案例一送检混合斑≠与案件有关案例二混合斑中的女性成分来源于谁 ...

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混合斑精子DNA分析的研究进展

（）商业化试剂盒二
按照商业化试剂盒推荐的操作步骤，对精子细胞进行提取纯化，从而达到分离精子ＤＡ目的。目前Ｎ的常用的试剂盒有ＤＡＩＭ系￣ｔＰ７、ＤｆｒＭ系ＮＴＱ３．９ｉｅ￣ＴＪ８）（ｘ统【９ｈｓｋｅＴ法嘲（３９４）ａｅｏｌＭ】、Ｐ９ｌＧｃＰ４３等。这些方法・—９９
２１００年１月
辽宁警专学报
ＪＵＲＮＡＬＯＦＬＡＯＮＮＧＯＵＣＯＩＩＰＥＡＣＡＤＥＭＹ
Ｊｎ２０ａ．０１
第１（期总第５９期）
Ｎ．Ｓｍ．ｏ１（ｕ５９）
混合斑精子ＤＮ分析的研究进展Ａ
任文彦 ’ ，张
关键词：混合斑。精子ＤＡＮ分析，法医学。个人识别。研究进展
＊ｌ￣类号：Ｄ９９２ｔｔ１．文献标识码：Ａ文章编号：０８—５７（０００ —０８１０３８２１）１０６—０４各有特点，在分离精子细胞中起了很大的作用。ＤＡＩＭｓｓｍ是用细胞裂解液裂解细胞，通ＮＴｔＱｙｅ过磁性硅胶吸附ＤＡ，从细胞中游离出来的ＤＡ分子ＮＮ被吸附到磁性颗粒表面，而蛋白质等分子不被吸附而留在溶液中。在磁场作用下，磁性颗粒与液体分开，回收颗粒后，再用洗脱液洗脱吸附的ＤＡ。ＮＤｆ￣ｘＭ系统是ｐｅａｉｅＴｍｍｇ公司研制的一种新型高效的混合斑分离系统。它利用标准蛋白酶Ｋ消化，并结合相差分离与差速离心技术对混合斑中的精子及上皮细胞ＤＡ进行分离提取。ＮＰａｅｏｋｅ是一种核酸提取惰性凝胶物质，在ｈｓｃｌｌＧ离心过程中聚集在一起，水和有机相之间形成了阻断层，有机相和中间的杂质被有效的封闭在阻断层里面或下面，通过简单的倾倒或吸液方式吸出全部水相样品，核酸得率和纯度可增加３％，而且完全不会被中０间层物质所污染；ＰＧＬ还避免了与有毒物质直接接触，提高了操作安全性。

精-血混合斑检出单一STR分型3例

次提取１０处血迹进行检验，又获得４名不同男性ＳＴＲ分型。对Ｔ恤上检出男性ＳＴＲ分型的血迹部位进行涂片染色检验，显微镜下检见精子。案例２某年５月，某市一休闲店发内生ｌ起卖淫女被杀案，中心现场见多处滴状血，提取ＤＮＡ检
同一车辆。
验，在其中１处滴状血上检出１名男性ＳＴＲ分型，与犯罪嫌疑人不同，因与现场血迹分析不符，笔者对该处滴状血迹补充进行精斑检验呈阳性反应。
案例３某年１０月，某宾馆一房间内发生１起强
总之要结合客观规律与实际情况，综合分析符合
点和差异点的数量和质量。对于符合特征，注意分析
其特异性程度；对于差异特征，注意分析其伪装的可能。如果涉案车辆和嫌疑车辆存在足够的符合特征，
符合特征的价值充分反映了同一辆车的特点；同时没
关键词：混合斑；ＳＴＲ分型；优势扩增；ＤＮＡ检验中图分类号：ＤＦ７９５．２文献标识码：Ｂ
文章编号：１００８ — ３６５０（２０１３）０６ — ００６８一Ｏｌ
型蔓堇Ｑ生筮翅
证。种属认定还可以作为否定的依据，排除嫌疑车辆。车牌号码是从外观上确定车辆身份最有力的个体特征。但在大量的案件中，由于拍摄角度或者像素低等原因，无法从视频中获知车牌号码。依据其它特征对嫌疑车辆进行检验鉴定便成了不可避免的途径。在种属认定同一的基础上，可以检验车辆外部的损

混合斑检验10用

三、可能有混合斑的检材
（一）性犯罪案件检材，包括阴道拭子、内裤、
卫生纸、床单、外生殖器拭子及其他各类物
品，这类检材多含有精子及阴道上皮细胞，
属男、女个体成分的混合物；（二）多人受伤的现场血迹，凶器、当事人身上或衣物上的血痕，多为混合血痕；
(三）咬痕拭子含有咬者的口腔上皮细胞和被咬者的皮肤细胞；（四）指甲垢，含有本人和被抓者的细胞；
2.阴道肽酶测定
肽酶（Peptidase）催化肽键水解的酶，阴道肽酶（vaginal peptidase,Vp）能水解L缬氨酰基-L-亮氨酸及其他二肽底物.
仅存在于女性生殖道分泌液中，包括输卵管和子宫内膜分泌液、子宫颈管粘液及阴道粘膜分泌液中，与年龄、性活动及月经周期无关。
阴道肽酶测定：
用淀粉凝胶电泳检测，近正极有一条Vp蓝紫色谱带。 Vp检测阳性率64％，阴性不能否定阴道液存在。在阴道液斑中，Vp的检出期限为7个月。 Vp不存在于血液及其他人体液中，月经血及精液等均不影响其检出。
（1）阴道上皮细胞：大而扁平、形态不规则、胞浆红染，有的为己完全角化无核。（2）若同时查见精子，为阴道分泌液与精液的混合斑。
可根据嗜碘试验将富含糖原的阴道上皮细胞与口腔粘膜上皮细胞相鉴别。
嗜碘试验
斑痕沉淀物涂片干燥，加1~2滴Lugol’s碘液，或将玻片翻转盖在盛有Lugol’s碘液的小皿上，2~3min后镜检。阴道上皮细胞被碘染成红褐色或深黄褐色，口腔粘膜细胞不着色。注意：男性尿道口上皮细胞也呈碘染色法阳性，故在检查阴茎上有无阴道上皮细胞附着时需慎重。
笫一步消化的上清液提取阴道上皮细胞DNA
第二步消化的上清液提取精子的DNA
实际操作中并非每次都能保证理想地分离精

混合斑的DNA鉴定的几种方法研究

究，现总结如下。
关键词法医物证；混合斑；鉴定作者简介吴洪槟（９９１７ —— ）男，，四川攀枝花人，助教，士，学主要从事基础医学教学工作。
混合斑（指女性阴道分泌液与精斑的混合斑迹）是常见的生物检材之一，采用常规的Ｃｅｘ对于ｈｌ法，ｅ新鲜的或精子量较多的精斑可以得到满意的结果，但是，对于精子量较少或降解程度较严重的混合斑，则检验效果不佳，而且检验时间较长。作者结合多例检案报告，对现有混合斑ＤＡ鉴定的几种方法进行综Ｎ合比较研究，现总结如下。
优点是简单快速，对污染小的检材能迅速获得分型结果；缺点是污染大检材或精子数量少检材只能
获得少部分分型图谱。
・
８・５
维普资讯
第２４卷
攀枝花学院学报
第６期
２３商业化试剂盒（ＱＡｍ？ＤＡｍｎｋ或ＤｆｅＴ．如ＩａｐＮｉｉｉｔｉｒＭ系统）ｅｘ优点是能排除很多干扰因素如泥土、细菌等影响，对设备要求简单，易于在基层使用；缺点是时间较长，成本高。
１６ｗｚｒｌａｐ法．ｉｄｃｎｕａｅ
优点是灵敏度高，检验步骤少，操作简单快速，检案成功率高；缺点是易受干扰因素影响，抗干扰能力差。
３讨论
综合以上各种鉴定方法的使用条件、所需设备、检材的实际情况、实际使用中的检验效果以及检验时具体检验条件等各方面因素，针对各方法的优缺点，总结归纳出一套较实用有效的鉴定方法。情况如下：３１检材多且污染小案例．直接用酚一氯仿法或Ｃｅｘｈｌ法检验，ｅ因设备及试剂要求皆比较低，非常适合基层使用，如有个别检材无法显带，还可使用混合法，即先用酚一氯仿法提取ＤＡ后再用ＣｅｘＮｈｌ法检验，ｅ从实际使用结果看，９％以上检案都能显带。５３２检材多且污染大案例．先用酚一氯仿法或Ｃｅｘｈｌ法检验，ｅ如不行改用商业化试剂盒，在有条件情况下也可使用Ｙ— ＴＳＲ法或显微操作法，虽耗时长，但基本能完成鉴定要求。３３检材少且污染小案例．用ｗａｅｐ，ｉｒｃａｕ法也可用商业化试剂盒，ｚｄｌｎ在设备等情况满足时，也可使用Ｙ— ＴＳＲ法或显微操作法。３４检材少且污染大案例．大部分方法都不能有效显带，可使用Ｙ— ＴＳＲ法或显微操作法，尤其是后者，在此种检案中，虽鉴定成本高，但可有效排除干扰，得到分型结果。对于以上几种方法，需要根据实际条件和实际情况综合考虑后决定使用何种鉴定方法，以满足办案需要。

两例DNA检验失误引发的思考

罗守汉，熊义（湖北省武汉市公安局刑侦局，３０９４０１）
死者指甲内提取到，Ｄ的ＮＡ并不一致。这个事实证明，ＮＡ证据只是说明犯罪嫌疑人与犯罪现场存在Ｄ
某种程度的关联，非仅南Ｄ并ＮＡ证据就可以得出犯
案例２２０年７月，某（，５岁）一名在０３曹男２将酒店从事色情服务的女子魏某（，１）到位于７女２岁带
由于笔者习惯于在检材阳性部位取一较大面积进行ＤＮＡ检验，也可能是产生失误的原因之一。这经验告诉我们，面积多处分别提取检验是较好的解小决方法。笔者认为，响ＤＮＡ鉴定结论主要有４影
是否充分、完全、定。四是鉴定人员是否受到外界确
干扰。现在绝大多数实验室使用先进的ＤＮＡ自动
到老家，同其丈夫范某（１岁）６发生两次性关系，向后
其丈夫告知被强奸的事情，二人于７月１日到公安机关报案。高某对被指控强奸一事予以否定。后提取
斑，较陈旧的精斑却被漏掉，采样环节上出现失而在误。检验人员在提取混合斑时不仅要考虑该方法的核酸得率和纯度，也要考虑检材条件差异对一次提取核酸得率和纯度的影响。检验人员首先应吃透案情，然后根据检材的性质采用不同的方法，样才能更有这效地利用检材取得正确的结果。

应用EZ-tape胶带分离提取混合斑精细胞

退、ｌ２神经根轻度损害等，析认为，目前遗留骶～分其
的不良后果主要系其自身所患脊髓栓系综合征的临床表现，本次骶管灌注治疗在一定程度上使其症状显现或加重，为诱发因素，与度拟为１％。参５
（收稿日期：０２０ —１）２１ — ２３
［】匡金枝，同钢，巍，．ＤＡ自动化检案及其规范程２聂朱等Ｎ序的研究与应用【］公安部物证鉴定中心．法医遗传学Ｃ，／
但就现有材料分析，尚无证据证明某职工医院在
（上接第１３页）３
参考文献：
［］郑秀芬．法医ＤＡ分析［．京：１ＮＭ］北中国人民公安大学出
版社，０２：７．２０４
文选．北京：众出版社，０８２ — ２群２０：０２．
年龄增长，柱、脊脊髓发育及腰部前屈活动增多，神经
系统损害多进行性加重，相应症状亦呈进行性加其
重，一旦出现症状多不可逆转，以恢复正常，且难虽经
院对张某实施骶管灌注治疗与其自身原有疾病共同作用所致，二者的参与度各拟为５％。经多家医院治０疗后，张某仍遗留脐下８ｍ范围内皮肤刺痛觉减现ｃ
法医学杂志２１０２年
４月第２卷第２期８
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１３・３

计算混合样本似然率方法的分析与探讨

计算混合样本似然率方法的分析与探讨刘莹;任贺;高林林;石妍;陈冲;刘雅诚【摘要】目的：对混合样本似然率的四种计算方法进行分析和探讨。

方法以2013年CNAS-T0757能力验证的1例样本为例，使用四种常用方法（无限制性组合的似然率法、Clayton等的计算方法、p2定律的计算方法和ISFG推荐方法）分别计算似然率，并进行比较。

结果 Clayton等的计算方法、ISFG推荐方法得出的似然率最高，其次为无限制性组合的似然率法得出的结果，p2定律得出的似然率最低。

结论无限制性组合的似然率法最大程度兼顾了信息的保留及鉴定人的保护。

%Objective To analyze and discuss four methods of calculating likelihood ratio of DNA mixture. Methods In the case with CNAS-T0757 proficiency testing in 2013, the likelihood ratios were calculated and compared among four methods, including unrestricted combinatorial method, Clayton’s method, p2 principle method, and recommendations fromISFG . Results The likelihood ratios were maximumby Clayton’s method and recommendations fromISFG , followed by result of the unrestricted combinational method. The minimu mlikelihood ratio was obtained by p2 principle. Conclusion The unrestricted combi-national method could give furthest consideration to both information preservation and appraiser protection.【期刊名称】《法医学杂志》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】4页(P441-444)【关键词】法医遗传学;统计学;似然率;混合样本【作者】刘莹;任贺;高林林;石妍;陈冲;刘雅诚【作者单位】北京市公安局刑事侦查总队，北京 100192;北京警察学院，北京102202;杭州市公安局刑事科学技术研究所，浙江杭州 310004;北京通达首诚司法鉴定所，北京 100192;北京通达首诚司法鉴定所，北京 100192;北京市公安局刑事侦查总队，北京 100192; 北京通达首诚司法鉴定所，北京 100192【正文语种】中文【中图分类】DF795.2在法庭科学实践中，混合样本的结果解释相对比较复杂。

女性脸上斑点的成因解析内因外因及其相互作用

女性脸上斑点的成因解析内因外因及其相互作用女性脸上斑点的成因解析——内因、外因及其相互作用斑点是女性面部皮肤常见的问题之一，给人一种不健康、不美观的感觉。

然而，很多女性并不了解斑点的成因，随之也就无法采取正确的防护和治疗措施。

本文将从内因、外因以及它们之间的相互作用，对女性脸上斑点的成因进行解析，以期提供帮助和指导。

一、内因解析内因是指体内因素对斑点产生的影响。

下面将介绍一些常见的内因，以便我们更好地理解斑点的形成。

1.1 遗传因素了解斑点问题，我们必须先考虑遗传因素。

遗传因素可以使皮肤对阳光的敏感性增加，并使斑点易于出现。

这种敏感性往往是由于遗传基因中的一些缺陷或异常。

1.2 荷尔蒙变化女性的体内荷尔蒙水平经常发生变化，特别是在怀孕、绝经期等阶段。

荷尔蒙的波动可能导致色素沉着，从而形成斑点。

1.3 内分泌失调内分泌失调是指激素分泌异常或不平衡的状态。

它可能由内脏疾病、压力、生活习惯不良等原因引起。

内分泌失调会对肌肤产生不利影响，从而导致斑点问题。

二、外因解析外因是指环境和外部因素引起的斑点问题。

下面将介绍一些常见的外因，以便我们更好地了解它们对脸上斑点的影响。

2.1 阳光曝晒阳光中的紫外线是造成皮肤色素沉着的主要原因之一。

长时间的紫外线曝晒会导致斑点的形成，并使已有的斑点加深加重。

2.2 气候环境气候环境也与斑点的产生有着紧密的联系。

例如，干燥的气候条件可能导致皮肤水分流失，使斑点更加明显。

2.3 放化疗、激光等治疗方法一些放化疗、激光等治疗方法虽然可以达到一定的治疗效果，但它们对皮肤表层的刺激通常也会导致斑点的出现。

三、内因与外因的相互作用内因和外因在女性脸上斑点形成的过程中相互作用，进一步加剧了斑点问题的严重性。

下面将介绍内因和外因的相互作用以及对斑点产生的影响。

3.1 内因与外因的增效作用内因和外因之间存在着相互促进的关系。

例如，女性在体内激素水平波动的同时，若还暴露在紫外线较强的阳光下，斑点的形成会更为明显。

Y-STR

185BIOTECHWORLD 生物技术世界精斑是强奸、猥亵等案件中常见的生物检材,通过检出精斑DNA从而认定犯罪嫌疑人已经成为侦破该类案件的最直接、最高效的手段。

但是遇到没有射精、输精管结扎术后人员、精子缺乏症患者等无精子、少精子的情况时,采用差异裂解提取法就很难检出嫌疑人STR。

而采用Chelex法加入DTT和PK酶直接消化,消化液采用Identifiler Y-file试剂盒复核扩增分析可以获得嫌疑人Y-STR分型。

1 简要案情案例一:某年10月30日,嫌疑人翻墙进入某校女生宿舍,在一寝室内以持刀威胁并殴打的手段控制住3名女生,欲对她们轮流进行强奸。

在强奸了第一名女生后,强奸第二人时,由于受害人拼命反抗。

嫌疑人放弃强奸逃走。

侦查人员提取了第一名女生姚某的阴道擦拭物数枚、内裤送检。

案例二:某年2月4日,年仅4岁的幼女李某在菜市场走失,家人寻回时发现李某衬裤和袜子不见了,到医院检查后发现有被人强奸的迹象,遂报案,侦查人员提取了李某的阴道擦拭物数枚、内裤送检。

2 检验方法2.1 初次检验过程2.1.1 抗人前列腺特异抗原(PSA)金标试剂条检验分别剪取两起案件的阴道擦拭物一枚与内裤裆部约2CM 2剪片放入1.5ml离心管中加入450ul纯水,室温浸泡30分钟,期间反复搅动。

用抗人前列腺特异抗原(PSA)金标试剂条检验均呈阳性。

2.1.2 两步法提取精子DNA其原理是利用女性上皮细胞和精子结构上的差异,在PK和SDS的作用下裂解上皮细胞,通过离心、漂洗弃上清液除去大部分女性DNA,再在PK、DTT和Chelex的作用下进行二次消化,释放出精子DNA。

具体操作步骤:将检材离心弃上清后加400ulTNE溶液37℃浸泡30分钟。

然后加入10% SDS至终浓度1%,加蛋白酶K至终浓度100μg/ml,37℃保温2小时以上。

震荡消化液,吸取全部消化液转移至新1.5ml离心管中,12,000rpm离心3分钟。

美容师中级模拟练习题与答案

美容师中级模拟练习题与答案一、单选题（共70题，每题1分，共70分）1.皮肤外来色素的主要来源包括( )。

A、药物B、脂色素C、黑素D、胆色素正确答案：A2.磨砂膏利用( )作用促进皮肤新陈代谢,呈现良好的透明感。

A、化学刺激B、机械刺激C、推去搓按D、化学剥脱正确答案：B3.经脉是由( )和奇经八脉组成的。

A、十二经筋B、十二正经C、十四经脉D、任、督二脉正确答案：B4.中华人民共和国第一部《美容师职业技能( )》,由当时的国家劳动部颁发于1995年9月。

A、标准B、鉴定教材C、考核指南D、鉴定规范正确答案：B5.瑞尔黑变病与长期使用含有( )物质的化妆品有关。

A、光敏B、过敏C、芳香D、活性正确答案：A6.一般肤色的人适合选用浅红、粉红、( )红色的腮红修饰。

A、暗棕B、淡紫C、浅橘D、玫瑰正确答案：D7.( )如不及时治疗,日积月累会形成永久性眼袋。

A、肌性眼袋型B、暂时性眼袋C、黑眼圈D、睑袋型眼袋正确答案：B8.色斑皮肤护理可使用美白祛斑精华素做超声波美容仪导入,时间不超过( )分钟。

A、5B、3C、20D、10正确答案：D9.光子嫩肤仪治疗期间,顾客如果需要化妆,尽量不要使用( )。

A、粉底B、睫毛膏C、口红D、眼线液正确答案：A10.现代色彩理论认为,色彩混合主要分为( )种。

A、四B、三C、一D、二正确答案：B11.( )与皮脂混合形成皮脂膜对皮肤具有保护作用。

A、角质蛋白B、水C、汗液D、角质颗粒正确答案：C12.微晶磨削仪在使用时,应根据面部( )轻轻滑动。

A、肌肉纹理走向B、由上至下的原则C、毛发生长方向D、由下至上的原则正确答案：A13.使用美容透视灯操作前应为顾客做皮肤( )工作。

A、按摩B、清洁C、脱屑D、热敷正确答案：B14.皮肤分析时,( )不会对皮肤分析结果产生影响。

A、空气污染B、健康状况C、气候因素D、季节因素正确答案：A15.高频电疗仪配有可插入电极的绝缘把手和( )电极。

改良差异裂解法结合硅珠法提取混合斑精子DNA

５２例经常规差异裂解法检验含有女性分型的混合斑检材，采用改良差异裂解法结合硅珠法提取精子细胞
ＤＮＡ，ＩｄｅｎｔｉｉｆｌｅｒＭ试剂盒进行ＰＴＣＲ扩增检验。并将常规差异裂解法结果作为对照。结果５２例混合斑检材中，采用改良差异裂解法结合硅珠法检出单一男性精子成分有３８例，男性分型检出率达到９８．０８％。结论
ＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＳｐｅｒｍＤＮＡｆｒｏｍＭｉｘｅｄＳｔａｉｎｂｙｔｈｅＭｏｄｉｉｅｆｄＤｉｉｅｆｒｅｎｔｉａｌＬｙｓｉｓ
ＭｅｔｈｏｄＣｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＳｉｌｉｃｏｎＢｃａｄＭｅｔｈｏｄ
ＮａｎｔｏｎｇＰｕｂｌｉｃＳｅｃｕｒｉｔｙＢｕｒｅａｕ，Ｎａｎｔｏｎｇ２２６００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂ仃ＤＮＡｆｘｅｄｓｔａｉｎｂｙｔｈｅｍｏｄｉｉｅｆｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ１ｙｓｉｓｍｅｔｈｏｄｉｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘａｃｔｓｐｅｒｍｒｏｍｍｉ
．
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ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｆｅｍａｌｅＳＴＲｇｅｎｏｔｙｐｅｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｓｉｓｍｅｔｈｏｄｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．ＴｈｅｓｐｅｍＤＮＡｒｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｔｈｅｍｏｄｉｉｅｆｄｍｅｔｈｏｄｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｓｉｌｉｃｏｎｂｅａｄｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅｎｇｅｎｏｔｙｐｅｄｗｉｔｈｔｈｅＩｄｅｎｔｉｉｌｆｅｒＭＴＫｉｔ．ａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇｂｙｈｅｔｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ１ｙｓｉｓｍｅｔｈｏｄａｓｃｏｎｔｒｏ１．ＲｅｓｕｌｔｓＯｆｔｈｅ５２ｓａｍｐｌｅｓ．３８ｓａｍｐｌｅｓｗｉｔｈｓｏｌｅｍａｌｅＳＴＲｇｅｎｏｔｙｐｅｓｉｎａｌｌｌＯＣｉｗｅｒｅｄｅ — ｔｅｃｔｅｄ．ＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｍａｌｅＳＴＲｇｅｎｏｔｙｐｅｓｗａｓ９８．０８％ｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｍｏｄｉｉｅｆｄｍｅｔｈｏｄｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｓｉｌｉｃｏｎｂｅａｄｍｅｔｈｏｄ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｍｏｄｉｉｅｆｄｄｉｉｅｆｒｅｎｔｉａｌ１ｙｓｉｓｍｅｔｈｏｄｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｓｉｌｉｃｏｎｂｅａｄ

法医DNA鉴定中的染色体异常现象1.王欢1.张婷婷（通讯作者）1.吴琳1.刘童心2.王丽

法医DNA鉴定中的染色体异常现象 1.王欢 1. 张婷婷（通讯作者） 1. 吴琳 1.刘童心 2. 王丽发布时间：2023-05-17T00:32:26.125Z 来源：《健康世界》2023年8期作者： 1.王欢 1. 张婷婷（通讯作者） 1. 吴琳 1.刘童心 2. 王丽[导读] 染色体异常是一种严重的遗传类疾病，常会导致智力低下、1.山东阅微司法鉴定中心山东泰安 271000；2. 山东浩正司法鉴定中心山东枣庄 277100摘要：染色体异常是一种严重的遗传类疾病，常会导致智力低下、畸形、生长发育迟缓和多系统功能障碍等。

主要在遗传病、产前诊断以及DNA鉴定中进行研究。

本文主要对法医DNA鉴定中的染色体异常现象进行综述，包括单亲二倍体、三体综合征、嵌合体等，为法医DNA工作提供参考。

关键词：染色体异常；DNA鉴定；三体综合征；单亲二倍体；嵌合体染色体异常是染色体结构畸变、数目异常的严重遗传病之一，染色体异常依据累及染色体不同，可分为常染色体疾病和性染色体疾病，依据性质不同，可分为染色体数目异常和染色体结构异常[1]。

由于现代DNA鉴定技术不断发展和检测范围不断增大，在DMA亲子鉴定中也发现了比较多的染色体异常现象，导致短串联重复序列（STR）特殊图谱和假性排除等案例[2]。

本文主要综述法医DNA鉴定中染色体异常现象，为法医DNA鉴定提供参考。

1三体综合征三体综合征是染色体数目异常导致的疾病，主要有21三体综合征、18三体综合征和13三体综合征，其中13和18三体综合征常出现严重致死性畸形，大多出生不久后便死亡，而21三体综合征又叫唐氏综合征，在法医DNA分析中比较少见，存活下来的孩子往往智力低下、特殊面容、生长发育障碍等。

21三体综合征主要是在胚胎细胞内多一条21号染色体，90%以上来源于母亲，主要是因为卵母细胞发生过程漫长且2次减数分裂之间停止期比较长(约12～40年)，导致卵母细胞比精母细胞更容易产生减数分裂不分离而出现染色体数目异常[3]。

大规模平行测序在混合斑检测分析中的应用前景

大规模平行测序在混合斑检测分析中的应用前景刘京;何光林;侯一平;王正【摘要】混合斑是性犯罪案件中常见的生物检材,对其分析及结果解释是法医学检验中的难点之一.目前用于混合斑检测的遗传标记主要依赖于毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)分离技术,而检测结果分析方法主要为包含率法及似然率法.由于CE技术分辨率有限,并不能充分发挥各遗传标记的效能,因此拆分混合斑的能力有限.近年来,兴起的大规模平行测序(massively parallel sequencing,MPS)技术不仅能获得遗传标记的碱基序列信息,而且具有并行检测多种遗传标记的能力,衍生出新的分析方法,为法医混合斑检测分析带来了新的契机.本文拟对混合斑分析常规技术及大规模平行测序技术在混合斑中的应用前景进行综述,旨在为后期研究及实践提供参考和借鉴.【期刊名称】《法医学杂志》【年(卷),期】2019(035)001【总页数】6页(P84-88,94)【关键词】法医遗传学;混合斑;大规模平行测序;二代测序;综述【作者】刘京;何光林;侯一平;王正【作者单位】四川大学华西基础医学与法医学院法医研究所,四川成都 610041;四川大学华西基础医学与法医学院法医研究所,四川成都 610041;四川大学华西基础医学与法医学院法医研究所,四川成都 610041;四川大学华西基础医学与法医学院法医研究所,四川成都 610041【正文语种】中文【中图分类】DF795.2法庭科学中，混合斑是指两名或两名以上个体的体液、分泌液混合形成的生物斑痕，常出现于性犯罪案件、多人受伤的现场血迹、咬痕拭子及指甲垢等。

由于受到混合成分的种类、个体数量以及各组分在混合斑中所占比例等因素的影响，混合斑的鉴定比单一个体来源斑痕的鉴定复杂得多[1]。

目前，混合斑检测分析主要依赖于毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）分离技术，但此技术分辨率有限，并不能完全发挥各遗传标记的效能，拆分能力受限。

涉外司法精神病学重复鉴定1例

勘查现场时认真仔细，发现了浸泡在水中的内裤．并采用了正确的提取方法，即马上原物提取、自然通风环境
下晾Байду номын сангаас而不采用拧干的方法，这为后面的ＤＡ检验创Ｎ
造了条件，为案件的侦破提供了强有力的证据。精子细胞核是富含二硫基的交联蛋白组成的网状结构，不容易被裂解，因此浸泡在水中１２小时以上的混合斑是可以进行ＤＡ检验的。但是经水浸泡后Ｎ
验为强阳性的地方剪取一定量检材进行ＤＡ检验．Ｎ
被人下毒的问题，他说：１９年我在加州读研究生 “９１
的时候就有人给我下毒，到中国后也有这样的事，我不知道李某给我下毒没有，但我常拉稀．手起疱．发抖，子疼。某还告诉我，肚李再过６个月这个问题会好
被鉴定人史密斯ｆ名，，１岁，国国籍）化男４美，于２００３年４月６日２０时许在暂住地与其妻子李某（，５岁，国国籍）女２中发生争执，后持刀杀死李某。案
发后史密斯洗澡更衣．出租车到美国大使馆。被乘后公安人员抓获。此案在审理过程中，曾对史密斯先后
组织全国专家对被鉴定人进行重新鉴定。
调查资料：据病历记载，密斯曾于１９史９３年１２
月人当地精神病院观察，断为重度抑郁发作、缘诊边

混合斑

1、3种DNA提取法在污染严重混合斑分型中的应用比较。

2007-08-09摘要：目的比较Chelex-100法、酚/氯仿法和二氧化硅膜法3种DNA提取法在污染严重混合斑分型中的应用效果。

方法从日常案例中收集污染严重的混合斑25份,差异消化法分离精子后同时用Chelex-100法、酚/氯仿法和二氧化硅膜技术3种方法提取DNA,采用PCR-STR技术对D19S253、FGA和CSF1PO 3个基因座进行分型,Ge-lPro软件处理电泳图谱, SPSS软件分析比较不同方法之间的差异。

结果采用Chelex-100法提取DNA, 25份检材分型结果均未成功;采用酚/氯仿法, 25份检材中10份分型成功, 3份检材FGA和CSF1PO基因座可分型, 4份检材CSF1PO基因座可分型;采二氧化硅膜纯化法, 25份检材均成功分型;酚/氯仿法和二氧化硅膜法两种方法比较,结果存在显著性差异(P<0. 05)。

结论：二氧化硅膜纯化技术可以有效去除PCR抑制物,提取的DNA扩增效果明显优于Chelex-100法和酚/氯仿法,具有较高的应用价值。

2006-09-20 讨论：目前国内实验室在进行精斑、混合斑STR分型时,多采用差异消化Chelex-100法或差异消化酚/氯仿法提取混合斑模板DNA。

这两种方法对于无污染且含有较多精子的混合斑效果较好,但对于现场污染严重的疑难混合斑的提取效果不理想。

由于这些混合斑中往往存在不明成分的污染,如污垢、灰尘、泥土、载体基质中的色素、漂白剂以及细菌繁殖产生的抑制物等,均可影响实验的成功率。

Chelex-100能螯合多价金属离子,抑制DNA酶活性,防止DNA降解,对微量但污染不严重的检材分型效果较好。

该方法虽然提取DNA的量较多,但由于不能充分的去除各种PCR抑制物,对于污染严重的检材效果并不理想,本文结果业已提供了进一步证实。

酚/氯仿法利用萃取作用去除有机类杂质,乙醇沉淀除去金属离子,对DNA有较好的纯化作用,但是有些色素和泥土中能被醇沉的杂质不易被去除,且操作中需多次转移液体,易造成DNA丢失,DNA提取率较低,因此要求检材量大、精子含量多。

混合斑检材中极微量精子DNA检验初探

２０年１月１日，在某市公园海ｌ现１０９１１边发个漂浮的编织袋，内装一具无名女尸。被害人阴道分泌物经金标抗人精试纸条检验为弱阳性，显微镜镜检未检见精细胞。通过常规两步消化法检验，未检出精子ＤＡ。后采用细胞Ｎ富集柱￣Ｅ１ＩＺ工作站提取精子ＤＮ］Ａ，采用２Ｉ准体系５ｕ标扩增取得了满意效果。侦查发现犯罪嫌疑人系用人力车运尸、抛尸，经对人力车出发地周围相关人员共８人进行９排查，嫌疑人李某某ＤＡ型与该杀人抛尸案阴道分泌Ｎ分
中ＤＡ液为１ｌ引物５ｕｌｕｅ１，ＴｐＮ溶０ｕ，，Ｂｆｒ０Ｉ１ａ酶Ｊ
两步消化法检验，未检出精子ＤＡＮ。另一份采用细胞富集
柱和Ｅ１Ｚ工作站提取精子ＣＡ，采用２ｌＮ５ｕ标准体系扩增，阴道擦拭物未检出精子ＤＡ，子宫擦拭物取得了满意效Ｎ果，经检验比对，与犯罪嫌疑人穆某某ＤＡＮ分型—致。
２０年２日，在某村一桥西．００９月１１１ｍ路旁沟内发现０
一
具无名女尸，经检验系他杀。经查被害人系一周前失踪
的某镇沈某。被害人阴道分泌物经金标抗人精试纸条检验
为弱阳性，显微镜镜检未检见精细胞。通过常规两步消化法检验，未检出精子ＤＡ。后采用细咆富集柱（宁省Ｎ辽公安斤）Ｅ１作站提取精子ＤＮ和Ｚ工Ａ，采用２ｌ５ｕ标准体
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刘某某被害。受害＾腹部被剖开，子宫、阴道均被切开，并
被放火焚尸。由于消防部门在救火时对现场浇人了大量的水，尸体被冲洗严重。尸检中对被害＾残存阴道、子宫进行擦拭提取，提取产物经金标抗＾精试纸条检验为弱阳性，显