Kir6.1基因敲除小鼠脑梗死周围扩散性去极化波的内源光信号成像
人大肠癌细胞系HCTll6中Sirt1基因敲除细胞株的构建
疾 病动 物模 型 的建 立 和基 因治 疗 等 方 面 都起 到很 大 贡献 。与小 鼠基 因敲 除相 比 ， 由于人 类体 细胞 同源 重 组 效率 低 ， 而 限制 了基 因敲 除技术 人类体 细 胞 系 中 从 的应用 ’ 。研 究 发 现 ｒ Ａ Ａ Ｖ载 体 中 的外 源 Ｄ Ａ 序 Ｎ 列 整合 进染 色体 同源 位点 的效 率较 高 ， 有证 据 证 明其
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依达拉奉右莰醇通过抑制TLR4NF-κB信号通路减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠炎症反应
实验研究依达拉奉右莰醇通过抑制TLR4/NF-κB信号通路减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠炎症反应晚丽，李作孝△摘要：目的探讨依达拉奉右莰醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠炎症反应的影响及其机制。
方法30只雌性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、依达拉奉右莰醇干预组各10只。
除空白组外，其余2组小鼠均采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55（MOG35-55）多肽诱导EAE模型。
从造模次日开始，依达拉奉右莰醇干预组腹腔注射依达拉奉右莰醇12.5mg/kg，空白组及模型组腹腔注射等量生理盐水，1次/d，连续14d。
观察小鼠发病情况，并行神经功能障碍评分；HE和LFB染色观察脊髓组织病理改变；实时荧光定量PCR检测脑组织匀浆中白细胞介素（IL）-1β、IL-6及肿瘤坏死因子（TNF）-αmRNA表达水平；蛋白免疫印迹法检测脊髓组织中Toll样受体4（TLR4）、核因子κB p65（NF-κB p65）蛋白表达水平。
结果空白组小鼠均未发病，其余2组小鼠不同程度发病。
与模型组相比，依达拉奉右莰醇干预组小鼠的发病潜伏期、高峰期延迟，高峰期神经功能障碍评分降低（P＜0.01）。
空白组小鼠脊髓组织未见异常；模型组脊髓组织大量炎性细胞浸润、髓鞘结构紊乱；依达拉奉右莰醇干预组较模型组的炎性细胞浸润减少、髓鞘结构紊乱情况改善。
与空白组相比，其余2组小鼠脑组织匀浆中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平以及脊髓组织中TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平显著升高，以依达拉奉右莰醇干预可逆转建模引起的上述改变（P＜0.05）。
结论依达拉奉右莰醇可减轻EAE小鼠炎症反应，其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路活化有关。
关键词：脑脊髓炎，自身免疫性，实验性；Toll样受体4；NF-κB；炎症；白细胞介素类；肿瘤坏死因子α；依达拉奉右莰醇；TLR4/NF-κB信号通路中图分类号：R744.51文献标志码：A DOI：10.11958/20212362Edaravone dexborneol reduces inflammation in mice with experimental autoimmuneencephalomyelitis by inhibiting TLR4/NF-κB signaling pathwayWAN Li,LI Zuoxiao△Department of Neurology,the Affiliated Hospital of Southwest Medical University,Luzhou646000,China△Corresponding Author E-mail:****************Abstract:Objective To investigate the effect and mechanism of edaravone dexborneol on the inflammatory response in mice with experimental autoimmune encephalomyelitis(EAE).Methods Thirty female C57BL/6mice were randomly divided into the blank group,the model group and the edaravone dexborneol intervention group,with10mice in each group. Except for the blank group,EAE model was induced by myelin oligodendrocyte glycoprotein35-55(MOG35-55) polypeptide in the other two groups.From the day after modeling,mice in the edaravone dexborneol intervention group were intraperitoneally injected with edaravone dexborneol12.5mg/kg,while the mice in the blank group and the model group were intraperitoneally injected with the equal amount normal saline,once a day for consecutive14days.The behavioral changes of mice were observed,and neurological dysfunction scores were performed.HE and LFB staining were used to detect spinal cord pathological changes.The mRNA expression levels of interleukin(IL)-1β,IL-6and tumor necrosis factor-α(TNF-α)in brain homogenate were detected by real-time fluorescence quantitative PCR.The protein expression levels of Toll-like receptor4(TLR4)and nuclear factorκB p65(NF-κB p65)in spinal cord tissue were detected by Western blot assay.Results None of the mice in the blank group had the disease,and the other two groups of mice had different degrees of pared with the model group,the incubation period and peak period were delayed in the edaravone dexborneol intervention group,and neurological deficit scores in peak period decreased(P＜0.01).No abnormality was found in spinal cord tissue structure in mice of the blank group,and a large number of inflammatory cell infiltration,myelin structure 基金项目：泸州市人民政府-西南医科大学科技战略合作基金项目（2018LZXNYD-ZK17）作者单位：西南医科大学附属医院神经内科（邮编646000）作者简介：晚丽（1994），女，硕士在读，主要从事神经免疫方面研究。
电子科技大学2023年613分子生物学考研真题(回忆版)
电子科技大学2023年613分子生物学考研真题（回忆版）一名词解释10题共30分
核小体
Tm
颠换
Gold gate克隆
DNA拓扑异构酶
内含子可变剪接
中心法则
SiDNA
复制叉
卫星DNA
二选择20题共60分
Rna聚合酶三种作用
核心酶亚基
端粒构成及作用
Dna聚合酶构成作用
Dna修复方法
氨基酸活化
顺式作用元件
SnDna作用
操纵子基质
DNA子母链计算
复制起点
全酶核心酶
启动子位置及作用
高中低重复序列
三简答题6题共35分
描述DNA一二三级结构
介绍三种RNA作用
核糖开关是怎么发挥作用的
新冠病毒检测的原理与技术以及操作
色氨酸操纵子的组成与作用
转录前DNA染色体调控有哪些方式
四材料分析题1题共10分
原体突变为突变体密码子突变对转录及终止的影响
五实验1题共15分
某拟南芥某基因可能对花型发育有关，设计实验得到其突变体并对可能出现的实验结果进行分析。
七叶皂苷钠调控SIRT1
七叶皂苷钠调控SIRT 1/NF-κB 信号通路对帕金森病大鼠的神经保护作用Δ周慧敏＊，陈静，欧诒丹，王御林，钟纯正 #（儋州市人民医院神经内科，海南 儋州 571700）中图分类号 R 965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2024）06-0689-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2024.06.09摘要 目的 探究七叶皂苷钠通过调控沉默信息调节因子1（SIRT 1）/核因子κB （NF-κB ）信号通路发挥对帕金森病大鼠的神经保护作用。
方法 采用6-羟基多巴胺注射法构建帕金森病大鼠模型，将建模成功的48只大鼠随机分为模型组、七叶皂苷钠低剂量组（1.8 mg/kg ）、七叶皂苷钠高剂量组（3.6 mg/kg ）、七叶皂苷钠+EX 527组（七叶皂苷钠3.6 mg/kg+SIRT 1抑制剂EX 527 5 mg/kg ），每组12只；另取12只健康大鼠作为假手术组。
各药物组大鼠腹腔注射相应药液，每天1次，持续21 d 。
末次给药结束24 h 后，检测大鼠运动及认知功能，观察其黑质区和海马组织CA 1区神经元形态，检测其黑质纹状体中多巴胺（DA ）含量和黑质区酪氨酸羟化酶（TH ）、α突触核蛋白（α-Syn ）表达水平，检测其血清中促炎因子[白细胞介素6（IL-6）、IL-18]、抗炎因子（IL-10）水平及黑质纹状体中SIRT 1、磷酸化NF-κB p 65（p-NF-κB p 65）、NF-κB p 65蛋白表达水平。
结果 与假手术组比较，模型组大鼠黑质区和海马组织CA 1区神经元损伤严重；其旋转圈数、逃避潜伏期、黑质区α-Syn 蛋白表达水平、血清中促炎因子水平、黑质纹状体中p-NF-κB p 65与NF-κB p 65蛋白的相对表达量之比均显著升高或延长（P ＜0.05），目标象限停留时间、黑质纹状体中DA 含量及黑质区TH 蛋白表达水平、血清中抗炎因子水平、黑质纹状体中SIRT 1蛋白表达水平均显著缩短或降低（P ＜0.05）。
光化学栓塞法建立缺血性脑卒中动物模型
光化学栓塞法建立缺血性脑卒中动物模型马浚宁;高俊玮;侯博儒;任海军;刘吉星;陈四化;严贵忠【摘要】背景:实验性缺血性脑卒中动物模型是研究缺血性脑卒中病理机制以及研究开发新治疗方案必不可少的工具,光化学栓塞法制作缺血性脑卒中动物模型操作简便,稳定性好,重复性高,可有针对性的控制梗死灶的位置以及大小,是研究缺血性脑卒中病理机制的良好选择.目的:建立光化学栓塞法缺血性脑卒中动物模型,对比不同性别小鼠缺血性脑卒中后梗死体积以及行为学表现的异同.方法:62只昆明小鼠依据检测内容分为病理学检测6只、梗死体积测试16只和行为学测试40只.其中病理学检测小鼠分为假手术组和模型组,各3只;梗死体积测试小鼠分为雌性模型组和雄性模型组,各8只;行为学测试小鼠分为雌性模型组、雌性假手术组、雄性模型组和雄性假手术组,各10只.模型组(含雌性模型组和雄性模型组)小鼠采用光化学栓塞法制备局部缺血性卒中模型,假手术组(含雌性假手术组和雄性假手术组)小鼠不注射孟加拉玫瑰红染料.结果与结论:尼氏染色显示模型组小鼠梗死中心出现神经元变性坏死,空泡样病理改变,Fluoro-Jade C染色可见模型组小鼠梗死中心中出现变性神经元,且雌性小鼠脑梗死体积显著小于雄性小鼠,模型组小鼠行为运动功能受损程度显著大于假手术组小鼠,其中雌性小鼠运动功能受损程度小于雄性小鼠.表明光化学栓塞法可以成功建立缺血性脑卒中动物模型,且相同条件下缺血性脑卒中对于雄性造成的神经功能损伤更为严重.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2015(019)049【总页数】7页(P7951-7957)【关键词】实验动物模型;脑及脊髓损伤动物模型;光化学法;缺血性脑卒中;动物模型;尼氏染色;Fluoro-Jade C染色;行为学;疲劳转棒;前肢抓力;甘肃省自然科学基金【作者】马浚宁;高俊玮;侯博儒;任海军;刘吉星;陈四化;严贵忠【作者单位】兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学生命科学院,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学生命科学院,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学生命科学院,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000【正文语种】中文【中图分类】R318文章亮点：采用光化学栓塞法建立缺血性脑卒中动物模型，并对比不同性别小鼠缺血性脑卒中后梗死体积以及行为学表现的异同，证实光化学栓塞法可以成功建立缺血性脑卒中动物模型，且相同条件下缺血性脑卒中对于雄性造成的神经功能损伤更为严重。
基因敲除技术在神经系统疾病治疗中的应用
基因敲除技术在神经系统疾病治疗中的应用目前，神经系统疾病治疗一直是一个非常重要的医学领域。
神经系统疾病包括帕金森病、阿尔茨海默病、癫痫、脑白质病变等，其治疗一直是医学界关注的焦点。
近年来，随着基因编辑技术的发展，基因敲除技术逐渐成为神经系统疾病治疗的一种新手段。
一、基因敲除技术简介基因敲除技术是一种分子生物学技术，可以使特定的基因变得无法表达并不再产生相应的蛋白质。
这种技术主要利用了RNA干扰和CRISPR/Cas9两种方法。
其中，RNA干扰主要是通过合成siRNA干扰RNA的表达，从而达到基因敲除的目的；而CRISPR/Cas9技术则直接对DNA进行裁剪，从而使染色体上的目标基因在细胞分裂过程中丢失。
二、基因敲除技术在神经系统疾病治疗中的应用1. 帕金森病帕金森病是一种常见的神经障碍疾病，主要表现为慢性进行性肌肉僵硬、震颤和运动能力障碍等症状。
该病的发生与缺乏多巴胺神经元有关。
研究表明，基因敲除技术可以用于治疗帕金森病。
例如，利用基因敲除技术在小鼠体内删除特定的基因，可以使其多巴胺神经元恢复，从而缓解症状。
2. 阿尔茨海默病阿尔茨海默病是一种严重的神经系统疾病，会引起记忆损失和认知能力下降等问题。
该病的发生与淀粉样脑β植物有关。
近年来，有学者利用基因敲除技术减弱阿尔茨海默病小鼠体内的淀粉样脑β植物，结果发现小鼠的认知和行为功能均得到了改善。
3. 癫痫癫痫是一种常见的神经系统疾病，其特征为反复癫痫发作。
目前的治疗手段主要包括药物治疗和手术治疗等，但是仍然存在一定的局限性。
近期，有研究表明，基因敲除技术可以用于治疗癫痫。
例如，使用基因敲除技术靶向一个控制神经元兴奋性的钾离子通道，能够有效预防和治疗癫痫。
4. 脑白质病变脑白质病变是一组临床症状和病理表现的综合症，病因不明，临床表现包括智力障碍、肾上腺外分泌和运动失调等。
然而，使用基因敲除技术针对某些关键基因进行靶向敲除，在动物模型中可以有效地缓解脑白质病变的症状。
cre-loxp基因敲除系统
背景介绍
1981 年Evans 等首次在体 外分离和培养ES，成功建 立了小鼠胚胎干细胞系
1985 年Smithies最早在哺乳动 物细胞中发现并实现了同源重 组
同源重组
Homologus Recombination
同源重组是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同 一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合 。在基因敲除小鼠制作过程中，需要针对目的基因两端特异性片 段设计带有相同片段的重组载体，将重组载体导入到胚胎干细胞 后外源的重组载体与胚胎干细胞中相同的片段会发生同源重组
三、Cre工具鼠的构建
DNA显微原核注射，是指将外源DNA通 过显微注射的方法注射到受精卵的原 核内，注射DNA整合到小鼠受精卵的 基因组中，并稳定遗传给后代。
诱导性组织特异性Cre工具鼠的载体构建
MHC (cardiac-specific a-myosin heavy chain) Mer (mutated murine estrogen receptor ligand-binding domain amino
MerCreMer融合蛋白
该系统将雌激素受体(Estrogen Receptor,ER)的 配体结合区(ligand-binding domain,LBD)和Cre 重组酶进行融合，产生一种嵌合重组酶，该嵌 合重组酶的表达被置于特异启动子的调节之下 ，从而使其在特定组织和器官或者特定发育阶 段产生。但是只有该嵌合重组酶并不能发挥 Cre重组酶的活性，因为雌激素受体结合区的 存在使其不能进入核内与loxP位点相结合。只 有加入雌激素后才能使其进入核内发挥作用。
基因敲除机理 （续）
Offspring: 25% homozygous knockout after 2 generation
Limk1在FMR1基因敲除小鼠脑组织的表达及意义
研究表明ＦＭＲＰ是一种ｍＲＮＡ结合蛋白， ＦＭＲＰ具有转录后水平负性调控蛋白质表达的功 能Ｈ Ｊ。最新的研究表明ＦＭＲＰ与ｍｉＲＮＡ共同参与 构成ＲＮＡ诱导的基因沉默复合物（ＲＮＡ·ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｘ；Ｒ１ＳＣ）后依据破坏或阻遏靶 ｍＲＮＡ起到沉默基因、调控表达的作用¨Ｊ。ＦＭＲＰ 缺失可引起ｍｉＲＮＡ的成熟障碍，功能降低。Ｌｉｍｋｌ 蛋白是目前少数明确的能够通过磷酸化途径调控细 胞骨架形成的蛋白，其作用在维持神经系统的生长 发育和功能尤为明显。Ｓｃｈｒａｔｔ ＧＭ№１等最新研究结 果显示ｍｉＲ．１３４通过抑制Ｌｉｍｋｌ基因表达调控树突 棘的形态。因此本组推测：在脆性ｘ综合征由于 ＦＭＲＰ的减少，影响了对Ｌｉｍｋｌ有基因沉默调控作 用的ｍｉＲ．１３４的功能，可能是影响树突棘发育的主 要原因。本研究通过免疫组化比较不同年龄组的 ＫＯ鼠和ＷＴ鼠海马神经元Ｌｉｍｋｌ在脑组织的表达 差别，明确与ｍｉＲ一１３４相关的蛋白Ｌｉｍｋｌ在ＦＭＲｌ 基因敲除鼠表达变化，探讨Ｌｉｍｋｌ在脆性ｘ综合征 的致病机理的作用。
首次发现：通过基因敲除可消除活组织中的衰老细胞
首次发现：通过基因敲除可消除活组织中的衰老细胞订阅号APExBIO细胞衰老是细胞周期停滞的永久状态，其保护有机体免受肿瘤发生，并在损伤和组织重塑期间调节组织完整性。
然而，衰老期间衰老细胞在组织中的积累导致与年龄有关的病理反应。
因此，需要更深入地了解调节衰老细胞生存力的机制。
在这里，来自魏茨曼科学研究所的一篇研究显示CDK抑制因子p21（CDKN1A）维持DNA损伤诱导的衰老细胞的活力。
在p21沉默后，衰老细胞获得多个DNA损伤，从而激活ATM 和NF-κB激酶，导致细胞存活率降低。
NF-κB活化诱导TNF-α分泌和JNK活化，以caspase和JNK依赖性方式介导衰老细胞的死亡。
值得注意的是，p21敲除小鼠消除了衰老的肝星状细胞，减少了肝纤维化和胶原蛋白的产生。
这些发现确定了调控衰老细胞活力和纤维化的新机制。
细胞衰老（Cellular senescence），是细胞周期停滞的永久形式，对各种应激源包括端粒缩短，致癌基因激活和DNA损伤等作出反应来停止细胞增殖。
细胞衰老在短期损伤后的组织稳态中起着重要作用，促进肝脏损伤后的组织修复，皮肤纤维化和伤口愈合过程中的组织修复。
衰老细胞表现出升高的衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）活性和持续的DNA损伤反应，使其与其它非增殖细胞群区分开。
衰老细胞产生多种特征性分泌因子，统称为衰老相关分泌表型（SASP），其以自分泌的方式加强衰老停滞并介导衰老细胞的免疫监视。
然而，随着衰老，衰老细胞在生物体中积累并促进局部炎症，其以细胞非自主的方式驱动组织衰老，组织破坏以及潜在的肿瘤发生和转移。
衰老程序由信号通路的复杂相互作用驱动。
如利用 p16INK4A （CDKN2A）和p53（TP53）靶向p21 （CDKN1A），抑制细胞周期蛋白依赖性激酶（CDKs），从而抑制增殖相关基因的表达。
另外， NF-κB作为SASP的主调节剂，影响衰老细胞的微环境和它们的免疫监视。
神经干细胞特异性LSD1基因敲除对小鼠情绪及记忆的影响
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Ｓ Ｈ Ｉ Ｃ ｈ ａ ｎ ｇ － ｊ ｉ ｅ ，Ｈ Ｕ Ａ Ｑ ｉ ｕ — ｈ ｏ ｎ ｇ ，Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｌ ｉ — ｈ ｏ ｎ ｇ ， Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｒ ｕ （ Ｓ ｈ ａ ｎ ｇ ｈ ａ ｉ Ｋ ｅ ｙ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｓ ｉ ｇ ｎ ａ ｌ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ Ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ， Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ
０ ． ０ ０ ７ ５ ） ； 强 迫 游 泳 实 验 中不 动 时 间 明显 增 加 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ； 并 在 新 物 体 识 别 实 验 中 表 现 出记 忆 力 显 著 下 降现 象 （ Ｐ＝ ０ ． ０ ０ １ ９ ） 。 结论 记忆 障碍。 小 鼠脑 神 经 干 细 胞 敲 除 Ｌ Ｓ Ｄ１ 基因， 海 马 区神 经 细 胞 增 殖 降低 ， Ｌ Ｓ Ｄ１ 一 Ｃ Ｋ Ｏ小 鼠表 现 出 负 面 情 绪 和
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pk18mobsacb敲除原理
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pk18mobsacb敲除原理（大纲）一、pk18mobsacb概述1.1pk18mobsacb的定义1.2pk18mobsacb的作用与功能二、基因敲除技术简介2.1基因敲除的原理2.2常见基因敲除方法三、pk18mobsacb敲除原理3.1敲除策略3.1.1选择性敲除3.1.2非选择性敲除3.2敲除方法3.2.1CRISPR/Cas9技术3.2.2RNA干扰技术3.2.3转座子插入技术四、pk18mobsacb敲除效果评估4.1敲除效率4.2敲除特异性4.3敲除稳定性五、应用与前景5.1pk18mobsacb敲除在生物研究中的应用5.2未来发展方向与挑战六、总结6.1研究成果6.2不足与改进方向一、pk18mobsacb概述PK18mobsACB是一种人工合成的双链RNA分子，用于敲除特定的基因。
在基因敲除领域，PK18mobsACB因其高效、特异性的基因沉默效果而被广泛应用。
PK18mobsACB的主要作用是通过与目标基因的mRNA分子结合，阻止其翻译过程，从而实现基因的沉默。
具体而言，PK18mobsACB可以与目标基因的mRNA形成双链RNA复合物，阻碍了翻译机器对mRNA的识别和翻译，导致目标基因无法产生相应的蛋白质，从而实现了对目标基因的敲除。
Sirt6基因脑特异性敲除对老年小鼠大脑皮层的影响
敲除ABRO1对小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)LPSTLR4通路活化的影响
doi：10.3969/j.issn.1000-484X.2021.03.001-基础免疫学•敲除ABRO1对小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)LPS/TLR4通路活化的影响①李东旭张文葛志强詹轶群②尹荣华②杨晓明②(天津大学化工学院制药工程系，天津300072)中图分类号R392文献标志码A文章编号1000484X(2021)03"0257鄄05[摘要]目的:探讨敲除ABRO1对小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)LPS/TLR4通路活化的影响。
方法:分离培养ABRO1敲除(KO)及野生型(WT)MEF细胞;采用CBA流式细胞术检测LPS诱导后ABRO1KO与WT MEF细胞分泌IL-6的水平;采用Western blot法确认其NF-k B信号通路以及MAPK信号通路的活化;采用qPCR检测IL-6、IL-1茁和TNF-琢的mRNA表达；采用荧光素酶报告基因检测NF-k B的转录活性。
结果：CBA流式结果显示，10ng/ml、100ng/ml和1滋g/ml3种不同剂量的LPS诱导ABRO1KO与WT MEF细胞分泌IL-6的水平差异无统计学意义。
qPCR检测显示,1滋^ml LPS诱导ABRO1KO与WT MEF细胞IL-6、IL-1茁和TNF-琢的mRNA水平差异无统计学意义。
Western blot结果显示,1滋g/ml LPS诱导ABRO1KO与WT MEF细胞的NF-k B信号通路以及MAPK信号通路活化差异无统计学意义。
荧光素酶报告基因检测结果显示，1滋g/ml LPS诱导ABRO1KO与WT MEF细胞NF-k B报告基因活性差异无统计学意义。
结论：敲除ABRO1不影响MEF细胞LPS/ TLR4信号通路活化。
[关键词]ABRO1基因；小鼠胚胎成纤维细胞；白细胞介素6；脂多糖类Effect of ABRO1deficiency on LPS/TLR4signaling pathway in mouse embryonic fibroblast(MEF)LI Dong-Xu,ZHANG Wen,GE Zhi-Qiang,ZHAN Yi-Qun,YIN Rong-Hua,YANG Xiao-Ming.Department of Pharmaceutical Engineering,School of Chemical Engineering and Technology,Tianjin University,Tianjin 300072,China[Abstract]Objective:To investigate the effect of ABRO1deficiency on LPS/TLR4signaling pathway in mouse embryonic fibroblast(MEF).Methods:The release of IL-6from ABRO1knockout(KO)and wild type(WT)MEFs after LPS treatment was assessed by BD Cytometric Bead Array(CBA).The mRNA level of IL鄄6,IL-1茁and TNF-琢in ABRO1KO and WT MEFs treated with LPS was measured by qPCR.The activation of NF-k B and MAPK signaling pathway in ABRO1KO and WT MEFs were assessed by Western blot.In addition,the luciferase reporter gene assay was used to test the effect of ABRO1knockout on the transcriptional activity of NF-k B.Results:ABRO1KO and WT MEFs produced similar amounts of IL-6induced by LPS.Consistently,LPS-induced upregulation of IL-6,IL-1茁and TNF-琢mRNA was not markedly changed in ABRO1KO MEFs compared with WT MEFs.ABRO1KO MEF showed unaltered activation of NF-k B and MAPK signaling pathway by Western blot.The luciferase reporter gene assay showed that there is no obvious difference in activity of NK-k B reporter gene between the ABRO1KO MEFs and ABRO1WT MEFs.Conclusion:Deficiency of ABRO1has no significant effect on the activation of LPS/TLR4signaling pathway in MEFs.[Key words]ABRO1；Mouse embryonic fibroblast；Interleukin-6；Lipopolysaccharides①本文为国家自然科学基金面上项目(No.81870412)。
ko敲除实验原理
ko敲除实验原理Ko knocking out experiment is a method used to study the functionof a particular gene by inactivating or "knocking out" the gene.ko敲除实验是一种通过让基因失活或“敲除”来研究特定基因功能的方法。
This is typically done by introducing a mutation into the gene of interest in a model organism, such as a mouse, and then studyingthe effects of the mutation on the organism's phenotype.通常通过在模式生物（如小鼠）中引入基因的突变来完成这一过程，然后研究这一突变对生物表型的影响。
One of the most common methods for knocking out a gene is to use homologous recombination to replace the normal gene with a mutated version in embryonic stem cells.敲除基因最常用的方法之一是利用同源重组在胚胎干细胞中用突变版本替换正常基因。
The modified stem cells can then be injected into mouse embryos, where they will contribute to the development of various tissues in the resulting chimeric mice.修改后的干细胞然后可以被注射到小鼠胚胎中，在那里它们将有助于发展成为各种组织的嵌合小鼠。
脑梗死小鼠凋亡神经元及脑血管内皮细胞超微结构的观察
脑梗死小鼠凋亡神经元及脑血管内皮细胞超微结构的观察李振光,伍期专,姚存姗(北京医科大学第一医院神经生化室,北京 100034)摘要:目的 观察脑梗死后不同时间点脑组织的病理变化,尤其是凋亡神经元及血管内皮细胞超微结构的改变。
方法 采用经皮光化学脑梗死模型,氯代三苯基四氮唑(TTC )染色,光镜及透射电镜观察。
结果 缺血24～48h ,脑组织及血管内皮细胞损伤最严重,缺血6h 至1个月均可见凋亡神经元,其中以48h 最多见。
早期应用巴曲酶对缺血脑组织及血管内皮细胞有保护作用。
结论 脑缺血后神经元在相当长的一段时间内均可发生凋亡。
保护血管内皮细胞、抑制神经元凋亡对改善缺血脑组织的预后具有重要意义。
关键词:脑梗塞;小鼠;细胞凋亡中图分类号:R 743.33 文献标识码:A 文章编号:1009-0126(2000)02-0128-04 Long -term observation on ultrastructure of apoptosis of neuron andendothelial cells of cerebral vessels in mice with photochemicallyinduced cerebral infarctionLI Zhen -guang ,WU Qi -zhuan ,YAO Cun -shan(Labo rato ry of Neu rochemis try ,First Affiliated Hos pital ,Beijing M edical University ,Beijing 100034,China )A bstract :Objective To investigate the cerebral pathological changes at different time points after brain in -farction ,especially the changes of the ultrastructure of apoptosis of neuron and vascular endothelium .Methods The transdermically photochemically induced cerebral infarction model was used .TTC (2,3,5-triphenyl -tetrazolium chloride )staining ,light and transmission electron microscopy were chosen to investigate the chang -es .Results The dama ge of brain tissue and vascular endothelium was most prominent from 24to 48hours af -ter brain infarction .The apoptosis of neuron could be found from 6hours to 1month after brain infarction ,andwas found most frequently at 48hours .The administration of batr oxobin protected the brain tissue and endothe -lium at the early stage of cerebral ischemia .Conclusion The apoptosis of neuron could occur during a rather long period and the time window of inhibiting ischemic apoptosis is r elative long .The pathomorphism of isch -emic brain could be seriously influenced by endothelium .Key words :cerebral infarction ;mice ;apoptosis 收稿日期:1999-10-23作者简介:李振光,男,1965年9月生,硕士,主治医师,现在山东省文登中心医院神经生化临床应用重点实验室,山东威海,264400 近年来,许多研究结果表明,细胞凋亡参与了脑缺血后的再灌注损伤,特别在迟发性神经元死亡中发挥着重要的作用〔1〕。
pk18mobsacb基因敲除原理
pk18mobsacb基因敲除原理PK18MOBSACB基因敲除原理引言：基因敲除是一种常用的分子生物学技术，可以通过干扰目标基因的表达来研究其功能。
PK18MOBSACB是一种常见的基因敲除工具，本文将以PK18MOBSACB基因敲除原理为标题，探讨其工作原理及应用。
一、PK18MOBSACB基因敲除原理概述PK18MOBSACB是一种基因敲除工具，其原理主要包括以下几个步骤：1.构建敲除载体：首先，需要构建一个敲除载体，该载体通常包含目标基因的上下游序列、抗性基因等。
构建敲除载体的目的是将其导入到目标细胞中，并实现目标基因的敲除。
2.导入敲除载体：将构建好的敲除载体导入到目标细胞中，可以通过化学法转染、电穿孔法、病毒载体转染等方法实现。
3.选择性筛选：导入敲除载体后，需要进行选择性筛选，以筛选出已经发生基因敲除的细胞。
通常使用特定培养基或添加抗生素来选择带有敲除载体的细胞。
4.鉴定敲除细胞：通过PCR、Western blot、克隆测序等方法，对筛选出的细胞进行鉴定，确定是否成功实现了目标基因的敲除。
二、PK18MOBSACB基因敲除原理详解1.PK18MOBSACB基因敲除载体的构建PK18MOBSACB基因敲除载体的构建是基因敲除实验的关键步骤之一。
一般而言，敲除载体由多个部分组成：目标基因的上下游序列、选择性标记基因和辅助基因等。
2.导入敲除载体将构建好的PK18MOBSACB基因敲除载体导入到目标细胞中，是实现基因敲除的关键步骤。
目前常用的导入方法包括化学法转染、电穿孔法和病毒载体转染等。
这些方法都可以有效地将敲除载体导入到目标细胞中。
3.选择性筛选导入敲除载体后，需要进行选择性筛选，以筛选出已经发生基因敲除的细胞。
常用的选择方法是添加抗生素或使用特定培养基。
这些方法可以选择出带有敲除载体的细胞，进一步进行后续的鉴定工作。
4.鉴定敲除细胞经过选择性筛选后，需要对敲除细胞进行鉴定，以确定是否成功实现了目标基因的敲除。
基因敲除技术研究新进展2021
基因敲除技术研究新进展2021基因敲除技术研究新进展黄薇,严放北京大学医学部心血管研究所gene knockout）技术是20世纪80年代发展起来的一门新技术。
应用DNA同源重组技术将灭活的基因导入小鼠胚em cells，ES cells）以取代目的基因，再筛选出已靶向灭活的细胞，微注射入小鼠囊胚。
该细胞参与胚胎发育形成可得到纯合基因敲除小鼠。
基因敲除小鼠模型的建立使许多与人类疾病相关的新基因的功能得到阐明，使现代生物学进展。
基于基因敲除技术对医学生物学研究做出的重大贡献，在该领域取得重大进展的三位科学家，70岁的美国人chi）、82岁的美国人奥利弗?史密西斯（Oliver Smithies）和66岁的英国人马丁?埃文斯（Martin Evans）分享了280年代末期的基因敲除技术为第一代技术，属完全性基因敲除，不具备时间和区域特异性。
关于第二代区域和组织于1993年。
Tsien等[1]于1996年在《Cell》首先报道了第一个脑区特异性的基因敲除动物，被誉为条件性基因敲除oxP系统为基础，Cre在哪种组织细胞中表达，基因敲除就发生在哪种组织细胞中。
imizu等[2]于《Science》报道了以时间可调性和区域特异性为标志的第三代基因敲除技术，其同样以Cre/LoxP系统re的表达。
该技术使目的基因的敲除在时间上可人为控制，避免了死胎或动物出生后不久即死亡等现象的出现。
实验室Cui[3]等又报道了第四代基因工程技术，即可诱导的区域性蛋白质敲除技术，用这一技术构建的模式动物可在定蛋白质的功能，从根本上改变了前三代基因敲除技术对蛋白质代谢速度的内在依赖性，达到空前的时间精度，成组研究最先进的工具之一。
以来上述基因敲除技术只能在小鼠上完成，因为只有小鼠的ES细胞能在体外培养中无限增殖并同时保持多分化潜能以及猴等大动物模型在疾病研究中更接近于人类，大动物更有益于某些繁琐的手术操作，同时血浆及组织样本量较大家介绍近两年来基因敲除技术在大动物模型上的突破及进展。
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ｏｆ １５．５ ４－４．８ ｉｎ ｗｉｌｄ
ｍｉｃｅ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅｒｅ
ｎｏ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ
ａｎ
ＰＩＤ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓ，ｖｅｌｏｃｉｔｙ ａｎｄ ｄｕｒａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｗｏ
ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．Ｋｉｒ６．１ ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｍｉｃｅ ｓｈｏｗｅｄ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ＰＩＤ
ｓｔｕｄｉｅｄ
ｂｙ ４－ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ＯＩＳ
ｉｍａｇｉｎｇ
ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．【Ｒｅｓｕｌｔｓ】ＰＩＤ
ｗｅｒｅ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ
ａｓ
ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔ，ｒｅｄ ａｎｄ ｂｌｕｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｓ ｉｎ ｃｏｒｔｉｃａｌ ｒｅｆｌｅｃｔａｎｃｅ ｔｈａｔ ｓｌｏｗｌｙ ｐｒｏｐａｇａｔｅｄ ４ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ ＰＩＤ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｒｅｓｔｒｏ－ｃａｕｄａｌ，ｌａｔｅｒｏ－ｍｅｄｉａｌ，ｅａｕｄｏ—ｒｏｓｔｒａｌ，ａｎｄ
Ｌｅｅ Ｊｉｎ～Ｍｏｏｚ｝
（１．广州市第一人民医院神经外科，广东广州５１０１８０；２．华盛顿大学医学院神经科，美国密苏里圣路易斯６３１１０） 摘要：
【目的】观测小鼠脑梗死周围扩散性去极化波（ＰＩＤ）的内源光信号变化特征，了解Ｋｉｒ６．１基因敲除ｘＣｄ，鼠ＰＩＤ
的影响。【方法】以Ｋｉｒ６．１基因敲除小鼠及同窝野生型小鼠各ｌｏ只为研究对象，线栓法制备大脑中动脉梗死（ＭＣＡＯ）模型． 应用四波长内源光信号（ＯＩＳ）成像技术监测ＰＩＤ的发作情况，比较两组之间的差异。【结果】ＯＩＳ成像显示ＰＩＤ在空问分布上
流仪（ＰｅｒｉＦｌｕｘ ５０１０，瑞典Ｐｅｒｉｍｅｄ公司）、四波长
质；通过相机４×４像素组合方式获得数据，全帧 速率为３０ Ｈｚ，四个波长运行时帧速率为１２０ Ｈｚ （输出图像由５１２
Ｘ
ＯＩＳ成像系统（美国华盛顿大学医学院自行研制）、 反馈式温度调节仪（ｍＴＣＩＩ，美国Ｃｅｌｌ
１．２实验动物及分组
Ｍｉｃｒｏｃｏｎｔｒｏｌｓ
ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｍｅａｎ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ（３８．２±７．５％）ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｗｉｌｄ ｔｙｐｅ ｍｉｃｅ
ａｒｅ
（２７．８±６．６％）．【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ】Ｕｓｉｎｇ
ａｒｅ
４－ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ＯＩＳ ｓｙｓｔｅｍ，ｗｅ
ａｂｌｅ ｔｏ ｇｅｔ ｈｉｇｈ ｔｅｍｐｏｒａｌ—ｓｐａｔｉａｌ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｃｏｌｏｒ ｉｍａｇｅｓ ｗｈｉｃｈ
５１２像素降为１２８×１２８像
公司）、小鼠手术操作台和显微手术器械等。 选用ＳＰＦ级成年雄性Ｋｉｒ６．１ ＫＯ小鼠１０只为 实验组，遗传背景为Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ，３～４月龄，体质量
２２～２８
素），最终像素为７８斗ｍ×７８斗ｍ。为获得模拟白光 照射下的彩色影像，最先开始从红色（６２５ ｎｍ）、黄
色（５８８ ｎｍ）和蓝色（４７８ ｎｍ）光照射产生的图像数
万方数据
第２期
吕建平，等．Ｋｉｒ６．１基因敲除小鼠脑梗死周围扩散性去极化波的内源光信号成像
பைடு நூலகம்
２６５
扩散性去极化（Ｓｐｒｅａｄｉｎｇ ｄｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）是在 脑皮层表面缓慢传播的一种特殊去极化波［Ｍ］。局 灶性脑缺血后可诱发扩散性去极化波，称为梗死 周围扩散性去极化（ｐｅｒｉ—ｉｎｆａｒｃｔ ｄｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｓ， ＰＩＤ），ＰＩＤ与脑梗死病变的进展关系密切，是脑梗 死的重要病理生理学机制之一【３＿引。目前共识是 Ｋ＋与扩散性去极化发作密切相关．因此有学者已 开始关注Ｋ＋通道在扩散性去极化发作相关机制中 的作用【５］。然而，在数十种类型Ｋ＋通道的庞大家族 中，究竟哪些Ｋ＋通道可能会影响扩散性去极化的 发作？目前对此展开的研究仍相当有限。在内向整 流Ｋ＋通道（Ｋｉｒ）家族中，Ｋ册通道在缺血缺氧等病 理条件下才开放。对缺血缺氧性脑损伤有保护作 用［¨］。其中，Ｋｉｒ６．１ Ｋ册通道主要在星形胶质细胞 中表达．而星形胶质细胞在扩散性去极化的产生 和传播中发挥着重要作用［１－２］。因此，我们推测
表现为由发源处向四周缓慢播散的、红蓝相间的弧形波，；ＰＩＤ存在４种不同播散类型：喙一尾播散类型、侧方一内侧播散类 型、尾一喙播散类型和对侧播散类型；Ｋｉｒ６．１基因敲除小鼠ＰＩＤ的发作次数（２５．５±６．５次）明显高于野生型小鼠（１５．５±４．８ 次）（Ｐ＜０．０１），但两组小鼠ＰＩＤ的播散类型、速度及时程无显著差异（Ｐ＞０．０５）；Ｋｉｒ６．１基因敲除小鼠ＭＣＡＯ模型脑梗死体积
手术切口。
１．４
Ｋ册通道可能在ＰＩＤ的发作中发挥重要作
ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ
用。本研究采用内源光信号（ｏｐｔｉｃａｌ
ｓｉｇｎａｌ，ＯＩＳ）成像技术［ｓ］监测Ｋｉｒ６．１基因敲除
（ｋｎｏｃｋｏｕｔ，ＫＯ）ｄ，鼠与同窝野生型（ｗｉｔｄｔｙｐｅ，册）
小鼠局灶性脑缺血后诱发的ＰＩＤ，对比分析两组 ＰＩＤ的发作次数、时间特性、空间分布特征及其传 播方式等．以探索Ｋｉｒ６．１基因在ＰＩＤ发作相关机 制中的作用。
ｇ；另选１０只同龄雄性野生型（ＷＴ）ｄ，鼠为 对照组．由美国华盛顿大学医学院实验动物中心 提供。两组小鼠的基本生理指标（发育、外形和体 质量等）无明显差异。标准配方饲料喂养，自由进 水。所有程序均经过华盛顿大学医学院动物研究
１材料与方法
１．１实验仪器
ｎｍ和６２５ ｎｍ的发光二极
管，共同组成照明环（直径７ ｃｍ），于小鼠头顶上方
约１０ ｃｍ场续照明；采用低温帧传输ＥＭＣＣＤ相机 （ｉＸｏｎ ８９７，英国Ａｎｄｏｒ公司）获得图像，视野调整 到约１ ｅｍ２，覆盖前到嗅球后到上丘的大部分脑皮
小动物专用吸人麻醉机（ＶＭＲ。美国ＭＡＴＲＸ 公司）、标准脑立体定位仪（美国Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ公司）、 手术显微镜（德国Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ公司）、激光多普勒血
百分比（３８．２±７．５）％明显大于野生型小鼠（２７．８±６．６）％（Ｐ＜ｏ．０５）。【结论】四波长ＯＩＳ成像技术可获得ＰＩＤ的高分辨
率彩色影像，为更深入研究ＰＩＤ的时空特性创造了条件；Ｋｉｒ６．１基因敲除后促进ＰＩＤ的发作。可能与星形胶质细胞Ｋｉｒ６．１ ＫＡａｒ通道清除细胞外Ｋ＋的能力下降有关；Ⅺ１１５．１基因敲除后可能通过促进小鼠ＰＩＤ的发作，导致脑缺血损伤较野生型小 鼠更为严重。 关键词：脑梗死；扩散性去极化；内源光信号；Ｋｉｒ６，１ 中图分类号：Ｒ７４３．３３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２—３５５４（２０１５）０２—０２６４—０５
ＯＩＳ成像系统［８１监测ＰＩＤ
ＯＩＳ持续监测６ ｈ，异氟烷麻醉浓度调整为 １％，以减少药物可能对ＰＩＤ发作的影响。加热护 垫维持肛温在（３７．０±０．５）℃。如图１所示，小鼠置 于四波长ＯＩＳ成像系统，头顶部正中切开部位滴 人润滑油，保持颅骨湿润状态。ＯＩＳ照明光源为波
长４７８
ｎｍ、５８８ ｎｍ、６１０
［Ｊ
ＳＵＮ Ｙａｔ—ｓｅｎ
Ｕｎｉｖ（Ｍｅｄ Ｓｃｉ），２０１５，３６（２）：２６４—２６８］
收稿日期：２０１４—０９—０１ 基金项目：广东省医学科研基金（Ａ２０１４５４８） 作者简俞：吕建平，博士，副主任医师，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｊｐｗｈｘ＠１６３．ｃｏｒｎ；女通信作者：Ｌｅｅ Ｊｉｎ—Ｍｏｏ，博士，教授，Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｕｊ＠ｎｅｕｒｏ．ｗｕｓｔｌ．ｅｄｕ
Ｏｐｔｉｃａｌ Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ Ｓｉｇｎａｌ
Ｉｍａｇｉｎｇ
ｏｆ Ｐｅｒｉ－ｉｎｆａｒｃｔ Ｄｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｋｉｒ６．１ Ｋｎｏｃｋｏｕｔ
Ｍｉｃｅ
ＬＵ Ｊｉａｎ—ｐｉｎ９１，ＣＡＯ Ｚｈｉ—ｋａｉｌ，ＬＵＯ Ｊｉｎ－ｂｉａ０１，ＺＨＡＮＧ Ｈａｉ—ｘｉａ２，ＬＥＥ Ｊｉｎ—Ｍ００２＋
ａ
ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｌｙ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｏｒｉｇｉｎ
ｓｉｔｅ．Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ
ｗｅｒｅ
ｅｏｎｔｒａｌａｔｅｒａｌ ｐａｔｔｅｒｎ．Ｋｉｒ６．１ ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｍｉｃｅ ｈａｄ ｔｙｐｅ
ｍｅａｎ ｏｆ ２５。５±６．５ ＰＩＤ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｍｕｃｈ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ
ｉｎ
ａ
ｍｅａｎ
据最大值归一化为１，然后存储在ＲＧＢ图像的红 绿蓝通道．通过ＭＡＴＬＡＢ软件处理．最终形成高时 空分辨率ＯＩＳ彩色影像。 在ＭＡＴＬＡＢ计算平台下分析处理采集的ＰＩＤ 波图像序列，选取感兴趣区域（ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｉｎｔｅｒｅｓｔ， ＲＯＩ），参照Ｂｒｅｎｎａｎ等［１０］的测量方法对光强信号 数据进行计算分析。
Ｋｉｒ６．１
委员会批准（项目号：２０１１０１８６）。
１．３
大脑中动脉梗死（Ｍｉｄｄｌｅ
ｃｅｒｅｂｒａｌ ａｒｔｅｒｙ
ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ，ＭＣＡＯ）模型的制备
小鼠经３％异氟烷吸入麻醉．模型制备时将剂 量调整为１．５％。传统线栓法制作左侧永久性 ＭＣＡＯ模型【９］。小鼠俯卧位，取头顶部正中头皮切 口．向两侧牵开后显露约１ ｅｍ２颅骨，激光多普勒 血流仪检测左侧大脑中动脉分布区的血流量（检 测点：前囟后２ ｍｍ，中线旁开５ ｍｍ）；随之体位调 整为仰卧位，取颈正中切口长约１ ｃｍ，切开皮肤与 筋膜，显露左侧颈总、颈内和颈外动脉，在颈总动 脉做斜切口并插入长１２ ｍｉｎ的６—０尼龙线（线端 用硅胶包被处理），至稍遇阻力时中止插线，插线 深度从颈总动脉分叉处计约１０ ｍｍ左右阻断大脑 中动脉血流。激光多普勒血流仪再次检测左侧大 脑中动脉分布区的血流量，计算术后脑血流量与 术前脑血流量的百分比值，当血流量降低到原来 的２０％以下时提示栓塞成功，固定保留栓线，缝合
第３６卷第２期 ２０１５年３月
中山大学学报（医学科学版）
ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＳＵＮ ＹＡＴ－ＳＥＮ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＭＥＤＩＣＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥＳ）
Ｖ０１．３６