脑膜炎奈瑟菌
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第三节 奈瑟菌属
第三节奈瑟菌属(Neisseria)致病菌脑膜炎奈瑟菌(N. meningitides) 淋病奈瑟菌(N. gonorrhoeae)一、脑膜炎奈瑟菌(N. meningitides)（一）生物学性状形态与染色肾形，G-双球菌，有荚膜，菌毛培养特性专性需氧，培养基：巧克力培养基，5%CO2 菌落：光滑，透明，不溶血1．抵抗力对干燥，热力，消毒剂均敏感（二）致病性致病物质荚膜：菌毛：内毒素：主要致病物质1．所致疾病流脑，人是其唯一易感宿主三种临床类型：普通型，爆发型，慢性败血病型（三）免疫性：以体液免疫为主（四）微生物学检查法标本采集涂片染色镜检分离培养与鉴定快速诊断法（五）防治原则流脑荚膜多糖疫苗，治疗首选青霉素G：1云南大学药学院(昆明650091)；2云南沃森生物技术有限公司(昆明6501l8 为制备四价脑膜炎球菌疫苗的需要2005A群脑膜炎球菌多糖结合物的免疫原性研究上海生物制品研究所朱为2002脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitides）感染是细菌性脑膜炎的常见病因，按荚膜多糖可将其分成12个血清群，其中A、B 和C 群感染占所有感染者的90%。
全球由脑膜炎球菌引起的脑膜炎发病率在30-50万，病死率约10%，有相当一部分儿童因脑膜炎球菌严重感染而发生致聋等永久后遗症。
在我国，A群脑膜炎球菌是主要致病菌群，95%的病例由A群引起。
80 年代以来，我国进行了A群脑膜炎球菌荚膜多糖疫苗的大面积接种，有效地控制了发病率。
该荚膜多糖是N-乙酰-3-O-乙酰甘露糖胺磷酸盐的线形共聚物，属T细胞非依赖性（TI）抗原，具有中等免疫原性和年龄相关的保护力，不能诱导免疫记忆。
现已证实它对2岁以上儿童和成人在短期内有效，但随时间延续保护力下降，尤其在幼龄儿童中。
因此有必要改进现有疫苗，提高其对各年龄组（包括婴儿）的免疫效果。
近期的研究集中在开发多糖结合疫苗，即将多糖共价结合到蛋白质上，使其转化为T细胞依赖性（TD）抗原，以增强免疫原性和诱导免疫记忆。
流行性脑脊髓膜炎()描述
(四)慢性型
少见 病程迁延 间歇性发冷、发热 成批出现皮疹、瘀点 伴关节痛、脾大、白细胞增多，血培养阳性
婴幼儿流脑的特点
临床表现不典型 呼吸道症状及消化道症状 有烦躁不安、尖声哭叫、惊厥 囟门隆起 脑膜刺激征可不明显
老年流脑的特点
暴发型发病率较高 临床表现上呼吸道感染症状多见，意识障碍
除颅压增高外，其他检查可无明显改变。
七．实验室检查
细菌学检查
＊是确诊的重要方法。
涂片染色：皮肤瘀点组织液涂片 脑脊液涂片
细菌培养：血或脑脊液检测
七．实验室检查
免疫学检测
可协助确诊，多应用于已用抗 菌药物治疗，细菌学检查阴性 者。
检测特异性抗原及特异性抗体
七．实验室检查
其他
＊RIA法检测脑脊液β2微球蛋白 鲎溶解物试验： 检测血清及脑脊液中的内毒素
选用以下抗菌药物。
(1)青霉素
至目前，青霉素对脑膜炎球菌仍为一种高度 敏感的杀菌药物，尚未出现明显的耐药。 故 为目前国内外治疗流脑病人首选采用的高效、 低毒及价廉之抗菌药物；剂量成人每日20万 u/kg，儿童20万—40万U/kg，分次加入5 ％葡萄糖液内静脉滴注，疗程5~7d。
(2)氯霉素
1. 其他细菌引起的化脓性脑膜炎，常见的有： 肺炎链球菌脑膜炎 流感嗜血杆菌脑膜炎 金黄色葡萄球脑膜炎
上述化脓性脑膜炎发病均无明显季节性，多 散发而不引起流行，无皮肤粘膜瘀点、瘀斑。 确诊则有赖于细菌学检查出不同病原菌。
十. 鉴别诊断
2．结核性脑膜炎
起病缓慢，病程较长。低热、盗汗、消瘦等症状， 皮肤粘膜无瘀点、瘀斑。 多有结核病史或密切接触史。 脑脊液检查：颅压升高更明显，脑脊液外观混浊呈 毛玻璃状， 白细胞多在50×106/L以下，以单核细胞增多为主。 蛋白质增加，糖及氯化物减低； 脑脊液涂片抗酸染色可检出抗酸染色阳性杆菌。
奈-瑟-菌-属(Neisseria)
治疗－ 1、应早期治疗，配偶、性伙伴 必须同治。
2、此菌易耐药，治疗应彻底。
Terms of Microbiology
Neisseria N.meningitidis Meningococcus N.gonorrhoeae Gonococcus
奈瑟菌属 脑膜炎奈氏菌 脑膜炎球菌 淋病奈氏菌 淋球菌
临床表现
潜 伏 期 1 － 10 天，一般为 2 － 3 天
普通型 暴发型
败血症 型
约占全部病例旳90% 起病急骤，病情凶险， 如不急救常二十四小时内死亡 主要见于成人
脑膜炎奈瑟菌 （N.memingitidis)
临床表现
一般型
1。上呼吸道感染期 多数病人无明显症状，
部分病人有咽炎。
2。败 血 症 期
防治原则：
治疗－首选青霉素、 磺胺类药，理由是 轻易透过血脑屏障
淋 球 菌（Gonococcus)
中国性病报告
中国性病麻风病控制中心旳龚向东说： “我国正式公布数字与实际旳性病发病数 大约20倍左右差距，估计起码有1000万 例以上”.
淋 球 菌（Gonococcus)
中国性病报告
1990年上海召开第一次性病大会上，教 授夏国美悲观地指出：“消灭性病是不可 能旳,控 制也是不可能旳，要做到旳是降低 发病率，但也不一定能做到”。
脑膜炎奈瑟菌 （N.memingitidis)
流行病学
易感人群
男女发病率大致相等。大城市发病分散， 以 2岁下列发病率最高；中小城市则以 2 － 4 岁或5 － 9岁旳年龄组发病率最高；而偏僻 山区则一旦传染源介入，常引起点状暴发， 15岁以上发病者可占总发病率旳二分之一以 上且一户二人或二人以上发病者也不少见。
2、此菌易耐药，治疗应彻底。
Terms of Microbiology
Neisseria N.meningitidis Meningococcus N.gonorrhoeae Gonococcus
奈瑟菌属 脑膜炎奈氏菌 脑膜炎球菌 淋病奈氏菌 淋球菌
临床表现
潜 伏 期 1 － 10 天，一般为 2 － 3 天
普通型 暴发型
败血症 型
约占全部病例旳90% 起病急骤，病情凶险， 如不急救常二十四小时内死亡 主要见于成人
脑膜炎奈瑟菌 （N.memingitidis)
临床表现
一般型
1。上呼吸道感染期 多数病人无明显症状，
部分病人有咽炎。
2。败 血 症 期
防治原则：
治疗－首选青霉素、 磺胺类药，理由是 轻易透过血脑屏障
淋 球 菌（Gonococcus)
中国性病报告
中国性病麻风病控制中心旳龚向东说： “我国正式公布数字与实际旳性病发病数 大约20倍左右差距，估计起码有1000万 例以上”.
淋 球 菌（Gonococcus)
中国性病报告
1990年上海召开第一次性病大会上，教 授夏国美悲观地指出：“消灭性病是不可 能旳,控 制也是不可能旳，要做到旳是降低 发病率，但也不一定能做到”。
脑膜炎奈瑟菌 （N.memingitidis)
流行病学
易感人群
男女发病率大致相等。大城市发病分散， 以 2岁下列发病率最高；中小城市则以 2 － 4 岁或5 － 9岁旳年龄组发病率最高；而偏僻 山区则一旦传染源介入，常引起点状暴发， 15岁以上发病者可占总发病率旳二分之一以 上且一户二人或二人以上发病者也不少见。
中国B群脑膜炎奈瑟菌的变异趋势研究
我国B群ST-4821克隆群Nm菌株的分布
C群
B群
te x te x c tr D c tr C B A
CPS
c tr D c tr C B c tr c tr c tr c tr A sia A sia B sia C sia D orf orf ga 1 2 lE
sia A sia B sia C sia D
•共检测出69种不同的porB基因型别，新型别有48种(69.57%, 48/69) ，来 自86株(52.44%) Nm 菌株； • 某些型别与菌株的来源或时间分布间存在一定关联性。
13
我国B群Nm菌株fHbp基因流行分布 及多态性研究
1977 - 1993, n (%) patient fHbp 2.16 2.18 2.19 Other Total 5 (19.23) 3 (11.54) 5 (19.23) 13 (50.00) 26 3 (8.57) 4 (11.43) 11 (31.43) 17 (48.57) 35 4 (16.00) 4 (16.00) 1 (4.00) 16 (64.00) 25 20 (31.25) 10 (15.63) 1 (1.56) 33 (51.56) 64 32 (21.33) 21 (14.00) 18 (12.00) 79 (52.67) 150 carrier 2005 - 2012, n (%) patient carrier Total, n (%)
脑膜炎奈瑟菌分型
核酸
血清群：基于荚膜多糖结构， 分12个血清群。A、B、C、W、 X、Y占95%。疫苗研制的基础。 血清型：PorB。 血清亚型：PorA。 序列型（sequence type，ST) 和克隆群（clonal complex, CC）：基于7个管家基因序列。
奈瑟菌属
（四）防治原则
呼吸道传染病，预防要采取综合性措 施，包括隔离病人、加强带菌者的检查、 保持室内通风良好。 近年来，采用纯化A群特异性多糖制 备疫苗，接种后不但免疫效果好，而且机 体反应轻微。
患者可用青霉素、氯霉素和红霉素治
疗。
二
淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）
形态与染色
生Байду номын сангаас学性状
G-双球菌，似一对咖啡豆，无芽胞和 鞭毛，有荚膜和菌毛
。
致病性和免疫性
2、所致疾病
流行性脑脊髓膜炎 ( 流脑） : 疾病的发生、 发展与机体的抵抗力有密切关系。
发病过程： 1、细菌首先在鼻咽部繁殖致上呼吸
道炎症 2、导致菌血症或败血症 3、到达脑膜，引起化脓性炎症，出 现脑膜刺激征：剧烈头痛、喷射状 呕吐、颈项强直。 4、中毒性休克
交及PCR技术检测淋病奈瑟菌DNA等。
防治原则
预防：属 STD，首先要禁止卖淫、嫖娼、加强 预防性病知识的教育；婴儿出生时用1%硝酸银 滴眼，预防新生儿脓漏眼。
治疗：对病人早期用药，彻底治疗。包括性 伙伴。
青霉素是首选药物。还需参考药敏试验选择药 物。 化学用药主要用来预防新生儿脓漏眼，目前多 用1%硝酸银、1%四环素、0.5%红霉素眼膏。
致病性与免疫性
免疫性
致病性与免疫性
人无自然抵抗力，普遍易感，多可自 愈。病后免疫力不强。 再感染者仍极为常见。
微生物学检查法
1、直接涂片染色镜检：如在中性粒细胞内发现有 G—双球可初步诊断。 直接涂片染色镜检
2、分离培养（巧克力培基）与鉴定：典型的菌落。 生化反应等 快速诊断法
药敏实验
SPA协同凝集试验、ELISA查抗原、用核酸杂
医学微生物学--奈瑟菌属
微生物学检查法
细菌分离和鉴定
直接涂片 染色镜检 标 本 分离培养 (巧克力 血平板) 若在中性粒细胞内外 发现典型G—双球菌， 则可作出初步判断。 涂片染色镜检 生化、药敏等 血清学实验
挑选典型 的菌落
注意：根据病程发展采集不同部位的标本。 采集后必须保温保湿，立即送检。
微生物学检查法
快速诊断法
脂寡糖：诱发局部炎症，逃避免疫。
sIgA酶：能破坏粘膜表面的抗体sIgA
致病性与免疫性
所致疾病 淋病 (gonorrhea)：是性传播疾病 (sexually transmitted disease,STD) 之一。性接触传播为主. 淋病性眼结膜炎/新生儿脓漏眼：胎儿 经产道分娩时可被感染。 淋病奈瑟菌性结膜炎及幼女阴道口阴 道炎：通过毛巾、浴池间接感染。
生物学性状
抵抗力
抵抗力弱。1%石炭酸1～3min即死亡。 本菌能迅速自溶。 淋病奈瑟菌对青霉素、头孢胺噻肟钠、 环丙沙星、壮观霉素(trobincin) 等多种抗 生素敏感，但是近年有关耐药菌株的报告 增多。
生物学性状
抗原结构与分类
1．菌毛蛋白抗原：黏附 2．外膜蛋白抗原：①ProI
②ProⅡ ③ProⅢ
生物学性状
抵抗力
对干燥、湿热、寒冷等抵抗力极弱， 室温放置3h即死亡。对常用消毒剂也很 敏感。例如，1%石炭酸、75%乙醇、 0.1%新洁尔灭菌可使细菌迅速死亡。对 磺胺、青霉素、链霉素和金霉素均敏感。
致病性和免疫性
致病物质
菌 毛：粘附于粘膜上皮细胞，有利于定植 荚 膜：抵抗吞噬，有利于入侵。 sIgA酶：能破坏粘膜表面的抗体sIgA
3．脂寡糖抗原(LOS)：类似内毒素 抗原性转换：淋病奈瑟菌的抗原性易发生 变异, 即同一种抗原可发生型的转变。抗原变 异频率为10-3～10-2，变异速度很快。
《传染病护理》教学教案10流行性脑脊髓膜炎教案
传染源
带菌者和流脑病人是本病的传染源。病人在潜伏期末期和急性期均有传染性，但病人作为传染源的意义远不如带菌者重要。本病隐性感染率高，感染后细菌可存在于正常人鼻腔，不引起症状而成为带菌者，且带菌者不易被发现，流行期间人群带菌率显著增高，可达50％以上。国内调查流行期间A群带菌率高，引起流行的亦主要是A群，说明二者有平行关系。非流行期间则B群是最多的带菌菌群。
脑膜炎期主要病变部位在软脑膜和蛛网膜，早期表现为脑膜血管充血、出血、炎症和水肿，可引起颅内压升高；后期大量纤维蛋白、中性粒细胞及细菌，引起脑脊液混浊。亦可引起颅底部炎症、粘连，而发生视神经、外展神经、动眼神经、面神经或听神经等脑神经损害，并出现相应的临床表现。
爆发休克型的主要病变为皮肤、内脏血管更为严重的损害，造成皮肤、内脏广泛出血。
3．脑膜炎期：
大多数败血症患者于24小时左右出现脑膜刺激征，此期持续高热，头痛剧烈、呕吐频繁，皮肤感觉过敏、怕光、狂躁及惊厥、昏迷。血压可增高而脉搏减慢。脑膜的炎症刺激，表现为颈后疼痛，颈项强直，角弓反张，克氏征及布氏征阳性。
4．恢复期
体温逐渐下降至正常，皮肤淤点淤斑消失，大淤斑中央坏死部位可形成溃疡，后结痂而愈；症状逐渐好转，神经系统检查正常。约10％病人可出现口唇疱疹。病人一般在1—3周内可痊愈。
③地区分布：见于世界各国呈流行性或散发性，如非洲有脑膜炎地带。一般大城市散发，中小城市较多，山区农村可爆发。
我国曾于1938年、1949年、1959年、1967年和1977年先后发生5次全国性流脑大流行，其中以1967年春季最为严重，发病率高达403/10万，病死率为5.49%，流行范围波及全国城乡。但自1985年开展大规模流脑A群疫苗接种之后，流脑的发病率持续下降，2000年以来发病率一直稳定在0.2／10万左右，未再出现全国性大流行。
带菌者和流脑病人是本病的传染源。病人在潜伏期末期和急性期均有传染性，但病人作为传染源的意义远不如带菌者重要。本病隐性感染率高，感染后细菌可存在于正常人鼻腔，不引起症状而成为带菌者，且带菌者不易被发现，流行期间人群带菌率显著增高，可达50％以上。国内调查流行期间A群带菌率高，引起流行的亦主要是A群，说明二者有平行关系。非流行期间则B群是最多的带菌菌群。
脑膜炎期主要病变部位在软脑膜和蛛网膜，早期表现为脑膜血管充血、出血、炎症和水肿，可引起颅内压升高；后期大量纤维蛋白、中性粒细胞及细菌，引起脑脊液混浊。亦可引起颅底部炎症、粘连，而发生视神经、外展神经、动眼神经、面神经或听神经等脑神经损害，并出现相应的临床表现。
爆发休克型的主要病变为皮肤、内脏血管更为严重的损害，造成皮肤、内脏广泛出血。
3．脑膜炎期：
大多数败血症患者于24小时左右出现脑膜刺激征，此期持续高热，头痛剧烈、呕吐频繁，皮肤感觉过敏、怕光、狂躁及惊厥、昏迷。血压可增高而脉搏减慢。脑膜的炎症刺激，表现为颈后疼痛，颈项强直，角弓反张，克氏征及布氏征阳性。
4．恢复期
体温逐渐下降至正常，皮肤淤点淤斑消失，大淤斑中央坏死部位可形成溃疡，后结痂而愈；症状逐渐好转，神经系统检查正常。约10％病人可出现口唇疱疹。病人一般在1—3周内可痊愈。
③地区分布：见于世界各国呈流行性或散发性，如非洲有脑膜炎地带。一般大城市散发，中小城市较多，山区农村可爆发。
我国曾于1938年、1949年、1959年、1967年和1977年先后发生5次全国性流脑大流行，其中以1967年春季最为严重，发病率高达403/10万，病死率为5.49%，流行范围波及全国城乡。但自1985年开展大规模流脑A群疫苗接种之后，流脑的发病率持续下降，2000年以来发病率一直稳定在0.2／10万左右，未再出现全国性大流行。
脑膜炎奈瑟菌诊断标准
脑膜炎奈瑟菌诊断标准
脑膜炎奈瑟菌诊断标准如下：
1、血液检查：由于脑膜炎奈瑟菌可引起脑膜炎，脑膜炎会改变血液中的白细胞、血小板和凝血活动指标。
2、尿检：如果尿中存在可疑的细菌阳性，可能提示患者某种病毒或细菌感染，包括橡桃枝状杆菌。
3、颅脑CT扫描：颅脑CT扫描可以检测出脑膜炎奈瑟菌感染的体征，主要表现为脑室增宽、脑血管扩张、脑室内有炎性改变的小块体。
4、脑脊液检查：脑脊液检查可以检测脑脊液中的孢子和细菌，以确定脑膜炎奈瑟菌的存在。
5、颅脑MR：MR可以更准确的检测出脑膜炎奈瑟菌的感染情况，MR影像也可以比CT扫描更准确地捕捉脑内的改变，如软脑膜、静脉网和血管扩张。
微生物学检验奈瑟菌属卡他布兰汉菌属
抗原结构
☆O抗原：化学成分为脂多糖；耐热；种 属特异性；与相应抗体结合出现颗粒状 凝集；共同抗原可引起交叉反应
☆H抗原：化学成分为蛋白质；不耐热； 与相应抗体出现絮状凝集
☆表面抗原：化学成分为多糖；不耐热； 可阻断O凝集
遗传变异：S-R变异、H-O变异 临床意义：
☆致病物质：菌毛、表面抗原、内毒素、 肠毒素
脑脊液、瘀血点
血液
直接涂片染色
增菌培养
初步报告
分离培养 （巧克力色平板）
可疑菌落、盐水自凝
鼻咽拭子
分离培养
（卵黄双抗平板）
自凝、色素
无自凝
报告阴性 涂片染色 生化反应
生长特性
血清学分群
直接涂片镜检
脑脊液沉淀物、瘀血点涂片革兰染色镜 检： 若发现中性粒细胞内、外有革兰阴性双 球菌、呈肾形，可作初步诊断
涂片染色
生化反应
生长特性
直接涂片
分泌物涂片，做革兰染色 急性炎症期中性粒细胞内可见革兰阴性 双球菌。 阳性率男性90％、女性50％～60％。 无症状淋病或轻症患者，尤其是女性， 检出率低，只做涂片可漏诊40％以上，
培养检查
取材部位准确 培养基预温 立即接种 最好床边接种 合适的培养基 CO2培养 取氧化酶阳性菌落做下一步鉴定
微生物学检验奈瑟菌属卡他 布兰汉菌属
脑膜炎奈瑟菌
是引起流行性脑脊髓膜炎的病原菌
培养特性－－生长条件
营养要求高、在血液、血清培养基中才 能生长 专性需氧、初次分离需5％CO2 最适温度35℃，<30℃或>40℃不生长 可产生自溶酶
常用培养基及生长现象
巧克力色血平板：属营养培养基，菌落 无色、光滑湿润、边缘整齐、有光泽， 似露水珠，易乳化 卵黄双抗平板（EPV）：属选择平板， 用于含杂菌的鼻咽拭标本的分离培养， 菌落无色、光滑湿润、较大、扁平
脑膜炎奈瑟菌
根据荚膜多糖可将脑膜炎奈瑟氏菌分为A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135、L、H、I、K等13个血清群，其 中A、B、C群最为多见，约占90%。
关于血清凝集法用的诊断血清方面，推荐天津生物芯片公司生产的脑膜炎奈瑟氏菌全套诊断血清产品。这套 产品除了包含脑膜炎奈瑟氏菌菌10个常见血清群的诊断血清。
脑膜炎双球菌，又名脑膜炎奈瑟菌或脑脊髓膜炎双球菌，简称为脑膜炎球菌，是一种革兰氏阴性菌，因其所 导致的脑膜炎而闻名，亦会造成脑膜炎球菌血症(一种致命性的败血症)。它只感染人类，并无寄生的动物，是唯 一令细菌性感染脑膜炎成为流行病的病菌。约10%成人的鼻咽中有它的踪迹。
生物学性状
1
形态与染色
2
培养特性
血液与脑脊液标本在血清肉汤培养基中增菌后，接种到巧克力色血琼脂平板上，置于含5%～10%CO2的环境中 孵育。挑取可疑菌落涂片镜检，并作生化反应（表13-1）及型特异性多价血清的凝集试验鉴定。
主要通过氧化酶、糖类发酵以及培养生长特点进行。 ①细菌形态呈肾形； ②氧化酶试验阳性； ③触酶试验阳性； ④分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气； ⑤荚膜多糖抗原直接凝集试验。
脑膜炎奈瑟菌
流行性脑脊髓膜炎的病原菌
目录
01 生物学性状
03 微生物学检查法
02 致病性与免疫性 04 防治原则
脑膜炎奈瑟菌（N. meningitidis）简称为脑膜炎球菌（meningococcus），是流行性脑脊髓膜炎（简称流 脑）的病原菌。肾形或豆形革兰阴性双球菌，两菌接触面平坦或略向内陷，直径0.6~0.8μm。人工培养后可成卵 圆形或球状，排列较不规则，单个、成双或4个相联等。在孵育24h后的培养物中，常呈现衰退形态，菌体大小较 不一致，着色亦深浅不匀。在患者脑脊液中，多位于中性粒细胞内，形态典型。新分离菌株大多有荚膜和菌毛
奈瑟菌的分离和鉴定
¨ 4）血液 抽取静脉血5~8ml，立刻接种注入血 培养瓶，按血液细菌培养常规操作。
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（3）生化反应
¨ 取纯培养物，如其形态、菌落特征 典型，氧化酶阳性，可按表1进行鉴定。
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– （2）女性 尿道炎患者，先以无菌生理盐水清洗尿道 口，从阴道后壁由后向前压迫尿道，使分泌物排出， 然后用无菌拭子或接种环采集；对于宫颈炎患者，先 无菌生理盐水清洗宫颈口和阴道壁，再用阴道窥镜压 迫子宫阴道部，使分泌物排出，然后用无菌拭子或接 种环采集标本；合并肠炎的患者，可在直肠镜下，用 无菌绵拭子采集直肠窝粘膜的粘液进行送检。
• （3）生化反应特点 脑膜炎球菌可分解葡萄糖、麦芽糖， 产酸不产气。不分解蛋白质，不产生靛基质，不产生硫化 氢，不分解尿素，硝酸盐还原试验阴性，氧化酶试验阳性。
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2. 标本采集：
¨ 根据病期不同，采集的标本也有所 不同。菌血症期病人可采取血液；出现 出血点或瘀斑者，可挑取瘀斑渗出液； 如出现脑脊髓膜刺激症状者，必要时可 抽取脑脊液；上呼吸道感染期的疑似病 人和带菌者，可取鼻咽腔分泌物进行检 查。因该菌易自溶，故应立即送检，最 好在床边接种。
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（3）生化反应特点
¨ 淋球菌只分解葡萄糖，产酸不产气， 不产生靛基质，不产生硫化氢，硝酸盐 还原试验阴性，氧化酶及触酶试验均阳 性。
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（3）生化反应
¨ 取纯培养物，如其形态、菌落特征 典型，氧化酶阳性，可按表1进行鉴定。
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– （2）女性 尿道炎患者，先以无菌生理盐水清洗尿道 口，从阴道后壁由后向前压迫尿道，使分泌物排出， 然后用无菌拭子或接种环采集；对于宫颈炎患者，先 无菌生理盐水清洗宫颈口和阴道壁，再用阴道窥镜压 迫子宫阴道部，使分泌物排出，然后用无菌拭子或接 种环采集标本；合并肠炎的患者，可在直肠镜下，用 无菌绵拭子采集直肠窝粘膜的粘液进行送检。
• （3）生化反应特点 脑膜炎球菌可分解葡萄糖、麦芽糖， 产酸不产气。不分解蛋白质，不产生靛基质，不产生硫化 氢，不分解尿素，硝酸盐还原试验阴性，氧化酶试验阳性。
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2. 标本采集：
¨ 根据病期不同，采集的标本也有所 不同。菌血症期病人可采取血液；出现 出血点或瘀斑者，可挑取瘀斑渗出液； 如出现脑脊髓膜刺激症状者，必要时可 抽取脑脊液；上呼吸道感染期的疑似病 人和带菌者，可取鼻咽腔分泌物进行检 查。因该菌易自溶，故应立即送检，最 好在床边接种。
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（3）生化反应特点
¨ 淋球菌只分解葡萄糖，产酸不产气， 不产生靛基质，不产生硫化氢，硝酸盐 还原试验阴性，氧化酶及触酶试验均阳 性。
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2. 标本采集：
微生物学检验奈瑟菌属卡他布兰汉菌属
培养检查
增菌培养：血液、脑脊液接种增菌液，5 ％CO2培养。 分离培养：将增菌培养物转种巧克力色 平板，置5％CO2环境，35℃培养18～24 小时 可疑菌落：观察菌落特征，取可疑菌落 涂片染色镜检，作盐水自凝试验，盐水 中无自凝。
鉴定试验
形态染色：革兰阴性、肾形、成双排列 氧化酶（+） 触酶（+） 糖代谢试验：发酵葡萄糖、麦芽糖 生长特性试验：生长温度、营养需求 血清学鉴定与分群：可与相应诊断血清 发生凝集
肠道杆菌
是一大群生物学性状相近的革兰 阴性杆菌。
与医学关系密切的肠道杆菌
正常菌群
埃希菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 肠杆菌属 沙雷菌属 枸橼酸菌属
致病菌
致病性大肠埃希菌 志贺菌属 沙门菌属 耶尔森菌属
肠道杆菌共同特性
形态染色：均为革兰阴性杆菌，无芽孢， 有菌毛，多数有鞭毛，少数有荚膜 培养特性：需氧、兼性厌氧；营养要求 不高；光滑型菌落； 生化反应： ☆氧化酶－；触酶＋；硝酸盐还原试验＋ 发酵葡萄糖 ☆非致病菌多数分解乳糖，致病菌多数不 分解乳糖
快速鉴定试验
荧光抗体法 荧光素-流脑抗体 +待检物－－荧光
（直接法）
流脑抗体 +待检物 +羊抗兔荧光抗体－－荧光
（间接法）
间接血凝试验 流脑多糖抗原致敏红细胞 +待检血清 反向血凝试验 流脑抗体致敏红细胞 +标本中可溶性流脑抗原
鉴定依据
形态染色：革兰阴性球菌成双排列 菌落典型：光滑型，易乳化，盐水中无 自凝 生化反应： 氧化酶＋、触酶发酵葡萄糖、麦芽糖 生长条件：普通培养基不生长、 血清学：与相应分群血清凝集
生化反应
氧化酶试验阳性 分解葡萄糖、麦芽糖、不分解蔗糖
细菌学-奈瑟菌属
一、脑膜炎奈瑟菌（一）生物学性状1.形态与染色：肾形或豆形革兰阴性双球菌，多位于中性粒细胞内，形态典型。
新分离菌株大多有荚膜和菌毛。
2.培养特性：营养要求较高常用经80℃以上加温的血琼脂平板；色似巧克力，故名巧克力（色）培养基，专性需氧，在5%CO。
条件下生长更佳。
最适pH为7.4～7.6。
产生自溶酶，人工培养物超过48小时常死亡。
自溶酶经60℃30分钟或甲醛液处理均可使之破坏。
3.生化反应：大多数脑膜炎奈瑟菌分解葡萄糖和麦芽糖，产酸，不产气。
4.抗原结构与分类：脑膜炎奈瑟菌的主要表层抗原有三种。
（1）荚膜多糖群特异性抗原∶分成13个血清群，以C群致病力最强。
对人类致病的多为A、B、C群，我国95%以上为A群，近些年发现B和C群的感染。
（2）外膜蛋白型特异性抗原∶A群所有菌株的外膜蛋白相同。
（3）脂寡糖抗原∶由外膜上糖脂组成，具有抗原性。
5.抵抗力：对理化因素的抵抗力很弱。
对干燥、热力、消毒剂等均敏感。
（二）致病性1.致病物质（1）英膜（2）菌毛（3）IgA1蛋白酶（4）脂寡糖（是脑膜炎奈瑟菌的主要致病物质）2.所致疾病：脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎（流脑）的病原菌，人类是其唯一易感宿主。
6个月至2岁儿童因免疫力弱，是易感人群，发病率较高。
主要经飞沫传播方式侵入人体的鼻咽部，一般表现为普通型、暴发型和慢性败血症型。
普通型占90%左右。
细菌到达中枢神经系统主要侵犯脑脊髓膜，引起化脓性炎症，产生剧烈头疼、喷射性呕吐、颈项强直等脑膜刺激症状。
细菌可引起细小血管栓塞，导致皮肤出现瘀斑。
（三）免疫性：机体对脑膜炎奈瑟菌的免疫性以体液免疫为主。
6个月婴儿可通过母体获得抗体，产生自然被动免疫。
（四）防治原则：流行期间儿童可口服磺胺药物等预防。
治疗首选药物为青霉素G，剂量要大，对过敏者可选用红霉素。
二、淋病奈瑟菌（淋球菌）（一）生物学性状1.形态与染色：革兰染色阴性球菌，直径0.6~0.8μm。
常成双排列，两菌接触面平坦，似一对咖啡豆。
奈瑟菌属
(1)脑脊液经离心沉淀后，取沉淀物涂片，革兰染色后镜检，如在中性粒细胞内，外有革兰阴性双球菌，可 作出初步诊断。
(2)出血淤斑碘酊、酒精消毒皮肤后，用无菌针头挑破出血淤斑，挤出少量液体印片，干燥后革兰染色镜检。 阳性率可达80%。
3．分离培养和鉴定血液或脑脊液先接种至血清肉汤培养基增菌后，再在巧克力色平板上行画线分离。平板置 于含5%-10% CO2的大气环境中孵育。挑取可疑菌落涂片染色检查，并作生化反应和凝集试验鉴定。
感谢观看
3．抗原构造
(1)荚膜多糖抗原有群特异性，根据荚膜多糖抗原可将脑膜炎球菌分为12个血清群，对人类有致病作用的主 要是A、B、C群，在我国以A群为主。
(2)外膜蛋白抗原有型特异性，根据此抗原各群又可分为若干型。
4．抵抗力较弱。对干燥、热、冷、紫外线等均十分敏感。在75%乙醇、0.1%新洁尔灭和1%石炭酸中迅速杀灭。 对磺胺药、青霉素、链霉素等敏感。
2．培养特性营养要求较高，常用的培养基是血琼脂平板和巧克力色平板。专性需氧，初次分离培养须供给 5%-10%的CO2。37℃孵育24h后形成1.0-1.5mm的无色、圆形、凸起、光滑、透明，似露滴状的菌落，无溶血现象。 多数菌能分解葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气。氧化酶试验阳性。
3．抗原构造
(1)荚膜多糖抗原有群特异性，根据荚膜多糖抗原可将脑膜炎球菌分为12个血清群，对人类有致病作用的主 要是A、B、C群，在我国以A群为主。
1．致病物质主要有荚膜、菌毛和内毒素。
荚膜可抗吞噬细胞的吞噬作用，菌毛有助于细菌附着于细胞表面，利于进一步侵入。内毒素是主要致病物质， 由细菌自溶或裂解释放，可使小血管、毛细血管形成血栓引起出血，严重时造成DIC、中毒性休克。
2．所致疾病脑膜炎球菌是流脑的病原菌。主要通过呼吸道飞沫传播，也可通过病人呼吸道分泌物污染的物品 而感染。潜伏期2～3天，长者可达10天。病菌在鼻咽部繁殖后侵入血流，引起菌血症或败血症。病人表现为恶寒、 高烧、恶心、呕吐、皮肤或黏膜出现出血点或出血斑。细菌通过血脑屏障到达脑脊膜，产生化脓性炎症。病人表 现为剧烈头痛、喷射状呕吐、颈项强直等脑膜刺激症状。爆发型流脑起病急剧凶险，若不及时抢救，常于24小时 内危及生命。
(2)出血淤斑碘酊、酒精消毒皮肤后，用无菌针头挑破出血淤斑，挤出少量液体印片，干燥后革兰染色镜检。 阳性率可达80%。
3．分离培养和鉴定血液或脑脊液先接种至血清肉汤培养基增菌后，再在巧克力色平板上行画线分离。平板置 于含5%-10% CO2的大气环境中孵育。挑取可疑菌落涂片染色检查，并作生化反应和凝集试验鉴定。
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3．抗原构造
(1)荚膜多糖抗原有群特异性，根据荚膜多糖抗原可将脑膜炎球菌分为12个血清群，对人类有致病作用的主 要是A、B、C群，在我国以A群为主。
(2)外膜蛋白抗原有型特异性，根据此抗原各群又可分为若干型。
4．抵抗力较弱。对干燥、热、冷、紫外线等均十分敏感。在75%乙醇、0.1%新洁尔灭和1%石炭酸中迅速杀灭。 对磺胺药、青霉素、链霉素等敏感。
2．培养特性营养要求较高，常用的培养基是血琼脂平板和巧克力色平板。专性需氧，初次分离培养须供给 5%-10%的CO2。37℃孵育24h后形成1.0-1.5mm的无色、圆形、凸起、光滑、透明，似露滴状的菌落，无溶血现象。 多数菌能分解葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气。氧化酶试验阳性。
3．抗原构造
(1)荚膜多糖抗原有群特异性，根据荚膜多糖抗原可将脑膜炎球菌分为12个血清群，对人类有致病作用的主 要是A、B、C群，在我国以A群为主。
1．致病物质主要有荚膜、菌毛和内毒素。
荚膜可抗吞噬细胞的吞噬作用，菌毛有助于细菌附着于细胞表面，利于进一步侵入。内毒素是主要致病物质， 由细菌自溶或裂解释放，可使小血管、毛细血管形成血栓引起出血，严重时造成DIC、中毒性休克。
2．所致疾病脑膜炎球菌是流脑的病原菌。主要通过呼吸道飞沫传播，也可通过病人呼吸道分泌物污染的物品 而感染。潜伏期2～3天，长者可达10天。病菌在鼻咽部繁殖后侵入血流，引起菌血症或败血症。病人表现为恶寒、 高烧、恶心、呕吐、皮肤或黏膜出现出血点或出血斑。细菌通过血脑屏障到达脑脊膜，产生化脓性炎症。病人表 现为剧烈头痛、喷射状呕吐、颈项强直等脑膜刺激症状。爆发型流脑起病急剧凶险，若不及时抢救，常于24小时 内危及生命。
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教研室审阅意见
（教研室主任签名） 年 月 日
教 学 内 容
辅助手段 时间Βιβλιοθήκη 配脑膜炎奈瑟菌一．脑膜炎奈瑟菌的英文名称及缩写；脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎的致病菌简称流脑，流 脑的临床症状及流行状况。 二．脑膜炎奈瑟菌的生物学性状 1. 形态结构 G-双球菌，直径 0.6-0.8um，形态描述为肾形或咖啡豆样，成双排列时凹面或坦面相对， 临床标本采集后涂片染色镜检后发现脑膜炎奈瑟菌通常位于中性粒细胞内，因此，如果在中性粒 细胞内见到大量 G-双球菌对临床诊断具有重要指导意义。 2. 培养特性及生化反应 对营养要求高，需要用到特殊培养基——巧克力培养基；在巧克力培养基上可形成圆形、 隆起、表面光滑湿润、边缘整齐、透明或者半透明的小菌落，形似露滴，称为“露滴样菌落”。 脑膜炎奈瑟菌有一种特殊现象——“自溶现象”。当脑膜炎奈瑟菌
西安医学院教案
课程名称 临床微生物 与检验 梁晓萍 班级 专业技 术职务 检本 1008-1010 助教 专业，层次 授课方式 （大，小 班，实习） 脑膜炎奈瑟菌 《临床微生物学与检验》第 5 版 主编：倪语星、尚红 小 班 本科 学 时
教
师
2
授课题目（章，节） 基本教材或主要参考书
教学目的： 掌握：1.脑膜炎奈瑟菌的生物学性状；2.脑膜炎奈瑟菌的微生物学检查 熟悉：脑膜炎奈瑟菌的致病物质 教学内容： 1.脑膜炎奈瑟菌所致疾病 2.脑膜炎奈瑟菌的形态结构、培养特性、生化反应及抵抗力 3.脑膜炎奈瑟菌的致病物质 4.脑膜炎奈瑟菌的微生物学检查 教学方法： 课堂讲授，多媒体。 教具： 讲授 教学重点，难点： 重点：掌握脑膜炎奈瑟菌的生物学性状及微生物学检查。 难点：致病物质及血清分群。
教 学 内 容
辅助手段 时间分配
小
结
掌握真脑膜炎奈瑟菌的生物学性状及微生物学检查。
复习思考题 作业题
作业： 1． 什么是脑膜炎奈瑟菌？ 2． 脑膜炎奈瑟菌微生物检查的注意事项及鉴别要点？ 3． 脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌的异同点？
评估： 改进方法：
教学后记
时间利用：