碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降肠杆菌科细菌耐药基因型研究

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碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的分子生物学及其临床感染特征研究

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的分子生物学及其临床感染特征研究细菌耐药性目前已成为全球性关注的问题,耐药细菌所致感染已构成新世纪抗感染治疗的新挑战,是当前人类健康和生命面临的主要威胁。

肠杆菌科细菌分布广,与人类关系密切。

在医院感染中,肠杆菌科细菌包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等是引起医院感染最常见的病原菌,并以多重耐药菌株引起的感染为显著特点。

碳青霉烯类抗生素是目前临床治疗产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrumβ-Lactamases, ESBLs)及AmpC酶等多重耐药菌株所引起感染的最有效的抗菌药。

但随着该类抗生素在临床上的广泛应用及不合理使用,临床上已出现对碳青霉烯类抗生素耐药的菌株。

目前国内外关于肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制报道主要集中在四个方面：①产生碳青霉烯酶,如IMP型和VIM型金属酶以及KPC (Klebsiella pneumoniae carbapenemase, KPC)型碳青霉烯酶等；②ESBL和/或AmpC酶过度表达同时合并外膜孔蛋白的丢失；③外排泵高表达的膜屏障机制；④药物靶位改变。

在上述几种耐药机制中,产碳青霉烯酶是肠杆菌科细菌对碳青霉烯类耐药最主要的机制。

骆俊等人对2003年6月到2004年5月华山医院临床分离的耐亚胺培南的革兰阴性杆菌中的碳青霉烯酶进行了筛查,发现细菌产碳青霉烯酶是不动杆菌和弗劳地柠檬酸杆菌对亚胺培南和美罗培南等碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因之一。

沈继录等人采用琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对199株革兰阴性杆菌的最低抑菌浓度(MIC),结果显示耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌对12种抗生素的耐药率均高于碳青霉烯类敏感革兰阴性杆菌的耐药率,而且产生多种碳青霉烯酶,如KPC、IMP、VIM和OXA型碳青霉烯酶等,并在弗劳地柠檬酸杆菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌中有产酶克隆株的流行。

在巴西,肠杆菌科细菌中对碳青霉烯耐药已成为主要问题,特别是产KPC酶的耐药株已在多个地区报道。

碳青霉烯中介肠杆菌科细菌耐药性及相关基因检测

碳青霉烯中介肠杆菌科细菌耐药性及相关基因检测张霞;朱超望;王莹超;眭阳;尹娟【摘要】Objective To investigate the drug resistance of Carbapenem-intermediate Enterobacteriaceae (CIE),and whether carrying carbapenemases gene. Methods 26 CIE isolates were collected from March 2015 to January 2017 in the North District of Affiliated SuzhouHospital,Nanjing Medical University,drug resistance of these isolates were investigated by antibiotic susceptibility testing. Carbapenemase genes KPC,NDM,IMP,VIM and OXA48 were detected by polymerase chain reaction (PCR). Results More than 80% of 26 CIE clinical isolates were resistance to ampicillin,cefazolin,ceftazidime. PCR detected 6 isolates carrying carbapenemase genes,including 4 isolates of KPC, 1 isolate of NDM and 1 isolate was IMP positive. Conclusion The multidrug resistance rate in carbapenems-intermediate Enterobacteriaceae was high,and the carbapenemases gene positive isolates were also account for a certain proportion, which suggests that the clinical monitoring of multiple drug-resistant bacteria needs to be further strengthen.%目的分析碳青霉烯类药物敏感性中介肠杆菌科细菌(Carbapenem-intermediate Enterobacteriaceae,CIE)的耐药特性及其携带碳青霉烯酶基因情况.方法收集2015年3月~2017年1月南京医科大学附属苏州医院北区分离的26株CIE,分析菌株对抗菌药物的敏感性,并通过聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)筛选碳青霉烯酶基因KPC、NDM、IMP、VIM和OXA48基因.结果26株临床分离的CIE菌株中,对氨苄西林、头孢唑林、头孢他啶等药物耐受均达到80%以上,PCR法检测到6株细菌携带碳青霉烯酶基因,包括KPC 4株、NDM 1株、IMP 1株.结论碳青霉烯中介肠杆菌科细菌多重耐药率较高,且检出碳青霉烯酶基因的菌株也占一定比例,需进一步加强临床多重耐药细菌的监测.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2017(019)006【总页数】4页(P614-617)【关键词】肠杆菌科细菌;多重耐药;碳青霉烯酶基因【作者】张霞;朱超望;王莹超;眭阳;尹娟【作者单位】215008 苏州,南京医科大学附属苏州医院北区检验科;215008 苏州,南京医科大学附属苏州医院北区检验科;215008 苏州,南京医科大学附属苏州医院北区检验科;215008 苏州,南京医科大学附属苏州医院北区检验科;215008 苏州,南京医科大学附属苏州医院北区检验科【正文语种】中文【中图分类】R378.2;R392.11肠杆菌科细菌为革兰阴性菌，是临床常见和易分离的病原菌，常引起患者严重感染和医院获得性感染。

碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌耐药性及耐药基因分析

㊃论著㊃D O I :10.3969/j.i s s n .1672-9455.2023.18.009碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌耐药性及耐药基因分析*侯素君1,尹盟盟1,王均梅1,别海文1,梁永娟1,朱元祺21.山东省日照市中医医院检验科,山东日照276800;2.青岛大学附属医院检验科,山东青岛266003摘要:目的探讨医院碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(C R E )的临床耐药性及耐药表型和基因型,为医院C R E 菌株感染的临床治疗及医院感染暴发的预防和控制提供科学依据㊂方法收集2020年7月至2023年1月日照市中医医院临床患者标本中分离的77株C R E 菌株,采用全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药敏试验,采用改良碳青霉烯酶灭活试验(m C I M )和乙二胺四乙酸(E D T A )改良碳青霉烯酶灭活试验(e C I M )联合检测碳青霉烯酶表型,采用聚合酶链反应(P C R )扩增耐药基因并进行测序分型㊂结果 77株C R E 菌株主要分离自痰液,其次是尿液㊁胸腔积液;科室来源主要是颅脑外科㊁重症医学科㊁脑卒中监护室㊂C R E 菌株中肺炎克雷伯菌33株,大肠埃希菌15株,阴沟肠杆菌12株,其他细菌17株㊂C R E 菌株对替加环素敏感性为97.4%,阿米卡星为44.2%,复方磺胺甲噁唑为39.0%,对其他抗菌药物的敏感性均低于20.0%㊂m C I M 筛选碳青霉烯酶菌株的灵敏度为95.9%,特异度为100.0%㊂P C R 扩增结果显示49株C R E 菌株携带N D M 基因,24株C R E 菌株携带K P C 基因,1株C R E 菌株携带I M P 基因,3株未检出碳青霉烯酶基因;基因测序比对确定耐药基因亚型分别为b l a K P C -2㊁b l a N D M -1㊁b l a I M P -4㊂结论 C R E 菌株以肺炎克雷伯菌㊁大肠埃希菌㊁阴沟肠杆菌为主,具有较强的耐药性,肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药基因主要为b l a K P C -2㊁大肠埃希菌耐药基因主要为b l a N D M -1,阴沟肠杆菌耐药基因主要为b l a N D M -1,临床需加强C R E 菌株检测,根据药敏试验结果合理选用抗菌药物,防范其在医院内暴发流行㊂关键词:碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌; 细菌耐药性; 耐药基因中图法分类号:R 446.5文献标志码:A 文章编号:1672-9455(2023)18-2667-05A n a l y s i s o n d r u g r e s i s t a n c e a n d d r u g r e s i s t a n c e g e n e s o f c a r b a pe n e m -r e s i s t a n t E n t e r o b a c t e r i a c e a e b a c t e r i a*H O U S u j u n 1,Y I N M e n g m e n g 1,WA N G J u n m e i 1,B I E H a i w e n 1,L I A N G Y o n g j u a n 1,Z HU Y u a n qi 21.D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,R i z h a o M u n i c i p a l H o s p i t a l o f Tr a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e ,R i z h a o ,S h a n d o n g 276800,C h i n a ;2.D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f Q i n g d a o U n i v e r s i t y ,Q i n g d a o ,S h a n d o n g 266003,C h i n a A b s t r a c t :O b je c t i v e T o e x p l o r e t h e c l i n i c a l d r u g r e s i s t a n c e ,d r u g r e s i s t a n c e p h e n o t y p e s a n d g e n o t y p e s of c a r b a p e n e m -r e s i s t a n t E n t e r o b a c t e r i a c e a e (C R E )b a c t e r i a i n t h e h o s p i t a l s o a s t o p r o v i d e a s c i e n t i f i c b a s i s f o r t h e c l i n i c a l t r e a t m e n t o f C R E b a c t e r i a l s t r a i n s i n f e c t i o n a n d t h e p r e v e n t i o n a n d c o n t r o l o f t h e C R E b a c t e r i a l s t r a i n s i n f e c t i o n o u t b r e a k s .M e t h o d s S e v e n t y -s e v e n C R E s t r a i n s i s o l a t e d f r o m t h e c l i n i c a l p a t i e n t s s a m pl e s i n R i z h a o M u n i c i p a l H o s p i t a l o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e f r o m J u l y 2020t o J a n u a r y 2023w e r e c o l l e c t e d ,t h e b a c t e r i a l i d e n t i f i c a t i o n a n d d r u g s u s c e p t i b i l i t y t e s t s w e r e c o n d u c t e d b y t h e f u l l a u t o m a t i c m i c r o b i o l o gi c a l a n a -l y z e r ,a n d t h e c a r b a p e n a s e p h e n o t y p e w a s d e t e c t e d b y t h e m o d i f i e d c a r b a p e n e n a s e i n a c t i v a t i o n m e t h o d (m C I M )a n d E D T A m o d i f i e d c a r b a p e n e n a s e i n a c t i v a t i o n m e t h o d (e C I M ).T h e d r u g -r e s i s t a n c e g e n e s w e r e a m -p l i f i e d b y p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n (P C R )a n d t h e s e q u e n c i n g w a s p e r f o r m e d .R e s u l t s S e v e n t y-s e v e n C R E s t r a i n s w e r e m a i n l y i s o l a t e d f r o m t h e s p u t u m s p e c i m e n ,f o l l o w e d b y t h e u r i n e a n d p l e u r a l e f f u s i o n .T h e d e -p a r t m e n t s w e r e m a i n l y t h e c r a n i o c e r e b r a l s u r g e r y,i n t e n s i v e c a r e m e d i c i n e a n d s t r o k e i n t e n s i v e c a r e u n i t .A -m o n g th e C R E s t r a i n s ,t h e r e w e r e 33s t r a i n s o f K l e b s i e l l a p n e u m o n i a e ,15s t r a i n s o f E s c h e r i c h i a c o l i ,12s t r a i n s o f E n t e r o b a c t e r c l o a c a e a n d 17s t r a i n s o f o t h e r b a c t e r i a .T h e s e n s i t i v i t y o f t h e C R E s t r a i n s t o t i g a c y c l i n e w a s 97.4%,w h i c h t o a m i k a c i n w a s 44.2%,w h i c h t o c o t r i m o x a z o l e w a s 39.0%,a n d w h i c h t o o t h e r a n t i b a c t e r i a l d r u g s w a s l o w e r t h a n 20.0%.T h e s e n s i t i v i t y a n d s p e c i f i c i t y o f m C T M f o r s c r e e n i n g c a r b a p e n a s e s t r a i n w e r e 95.9%a n d 100.0%,r e s p e c t i v e l y .T h e P C R a m pl i f i c a t i o n r e s u l t s s h o w e d t h a t 49s t r a i n s o f C R E b a c t e r i a c a r -r i e d t h e N D M g e n e ,24s t r a i n s o f C R E b a c t e r i a c a r r i e d K P C g e n e ,1s t r a i n o f C R E b a c t e r i u m c a r r i e d I M P g e n e,㊃7662㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n ,S e pt e m b e r 2023,V o l .20,N o .18*基金项目:青岛大学附属医院临床医学+X 科研项目(2019-3399);山东省日照市中医医院2021年度院级科研立项项目(R Z Z Y 2021L C -09)㊂作者简介:侯素君,女,副主任技师,主要从事临床病原微生物耐药监测及耐药机制方面的研究㊂Copyright ©博看网. All Rights Reserved.a n d3s t r a i n s d i d n o t d e t e c t c a rb a p e n e n a s e g e n e.T h e g e n e s e q u e nc i n g c o m p a r i s o nde t e r m i n e d t h a t t h e s u b t y p e s of d r ug r e s i s t a n c e g e n e w e r e b l a K P C-2,b l a N D M-1a n d b l a I M P-4.C o n c l u s i o n Th e C R E s t r ai n s a r e m a i n l y K l e b s i e l l a p n e u m o n i a e,E s c h e r i c h i a c o l i a n d E n t e r o b a c t e r c l o a c a e w i t h s t r o n g d r u g r e s i s t a n c e.T h e c a r b a p e n e m r e s i s t a n t g e n e o f K l e b s i e l l a p n e u m o n i a e i s i s m a i n l y b l a K P C-2,w h i c h o f E s c h e r i c h i a c o l i i s m a i n l y b l a N D M-1,a n d w h i c h o f E n t e r o b a c t e r c l o a c a e i s m a i n l y b l a N D M-1.C l i n i c s h o u l d s t r e n g t h e n t h e C R E s t r a i n s m o n i t o r i n g.T h e a n t i b a c t e r i a l d r u g s s h o u l d b e r e a s o n a b l y s e l e c t e d a c c o r d i n g t o t h e d r u g s u s c e p t i b i l i t y t e s t r e s u l t s t o p r e v e n t i t s o u t b r e a k s a n d e p i d e m i c i n t h e h o s p i t a l.K e y w o r d s:c a r b a p e n e m-r e s i s t a n t E n t e r o b a c t e r i a c e a e;b a c t e r i a l r e s i s t a n c e;d r u g r e s i s t a n c e g e n e当前,细菌耐药已成为全球公共健康领域的重大挑战,其中尤以碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(C R E)引起的感染形势最为严峻,碳青霉烯类抗菌药物包括亚胺培南㊁美洛培南和厄他培南等,是治疗多重耐药革兰阴性杆菌所致感染最有效的抗菌药物之一㊂随着该类药物在临床的广泛应用,肠杆菌目细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率呈逐年快速上升趋势[1]㊂耐药细菌感染致住院时间延长㊁费用增加㊁病死率增高,在社区或医院中可引起散发,交叉传播,甚至导致暴发流行,对婴幼儿㊁老年人和免疫缺陷者的威胁巨大㊂因此,探讨医院C R E菌株的耐药表型和基因型,可以为医院C R E菌株感染的临床治疗和医院感染暴发的防控提供科学依据㊂1材料与方法1.1菌株来源收集2020年7月至2023年1月日照市中医医院临床患者标本中分离的77株C R E菌株,剔除同一患者同一部位重复分离的菌株㊂1.2质控菌株大肠埃希菌A T C C25922㊁肺炎克雷伯菌A T C C700603㊁大肠埃希菌A T C C700323㊁大肠埃希菌A T C C35218㊁肺炎克雷伯菌A T C C B A A1705㊁肺炎克雷伯菌A T C C B A A2146均由省临床检验中心提供㊂1.3仪器与试剂 V I T E K2C o m p a c t全自动细菌鉴定及药敏分析仪(法国生物梅里埃公司)㊁L a b n e t C1301-230E U型手掌形离心机(美国L a b n e t公司)㊁B i o-R a d M y C y c i e r型P C R扩增仪(美国B i o-R a d公司)㊁E p p e n d o r f5415R型台式高速离心机(德国E p-p e n d o r f公司)㊁北京六一D Y C P-31D N型琼脂糖凝胶电泳仪(北京六一生物科技有限公司)㊁B i o-R a d凝胶成像仪(美国B i o-R a d公司)㊁B i o-R a d电泳槽(美国B i o-R a d公司),2ˑA c c u r a t e T a q预混液(湖南艾科瑞生物工程有限公司),D L2000D N A M a r k e r(日本T a K a R a公司),琼脂糖(日本T a K a R a公司),4S G e l-r e d核酸染料(香港B B I L i f e S c i e n c e C o r p o r a t i o n), W i z a r d G e n o m i c D N A P u r i f i c a t i o n K i t(美国P r o-m e g a公司),胰蛋白胨大豆肉汤培养基(T S B,杭州滨和微生物试剂公司),E t e s t条(温州市康泰生物科技有限公司),头孢哌酮/舒巴坦㊁替加环素药敏纸片均为英国O x i d公司产品㊂1.4方法1.4.1菌株鉴定及药敏试验菌株分离与培养严格按照‘全国临床检验操作规程“(第4版)[2]进行,使用V I T E K2C o m p a c t全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验㊂药敏试验结果判断根据美国临床和实验室标准协会(C L S I)最新版标准判断,收集临床标本中分离的肠杆菌目细菌药敏试验报告中亚胺培南㊁美洛培南最小抑菌浓度(M I C)ȡ4μg/m L或厄他培南ȡ2μg/m L(已用E t e s t条复核)的菌株[3]㊂1.4.2碳青霉烯酶表型确证试验改良碳青霉烯酶灭活试验(m C I M)操作步骤:参照C L S I2020年版M100操作标准,用1μL接种环挑一满环菌落,加入2 m L T S B肉汤中乳化,振荡10~15s,每管放入1张含10μg美洛培南的无菌纸片,确认纸片浸没于菌悬液中,35ħ孵育4h,将美洛培南纸片贴于已涂布大肠埃希菌A T C C25922悬液的MH平板,35ħ孵育18~ 24h,量取抑菌圈直径㊂乙二胺四乙酸(E D T A)改良碳青霉烯酶灭活试验(e C I M)操作步骤:另取一支试管,加入2m L T S B肉汤,再加入20μL0.5m o l/L E D T A溶液混匀,E D T A浓度最终为5mm o l/L㊂其余步骤同m C I M㊂m C I M判断标准:美洛培南抑菌圈直径为6~15mm或直径16~18mm但抑菌圈内有散在菌落时,为碳青霉烯酶阳性;抑菌圈直径ȡ19 mm,为碳青霉烯酶阴性;抑菌圈直径为16~18mm 或直径为19mm但抑菌圈内有散在菌落,则无法判断是否存在碳青霉烯酶,为碳青霉烯酶不确定[4]㊂e C I M判断标准:e C I M与m C I M结果比较,美洛培南抑菌圈直径相差ȡ5mm为金属β-内酰胺酶阳性,美洛培南抑菌圈直径相差ɤ4mm为金属β-内酰胺酶阴性,待测菌株产丝氨酸蛋白酶㊂1.4.3基因检测煮沸裂解法提取D N A模板,采用P C R扩增碳青霉烯酶耐药基因,扩增条件为94ħ预变性5m i n;94ħ变性30s,52ħ退火40s,72ħ延伸50s,共35个循环;72ħ再延伸10m i n㊂扩增后产物取10μL通过1.5%琼脂凝胶电泳30m i n,最终在凝胶成像仪上观察结果㊂引物信息见表1,引物序列查阅文献[5]获得,由上海生工生物工程有限公司合成引物,并进行相应的测序分析,与目的基因㊁阳性对照条带位置的扩增产物送上海生工生物工程有限公司完成测序,基因序列在h t t p://b l a s t.n c b i.n l m.n i h.g o v/b l a s t.c g i进行比对,确定耐药基因亚型㊂1.5统计学处理采用全国细菌耐药监测网提供的W h o n e t5.6软件收集药敏试验结果,使用S P S S21.0统计软件进行分析,计数资料以例数或百分比表示,比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义㊂㊃8662㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n,S e p t e m b e r2023,V o l.20,N o.18Copyright©博看网. All Rights Reserved.表1 P C R 扩增碳青霉烯类耐药基因引物引物引物序列(5'-3')目的基因产物长度(b p )N D M -F G G T T T G G C G A T C T G G T T T T Cb l a N D M 621N D M -RC G G A A T G G C T C A T C A C G A T C I M P -FG G A A T A G A G T G G C T T A A Y T C T C b l a I M P 232I M P -RG G T T T A A Y A A A A C A A C C A C C K P C -F m C G T C T A G T T C T G C T G T C T T Gb l a K P C 798K P C -R m C T T G T C A T C C T T G T T A G G C G V I M -FG A T G G T G T T T G G T C G C A T A b l a V I M 390V I M -RC G A A T G C G C A G C A C C A G O X A -48-FG C G T G G T T A A G G A T G A A C A C b l a O X A -48438O X A -48-RC A T C A A G T T C A A C C C A A C C G2 结果2.1 C R E 菌株的种类与临床分布 77株C R E 临床分离株中,肺炎克雷伯菌33株(42.9%)㊁大肠埃希菌15株(19.5%)㊁阴沟肠杆菌12株(15.6%)㊁弗劳地枸橼酸杆菌7株(9.1%)㊁雷氏普罗威登斯菌3株(3.9%)㊁产气肠杆菌3株(3.9%)㊁奇异变形杆菌2株(2.6%)㊁产酸克雷伯菌2株(2.6%)㊂77株C R E 菌株来源标本以痰液和尿液为主,其中分离自痰液33株(42.86%)㊁尿液30株(38.96%)㊁胸腔积液6株(7.79%)㊁穿刺液5株(6.49%)㊁脑脊液2株(2.60%)㊂77株C R E 菌株的科室分布:颅脑外科23株,重症医学科10株,脑卒中监护室9株,急诊科6株,泌尿外科6株,肺病科5株,肝胆胰脾科3株,胸外科3株,脑病科2株,心血管内科2株,骨六科2株,康复科2株,髋膝骨科1株,风湿肾病科1株,妇科1株,肿瘤科1株㊂2.2 C R E 菌株药敏试验结果 77株C R E 菌株中超广谱β-内酰胺酶(E S B L s )的检出率为100.0%,对替加环素敏感性最高(97.4%),其次为阿米卡星(44.2%)㊁复方磺胺甲噁唑(39.0%),对其余抗菌药物的敏感性均低于20.0%㊂大肠埃希菌对阿米卡星的敏感性为80.0%,肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对阿米卡星的敏感性分别为48.5%和50.0%㊂见表2㊂表2 C R E 菌株对常用抗菌药物的药敏试验结果(%)抗菌药物总计(n =77)耐药敏感肺炎克雷伯菌(n =33)耐药敏感大肠埃希菌(n =15)耐药敏感阴沟肠杆菌(n =12)耐药敏感阿米卡星55.844.251.548.520.080.050.050.0头孢唑啉100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0头孢吡肟89.610.487.912.180.020.091.78.3头孢替坦94.85.290.99.193.30.7100.00.0头孢呋辛100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0妥布霉素83.116.969.730.386.713.391.78.3庆大霉素79.219.963.636.480.020.091.78.3亚胺培南100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0氨曲南80.519.597.03.020.080.083.316.7美洛培南100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0呋喃妥因98.81.293.96.154.446.6100.00.0头孢曲松100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0头孢他啶100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0环丙沙星98.71.3100.00.093.30.7100.00.0左氧氟沙星89.610.484.815.286.713.391.78.3复方磺胺甲噁唑61.039.036.463.680.020.050.050.0氨苄西林100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0替加环素2.697.40.0100.00.0100.00.0100.0头孢哌酮/舒巴坦96.13.993.96.193.30.7100.00.0哌拉西林钠/他唑巴坦100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0阿莫西林/克拉维酸100.00.0100.00.0100.00.0100.00.02.3 耐药基因扩增结果 77株C R E 菌株中74株产碳青霉烯酶,3株未检出㊂其中,33株肺炎克雷伯菌中20株携带K P C 基因,12株携带N D M 基因,1株未检出碳青霉烯酶,主要产K P C (60.6%);15株大肠埃希菌中12株携带N D M 基因,3株携带K P C 基因,主要产N D M (80.0%);12株阴沟肠杆菌携带N D M 基因(100.0%);7株耐弗劳地枸橼酸杆菌携带N D M 基因(100.0%);3株雷氏普罗威登斯菌中2株携带N D M 基因,1株未检出碳青霉烯酶;3株产气肠杆菌中1株携带N D M 基因,1株携带K P C 基因,1株未检出碳青霉烯酶;2株产酸克雷伯菌中1株携带N D M基因,1株携带I M P 基因;2株奇异变形杆菌携带N D M 基因㊂碳青霉烯酶基因型中N D M 占66.2%(49/74),K P C 占32.4%(24/74),I M P 占1.4%(1/74)㊂琼脂电泳图见图1~3㊂2.4 碳青霉烯酶表型试验结果 74株携带碳青霉烯酶基因的C R E 菌株,其中71株m C I M 试验阳性,3株m C I M 试验均阴性,m C I M 筛选碳青霉烯酶菌株的灵敏度为95.9%,特异度为100.0%㊂m C I M 阳性菌株中,肺炎克雷伯菌32株,大肠埃希菌15株,阴沟肠㊃9662㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n ,S e pt e m b e r 2023,V o l .20,N o .18Copyright ©博看网. All Rights Reserved.杆菌12株,弗劳地枸橼酸杆菌7株,奇异变形杆菌2株,产气肠杆菌1株,产酸克雷伯菌1株,雷氏普罗威登斯菌1株㊂m C I M 结合e C I M 试验初步判断产金属β-内酰胺酶51株(m C I M 阳性,e C I M 阳性),产丝氨酸蛋白酶20株(m C I M 阳性,e C I M 阴性)㊂注:M 为D L 2000D N A 标志物;1为b l a N D M 阳性对照;2为b l a N D M阴性对照;3~16为临床菌株b l a N D M阳性㊂图1 P C R 扩增菌株b l a N D M基因的电泳图注:M 为D L 2000D N A 标志物;1为b l a K P C 阳性对照;2为b l a K P C阴性对照;3~17为临床菌株b l a K P C阳性㊂图2 P C R 扩增菌株b l a K P C基因的电泳图注:M 为D L 2000D N A 标志物;1为b l a I M P 阴性对照;2为b l a I M P阳性对照;4为临床菌株b l a I M P 阳性;3㊁5~12为临床菌株b l a I M P阴性㊂图3 P C R 扩增菌株b l a I M P 基因的电泳图2.5 基因测序耐药基因扩增结果将与目的基因㊁阳性对照条带位置的扩增产物送上海生工生物工程有限公司完成测序,基因序列在h t t p://b l a s t .n c b i .n l m.n i h .g o v /b l a s t .c gi 进行比对,确定耐药基因型为b l a K P C -2㊁b l a N D M -1㊁b l a I M P -4㊂3 讨论C R E 是当前最受关注的耐药威胁之一,我国C R E 的流行情况也比较严重㊂中国C H I N E T 细菌耐药性监测数据表明,2005年碳青霉烯类抗菌药物对肠杆菌目细菌保持着较高的抗菌活性,耐药率低于2%;到2010年,耐药率明显上升,达到5%;肺炎克雷伯菌的耐药率已高达10%[6]㊂2018年肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率全国平均为10.1%[7],2021年肺炎克雷伯菌耐药率上升到23.1%[8],肠杆菌目细菌对碳青霉烯类抗菌药物最常见的耐药机制为产碳青霉烯酶[9]㊂因此,快速㊁准确地检测本院耐药菌是否产碳青霉烯酶,了解C R E 菌株基因分型对于临床治疗和医院感染控制至关重要㊂本研究77株C R E 菌株中,肺炎克雷伯菌占42.9%,大肠埃希菌占19.5%,阴沟肠杆菌占15.6%,其他肠杆菌目细菌占22.0%,与陆书华等[10]㊁崔超琼等[11]的研究结果接近;主要碳青霉烯酶基因型中N D M 占66.2%(49/74),K P C 占32.4%(24/74),I M P 占1.4%(1/74)㊂C R E 菌株主要分离自痰液㊁尿液㊁胸腔积液,也可分离自脑脊液㊁血液㊁穿刺液等,说明耐药株引起的感染并不仅限于呼吸㊁泌尿系统,还可能引起颅内㊁血流㊁胸腔等多部位感染,其感染的广泛性应引起临床重视㊂C R E 菌株科室分布主要是颅脑外科㊁重症医学科㊁脑卒中监护室,这与重症监护室患者病因的复杂性㊁病情危重㊁免疫力低下㊁糖皮质激素和高效广谱抗菌药物长期应用,以及侵入性操作治疗较多有关㊂本研究药敏试验结果显示,77株C R E 菌株对青霉素类㊁头孢菌素类㊁头霉素类耐药率均为90%以上,与王珍珍等[12]研究结果一致,临床应慎重经验用药,对替加环素㊁阿米卡星㊁复方磺胺甲噁唑耐药率分别为2.6%㊁55.8%㊁61.0%[13],临床可选择这些药物治疗感染者㊂按照A m b l e r 分子分类方法可将碳青霉烯酶分为3类:(1)A 类丝氨酸碳青霉烯酶,以K P C 为主,该酶活性可被阿维巴坦抑制,产酶菌株通常仅对替加环素㊁多黏菌素或头孢他啶/阿维巴坦敏感;(2)B 类金属β-内酰胺酶,以N D M 型金属酶为主,该酶活性不能被阿维巴坦抑制,产酶菌株通常仅对替加环素㊁多黏菌素敏感,少数菌株对氨曲南敏感;(3)D 类丝氨酸碳青霉烯酶,以O X A -48为主,常见于儿童患者分离的肺炎克雷伯菌,该酶活性可被阿维巴坦抑制,产酶菌株通常仅对替加环素㊁多黏菌素或头孢他啶/阿维巴坦敏感㊂C R E 感染的治疗具有挑战性,应根据药敏试验结果㊁耐药表型或基因分型㊁感染的严重程度,选择有效的治疗方案㊂本研究利用C L S I 推荐的m C I M 和e C I M 试验联合检测碳青霉烯酶表型,m C I M 筛选碳青霉烯酶菌株的灵敏度为95.9%,特异度为100.0%[1],与之符合,结合e C I M 试验初步判断产金属β-内酰胺酶51株,产丝氨酸蛋白酶20株㊂m C I M 试验操作简单,成本低,不需要特殊试剂,灵敏度和特异度高,适合所有微生物室开展㊂m C I M 与e C I M 联合检测筛选碳青霉烯酶表型,对临床选择用药具有重要意义㊂P C R 扩增结果显示,77株C R E 菌株中74株产㊃0762㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n ,S e pt e m b e r 2023,V o l .20,N o .18Copyright ©博看网. All Rights Reserved.碳青霉烯酶,3株未检出,而E S B L s的检出率为100.0%,可能为高产头孢菌素酶(A m p C)或高产E S-B L s合并外膜孔蛋白缺失或变异以及细菌外排泵系统改变所致[14]㊂目前常见的碳青霉烯酶为K P C㊁V I M㊁N D M㊁I M P和O X A,国内以K P C㊁N D M和I M P为主[15]㊂本研究77株菌株主要流行的碳青霉烯酶基因型依次为N D M(66.2%)㊁K P C(32.4%)和I M P(1.4%),以N D M和K P C为主[16]㊂河南部分地区和海南省5家综合医院收集的C R E菌株中,主要的耐药基因型也是N D M[17-18],本研究耐药基因K P C 的检出率低于N D M,77株C R E菌株中,仅有1株耐碳青霉烯产酸克雷伯菌检出I M P基因㊂97.0% (32/33)的肺炎克雷伯菌㊁100.0%(15/15)的大肠埃希菌,100.0%(12/12)的阴沟肠杆菌携带碳青霉烯酶基因㊂碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌主要携带K P C-2基因[19],碳青霉烯类耐药大肠埃希菌和阴沟肠杆菌主要携带N D M-1基因,与陆书华等[10]报道一致㊂K P C和N D M耐药基因均可由质粒介导,通过菌株自身克隆以及不同菌种间水平转移,是C R E流行激增的主要原因㊂K P C-2和N D M-1可水解绝大多数β-内酰胺药物,包括碳青霉烯类,不同之处在于K P C-2为丝氨酸蛋白酶,水解氨曲南,能被新型酶抑制剂阿维巴坦所抑制,而N D M-1为金属酶,不水解氨曲南,不被阿维巴坦㊁韦博巴坦等抑制㊂总之,C R E呈现广泛耐药甚至全耐药的特征,使临床抗感染治疗面临无药可用的困境,导致感染患者病死率高㊂实验室应快速鉴别产碳青霉烯酶菌株,选择早期快速筛查的方法,加快开展联合药敏试验,有效降低C R E感染患者的病死率[20]㊂临床医生应掌握医院C R E临床分布特征及耐药基因㊁细菌耐药情况,根据药敏试验结果合理选用抗菌药物;院感防控部门需加强监督检查,共同遏制C R E菌株在不同患者和不同区域间流行播散,降低医院C R E感染发生率㊂参考文献[1]喻华,徐雪松,李敏,等.肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的实验室检测和临床报告规范专家共识[J].中国感染与化疗杂志,2020,20(6):671-680.[2]尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].4版.北京:人民卫生出版社,2015:560-851.[3]C e n t e r s f o r D i s c a s e C o n t r o l a n d P r e v e n t i o n(C D C).F a c i l i-t y g u i d a n c e f o r c o n t r o l o f c a r b a p e n e m-r e s i s t a n t E n t e r o b a c-t e r i a c e a e(C R E)[E B/O L].[2023-04-15].h t t p s://w w w.c d c.g o v/h a i/p d f s/c r e/c r e-g u i d a n c e-508.p d f.[4]C l i n i c a l a n d L a b o r a t o r y S t a n d a r d s I n s t i t u t e.P e r f o r m a n c es t a n d a r d s f o r a n t i m i c r p b i a l s u s c e p t i b i l i t y t e s t i n g:M100-S30[S].W a y n e,P A,U S A:C L S I,2020.[5]P O I R E L L,WA L S H T R,C U V I L L I E R V,e t a l.M u l t i-p l e x P C R f o r d e t e c t i o n o f a c q u i r e d c a r b a p e n e m a s e g e n e s [J].D i a g n M i c r o b i o l I n f e c t D i s,2011,70(1):119-123.[6]周宏伟,胡燕燕,张嵘.碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的检测方法[J].检验医学,2020,10(35):971-973. 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碳青霉烯类抗生素耐药状况及耐药机理分析1

碳青霉烯类抗生素耐药状况及耐药机理分析[摘要]目的: 探讨碳青霉烯类抗生素耐药状况及耐药机理。

方法: 利用excel表格对我院2010~2014年期间综合重症监护室中各种碳青霉烯类抗生素使用情况、用药密度、检测菌分离情况进行统计分析。

结果: 2010~2014年期间，我院综合重症监护室碳青霉烯类抗生素的用药密度分别为32.7、30.12、29.52、28.55、27.15，呈逐年下降趋势。

各年度检测率变化较小，鲍曼不动杆菌检出率呈逐年增加趋势。

非发酵革兰氏阴性菌（鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌）对碳青霉烯类抗生素的耐药率显著高于肠杆菌科细菌（大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌），耐药率随用药密度的减少变化不大。

结论: 碳青霉烯类抗生素的临床使用应慎重，注意用药的合理性。

[关键词]碳青霉烯类抗生素，耐药状况，耐药机理[Abstract] objective: to study the penicillium carbon alkene antibiotic drug resistance situation and mechanism of drug resistance. Methods: in our hospital from 2010 to 2014, using excel spreadsheet to integrated in the intensive care unit during various carbon penicillium alkene antibiotics usage, the density of medication, bacteria separation conditions were analyzed. Results: during 2010 ~ 2014, and our general intensive care unit carbon penicillium alkene antibiotic drug density were 32.7, 30.12, 29.52, 28.55, 29.52, declining trend year by year. The annual detection rate of change is small, acinetobacter baumannii incidence increased year by year. The fermentation of gram-negative bacteria (acinetobacter baumannii, pseudomonas aeruginosa) on carbon penicillium alkene antibiotic resistant rate was significantly higher than that of enterobacteriaceae bacteria (e. coli), sewer e. coli, klebsiella pneumoniae, with resistance reduction medicine density changed little. Conclusion: penicillium carbon alkene clinical use of antibiotics should be careful, pay attention to the rationality of drug use.[Key words] penicillium carbon alkene of antibiotics, drug resistance, resistance mechanism碳青霉烯类抗生素是自20世纪70年代开始研究的-内酰胺类抗生素，具有耐受性好、抗菌谱广、毒性低、抗菌活性强等优点，是目前临床上治疗重症细菌感染、肠杆菌科细菌感染、多重耐菌株感染的首选药物。

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药机制的研究

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｃａｒｂａｐｅｎｅｍ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ
（ＣＲＥ）ｓｔｒａｉｎｓｓｏａｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅｇｕｉｄａｎｃｅｆｏｒｒｅａｓｏｎａｂｌｅｃｌｉｎｉｃａｌｕｓｅｏｆａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ．ＭＥＴＨＯＤＳＡｔｏｔａｌｏｆ２２０３ｃｌｉｎｉ－
中华医院感染学杂志２０１６年第２６卷第２１期ＣｈｉｎＪＮｏｓｏｃｏｍｉｏｌＶｏ１．２６Ｎｏ．２１２０１６
ｄｏｉ：１０．１１８１６／ｃｎ．ｎｉ．２０１６ — １５３７３３
统对其进行鉴定及药敏试验；改良Ｈｏｄｇｅ试验初筛碳青霉烯酶；ＥＤＴＡ一亚胺培南（ＩＰＭ）协同法和亚胺培南双纸片
增效法确认金属酶表型；ＰＣＲ法检测内酰胺酶基因及整合子基因，产物测序，ＢＬＡＳＴ软件比对分析。结果２２０３株肠杆菌科细菌中共检出１７株ＣＲＥ，检出率为０．７；药敏结果显示，１７株ＣＲＥ菌株对常用抗菌药物高度耐药，除对阿米卡星和头孢哌酮／舒巴坦的耐药率低，分别为３５．３和４７．１％，对其他抗菌药物的耐药率在７６．４～１００．０；１７株菌均检出ｂｌａＴＥｕ基因，６株肺炎克雷伯菌同时检出ｂｌａｓＨｖ基因，并且其中１株肺炎克雷伯菌同时携带ｂｌａＫｐ。基因，其余基因均阴性；３种整合子中ｉｎｔＩ基因为阳性，检出率高达７０．６。结论携带ｂｌａＴＥＭ、ｂｌａｓｎｖ和ｂｌａＫＰｅ基因是导致该院肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的重要原因，Ｉ类整合子在其耐药基因的转移方面起了十分重要的作用。关键词：碳青霉烯类抗菌药物；肠杆菌科细菌；耐药性；耐药机制；整合子

碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌毒力因子与耐药基因相关性研究

碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌毒力因子与耐药基因相关性研究作者：宋真金炎杨蕾路超白媛媛郝莹莹来源：《新医学》2019年第03期【摘要】目的分析碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌（E.Coli）耐药基因型与所含的毒力因子的关系。

方法 PCR检测E.Coli毒力因子和耐药基因;采用Fisher确切概率法对耐药基因和毒力因子的关系进行分析。

结果 95.7%（22/23）菌株超广谱β-内酰胺酶（ESBL）基因阳性，43.5%（10/23）菌株检出胞外黏多糖相关基因，87.0%（20/23）菌株检出P菌毛相关基因。

耐药基因CTX-M-15型比CTX-M-55型菌株携带毒力因子papGⅡ的概率低（P = 0.049）。

耐药基因NDM-1阳性菌株比NDM-5阳性菌株中毒力因子papGⅢ携带率高（P = 0.047）。

结论ESBL阳性菌株中不同CTX-M、NDM亚型与毒力因子papGⅡ、papGⅢ具有一定的相关性，毒力因子的携带情况与E.Coli耐药情况可能有关。

【关键词】大肠埃希菌;毒力因子;耐药基因;超广谱β-内酰胺酶;碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌【Abstract】 Objective To investigate the correlation between the genotype of drug-resistant genes and the virulence factors in carbapenem-resistant Escherichia coli（E.Coli） strains.; Methods The virulence factors and drug-resistant genes were detected by PCR. The relationship between drug resistance genes and virulence factors was analyzed by Fisher’s exact test.; Results A total of 95.7% （22/23） of the bacterial strains were positive for extended spectrum beta-lactamase （ESBLs）gene， 43.5% （10/23） positive for the extracellular polysaccharide-related genes， and 87.0% （20/23） positive for the P fimbriae-related genes. The positive rate of virulence factors papG Ⅱ in the CTX-M-15 strain was significantly lower compared with that in the CTX-M-55 strain （P =0.049）. The positive rate of virulence factor papG Ⅲ in the NDM-5 positive strain was considerably higher than that in NDM-1 positive strains （P = 0.047）.; Conclusions The genotypes of CTX-M and NDM among ESBLs positive strains were asssociated with virulence factors papG Ⅱ or papG Ⅲ; virulence factors might be associated with the drug resistance genes in E.Coli.【Key words】 Escherichia coli;Virulence factor;Drug resistance gene;Extended spectrum beta-lactamase;Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae大肠埃希菌（E.Coli）是引起医院内感染最常见的病原菌。

肠杆菌科细菌碳青霉烯类抗生素耐药治疗的研究进展

Mod Diagn Treat 现代诊断与治疗2021Apr 32(8)肠杆菌科细菌碳青霉烯类抗生素耐药治疗的研究进展吴鸿滨(天津市第五中心医院检验科,天津300450)Research Progress in the Treatment of Carbapenem-resistant Enter 鄄obacteriaceaeWU Hong-bin (Department of Clinical Laboratory,Peking University Binhai Hospital,Tianjin 300450,China )Abstract :Enterobacteriaceae are facultative anaerobic or obligate aerobic gram -negative bacilli and coccobacillusthat widely exist in human and in the intestine of most warm-blooded animals,and most of them are normal flora.As one of the most widely distributed pathogenic bacteria,Enterobacteriaceae can be transformed into conditional pathogenic bacteriawhen the immunity of host decreases,which not only causes external acquired infection,but also iatrogenic infection inside the hospital.Carbapenems are β-lactam antibiotics with broadantibacterial spectrum and strong antibacterial property,and is thus often used as the final drug therapyin the treatment of multi-drugresistant gram-negative bacillus infection.However,the unscientific usage and dosage of broad-spectrum antibioticsin recent years has given rise toa large number of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE),the drug resistance rate ofwhich is increasing year by year.Keywords :Enterobacteriaceae ;Drug resistance ;Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae ;Resistance mechanism;Ther ⁃影响,其不同形状大小会对患者治疗效果产生较大影响,在治疗时应根据患者实际情况进行选择。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌实验室检测的研究

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌实验室检测的研究碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（ESBL-ECR）是一类对β-内酰胺类抗生素具有高度耐药性的细菌，已成为临床上非常严重的耐药菌株。

为了更好地了解ESBL-ECR的分布情况及其耐药机制，许多研究开始对其进行实验室检测。

研究人员需要收集临床样本，这些样本包括血液、尿液、粪便等。

在收集样本之前，应确保采样工具和容器无菌，并且在采样过程中要避免污染。

收集的样本随后被送到实验室进行处理和检测。

在实验室中，研究人员首先需要对收集到的样本进行处理，以分离出ESBL-ECR细菌。

处理过程包括菌落计数、筛选、分离纯化等步骤。

这些步骤旨在降低其他非目标细菌的干扰，并确保处理后的样本仅包含ESBL-ECR细菌。

接下来，研究人员需要对分离纯化的ESBL-ECR细菌进行鉴定和验证。

鉴定的方法包括生化试验、形态学观察和基因测序等。

这些方法可以帮助确定细菌的种属和亚种，并且可以评估其对碳青霉烯类抗生素的耐药性。

在鉴定和验证完成后，研究人员可以开始对ESBL-ECR细菌的耐药机制进行研究。

这一部分的实验通常包括检测细菌的小梭菌酶（TEM、SHV、CTX-M等）、外膜蛋白（OmpC、OmpF 等）、增强型效应位点（AmpC等）等。

这些实验可以帮助研究人员更好地了解ESBL-ECR 细菌的耐药机制，并为研发新的抗菌药物提供参考。

研究人员还需要对ESBL-ECR细菌的耐药性进行药敏试验。

这些试验可以确定细菌对碳青霉烯类抗生素的最低抑菌浓度（MIC），并评估其对其他抗生素的敏感性。

药敏试验的结果可以为临床医生选择最适合的治疗方案提供参考。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌实验室检测的研究包括样本处理、细菌鉴定和验证、耐药机制研究以及药敏试验等多个步骤。

这些研究有助于更好地了解ESBL-ECR细菌的分布情况和耐药机制，为制定有效的治疗策略提供科学依据。

碳青霉烯类抗生素耐药机制介绍

碳青霉烯类抗生素耐药机制介绍碳青霉烯类抗生素一种非典型beta-内酰胺类抗生素，具有抗菌谱广、抗菌活性强以及对beta-内酰胺酶稳定以及毒性低等特点，对控制耐药菌、产酶菌感染及免疫缺陷者感染发挥着重要作用。

其结构与青霉素类的青霉环相似，不同之处在于噻唑环上的硫原子为碳所替代，且C2与C3之间存在不饱和双键；另外，其6位羟乙基侧链为反式构象。

研究证明，正是这个构型特殊的基团，使该类化合物与通常青霉烯的顺式构象显著不同，具有超广谱的、极强的抗菌活性，以及对beta-内酰胺酶高度的稳定性。

碳青霉烯类抗生素作用方式都是抑制胞壁粘肽合成酶，即青霉素结合蛋白（PBPs），从而阻碍细胞壁粘肽合成，使细菌胞壁缺损，菌体膨胀致使细菌胞浆渗透压改变和细胞溶解而杀灭细菌。

哺乳动物无细胞壁，不受此类药物的影响，因而本类药具有对细菌的选择性杀菌作用，对宿主毒性小。

青霉素结合蛋白（PBPs）是存在于细胞浆膜上的蛋白，分两类，一类具有转肽酶和转糖基酶的活性，参与细胞壁的合成，另一类具有羧肽酶活性，与细菌细胞分裂和维持形态有关。

近十多年来已证实细菌胞浆膜上特殊蛋白PBPs是此药的作用靶位，亚胺培南与PBP2的亲和力很强，结合后阻碍细胞壁的合成，可使细菌迅速肿胀、溶解，而且其作用很少受接种菌量（PH5.5～8.5）的影响。

美罗培南能迅速渗透入肠杆菌科和铜绿假单孢菌靶位，主要是与PBP2和PBP3紧密结合。

国内已经上市的品种有亚胺培南，美罗培南，帕尼培南，法罗培南，厄他培南，比阿培南。

抗菌药物出现，总是伴随着细菌耐药性的产生，碳青霉烯类抗生素虽然刚开始使用时，细菌的耐药性相当低，对常见病原菌的敏感率很高，但碳青霉烯类与其他抗菌药物一样，在临床应用后即出现耐药菌株。

目前临床上已出现亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类药物的耐药菌株。

细菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的机制主要有以下几种：1.外膜孔蛋白减少或丢失伴高水平beta-内酰胺酶的持续产生外膜的通透性对药物进入菌体至关重要，抗生素可以通过通道蛋白直接扩散进入胞内，并到达菌体内的相应作用部位，从而达到抑菌或杀菌的作用。

产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的检测及耐药特点研究

产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的检测及耐药特点研究研究背景肠杆菌科细菌是社区获得性感染和医院获得性感染的重要条件致病菌,主要引起呼吸系统感染和泌尿系统感染,在免疫力低下的患者中可引起严重甚至致死性的感染。

而碳青霉烯类抗菌药物是目前临床上作为治疗肠杆菌科细菌感染最强而有力的一类抗菌药物,包括亚胺培南、美罗培南、厄他培南等,其对极大多数由质粒或染色体介导的β-内酰胺酶都有较高的稳定性,且与青霉素结合蛋白（PBPs）亲和力强,能有效地渗透细菌外膜,并存在抗生素后效应,因其抗菌谱广、抗菌活性强、杀菌作用快,临床上碳青霉烯类抗菌药物广泛用于治疗产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC酶）细菌引起的感染。

但是随着碳青霉烯类抗菌药物的大量使用,国内外开始报道对碳青霉烯类抗菌药物不敏感甚至耐药的肠杆菌科细菌,这极大地限制了碳青霉烯类抗菌药物的使用,产生这一现象的重要原因是菌株获得了碳青霉烯酶基因。

其中由质粒携带的碳青霉烯酶基因由于其耐药基因环境存在介导转移的基因元件,使得其易于在不同细菌间转移,造成了碳青霉烯酶耐药性的广泛传播,成为近年临床微生物学领域备受关注的热点之一。

本研究通过采用法国梅里埃Vitek2全自动微生物鉴定仪与药物敏感仪对收集的耐药菌株进行鉴定及药敏分析,对本院可疑的产碳青霉烯酶菌株进行多重PCR检测碳青霉烯酶基因,并对耐药基因阳性的菌株进行接合转移实验,以了解耐药基因的传播方式;通过高通量测序技术对其中一株接合转移成功的多重耐药菌株进行质粒全序列的测定,获得的全序列通过生物信息学分析,展开对肺炎克雷伯菌耐药基因环境及耐药机制的研究。

研究目的了解本院临床分离的肠杆菌科菌株的耐药特点及产碳青霉烯酶情况,探讨产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌耐药基因的传播方式及可能的耐药机制,为临床控制耐药基因的传播提供一定的实验依据。

研究方法1.菌株收集和药敏实验收集广州医科大学附属第一医院检验科微生物室分离的来自不同科室的不同标本类型的耐碳青霉烯类抗菌药物的肠杆菌科菌株共18株。

碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌的耐药机制探讨

摘要：目的探讨本院存在的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐药机制。方法临床检出碳青霉烯类抗菌药物非敏感肠杆
菌科细菌６。改￣Ｈｏｇ实验、ＥＴ株ｄｅＤＡ协同试验检、改良三维实验检测其耐药表型；引物特异性ＰＲ法检测其碳青霉烯酶耐药Ｃ
基因及外膜蛋白基因存在情况。结果１大肠埃希菌中改￣Ｈｏｇ实验弱阳性，ＥＴ株ｄｅＤＡ协同试验阳性，改良三维实验结果可被ＣＡ单独抑制，ＰＲ扩增结果Ｉ４ＬＣＭＰ碳青霉烯酶基因阳性。５产气肠杆菌改￣Ｈｄｅ验，阴性３，阳性两株，ＥＡ协同试验株ｏｇ实株ＤＴ
培南、美罗培南、厄他培南纸片由美国默沙东制药公
司赠送。溴化乙锭（Ｂ购自Ｓｇ公司，琼脂糖购自Ｅ）ｉｍａＢＯＳ公司，Ｐｅｉ购ＡＴＫＲ生物技术公司。ＩＷＥＴｒｍｘａａａ
Ｄｒｅ（Ｌ２０）白ＴＫａａＮＡＭａｒ．００购ｋＤａＲ生物技术公司。
ｉｈｓｈｓｉ１Ｍｅｈｄ６ｓｒｉｓｏａｂｐｎｍｎｉａｔｒａｒｇｎｎｓｎｉｖｎｅｏａｔｒｃａａｔｒａｎｔｉｏｐｔ．ａｔｏｓｔａｎｆｃｒａｅｅａｔｃｅｉｌｄｕｏ —ｅｓｔｅＥｔｒｂｃｅｉｅｅｂｃｅｉｂｉａ
ｔｅｐｅｅｃ；ｏｙｒｓｈｉｒａｔｎ（Ｃ）ｏｄｔｃｇｎｓｏｅｃｒａｅｅｓｓｎｕｅｍｂａｅｐｏｅ．ｈｒｓｎｅｐｌｍｅａｅｃａｅｃｉＰＲｔｅｔｅｅｆｈａｂｐｎｍａｅｄｏｔｒｎｏｅｔａｍｅｒｎｒｔｉｎ

肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药现状

肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药现状
contents
目录
• 肠杆菌科细菌概述 • 碳青霉烯类药物介绍 • 肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物的耐药
现状 • 肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药性的
影响 • 应对肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药
性的策略与措施
01
肠杆菌科细菌概述
肠杆菌科细菌的定义与分类
定义
肠杆菌科细菌是一类常见的肠道病原菌，属于革兰氏阴性杆菌。
碳青霉烯类药物的作用机制
抑制细菌细胞壁的合成
碳青霉烯类药物通过抑制细菌细胞壁的合成，导致细菌细胞壁缺损，水分由外环境不断渗入高渗的菌体内，致细菌膨胀、变形死亡。
ห้องสมุดไป่ตู้破坏细菌细胞膜的完整性
碳青霉烯类药物能够破坏细菌细胞膜的完整性，导致细胞膜失去正常的生理功能，引起细菌死亡。
碳青霉烯类药物的抗菌谱
对肠杆菌科细菌具有抗菌活性
加强耐药性监测与预警
建立全国性的肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药监测网络，定期收集和分析相关数据，及时发现和预警耐药性趋势。
强化医疗机构、实验室和公共卫生部门之间的信息共享和协作，确保耐药性监测数据的准确性和及时性。
提高医务人员对耐药性的认识和警惕性，加强临床微生物实验室的检测能力，确保及时发现和报告耐药菌株。
针对肠杆菌科细菌的耐药性，抗生素使用指南需要不断更新，以指导临床医生合理用药。
抗生素管理政策调整
政府和医疗机构需要加强抗生素管理，制定更为严格的抗生素使用规定，以遏制耐药性的发展。
患者自我保护意识提高
公众需要增强对抗生素合理使用的认识，提高自我保护意识，避免不合理的抗生素使用。
05
应对肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药性的策略与措施

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性及分子机制研究

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性及分子机制研究安童童;赵志军;李刚;康宇婷;刘学雷;杨宁爱;贾伟【摘要】目的探讨耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性及其分子机制.方法采用WHONET 5.6软件对某三甲综合教学医院2014-2016年分离的肠杆菌科中耐亚胺培南的细菌进行初筛,采用肉汤稀释法检测碳青霉烯类抗生素对细菌的最低抑菌浓度(MIC),用PCR方法检测blaNDM、blaKPC-2、blaCTX-M-15、blaOXA-48等耐药基因;利用测序方法鉴定blaNDM亚型.结果共筛选出92株耐药菌,标本来源主要为胆汁、痰和无菌中段尿,92株耐药菌主要分离自肝胆外科、ICU和血管外科.药敏试验表明92株耐药菌对阿米卡星的敏感率最高(88％),对其他抗生素敏感率均较低,对头孢呋辛、头孢唑啉和亚胺培南的敏感率低至0.应用PCR检测耐药基因,其中blaNDM、blaCTX-M-15、blaTEM和blaSHV检出率较高,分别为64.1％、64.1％、91.3％和72.8％;blaKPC-2和blaVIM阳性率较低,分别为13.0％和3.3％,未检测出blaOXA-48耐药基因;测序发现59株blaNDM阳性菌中有35株为blaNDM-1,24株为blaNDM-5.结论耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌耐药基因检出率高;宁夏地区首次发现blaNDM-5亚型;blaNDM型耐药基因的阳性率高,应加强对基因的监测,控制其在医院内的传播流行.%Objective To explore the molecular epidemiology and mechanism of bacteria resistant to carbapenem-resistant Enterobacteriaceae. Methods The WHONET5.6 software was used to screen the imipenem-resistant bacteria in Enterobacteriaceae isolated from a comprehensive teaching hospitalin2014-2016. The positive strains were tested for the minimum inhibitory concentration of carbapenem by broth dilution method. The blaNDM, blaKPC, blaCTX-M-15 and blaOXA-48 resistance genes were detected byPCR.NDM subtypes were identified by sequencing. Results A total of 92 resistant strains were screened. The main sources of samples were bile, sputum and aseptic midstream urine. 92 strains of resistant bacteria were mainly isolated from hepatobiliary surgery, ICU and vascular surgery. Drug susceptibility test showed that 92 resistant strains had the highest sensitivity to amikacin (88％), lower sensitivity to other antibiotics, and the susceptibility to cefuroxime, cefazolin and imipenem was as low as 0. PCR was used to detect drug resistance genes. The detection rates of blaNDM, blaCTX-M-15, blaTEM and blaSHV were 64.1％, 64.1％, 91.3％ and72.8％, respectively. The positive rates of blaKPC-2 and blaVIM were 13.0％ and 3.3％, respectively. No blaOXA-48 resistant genes were detected. 35 of 59 blaNDM-positive strains were blaNDM-1 and 24 were blaNDM-5. Conclusion Detection rates of resistance genes in Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae were very high which may cause nosocomial infections. blaNDM-5 subtype was found in Ningxia for the first time, and the positive rate of blaNDM type resistance gene was high. We should strengthen the monitoring of blaNDM type drug-resistant strains to control their spread in the hospital.【期刊名称】《宁夏医科大学学报》【年(卷),期】2019(041)001【总页数】5页(P19-23)【关键词】肠杆菌科;碳青霉烯酶;新德里金属-β-内酰胺酶-1;耐药基因【作者】安童童;赵志军;李刚;康宇婷;刘学雷;杨宁爱;贾伟【作者单位】宁夏医科大学临床医学院, 银川 750004;宁夏医科大学总医院医学实验中心, 银川 750004;宁夏病原微生物重点实验室, 银川 750004;宁夏医科大学总医院医学实验中心, 银川 750004;宁夏病原微生物重点实验室, 银川 750004;宁夏医科大学临床医学院, 银川 750004;宁夏医科大学临床医学院, 银川 750004;宁夏医科大学临床医学院, 银川 750004;宁夏医科大学总医院医学实验中心, 银川750004;宁夏病原微生物重点实验室, 银川 750004【正文语种】中文【中图分类】R378.2肠杆菌科细菌分布广泛，多数为肠道正常菌群，部分为致病菌，在某些情况下，尤其是免疫缺陷、粒细胞缺乏患者易引起各种严重感染，如下呼吸道、消化道、泌尿道、手术切口等多部位感染，故称为条件致病菌，是医院感染性疾病最重要的致病菌，已成为医学界共同关注的问题[1]。

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性分析及基因型研究

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性分析及基因型研究庞峰;李艳华;贾秀芹;赵岐刚【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2013(31)4【摘要】目的探讨本院耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌(CRE)的耐药性及基因型.方法收集临床分离的30株CRE,用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,PCR检测碳青霉烯酶blaKPC、blaIMp、blaVIM、blaOXA-48及blaNDM-1基因,阳性结果进行DNA测序,BLAST比对确定基因型.结果 30株CRE以肺炎克雷伯菌为主,占80％；感染患者主要来自ICU；感染部位以下呼吸道为主,占93.3％；对常用抗菌药物呈多重耐药；其中25株改良Hodge试验阳性；PCR扩增和DNA测序显示11株为blaIMP-4,12株为blaIMP-8,未检出blaKPC、blaVIM、blaOXA-48及blaNDM-1目的基因.结论 blaIMP-4型和blaIMP-8型碳青霉烯酶是本院肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的主要型别,且已在ICU中局部流行.【总页数】3页(P307-309)【作者】庞峰;李艳华;贾秀芹;赵岐刚【作者单位】聊城市人民医院检验科 ,山东聊城252000;聊城市人民医院检验科 ,山东聊城252000;聊城市人民医院药剂科,山东聊城252000;聊城市人民医院检验科 ,山东聊城252000【正文语种】中文【中图分类】R446.5【相关文献】1.替加环素对不同耐药基因型耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的敏感性研究 [J], 刘立荣;李向阳;瞿玲娜;唐玉霞;曹景宏;颜小萍2.宿迁地区碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌耐药性及碳青霉烯酶基因型分析 [J], 张保荣;毕茹茹;孔子艳;马萍;顾兵3.昆明地区碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌耐药性分析及基因型检测 [J], 胡莹;邰文琳;马润;王卓;番寿蕊;王玉明4.耐碳青霉烯类抗菌药物的肠杆菌科细菌耐药基因型分析及治疗 [J], 艾杨;刘丽5.我院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌感染特点及碳青霉烯酶基因型分析 [J], 丁卉;吴大盈;江丽莉;李爱芳;李国雄;赵志钢因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌实验室检测的研究

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌实验室检测的研究1. 引言1.1 背景介绍碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌是当前临床上非常常见的耐药菌株之一，其对抗生素的耐药性严重威胁着临床治疗的效果。

碳青霉烯类抗生素是目前治疗耐药细菌感染的一线选择药物，但由于某些细菌产生了碳青霉烯酶等耐药机制，导致碳青霉烯类抗生素的治疗效果受到影响。

在临床实践中，对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的及时检测和监测非常重要。

只有通过准确的实验室检测方法，及时获知病原菌的耐药情况，医生才能制定出更合理有效的治疗方案，避免病情的恶化和传播。

本研究旨在通过实验室检测方法，对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌进行深入研究，探索其耐药机制和检测方法，为临床治疗提供更多参考依据和支持。

通过本研究，希望能够为解决临床碳青霉烯类耐药细菌感染提供一定的科学依据和实验数据支持。

【字数：242】1.2 研究目的本研究的目的是探讨碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌在实验室检测中的特点和表现。

通过对这类耐药菌的实验室检测方法进行研究，可以为临床诊断和治疗提供更准确和可靠的依据，减少耐药菌对人类健康造成的威胁。

通过深入了解碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的检测特点，更好地指导临床医生合理使用抗生素，预防耐药菌的传播和增加。

通过本研究，我们希望为抗生素耐药性及其防治提供更为科学的依据，为临床治疗提供更准确的参考信息。

1.3 研究意义碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌是目前临床上常见的一类耐药菌株，这些细菌对多种抗生素表现出耐药性，给治疗带来了一定困难。

对于这类细菌的检测和监测具有重要的临床意义。

本研究旨在利用实验室方法对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌进行检测，为临床上对这类细菌的防控提供参考依据。

1. 临床治疗指导：了解耐碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的分布状况和耐药性情况，可以为临床医师提供更准确的治疗指导，避免因抗生素选择不当而导致的治疗失败。

2. 防控措施制定：通过对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的实验室检测，可以及时发现和监测这些细菌的传播情况，为临床医院制定有效的防控措施提供科学依据。

碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因的检测

和Ｋ６同时含ＳＶ２因。６株Ｋ对厄他培南、罗培南、ｐＨ－基ｐ美头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和头孢西
丁均耐药，１Ｋ对亚胺培南中介，余菌株均耐药；仅株ｐ其２株Ｋｐ对氨曲南敏感，其余菌株均耐药；３
株Ｋｐ对哌拉西Ｓ／ｔ他唑巴坦耐药，株中介，，１２株敏感；４株Ｋ对左氧氟沙星敏感，耐药；ｐ２株３株Ｋｐ对阿米卡星和庆大霉素敏感，３株耐药。结论菌药物，以防治疗失败。碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的Ｋｐ均携带多种Ｂ内酰胺类耐药基因，－其菌株对临床常用抗菌药物的耐药性有很大差异，临床应根据药敏结果选用抗
．
临床论著．
碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的肺炎克雷伯菌Ｉ内酰胺酶基因的检测３一
姜梅杰秦霞
【要】目的研究碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的肺炎克雷伯菌Ｂ内酰胺类耐药基因的摘一
存在情况，为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集本院临床分离的６株对碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的Ｋ，ｐ采用特异性ＰＲ扩增和序列分析检测Ｂ内酰胺类耐药基因在碳青霉烯类抗Ｃ一菌药物敏感性降低的Ｋｐ中的存在情况，Ｅｔｓ方法测定菌株的药敏情况。结果经ＰＲ扩增和用 — ｔｅＣ
ｐｅｍｏｉｅｗｔｅｒａｅｅｓｔｉａｂｐｎｍｎｉｉｔｓｉｏａｅｒｍｕｏｐｔｌｃｒｅａｉｔｆｎｕｎａｉｄｃｅｓｄｓｎｉｖｔｔｃｒａｅｅａｔｏｉｓｌｔｄｆｏｏｒｈｓｉａｒｄａｖｒｅｙｏｈｉｙｏｂｃａｉ

碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究进展

碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究进展碳青霉烯类抗生素是目前临床上抗菌谱最广、抗菌活性最强的非典型β-内酰胺类抗生素，然而随着碳青霉烯类药物在临床上的广泛应用，细菌对其耐药性不断增加，给临床抗感染治疗带来了新的挑战。

为延缓其耐药现象的发展，本文从产生碳青霉烯酶、结合位点改变、外膜孔蛋白缺失或减少、主动外排泵过度表达、细菌生物膜系统等5个方面介绍了碳青霉烯类抗生素的耐药机制，为进行新的药物设计与开发提供依据，同时为临床医师谨慎、合理地应用碳青霉烯类药物提供参考。

[Abstract] Carbapenems are a class of β-lactam antibiotics with a broad spectrum and the strongest of antibacterial activity in currently clinic.However，with the wide-spread use of carbapenems in the clinical，the bacterial resistance to antibiotics is increasing，which has brought new challenges to the clinical treatment of infection.To delay the development of drug resistance，this text researched five aspects about the mechanisms of carbapenem resistant，which are as follows：the production of carbapenemases，altered binding site，the loss or reduce of outer membrane protein，overexpression of efflux pump system，bacterial biofilm system in this article.To can provide the basis for the design and development of new drugs，and provide reference for the clinicians to use the drug carefully and reasonably.[Key words] Carbapenem antibiotics；Carbapenemasese；Bacterium；Resistance mechanism碳青霉烯類抗生素是一类非典型β-内酰胺类抗生素，与头孢菌素类不存在交叉耐药性，对头孢菌素耐药的细菌仍有活性。

肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性分析

肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性分析【摘要】目的：分析肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性，为指导临床合理用药提供支持。

方法：选择本地医院临床分离并鉴定的200株肠杆菌科细菌为观察对象，采用纸片扩散法（L-B法）做碳青霉烯类抗菌药物的药敏性试验，比较肠杆菌科细菌对不同碳青霉烯类抗菌药物的耐药性差异。

结果：在本次分离鉴定的200株肠杆菌科细菌中，大肠埃希菌占比最高，其次为肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌。

药物的耐药性评估结果显示，肠杆菌科细菌对亚胺培南的敏感度最高、对厄他培南的敏感度次之，对美罗培南的敏感度最低，组间数据差异显著（P＜0.05）。

结论：现阶段肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性问题依然存在，但该药物依然能够取得满意效果，因此未来应高度重视碳青霉烯类抗菌药物的耐药性变化，做好预防，这对于提升治疗效果的意义重大。

关键词：肠杆菌科细菌；耐药性；亚胺培南；厄他培南；美罗培南前言：目前医院感染已经成为患者治疗干预阶段不容忽视的问题，而根据相关学者的调查发现，肠杆菌科细菌是医院感染的主要原因，在此类患者治疗期间，碳青霉烯类抗菌药物因为具有广谱抗菌活性好、通透性强等优点，成为诸多医师的首选。

但不容忽视的是，随着碳青霉烯类抗菌药物应用量的增加，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性逐渐增加，在一定程度上影响了患者康复进程，不容忽视[1]。

因此为更深入地了解肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性，本文以本地医院分离鉴定的200株样本为观察对象，资料如下。

1.资料方法1.1一般资料选择本地医院分离鉴定的200株肠杆菌科细菌样本为研究对象，入选时间范围为2022年2月-2023年6月，菌株来源于患者送检的尿液、痰液以及脓液、灌洗液等，同时排除了同一标本中检出的重复菌株。

1.2方法本次试验中所使用的仪器设备为全自动微生物分析仪（德国西门子公司，设备型号SCAN4）；使用GNS-448药敏卡，其中包含美罗培南与亚胺培南两种药物；厄他培南纸片采购自英国Oxoid公司。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌实验室检测的研究

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌实验室检测的研究1. 引言1.1 研究背景碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌是一类对抗生素产生抗性的细菌，其能够对抗碳青霉烯类抗生素的治疗。

随着抗生素的广泛使用，碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐药性不断增强，已经成为临床上常见的耐药菌株之一。

目前对于这类细菌的检测方法仍然存在一定的局限性，需进一步加强实验室检测的研究。

由于碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌在医院感染和传播中的重要性，了解其检测方法对于临床诊断和治疗具有重要意义。

本研究旨在探讨碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的实验室检测方法，并分析其实验结果及可能的影响因素，以期为相关研究提供参考。

通过本研究的实验结果，有望为临床上对这类耐药菌株的检测和治疗提供重要的依据，对于控制细菌耐药性的进展具有积极的意义。

1.2 研究目的本研究旨在探讨碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌在实验室检测过程中的相关问题，并提出相应的解决方案。

具体目的包括：1. 探究碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的特性和耐药机制，为后续研究提供基础性知识；2. 分析实验室检测方法的优势和不足之处，探讨其在临床诊断中的应用潜力；3. 总结影响实验结果准确性的因素，为提高检测效率提供参考建议；4. 探讨碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌耐药性的相关研究进展，为今后研究方向的确定提供参考依据。

通过本研究的开展，旨在为临床防控碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌提供科学依据和技术支持，从而更好地维护人类健康和公共安全。

1.3 研究意义碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌在临床上越来越常见，给医疗治疗带来了巨大挑战。

开展对这类细菌的实验室检测研究具有重要的意义。

通过对这类细菌的检测，能够及时发现耐药菌株的存在，从而指导临床用药，避免药物的滥用和耐药菌株的传播。

通过研究检测方法和影响因素，可以提高检测的准确性和灵敏度，为临床治疗提供更有力的支持。

对相关研究进展的总结和讨论，有助于拓展对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的认识，推动防治工作的进一步发展。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌实验室检测的研究

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌实验室检测的研究
碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, CRE）
是一类耐药性较高的细菌，对抗菌药物的治疗效果较差。

近年来，CRE感染的发病率呈上
升趋势，引起了广泛的关注。

研究CRE的传播途径和检测方法对于制定有效的防控策略具
有重要的意义。

CRE的传播途径主要包括医疗机构内的交叉感染和社区获得性感染。

交叉感染是指在
医疗机构内，由患者、医护人员或环境中的污染源传播给其他患者。

社区获得性感染是指
在社区环境中通过接触污染源而感染。

建立有效的感染控制措施，如手卫生、环境清洁和
患者隔离等，可以有效地降低CRE的传播风险。

CRE的实验室检测是诊断和监测CRE感染的重要手段。

常用的CRE检测方法包括传统的培养和鉴定方法以及分子生物学方法。

培养和鉴定方法主要是利用培养基和药物敏感试验
来筛选出对碳青霉烯类抗生素耐药的细菌，然后通过鉴定技术确认是否为CRE。

分子生物
学方法主要是通过PCR扩增和测序等技术来检测CRE特有的耐药基因，如blaNDM、blaKPC 等。

CRE的研究还包括了对其耐药机制和抗菌药物的开发。

CRE的耐药机制主要包括产生碳青霉烯酶、改变外膜通透性和增强泵机制等。

针对CRE的耐药机制，可以探索新的治疗策略，如开发靶向碳青霉烯酶的抗菌药物或使用联合疗法等。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的实验室检测和研究是对其传播和防控具有重要意义的。

通过建立有效的检测方法和探索新的治疗策略，可以有效地应对CRE感染带来的挑战。