AA-2βG与V_c对DPPH自由基清除作用的比较
219401819_双水相提取金银花叶总黄酮工艺优化及其抗氧化活性
许晓路，戴国庆，韦涵峰，等. 双水相提取金银花叶总黄酮工艺优化及其抗氧化活性[J]. 食品工业科技，2023，44（13）：242−248.doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022100038XU Xiaolu, DAI Guoqing, WEI Hanfeng, et al. Optimization of Aqueous Two-phase Extraction Technology of Total Flavonoids from Lonicera japonica Thunb. Leaves and Its Antioxidant Activity[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(13): 242−248.(in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022100038· 工艺技术 ·双水相提取金银花叶总黄酮工艺优化及其抗氧化活性许晓路，戴国庆，韦涵峰，俞 杰*（浙江树人大学生物与环境工程学院，浙江杭州 310015）摘 要：研究了乙醇-(NH 4)2SO 4双水相提取金银花叶总黄酮工艺，并探讨了总黄酮的抗氧化活性。
以(NH 4)2SO 4质量分数、液料比、浸提温度和浸提时间等因素为自变量，以总黄酮得率为指标，采用正交试验对工艺参数进行了优化。
通过对DPPH 自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除率的测定，评价总黄酮的抗氧化性能。
最佳实验条件为：(NH 4)2SO 4质量分数15%，液料比25:1 mL/g ，浸提温度50 ℃，浸提时间30 min 。
在该条件下，总黄酮得率为4.98%。
当金银花叶总黄酮浓度为0.48 mg/mL 时，DPPH 自由基的清除率为97.61%，浓度为0.72 mg/mL 时，羟基自由基的清除率为86.53%，超氧阴离子自由基的清除率为75.29%，表现出良好的抗氧化性能。
葡萄籽低聚原花青素化学成分及抗氧化研究
（ ０ ８ ０ ０ １ ２０４２２ ）
研究表 明 ， 葡萄籽原花青素是迄今 为止所发 现的最有 效 的 自由基 清除剂之一 ， 特别是低 聚花青 素可 以清 除 体 内的 自由基和活性氧 ， 能预防因人体血 液 中低密度
葡 萄籽原花 青素 由不 同数 目的黄烷 醇一 茶素 、 儿
表儿茶 素聚合而成 ，通 常将 二一 四聚体称为低 聚原 花 青素 （ｒｃａｉｏ ｃ ｌ ｏ ｅ， Ｐ ， ｐｏｙｎｄｌ ｉ ｍ ｒＯ Ｃ）五聚体 以上 的称 为 ｉｏｇ 高聚体 （ｒｃａｉｏ ｃ ｏ ｍ ｒ，Ｐ ）对于葡萄籽原 花 ｐｏｙｎｄｌ ｌ ｅｓＰ Ｃ ， ｉｐ ｙ 青素抗 氧化性 的研究报 道很 多Ｉ ｌ ｌ， ＿ 既包括动物体 内抗 ５ 氧化试 验 ，又包括体外 细胞 培养及用化 学方法测定 。
和ｏｃ 对 Ｄ Ｐ 自由基 和羟 自由基都 具有较好的清除活性。对 Ｄ Ｐ 自由基的清除作 用与 ｖ 相 ３，其 Ｉ 分别为 ｐ Ｓ ＰＨ ＰＨ ＂ － ｃ １ ０ｔ ／ Ｌ和 １ ９ Ｉ ／ Ｌ ． ｇｍ ２ ｘ ． ￣ ｍ ，明显 强 于 Ｖ 和 Ｔｏ ｘ ３ ｇ ｃ ｒｏ ；原花青 素 Ｂ 和 ｏｃｓ ｌ ２ ｐ 对羟 自由基 的抑制 率明显 高于 Ｖ 、 Ｅ ｃＶ 和 Ｔｏｏ。ｐ 经过层析分离纯化后得 到的原花青素 Ｂ 清除 Ｄ Ｐ 自由基 的效果有所提 高，但 对于羟 自由基的清除活 ｒ ｘｏｃ ｌ ｓ ＰＨ
ａ ｄ ＲＰ ｎ —ＨＰ ＬＣ． ｅａ ｔｏ ｉａ ｔａ ｔ ｉ ｆｐ ｏ ｎ ｈ ｃ ａ ｉ ｉ ， ｅ ｖ ｒｔｏ ， ｎ ｘｒｃ ｓ ａ ｐｅ ｐ ｌｐ ｅ ｏ ， ， Ｔｈ ｎ ｉｘｄ ｎ ｃ ｉ ｔ ｏ ｒ ａ ｔｏ ｙ ｎ ｄｎ Ｂ２ｒ ｓ ｅ ａｒ ｌｗｉｅｅ ｔａ ｔ， ｐ ｌ ｏｙ ｈ ｎ ｌ Ｖｃ ｖｙ ＶＥａ ｄ Ｔｒｌｘ ｗｅ ｅ ｄ ｔｒ ｉｅ ｙｓ ａ ｅ ｇｎ ＰＨ ａ ｉａ ｎ ｙ ｒ ｘ ｌｒｄ ｃ １ Ｈｏ ｖ ｒ ｐ ｏ ｎ ｈ ｃ ａ ｉ ｉ ｎ ｏｏ ｒ ｅｅｍ ｎ ｄ ｂ ｃ ｖ ｎ ｉ ｇ ＤＰ ｒ ｄ ｃ ｌａ ｄ ｈ ｄ ｏ ｙ ａ ｉ ａ． ｗｅ ｅ ， ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｎ ｄ ｎ Ｂ ｎ ｏ ｃＳ ｈ ｗｅ ｍｏ ｅ ｆ ｃｉｅ ｔ ｃ ｖ ｎ ｉｇ ２ ａ ｄ ｐ ｓ ｏ ｄ ｒ ｅｆ ｔｖ ａ ｓ ａ ｅ ｇｎ ＤＰ ｅ ＰＨ ・ ｗｉｈ Ｃ５ ｖ ｌ ｅ ｏ １２ ａ ｄ ．９ ￣ｍｏ／ ｔ Ｉ ０ ａｕ ｓ ｆ ．０ ｎ １３ ｌＬ．
15种柑橘果实主要酚类物质的体外抗氧化活性比较
ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ａｎｄ
ａｎ
ｏｂｖｉｏｕｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅｓｅ
ｍａｊｏｒ
ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ．Ｆｏｕｒ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ａｃｉｄｓ ｈａｄ
ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｃｌｉｎｉｎｇ ｏｒｄｅｒ ｏｆ ｇａｌｌｉｃ ａｃｉｄ（９２．３２％）＞ｃａｆｆｅｉｃ ａｃｉｄ（８５．２９％）＞ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ
美国铂金埃尔默公司。
高效液相色谱一ＤＰＰＨ／ＡＢＴＳ（ｈｉｇｈ 综合（ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ
ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ—ＤＰＰＨ／ＡＢＴＳ，ＨＰＬＣ．ＤＰＰＨ／ＡＢＴＳ）柱后衍生
系统联用技术分别对１５种柑橘果实主要酚类物质单体的抗氧化活性进行测定和比较分析。结果表明：抗氧化活性
ｐｏｔｅｎｃｙ
万方数据
６６
２０１５，ＶｏＬ３６，Ｎｏ．１１
食品科学
北京百灵威 吸光度。
※基础研究
式中：爿ｉ为空白对照组的吸光度；Ａ．为加样品溶液的 ＡＢＴＳ＋・抗氧化活性的测定参照Ａｒｎａｏ等¨２１的方法，
ｖｃ（上．ａｓｃｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ，纯度９９％）
公司：二甲基亚砜（ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ，ＤＭＳＯ）、 ＤＰＰＨ、ＡＢＴＳ、２，４，６．三吡啶基三嗪（２，４，６一ｔｒｉ Ｓ （２－ｐｙｒｉｄｙｌ）一ｓ—ｔｒｉａｚｉｎｅ，ＴＰＴＺ）、色谱级甲酸 ＮａＨＣＯ，等为分析纯
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ
Ｌａｎｄｓｃａｐｅ
Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ
一种中药组合物的抗氧化清除自由机效果实验
一种中药组合物的抗氧化清除自由机效果实验【摘要】目的考察一种延缓衰老美白肌肤的组合物，通过实验验证其抗氧化清除自由机的效果。
方法将该组合物通过水煎的方法提取其有效成份，通过抑制酪氨酸酶活性的实验[1]和对dpph 自由基的清除实验[2]这两个实验来考察。
结果本组合物提取液有较强的酪氨酸酶活性抑制能力，其活性亦与vc乙基醚、熊果苷相当，有较强的dpph自由基清除能力，其活性也与vc乙基醚、熊果苷相当。
结论本组合物具有抗氧化清除自由机的效果，有延缓衰老美白肌肤的作用。
【关键词】中药组合物；抗氧化清除自由机doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2012.08.650 文章编号：1004-7484（2012）-08-2938-02一种中药组合物，其组分以重量计为：芍药花41份，银杏叶21份，黄芪24份，枸杞子14份，被作为延缓衰老美白肌肤的袋泡茶使用。
为验证其是否具有所述效果，笔者进行了以下实验：1 抑制酪氨酸酶活性的实验1.1 仪器与试剂 uv762紫外可见分光光度计（上海分析仪器厂），fa2004电子分析天平（上海良平仪器有限公司），酪氨酸酶、vc乙基醚、熊果苷为成都德莱生物科技有限公司提供。
1.2 样品的制备称取芍药花41g、银杏叶21g、黄芪24、枸杞子14g，加水1000ml，置烧瓶中加热，保持微沸1.5小时，滤过，收集滤液备用，再加水1000ml，保持微沸1小时，滤过，收集滤液，1.3 测试方法取四只试管分别标上1#、2#、3#、4#；参照表1的试剂用量和浓度，在四只试管内分别加入各列所列的相应反应液，振摇混和均匀，于37oc预热10min，然后在各试管内分别加入酪氨酸酶溶液，于37°c准确反应5min，迅速转移至比色皿中，于475nm处测吸光度值（a）。
1.4 结果计算与统计按下式计算对酪氨酸酶的抑制率：抑制率=[1-（a3-a4）/（a1-a2）]×100%式中：a1、a2、a3、a4分别代表表3中1#、2#、3#、4#四个试管中反应后于475nm处所测得的吸光度值。
水杉种子中总黄酮含量及其清除自由基能力分析
水杉种子中总黄酮含量及其清除自由基能力分析作者：杨俊杰王海燕张耀洲来源：《湖北农业科学》2013年第02期摘要：用紫外分光光度法，以芦丁作对照，测定水杉（Metasequoia glyptostroboides）种子中的总黄酮含量，以BHT和维生素C作对照，比较其对DPPH自由基的清除能力。
结果表明，水杉种子中总黄酮含量为34.7 mg/g，其清除DPPH自由基的能力随质量浓度升高而增强，达到EC=145.6 μg/mL，低浓度时低于BHT，随着浓度增高，高于相同质量浓度的BHT，低于维生素C，但在400 μg/mL时，与维生素C持平。
水杉种子中黄酮有较高利用价值，作为天然抗氧化剂有良好的应用价值。
关键词：水杉（Metasequoia glyptostroboides）种子；总黄酮；抗氧化；自由基中图分类号：O657.32；R285 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）02-0423-02水杉（Metasequoia glyptostroboides）为裸子植物门杉科水杉属，是世界珍稀孑遗物种。
据《中国中药资源志要》[1]记载，其叶、种子有清热解毒、消炎止痛功效，常用于治疗痈疮肿痛，藓疮等症，《名医别录》列为中品，谓煮汤洗，可治臁疮，《本草纲目拾遗》载杉木油治一切顽癣[2]。
水杉中化学成分较为复杂，包括黄酮类、萜类、木脂素、类胡萝卜素、甾醇等[3]。
水杉中的黄酮具有抗心肌肥厚和心律失常的药理作用[4]，其叶中的总黄酮具有抗氧化功能[3]，早期研究表明，肿瘤、冠心病和衰老均与自由基引起的膜脂质氧化性损伤有关。
目前已有的研究主要集中在水杉叶方面，而对水杉种子的研究较少。
本试验对水杉种子中黄酮的自由基清除能力进行分析，为其进一步的开发应用提供参考。
1 材料与方法1.1 材料供试水杉种子于2011年11月采自信阳农业高等专科学校校园内。
TU-1810紫外可见分光光度计购自北京普析通用仪器有限公司，芦丁标准品（批号10080-200707）购自中国药品生物鉴定所。
DPPH法测定紫红薯提取物清除自由基的能力
除遗传因素外 ， 氧化物在动物呼吸过程 中产生 的氧 自
由基造成机体损伤是衰老的原 因。随着对 自由基认识 的深入 ， 近代 医学指出 ， 内 自由基反应与一些疾病的 体
发生 、 发展和老化进程密切相关 ， 内过剩的 自由基对 体
构成组织细胞的生物大分子起攻击作用 ， 使组织器官 的形态结构和生物功能的完整受到急性和慢性 损伤 ，
老的征象ｆ ｌ ｊ 。食用油脂 和富脂食 品的酸败也是 由 自由 基引发而致 ，它不仅使油脂本身受 到破坏失去营养 ，
而且其氧化产物和中间物会伤害生物膜 、 、 酶 维生素和
型旋转蒸发仪 ： 上海亚荣生化仪器厂 ；Ｋ ８Ｂ电热真 Ｚ 一２ 空干燥箱 ： 上海实验仪器厂有限公 司；０ Ｆ 一 １ １Ａ ２电热鼓 风干燥箱 ： 上海 申光仪器仪表有限公 司。
Ｗ Ａ ＧＨ — ａ ｌ Ｈ ｉ－ ｕ Ｎ ｅ ｃｉ＿ ＵＱｕ ｈ ｉ 。． （ ．ｕｈ ｕ ｇｉ ｌ ｒｌ ｏ ｅｅ Ｓ ｚｏ １０ ８ Ｊ ｎ ｓ， ｈｎ ； ． ａｊ ｇ ｇ ｃｌ ｒ ｎ ｅ ｉ ｏ ｅｅ ｆ ｏｄ １Ｓ ｚｏ ｒ ｕ ｕａ Ｃ ｌ ｇ ， ｕｈ ｕ ０ ，ｉ ｇｕ Ｃ ｉ ２ Ｎ ｎｉ ｒ ｕｔ ａ Ｕ ｉ ｒ ｔＣ ｌｇ ｏ， Ａ ｃｔ ｌ ２ ５ ａ ａ ｎ Ａ ｉ ｕ ｌ ｖ ｓｙ ｌ ｏ Ｆ
Ｎａｊ ｇ ２ ０ ９ ， ｉｎ ｓ ， ｈｎ ） ｎｉ １ ０ ５ Ｊ ｇｕ Ｃ ｉａ ｎ ａ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｄｅｅ ｍｉ ａｉｎｏ ｓ ｒ ｃ ： ｔ ｒ ｎ ｔ ｆＤＰＰ ａ ｔｏ ｉ ａ ｔｐ ｇ ｎ ｕ ｐ ｅｓ ｅ ｏ ａｏ ｒ ｌｏ ｅｆｅ ａ ｉａｓ Ｅｘ ｅｉ ｎ ｓ ｏ Ｈ ｎ ｉｘｄ ｎ ｉｍｅ ｔｐ ｒ ｌ ｗｅ ｔ ｔｔ， ｅｎ ｖ ｒ ｅｒ ｄ ｃ ｌ． ｐ ｒｍｅ ｔ ｐ ｓ ｏ ｄ ｔａ ｔ ｈ ｕ ｌ ｗｅ ｔｐ ｔｔ ｉｍｅ ｔｃ ｎ ｅ ｔａｉｎ ｎ ｒａ ｅ ｔ ｎｉｘｄ ｎ ａ ａ ｉ ａ ｅ ｂ ｅ ｈ ｗｅ ｈ ｔｗｉ ｔ ｅ ｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｏａｏ ｐｇ ｎ ｏ ｃ ｎｒ ｔ ｓｉｃ ｅ ｓ ，ｉ ａ ｔ ｉａ ｔｃ ｐ ｃｔ ｈ ｖ ｅ ｎ ｈ ｐ ｏ ｓ ｏ ｙ ｉｃ ｅ ｓ ｄ Ｒｕｉ ｏ ａｅ ｔ ｈ ｎ ｕ ｐ ｅ ｓ ｅ ｏａｏａ ｔ ｘ ｄ ｎ ｉｍ ｅ ｔ ｗｉ ｈ ｘ ｅ ｔ ｎ ｏ ｅ ｎ ｒａ ｅ ． ｔ ｃ ｍｐ ｒ ｄ ｗｉ ｔ ｅＶｃａ ｄ ｐ ｒ ｌ ｗｅ ｔｐ ｔｔ ｎ ｉ ｉａ ｔｐｇ ｎ ， ｔ ｔｅ ｅ ｃ ｐｉ ｆｔ ｎ ｈ ｏ ｈ ｏ ｈ ａ ｉ ｔ ｆ ｒｅｒ ｄ ｃ ｌ ｈ ｎＶｃ ｕ ｉｈ ｒｔ ａ ａ ｆｒ ｔ ． ｕ ｐ ｅｓ ｅ ｏａｏｐ ｇ ｎ ｎ ａｆｔ ｌａ ｅ ｂ ｌ ｙｏ ｅ ａ ｉａｓｔ ａ ，ｂ ｔ ｇ ｅ ｈ ｎｔ ｔｏ ｕｉ Ｐ ｒ ｌ ｗｅ ｔ ｔｔ ｉｍｅ ｔａ ｄａ ｈ ｌ ｃｅ ｒｔ ｉ ｆ ｈ ｈ ｎ ｐ ｏ ｈ ＤＰ ＰＨ ｒｅｒ ｄｃ ｌ ｎ ｉｉｉｎｃ ｐ ｃｔ ｆ１ ３ｍｇｍＬ． ｎ ｔ ａ ｉｔ ｅ ｖ ｅ ａ ｉａ ｓ００ ６ １ｆｒ ｆｅ ａ ｉａ ｈｂ ｔ ａ ａ ｉｙｏ ６ ／ ｉ ｏ ａ ｄ ｉ ｂｌ ｙｔ ｒ ｍｏ ｅｆ ｅｒｄ ｃ ｌ ．０ ｏ Ｅ． ｓ ｉ ｏ ｒ Ａ Ｋ ｅ ｒ ｓ ｐ ｒ ｌ ｗｅ ｔｐ ｔｔ； ｕ ｐｅ ＤＰＰ ａ ｔ ｘｄ ｎ ｙ ｗｏ ｄ ： ｕ ｅｓ ｅ ｏａｏ ｐ ｒ ｌ； ｐ Ｈ； ｎ ｉ ｉ ａ ｔ ｏ
不同类胡萝卜素清除自由基能力的比较
不同类胡萝卜素清除自由基能力的比较The Comparison of Free Radical Scavenging Capacity of Carotenoids袁磊;刘晓庚;唐瑜;∙1:南京财经大学食品科学与工程学院∙2:江苏省粮油品控重点实验室摘要：比较不同结构类胡萝卜素清除自由基能力。
分别以虾青素、β-胡萝卜素、番茄红素和叶黄素为对象,采用DPPH法、水杨酸法和邻苯三酚自氧法分别表征清除DPPH·自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基能力。
结果表明类胡萝卜素具有较强的清除自由基能力,且清除能力均遵循剂量-效应关系;对DPPH·自由基、羟基自由基和超氧阴离子的清除能力大小关系为虾青素>叶黄素>β-胡萝卜素>番茄红素。
类胡萝卜素清除自由基能力优良,不同结构类胡萝卜素清除自由基能力有差异,此类功能性产品具有广阔的市场前景。
关键词：类胡萝卜素;;结构;;自由基;;清除能力Abstract: Keywords: 基金项目:江苏省粮油品质控制及深加工技术重点实验室资助项目(LYPK201301)作者:袁磊;刘晓庚;唐瑜;Email:参考文献：∙[1]Shon M Y,Kim T H,Sung N J.Antioxidants and free radical scavenging activity of Phellinus baumii(Phellinus of Hymenochaetaceae)extracts[J].Food Chemistry,2003,82(4):593-597.∙[2]方允中,杨胜,伍国耀.自由基、抗氧化剂、营养素与健康的关系[J].营养学报,2003,25(4):337-343.∙[3]Rao P S,Kalva S,Yerramilli A,et al.Free Radicals and Tissue Damage:Role of Antioxidants[J].Free Radicals and Antioxidants,2011,4:2-7.∙[4]Fujisawa S,Atsumi T,Kadoma Y,et al.Antioxidant and prooxidant action of eugenol-related compounds and their cytotoxicity[J].Toxicology,2002,177:39-54.∙[5]Michaud D S,Feskanich D,Rimn E B,et al.Intake of specific carotenoids and risk of lung cancer in 2 prospective US cohorts[J].Journal of Clinical Nutrition,2000,72(4):990-997.∙[6]Bendich A.Carotenoids and the Immune Response[J].The Journal of Nutrition,1989,119(1):112-115.∙[7]范晓岚,杨军,糜漫天,等.β-胡萝卜素的抗氧化作用与疾病预防[J].中国公共卫生,2003,19(4):479-480.∙[8]孙震,姚惠源.类胡萝卜素的抗氧化活性与其量子化学参数的相关研究[J].食品与机械,2007,23(4):56-59.∙[9]宋素梅.南极磷虾中虾青素的提取与分离纯化[D].无锡:江南大学,2013.∙[10]胡小明,蔡万玲,代斌.天然β-胡萝卜素的提取工艺条件研究[J].食品工业科技,2006,27(10):133-136.∙[11]赵功玲.番茄红素的提取及纯化工艺研究[D].杨凌:西北农林科技大学,2005.∙[12]Mellors A,Tappel A L.The inhibition of mitochondrial peroxidation by ubiquinone and ubiquinol[J].Journal of Biologieal Chemistry,1966,241(19):4353-4356.∙[13]Rufian H J A,Morales N F J.Effect of in vitro enzymatic digestion on antioxidant activity of coffee melanoidins and fractions[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2007,55(24):10016-10021.∙[14]王建华,张民,甘璐,等.枸杞多糖-2的抗羟基自由基氧化作用[J].食品科学,2001,22(1):11-13.∙[15]吴亚楠,鲁晓翔,连喜军.玉米须黄酮清除自由基活性的研究[J].食品研究与开发,2009,30(1):5-8.∙[16]陈留勇,孟宪钧,贾薇,等.黄桃水溶性多糖的抗肿瘤作用及清除自由基、提高免疫活性研究[J].食品科学,2004,24(1):167-170.∙[17]许申鸿,杭瑚,李运平.超氧化物歧化酶邻苯三酚测活法的研究及改进[J].化学通报,2001,64(8):516-519.∙[18]Smoluk G D,Fahey R C,Ward J F,et al.Interaction of glutathione and other low-molecular weight thiols with DNA:Evidence for counter ion condensation and colon depletion near DNA[J].Radiation Research,1998,114(1):3-10.∙[19]王云海,罗云敬,钟儒刚.过氧亚硝酸根对蛋白质损伤的研究进展[J].化学进展,2007,19(6):893-901.∙[20]Shen H M,Yang F C,Ding W X,et al.Superoxide radical-initiated apoptotic signaling pathway in selenite-treated Hep G(2)cells:mitochonaria serve as the main target[J].Free Radical Biology&Medicine,2001,30(1):9-21.∙[21]Hosaka S,Obuki M,Nakajima J,et parative study of antioxidant as quenchers or scavengers of reactive oxygen species based on quenching of MCLA-dependent chemiluminescence[J].Luminescence,2005,20(6):419-427.∙[22]Sumanont Y,Murakami Y,Tohda M,et al.Evaluation of the nitric oxide radical scavenging activity of manganese complexes of curcumin and its derivative[J].Biological&Pharmaceutical Bulletin,2004,27(2):170-173.∙[23]Britton G.Structure and properties of carotenoids in relation to function[J].The Journal of the Federation of American Societies for Experimental Biology,1995,9(15):1551-1558.∙[24]周敏娜,杨英杰,吕庆章.4种类胡萝卜素抗氧化性质的量化计算[J].计算机与应用化学,2011,28(10):1305-1308.∙[25]陈东方,王海玉,李立,等.天然虾青素缓解体力疲劳作用的实验研究[J].中国现代医学杂志,2010,20(17):2567-2569.∙[26]陈志强,任璐,江慎华,等.虾青素降血糖作用的研究[J].食品科学,2008,29(7):402-404.∙[27]Gunasekera R S,Sewgobind K,Desai S,et al.Lycopene and lutein inhibit proliferation in rat prostate carcinoma cell[J].Nutrition and Cancer,2007,58(2):171-177.∙[28]Olmedilla B,Gr anado F,Blanco I,et al.Lutein,but notα-tocopherol,supplementation improves visual function in patients with age-related cataracts:A 2-y doubleblind,placebo-controlled piot study[J].Nutrition,2003,19(1):21-24.∙[29]Bertram J S,Pung A,Churley M,et al.Diverse carotenoids protect against chemically induced neoplastic transformation[J].Carcinogenesis,1991,12(4):671-676.∙[30]Fryburg D A,Mark R J,Griffith B P,et al.The effect of supplemental beta-carotene on immunologic indices in patients with AIDS:a pilot study[J].The Yale Journal of Biology and Medicine,1995,68(1):1923.∙[31]Blum A,Monir M,Wirsansky I,et al.The beneficial effects of tomatoes[J].European Journal of Internal Medicine,2005,16(6):402-404.∙[32]Rao L G,Mackinnon E S,Josse R G,et al.Lycopene consumption decreases oxidative stress and bone resorption markers in postmenopausal women[J].Osteoporosis International,2007,18(1):109-115.∙[33]赵娟娟.番茄红素的抗氧化活性研究[J].食品科技,2010,35(7):62-65.∙[34]赵学超.蛋黄中叶黄素分离纯化及功能性研究[D].无锡:江南大学,2009.∙[35]李大婧,刘志凌,刘春泉.叶黄素酯和叶黄素抗氧化作用比较[J].中国食品学报,2008,8(5):28-32.。
4种黄酮小分子对DPPH自由基的清除作用及构效关系研究
4种黄酮小分子对DPPH自由基的清除作用及构效关系研究刘帅涛;陶慧林;李锦艳【摘要】The scavenging activities, stabilities and hemi-inhibitory concentrations ( IC50 ) of 4 fla-vonoids, including rutin, vitexin, kaempferide and hyperoside to DPPH free radical were investigated by UV - Vis spectra, by using natural antioxidants ascorbic acid as the comparison. The relations of the flavonoids structures with their antioxidant activities were also discussed. The results indicated that different antioxidants have different balance time in scavenging the DPPH free radical, in which rutin need the longest time. Four flavonoids and ascorbic acid have scavenging effect to DPPH free radical, and the dose-effect relationship exists. The DPPH free radical scavenging abilities of these five antioxidants were as follows; hyperoside > ascorbic acid > rutin > kaempferide > vitexin. The a-nalysis on the structures of four flavonoids showed that the pyrocatechol hydroxy group of B ring was necessary for the antioxidant activities of flavonoids compounds. The hydroxymethylation of - OH at B ring and the glycosylation of - OH at A ring were not favorable for antioxidant activities. The gly-cosylation of 3-OH at C ring could increase the antioxidant activities of flavonoids, in which the antioxidant activity of monloglycoside ( e. G. Hyperoside) is better than that of diglycoside (e. G. Rutin).%通过紫外可见光谱测定了4种黄酮小分子芦丁、牡荆素、山奈素、金丝桃苷对DPPH自由基的清除率、稳定性及半抑制浓度(IC50),并以常用的天然抗氧化剂抗坏血酸作为对照,考察了其抗氧化效果,探讨了黄酮类化合物的抗氧化性与结构的关系.结果表明:不同的抗氧化剂清除DPPH自由基达到平衡的时间不同,芦丁所需时间最长.4种黄酮小分子及抗坏血酸均对DPPH自由基有清除效果,并存在一定的量效关系.对DPPH自由基的清除能力从大到小依次为金丝桃苷、抗坏血酸、芦丁、山奈素、牡荆素.结构分析表明,B环邻二酚羟基是黄酮类化合物抗氧化所必需的基团,其羟甲基化及A环羟基糖苷化不利于黄酮类化合物的抗氧化活性.而C环3-OH的糖苷化对抗氧化活性有利,且单糖苷优于双糖苷.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2012(031)001【总页数】5页(P71-75)【关键词】黄酮小分子;DPPH自由基;构效关系【作者】刘帅涛;陶慧林;李锦艳【作者单位】桂林理工大学化学与生物工程学院,广西桂林541004;桂林理工大学化学与生物工程学院,广西桂林541004;桂林理工大学化学与生物工程学院,广西桂林541004【正文语种】中文【中图分类】O657.3;O625.311黄酮类化合物(Flavonoids)是一类在自然界广泛分布的多酚类物质。
DPPH自由基清除能力检测试剂盒说明书
DPPH 自由基清除能力检测试剂盒说明书微量法货号：BC4755规格：100T/48S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体80mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体30mL×1瓶（自备）常温保存试剂二粉剂×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：无水乙醇自备；2、试剂二：粉剂置于瓶内EP 管中。
临用前加入4.05mL 试剂一振荡溶解，用不完的试剂可于-20℃保存1个月，建议分装保存，避免反复冻融；临用前根据试验所需量按照试剂二：试剂一（V:V ）=4：21的比例配制成工作液，现配现用，用不完的工作液可于2-8℃保存一周；3、试剂三：10mg 维生素C 。
临用前加入1mL 提取液，充分振荡溶解，配成10mg/mL 的维生素C 溶液，2-8℃保存两周；用于阳性对照。
产品说明：DPPH 自由基一种很稳定的氮中心的自由基，是样本抗氧化能力的重要指标之一，广泛应用于抗氧化类食品、保健品及药品的研究中。
DPPH 自由基有单电子，其醇溶液呈紫色，在515nm 处有强吸收。
当有抗氧化剂存在时，DPPH 自由基被清除，其溶液颜色变浅，515nm 的吸光度下降，在一定范围内其吸光度的变化与自由基被清除的程度成正比。
本试剂盒中，通过吸光度下降的程度来反映样本清除DPPH自由基的能力。
DPPH ·DPPH ·H注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅、台式离心机、无水乙醇、研钵/粉碎机、烘干箱、30~50目筛和蒸馏水。
操作步骤：一、样本的制备（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）AntioxidantsBeijing Solarbio Science &Technology Co.,LtdTel:400-968-6088Fax:************（1）植物样本的制备：将新鲜样本置于60℃烘箱烘干至恒重，研钵研碎（或粉碎机粉碎），过30~50目筛；称取约0.05g样本，加入1mL提取液后置于40℃水浴锅中浸提30min；10000rpm室温离心10min，取上清，置于冰上待测。
抗坏血酸清除DPPH自由基的作用机理
抗坏血酸清除DPPH自由基的作用机理
李铉军;崔胜云
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2011(032)001
【摘要】采用光谱、电化学和质谱分析方法研究抗坏血酸对DPPH自由基清除机理,发现DPPH在溶液中是以自由基形态和含氮-氮双键的高度共轭结构的正离子态DPPH+存在且抗坏血酸对上述两种形态都有清除作用.由于DPPH自由基与DPPH+在溶液中处于平衡态,故同种抗氧化剂用517nm波长处DPPH+的吸收强度变化可间接评价对DPPH自由基的清除作用,但对不同抗氧化剂而言,因抗氧化剂对DPPH的不同形态相对清除作用的不同会带来较大的误差或误判.本研究对准确评价抗氧化剂的自由基清除作用具有一定指导意义.
【总页数】5页(P86-90)
【作者】李铉军;崔胜云
【作者单位】延边大学长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室,吉林延吉,133002;延边大学长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室,吉林延
吉,133002
【正文语种】中文
【中图分类】O651
【相关文献】
1.核桃仁抗氧化活性成分对自由基DPPH清除时间和清除率的研究 [J], 汤昆;邱娜;邱金东
2.DPPH法测定自制蜂王幼虫美白、抗衰老防皱面霜清除DPPH自由基的能力 [J], 谭曜; 陈平; 许赛慧; 朱杰
3.响应曲面优化提取半枝莲中总黄酮及清除DPPH自由基作用的研究 [J], 李可同;李棣华;吕沅珊;刘俊红
4.查尔酮类似物清除DPPH自由基和保护H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞损伤的抗氧化活性 [J], 黄丽丽;陈婵婵;汪佳兵;张佳枫;吴建章
5.黑豆异黄酮的提取分离及其对DPPH自由基的清除能力 [J], 王宁;张叶韬;芦晓
芳
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AA_2_G与V_c对DPPH自由基清除作用的比较
图1
AA 2 G 的分子结构
1
材料与方法
1. 1 试剂及仪器 2 O D 葡 萄糖基 L 抗 坏血酸 ( AA 2 G) ( 宁 夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实 验室从枸杞干果中分离得到[ 8] ) , 维生素 C ( 上海润 捷化学试剂有限公司 ) , DPP H ( 美国 Sigm a Aldrich
V ( 溶剂 ) / mL 3. 98 3. 96 3. 92 3. 90 3. 84 4. 00 5. 00
空白 参比
9. 9 mg 的 DPPH , 用无水乙醇定容于 50 mL 容量瓶 中, 配成 c= 5. 0 ! 10- 4 mol/ L 溶液, 避光保存, 备用. 2) V c 溶 液的配制 . 称取 3. 5 mg 的 L AA, 用 = 60% 乙醇 定 容于 10 m L 容量 瓶 中, 配 成 c = 2. 0 ! 10- 3 m ol/ L 溶液, 避光保存, 备用 . 3) AA 2 G 溶液的 配制. 称取 6. 8 m g 的 AA 2 G, 用 = 60% 乙醇定容于 10 mL 棕色容量瓶中 , 配成 c= 2. 0 ! 10 - 3 mol/ L 溶液 , 避光保存 , 备用 . 4) 反应溶液的配制. 用 0. 01 mol/ L 柠檬酸溶液 与 0. 01 m ol/ L 柠檬酸钠溶液的混合溶液配成 pH = 3. 0, 4. 0, 5. 0, 6. 0 的缓冲溶液 ; 再用缓冲溶液分别 配成反应溶液: 乙醇 ( = 60% ) 缓冲溶液( = 40% , pH = 3. 0) ∀ ; 乙醇 ( = 60% ) 缓冲溶液 ( = 40% , pH = 4. 0) #; 乙醇 ( = 60% ) 缓冲溶液 ( = 40% , pH = 5. 0) ∃; 乙醇 ( = 60% ) 缓冲溶液 ( = 40% , pH = 6. 0) %; 乙醇( = 60% ) 水( pH = 7. 0) . 1. 2. 2 V c 与 AA 2 G 对 DPPH 的清除作用 DP PH 自由基分析法的原理是 , 依据 DPPH 具有单电 子而使其在 = 517 nm 处有一强吸收( 深紫色) , 当有 自由基清除剂与其单电子配对而使其吸收逐渐减弱 ( 颜色变淡) 或消失. 一般褪色程度与其所接受的电子 数呈定量关系, 因而可用分光光度法进行定量分析, 以评价自由基清除剂的能力, 其能力用清除率来表 示. 一般, 抗氧化剂对 DPPH 的清除率越大, 其抗氧 化能力越强 . 实验中分别加入一定体积的 V c 或 AA 2 G 溶液到 5 mL 棕色容量瓶中, 充分混合 , 室温下避 光静置 30 min, 在最大吸收波长( 517 nm) 处测定其吸 光度 A ( 表 1) . 依据以下公式计算清除率 . 清除率 S = [ 1- ( A i - A j ) / A 0 ] ! 100% .
AA-2βG与Vc对DPPH自由基清除作用的比较
AA-2βG与Vc对DPPH自由基清除作用的比较张自萍;刘晓明;郝艳芳;王玉炯【期刊名称】《宁夏大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(031)004【摘要】用DPPH自由基(DPPH·)清除法,比较了不同浓度、不同pH值时Vc和AA-2卢G对DPPH·的清除作用.结果表明,AA-2βG与Vc对DPPH·的清除能力均与浓度呈明显量效关系;AA-2βG对DPPH·的清除作用是一个长时间的过程,且清除能力随pH值的升高而下降;在乙醇(()=60%)-柠檬酸缓冲液(()=40%,pH=3.0)体系中,AA-2βG对DPPH·的清除能力较Vc强.与Vc相比,AA-2βG具有较高的稳定性和较长的时效性,说明其具有与Vc相似但又不完全相同的抗氧化机制.可为AA-2βG作为稳定的Vc衍生物应用于医药、食品和化妆品等领域提供基础数据,为正确理解枸杞的组效关系,揭示枸杞抗氧化、抗衰老等药效机制提供参考.【总页数】4页(P377-380)【作者】张自萍;刘晓明;郝艳芳;王玉炯【作者单位】宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川,750021;宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川,750021;宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川,750021;宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川,750021【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.不同豆浆制备工艺活性成分与DPPH自由基清除能力比较研究 [J], 于寒松;张伟;陈今朝;胡耀辉2.欧李仁多肽的制备及其对DPPH自由基清除作用的研究 [J], 张英;郭宝禹;张玲;侯红萍3.榅桲子总三萜提取工艺及其DPPH·自由基清除作用的研究 [J], 阿卜杜热合曼·努如拉;古丽巴哈尔·艾力;哈及尼沙;李改茹4.苜蓿总黄酮纯化及纯化前后对DPPH自由基清除能力比较 [J], 郭新颖;李晨阳;王梦晗;杨莉;陈宇姝;马晓宇;朱玟;李波5.6种小型浆果营养成分及DPPH自由基清除活性比较 [J], 唐晓姝;胡博;陈雪梅;张白曦因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
维生素C清除自由基能力3种检测方法的比较
维生素C清除自由基能力3种检测方法的比较阿吉姑·阿布都热西提;买尔旦·马合木提;马合木提·乌斯满;艾尔肯·依不拉音【摘要】目的:探讨3种不同方法检测维生素C清除自由基能力的差异,为选择一种有效评价抗氧化活性物质清除自由基能力的方法提供依据.方法:分别采用二苯代苦味肼基自由基(DPPH?分光光度法、Mn2+-H2O2-PAR分光光度法和羟自由基(稯H)试剂盒法对不同浓度的维生素C清除自由基(稯H、DPPH?的能力进行比较.结果:DPPH贩止夤舛确ān2+-H2O2-PAR分光光度法、稯H试剂盒法检测0.024 mg/ml 维生素C对自由基的清除率分别为80.09%、95.00%、9.56%,自由基清除率为50%时维生素C浓度(IC50值)分别为0.005、0.013、0.200 mg/ml. 结论:Mn2+-H2O2-PAR分光光度法的检测结果与DPPH贩止夤舛确ɑ疽恢?该方法可能可以作为评价抗氧化活性物质清除自由基能力的有效方法之一.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2008(031)005【总页数】3页(P578-579,582)【关键词】分光光度法;维生素C;自由基【作者】阿吉姑·阿布都热西提;买尔旦·马合木提;马合木提·乌斯满;艾尔肯·依不拉音【作者单位】新疆医科大学药学院药剂/物化教研室,新疆,乌鲁木齐,830000;新疆医科大学附属肿瘤医院,新疆,乌鲁木齐,830000;新疆医科大学药学院化学教研室,新疆,乌鲁木齐,830000;新疆医科大学药学院分析测试中心,新疆,乌鲁木齐,830000【正文语种】中文【中图分类】R927.2羟自由基(·OH)是一种氧化能力很强的自由基，可以使糖类、氨基酸、蛋白质、核酸和脂类等发生氧化，·OH与衰老、肿瘤、辐射损伤和细胞吞噬有关[1]。
二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)是一种稳定的有机自由基，通过检测抗氧化剂对DPPH·的清除能力可以表示其抗氧化性的强弱。
α-生育酚与自由基DPPH·的反应机理研究论文摘要
α-生育酚与自由基DPPH·的反应机理研究论文摘要引言自由基是一种高度活性的分子，并且可以与许多物质发生反应。
在人体内，自由基的产生可能会导致许多健康问题，例如癌症、心血管疾病和神经退行性疾病。
因此，研究自由基的特性以及防止自由基造成的损害对于保持人体健康至关重要。
α-生育酚作为一种天然抗氧化剂，已被广泛应用于各种食品和保健品中。
本文旨在研究α-生育酚与自由基DPPH·的反应机理。
实验方法本实验通过紫外分光光度法对α-生育酚与自由基DPPH·反应的机理进行研究。
在实验中，我们分别制备了一组DPPH·和α-生育酚反应溶液和一个对照组，单独制备了DPPH·和α-生育酚溶液。
我们在1分钟，2分钟和3分钟时分别测量了反应溶液和对照组的吸光度，并用这些测量值计算了α-生育酚对DPPH·的清除率。
实验结果我们的研究表明，α-生育酚与DPPH·的反应机理是一种自由基清除的过程。
在实验中，我们发现，随着反应时间的增加，α-生育酚的清除率也随之增加。
我们还发现，在相同的时间段内，α-生育酚对自由基的清除率与其初始浓度有关。
当α-生育酚的初始浓度为20μM时，其清除率为64.2%。
当α-生育酚的初始浓度为40μM时，其清除率为81.1%。
讨论α-生育酚作为一种天然抗氧化剂，可以保护人体免受自由基的损害。
本实验的结果表明，α-生育酚与DPPH·的反应机理是一种自由基清除的过程。
当α-生育酚和DPPH·共存时，α-生育酚通过捐赠氢原子的方式与DPPH·反应，并转化为自由基状态。
这种反应使DPPH·脱掉一个电子而被还原成無色二苯脂肪基並穩定。
因此，α-生育酚可以通过清除自由基来防止其造成的损害。
通过本次实验的研究，我们可以得出α-生育酚在保护人体免受自由基伤害方面的重要性。
结论本次实验证明了α-生育酚与自由基DPPH·的反应机理是一种自由基清除的过程。
抗坏血酸清除DPPH自由基的作用机理
Abstract ：DPPH radical scavenging properties of antioxidants are generally evaluated by determining absorbance (A517 nm) at
文献标识码：A
文章编号：1002-6630(2011)01-0086-05
体外检测抗氧化剂清除自由基方法中以清除 DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)自由基最为常见[1-8]。该方 法的基本原理是 DPPH 在溶液中生成一个稳定的含氮自 由基且该溶液呈典型的紫色在紫外 - 可见(UV-Vis)光区具 有较强的吸收光谱。当 DPPH 溶液中加入抗氧化剂时， 由于其自由基清除作用使 DPPH 紫色消退导致吸收光谱 强度随加入的抗氧化剂的量的增加而减小，通过加入抗 氧化剂前后吸光度的线性变化计算自由基清除率[9-14]。通 常抗坏血酸等具有递电子和递质子能力的抗氧化剂对 DPPH自由基的清除作用是通过抗氧化剂把电子和质子传 递给 DPPH 自由基，从而生成稳定的分子态的 DPPH2 的 结果[15]，见图 1 。
effects on the two forms of DPPH.
Key words：ascorbic acid；DPPH free radical；scavenging mechanism；spectrometry；cyclic voltammetry；mass
spectrometry 中图分类号：O651
图 2 抗 坏 血 酸 和 DPPH 混 合 溶 液 的 UV-Vis 吸 收 光 谱 Fig.2 UV-Vis spectrum of aqueous ascorbic acid solution and its
天然黄酮类化合物清除DPPH·的构效关系
天然黄酮类化合物清除DPPH的构效关系陈季武;胡斌;赵实;邓玉;秦海燕【期刊名称】《发光学报》【年(卷),期】2005(026)005【摘要】应用DPPH·分光光度测定法研究了11种高纯度的天然黄酮类化合物清除二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)的构效关系.结果表明,这11种天然黄酮类化合物都能有效地清除DPPH·,其清除DPPH·作用大小顺序依次为:槲皮素＞泽漆新苷＞儿茶素＞金丝桃苷＞芸香苷＞山奈素＞桑色素＞异槲皮苷＞黄芩苷＞石吊兰素＞金雀异黄素.发现这11种天然黄酮类化合物有如下构效关系:1.B环上和/或A环上具有邻位羟基可大大增强清除DPPH·作用;2.B环上4′位羟基和A环上6位羟基清除DPPH·的活性都很强;3.异黄酮清除DPPH·的活性弱于相应的黄酮;4.黄酮醇清除DPPH·的活性强于相应的双氢黄酮醇,提示C环具有C2-C3双键结构可增强清除DPPH·作用;5.黄酮类化合物对DPPH·的清除能力与其酚羟基位置密切相关;6.C环3位上羟基被糖基化时,其清除DPPH·的作用减弱.所得结果为进一步开发利用黄酮类化合物提供了理论依据.【总页数】5页(P664-668)【作者】陈季武;胡斌;赵实;邓玉;秦海燕【作者单位】华东师范大学,生命科学学院,上海,200062;华东师范大学,生命科学学院,上海,200062;华东师范大学,生命科学学院,上海,200062;华东师范大学,生命科学学院,上海,200062;华东师范大学,生命科学学院,上海,200062【正文语种】中文【中图分类】O655.4;O657.3【相关文献】1.食用甜蕨及苦蕨黄酮类化合物对DPPH自由基的清除效果 [J], 方玉梅;谭萍;王毅红;张春生2.金针菇黄酮类化合物清除DPPH自由基活性 [J], 方玉梅;谭萍;王毅红;张春生3.4种黄酮小分子对DPPH自由基的清除作用及构效关系研究 [J], 刘帅涛;陶慧林;李锦艳4.珠芽蓼黄酮类化合物清除DPPH·的作用 [J], 肖奇志;王毅红5.沙苑子黄酮类化合物的响应面法优化提取及其清除DPPH自由基能力 [J], 张清安;范学辉;刘梅;张志琪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
三种葡萄皮及籽中活性成分与DPPH清除能力比较
三种葡萄皮及籽中活性成分与DPPH清除能力比较
张岚;柴菁菁;刘敏;葛红娟
【期刊名称】《吉林医药学院学报》
【年(卷),期】2016(037)001
【摘要】目的比较三种市售葡萄皮及籽中总酚、总黄酮含量以及抗氧化活性. 方法采用有机溶剂萃取法提取葡萄皮及葡萄籽中的总酚与总黄酮,采用分光光度法测定含量,并进行DPPH自由基清除的研究. 结果巨峰籽中的总黄酮、总酚含量相对较高;红提籽中总酚含量相对较高;而龙眼皮和龙眼籽提取物的DPPH自由基清除率相对较高. 结论葡萄籽多酚与黄酮含量均高于葡萄皮,是天然多酚和黄酮的良好来源. 葡萄籽提取物具有较强的清除DPPH自由基的能力.
【总页数】4页(P1-4)
【作者】张岚;柴菁菁;刘敏;葛红娟
【作者单位】吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林132013
【正文语种】中文
【中图分类】R151
【相关文献】
1.不同豆浆制备工艺活性成分与DPPH自由基清除能力比较研究 [J], 于寒松;张伟;陈今朝;胡耀辉
2.麻风树籽初提取物对DPPH·自由基的清除能力研究 [J], 莫绪(如生);邹碧群;刘贤贤
3.三种葡萄皮及籽中活性成分与DPPH清除能力比较 [J], 张岚;柴菁菁;刘敏;葛红
娟
4.围头湾5种海藻提取物 AChE 抑制活性与 DPPH.清除能力的比较 [J], 黄晓冬;李裕红;黄晓昆;戴聪杰
5.苜蓿总黄酮纯化及纯化前后对DPPH自由基清除能力比较 [J], 郭新颖;李晨阳;王梦晗;杨莉;陈宇姝;马晓宇;朱玟;李波
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DPPH自由基清除法实验以香草酸为例
DPPH自由基清除法实验—以香草酸为例【仪器与试剂】1.仪器可见分光光度计；SB3200D超声波清洗机；电子天平（BS110S）；BIOHIT单道手动可调移液器（10-100μL、100-1000μL、1000-5000μL）；微量比色皿。
2.试剂香草酸（AR）、DPPH（AR）、无水乙醇（AR）；【原理】根据文献[1]可知，DPPH（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical）即1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，别名1,1-二苯基-2-苦肼基自由基，它的分子中，由于存在多个吸电子的硝基-NO2和苯环的大π键，所以能稳定存在。
所以DPPH作为体外的一种非常稳定的自由基，常被用于检测物质清除自由基能力。
其原理是它在波长519nm处有最大吸收，显紫色，当自由基被清除后，其溶液吸收会减少，紫色会变浅。
通过计算其吸收度减少幅度，可得到自由基清除率，用以判断物质的自由基清除能力。
图1.DPPH结构式图 2.DPPH分子模型【实验对象】香草酸（Vanillic acid），学名“4-羟基-3-甲氧基苯甲酸”，分子式为C8H8O4，是酪氨酸、儿茶酚胺的代谢产物，主要以硫酸酯结合型存在于尿中。
香草酸为白蒿的抗菌主要有效成分，广泛存在于胡黄连、高丽参等中药材中，具有抗细菌和抗真菌的作用。
香草酸具有较强的抗氧化活性，是良好的混合型酪氨酸酶抑制剂。
香草酸在结构上咖啡酸、阿魏酸极其相似，它们三者之间又可以作为彼此的代谢物而存在于体内，具有较高的研究意义。
图3.香草酸结构式图4.香草酸分子模型【实验操作】清除DPPH能力检测本实验采用文献[1]的方法，并视情况改动。
大致过程如下：1. DPPH测试液的配置取DPPH 0.5mg溶于约20mL溶剂（无水乙醇、95乙醇或甲醇）中，超声5min，充分振摇，务使上下各部分均匀。
取1mL 该DPPH溶液，在519nm处测A值，使A 在0.9左右。
该DPPH溶液最好避光保存，3.5小时内用完。
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文 章 编 号 ： ２ ３ ２ ２ （ ０ ０ ０ — ３ ７０ ０ ５ － ３ ８ ２ １ ） ４０ ７ — ４
Ａ 一 Ｇ 与 Ｖ 对 Ｄ Ｐ 自由基 清除 作 用 的 比较 Ａ ｃ ＰＨ
张 自萍 ， 刘 晓 明 ，郝 艳 芳 ， 王 玉 炯
（ 夏 大 学 西 部 特 色生 物 资 源保 护 与 利 用教 育部 重 点 实 验 室 ， 宁 宁夏 银 川 ７ ０ ２ ） ５０ １
衍
很 稳定 的 以氮原 子 为 中心 的 自由基 ． 通过 检 测 抗 氧 化 剂对 ＤＰ Ｈ・ 清 除 能 力 ， 以说 明抗 氧 化 剂 抗 Ｐ 的 可 氧 化 能力 的强 弱． 目前 ， Ｐ Ｈ・ 己 被广 泛 用 于 抗 Ｄ Ｐ 法
氧 化剂 的筛 选工 作 中 ， 国 内外有 着广 泛 的应 用 ． 在 笔
Ｖ 相 似 但 又 不 完 全 相 同的 抗 氧 化 机 制 ． 为 ＡＡ一 可 ２ 作 为稳 定的 Ｖ 衍 生 物 应 用 于 医药 、 品 和 化 妆 品 等 领 域 提 食
供 基 础 数 据 ， 正 确 理 解 枸 杞 的 组 效 关 系 ， 示 枸 杞 抗 氧 化 、 衰 老 等 药 效 机 制 提 供 参 考． 为 揭 抗 关 键 词 ：－ －－ 葡 萄糖 基一 一 坏 血 酸 （ 一卢 ； 生 素 Ｃ； Ｐ Ｈ 自由基 （ Ｐ Ｈ・ ； 杞 子 ２Ｏ ／Ｄ一 ￣ Ｌ抗 ＡＡ ２Ｇ） 维 ＤＰ Ｄ Ｐ ）枸
者通 过 与 Ｖ 相 比较 ， 究 ＡＡ一５ 对 Ｄ Ｐ 的 清 研 ２ ０ Ｐ Ｈ・
除 作用 ， 旨在 为深 人 研究 枸 杞 子 中 ＡＡ ２ 的抗 氧 一 化 作用 和其 他生 物活 性提 供参 考 ．
ＣＨ ， ＯＨ
ｐ ｒｎ ｓｌ —ｓｏｂ ｃ ， ＿ ） 目前 从 天 然 资 ｙａ ｏｙ— ａｃｒｉ ａｉ ＡＡ ２ 是 Ｌ ｃ ｄ
分 类 号 ： 中 图） ８ ． （ Ｒ２ ５ ５ 文献标志码 ： Ａ
抗 坏血 酸 （ ＿ Ｌ ＡＡ） 又 名 维 生 素 ｃ（ ， 为 ， Ｖ ）作 水溶 性抗 氧化 剂 ， 保 持 和促 进 机 体 健 康 起 到 重 要 对 作用 ， 在食 品 、 保健 品 、 医药 、 妆 品和饲 料等 诸多 领 化
抗坏血酸 ， 样大 大 提高 了 Ｖ 这 的稳定 性． 目前 ， 其 对
生物活性 的研究 正 处 于起 步 阶段． ｏ ａ ａ等口 经 大 Ｔｙｄ
Ｈ ＯＨ
鼠体 内实验表 明 ， 一Ｊ ＡＡ ２Ｇ显示 一定 的 Ｖ 前体 活 性 ， ８ ｃ 且 大 鼠经 口摄入 ＡＡ－ 时 ， 其血 液 中能检测 到 未 ２ 在
域有 广 阔的应 用 前 景 ］ 然 而 Ｖ 的不 稳 定 性 ， ． 使 其在 应用 上受 到 了很 大 的限 制 ， 因此 ， 如何 增 强 Ｖ 的稳 定性 ， 目前 国 内外学 者所 关 心的 问题 ＿ ． 是 ３ ］ ２（＿ 一 ） 葡 萄 糖 基一 一 坏 血 酸 （－ ／ ｇｕｏ Ｌ抗 ２Ｏ－Ｄ－ ｌｃ— ｝
第 ３ 卷 第４ １ 期
Ｖｏ１ １ ．３ ＮＯ． ４
宁夏大学学报（ 自然科 学版 ）
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＮｉ ｇ ｉ ｉ ｅ ｓｔ （ ｔ ｒ ｌ ｃｅ ｃ ｄ ｔ ｎ ｏ ｒ ａ ｎ ｘ ａ Ｕｎ ｖ ｒ ｉｙ Ｎａ ｕ ａ Ｓ ｉｎ ｅ Ｅ ｉ ｏ ） ｏ ｉ
２１年１ Ｏ ０ ２月
ＤＰ Ｈ ・ １ １二 苯 基 一一 基 肼 自 由 基 ） 一 种 Ｐ （ ，一 ２苦 是
ｌ 材 料 与 方 法
１ １ 试 剂 及 仪 器 ．
２Ｏ— Ｄ一 萄 糖 基一 一 坏 血 酸 （ 一 ） 宁 一 葡 Ｌ抗 ＡＡ ２ （
夏大 学西 部特 色生 物 资源保 护 与利用 教育 部重 点实 验 室从 枸杞 干 果 中分 离得 到［ ） 维 生 素 Ｃ（ 海 润 ８ ， ］ 上 捷 化学 试 剂有 限公 司 ） ＤＰ Ｈ（ 国 Ｓｇ — ｄｉｈ ， Ｐ 美 ｉｍａＡｌｒ ｃ
图 １ ＡＡ一 ２ 的 分 子 结 构
转 化的 ＡＡ ２ 和代谢 物 Ｖｒ说 明 ＡＡ ２ 在体 内具 －５ ０ ． －５ ０
有较 高 适 合作 为 Ｖｃ 前体应用 于 医药 、 妆品和食 品等领域． 化 笔者前
期研究 发现 ， 它也具 有抑制黑 素细胞 合成 和人宫 颈癌 Ｈ ｌ 细胞增殖作 用¨ ． ｅａ ８
摘 要 ： Ｄ Ｐ 自由基 （ Ｐ ） 除法 ， 较 了不 同浓 度 、 同 ｐ 值 时 Ｖ ＡＡ ２Ｏ 对 Ｄ Ｐ ・ 清 除 作 用． 用 ＰＨ ＤＰ Ｈ・ 清 比 不 Ｈ 和 －ｆ ｉ ＰＨ 的 结果 表 明 ， 一 与 Ｖ 对 Ｄ Ｐ 的 清除 能力 均 与 浓度 呈 明 显 量 效 关 系 ； 一 对 Ｄ Ｐ 的 清 除 作 用是 一 个 长 ＡＡ ２ Ｐ Ｈ・ ＡＡ ２ Ｐ Ｈ・ 时 间 的过 程 ， 清 除 能 力 随 ｐ 值 的 升 高 而 下 降 ； 乙 醇 （ ６ ）柠 檬 酸 缓 冲 液 （ ４ ， Ｈ ： ３ ０ 体 系 中 ， 且 Ｈ 在 — ０ 一 ： ０ ｐ ．） ＡＡ ２ 对 Ｄ Ｐ 的 清 除 能 力 较 、 一 Ｐ Ｈ・ ， ｃ强． Ｖ 比 ， 一 具 有 较 高 的稳 定 性 和 较 长 的 时 效 性 ， 明 其 具 有 与 与 相 ＡＡ ２ 说
源 （ 杞 果 实 ） 发 现 的 唯 一 一 种 新 型 、 定 的 枸 中 稳
生物 ］结构式 如图 １ ， 所示 ． 由图 １ 知 ， 可 由于在 Ｖ
分子的 ｃ ２羟基上 有葡 萄糖 基 存在 ， 坏血 酸母 环 固 抗
有的连烯二 醇结构得 以掩蔽 ， 而不 易被 氧化 为脱氢 型