乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)
乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒一站式解决方案
乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性检测试剂盒一站式解决方案乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LD 或LDH ，EC1.1.1.27 ）是一类NAD依赖性激酶，有LDHA、LDHB、LDHC三种亚基，可构成6种四聚体同工酶。
动物乳酸脱氢酶是由4个亚单位组成的四聚体，常见的A、B 两种亚基构成的5种LDH同工酶（LDH1-5），C亚基则仅组成一种LDH同工酶即LDH-C4。
乳酸脱氢酶为含锌离子的金属蛋白，分子量为135-140kD，是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一，可催化丙酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应，也可催化相关的α-酮酸。
LDH广泛存在于人体组织中，以肾脏含量最高，其次是心肌和骨肌。
红细胞内LDH约为正常血清的100倍。
一、乳酸脱氢酶分类1.根据结合辅酶的不同，微生物体一般包含两种乳酸脱氢酶，NAD-依赖型乳酸脱氢酶（NAD-dependent lactate dehydrogenases，nLDHs）和NAD-非依赖型乳酸脱氢酶（NAD-independent lactate dehydrogenases，iLDHs）两大类。
2.按其催化底物的构型不同，NAD-依赖型乳酸脱氢酶可以分为NAD依赖型-L-乳酸脱氢酶（L-NAD-依赖型乳酸脱氢酶）和NAD依赖型-D-乳酸脱氢酶（D-NAD-依赖型乳酸脱氢酶）两大类，分别催化丙酮酸合成L-乳酸和D-乳酸。
3.根据天然电子受体的不同，可以将NAD-非依赖型乳酸脱氢酶分为三类。
第一类为膜蛋白，利用膜醌类作为外部的电子受体；第二类直接利用O2作为电子受体，根据氧化终产物的不同，又将其细分为乳酸氧化酶（Lactate oxidase，LOX）和乳酸单氧酶（Lactate monooxygenases，LMO），其中前者产生丙酮酸和H2O2，而后者产生乙酸、CO2和H2O；第三类是硫胺b2（flavocytochrome b2），存在于真菌中，它天然的电子受体为细胞色素c。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求lepu
乳酸脱氢酶测定试剂盒（乳酸底物法）适用范围：用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶的活性。
分说明1.1 规格试剂1:3×60 mL，试剂2:1×45 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×20 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×12 mL；试剂1:2×60 mL，试剂2:2×15 mL；试剂1:1×40 mL，试剂2:1×10 mL；试剂1:1×4L，试剂2:1×1L；试剂1:1×16L，试剂2:1×4L。
1.2主要组成成分试剂1主要组分：试剂2主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.50。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率(△A/min)应不大于0.002。
2.4 分析灵敏度测试300U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0085。
2.5 准确度用参考物质（GBW09177）对试剂（盒）进行测试，相对偏差应不超过±10%。
2.6 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得结果的重复性（变异系数，CV）应不大于5%。
2.7 线性2.7.1 在[25,750]U/L区间内，线性相关系数r应不小于0.990；2.7.2 [25,100）U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±10U/L；[101,750]U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8 批间差试剂（盒）批间相对极差应不大于10％。
LDH检测
乳酸脱氢酶释放法lactate dehydrogenase release assay碧云天的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。
本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。
同时，基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。
细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。
通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH 的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。
LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。
LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞，随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。
本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱氢酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT(2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。
吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。
该酶联反应原理的示意图如下：可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。
一个试剂盒可进行100次检测。
包装清单：产品编号产品名称包装C0016-1 LDH释放试剂 1.5mlC0016-2 乳酸溶液2mlC0016-3 酶溶液1ml×2C0016-4 INT溶液(10X) 0.2mlC0016-5 INT稀释液2ml—说明书1份保存条件：-20℃保存，一年有效。
乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求derui
乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂盒
（乳酸底物法）
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下，吸光度≤0.50。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下，吸光度变化率≤0.002。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时，吸光度变化率≥0.004。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5%。
2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤10.0%。
2.6准确度
相对偏差（Bias%）应在参考物质靶值±10%以内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
乳酸(LAC)测定试剂盒(乳酸氧化酶法)产品技术要求百奥泰康
乳酸（LAC）测定试剂盒（乳酸氧化酶法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血浆中乳酸的浓度。
1.1 产品规格1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）、校准品（选配）和质控品（选配）组成。
1.2.1试剂组成试剂1: Tris缓冲液≥50.0mmol/L 乳酸氧化酶（LOX）≥0.2KU/L过氧化物酶（POD）≥0.5KU/L4-氨基安替比林≥0.4mmol/LTOPS0.5mmol/ L1.2.2 校准品组成乳酸目标浓度：2.50mmol/L该校准品为水基质液体校准品1.2.3质控品组成水平1：乳酸目标浓度： 1.50mmol/L水平2：乳酸目标浓度： 5.00mmol/L该质控品为水基质液体质控品2.1 外观a) R1应为无色至淡红色溶液，无混浊，无未溶解物。
b) 校准品应为无色至淡黄色溶液，无混浊，无未溶解物。
c) 质控品应为无色至淡黄色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2 净含量液体组分不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度应不大于0.500。
2.4 分析灵敏度LAC试剂盒测定浓度5.00mmol/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.200。
2.5 准确度回收试验：测定回收率，应在85%-115%之间。
2.6 精密度2.6.1重复性变异系数应不大于5%。
2.6.2批间差批间相对极差（R）应不大于10%。
2.7 线性在（0,13.30] mmol/L范围内，LAC试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900；在（0,2.00]范围内绝对偏差应不超过0.30mmol/L，在(2.00,13.30]范围内相对偏差应不超过±15%。
2.8 质控品赋值有效性测定值在质控靶值范围内。
2.9校准品溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供乳酸校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。
乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒说明书
乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒说明书（乳酸→丙酮酸连续监测法）【产品名称】中文名称：乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒（乳酸→丙酮酸连续监测法）英文名称：LACTATE DEHYDROGENASE REAGENT KIT（L→P method）【包装规格】50ml/盒（R-1：40ml×1，R-2：10ml×1），240ml/盒（R-1：64ml×3，R-2：48ml×1），250ml/盒（R-1：40ml×5，R-2：10ml×5），375ml/盒（R-1：100ml×3，R-2：75ml×1），2500ml/盒（R-1：500ml×4，R-2：500ml×1）。
【预期用途】本试剂盒用以测定人血清乳酸脱氢酶(LDH)的活力。
【检验原理】乳酸脱氢酶在催化乳酸生成丙酮酸的同时将NAD+还原成NADH。
通过测定NADH在340nm处吸光度增加的速度可求得乳酸脱氢酶的活力。
LDHL-乳酸+ NAD+─────→丙酮酸+ NADH + H+【主要组成成份】试剂成份含量R-1 L-乳酸锂76mmol/LR-2 NAD ≥31mmol/l *不同批号试剂盒中的各组份，经检验符合产品性能指标的，可以互换。
【储存条件及有效期】本试剂盒在2-8℃下避光保存可稳定一年；试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。
【适用仪器】本试剂适用于日立7020型、日立7060型、日立7080型、日立7150型、日立7170型、日立7180型、日立7600（D）型、日立7600（P）型自动分析仪以及奥林巴斯AU600、AU2700、东芝-雅培、BECKMAN CX系列、BECKMAN LX-20型等自动分析仪。
本试剂在日立7020自动分析仪上已通过第三方验证，并备有以上各种自动分析仪的参数可供参考。
【样本要求】空腹血清，保存于室温可稳定3小时，保存于0℃以下可稳定1周。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求haifeng
乳酸脱氢酶测定试剂盒（乳酸底物法）
适用范围：本产品适用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。
1.1 产品规格
1.2 主要组成成分
2.1 外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无破损；
2.1.2试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；
2.1.3试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2 净含量
净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白
2.3.1空白吸光度
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下,空白吸光度应小于0.5。
2.3.2空白吸光度变化率
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下，空白吸光度变化率不大于0.002/min。
2.4 线性范围
(25,1000)U/L范围内，相关系数≥0.990；
(25,100]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±10U/L；
(100,1000)U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度
在产品说明书规定参数设定条件下，换算为测定浓度为300U/L的样本, 吸光度变化率△A/min应不小于0.015。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤5.0%。
2.6.2 批间差
相对极差R≤10.0%。
2.7 准确度
测定参考物质GBW(E)090593，测定结果应不超过标示值的±10%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃~8℃储存，可稳定12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测，检测结果应满足2.4和2.7的规定。
LAC乳酸测定试剂盒(乳酸氧化酶法)产品书说明书
乳酸测定试剂盒（乳酸氧化酶法）说明书【产品名称】通用名称：乳酸测定试剂盒（乳酸氧化酶法）英文名称：lactic acid Assay Kit（LAC）【包装规格】R1：1⨯40ml、R2：1⨯10ml；R1：2⨯40ml、R2：2⨯10ml；R1：2⨯60ml、R2：2⨯15ml；校准品（选配）：1⨯2ml（1个水平）。
【预期用途】用于体外定量测定人血浆中乳酸的含量。
临床上主要用于代谢性酸中毒的辅助诊断。
【检验原理】乳酸在乳酸氧化酶（lactate oxidase）的催化下，生成丙酮酸和过氧化氢，过氧化氢、4—氨基安替比林、4—氯酚反应生成紫红色化合物，在546nm处有最大吸收峰，其吸光强度与样本中乳酸含量成正比。
乳酸氧化酶乳酸＋O2—————〉丙酮酸＋H2O2过氧化物酶H2O2＋4—氯酚＋4—氨基安替比林—————〉紫色产物＋2H2O【主要组成成分】由试剂R1、R2和校准品组成。
试剂R1:4-氯酚2.1mmol/L、过氧化物酶2KU/L；试剂R2：4—氨基安替比林3.5mmol/L 、乳酸酶3KU/L；校准品:含乳酸水溶液。
校准品可溯源至Randox 参考品CAL2351，注：浓度见每批瓶标示。
不同批号试剂盒中各组分不可互换。
【储存条件及有效期】试剂和校准品在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期，有效期365天。
试剂和校准品开瓶后2℃～8℃可稳定30天。
备注：生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。
【适用仪器】日立7180、奥林巴斯AU680、贝克曼LX-20/DXC800、迈瑞BS-380、朕江T900全自动生化分析仪。
【样本要求】1、新鲜空腹血浆。
血液从静脉处收集，存于冰浴，血浆在30分钟内离心，并在1h内上机测定，延迟离心会使乳酸值升高。
离心后2℃～8℃可保存3小时。
2、为保证样本各组分稳定，新鲜采集的血浆需用抗凝剂EDTA氟化钠处理。
【检验方法】（1）双试剂无需配制，直接使用。
LDH文档,乳酸脱氢酶测定试剂盒(LDH)检测标准操作规程
1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒（IFCC法）测定方法2、适用范围：适用于人血清或血浆乳酸脱氢酶(LDH)的测定。
3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃～8℃有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定30天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理LDH 催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，NADH 的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活性成正比。
LDH乳酸+ NAD+ + H2O 丙酮酸+ NADH + H+4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆样本，采集后及时测定，应避免溶血和污染。
4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围115～220 U/L （注：各实验室应有自己的参考范围。
）4.5 方法评价线性范围：4～1000U/L内。
当样本测定值超过上限时，应将样本用生理盐水稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。
精密度：批内变异系数：≤ 3.0%；批间变异系数：≤5.0%。
分析灵敏度：本试剂盒的检测低限不高于4 U/L。
一种高灵敏的乳酸测定方法及乳酸检测试剂盒[发明专利]
![一种高灵敏的乳酸测定方法及乳酸检测试剂盒[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/4068a7fca0c7aa00b52acfc789eb172ded63991a.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810299062.5(22)申请日 2018.04.04(71)申请人 浙江力耐得传动科技有限公司地址 312300 浙江省绍兴市上虞区百官街道城东工业区(72)发明人 李丰盛 倪建芬 黄丽珍 (51)Int.Cl.C12Q 1/28(2006.01)C12Q 1/26(2006.01)(54)发明名称一种高灵敏的乳酸测定方法及乳酸检测试剂盒(57)摘要本发明涉及一种高灵敏度测定乳酸的方法，同时本发明还涉及乳酸检测试剂盒，属于医学检验、乳酸菌发酵食品测定技术领域。
乳酸检测试剂是用于高原反应、运动员训练、重症糖尿病，以及其它原因引起的机体酸中毒时的重要检测指标，也是乳酸发酵食品检测的一项指标。
本方法是用原乳酸氧化酶法，另外再引入丙酮酸氧化酶，使一分子的乳酸经过乳酸氧化酶和丙酮酸氧化酶反应，能生成两分子的过氧化氢，再经Trinder反应生成红色，在波长500～600nm下检测吸光度，计算出乳酸的含量。
该方法灵敏度高，重复性好，线性宽，稳定性好，很实用于常规实验室应用。
权利要求书2页 说明书8页 附图1页CN 110343740 A 2019.10.18C N 110343740A1.一种测定乳酸的方法，步骤如下：1).将样品与主要由乳酸氧化酶、丙酮酸氧化酶、磷酸盐、过氧化物酶、4-氨基安替比林、色原组成的试剂混合，使之发生如下反应：2).检测最终反应物在主波长500～600nm吸光度，测算出乳酸的含量。
2.根据权利要求1所述测定乳酸的方法，其特征在于：被测样品与试剂的比例控制在1/ 80至1/120。
3.一种乳酸检测试剂盒，其特征在于：包括试剂一和试剂二；试剂一：试剂二：所述试剂一与试剂二的比为1/1到4/1。
4.根据权利要求3所述乳酸检测试剂盒，其特征在于：所述缓冲液为醋酸盐、甘氨酸盐、磷酸盐、三羟甲基氨基甲烷、2-吗啉乙磺酸、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、4-羟乙基哌嗪丙磺酸中的一种或多种。
乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒说明书 微量法
乳酸脱氢酶（LDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0685规格：100T/48S产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体7mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，-20℃保存，用时加入1.3mL双蒸水充分溶解备用，配好后可分装成小管-20℃保存，可保存两周，禁止反复冻融；试剂三：液体7mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体25mL×1瓶，4℃保存；丙酮酸钠标准液：液体1mL×1支，4℃保存，2μmol/ml。
产品简介：LDH（EC 1.1.1.27）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着NAD+/NADH之间互变。
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：1.细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2.血清（浆）样品：直接检测。
3.丙酮酸钠标准液：取100μL标准液，倍比稀释至1、0.5、0.25、0.125、0μmol/mL，用2、1、0.5、0.25、0.125、0μmol/mL做标准曲线。
乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明
乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明乳酸脱氢酶（LDH）法操作说明操作简介：乳酸脱氢酶（LDH）法是一种常用的生物化学分析方法。
本文将详细介绍使用乳酸脱氢酶法进行实验操作的步骤。
材料准备：1. 乳酸脱氢酶试剂盒2. 样品溶液3. 乳酸标准品4. 实验用试管和显微管操作步骤：1. 样品制备- 将待测样品装入实验用试管中。
每个样品应分别装入不同的试管，以避免交叉污染。
- 若样品过浓稀，需要进行适当的稀释，确保样品浓度在测试范围内。
2. 标准曲线制备- 准备不同浓度的乳酸标准品溶液，浓度范围可根据实验要求而定。
- 将不同浓度的标准品溶液分别装入实验用试管中。
3. 试剂添加- 分别向样品管和标准品管中加入相同体积的乳酸脱氢酶试剂，充分混匀。
4. 反应温育- 将所有试管置于恒温水浴中，温度设定为适合乳酸脱氢酶反应的温度（一般为37°C）。
- 在设定的反应温度下，将试管保持在水浴中反应一段时间（时间根据实验要求而定）。
5. 反应终止- 在反应时间结束后，以适当的方法终止反应。
常见的终止方式是添加酸性试剂或采用其他合适的方法。
6. 测定乳酸脱氢酶活性- 使用光度计、分光光度计或其他合适的仪器，测定样品和标准品反应后产生的光吸收值。
吸收值与乳酸脱氢酶活性成正比。
- 通过标准曲线，将样品的吸收值转化为对应的乳酸脱氢酶活性。
注意事项：1. 本实验操作需要严格按照实验室安全操作规范进行，避免任何可能导致个人受伤或污染的行为。
2. 实验过程中的试剂、标样和废液等应按照实验室规定的方法处理，不得随意丢弃。
3. 在操作过程中，保持实验器材和试剂的洁净，尽量避免外界因素对实验结果的影响。
4. 操作时需注意避免交叉污染，尤其是样品的装管和试剂的配比过程。
5. 样品和标准品的选择要合适，浓度范围应覆盖实验要求。
6. 温育过程中，确保试管能均匀受热，并避免发生温度不稳定的情况。
总结：乳酸脱氢酶（LDH）法是一种可靠的生物化学分析方法，适用于乳酸脱氢酶活性的测定。
乳酸试剂盒说明书
乳酸试剂盒说明书乳酸试剂盒是一种常见的实验室试剂，用于测定液体或样品中乳酸的浓度。
以下是乳酸试剂盒的详细说明书，以帮助用户正确使用和理解这种试剂盒的原理和操作步骤。
1. 产品简介：乳酸试剂盒是一种用于测定乳酸浓度的化学试剂盒。
它基于乳酸与酶的催化作用，通过测量乳酸与辅酶之间的光学吸收来确定样品中乳酸的浓度。
2. 试剂成分：乳酸试剂盒包含以下主要试剂成分：- 乳酸酶：催化乳酸与辅酶之间的反应。
- 辅酶：与乳酸酶反应并产生光学吸收的物质。
- 缓冲液：维持反应体系的pH值稳定。
- 稳定剂：保持试剂盒的稳定性。
3. 原理：乳酸试剂盒的原理是基于乳酸酶的催化作用。
乳酸与乳酸酶反应生成丙酮酸和辅酶，辅酶的产生会引起光学吸收的变化。
通过测量辅酶光学吸收的变化，可以确定样品中乳酸的浓度。
4. 操作步骤：以下是使用乳酸试剂盒进行乳酸浓度测定的基本步骤：- 步骤1：准备样品。
将待测液体或样品按照试剂盒说明稀释至合适的浓度范围。
- 步骤2：加入试剂。
向样品中加入适量的乳酸试剂盒试剂，充分混合。
- 步骤3：反应。
将混合液置于适当的温度下静置一段时间，使乳酸与试剂发生反应。
- 步骤4：测量光学吸收。
使用光度计或分光光度计，在适当的波长下测量混合液的光学吸收值。
- 步骤5：计算浓度。
根据乳酸试剂盒的标定曲线，将测得的光学吸收值转换为乳酸的浓度。
5. 注意事项：- 在进行实验前，确保试剂盒的使用期限未过期。
- 按照说明书的要求正确稀释样品，以避免超出试剂的测量范围。
- 在实验过程中，保持试剂和样品的温度稳定。
- 根据实验需要，调整光度计的波长以获得最佳测量结果。
- 根据试剂盒的要求，进行适当的质量控制实验以确保测量结果的准确性。
以上是乳酸试剂盒的详细说明书，通过正确理解和操作，用户可以准确测定样品中乳酸的浓度，从而在实验和研究中得到可靠的结果。
乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒
Focusonyourresearch Serviceforlifescience乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）比色法测试盒货号：Ｅ－ＢＣ－Ｋ０４６－Ｍ方仪器：酶标仪（４４０－４６０ｎｍ）规格：９６Ｔ（４０ｓFocusonyourresearchServiceforlifescience基本信息用途本试剂盒合用于检测血清、血浆、胸水、组织、细胞等样本中LDH活力。
检测范围及敏捷度检测范围：6-1000U/L敏捷度：6U/L背景介绍乳酸脱氢酶（EC，LDH）是一种氧化复原酶，它催化丙酮酸和乳酸的互相转变，同时将NADH氧化成NAD+[1]。
LDH是一种四聚体分子，由两个亚基构成，分别为H亚基和M亚基[2]。
在组织损害或红细胞溶血后，细胞将LDH开释到血液中。
细胞外的LDH活性用于检测细胞损害或细胞死亡[3]。
检测原理以辅酶I为递氢体，LDH催化乳酸产生丙酮酸，丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，后者在碱性溶液中呈棕红色，颜色的深浅与丙酮酸的浓度呈正比，经过测定OD值，可计算LDH的活力。
本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，介绍使用 BCA法（货号：E-BC-K318-M）。
乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒供给试剂和物件编号名称规格(size)保留方式（96T）(Storage)试剂一基质液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent1)(SubstrateBuffer)试剂二辅酶I粉剂×1支2-8℃保留6个月(Reagent2)(CoenzymeI)试剂三显色剂5mL×1瓶2-8℃避光保留6(Reagent3)(ChromogenicAgent)个月试剂四碱溶液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent4)(AlkaliReagent)试剂五2μmol/mL丙酮酸标准品1mL×1支2-8℃保留6个月(Reagent5)(2μmol/mLPyruvicAcidStandard)96孔酶标板1板96孔覆膜2张样本地点标志表1张注：试剂严格按上表中的保留条件保留，不一样试剂盒中的试剂不可以混用。
唾液酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求九强
唾液酸测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中的唾液酸的含量。
1.1 包装规格见表1。
表1 包装规格1.2 主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分注：不同批号的校准品、质控品赋值有差异，具体赋值详见靶值单。
2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为无色到淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为无色到淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≥0.7000。
2.4 准确度与已上市产品进行比对试验：在[10.0，200.0] mg/dL区间内，相关系数r ≥0.975，偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为60mg/dL时，其吸光度变化率在0.0100～0.1000之间。
2.6 线性区间在[10.0，200.0] mg/dL区间内，线性相关系数r≥0.990，测定的线性偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低两个不同浓度的同一血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8 稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。
2.9校准品溯源性按照《GB/T 21415-2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供所用产品校准的来源、赋值过程以及测量不确定度,试剂盒校准品溯源至浙江东瓯诊断产品有限公司的唾液酸测定试剂盒。
乳酸脱氢酶测定方法操作规程
乳酸脱氢酶（LDH）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂盒（IFCC 法）使用说明书【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清或血浆中乳酸脱氢酶的活力。
【检验原理】LDH催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH。
NADH的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活性成正比。
乳酸+ 2O LDH丙酮酸+NADH+H+【主要组成成份】R1：Good’s缓冲液50 mmol/LL-乳酸 5.0 mmol/LR2：NAD+7.0 mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2~8℃保存有效期为18个月。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃~8℃可稳定30天。
试剂不可冰冻。
【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。
若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。
建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。
【样本要求】新鲜血清或血浆，采集后及时测定，应避免溶血和污染。
【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向上升反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。
校准校准品类型S1：生理盐水S2：迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求（包括但不限于以下情况）更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。
质控品测定值应该在规定的范围内。
若超出规定范围，有必要采取相应的措施或联系生产厂家。
【参考范围】男性：135~225U/L 女性：135~214U/L（注：各实验室应有自己的参考范围。
乳酸脱氢酶法操作说明
乳酸脱氢酶法操作说明装备与准备：1.安全镜、手套和实验室衣物。
2.LDH酶标仪和试剂盒。
3. 乳酸标准品（浓度待测，如1, 2, 4,和8mmol/L）。
4.甲酸钠和碳酸氢钠缓冲液（pH10）。
5.NADH。
6.甲酸钠酶混合物。
操作步骤：1.将LDH试剂盒中的所有试剂室温恢复到室温（20-25°C）。
2.使用甲酸钠和碳酸氢钠缓冲液，配制pH为10的缓冲液。
3.将试剂盒中的稀释液瓶放在LDH酶标仪中的样品槽中预热。
4. 在一个试管中加入10µl的标准品（1，2，4或8mmol/L），然后加入200µl的缓冲液和40µl的NADH。
5.加入10µl的甲酸钠酶混合物。
6.快速旋转混合试管中的液体。
7.立即将试管放在LDH酶标仪中的样品槽中，然后记录开始的时间。
8.观察反应液的吸光度变化。
该试剂盒中的酶会催化LDH的反应，并使NADH氧化为NAD。
NADH氧化产生的吸光度变化可以与待测标品中的乳酸浓度正相关。
9. 在约1至2分钟内，观察吸光度的稳定，并记录最大吸光度（Amax）的值。
10.用同样的步骤重复测量三个标准品。
11. 使用Amax值的三个测量结果，制作标准曲线。
将Amax值作为y 轴，标准品浓度（mmol/L）作为x轴绘制图表。
12.分析待测样本。
将待测样本用缓冲液稀释1:2或1:5的比例，在酶标板上重复三次。
13.将吸光度读数记录下来，并使用标准曲线，将吸光度转换为乳酸浓度。
14.使用样本的三个测量结果计算样本的均值。
注意事项：1.在操作之前，确保所有试剂和设备达到室温。
如果试剂需要特殊条件，按照说明书操作。
2.注意使用安全措施，如戴手套、安全镜和实验室衣物，以防止化学物质接触皮肤或眼睛。
3.按照说明书中的比例准确配制试剂和标准品。
4.必须在开始试验后立即将试管放入酶标仪中，以确保吸光度测量的准确性。
5.注意观察试剂盒中的反应液的颜色变化，并在愈合后的最大吸光度值时记录时间。
C0016 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒说明书
乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒产品简介：碧云天的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。
本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。
同时，基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。
细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。
通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。
LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。
LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr 标记细胞，随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。
本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱氢酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT (2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。
吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。
该酶联反应原理的示意图如下：可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。
一个试剂盒可进行100次检测。
保存条件：-20℃保存，一年有效。
C0016-3需注意避免反复冻融。
C0016-4需避光保存。
试剂盒解冻后可以短期4℃存放，2-3天内有效。
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乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)
简介：
乳酸(Lactic acid ，LD)又称2-羟基丙酸是一种化合物，是一种含有羟基的羧酸，分子式是C 3H 6O 3，参与生物化学很多反应过程。
乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)其检测原理是在NAD 存在条件下，乳酸脱氢酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸，同时生成NADH 。
在碱性条件下显色剂与丙酮酸生成复合物，并使平衡偏向乳酸氧化为丙酮酸的方向，驱动反应完成，生成的NADH 与乳酸为等量摩尔。
通过分光光度比色法(酶标仪)测定340nm 处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出LD 水平。
该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的乳酸含量。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 准备样品：
①_x0001_ 血浆、血清、尿液及其他体液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存。
②_x0001_ 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于LD 的检测。
③_x0001_
高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的LD ，可以使用原有的裂解液或
PBS 等进行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5～10倍后检测。
2、 配制标准品工作液：取乳酸标准(20mmol/L) 0.1ml 溶解于0.3ml 乳酸标准稀释液，使
浓度达到5mmol/L ，即为标准品工作液-乳酸标准(5mmol/L)。
4℃避光保存2个月有效。
编号 名称
TC0731 110T Storage
试剂(A): 乳酸标准(20mmol/L) 1ml -20℃ 避光 试剂(B): 乳酸标准稀释液 1ml RT 试剂(C): LD 显色液
C1: LD Assay buffer 5ml 4℃ 避光 C2: NAD 2支 -20℃ 避光 C3: LDH solution
15μl
-20℃ 避光
试剂(D): LD 终止液 30ml
RT 使用说明书
1份
3、LD检测：按照下表设置空白孔、对照孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，
并注意避免产生气泡。
如果样品中的LD含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
样品的检测最好能设置平行孔。
加入物空白孔对照孔标准孔测定孔蒸馏水/μl 5 40 ——
待测样品(血清、血浆、体液等)/μl — 5 — 5
乳酸标准(5mmol/L)/μl —— 5 —
LD显色液/μl 40 —40 40
混匀，37℃水浴准确保温5min,立即加入终止液终止反应。
LD终止液/μl 240 240 240 240
4、用酶标仪检测，以蒸馏水调零，读取空白孔、对照孔、标准孔、测定孔的340nm吸光
度(即A空白、A对照、A标准、A测定)，一般应数小时内检测完毕。
计算结果：
血清、血浆、尿液、脑脊液乳酸(mmol/L)=｛(A测定−A对照)/(A标准−A空白)｝×5
组织乳酸(mmol/g)=｛(A测定−A对照)/(A标准−A空白)｝×5/待测样品蛋白浓度(g/L)
参考区间：
健康成年人安静状态空腹静脉血0.6～2.2mmol/L
健康成年人安静状态空腹动脉血0.3～1.47mmol/L
健康成年人尿液乳酸排除量 5.5～232mmol/d
新生儿毛细血管血 1.2～4.4mmol/L
0～16儿童脑脊液 1.1～2.8mmol/L
注意事项：
1、本法适用于自动分析仪，分别监测测定管和标准管的吸光度升高速率，计算乳酸的浓
度。
2、如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定。
3、抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。
抗凝血样品置于冰浴中送检，尽快分离出血浆等。
4、草酸抗凝剂对LDH有一定的抑制作用。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。