论ELISA检测技术在畜产品抗生素类药物残留检测中的应用
品检中的兽药残留检验方法
品检中的兽药残留检验方法兽药残留是指兽药在兽体内或畜禽产品中残留的化学物质。
合理使用兽药可以预防和治疗动物疾病,提高畜禽养殖效益。
然而,如果兽药残留超过安全标准,可能对消费者健康造成潜在风险。
因此,兽药残留的检验方法在品检中显得尤为重要。
兽药残留检验方法是确定畜产品中兽药残留水平的关键步骤。
本文将介绍一些常用的兽药残留检验方法,并讨论其原理和应用。
高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)是目前应用广泛的兽药残留检验方法之一。
该方法基于高效液相色谱(HPLC)和质谱联用仪(MS),通过对样品进行分离和定性分析,可以快速、准确地检测多种兽药残留物。
HPLC-MS方法具有高选择性、高灵敏度和高分辨率的特点,适用于不同类型的兽药残留物检测。
酶联免疫吸附测定法(ELISA)是一种基于免疫学原理的兽药残留检测方法。
该方法利用特异性抗体与兽药残留物结合,形成特异性抗原-抗体复合物,并通过酶作用产生颜色反应,从而定量检测兽药残留物的含量。
ELISA方法具有简单、快速、便捷的特点,适用于大规模的兽药残留检测。
气相色谱-质谱联用法(GC-MS)也是常用的兽药残留检验方法之一。
该方法利用气相色谱和质谱联用仪对样品进行分离和定性分析,可以检测挥发性兽药残留物和半挥发性兽药残留物。
GC-MS方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点,适用于多种兽药残留物的分析。
快速液相色谱法(UPLC)也是兽药残留分析中常用的检测方法之一。
与传统的液相色谱相比,UPLC具有更高的分离效率、更短的分析时间和更低的溶剂消耗量。
因此,UPLC是一种高效、准确和经济的兽药残留检验方法。
综上所述,兽药残留检验方法在品检中起着重要的作用。
通过合理选择和应用适当的检验方法,可以快速、准确地检测畜产品中的兽药残留物。
这有助于确保畜产品的质量安全,保护消费者的健康。
未来,随着科技的进步,兽药残留检验方法还会不断发展和完善,以应对不断变化的兽药种类和畜产品需求。
酶联免疫法检测卡那霉素的应用进展
酶联免疫法检测卡那霉素的应用进展摘要:本文查阅了相关文献,对酶联免疫方法(ELISA)应用于卡那霉素含量检测的进展进行综述。
酶联免疫法主要用于检测食品、饲料和医药行业样本中的卡那霉素,食品的样本包括牛奶,鸡蛋,鸡肉,鸡肝、猪肉、猪肝、奶粉等,医药行业检测样本有疫苗,细胞培养液,质粒等。
酶联免疫法目前在中的检出限分别可以达到,准确性最高加标回收率,利于大家建立能够用于食品和医药中卡那霉素等抗生素残留量检测的有效方法,以加强对产品中抗生素残留量控制,进一步提高食品医药的安全性。
关键词:卡那霉素;酶联免疫;定量检测卡那霉素,英文名Kanamycin,一种氨基糖苷类抗生素。
对多数肠杆菌科细菌,如大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、肠杆菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、普罗菲登菌属、耶尔森菌属[1]等均有良好作用;流感杆菌、布鲁菌属、脑膜炎球菌、淋球菌等对卡那霉素也大多敏感。
不良反应:1.在疗程中可能发生听力减退、耳鸣或耳部饱满感,此为影响耳蜗神经所致。
少数患者,尤其原来有肾功能减退者可在停药后发生,须引起注意。
影响前庭神经功能时可出现眩晕、步履不稳,但并不多见; 2.可出现血尿、排尿次数减少或尿量减少、食欲减退、恶心、呕吐、极度口渴等肾毒性反应。
在国标GB31650-2019中规定所有食品动物(产蛋期禁用,不包括鱼)的肌肉或皮脂中的卡那霉素含量不能超过100µg/kg,奶的卡那霉素不能超过150µg/kg,肝脏的卡那霉素不能超过600µg/kg,肾的卡那霉素不能超过2500µg/kg。
目前检测卡那霉素的方法有微生物法,HPLC,液质法,免疫法等[1],但是微生物法培养时间很长,色谱质谱法程序复杂,过柱一次只能测一个样品,不适合大量样品筛查,免疫胶体金法只能做到半定量[2]。
选择用酶联免疫法来检测样本里的卡那霉素,能进行样品的大量筛查和定量检测。
ELISA测定卡那霉素的方法建立竞争法是目前比较流行的一种ELISA方法,在中国的发展应用是近20多年开始流行的。
ELISA技术在畜牧业中的应用进展
应抗原( 或抗体 ) 合后 ,可根 据加 入底 物 的颜 色反 结 应 来判 定 是 否存在 免疫 反 应 ,并且 颜 色反应 的深度
与标 本 中相 应抗 原 ( 或抗 体 ) 的量 成 正 比例 ,因此 , 可依 据 底 物显 色 的程 度来 判 定试 验 结果 。E IA方 LS 法是 一 种敏 感及 具有 特异 性 的方 法 ,与 经典 的分 析
用于临床 医学、生物化 学、分析化 学、食 品安全监 测、环境 污染控制 、畜牧业等领域 。文章综述 了酶联 免疫吸附
试 验 在 畜牧 行 业 申 的应 用进 展 。
关键词 :E IA;畜牧业 ;检测 ;农药;疾病 LS
中图分类号:¥ 1 :¥ 5 .3 文献标 志码 :A 文章编号 :10 _ 0 4 2 1 )5 0 1 — 4 8 1 8 13 0 1 0 8 (0 2 0 - 0 4 0
测猪 肉、鸡肉、鸡蛋 、鱼 、牛奶 、肾中残留新霉素 的 E IA 。E IA在农 药 检测 中 的应 用 具 有 诱 人 LS I LS
的前 景 。 +
22 动物 疾病 的诊 断 .
动物 疾病 让养 殖 户蒙受 巨大 的经济 损失 ,特 别 是传 染病 ,只有 提前 诊断 动物 的疾 病 ,才 能让养 殖
刍动物血清的裂谷热病毒( V V 抗体 ,结果表明, R F) 敏感性和特异性与制造商推荐 的物种特异性阈值一 致 。P w sa 在 非 洲 用 基 于 重 组 核 衣 壳 的 E I a ek 等 L— s A来检 测 非洲水 牛抗裂谷 热 病毒 的 IG抗体 ,其研 g
出基 于单 克 隆抗 体 的直 接 竞 E IA(c LS 与 用 LS dE IA) 高效 液 相色 谱 仪 一 质谱 法 ( P C MSMS 来 检 测 蔬 HL— / )
酶联免疫吸附测定法ELISA在抗生素残留检测中的应用
加强国际合作与交流
加强与其他国家和地区的合作与交流,共同推进ELISA技术在抗生素 残留检测领域的发展和应用。
07 参考文献
参考文献
1 2
参考文献1
介绍了ELISA的基本原理和在抗生素残留检测中 的应用,强调了其高灵敏度和特异性。
抗生素残留的来源
畜牧业和农业中广泛使用抗生素,导致动物产品如肉类、蛋类和奶制品中存在 抗生素残留。
ELISA技术简介
01
酶联免疫吸附测定法(ELISA)
是一种基于抗原-抗体反应的检测方法,通过酶标记技术将免疫反应与
化学信号放大相结合,实现对目标物质的灵敏检测。
02
ELISA技术的优点
高灵敏度、特异性、操作简便、适合批量检测等。
03 ELISA在抗生素残留检测 中的应用
抗生素残留检测的重要性
保障食品安全
抗生素残留超标可能对人体健康造成危害, 如产生过敏反应、耐药性等,因此对抗生素 残留进行检测是保障食品安全的重要环节。
国际贸易标准
随着国际贸易的发展,各国对抗生素残留 的检测标准日益严格,符合国际标准的检 测方法对于出口农产品的企业至关重要。
酶联免疫吸附测定法(ELISA)在 抗生素残留检测中的应用
目录
• 引言 • ELISA技术原理 • ELISA在抗生素残留检测中的应用 • ELISA技术的实验流程 • 实验结果和数据分析 • 结论 • 参考文献
01 引言
抗生素残留问题
抗生素残留对人类健康的潜在威胁
长期摄入含有抗生素残留的食物可能增加人体内耐药菌株的形成,降低抗生素 在治疗疾病时的有效性。
03
ELISA技术的基本原理
ELISA法检测鸡胚中抗生素残留量的研究及其应用
J N i, IQ ,I ogw i e a. C agh nIstt o ioi l rdc ,C agh n 30 2 C i I G We HU i U H n— e, t 1 ( h ncu n i e fBo g a out h ncu 10 6 。 hn A L tu l c P s a)
Ab ta t TO d tr n ea ii n rsd e n hoa h ne l eiu si i i hc e mby o rd c sr c : eemiet mpcl eiu sa d c lrmp e io sd e n Hal wht c ik ne rofrpo u - h i l r n a e
摘
106 ) 302
要: E IA法测定氨苄青 霉素、 用 LS 氯霉素在流感疫苗生产用海兰 白鸡 鸡胚 中的残 留。实验通过 比较 空白组 0 d
龄全鸡胚 和给药组 O d龄全鸡胚中氨苄青霉素 、 氯霉素 的残 留量 , 明了饮水给药 的方法能够建立抗 生素残 留的动 说 物模 型。通过 比较 1d龄鸡胚尿囊液 、 0 卵黄 中氨苄青霉 素 、 霉素 的残留量 , 明尿囊液 中的残 留量明显 高于 卵 氯 说 黄 。通过绘制残 留曲线 , 可以看 出氨苄青霉素 、 氯霉素在海兰 白鸡体 内蓄积迅速 , 却消除缓慢 。通过 实验初步摸索 出了氨苄青霉素 和氯霉素在鸡胚 中的分布 、 代谢及残 留规律 , 获得了部分生产用鸡胚尿囊 液的抗生素残 留量数据 , 为进一 步控制流感疫 苗生 产用鸡胚质量提供技术保障。 关键词 :LS E IA法 ; 氨苄青霉素 ; 氯霉素 ; 鸡胚 尿囊液 ;
4 0
微 生 物 学 免 疫 学 进 展 2 1 第 3 第 2期 00年 8卷
畜产品中青霉素残留的ELISA法测定
( i l Nu r in a d F e a o aoyo n a r vn e Ku mig 6 0 0 . hn ) Anma tio n e d L b rtr fYu n nP o i . n n 5 2 1 C ia t c
Ke r s Pe ii i ELI A ; i l o u to y wo d : n c ln; l S Anma Pr d c in
12 . 方 法
法, 主要 有微生 物检 测法 、 理化 检测法 … 。但 这些 方法 都存在
畜产 品中青 霉素残 留的 E IA法测定 LS
李 青
( 云南 省 动 物 营养 与 饲 料 重 点 实 验 室 , 南 昆 明 6 0 0 ) 云 5 2 1 中 图分 类 号 :8 9 8 ¥ 5 .4 文献标识码 : A 文 章 编 号 :0 4 0 4 2 0 )9—0 0 —0 10 —7 3 (0 2 0 素 ( 霉 素 药 渣 ) 大 幅 度 人 青 能
29gN 2 O 、. a I . I . w e 0 0 2 . aHP 38 0gN C 、 2gKC、 5mIT en 2 , .0g 0 0
的提高畜禽 生长速度 。随后世界各 国尤其是我 国, 广泛 使用抗 生素添加剂 促进畜禽生 长, 且在实际应 用中几乎不分 人用和 而
兽用。尽管 国家有关部 门 制定 了相应 的法 律、 规 加 以限制 , 法
叠代化钠, 加蒸 馏水定容至 100mI 4℃保存。 0 , 底物溶 液:. . m lI p 5磷 酸盐 一柠檬酸 缓 冲液( a0 1 o H /, 含邻
苯 二 胺 0 4 m / I) 用 前 加 少 量 3 . g m 临 0%H2 ( . I mI 15 / ) b 称 T 0mg溶 于 1 二 甲基 亚 砜 ( Ms 4 ℃ 保 存 。 . MB6 OmI D 0)
兽药残留检测方法
兽药残留检测方法
兽药残留检测方法主要包括以下几种:
1. 高效液相色谱法(HPLC):通过对样品进行提取和分离,利用高效液相色谱仪进行检测。
该方法可以同时检测多种兽药残留,并且具有高灵敏度和高准确性。
2. 气相色谱法(GC):对样品进行蒸馏提取后,利用气相色谱仪进行分离和检测。
该方法适用于挥发性兽药残留的检测,具有高分辨率和快速分析的优点。
3. 液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS):将高效液相色谱与串联质谱联用,可对多种兽药残留进行高灵敏度、高选择性的定性和定量分析。
4. 酶联免疫吸附法(ELISA):利用免疫学技术,通过抗体与兽药残留结合来检测样品中的兽药残留。
该方法具有操作简单、快速、经济的特点,但灵敏度和选择性较低。
5. 生物传感技术:利用生物传感器对兽药残留进行检测,如基于表面等离子体共振(SPR)技术、电化学传感器等。
这些方法具有高灵敏度、高选择性和实时监测的特点。
总之,不同的兽药残留检测方法有着各自的特点和适用范围,可根据需求选择合适的方法进行检测。
畜产品中常用兽药残留危害及检测方法
畜产品中常用兽药残留危害及检测方法兽药残留对人体健康的危害有多个方面。
首先,兽药残留可能导致抗药性菌株的产生。
长期暴露于兽药残留的情况下,细菌、寄生虫等会逐渐形成抗药性,从而降低了抗生素的疗效。
其次,兽药残留可能导致人体免疫力下降。
人类消费含有兽药残留的畜产品后,兽药残留会进入人体,影响人体的免疫系统,使身体对其他疾病产生抵抗力下降。
此外,一些兽药残留还可能对人体的内分泌系统产生影响,导致激素失衡。
目前,针对兽药残留的检测方法主要包括生化方法、免疫学方法和分析化学方法。
生化方法是通过测定畜产品中特定兽药的生物活性来进行检测。
常用的方法包括抗生素菌落呈阴性检测法、抗生素抑菌法等。
这些方法通过将畜产品与感受器混合,观察感受器是否发生生理变化,从而判断兽药残留是否超标。
免疫学方法是通过检测畜产品中与兽药相关的抗体或免疫反应来进行检测。
常用的方法有ELISA(酶联免疫吸附测定法)、免疫层析法等。
这些方法通过检测样本中抗体和兽药之间的免疫反应,来判断兽药残留是否超标。
分析化学方法是通过分析畜产品中兽药的化学成分来进行检测。
常用的方法有气相色谱法、液相色谱法等。
这些方法通过将畜产品中的兽药提取出来,然后使用化学试剂进行分析,从而判断兽药残留是否超标。
综上所述,畜产品中常用兽药残留对人体健康构成潜在风险。
为了保证畜产品的质量安全,必须使用科学合理的方法进行兽药残留的检测。
目前生化方法、免疫学方法和分析化学方法是常用的检测方法。
这些方法在实际应用中,可以互相结合,提高检测的准确性和可靠性。
未来的研究还可以进一步改进和发展更加高效和灵敏的兽药残留检测方法,确保畜产品的质量安全。
酶联免疫吸附试验_ELISA_在畜产品药物残留检测中存在的问题及解决方法
食品安全问题已经成为全球关注的焦点问题之一。
近年来,兽药残留致使食物中毒的报道屡见报端,严重损害了人们的健康,而且造成了巨大的经济损失。
传统的检测方法主要采用高效液相色谱(HPLC )、气相色谱一质谱法(GC-M S )等分析法检测兽药残留,需要昂贵的仪器设备和专业人员,费时、费力、成本高,难以在基层推广。
酶联免疫吸附试验(ELISA )具有操作简便、灵敏度高、样品容量大、仪器化程度和分析成本低的优点,已成为目前畜产品药物残留检测中使用最普遍的方法之一,几乎所有重要的畜产品药残检测都已建立或试图建立ELISA ,如“瘦肉精”、莱克多巴胺、磺胺类、沙丁胺醇等。
尽管酶联免疫吸附试验具有操作简便的优点,但在实践中很容易出现各种各样的问题,影响因素较多,易出现假阴性、假阳性结果等缺点。
现将常出现问题的可能原因和解决方法以及影响因素作如下探讨。
一、酶联免疫吸附试验原理ELI SA 方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。
此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。
滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。
因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。
此种显色反应可通过ELISA 检测仪进行定量测定,这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来,使ELISA 方法成为一种既特异又敏感的检测方法。
二、常出现问题的可能原因及解决方法目前酶联免疫法检测用试剂盒种类繁多,有国外进口的,有国内自行研制生产的,如盐酸克仑特罗的检测用试剂盒就有德国拜发、美国IDS 、英国朗道、北京望尔、杭州迪恩等。
如何在众多的品牌中选择既能满足检测要求又价格低廉的试剂盒是一个问题。
在实际检测中可以根据最低检测限、回收率、交叉反应率、变异系数、标准曲线图谱及数据进行选择。
畜产品中农药克伦特罗残留实用检测方法ELISA的测定
10 100 50 0u 、 道 移 液 器 3 0u 、 国拜 发 C 8柱 、 0 、 0 、 0 L 多 0 L 德 l 离 以上 , 离 上 清 液 , 度 升 至 室 温 , 柱 , 3mL甲 醇 洗 涤 柱 分 温 上 用
心机 、 振荡器。
子, 流速 为 1滴 /、 2mLp .5 M 磷酸二氢钾 缓液洗 涤 s用 H3 0m 0
程 简单 , 品前 处 理 快 捷 , 同时 分 析 多 个样 品 , 析 时 间 短 、 工 作 液 、 标 记 物 工 作 液 、 色 剂 、 应 停 止 液 、 冲液 ( 国 样 可 分 成 酶 发 反 缓 德
。② 试 剂盒 B:6孔 酶联 板 、 9 克伦 本低 、 敏感 度 高 且 对 环 境 的污 染 少 等 优 点 , 在 实 际 应 用 过 程 拜 发克伦特罗检测试剂 盒 ) 但 中涉及样 品的处理 、 试剂准备 、 加样 、 温育 、 显色 、 结果判定等较 特 罗 系 列 标 准 溶 液 ( 度 为 0、0 . 30 0 9 00 27 00 浓 100、0 . 、0 . 、 0 . 、
多方 面 , 中任 何 一 个 步 骤 的 操 作 不 当 都 会 影 响 最 终 的测 定 结 810 g )抗体浓缩液 、 其 0 . / , 0u L 酶标记物工作液 、 底物液 A液 、 底物 果。 为此 , 者 于 20 年 7 进 行 了 E IA测 定 畜 产 品 中 克伦 液 B液 、 止液 、 笔 06 月 LS 终 浓缩 洗涤液 、 浓缩复溶 液( 北京望尔生 物技术
检测方法 。
() 器 2仪
1 n 加入 4mL5 0m 磷 酸二氢 钾缓 冲溶 p . 混 合在 5mi, 0 M H30,
美 国 BO R D 5 I — A 5 0型 酶 标 仪 、 道 移 液 器 2 、 4 单 0 ℃保 存 1 。在 1  ̄ 2h 0C~1℃条件下 离心 1 i, 0 mi 5 5m n 40 0r n /
应用ELISA对畜产品瘦肉精残留的快速筛选
我 国农业 部等 相关 部 门多次 发文 ,禁 止生产 和使 用 “ 肉精 ” 瘦 。但 仍 有 很 多瘦 肉精 中毒 事件 发 生 ,严 重威 胁 消费者 的健 康 。因此 检测 动物 产 品及饲 料 中的瘦 肉精具 有 重要 意义 。 测 定克 伦特 罗 的方 法有 高效 液 相色谱 一 质谱联 用法 ( P CMS 、气 相色谱 一 HL— ) 质谱联 用 法 ( CMS G— ) 和高效 液相 色谱 法 ( P C) H L ,这 些 都是 比较 传 统 的 办法 , 目前仍 作 为 确 认方 法 ,但 由于 检测 仪 器 费 用 昂贵 、步 骤繁 琐 以及耗 时较 长 ,现 已不适 用 于 畜 牧 兽 医部 门 的检 测 j 目前 常 用 的 是 竞 争 酶联 免 。 疫 法 ( LS ,运用 抗 原抗体 反应 的原 理 ,能快 速 地 对 “ 肉精 ” 作 出定 量分 析 及 快 速 筛选 ,一 般 E IA) 瘦 实验 只需 2~ ,而且 准确性 高 和重 复性 强 ,检测 费用相 对低 廉 一 3h 。
T eQuc ls n Meh d Cln uea e iu h ikAnyi o to e b tr l ddELI A S
ZUO a —e ’ ZHANG e g , CHU u q a Xio li Fn S io’ LI Ha —h n ’ U is e g
应用EI 对畜产品瘦肉精残留的 LA S 快速筛选
左 晓磊 ,张
( .石 家 庄 市 畜 牧 水 产 局 ,河 北 石 家 庄 1
峰 ,褚 素 巧 ,刘海 生
酶联免疫吸附反应的技术进展及应用
ELISA的基本原理是利用抗原-抗体反应的特异性,将特异性抗体或抗原固相 化在固体表面上,再与待测样本中的相应抗原或抗体发生特异性结合,加入酶标 记的二抗,最后通过底物显色反应,定量或定性分析待测样本中的抗原或抗体。
随着生物技术的不断发展,ELISA技术也在不断进步。在抗体方面,越来越 多的重组抗体和基因工程抗体被应用于ELISA中,这些抗体的制备过程更加简单, 纯度和特异性更高。在标记技术方面,酶标记物的选择更加多样化,如碱性磷酸 酶、β-半乳糖苷酶、辣根过氧化物酶等,以满足不同检测需求。同时,一些新 型的检测系统,如微孔板、磁性颗粒和纳米材料等被引入到ELISA中,使得检测 更加灵敏、快速和自动化。
6、洗涤:清洗,去除未结合的酶标记抗体或抗原。
7、显色:加入底物溶液,酶催化底物生成有色产物,根据颜色深浅判断抗 原或抗体的浓度。
8、终止反应:加入终止液,停止酶催化反应。
9、读数:在酶标仪上读取各孔的光密度值,根据标准曲线计算抗原或抗体 的浓度。
三、ELISA酶联免疫吸附试验原 理
ELISA酶联免疫吸附试验基于抗原抗体反应的特异性。抗原和抗体分别固定 在固相载体和酶标记物上,当两者相遇时,发生特异性结合。通过洗涤步骤去除 未结合的成分,仅留下结合在固相载体上的抗原-抗体复合物。然后加入酶标记 的抗体或抗原,进一步与复合物中的抗原或抗体结合。最后加入底物溶液,酶催 化底物生成有色产物,根据颜色深浅判断抗原或抗体的浓度。
酶联免疫吸附反应的技术进展及应 用
酶联免疫吸附反应(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一 种基于抗原-抗体反应的经典免疫分析方法。在过去的几十年里,ELISA技术取得 了显著的技术进展,使其在生物医学、环境保护、食品检测等领域中的应用越来 越广泛。本次演示将介绍ELISA的技术进展及其在不同领域中的应用情况,并通 过案例分析探讨其优缺点和发展趋势。
药残检测的原理及方法
药残检测的原理及方法药残检测的原理及方法一、引言近年来,食品安全问题备受关注,其中药残问题成为公众关注的焦点之一。
药残是指在兽药、农药、兽药、饲料和化妆品等中,超过一定限量的残留物。
药残的存在对人体健康产生潜在风险,药残检测成为保障食品安全的重要手段。
本文将深入探讨药残检测的原理及方法,并探讨其应用前景。
二、药残检测的原理药残检测的原理基于先进的分析技术和仪器设备,主要包括以下几个方面:1. 物理方法:通过利用光学、红外光谱、质谱和色谱等物理特性,对样品进行分析和检测。
红外光谱技术可以通过样品吸收、反射和散射红外光谱来判断样品中残余的药物成分。
2. 化学方法:利用特定药物的化学性质,如药物的分子结构和化学反应,对药残进行分析和鉴定。
使用高效液相色谱技术可以通过分离和定量测定样品中的药物残留量。
3. 生物学方法:利用生物学技术,如酶联免疫吸附试验(ELISA)和生物传感器等,对样品中的药残进行检测和测定。
这些方法可以通过特定的生物反应,如抗体与药物结合,来判断样品中的残留药物。
三、药残检测的方法药残检测的方法包括样品采集、样品前处理、分析测定和结果解释等过程。
1. 样品采集:样品采集是药残检测的第一步,关系到后续检测结果的准确性。
一般情况下,样品采集应该在合适的时间、地点和方式下进行,以确保采集到的样品具有代表性。
2. 样品前处理:样品前处理是为了提取样品中的目标药物,并去除干扰物质。
常见的样品前处理方法有溶剂萃取、固相萃取和超声萃取等。
这些方法可以有效提高样品中药物的浓度,并减少其他物质的干扰。
3. 分析测定:根据样品中残留药物的特性和浓度,选择合适的分析测定方法进行检测。
常用的分析测定方法包括高效液相色谱、气相色谱、核磁共振和质谱等。
这些方法具有高效、准确和灵敏度高的特点。
4. 结果解释:根据测定结果,进行数据处理和解读。
可以通过比对样品与标准物质的色谱图、质谱图和浓度,来判断样品中是否存在药残。
应用ELISA检测我国猪病的研究进展
E L I S A可测定 抗 原 ,也 可测定 抗 体 。 固相 的抗
否 有 免 疫 反 应 ,并 且 颜 色 变 化 的深 浅 与 试 验 中相 应抗体 ( 抗原 ) 的量 成 正相 关 ,因 此可 以依 据 底 物 显 色 的深 浅程 度来 判 定试 验结 果 。E L I S A是 一 种敏 感 度 极 高 且 特 异 极 强 的试 验 方 法 ,与传 统 分 析方 法 相 比 , 敏 感 度 更 高 、特 异 性 更 强 、 准 确 度 更
成酶 复 合 物 ,这 种 酶 复合 物 的免 疫 学 和酶 学 活 性
都没 有发生改变 ;酶复合物与对应 的抗体 ( 抗原) 结合后 ,可依据加 入底 物后 的颜 色变化来判定是
收稿 日期 :2 0 1 3 — 0 5 — 2 8
作 者简介 :方礼禄 ( 1 9 8 4 一 ) ,男 ,壮族 ,广西钦州人,硕 士,主要从事畜牧生产工作。
高达 9 6 . 2 % ,与 上 海 优 耐特 F MD V V P 1 E L I S A检 测
结果符合率为 8 7 . 2 7 % ” 。 2 . 1 _ 6 猪 日本 乙型脑 炎病毒 建立检测猪 日本乙型脑炎病毒 ( J E V ) 抗体的间
接E L I S A所 用 的包 被 抗 原 包 括 J E V、J E V囊膜 E重 组 蛋 白及 J E V非 结 构 重 组 蛋 白 N S l 。其 中 J E V 囊膜重组 E 蛋 白E L I S A与康柏德猪乙脑 E L I S A的符 合率为 8 2 %,J E V非结构重组 蛋白N S 1 E L I S A 与商
F A N G L i l u 。 , WA N G Z h a o j u n 。 , X U L i , S HE N J u n , Y U G u i p i n g , Y A N C a i h o n g , Y A N G G u a n g
elisa在食品检验中的应用
酶标抗原或抗体的质量直接影响到ELISA实验的 灵敏度和特异性,因此制备过程中需要严格控 制条件和纯化步骤,确保产品质量。
03
ELISA在食品检验中的应用
食品中农药残留检测
总结词
ELISA技术广泛应用于食品中农药残留的检测,通过抗体与抗原的特异性结合, 实现对农药残留的灵敏检测。
适用范围广
ELISA方法可以用于检测各种食品中 的有害物质,如蔬菜、水果、肉类、 乳制品等。
局限性
样品处理要求高
ELISA方法对样品处理的要求较高,需要去 除干扰物质,以免影响检测结果。
检测时间较长
ELISA方法的检测时间较长,需要一定的等 待时间才能获得检测结果。
成本较高
ELISA方法的成本较高,需要购买昂贵的试 剂和设备。
ELISA简介
定义
ELISA是酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)的简称,是一种基 于抗原-抗体反应的检测方法。
工作原理
将抗原或抗体与固相载体结合,使待测样本中的目标物质与固相载体上的抗原或抗体结合 ,再加入酶标记的抗体或抗原,最后通过底物显色反应,达到检测目标物质的目的。
03
未来可以通过改进ELISA方法,提高其特异性,减少假阳性或假
阴性的出现。
05
实际应用案例分析
案例一:ELISA在农药残留检测中的应用
总结词
ELISA在农药残留检测中具有高灵敏度和 特异性,能够快速准确地检测出食品中 农药残留量,保障食品安全。
VS
详细描述
ELISA技术利用抗原与抗体的特异性结合 ,通过酶标记物对信号的放大作用,实现 对食品中农药残留的定量或定性检测。该 方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好 等优点,可广泛应用于蔬菜、水果、粮食 等农产品中农药残留的检测。
elisa检测方法的原理和应用
elisa检测方法的原理和应用概述酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,简称ELISA)是一种广泛应用于生物医学研究和临床检测中的重要技术。
ELISA方法基于特异性的抗原和抗体相互作用,可以快速、灵敏地检测出目标物质的存在。
本文将介绍ELISA方法的原理和应用。
原理ELISA方法的原理是将目标物质(抗原或抗体)固定在特定的固相载体上,然后用特异性的酶标记抗体或抗原与目标物质发生特异性结合,最后通过酶的催化作用,使用合适的底物将酶活性转化为可测量的颜色、荧光或发光信号。
ELISA常见的几种类型包括直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和夹心ELISA。
直接ELISA直接ELISA方法是将目标物质与酶标记的抗体或抗原直接结合,经过洗涤后,使用适当的底物进行检测。
这种方法操作简单,但对于抗原含量较低的样本,灵敏度较低。
间接ELISA间接ELISA方法是在目标物质固定的固相载体上,首先加入特异性的未标记的抗体,然后再加入酶标记的抗体与未标记的抗体发生结合。
这种方法可以提高灵敏度,因为酶标记抗体一般比未标记的抗体多。
竞争ELISA竞争ELISA方法是利用标记的抗原与固定在载体上的抗原竞争与抗体结合。
这种方法适用于检测含有相同抗原的样品。
夹心ELISA夹心ELISA方法是在固相载体上固定抗体,在抗原添加后,再加入酶标记的抗体对抗原进行结合。
这种方法可以用于检测多种抗体或抗原。
应用ELISA方法在许多领域中被广泛应用,特别是在生物医学研究和临床诊断中。
生物医学研究ELISA方法可以用于检测和定量细胞因子、酶、抗体、肿瘤标记物以及其他生物分子的存在。
这种方法可以帮助研究者了解疾病机制、药物疗效评估、生物标志物的发现等。
临床诊断ELISA方法在临床诊断中也有广泛的应用,可以用于检测传染病、自身免疫性疾病、肿瘤标记物和药物浓度等。
ELISA方法可以提供快速、敏感、特异性的检测结果,有助于早期诊断和治疗的选择。
酶联免疫法测定畜产品及牛奶中磺胺类药物残留
5酶联免疫法测定畜产品及牛奶中磺胺类药物残留杨华生(贵阳市农产品质量安全监督检验测试中心550081)摘要:基于竞争性酶联反应原理,将磺胺类药物、酶偶联磺胺类药物、磺胺类药物抗体一同加入微孔竞争结合反应,除去未被结合的酶偶联磺胺类药物,通过酶与底物的显色程度间接对样品中磺胺类药物进行定量测定。
关键词:磺胺类药物;酶偶联;抗体;竞争结合;底物磺胺类药物为人工合成的抗菌药,具有抗菌谱较广、性质稳定、使用简便等优点,特别是抗菌增效剂—甲氧苄氨嘧啶(TMP)发现以后,与磺胺类联合应用可使其抗菌作用增强、治疗范围扩大,在畜牧业生产中广泛用于防治动物疾病的抗生素,特别是在处理急性泌尿系统感染中有其重要价值,但与此同时,也极容易形成此类兽药及其代谢物在养殖动物产品体内残留并最终被消费者食用,该药肝内的代谢产物─乙酰化磺胺的溶解度低,易在尿中析出结晶,引起肾毒性,可导致人体内正常菌群产生耐药性,引发中毒或过敏反应,为此磺胺类药物用量已被严格控制用于食料添加剂和治疗传染性肠炎、乳房炎和其他疾病[1],我国农业部第235号文件、美国FDA 和欧盟一致规定,在肌肉、肝脏、肾脏和牛奶中磺胺类药物的含量不能超过100ug/kg [2],而该药物比较便捷、实用的检测方法就是利用抗原抗体高度特异性结合的特性,使用酶联免疫法测定。
1实验配置及原理1.1主要仪器及设备酶标仪(450nm )、洗板机、离心机、匀质机、涡旋振荡器、恒温培养箱(0℃~50℃)、冰箱(4℃~8℃)、20~200uL 吸头及单道可调移液器、20~300uL 多通道可调移液器、感量0.01g 的天平。
1.2反应试剂磺胺类药物标准溶液浓度分别为0ug/L 、0.5ug/L 、1.5ug/L 、5.0ug/L 、15.0ug/L 、50.0ug/L ,磺胺类药物抗体、酶(辣根过氧化物)偶联的磺胺类药物、底物(四甲基联苯胺)、蒸馏水、包被有磺胺类药物抗体的捕获抗体的聚苯乙烯微孔版、、加标用浓度为1.0mg/L 的磺胺类药物、用于酶标板冲洗的工作洗液、反应终止液、样品提取液、2M 的NaCl 溶液、乙腈水溶液(84︰16)、乙酸乙酯,此外,还准备有畜产品空白样Y 作为加标回收质控QC 样品,本实验选取了猪肉组织用于加标回收作为质控样,在工作曲线动态范围内高、中、低3个浓度点进行加标回收实验,参与整个实验过程。
ELISA的原理及应用
ELISA的原理及应用一、ELISA的概述ELISA是一种常用的实验技术,用于检测和测量特定抗体或抗原的存在。
ELISA是酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)的缩写,它结合了免疫学和酶学的原理。
二、ELISA的原理ELISA的基本原理是利用抗原与抗体之间的特异性反应来检测目标物质的存在。
ELISA分为直接ELISA、间接ELISA、间接竞争ELISA、夹心ELISA四种类型。
1. 直接ELISA直接ELISA是通过在试验板上直接固定抗原,然后将标记有酶的抗体与目标抗原结合来检测特定抗原或抗体的存在。
2. 间接ELISA间接ELISA是在试验板上固定抗原,然后加入待测样品,样品中的抗原或抗体与固定的抗原结合。
接着加入标记有酶的第二抗体来识别该特定抗原或抗体的存在。
3. 间接竞争ELISA间接竞争ELISA是将已知浓度的抗原或抗体与样本一起加入试验板上预先固定的抗原。
随后加入酶标记的第二抗体,其与样本中的抗原或抗体竞争与固定抗原结合。
通过测量酶标记抗体的活性,可以推断样本中目标分子的浓度。
4. 夹心ELISA夹心ELISA是用于检测与固定抗原或抗体同时结合的另一个抗原或抗体。
夹心ELISA是通过在试验板上先固定第一抗体,然后加入待测样品,样品中的目标抗原与固定的抗体结合。
最后,加入标记有酶的第二抗体来检测形成的夹心复合物。
三、ELISA的应用ELISA在医学、农业、环境保护等领域有广泛的应用,以下列举了一些具体的应用场景:1. 医学应用•ELISA常用于检测特定病原体的抗体或抗原,如HIV、乙肝病毒等。
•ELISA用于检测某些疾病的生物标志物,如心肌梗死的心肌肌钙蛋白和肿瘤标志物。
2. 农业应用•ELISA可用于检测农作物中的有害农药残留,以确保食品的安全性。
•ELISA也可用于饲料和动物产品中抗生素残留的检测,以保证动物饲养的安全和质量。
3. 环境保护•ELISA可以用于监测水体和土壤中的污染物,如重金属、有机化合物等。
《应用EMR-Lipid检测乳和乳制品中兽药残留量》编制说明.pdf.pdf
《应用EMR-Lipid检测乳和乳制品中兽药残留量》编制说明一、工作简况1.任务来源2018年5月23日,《国务院办公厅关于推进奶业振兴保障乳品质量安全的意见》由国务院常务会议审议通过,意见对奶源地建设、乳品加工流通、乳品质量安全监管及消费者引导等做出了全面部署。
2019年,国家重点研发计划立项国家质量基础的共性技术研究与应用专项项目:《乳制品全产业链和消费行为NQI集成及应用示范》(项目编号:2019YFF0216700),项目自2019年12月开始实施,目的为解决我国乳业发展中存在的供需结构不平衡、产业竞争力不强、消费培育不足等问题。
2.起草单位、协作单位起草单位:南京市产品质量监督检验院。
协作单位:/3.主要起草人张露,徐美玲,顾慧丹,楼超群,王晓丽,申蓉,张立元,闻伯芹,叶沐阳,陆秀凤,刘晓萌,张晓娴。
二、制定(修订)标准的必要性和意义1.标准化对象的特征本标准应用一种新型固相萃取材料(EMR-Lipid增强型脂质去除产品)于乳品样品的前处理过程中,利用液相色谱-质谱/质谱快速、高效的定量分析多种兽药的残留量。
2.标准化对象的基本情况兽药广泛用于食品生产行业的动物源性食品中,以预防动物疾病或作为生长促进剂。
这些药物将在动物组织中发生富集,使用不当更是会导致药物残留在食用组织中不断积累,对人类健康构成威胁。
随着人们对食品安全的日益关注,几乎每个国家都出台了限制食品动物产品中所使用药物的法规,乳品、肌肉、肝脏和鸡蛋等动物源食品通常具有复杂的化学成分,因此,采用包括常规萃取和高效净化的高效样品前处理方法至关重要。
已有的样品前处理方法包括传统的溶剂萃取、固相萃取(SPE)或多项技术的组合。
这些方法通常费力费时,仅适用于有限的化合物类别,并且需要额外进行方法开发。
多类别、多残留方法在监管性监测项目中越来越受青睐,因为它们可以扩大分析范围并提高实验室效率。
过去几年来接受监测的兽药数量越来越多,如今已报道了100多种兽药。
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论ELISA检测技术在畜产品抗生素类药物残留检测中的应用
作者:高云峰
来源:《农业与技术》2016年第02期
摘要:抗生素类药物能够促进畜禽的生长,抗生素类药物在畜禽产品当中的残留给人体健康造成危害。
国家相关部门制定了相应的法律、法规,以规范抗生素药物的使用,但是仍然不能保证畜产品中不存在抗生素类药物残留,因而采取先进的检测技术,对畜产品进行严格的检测。
文章就畜产品抗生素类药物残留检测问题展开讨论,结合ELISA检测技术的应用,为畜产品安全提供保障。
关键词:ELISA检测技术;畜产品;药物残留检测
中图分类号:S859.84 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20160133111
酶联免疫吸附法简称ELISA检测技术,在畜产品抗生素类药物残留检测得以有效的应用。
畜产品抗生素类药物残留检测,关系到食品健康安全,需要高度重视起来。
ELISA检测技术的仪器化程度高,对抗生素的灵敏度高,操作简单便捷,是抗生素类药物检测的有效办法,其应用领域也在不断的拓展,具有良好的发展前景。
1 ELISA检测技术的基本原理
ELISA检测技术的基本原理是酶分子与抗体的共价结合,两者的特性都不会因此而受到影响。
ELISA检测技术的敏感性高,故可应用检测的范围广泛,并具有良好的抗干扰能力,操作简单,能够高效检测大量的样本,安全无污染。
即使检测的样本浓度较低,ELISA检测技术同样能够精确的检测出来。
在应用在畜产品抗生素类药品残留检测之前,ELISA检测技术在临床医学、生物化学、分析化学等领域已经是十分成熟的检测技术,在畜产品安全检测当中还处于初始阶段,还有待于改进和提升,以进一步的推广和应用[1]。
2 ELISA检测技术的应用
畜产品抗生素类药物残留的主要原因是由于养殖过程中,为了防治疾病而人为注射的抗生素类药物,但是在畜禽的生长过程中,这些抗生素类药物仍然会残留在畜禽的体内,而抗生素类药物在畜禽产品当中的残留给人体健康造成危害。
制成的畜产品同样也会受到抗生素类药物残留的影响,人一旦摄食之后,会对人体造成伤害。
因此,利用ELISA检测技术对畜产品抗生素类药物残留进行检测是十分必要的。
青霉素、四环素、氯霉素是当前畜用抗生素药品的主要类型,利用ELISA检测技术分别进行检测。
2.1 青霉素
青霉素是畜用抗生素药品中最主要的类型,同时其残留的药性较强,人摄食了残留有青霉素的畜产品,给身体带来负面影响是巨大的,尤其会给人体疾病的治疗增加困难,抗生素对人体疾病治疗将会失去效果。
由于青霉素会抑制乳酸菌的生长,因此,ELISA检测的重点应该落在乳产品的检测上,以有效检测青霉素类药品的残留。
在直接竞争ELISA和间接竞争ELISA 法的基础上,采取ELISA检测技术对氨苄青霉素进行检测,为了确保畜产品的安全,其检测限为要比最低检测限的0.4ng/mL更低,进而满足畜产品当中各青霉素类药物残留检测标准[2]。
2.2 四环素
作为小分子半抗原物质,四环素产生免疫原性需要与大分子物质有效结合,采用BSA-OTC以及RSA-OTC人工抗原。
制备BSA-OTC血清,加上RSA-OTC包被抗原,利用ELISA 检测技术进行鉴定,并结合免疫扩散法。
通过对人工抗原对四环素抗原抗体反应进行分析,进而对四环素类药物残留进行精确的检测。
1.28×105的抗血清效价,是通过ELISA检测的四环素类药物残留的标准。
ELISA检测技术对四环素残留检验,适用于猪肉、鸡肉以及牛奶的检验测量当中,根据其回收率、批内变异系数以及批间变异系数,有效测定四环素类药物残留量,满足相关技术指标。
2.3 氯霉素
氯霉素对畜禽疾病控制有着良好的作用,但是其残留在畜产品当中的氯霉素药品则会给人体健康造成危害,根据国家对畜产品中氯霉素残留的限量标准,利用ELISA检测技术进行检测,以根据包被抗原和竞争半抗原的抗 CAP-McAb 反应,确定抗原质量浓度、抗CAP-McAb 稀释倍数、酶标二抗稀释倍数、最适检测范围、最小检测量以及批内变异系数以及批间变异系数,利用ELISA检测技术进行计算,以获得精确的氯霉素药品残留量,以保证畜产品的安全[3]。
3 结论
ELISA检测技术作为畜产品抗生素类药物残留检测的有效办法,以确保畜产品中抗生素类药物残留量符合国家相关标准。
凭借ELISA检测技术的优势,对畜产品进行严格的检测,进一步改进残留分析方法和相关技术,改进和提升畜产品安全检测技术,充分发挥ELISA检测技术的优势,为畜产品安全提供保障,在更多的领域里得到推广和应用。
参考文献
[1] 刘佳佳,佘永新,刘洪斌,金茂俊.聚醚类抗生素残留检测技术及其研究进展[J].食品工业科技,2011(08):440-444,448.
[2] 刘博,曹小妹,宋合兴,尹航,高文惠.畜产品中四环素类抗生素残留的检测技术[J].饲料博览,2012(12):33-38.
[3] 范国英,王顺岗,王自良,张改平,邓润广,杨艳艳.链霉素残留检测ELISA试剂盒的研制及应用[J].畜牧兽医学报,2008(03):380-384.。