临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立(20190827181453)
临床基因扩增检验试验的设置质量管理体系的-山东临床检验中心
质量管理的内涵
写你所做的
做你所写的 记录你已做的 分析你已做的 质量持续改进
怎样编写SOP？
1.检验项目SOP
应根据申华人民共和国卫生行业标准
编号WS/T 227-2002 “临床检验操作规程编写要求”编写项目的 SOP文件 原则上，每一收费的检验项目都应有与之相 应的SOP文件，尽管某些项目SOP文件可以 简单一些
仪器每日保养记录表
月保养记录表
项目校准程序和计划
校准对于检验结果在规定的报告范围内的准
确和可靠是必要的。 校准是一个测试和调整仪器或者检验系统， 试剂盒的过程，以提供检验反应和所测物质 之间的准确关系。 用配套校准品进行校准是量值溯源开始，厂 家应保证校准品的最终溯源
校准计划
校准计划是指检验项目的校准频度。
临床PCR 实验室质量管理的特点
（一）“无基因”概念
（二）实验室要有严格的人员进入限制和程
序 （三）使用合格的试剂和消耗品
临床基因扩增检验实验室相关记录
临床基因扩增检验实验室需要记录的有临床标本接 收中的患者个人有关资料（如姓名、性别、年龄 等）、标本接收日期、标本特性、标本的状态、标 本的编号等；检测前的仪器设备和试剂的准备等； 检测中的试剂生产厂家、试剂批号、检测日期、检 测结果、质控结果及分析、检测人（签字）、质检 人（签字）等、检测后的实验台面、仪器设备等的 消毒和清洁、紫外线照射等。记录要持之以恒。
质量管理
质量管理不是表面文章，其精髓就是所有与实验室 检验质量有关的环节全部要有章可循，并按章进行。 这即是对实验室实际操作技术人员的约束，同时也 是对实验室负责人的约束，不能随心所欲，比如说 仪器、试剂、消耗品的购买，都必须按程序进行。 这是与我们传统的平常只查考勤、查卫生等到出现 问题时再处罚个人的经验管理模式所完全不同的， 这个观念和意识的转变首先应是实验室负责人，然 后才是具体的实验操作人员。
临床基因扩增检验实验室的设置质量管理体系的建立及其技术验收
产物分析区
核酸扩增后产物分析方法,如膜上或微孔板上 探针杂交方法,琼脂糖凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝 胶电泳,核酸测序等方法。
本区是最主要的扩增产物污染来源，因此必 须注意避免通过本区的物品及工作服将扩增 产物带出。由于本区有可能用某些可致基因 突变和有毒物质，故应注意实验室人员的安 全防护。
卫检字2002第8号
临床基因扩增检验实验室技术验收申请表
一.基因扩增实验室基本情况 二.提供材料情况（十部分）
《医疗机构执业许可证》 拟设置基因扩增实验室医院医疗资源状况、对该检 测的需求及实验室运行的预测分析 拟设置基因扩增实验室的设置平面图 实验室主要负责人简历表 实验室工作人员一览表
临床基因扩增检验实验室技术验收申请表
试剂准备区
试剂分装应在超净台中进行 扩增反应混合液应使用分子生物学级的，试
剂制备好后应有质检： 一是否有污染（是否 有假阳性存在）、二是使用弱阳性质控物检 测试剂的扩增效果。
标本制备区
仪器设备配置标准：
生物安全柜 ， 2～8℃冰箱，-20℃或-80℃冰 箱；高速台式冷冻离心机；混匀器；水浴箱或加 热模块；微量加样器（覆盖1～1000µl）；可移动 紫外灯（近工作台面）；超净工作台，消耗品； 一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心 管和加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作 鞋；专用办公用品等。
样品处理对核酸扩增有很大影响，必须使用有效的 核酸提取方法，可在开展临床标本检测前对提取方法进 行评价。
标本制备区
温育既可在加热模块也可在水浴中进行。加 热模块和水浴应在每次使用时，都要对所设置 的温度使用已经校准的温度计进行校准。
临床基因扩增检验实验室基本设置标准
临床基因扩增检验实验室基本设置标准根据《临床检验扩增检验实验室管理暂行办法》，制定本标准一、临床基因扩增检验实验室区域设置原则（一）临床基因扩增检验实验室区域设置原则1、试剂储存和准备区2、标本制备区3、扩增反应混合物配制和扩增区4、扩增产物分析区如使用全自动分析仪，区域可适当合并。
（二）各工作区域必须有明确的标记，避免不同工作区域内的设备、物品混用。
（三）进入各工作区域必须严格按照单一方向进行，即试剂储存和准备区—>标本制备区—>扩增反应混合物配制和扩增区—>扩增产物分析区。
（四）不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。
工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出。
二、工作区域仪器设备配置标准（一）试剂储存和准备区1、2-8C和-15C冰箱2、混匀器3、微量加样器（覆盖1-1000ul）4、移动紫外灯（近工作台面）5、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）6、专用工作服和工作鞋7、专用办公用品（二）标本制备区1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱2、高速台式冷冻离心机3、混允器4、水浴箱或加热模块5、微量加样器（覆盖1-1000ul）6、可移动紫外灯（近工作台面）7、超净工作台8、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）9、专用工作服和工作鞋10、专用办公用品如需处理大分子DNA，应具有超声波水浴仪。
（三）扩增反应混合物配制和扩增区1、核酸扩增仪2、微量加样器（覆盖1-1000ul）3、可移动紫外灯（近工作台面）4、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）5、专用工作服和工作鞋6、专用办公用品(四)扩增产物分析区视检验方法不同而定。
基本仪器设备如下：1、微量加样器（覆盖1-1000ul）2、可移动紫外灯（近工作台面）3、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头（带滤心）4、专用工作服和工作鞋5、专用办公用品。
临床基因扩增检验实验室设计及建设要点
临床基因扩增检验实验室设计及建设要点1.实验室设计布局以四区设计为例，更高分区要求以此类推：mNGS实验室设置应该严格按照《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》（卫办医政发〔2010〕194号）国家卫健委高通量测序实验室的要求进行，临床基因扩增检验实验室应获得监管属地临床检验中心的认可，标准化分区及空气流向，确保工作有序，互不干扰，防止污染。
四区必须完全独立、大量的新风补充、不同区域的不同压力梯度、较严格的湿度控制要求、较高的洁净度要求。
1）装修材料简明洁净的外观 SL－6040A标准PCR实验室主要由彩钢板、铝合金型材和玻璃等材料构成，其四角采用铝合金圆角立柱支撑，实验室内角采用铝合金内圆角装饰，结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。
2）隔断布局试剂准备区试剂准备区配备有2~8℃冰箱，计算冷负荷时，需要将它们计算在内。
房间的面积宜控制在15~20㎡。
标本制备区标本制备区配备有2~8℃冰箱和-20℃冰箱，计算冷负荷时，需要将它们计算在内。
在标本制备区，还需要配备生物安全柜，用于进行提取核酸的操作。
为避免提取的核酸在柜内反复循环，造成标本之间的交叉污染，出现假阳性结果，该区域配备的生物安全柜必须是B2型的。
生物安全柜工作区垂直气流全部来自实验室，排风经过高效过滤器过滤后直接排至室外，不允许回到安全柜和实验室中。
如果实验室内配备生物安全柜，每配备一台，实验室的面积增加10㎡；标本制备区的面积宜在30~40㎡之间。
扩增室扩增室主要配备PCR实验室的核心仪器PCR仪，在实验室建造过程中，需要给PCR仪配备专门的UPS电源，保证它的正常工作。
该区面积控制在25~30㎡。
产物分析区在室内配备通风橱，保证房间内的相对负压，空气从室外流向室内。
该区面积控制在30~40㎡，用于测序仪增加等。
另外此分区为负压最大区域，考虑冷量损耗，工作温度:19-25℃（22±3℃），工作湿度:维持20-80%的不凝结的相对湿度。
临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立
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理想的PCR实验室设置A
产物分析区
扩增区
标本制备区 试剂准备区
空气流向
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
专用走廊
工作流向
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理想的PCR实验室设置B
产物分析区
核酸提取用离心管质检的基本方面 带滤心吸头的质检主要是滤心的密封性
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项目检测、结果判断、解释和报告 SOP
标本进入实验程序后的操作编号方式 根据所用试剂盒确定的详细操作流程 仪器编程及文件名的编写规则 结果判读的流程和规则 结果分析解释的流程 结果报告流程
试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
空气流向++
门
门
扩增和产 物分析区 空气流向++
其他实验室
试剂准备 区
空气流向
其他实验室
其他实验室
空气流向
走廊
走廊
其他实验室
空气流向+
其他实验室
标本制备 区
其他实验室
其他实验室
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临床基因扩增实验室设置的一般原则
各区独立
注意风向 “十六字口诀”
因地制宜 方便工作
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产物分析区
扩增区
标本制备区 试剂准备区
传递窗
传递窗
传递窗
空气流向
空气流向
空气流向
空气流向
缓冲间
缓冲间
临床基因扩增检验实验室基本设置标准
临床基因扩增检验实验室基本设置标准中国临床实验室实验室管理临床基因扩增检验实验室基本设置标准根据《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》,制定本标准.一,临床基因扩增检验实验室区域设置原则(一)临床基因扩增检验实验室原则上分为四个分隔开的工作区域:1.试剂贮存和准备区2.标本制备区3.扩增反应混合物配制和扩增区4.扩增产物分析区如使用全自动分析仪,区域可适当合并.(二)各工作区域必须有明确的标记,避免不同工作区域内的设备,物品混用.(三)进人各工作区域必须严格按照单一方向进行,即试剂贮存和准备区一标本制备区一扩增反应混合物配制和扩增区一扩增产物分析区.(四)不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色).工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出.二,工作区域仪器设备配置标准(一)试剂贮存和准备区1.2,8~C和一15~C冰箱2.混匀器3.微量加样器(覆盖1,1000~1)4.移动紫外灯(近工作台面)5.消耗品:一次性手套,一次性吸水纸,耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)6.专用工作服和工作鞋7.专用办公用品(二)标本制备区1.2,8~C冰箱,一20?或一80”C冰箱2.高速台式冷冻离心机3.混匀器4.水浴箱或加热模块5.微量加样器(覆盖1,1000~1)6.可移动紫外灯(近工作台面)7.超净工作台8.消耗品:一次性手套,一次性吸水纸,耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)9.专用工作服和工作鞋10.专用办公用品如需处理大分子DNA,应备有超声波水浴仪.(三)扩增反应混合物配制和扩增区1.核酸扩增仪2.微量加样器(覆盖1,10001.,.1)3.可移动紫外灯(近工作台面)4.消耗品:一次性手套,一次性吸水纸,耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)5.专用工作服和工作鞋6.专用办公用品(四)扩增产物分析区视检测方法不同而定.基本仪器设备如下:1.微量加样器(覆盖1,200~1)2.可移动紫外灯(近工作台面)3.消耗品:一次性手套,一次性吸水纸,加样器吸头(带滤心)4.专用工作服和工作鞋5.专用办公用品中国临床实验室?2002年第1期27。
临床基因扩增检验实验室基本设置标准
临床基因扩增检验实验室基本设置标准中国临床实验室实验室管理临床基因扩增检验实验室基本设置标准根据《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》,制定本标准.一,临床基因扩增检验实验室区域设置原则(一)临床基因扩增检验实验室原则上分为四个分隔开的工作区域:1.试剂贮存和准备区2.标本制备区3.扩增反应混合物配制和扩增区4.扩增产物分析区如使用全自动分析仪,区域可适当合并.(二)各工作区域必须有明确的标记,避免不同工作区域内的设备,物品混用.(三)进人各工作区域必须严格按照单一方向进行,即试剂贮存和准备区一标本制备区一扩增反应混合物配制和扩增区一扩增产物分析区.(四)不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色).工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出.二,工作区域仪器设备配置标准(一)试剂贮存和准备区1.2～8~C和一15~C冰箱2.混匀器3.微量加样器(覆盖1～1000~1)4.移动紫外灯(近工作台面)5.消耗品:一次性手套,一次性吸水纸,耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)6.专用工作服和工作鞋7.专用办公用品(二)标本制备区1.2～8~C冰箱,一20℃或一80”C冰箱2.高速台式冷冻离心机3.混匀器4.水浴箱或加热模块5.微量加样器(覆盖1～1000~1)6.可移动紫外灯(近工作台面)7.超净工作台8.消耗品:一次性手套,一次性吸水纸,耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)9.专用工作服和工作鞋10.专用办公用品如需处理大分子DNA,应备有超声波水浴仪.(三)扩增反应混合物配制和扩增区1.核酸扩增仪2.微量加样器(覆盖1～10001.,.1)3.可移动紫外灯(近工作台面)4.消耗品:一次性手套,一次性吸水纸,耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)5.专用工作服和工作鞋6.专用办公用品(四)扩增产物分析区视检测方法不同而定.基本仪器设备如下:1.微量加样器(覆盖1～200~1)2.可移动紫外灯(近工作台面)3.消耗品:一次性手套,一次性吸水纸,加样器吸头(带滤心)4.专用工作服和工作鞋5.专用办公用品中国临床实验室?2002年第1期27。
临床基因扩增检验实验室的设置、质量管理
实验室使用和管理：
当前第27页\共有68页\编于星期五\1点
标本接受区
试剂准备区
样本制备区 扩增区
产物分析区
区域的适当合并： “由于测定技术总是在发展之中，
区域的合并应根据仪器的特点而定”
当前第28页\共有68页\编于星期五\1点
小结：
从核心仪器特点、实验室的现状出发，综 合考虑管理要求
有关职责进行审核。
当前第40页\共有68页\编于星期五\1点
管理要求（现场考核）：
送审的文件描述与实验室实际情况的一致 性
实际运行与文件规定的一致性 人员素质：对文件的认知、熟悉、灵活运
用程度
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现场考核的实际内涵： 认识到不到位 落实到不到位 符合性检查加指导性检查 有重点的全面检查
当前第22页\共有68页\编于星期五\1点
标本制备区：
临床标本的保存
核酸提取、储存及
其加入至扩增反应 管
测定RNA时cDNA的合 成
不得在本区对样本进 行PCR扩增
冰箱 (2~8℃和-20℃或-80℃) 高速台式冷冻离心机
水浴箱和/或加热模块 生物安全柜 混匀器
微量加样器 可移动紫外灯 专用工作服和工作鞋
四个组成部分的关系：
关键：核心——过程（活动） 纽带——程序组织结构 Nhomakorabea程序
资源
过程
当前第46页\共有68页\编于星期五\1点
过程
理解
“过程”的重要性 1、工作是通过过程来完成的。 2、质量管理是通过对各种过程的控制 来实现的。 3、质量管理本身也是一系列的过程
过程的分解、控制 过程的有机组合
临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理
临床基因扩增检验实验室的规X化设置及其管理使基因扩增检验技术有效地应用于临床，更好地为疾病的预防、诊断和治疗效劳，保证检验质量，特制定本规X。
一、临床基因扩增检验实验室的规X化设置及其管理临床基因扩增检验实验室的规X化设置详见?临床基因扩增检验实验室管理暂行方法?(卫医发[2002]10号文附件?临床基因扩增检验实验室根本设置标准?。
为防止污染，必须严格遵循?临床基因扩增检验实验室设置标准?设置临床基因扩增检验实验室。
临床基因扩增检验实验室四个隔开的工作区域中每一区域都须有专用的仪器设备。
各区域都必须有明确的标记，以防止设备物品如加样器或试剂等从其各自的区域内移出从而造成不同的工作区域间设备物品发生混淆。
进入各个工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反响混合物配制和扩增区(简称扩增区至产物分析区，防止发生穿插污染。
在不同的工作区域应使用不同颜色或有明显区别标志的工作服，以便于鉴别。
此外，当工作者离开工作区时，不得将各区特定的工作服带出。
清洁方法不当也是污染发生的一个主要原因，因此实验室的清洁应按试剂贮存和准备区至扩增产物分析区的方向进展。
不同的实验区域应有其各自的清洁用具以防止穿插污染。
(一)<试剂贮存和准备区下述操作在该区进展：贮存试剂的制备、试剂的分装和主反响混合液的制备。
贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过产物分析区。
在翻开含有反响混合液的离心管或试管前，应将其快速离心数秒。
试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。
当贮存试剂溶液经检查可用后，应将其分装贮存备用，防止由于经常翻开反响管吸液而造成污染。
含反响混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。
大多数用于扩增的试剂都应冰冻贮存。
为防止因单次反响取液而频繁的冻融主贮存试剂，应分装冰冻贮存试剂溶液。
贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反响数来决定。
临床基 因扩 增检验实验室的设置及质量管理体系的建立
8.实施民法典，构建和谐民事关系 9.民法典是新时代我国社会主义法治建设的重大成 果 10.让民法典走到群众身边，走进群众心里 11.运用民法典维护人民权益、化解矛盾纠纷、促进 社会和谐 12.民法典与生活同行 13.民法典——新时代的人民法典 14.崇尚法典精神，共筑美好生活
15.民法典是一部固根本、稳预期、利长远的基础性法律 16．加强民法典重大意义的宣传教育，是坚持以人民为中 心、保障人民权益实现和发展的必然要求 17．要把民法典纳入国民教育体系，加强对青少年民法典 教育 18.切实推进民法典实施，更好保障人民权益 19.加强民法典重大意义的宣传教育，是提高我们党治国 理政的必然要求 20.切实实施民法典，依法保障人民合法权益 21.学好用好民法典，做知法守法好公民 22.学习民法典，践行人民至上理念，维护群众合法权益 23.贯彻实施好民法典，让民法典深入人心 24．坚持党的领导、人民当家作主、依法治国有机统一 25.中国特色社会主义法治建设的根本目的是保障人民权 益
接收的标本应收集在原始容器中 在核酸提取时带入至标本制备区
什么样的临床基因扩增检验实验室 是最标准的？
临床基因扩增实验室设置的一般原则
各区独立 注意风向 因地制宜 方便工作
“十六字口诀”
实验室质量管理体系的建立
质量手册 质量体系程序文件 标准操作程序
质量管理的内涵
写你所做的 做你所写的 记录你已做的 分析你已做的
临床基因扩增检验实验室的设置 及质量管理体系的建立
卫生部临床检验中心 李金明
临床基因扩增检验实验室的设置
依据：卫生部颁发的《临床基因扩 增检验实验室管理暂行办法》（卫 医发[2002]10号）
临床标本的接收
通常的工作流程：标本采集 血清分离
临床_PCR_实验室质量管理体系的建立
临床PCR实验室质量管理体系的建立卫生部临床检验中心李金明《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）是到目前为止卫生部针对一项检验技术的临床应用管理下发的第一个法规性文件，要求临床PCR实验室，不但在实验室设置及仪器设备等硬件上要满足开展临床检验的条件，而且要求实验室在日常工作要有文件化的工作程序。
对于临床实验室来说，这是从来没有过的。
我们的检验科多少年来遵循的都是一种固定的经验管理模式，对日常检验工作，通常缺乏一个文件化的程序，只是购买到商品试剂盒以后，按照试剂盒的说明书去进行检验，对试剂盒本身也缺乏相应的质检，日常检验基本上是完成即可，至于完成的质量怎么样，心中无数，只能从临床大夫和患者投诉的多少来做判断。
做得好一点的检验科，还多少有一点室内质控，或是参加了室间质评，做得差的，很多检验项目根本就没有室内质控。
但近年来，随着临床实验室质量保证的概念逐步地进入我们的临床检验实践，我国临床检验正进入到一个规范化和标准化的时代，尤其是临床PCR实验室，起到了一个很好的领头和示范作用。
在全国，一大批从事临床PCR检验的专家和同道，在他们的日常工作和申请实验室验收过程中，总结经验，建立了不但在形式而且在实质上符合当今实验室质量管理模式的临床PCR实验室。
本处的许多叙述，有本人的一些体会和理解，但很多的概念应该说是来自于我们全国各实验室的同行们实际工作经验的启发。
一、实验室质量管理概述实验室质量管理是说起来容易，做起来难。
要说吧，其基本内容也就四句话，就是写你所应做的，做你所写的，记录你已做的和分析你已做的。
所谓写你所应做的，就是将在实验室检测中要做的事以文件化的形式表述出来，形成一个实验室的质量管理文件，通常包括质量手册、质量体系程序文件和标准操作程序（SOP）等。
质量手册的基本定义是：阐明一个实验室的质量方针，并描述其质量体系的文件。
其主要内容包括目录、批准页、前言、质量方针、组织结构、人员职责、实验室设施环境、仪器设备、溯源性、检验方法、标本管理、记录、报告等，是对上述各方面质量管理的一般性描述。