龙葵碱含量测定
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乙醇法:称取20g的马铃薯鲜样品,将样品和几个玻璃珠(防止加热沸腾)放置于250ml的圆底烧瓶中,添加100ml的95%乙醇,将圆形烧瓶连接直形冷凝管,放置于水浴锅,调节温度为85-95℃,水浴4个小时。冷却,过滤取滤液,回收乙醇近干,然后将剩余的乙醇倒入蒸发皿中,将乙醇蒸干。用30ml的5%硫酸溶解剩余物,过滤,收取滤液,加入浓氨水调节PH值为10-10.5,冷却,放置于冰箱过夜。4℃,5000r/min离心,去上清液,用l%氨水洗涤,再离心,洗涤,至洗涤液澄清,离心,取沉淀即得粗样品。
乙醇一乙酸法:称取2g的烘干马铃薯鲜样品,加100ml乙醇和3ml乙酸,磁力搅拌器搅拌15分钟,过滤。滤液装入索氏脂肪抽提器的称脂瓶,滤渣用滤纸包住,放入索氏脂肪提取器的滤纸筒内,水浴抽提16小时后,回收乙醇近干,然后将剩余的乙醇倒入蒸发皿中,将乙醇蒸干。用30ml的5%硫酸溶解剩余物,过滤,收取滤液,加入浓氨水调节pH值为10~10.5,冷却,放置于冰箱过夜。4℃,5000r/min离心,去上清液,用1%氨水洗涤,再离心,洗涤,至洗涤液澄清,离心,取沉淀即得粗样品。
3.测定方法
龙葵碱标准溶液:精确称取0.0500g龙葵碱,加入l%硫酸溶液溶解,移入50ml容量瓶中,加入1%硫酸溶液至刻度,摇匀。此溶液每ml含龙葵碱lmg。标准曲线的制作:取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml标准溶液以1%硫酸稀释到2ml,置冰浴中逐渐加入5ml硫酸(宜于3分钟以上时间滴完),放置1分钟,然后置冰浴中滴加2.5ml l%甲醛(在2分钟以上时间滴完),放置90分钟后,于520nm波长测定吸光度。
样品的测定:将提取的粗样品用l%硫酸溶解,定容到10ml。取2ml的样品溶液,与标准曲线的制备同样操作,先预测其大概浓度,再以1%硫酸调节样品浓度,使之每毫升在0.2mg以下,取2ml按标准曲线制备项下操作,于520nm波长测定吸光度,计算含量。
4.马铃薯中龙葵碱含量的计算公式
X(mg/100g)=(P*V*50)/m
式中X—100g样品中所含龙葵碱的量
P—测定结果相应的标准浓度(mg/ml)
V一样品提取之后定容总体积(ml)
m一样品量(g)