微生物的实验室培养.ppt

微生物学实验ppt课件

器材与试剂的选用原则
03
如无菌操作、适用性、经济性等
02
细菌形态与结构观察
细菌培养及形态特征
01
02
03
细菌培养方法
包括需氧培养、厌氧培养和兼性厌氧培养等，不同种类的细菌需要不同的培养条件。
细菌菌落特征
观察细菌在固体培养基上形成的菌落，了解其形状、大小、颜色、透明度等特征。
细菌细胞形态
05
微生物代谢活性测定
生长曲线测定方法
直接计数法
通过显微镜直接观察并计数微生物数量，适用于较大微生物如细菌、酵母菌等。
比浊法
利用微生物生长引起培养液浊度变化来测定生长曲线，操作简便但易受杂质干扰。
平板菌落计数法
将待测样品稀释后涂布于固体培养基表面，培养后计数形成的菌落数，适用于可形成菌落的微生物。
原理
病毒必须寄生在活细胞内才能增殖，通过提供适宜的细胞环境，使病毒在细胞内复制并产生子代
病毒。
病毒检测技术及应用
免疫学方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光技术等检测病毒抗原或抗体。
分子生物学方法
基于病毒核酸的特异性，利用PCR、实时荧光定量PCR等技术扩增并检测病毒核酸。
微生物学实验ppt课件
contents
目录
• 实验基础知识 • 细菌形态与结构观察 • 真菌形态与结构观察 • 病毒培养与检测技术 • 微生物代谢活性测定 • 微生物遗传与变异研究 • 微生物生态学及环境因子影响研究
01
实验基础知识
微生物学概述
类生活中的作用：如生态平衡、发酵工业等
生理生化鉴定
利用真菌的生理生化特性，如营养需求、代谢产物等，进行进一步的分类鉴定。

人教版高中生物选修一课件：2.1微生物的实验室培养 (共60张PPT)

专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌

微生物的实验室培养公开课ppt课件

问题讨论
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？答：用手触摸锥形瓶，感觉刚刚不烫手时。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？答：既可以防止培养基表面的水分过快挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，影响微生物的生长。
1个不涂布作空白对照
稀
稀
二、稀释涂布平板法：释
释
103
104
倍
倍
1、梯度稀释菌液：
讨论
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养
皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒
②加琼脂的目的是什么?为什么要用玻璃棒搅拌？
作为凝固剂；防止琼脂糊底导致烧杯破裂。
③在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞,在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用
④培养皿能否用高压蒸汽灭菌？不能,因为培养皿要保持干燥,应该用干热灭菌.
落的目的；存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌
落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。
例：有关平板划线操作正确的是（ C ）
A．打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需要马上塞上棉塞
B．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 C．最后将平板倒置，放入恒温箱中培养 D．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
液体培养基：生长

微生物的实验室培养(纯化)

03 微生物生长曲线与测定
生长曲线类型及特点
A
延迟期
微生物接种到新鲜培养基后，需要一段时间适应新环境，此期间微生物生长缓慢，代谢活跃，为接下来的对数生长期做准备。
对数期
经过延迟期后，微生物进入快速生长阶段，此期间微生物数量呈指数增长，代谢旺盛，形态和生理特性比较稳定。
B
C
稳定期
随着营养物质的消耗和有害代谢产物的积累，微生物生长速度逐渐减慢，新增殖的细胞数与衰亡的细胞数大致相等，微生物总数达到最高水平并保持相对稳定。
借助人工智能、机器学习等技术手段，实现对培养条件的智能化控制，
提高实验室培养的自动化程度和效率。
谢谢聆听
进行无菌操作时，需穿戴无菌衣、帽、口罩和手套，确保操作过程无污染。
无菌器材
使用无菌器材，如无菌吸管、无菌培养皿等，避免污染。
培养基制备与灭菌
培养基选择
根据微生物的生长需求和实验目的，选择合适的培养基。
培养基制备
按照培养基配方准确称量各成分，混合均匀后分装至培养皿或试管中。
培养基灭菌
采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法等方法对培养基进行灭菌处理，确保无菌状态。
02
扩大培养
增加微生物的数量，为后续实验提供足够的生物材料。
03
微生物鉴定
通过观察微生物在特定培养基上的生长情况和形态特征，对微生物进行种类鉴定。
培养基类型及选择
基础培养基
提供微生物生长所需的基本营养物质，如碳源、氮源、无机盐等。
选择性培养基
在基础培养基中加入某种试剂或药物，以抑制非目标微生物的生
未来发展趋势与展望
01
高通量培养技术
随着生物技术的发展，高通量培养技术将成为未来微生物实验室培养的

2.1微生物的实验室培养

灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 2、干热灭菌： 160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸汽灭菌： 100kPa、121 ℃ 下维持15-30min.
完成三维设计—思考探究1，2
P12页
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
知识点三无菌技术
1.无菌技术的概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。无论是随后将要学到的倒平板、平板划线操作，还是平板稀释涂布法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
无菌技术的操作。
三、技能目标：掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。
知识点二：
1.培养基
2.培养基的类型和用途
（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。
（2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。
（2）每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。

微生物的实验室培养(课件)

详细描述
分批培养是将微生物接种到一定量的培养基中，在一定时间内完成生长繁殖的过程。该方法可以控制微生物的生长环境，便于观察和控制。连续培养则是让微生物在恒定条件下持续生长繁殖的方法，通过不断地补充新鲜的培养基和排除老的培养基，使微生物在恒定的条件下快速生长繁殖。该方法适用于大规模工业生产，可以提高生产效率和产品质量。
微生物培养
在适宜的温度、湿度、 pH等条件下，将纯化的微生物菌株接种到培养基中，让其生长繁殖。根据需要，可以选择不同的培养方式和培养
基类型。
微生物观察与检测
在培养过程中，定期观察微生物的生长情况，记录生长曲线、菌落形态等数据，并进行相关的检测和鉴定，如生化反应、抗原抗体反应等
。
微生物保藏与利用
微生物的生长需求。
培养基的pH值
培养基的pH值对微生物的生长具有重要影响，不同微生物对pH值的要求不同，因此需根据实际情况调整。
培养基的灭菌
灭菌是培养基制备的重要环节，通过高温或高压灭菌，消除培养基中的杂菌，保证微生物纯种培养。
实验室设备与器材
显微镜
观察微生物形态和生长情况，是微生物实验室的基本设备。
实验室安全防护措施
实验室应配备必要的安全设施，如灭火器、急救箱、洗眼器等，
并定期进行检查和维护。
实验室应保持通风良好，确保空气流通，以降低感染和污染的风
险。
实验室应定期进行消毒和清洁，确保实验环境的卫生和安全。
实验废弃物的处理与环保要求
实验废弃物应按照规定进行分类和处理，避免对环境和人类健康造成危害。
培养获得的微生物可以用于后续的研究和应用，如生产生物制品、进行疾病诊断和治疗等。同时，对于有价值的菌种可以进行长期保藏，

高中生物选修1微生物的实验室培养ppt(共54张PPT)

稀释涂布平板法
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
3类。
（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后
分装前，要进行的是
。调整pH
（6）右表中各成分重量确定的原则
是依微生物的生长需要确定。（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该
增加的成分
琼脂（或凝固。剂）
一、课题目标：
了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点：
如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构
青霉
生殖孢子生殖
直立菌丝营养菌丝
腐生生活
（二）培养基
培养基（培养液）是由人工方法配制
而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养
液。
1.培养基的类型
（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、
半固体培养基。（2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。
（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。
芽孢又小又轻，可以随风飘散。
平板划线的操作方法
C是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；
且体内一般不含有叶绿素.
寄生菌大部分病原菌
消毒与灭菌的概念及两者的区别
（2）若不慎将过量NaCl加入培养基中。
有的碳源同时是能源，如葡萄糖；
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。

2.1微生物的实验室培养

有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。特点：对恶劣的环境，如干旱、高温等，有很强的抵抗力。在生物体的一定部位产生一种特殊的生殖细胞叫孢子。孢子的特点是能直接长成新个体。
无菌技术：分类定义方法
灭菌法
物理法：热力、辐射、微波、杀灭一切微生物等离子体化学法：醛类、烷化剂
无机盐功能构成微生物细胞的组成成分调解微生物细胞的渗透压， PH值和氧化还原电位有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。Mg、 Ca、K是多种酶的激活剂
（4）特殊营养：
微生物生长不可缺少的微量有机物质，维生素、碱基等（生长因子）。（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）
病毒: 微生物
一般指肉眼看不见的生物
无细胞结构原核细胞
原核生物: 细菌、蓝藻原生生物：单细胞的动植物
如草履虫、单细胞藻类等
真菌: 如酵母菌
真核细胞
一、培养基
微生物生存的环境和营养物质在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要 1、培养基的种类的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。液体培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种半固体培养基据物理性质分放线菌的生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美如，在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多固体培养基常用于工业生产蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌，其代谢产长。常用于观察微生物的天然培养基物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并运动、鉴定菌种据化学成分分用于微生物的分离、计数带有金属光泽。合成培养基常用于工业生产选择培养基据用途分鉴别培养基常用于分类、鉴定

高中生物课件21微生物的实验室培养

高压蒸汽灭菌法
紫外线消毒化学药物消毒
主要方法
高压蒸汽灭菌锅内 ,100 kPa,121 ℃ 下持续加热 15~30 min
30 W 紫外线灯照射 30 min
用体积分数为 70%~75%的乙醇、碘酒涂抹等
应用范围
续表
培养基等
接种室空气等
用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒,手术器械、玻璃器皿等消毒
专题 2 微生物的培养与应用
目录退出
课题 1 微生物的实验室培养
目录退出
课前预习导学
目标导航
学习目标
1.了解有关培养基的基础知识。 2.进行无菌技术的操作。 3.进行微生物的培养。
重点难点重点:
1.进行无菌技术的操作。 2.进行微生物的培养。难点:正确进行无菌技术的操作。
目录退出
预习导引
目录退出
3.学习教材第 18 页平板划线操作,思考下列问题。 (1)为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗? 提示:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到单菌落。划线结束后需要灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免菌种污染环境和感染操作者。
目录退出
3.培养基灭菌后,需要冷却至 50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?
提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。

微生物的实验室培养ppt课件

26
（1）碳源
① 可作为碳源的物质有: a. 含碳无机物: 碳酸盐、碳酸氢盐、二氧化碳等 b. 含碳有机物：糖类（主要）
蛋白质脂肪酸
②不同微生物所利用的碳源不同 a.异养型微生物的碳源为含碳有机物（有机碳） b.自养型微生物的碳源为含碳无机物（无机碳）
27
（2）氮源
① 可作为氮源的物质有: a. 含氮无机物：氮气、氨气、氨盐、硝酸盐
无论是随后将要学到的倒平板、平板划线操作，还是平板稀释涂布法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。
专题2 :微生物的培养与应用
1
主要内容
一、培养基作用、种类二、无菌技术三、制备牛肉膏蛋白胨培养基四、纯化大肠杆菌
2
病毒界 (噬菌体、艾滋病毒)
微生物
约有10万种
原核生物界 (细菌、放线菌、蓝藻) 真菌界 (酵母菌\霉菌\大型真菌) 原生生物界 (草履虫\变形虫\衣藻)
特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.
据物理性质分半固体培养基
用于微生物的分离、
固体培养基
计数常用于分类、鉴定
常用于工业生产
在培养基中加入某种化学物质，以抑
天然培养制基不需要的微生物的生长，促进所需
据化学成分分
要的微生物的生长。例如，在培养基
合成培养中基ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ入青霉素，以抑制细菌、放线菌
根据的微生生长物，的从代而谢分特离点到，酵在母培菌养和基霉中菌加。入
大变形虫
草履虫
14

2021高中生物人教版选修一课件：专题2 课题1 微生物的实验室培养

01微生物的实验室培养课题1ꢀ微生物的实验室培养刷基础题型1ꢀ培养基的成分及种类分析1．[黑龙江大庆实验中学2019高二下月考]下列有关微生物培养基种类及配制原则的表述，正确的是(ꢀꢀ)CA．任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子B．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、O2、渗透压等的影响D．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微碱性解析培养微生物的培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子，但是培养某些特殊微生物的时候可以缺少部分成分，如能利用空气中CO2的自养生物，培养基中可以不提供碳源；能进行固氮作用的微生物，培养基中可以不提供氮源等，A错误。

固体培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，B错误。

微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、O2、渗透压等的影响，C正确。

培养不同的微生物需要有一些不同的特殊条件，培养细菌时需将培养基的pH调节到中性或微碱性，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，D错误。

2．[四川宜宾南溪区二中2019高二下月考]下列叙述错误的是(ꢀꢀ)BA．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B．培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性C．培养细菌时需将pH调至中性或微碱性D．培养产甲烷杆菌时需要提供无氧的条件解析维生素是乳酸菌生长繁殖所必需的，其自身又不能合成，因此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素，A正确；培养霉菌时应将培养基的pH调至酸性，碱性条件下霉菌不易繁殖，甚至会死亡，B错误；细菌生长繁殖所需要的pH是中性或微碱性，所以培养细菌时需将培养基pH调至中性或微碱性，C正确；产甲烷杆菌是一类以产生大量甲烷气体作为能量代谢终产物的特殊原核微生物，广泛存在于各种极端厌氧环境中，厌氧微生物在有氧气存在时，无氧呼吸受抑制，因此培养产甲烷杆菌时需要提供无氧的条件，D正确。

题型2ꢀ无菌技术3．[吉林延边2019高二下月考]在培养基配制和微生物接种的过程中，确保无杂菌污染被称为无菌操作。

微生物的实验室培养(共31张PPT)

生的一种有繁殖作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。
菌落
1.定义：
单个固体培养基上
或少数菌体大量繁殖
2.特征：大小、形状、光泽度、
颜色、透明度等。
3.功能：鉴定菌种的重要依据
子细胞群体
三.大肠杆菌的纯化培养：分散成单个细胞, 形成单个菌落
㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
1.计算：培养基用量
依配方计算各成分的用量 2.称量：牛1肉00膏0m黏l牛稠，肉用膏称蛋量白纸胨称培取养基的配方
牛肉膏、蛋白胨琼易脂吸20潮.0，g 要快、加盖 3.溶化：牛肉膏、称量牛纸肉、膏少量5g水加热溶解 →取纸
→蛋白胨、蛋Na白Cl胨→琼1脂0g →补水定容 4.调pH、分装、封口： Nacl 5g 5.灭菌：培养基、H培2O养皿定容至1000ml 6.倒平板：
肠杆菌，其代谢天产然物常就培用与养于伊基观红察和微美生蓝物结的合运，使菌落呈据深化紫学色成，分并分带有合金成属动光培、用泽养于鉴。基微定生菌物种的分离、计数
选择培养基常用于工业生产据用途分
鉴别培养基常用于分类、鉴定
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方琼脂20.0g 牛肉膏 5g
蛋白胨 10g Nacl 5g H2O 定容至1000ml
分析营养构成？
5. 配制原则
生产科研
⑴目的明确：根据微生物的种类、培养目的选择原料
自养型：不加碳源（CO2碳源）
异养型：有机碳源
⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当
⑶适宜的pH值：加入缓冲剂
细菌偏碱，真菌偏酸
二.无菌技术：防止外来杂菌的污染
超净工作台