D-对羟基苯甘氨酸的制备

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D-对羟基苯甘氨酸的合成研究

第２９卷第２期
２１年３月００
许昌学院学报
ＪＯＵＲＮＡＬ０ＦＸＵＣＨＡＮＧＵＮＩＶＥＲＳＴＹＩ
Ｖｏ＿２ｌ９．Ｎｏ２．
Ｍａ．２Ｏｒ０１
文章编号：６１８４（００）２—０９０１７ —９２２１００６— ３
的收率为６．％，６７经母液套用后，收率可以达到８．％．３８
加入相转移催化剂苄基三乙基氯化铵，将亲油性的苯酚转移到亲水性的乙醛酸相中，反应较可使
易进行．程收率达７％以上，液回收套用后总收率达７％以上，高效液相色谱法测得产品纯度为单０母５经
９．％．法反应时间短、９１此收率高．
１２３对羟基苯海因水解法．．
Ｓｈｒｅ，ｅｍｏ６乙醛酸、ｃａｄｒｄｈｌｗＥＶ『用Ｓ尿素与苯酚作用生成对一羟基苯海因，再进行水解得目标化合
低．现在对此法进行改进，以氨基磺酸代替原工艺中的铵盐，反应收率高，则且后处理也容易进行，添加若
适当的催化剂，可进一步缩短反应时间．此法在我国石家庄、武汉等厂家普遍采用．使用乙醛酸、酚、苯氨基磺酸Ｈ制得ＤＬ—ＨＧ，Ｐ温度控制在４６０— ０℃ ，应５～，羟基苯甘氨酸反６ｈ对
物．其反应式为：

制备D-对羟基苯甘氨酸新工艺

本文介绍的对羟基苯甘氨酸拆分工艺以Ｄ．３溴代樟脑一磺酸铵（简称Ｄ — ＡＢＣＳ）为拆分剂，冰
醋酸为溶剂，加少量浓盐酸或浓硫酸，以水杨醛为催化剂，使目标对映体的拆分及非目标对映体的外消
作者简介：李祖文，男，１９６３年出生，１９８６年毕业于沈阳药科大学，学士学位，工程师，主要从事药物合成及生产管理工作。
在此过程中起着关键的作用 … 。
２０１３年４月
李祖文等。制备Ｄ一对羟基苯甘氨酸新工艺
・２３・
对羟基苯甘氨酸在自然界是不存在的，其制备
此，所得产物存在收率低、质量差的问题。理论上讲，一次结晶过程收率可达５０％，但实
际上只能达到４０％左右，产品的光学纯度９５％左
右。在实际工业生产中，非目标对映体只有重复不
制备Ｄ一对羟基苯甘氨酸新工艺
李祖文，郭剑虹
（山西博康药业有限公司，山西太原０３００２１）
摘要：以Ｄ－３一溴代樟脑一８－磺酸铵（简称Ｄ．ＡＢＣＳ）为拆分剂，冰醋酸为溶剂，加少量浓硫酸，以水杨醛为催化剂，使目标对映体的拆分及非目标对映体的外消旋化同时进行，获得高收率、高纯度的Ｄ一对羟基苯甘氨酸。
断地进行消旋化，才能提高目标对映体的收率。因

酶法生产D-对羟基苯甘氨酸提取方法综述

ｌ一羟基苯Ｈ氨酸计，ｔ对Ｄ ‘ 就要用到６３脂，ｍ树考虑剑另一食树脂要再生备用，就要刚到１ｍ树脂。２低温等电点法在味精的生产巾得到成功的应用。中天化上在其专利１２１酶转化液中得到的结中将晶溶解于盐酸溶液中，脱色后用氨水调节至等ｆ经巳点形成结品。法节约能源，成的品休也比较粗该形
化学名为Ｄ仪氨基对羟基苯乙酸，分子式为ＣＨ一一。
液以ｐ４０加入强酸性树脂，住交换的过程巾不断Ｈ．
产生的氢离子使ｐＨ值降低，保证Ｄ对羟基苯甘可一
氨酸以阳离了状态吸附在树脂上。然后用０２ｏＩ．ｌｏｔ／
Ｎ分子量为１７１，一种重要的医药中间休。Ｏ，６、是６
酶法生产Ｄ对羟基苯氨酸的主要特点是转一
的氢氧化钠溶液洗脱，洗脱的过程巾，住南丁钠离子
不断把Ｄ对羟基苯甘氨酸阳离子从树脂上交换下一
苯氨酸以晶体的形式析出。法工艺成熟、该口前
仍有广泛的应用，也存在着不少缺点。是该上但一艺能源消耗火，热、空、凝，一道都消了不加真冷每
是惊人的。以树脂的工作交换量为１ｏ／，日产ｍｌＩ
（浙江海正药业股份有限公司，江台州３（）浙１３０

D—对羟基苯甘氨酸的合成方法及各自的优点

－，对羟基苯甘氨酸的合成1.1.对甲氧基苯甲醛法以上方法，合成收率为64.3％，拆分收率为73％，总收率约为47％。

该方法是早期用于工业生产D，L-HPG的合成方法，对甲氧基苯甲醛于氰化钠在水溶液或者醇溶液里面，经过环合，加压碱水解和脱甲基，得到D，L-HPG。

该工艺的优点是技术成熟，缺点是使用剧毒危险品氰化钠，生产和管理不便；在碱性条件下缩合时酚羟基容易氧化着色，杂质分离困难，生成的对羟基苯海因质量不好。

过去国内采用先醚化保护羟基，随后再水解的方式，虽然减轻了酚羟基氧化，但生产工艺复杂，生产成本高，已经被放弃了。

1.2.乙醛酸法1.2.1.对羟基扁桃酸氨解法乙醛酸与苯酚反应生成对羟基α－羟基苯乙酸，再在酸性或碱性情况下于50~70摄氏度反应，接缩合成D，L-对羟基苯海因，再经水解成DL-对羟基苯甘氨酸，收率为68%，反应条件易于控制。

但是反应时间长，收率偏低。

如果在第二步反应中加入相转移催化剂十八烷基二甲基苄基氯化铵，用苯二甲酰亚胺和氨水代替铵盐与对羟基扁桃酸反应，反应时间为8h,温度60℃，收率83.5%以上，产物纯度99%以上。

1.2.2乙醛酸水溶液、苯酚和醋酸铵“－步法”勒通收等人在前人研究的基础上，以乙醛酸水溶液、苯酚和醋酸铵为原料，采用－步法合成路线，合成了DL-对羟基苯甘氨酸。

原料摩尔配比：乙醛酸：苯酚：醋酸铵为1：1：4，体系的pH值为6.0～6.5、反应温度为30～35℃和反应进行24 小时的条件下，产率可达53.9％，纯度为98.5％。

与国外报道的相比，原料苯酚少用了－半，反应时间由48h缩短到24h，产率却超过了文献值。

殷树梅等又在乙醛酸、苯酚与铵盐作用，－步法合成目标产物的基础上进行改进，成功地以氨基磺酸代替醋酸铵，选用适当地催化剂，反应时间缩短为12h，产品收率达61％。

并确定最佳工艺条件为：原料摩尔比（乙醛酸：苯酚：氨基磺酸＝1.0：1.3：1.3），反应时间为12h。

D-对羟基苯甘氨酸合成的研究进展

甘氨酸；二步再将Ｎ一基甲酰一一羟基苯甘第氨Ｄ对氨酸用化学方法水解脱去氨甲酰基得ＤＨＰ — Ｇ。
有一定技术难度；一类是采用化学方法合成得另到外消旋体Ｄ，一羟基苯甘氨酸（ＬＨＰ，Ｌ对Ｄ， — Ｇ）再经拆分得到具有光学活性的ＤＨＰ — Ｇ。中国是抗生素类药物的生产和需求大国，而且中国制药行业已把半合成青霉素和半合成头孢菌素作为发
杆菌，热脂肪芽孢杆菌，瘤农杆菌，单胞杆嗜根假菌，肠杆菌等大。【海因酶催化对羟基苯海）＿
因的反应一般在碱性缓冲溶液中进行，反应的转化率较化学合成要高许多。Ｏｌｅｉ等成功ｉｒｌｖＫｅ
提取了Ｄ海因酶和Ｄ氨基甲酰水解酶，其用于一一将
该反应中使用剧毒的氰化钠，反应路线长，收
率低，碱水解步骤需要高压，设备的要求条件较对高，目前已经逐步被淘汰。１２２对羟基苯甲醛法（ｔｅｋｒ氨基酸合成．．Ｓｒｃｅ
１１２两菌两酶法．．
随着Ｄ氨基甲酰水解酶（Ｃ３５１的发现，一Ｅ．．）使由Ｄ， — Ｈ合成ＤＨＰ的两菌两酶法得以ＬＨＰ～Ｇ实现＿。培养用来提取Ｄ海因酶和Ｄ氨基甲酰７］一一水解酶适合的菌种是该法的关键（下式）见。

D-(-)-对羟基苯甘氨酸晶型及其制备方法[发明专利]

(10)申请公布号(43)申请公布日 (21)申请号 201610065222.0(22)申请日 2016.01.29C07C 229/36(2006.01)C07C 227/42(2006.01)(71)申请人郑州大学地址450001 河南省郑州市高新区科学大道100号申请人河南新天地药业股份有限公司(72)发明人李雯刘宏民张晓慧于玉振赵兵张恩孙凯马立英李战军李运丽王荣荣赵曼李鹏坤陈芳芳谢建中刘超(74)专利代理机构郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104代理人时立新(54)发明名称D-(-)-对羟基苯甘氨酸晶型及其制备方法(57)摘要本发明涉及一种D-(-)-对羟基苯甘氨酸新晶型及其结晶制备方法，属于结晶技术领域。

其单晶结构如下，为正交晶系P212121。

该新晶型采用加压结晶法、反溶剂重结晶法制备成80-150目细小晶体。

采用该专利方法制备的新晶型颗粒，具有良好的耐压力性和流动性，贮存180天后，产品颜色、纯度、形态未发生变化，未出现聚集结块现象，更有利于产品的储存运输。

(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页说明书7页附图6页CN 105566139 A 2016.05.11C N 105566139A1.一种D-(-)-对羟基苯甘氨酸晶型，其特征在于，单晶结构如下，为正交晶系P212121，2.如权利要求1所述的D-(-)-对羟基苯甘氨酸晶型，其特征在于，其X-射线粉末衍射在衍射角2θ＝10.5±0.1，14.9±0.1，18.6±0.1，19.0±0.1，19.4±0.1，20.6±0.1，21.2±0.1，21.9±0.1，23.6±0.1，28.4±0.1，30.0±0.1，30.6±0.1，33.4±0.1，33.8±0.1，35.3±0.1，35.9±0.1，37.1±0.1，38.5±0.1，39.1±0.1，41.8±0.1，43.4±0.1，44.0±0.1，46.2±0.1，47.2±0.1度处有特征峰，其TG-DSC图在226±5℃出现熔点峰。

采用非均相酶催化法生产D-对羟基苯甘氨酸的方法[发明专利]

专利名称：采用非均相酶催化法生产D－对羟基苯甘氨酸的方法
专利类型：发明专利
发明人：刘守信,崔哲锋,周志辉,付建忠
申请号：CN200610048209.0
申请日：20060830
公开号：CN1928103A
公开日：
20070314
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于医药原料的生产，特别是指采用非均相酶催化法生产D－对羟基苯甘氨酸的方法。

在酶催化反应罐中，投入DL－对羟基苯海因和溶剂，调整DL－对羟基苯海因投料量为溶剂体积的4％－28％；加入为反应液总量的1－12％且酶活高于0.3U/mL的酶制剂，在pH为6.2－8.6、温度为30－44℃条件下搅拌反应；取样并用高压液相色谱检测反应，反应进行6－12h后，则有D－对羟基苯甘氨酸晶体开始析出，待反应体系中N－氨甲酰对羟基苯甘氨酸浓度降至0.25％以下时，反应结束。

本发明解决了现有技术存在的溶液体积过大，产量低，能耗高的问题。

具有在水系中实现了微生物催化转化从液——液到固——固工艺的革新，与现有一步酶法结合后形成了D－对羟基苯甘氨酸的全新生产技术；产率高，能耗低，合格率达99％以上等优点。

申请人：石家庄经济技术开发区中天化工有限责任公司
地址：052165 河北省石家庄市石家庄经济技术开发区兴业街20号
国籍：CN
代理机构：石家庄科诚专利事务所
代理人：刘谟培
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D-对羟基苯甘氨酸的制备

D-对羟基苯甘氨酸的制备制药081（10084349）刘朝阳1前言1.1目的D-对羟基苯甘氨酸是重要的医药中间体，通过查阅国内外有关文献，本文总结了对羟基苯甘氨酸的性质、用途、主要生产路线和生产开发情况。

1.2产品介绍D-对羟基苯甘氨酸(简称:D-p-HPG)是一种重要的医药精细化学品,主要用于合成β-2-内酰胺类半合成抗菌素,如羟氨苄青霉素(阿莫西林)、头孢克罗、头孢立新、头孢拉定等抗菌药物。

这些药物用途广泛,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、弓形体、螺旋体等均有杀灭作用；同时它也用于多种多肽类激素及农药的合成、人工甜味剂的重要中间体。

【结构式】D-对羟基苯甘氨酸 (D-p-hydroxylphenylglycine,D-p-HPG),化学名D-α-氨基对羟基苯乙酸,分子式（OH）C6H4NH2CH2COOH,分子量167.2。

【性状】白色片状结晶,熔点204℃（分解）,微溶于乙醇和水,易溶于酸或碱溶液生成盐。

1.3研究意义D-对羟基苯甘氨酸是一种重要是合成广谱抗生素羟氨卞青霉素和羟基头孢菌素的重要原料，用途广泛。

中国是抗生素类药物的生产和需求大国,而且中国制药行业已把半合成青霉素和半合成头孢菌素作为发展重点,因此对D-HPG新工艺的研究具有重要的现实意义。

2合成方法综述合成方法大致分两类:一类是生物酶催化选择性合成D-HPG,该法选择性高,污染小,但因生物菌培养问题,大规模工业化生产还有一定技术难度；另一类是采用化学方法合成得到外消旋体D,L-对羟基苯甘氨酸(D,L-HPG),再经拆分得到具有光学活性的D-HPG。

2.1D,L-HPG的合成化学合成是工业上生产D-HPG普遍采用的，但近年来,随着环保要求的不断提高和生物酶技术在手性氨基酸药物中的研究的不断进展,利用生物催化合成D-HPG逐渐成为研究的热点。

2.1.1生物催化合成法与化学合成方法相比, 生物催化法具有环境污染小、反应条件温和、选择性和转化率高等优点,但生物菌种的筛选较为困难,投资大,生物酶容易失活,无法大规模连续化生产。

D_对羟基苯甘氨酸的制备_张大帅

2 实验部分
2.1 反应方程式 D-对羟基苯甘氨酸的合成如下。
2.2 仪器与试剂仪器： Bruker AV 400 MHz 型核磁共振仪
（TMS 为内标，瑞士 Bruker 公司）、 Lab Alliance Series 1500 型液相色谱仪（Lab Alliance 公司生产）、 CHIRALPAK AD-H 250 mm × 4.6 mm 手性柱（美国 GRACE 公司）、 YRT-3 熔点仪（天津大学精密仪器厂）、 WXG-4 目视旋光仪（上海精密科学仪器有限公司）。
试剂： L-（+）-酒石酸（纯度>99％）；正己烷、异丙醇（色谱纯）；水为去离子水；其它试剂均为 AR。 2.3 DL-HPG 的制备
在装有搅拌器、温度计、冷凝器的三口烧瓶中，依次加入 14.8 g （0.2 mol，溶于 20 mL 水中）乙醛酸溶液， 22.4 g （0.24 mol）苯酚， 0.3 g 催化剂十八烷基二甲基苄基氯化铵，搅拌下升温至 60℃，搅拌 15 min 后，加入 35.5 g （0.24 mol）邻苯二甲酰亚胺，在 60℃下搅拌反应 8 h。然后冷却至室温，用 30％碳酸钾溶液调节 pH=6，过滤，滤饼依次用水（60 mL × 2）和 60 mL 乙醇洗涤，室温干燥，得 23.2 g （69.5%）白色粉末，纯度 98.8%， m.p.224~226℃ （文献［9］值： 225~227℃ ）。 1H NMR （ 400 MHz， DMSO -d6）， δ： 4.07 （ s， 1H）， 6.70 （ q， J =2.4 Hz， 2H）， 7.15 （ d， J =8.4 Hz， 2H）， 7.80 （br， 2H）， 9.44 （br， 1H）； 1H NMR （400 MHz， D2O）， δ： 4.69 （ s， 1H）， 6.89 （ d， J =8.4 Hz， 2H）， 7.27 （d， J=8.4 Hz， 2H）。 2.4 DL-HPG 甲酯的制备

D_对羟基苯甘氨酸的生物合成

Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００４１，Ｃｈｉｎａ）
!! Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｉｓｐａｐｅｒｉｎｔｒｏｄｕｃｅｓｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄａｎｄｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｒｅｓｉｎｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅａｌｗｉｔｈｚｉｎｃｉｏｎｉｎｔｈｅｗａｓｔｅｗａｔｅｒｏｆｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｎＣａｎｄｃｏｎｆｉｒｍｓｏｍｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｎｄｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙｓｔｕｄｙｏｎｄｉｒｅｃｔｄｉｓｃｈａｒｇｅａｆｔｅｒｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｒｅｓｉｎ．
（下转第６６页）
６６
河北化ຫໍສະໝຸດ 工２００５年第６期
表１等摩尔数不同沉淀剂对锌沉淀转化反应的影响
沉淀剂锌沉淀转化率／％过滤时间／ｍｉｎ
氢氧化钠
９０
６５
碳酸钠
８６．７
１０
碳酸氢钠
７３．３
１０
母液锌残留含量／％
备注
０．０６
沉淀发粘，土褐色
０．０６
疏松、白色
０．１６
疏松、白色
［收稿日期］２００５－０７－０７［作者简介］许喆（１９７７－），男，从事医药中间体的生产技术工作。
２生产工艺路线
!! 将乙醛酸和苯酚、尿素分别加入到盛有浓盐酸的罐中，搅拌加热进行反应，反应液经冷却、结晶得到ＤＬ－对羟基苯海因悬浮液，然后经过滤洗涤得到对羟基苯海因。 !! 将培养液经过一级种子罐、二级种子罐，培养后送至发酵罐，将培养基配置罐内配好的诱导剂、玉米浆、液糖送至发酵罐进行发酵。发酵液经过滤系统循环过滤浓缩，透析液排放，浓缩的菌丝体加入无盐水顶洗，压入转化罐。向转化罐内加入苯海因，实现ＤＬ－对羟基苯海因的转化水解。得到的转化液经过滤系统循环过滤浓缩，除去菌丝和大部分可溶性蛋白，送至板框压滤机过滤得到转化液，即得到Ｄ酸溶液。再将转化液进行树脂处理、真空浓缩、结晶、离心、干燥得到白色结晶产品Ｄ－对羟基苯甘氨酸。３该生产工艺存在的问题３．１发酵液进行絮凝、板框压滤等处理，操作时间过长导致酶活下降（约５ｈ／批，酶活损失４０％）。３．２在转化过程中大部分菌体已经自溶，释放出大量蛋白，导致过滤困难，需添加助滤剂才能得以过滤且滤饼中的产品不能洗涤干净。３．３释放的蛋白质需用树脂吸附、加热调节等电点来去除，且Ｄ－对羟基苯甘氨酸在碱性条件下容易氧化，色泽加深，导致脱色时活性炭量增加，收率降低。３．４外循环蒸发的能耗较大，单位处理能力小且由

D-对羟基苯甘氨酸的合成研究

D-对羟基苯甘氨酸的合成研究张彦岭;李公春【摘要】综述了近年来D-对羟基苯甘氨酸合成工艺的研究进展.通过比较发现乙醛酸法及生物酶拆分制备D-对羟基苯甘氨酸具有较好的应用前景.【期刊名称】《许昌学院学报》【年(卷),期】2010(029)002【总页数】3页(P96-98)【关键词】D-对羟基苯甘氨酸;合成;拆分;进展【作者】张彦岭;李公春【作者单位】许昌学院,化学化工学院,河南,许昌,461000;许昌学院,化学化工学院,河南,许昌,461000【正文语种】中文【中图分类】O641.4D-对羟基苯甘氨酸(D-p-hydroxyphenylglycine,D-HPG),化学名为 D-α-氨基对羟基苯乙酸,分子式为 C8H9NO3,分子量为 167.2,是白色固体粉末,熔点为240℃,微溶于乙醇和水.D-对羟基苯甘氨酸是合成广谱抗生素阿莫西林、头孢羟氨苄的重要原料[1],因此D-对羟基苯甘氨酸的合成研究具有重要的应用价值.国内外都是先合成外消旋的DL-对羟基苯甘氨酸(DL-HPG),然后用化学或生物技术拆分法获得D-对羟基苯甘氨酸.现就国内外关于D-对羟基苯甘氨酸合成工艺的研究进展进行综述. DL-对羟基苯甘氨酸的制备主要有苯甲醛法和乙醛酸法两种路线.苯甲醛法用对羟基苯甲醛,碳酸氢铵与氰化钠环合成对羟基苯海因,再经碱性水解,开环制备DL-对羟基苯甘氨酸.反应方程式如下:这种合成路线利用最早,也比较成熟,但是该路线收率不高,且需要使用剧毒品氰化钠,现已很少使用.乙醛酸法是上世纪 90年代才形成的,是以乙醛酸为原料来合成D-对羟基苯甘氨酸.1.2.1 对羟基扁桃酸氨解法对羟基扁桃酸氨解法是以苯酚、乙醛酸为原料,氨基甲酸铵为氨化剂在 50～70℃进行反应,通入 N2保护,可以得到纯度大于 99%的D-对羟基苯甘氨酸,收率达到 65%以上,反应条件较易控制[3].其反应式为:1.2.2 乙醛酸、苯酚、氨基磺酸法用乙醛酸、苯酚与铵盐作用,一步法合成DL-HPG,此法原料易得、价格便宜,但反应时间长,收率偏低.现在对此法进行改进,以氨基磺酸代替原工艺中的铵盐,则反应收率高,且后处理也容易进行,若添加适当的催化剂,可进一步缩短反应时间.此法在我国石家庄、武汉等厂家普遍采用.使用乙醛酸、苯酚、氨基磺酸[4]制得DL-HPG,温度控制在 40～60℃,反应 5～6 h,对羟基苯甘氨酸的收率为 66.7%,经母液套用后,收率可以达到 83.8%.加入相转移催化剂苄基三乙基氯化铵[5],可将亲油性的苯酚转移到亲水性的乙醛酸相中,使反应较易进行.单程收率达 70%以上,母液回收套用后总收率达 75%以上,经高效液相色谱法测得产品纯度为99.1%.此法反应时间短、收率高.1.2.3 对羟基苯海因水解法Scharder S,dehmlow E V[6]用乙醛酸、尿素与苯酚作用生成对 -羟基苯海因,再进行水解得目标化合物.其反应式为:此外还有一些合成方法,以苯酚、乙醛酸为原料,氨水[7]为氨化剂采用最优工艺合成了DL-HPG.以邻苯二甲酰亚胺[8]代替氨基磺酸,选用季铵盐十八烷基二甲基苄基氯化铵为相转移催化剂,产品收率可达83.5%,纯度可达 99%以上.反应条件温和、工艺简单,提高了产品收率和纯度,此工艺具有一定的工业推广价值.比较以上各种方法可以看出,由于乙醛酸、苯酚、氨基磺酸法具有步骤少、收率高、成本低等优点,从而得到了广泛应用.在拆分技术上,近几年国内外常用的主要有化学拆分法和生物酶法.化学拆分法是广泛使用的一种方法.该法利用手性试剂与对羟基苯甘氨酸反应,生成两个非对映异构体,再利用两个非对映异构体的物理性质的不同将其拆分.最后把这两个非对映异构体分别复原为原来的对映体.以 d-3-溴樟脑 -8-磺酸铵盐[9]为拆分剂,在水杨醛存在下,使拆分和 L-对羟基苯甘氨酸消旋同时进行,拆分外消旋对羟基苯甘氨酸得到阿莫西林等的侧链酸D-对羟基苯甘氨酸,总收率为 70%,光学纯度 >99%.其反应式为:以DL-对羟基苯甘氨酸为原料,酯化后与D-酒石酸[10]成盐,利用D-型和 L-型盐在甲醇中溶解度的不同,D-型盐先析出,经水解、中和得到D-对羟基苯甘氨酸,总收率为 61%.此法原料易得、工艺简单、成本低.在拆分体系中加入苯甲醛可直接将L-对羟基苯甘氨酸消旋重新拆分,能使步骤简化,收率有所提高.生物酶法是当前国内外研究比较多的拆分方法,生物酶法具有光学活性单一、能源消耗少、“三废”污染小等优点.海因酶能选择性地将外消旋DL-对羟基苯海因中D型水解为N-氨甲酰 -D-对羟基苯甘氨酸(NC -D-HPG),残留L-对羟基苯海因在中性或碱性条件下,会迅速自发地消旋为 DL-对羟基苯海因.因此,消旋的DL-对羟基苯海因最终接近于完全转化为D-HPG.酶拆分法包括一步酶一步化学法和二步酶法,前者是用海因酶将DL-HPG水解为NC-D-HPG,再用化学法将其水解为D-HPG.随着N-氨甲酰水解酶在自然界中被发现,二步酶法生产D-HPG目前已成为研究的热点[11].据文献报道:分离出来的 Burkholderia cepaciaJS-02[12]、Sinorhizobium morelensS-5[13]菌株能产生高活性的对羟基苯海因酶和N-氨甲酰水解酶,可以把对-羟基苯海因转化成D-对羟基苯甘氨酸.这样就省去了先合成外消旋混合物再拆分的繁琐步骤,可直接得到期望产物.乙醛酸、苯酚、氨基磺酸法现已普遍应用在工业生产,具有步骤少、收率高、成本低等优点.随着拆分技术的发展,研发D-HPG的前景更好.为了实施绿色化学,倡导绿色合成,应注重不对称合成技术的研究开发,利用不对称合成技术直接得到期望的化合物构型D-HPG,避免了繁琐的拆分,简化了后处理操作,也减轻了环保压力.【相关文献】[1] Chia-Hsi Fana,Cheng-Kang Lee,Yun-Peng Chao.Recombinant Escherichia coli cell for D-p-hydroxyphenylglycine production from D-N-carbamoyl-p-hydroxyphenylglycine[J].Enzyme andMicrobial Technology,2000(26):222-228.[2] DegnerD,Pander H J,Siegel H.4-2Tert-butoxyphenylglycine nitrile and methods for D-(-)-and L-(+)-4-hydrophenylglycine[P].DE:3002543,1981-06-30.[3] 李文崇,朱绍勇.4-羟基苯苷氨酸合成的工艺改进[J].化工之友,2006(12):24.[4] 张静,涂伟萍.DL-对羟基苯甘氨酸的合成研究[J].应用化工,2003,32(5):46-51.[5] 裴蕾,刘福胜,于世涛.DL-对羟基苯甘氨酸的合成研究[J].精细石油化工进展,2007,8(11):20-23.[6] Scharder S,dehmlow E V.Hydrogen peroxide and air as inexpensive oxidants in phase-transfer catalysis[J].Org Prep Proced int,2000(32):123-125.[7] 伊汀.正交试验优化DL-对羟基苯甘氨酸合成工艺[J].上海化工,2008,33(11):11-13.[8] 项东升.DL-对羟基苯甘氨酸的合成新工艺[J].化工中间体,2006(11):20-22.[9] 杨帆,张征林,邹建忠.D-对羟基苯甘氨酸的不对称转化拆分[J].中国医药工志,2005,36(4):199-120.[10]李庆文.蒋俊树.化学拆分法制备左旋对羟基苯甘氨酸[J].安徽化工,2000,106(4):11.[11]杨华.重要医药中间体 -对羟基苯甘氨酸[J].化工中间体,2003(14):6-9.[12]Min Jiang a,Longan Shang,PingWei,et al.Pilot-scale production of d-p-hydroxyphenylglycine from dl-5-p-hydroxy -phenylhydantoin byBurkholderia cepacia JS-02[J].Enzyme andMicrobial Technology,2007(41):407-412.[13]ShengWu,Liu Yang,YanbinLiu,et al.Enzymatic production of d-p-hydroxyphenylglycine from dl-5-p-hydroxyphenylhydantoin by Sinorhizobium morelens S-5[J].Enzyme andMicrobial Technology,2005(36):520-526.。

海因酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展

海因酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展
董妍玲;谭新国;潘学武
【期刊名称】《氨基酸和生物资源》
【年(卷),期】2009(31)3
【摘要】D-对羟基苯甘氨酸(D-HPG)主要用于合成β-内酰胺类半合成抗生素,是国内最紧缺的医药中间体之一。

微生物酶法是目前获得光学纯D-HPG的重要途径,微生物中起催化作用的主要是D-海因酶和N-氨甲酰水解酶。

文章综述了产酶微生物的来源,酶的理化性质,以及培养条件的优化、基因工程、酶的固定化技术生产D-HPG的研究进展。

【总页数】6页(P47-52)
【关键词】D-对羟基苯甘氨酸;D-海因酶;D-氨甲酰水解酶;基因工程菌;固定化【作者】董妍玲;谭新国;潘学武
【作者单位】武汉生物工程学院生物技术系;武汉大学资源与环境科学学院环境科学系
【正文语种】中文
【中图分类】Q78
【相关文献】
1.海因酶法耦合原位分离技术制备N-氨甲酰-D-苯丙氨酸 [J], 徐晓滢;姚忠;马哲;刘辉;周华;韦萍
2.酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展 [J], 阚振荣;李业英;朱宝成;周海霞;梁利
华;张金平
3.微生物酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展 [J], 李业英;阚振荣;朱宝成
4.酶法转化D,L-苄基海因制备N-氨甲酰-D-苯丙氨酸 [J], 贾红华;韦萍;周华;欧阳平凯
5.用基因工程菌酶法和化学法制备-D-对羟基苯甘氨酸(英文) [J], 李志强;胡卓逸;刘景晶
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D-对羟基苯甘氨酸印迹聚合物的制备及识别性能研究的开题报告

D-对羟基苯甘氨酸印迹聚合物的制备及识别性能研究的开题报告一、选题背景及意义对羟基苯甘氨酸（tyrosine）是蛋白质中常见的氨基酸之一，它在蛋白质的分子结构和功能中起着重要的作用。

因此，对tyrosine进行检测和分析对于研究生物学和医学领域具有重要的意义。

传统的tyrosine检测方法主要依靠色谱法、质谱法和荧光法等技术，但这些方法存在着样品处理困难、成本高昂等问题。

近年来，以印迹技术为代表的生物传感器技术研究发展迅速，该技术不仅具有高灵敏度和高特异性的优点，而且还能够实现实时定量监测，成为了tyrosine检测领域的热门研究方向。

因此，本研究拟采用印迹技术制备对羟基苯甘氨酸印迹聚合物，并对其识别性能进行研究，以期为tyrosine检测提供更加简便、快捷、低成本的检测方法。

二、研究内容和方法1.印迹聚合物制备：采用自由基聚合技术，在含有tyrosine的体系中以甲基丙烯酸酯（MAA）作为功能单体，交联剂以及引发剂，经阳离子型表面活性剂微乳液法制备tyrosine印迹聚合物。

2.构建tyrosine检测传感器：将tyrosine印迹聚合物修饰于转化膜或传感器表面，构建tyrosine检测传感器。

3.识别性能研究：采用电化学阻抗谱（EIS）和循环伏安（CV）等技术对tyrosine印迹聚合物的识别性能进行测试，并与无印迹聚合物进行对照实验，探究其识别性能的异同。

三、研究预期成果1.成功制备出tyrosine印迹聚合物，并构建出tyrosine检测传感器。

2.验证tyrosine印迹聚合物对tyrosine有较高的识别性能。

3.建立一种简便、快捷、低成本的tyrosine检测方法。

四、研究意义和应用前景1.印迹技术在生物传感器领域中的应用将为生物医药领域提供更加简便、快捷、低成本的检测方法，进一步促进产品研发和推广应用。

2.该研究还有望为其他氨基酸的检测和分析提供新思路和方法。

3.该研究成果可以应用于食品、医药、农业、生态环境等领域。