;心肌细胞凋亡;血管紧张素Ⅱ受体【作者】杨春艳;冯朝晖;杨萍;任平【作者单位】吉林大学中日联谊医院心内科,吉林长春130033;吉林大学中日联谊医院心内科,吉林长春130033;吉林大学中日联谊医院心内科,吉林长春130033;吉林大学第一医院胸外科【正文语种】中文【中图分类】R541.6+1心肌细胞凋亡可导致心肌细胞数目的减少进而影响心肌收缩性，并可引起心肌细胞代偿性肥大及纤维化，促进心血管系统疾病的进展。
再复氧损伤的保护作用的开题报告
钴原卟啉对H9c2心肌细胞缺氧/再复氧损伤的保护作用的
开题报告
一、选题背景：
缺氧/再氧是心肌梗死的主要致病机制之一，会导致心肌细胞损伤、坏死和心肌
功能不全等不良后果。
因此，寻找有效的保护方法，减轻心肌缺血/再灌注损伤对于预防心肌梗死或改善心肌梗死后的病变具有重要意义。
近年来，钴原卟啉作为一种强效
光敏剂已经得到了广泛的关注，并被证明对心血管疾病有重要的保护作用。
（1）
二、研究目的：
本研究旨在探讨钴原卟啉对H9c2心肌细胞缺氧/再复氧损伤的保护作用，并进一步探究其作用机制。
三、研究方法：
1.培养H9c2心肌细胞，分为对照组、缺氧/再氧组和不同浓度钴原卟啉处理组。
2.缺氧/再氧处理：H9c2细胞经过处理后，置入缺氧箱中，用无血清DMEM培养基悬浮6小时，再导入有5% CO2的恢复培养箱中，复氧处理12小时。
3.不同浓度钴原卟啉处理：将不同浓度（0.1、1、10、100 μmol / L）的钴原卟
啉加入培养基中，预处理H9c2细胞24小时。
4.通过Western blot、Real-time PCR等方法检测Wnt信号通路的相关分子（β-catenin、Wnt3a、Dkk1）的表达，并测定炎症介质（IL-1β、TNF-α、MCP-1）的含量。
五、研究意义和预期结果：
本研究将进一步探索钴原卟啉对心肌细胞缺氧/再复氧损伤的保护作用，并挖掘
其作用机制，为预防和治疗心肌梗死提供理论依据。
预计结果将表明，钴原卟啉能够
显著降低心肌细胞缺氧/再氧所致的细胞损伤和炎症水平，通过调节Wnt信号通路的表达促进心肌细胞的再生和修复，从而发挥保护作用。
褪黑素通过介导线粒体自噬改善糖尿病心肌梗死后心肌损伤
褪黑素通过介导线粒体自噬改善糖尿病心肌梗死后心肌损伤焦阳;王继航;李影;沈建;侯小玲;沈明志;付振虹【期刊名称】《中华老年多器官疾病杂志》【年(卷),期】2022(21)3【摘要】目的探讨褪黑素通过介导线粒体自噬对糖尿病(DM)心肌梗死(MI)后心肌损伤的保护作用及相关机制。
方法将32只C57BL/6J雄性小鼠按照随机数表法随机分为4组,每组8只:(1)假手术组(sham组);(2)糖尿病组(DM组);(3)糖尿病急性心肌梗死组(DMI组);(4)糖尿病急性心肌梗死+褪黑素组(DMI+Mel组)。
4周后行超声心动图检测小鼠心脏功能。
取心脏行切片染色,检测小鼠心肌间质纤维化程度和心肌细胞凋亡水平。
培养H9c2细胞,分为以下4组:(1)对照组(CON组);(2)高糖高脂组(HG/HF组);(3)高糖高脂缺氧组(HG/HF+hypoxia组);(4)HG/HF+hypoxia+Mel组。
行相应处理后,采用蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3蛋白(Caspase-3)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)和微管相关蛋白1轻链3-β(LC3)、死骨片蛋白1(P62)、帕金蛋白(Parkin)等线粒体自噬相关蛋白的表达,采用荧光素酶法检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)浓度。
采用SPSS 25.0统计软件进行数据分析。
根据数据类型,分别采用方差分析和Dunnett法进行组间比较。
结果与sham组相比,DMI组和DMI+Mel 组小鼠的左心室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)显著降低;左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、心肌细胞横截面积、间质纤维化程度和细胞凋亡率显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。
与DMI组相比,DMI+Mel 组小鼠的心功能明显改善;LVESD、LVEDD、心肌细胞横截面积、间质纤维化程度和细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。
胡黄连苷Ⅱ对乙醇诱导的H9C2心肌细胞损伤的保护作用
胡黄连苷Ⅱ对乙醇诱导的H9C2心肌细胞损伤的保护作用胡军;赵渊源;孙靖涵;侯志文;于波【摘要】目的探讨胡黄连苷Ⅱ对乙醇所致H9C2心肌细胞损伤的保护作用.方法用MTT检测细胞存活率,LDH、SOD、Gpx、MDA及ROS试剂盒检测H9C2细胞在乙醇干预及胡黄连苷Ⅱ预处理条件下的氧化应激状态.结果 100 mmol/L及以上浓度的乙醇可导致H9C2细胞的存活率下降,100～200 mmol/L之间细胞存活率下降最为明显,200 mmol/L的乙醇可导致上清液中LDH活性的增加、细胞匀浆中SOD及Gpx活性的下降、细胞匀浆中MDA及细胞内ROS含量的增加.而胡黄连苷Ⅱ预处理可部分改善乙醇所致细胞存活率的下降,其保护作用部分是通过提高细胞中SOD及Gpx活性实现的.结论胡黄连苷Ⅱ对乙醇所致H9C2心肌细胞氧化应激损伤,具有保护作用,其保护作用部分是通过提高细胞的抗氧化作用实现的.【期刊名称】《中国医科大学学报》【年(卷),期】2014(043)006【总页数】5页(P523-526,537)【关键词】胡黄连苷Ⅱ;H9C2心肌细胞;乙醇;氧化应激【作者】胡军;赵渊源;孙靖涵;侯志文;于波【作者单位】中国医科大学附属第一医院心内科,沈阳110001;中国医科大学附属第一医院心内科,沈阳110001;中国医科大学附属第一医院心内科,沈阳110001;中国医科大学附属第一医院心内科,沈阳110001;中国医科大学附属第一医院心内科,沈阳110001【正文语种】中文【中图分类】R542.2氧化应激在包括酒精性心肌病在内的许多心血管疾病中起重要作用［1，2］。
氧化应激以活性氧的产生与清除失衡为特点。
活性氧的清除系统包括酶途经和非酶途经，前者包括超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶等，后者包括维生素C、维生素E等。
活性氧主要包括超氧阴离子、过氧化氢、羟自由基，它们可以通过氧化蛋白、脂类、核酸而影响细胞的完整性，从而影响细胞的结构与功能，另一方面活性氧也可以启动细胞的凋亡途经。