椪柑胚乳三倍体植株诱导研究
柑橘多倍体研究进展
１ 柑 橘 多倍 体 产 生 的基 本 方 法
１ １ 芽变 选 种 和 实 生 选种 ．
或少核的三倍体类 型的柑橘是一 个优 良性状 ， 这无 论对 于鲜 食还是加工都具 有重要意义和价值 。培育柑橘三倍体无 核品 种是 目前柑橘育种的主要 目标之一 。柑橘在世界果品产业中 占有重 要 的经 济地 位 ； 世界 上柑橘产 业还存 在不 少问题 ， 但 如腐毒病危 害、 品种退化 、 抗逆性差 、 产品和质量不高 、 鲜食 的
２ ０．
［］ ７ 张春英 ．杜 鹃花 的育 种发 展及 现 代育 种 ［ ］ Ｊ ．山东林 业 科 技 ，
２０ （ ） ７ ０ ５ ３ ： ７—７ ． ９
高的知名度 。由于各种 因素的制约 ， 使这 特殊的资源 优势在 社会发展过程 中没有发挥应有的作 用。杜鹃花要发展离不开
科技 的支撑 ， 抗逆（ 耐寒 、 耐碱 ） 品种的培育 、 综合技术 的提高 与储备 ， 需要 发扬 优势 ， 弥补不足 。随着 中 国经 济的腾 飞， 我 国的杜 鹃花产业终会走在世界的前列。
［］ ５ 李章汀 ， 林方喜 ， 魏云华 ， 等．杜鹃育种进展及 品种 开发建议 ［ ］ Ｊ． 台湾农业探索 ， ０ （ ）９ ９ ． ２ ７４ ： ０ ７— ９
［ Ｐ ｈ Ｅ．Ｗｅｗ ｉ ｒ ｕｃ ｅ ｏａｉ ｈｒ ａｄｎｕ ｄＲ ｏｏｅ ｄｏ ６］ ｕｌ ｇ ｅｓ ｒｈｄｎＢ ｔ ｓ ｅ ｒｅ ｎ ｈｄｄ ｎｒｎ ｅｄ ｎｅ Ｇ
多倍 体是指植物体 细胞 中含有 ３套或 ３套 以上基 因组 ，
是高等植物 染色体进化 的一个显著特征。植 物的多倍性在 自 然界中普遍存在 。人工创造植物的多倍 体和培育 多倍体新 品 种是加速 自然界植物 的进化 ， 实现农业高产优质 的重要途径 。
浅论果树三倍体育种的研究进展
浅论果树三倍体育种的研究进展论文关键词：果树三倍体育种论文摘要：本文综述了果树三倍体的研究进展：果树三倍体育种的途径主要包括利用对自然变异的选择获得三倍体、利用有性杂交来培育三倍体、利用胚乳培养获得三倍体和利用原生质融合培育三倍体；对三倍体的鉴定主要从形态特征、解剖结构、生理生化特性和染色体数目等方面来考虑，同时对今后果树三倍体育种的研究方向进行了展望。
多培体现象是高等生物最普遍的特点之一。
据统计，在果树中，多培体类型分属于20 科、35属，400 余种。
果树多倍体一般具有生长旺盛、果实大且少籽或无籽、产量高、适应性和抗逆性强等特点，且能够利用无性繁殖的方式固定其优良性状，使之保持稳定而不分离，在生产上长期利用。
三倍体生物与其他多倍体相比，其营养生长通常是最好的。
一般说来，三倍体具有两大基本特征：由体细胞增大所引起的巨大性和由减数分裂过程紊乱造成的不育性，再加上多种不同生物类型和品种的三倍体所具有的特殊可贵性状，常引起育种工作者的关注，已经成为果树育种工作的重要组成部分，形成了对三倍体选育多样化的特色。
鉴于此，对果树三倍体的特性、目前果树三倍体育种的主要途径、鉴定方法以及三倍体育种中应注意的问题进行分析和总结，以期为三倍体育种的进一步研究提供基础资料。
1 果树三倍体的特性1.1 生物学性状三倍体果树由于染色体组成多于二倍体，在形态上一般表现为巨大性，细胞体积增大，枝条变粗，叶片变宽变厚、叶色浓绿，叶绿体数目增加，气孔变大但密度下降，花粉粒增大，果大、少籽或无籽，可食率高,如三倍体无籽香蕉，三倍体葡萄红标无核、夏黑,三倍体黄盖梨、大叶雪梨等。
但是部分器官的巨型并不导致整个植株的巨型化，有的三倍体果树表现为生长缓慢，树体较小，节间变短,如柑桔三倍体前期生长弱，叶片厚而圆。
另外,大多数的三倍体对外界环境条件具有较强的适应性，有抗旱、抗病、抗寒等特性。
多倍体植株的能育性一般较原植物降低,一方面是由于染色体在减数分裂中的配对容易发生紊乱，另一方面是由于花粉粒巨型化导致受孕率低、结实率低。
无融合生殖与柑橘多胚现象的研究进展
植物科学学报2014，32（1）：88 96Plant Science JournalDOI ：10.3724/SP.J.1142.2014.10088无融合生殖与柑橘多胚现象的研究进展张斯淇，徐强，邓秀新*（华中农业大学园艺林学学院，园艺植物生物学教育部重点实验室，武汉430070）摘要：植物无融合生殖是指植物的胚珠组织不经历正常的减数分裂和受精作用，而直接进行胚发育形成种子的无性生殖方式。
无融合生殖植物完全继承了母体的全部基因型，因而具有独特研究与育种意义。
芸香科柑橘属植物具有独特的多胚现象，其珠心组织能够发育成不定胚（称为珠心胚）进行无融合生殖。
文中介绍了柑橘类植物的珠心胚生殖现象、细胞学和遗传学研究进展。
珠心胚现象虽然对柑橘杂交后代获得有较大影响，但在生产上可产生性状整齐一致的后代，可以培育无病毒苗木。
关键词：不定胚生殖；珠心胚；孢子体无融合生殖；柑橘中图分类号：S666文献标识码：A文章编号：2095-0837（2014）01-0088-09收稿日期：2013-04-26，修回日期：2013-08-05。
基金项目：国家自然科学基金资助项目（30921002）。
作者简介：张斯淇（1988－），女，博士研究生，主要从事柑橘无融合生殖研究（E-mail ：zhangsiqi@ ）。
*通讯作者（Author for correspondence.E-mail ：xxdeng@ ）。
A dvances in A pomixis and Polyembryony Ｒesearch in C itrus PlantsZHANG Si-Qi ，XU Qiang ，DENG Xiu-Xin *（College of Horticulture and Forestry ，Huazhong Agricultural University ，Key Laboratory ofHorticultural Plant Biology ，Ministry of Education ，Wuhan 430070，China ）A bs tract ：In apomixis asexual reproduction ，the ovule generates embryogenesis without meiosis or fertilization ，leading to embryo development and seed formation．Apomicts inherit the mother's genotype entirely ，and therefore have unique significance in research and breeding．Polyembryony ，in which nucellar embryos develop from nucellar tissue to undergo apomixis ，is a unique phenomenon of Citrus and other genera of Ｒutaceae．This review focused on the phenomenon of adventitious embryony in Citrus and recent progress in histocytology and genetics．Nucellar embryony hinders the formation of hybrid offspring in Citrus ，but it can produce offspring with good unity and can also be used for generating virus-free seedlings．Key words ：Adventitious embryony ；Nucellar embryo ；Sporophytic apomixis ；Citrus 早在1719年，Leeuwenhoek 就发现甜橙［Citrus sinensis （L.）Osbeck ］中一颗种子可以萌发出两个幼苗，这是柑橘多胚现象第一次被报道，而这种现象是由于植物界中独特的无融合生殖方式（apomixis ）导致的。
离体培养柑桔小胚获得三倍体植株1)
衰 １ 小粒种 子和正常种子 的出现 率及大 小比较
结
果
小拉种子 正常种子 比率
（ 一）小粒种子的大小和出现率 从表 １ 可以看出，小粒种子和正常种子的 单粒重、 粒长和粒宽等均存在着较大的差异。 小 粒种子的平均单粒重仅为 ０ ４克， ． ０ 为正常种子
粒数 出 现 率 单粒重 拉长（ 毫米 ） 粒宽（ 笼 》 毫米） ． ， （ ％） （ 克）
津 传 ＨＲＤ Ａ （ｅｎ） （ ： １ ８ ＥＥＩ Ｓ ｉｇ １ ６ ９ １ 二 Ｔ Ｂｊ ０ －１ ９ ｉ ） ８
离 养柑桔 胚获 倍 株‘ 体培 小 得三 体植 ’
高 峰 张仁 吴 仁 陈 春 进 安 善
（ 中国农业 科学院柑 桔研 究所 ， 重庆）
兰倍休植株因不能进行正常的减 数分 裂， 将小粒种子洗净胶质， 。 ％升汞溶液消 用 ． １ 常产生败育的胚囊和花粉；又因柑桔属植物具 毒 １ 分钟并在无菌水中浸洗 ３ ０ 次。 在无菌操 有单性结实的能力，因而人工培育三倍体植株 作条件下剥去内外种皮，分别接种到各种培养
１ 平均 数 土标 准误 〔 ． ） ） ＳＥ ．
２。 以Ｉ ） 其中 号和１ １ 号培养 基的效果 最好， 萌
发率均达 ９．多，而在 Ｉ 号培养基上的最低 ２ ３ Ｉ Ｉ
（６ 务） ７． 。由于 １号培养基中小植株的茎生长 ９ １
迅速， 非常纤细 （ １ ２ ，一部分后期转枯死 图 ， ） 亡， 所以其成苗率（９ 茄） ６． 反低于 Ｉ ２ 号和 Ｉ Ｖ号 培养基 （４ 务 和 ７．界） ８． ６ ６ ９ 。在 １ 号和 Ｉ Ｖ号培 养基中的小植株，根和茎均较粗壮，生长旺盛 （ １ ３。 切取根尖后的 ２ 株扦插苗继续培 图 ， ） ０ 养， 天后， 其中有一部分转枯死亡，另有 １ 株 ２
“丽桠2号”无籽椪柑保果试验技术总结
４２ 重视 三倍 体 新种 质其 他 特 性 的发掘 ．
目前 三倍体育种 的 目标 主要选育 是大果 、 无 以个别特征为依据妄言断之。目前最常见 的鉴定 方法有 ： 形态鉴定法 ， 细胞学鉴定法 ， 染色体计数 籽 、 风味好的品种 ， 而忽略 了对其他特性 的挖掘 。 同 法； 此外还有利用原位杂交技术 如 ＦＳ Ｇ Ｓ 我们可以在对其进行 目标性 状鉴定的过程中， ＩＨ、 ＩＨ以
“ 丽槿 ２号 ’ ’ 无籽檄柑保果试验技术总结
叶伟其 钟汉春
（ 浙江省丽水市农业科学研究所 ３ ３０ ２ ００）
丽水市农业科学研究所科技人员从 ２ 世纪 ０ ９ 年代中期起 ， 了以无籽为 目标的槛柑优系 ０ 开展
｛ 《 ．
选育研究 ， 经过多年努力 ， 已成功选育 出 “ 丽槛 ２ 号”（ 暂定名 ） 无籽桠柑新 品优系。 品种 自然结 该 果率比有籽碰柑低 ， 为提 高无籽槛柑 的座果率确 保丰产稳产，０ ３ ２０ 年 ， ２０ ～ ０ ５ 采用几种不同药剂在 生态农业科技园无籽槛柑 高接 园 （ ２年生 ， 中间
⑧
维普资讯
２０ ０６年第 ４期
株． ３次重复。
１ 试验操 作 ． ３
现代园艺
５ ％ ，有籽 槛柑 ２０ ． ３ ０ ４年 为 ８ ％，０ ５年度 为 ． ２０ ４
１． 极显著差异 ， ０ ％， ６ 由此证 明无籽桠柑 的 自然座
２０ ０３年度保果试 验 出现 ３ 个处 理的座果率
参试药剂共 ４ ， 种 分别为 ： 中国农业科学院 ① 柑桔研究所 生产的增效液化 Ｇ ＋ Ａ， Ａ Ｂ ②上海市沪 江生化厂生产的赤霉素 ，③珠海真绿色技术有限 公司生产的植物龙 ，④义乌市皇嘉生化有限公司 生产的芸苔素 。
柑桔胚乳培养体系的建立与优化
基金项目：浙江省教育厅2017年度高校访问工程师“校企合作项目”柑桔果实无核育种研究（课题编号：FG2017203）研究成果。
作者简介：李海林（1979-），男，甘肃陇南人，硕士，工程师，讲师，主要从事与园艺植物相关的教学与科研工作。
柑桔胚乳培养体系的建立与优化李海林1，聂振朋2，柯甫志2（1台州科技职业学院农业与生物工程学院，浙江台州318020；2浙江省柑桔研究所）利用Minitab 软件正交试验设计L9(33)，以MS 培养基，分别加入不同质量浓度的6-BA 、2,4-D 、对柑桔胚乳愈伤组织诱导；以MS 培养基，分别加入不同质量浓度TDZ 和NAA 对愈伤组织诱导不定芽。
结果表明：柑桔愈伤组织诱导最佳组合为6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.2mg/L+sucrose 40g/L ，愈伤组织诱导率可达30%；柑桔不定芽诱导最佳组合为TDZ 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+sucrose40g/L ，不定芽诱导率可达35%。
柑桔；胚乳；正交试验择半透明状固体、富有弹性的胚乳，单独接种。
1.2.3愈伤组织诱导。
所用培养基以MS 为基本培养基，对6-BA 、2,4-D 、sucrose 浓度利用Minitab 软件正交设计优化。
正交设计的因素及水平分别为6-BA 浓度（0.5、1.0、1.5mg/L ），2,4-D 浓度（0.2、0.4、0.6mg/L ），sucrose （20、40、60g/L ）（见表1）。
每个处理接种l0瓶。
及时对其进行形态观察，50~60d 后统计愈伤组织诱导率。
愈伤组织诱导率=愈伤组织块数／接种个数。
1.2.4不定芽诱导。
获得胚乳愈伤组织增殖培养后，接种于不定芽诱导培养基。
以MS 培养基为基本培养基，对TDZ 、NAA 、sucrose 浓度利用Minitab 软件正交设计优化。
正交设计的因素及水平分别为TDZ 浓度（0.5、1.0、1.5mg/L ），NAA 浓度（0.1、0.2、0.3mg/L ），sucrose （20、40、60g/L ）（见表2）。
一种诱导椪柑成熟果实胚乳产生愈伤组织的方法[发明专利]
![一种诱导椪柑成熟果实胚乳产生愈伤组织的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/7a615904102de2bd97058839.png)
专利名称：一种诱导椪柑成熟果实胚乳产生愈伤组织的方法专利类型：发明专利
发明人：彭磊,安万祥,周玲,于趆,王文涛,黄震
申请号：CN202010859884.1
申请日：20200824
公开号：CN111972289A
公开日：
20201124
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明是一种能够有效诱导椪柑成熟果实中的胚乳产生愈伤组织的方法。
按以下步骤进行：1）选用达到成熟的椪柑果实；2）从果肉中取出种子；3）用清水浸泡种子12小时，使种子充分吸收水分；4）剥去种皮，洗涤干净；5）在超净工作台上用0.1%升汞消毒2分钟；6）升汞溶液中取出种子后，用灭菌蒸溜水清洗干净；7）切除胚；8）接种于MS+6‑BA2mg/L+NAA0.1 mg/L培养基中，培养到第四周，有大量愈伤组织产生（共产生愈伤组织25~32块），愈伤组织诱导率为
83.3~100%，得到较好效果。
申请人：云南农业大学
地址：650000 云南省昆明市黑龙潭
国籍：CN
代理机构：昆明正原专利商标代理有限公司
代理人：金耀生
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一种诱导三倍体不育花生恢复育性的方法[发明专利]
![一种诱导三倍体不育花生恢复育性的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/8b54244a0029bd64793e2c6b.png)
专利名称：一种诱导三倍体不育花生恢复育性的方法
专利类型：发明专利
发明人：贺梁琼,唐荣华,韩柱强,钟瑞春,蒋菁,唐秀梅,高忠奎,熊发前,李忠,黄志鹏
申请号：CN201410677087.6
申请日：20141121
公开号：CN104351045A
公开日：
20150218
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种诱导三倍体不育花生恢复育性的方法，包括以下步骤：(1)开花期间用棉球包裹三倍体花生植株侧枝的顶端分生组织；(2)配置0.2％的秋水仙碱溶液，用吸管吸取秋水仙碱溶液滴至棉球上至棉球湿透；(3)白天每隔1～2小时浸润一次棉球，一直使棉球保持湿润状态；(4)发现有果针时，及时将果针埋入土中。
本发明解决了三倍体花生高度不育的技术问题。
申请人：广西壮族自治区农业科学院经济作物研究所
地址：530105 广西壮族自治区南宁市南宁东盟经济技术开发区广西农科院里建基地
国籍：CN
代理机构：广西南宁公平专利事务所有限责任公司
代理人：黄永校
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一种柑橘多倍体高效诱导与快速应用技术[发明专利]
![一种柑橘多倍体高效诱导与快速应用技术[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/597f398c783e0912a3162a3b.png)
专利名称：一种柑橘多倍体高效诱导与快速应用技术专利类型：发明专利
发明人：万水林,胡钟东,刘召亮,闫承璞,段宪明
申请号：CN201610899382.5
申请日：20161017
公开号：CN106613929A
公开日：
20170510
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于生物育种技术领域，其主要内容为在春季柑橘芽刚萌动时，选择柑橘树冠外围或上部旺盛枝梢，并选中下部腋芽，抹除，之后在该部位用浸有0.06‑0.08%秋水仙素+1%二甲基亚砜的棉球处理，封口膜绑缚、密封，再用黑色胶布包裹遮光，同时剪去处理部位上部枝梢，抹除下部萌芽。
5‑7天后解绑，剪除周围的竞争性枝梢。
10‑15天后，复芽萌发。
1.5‑2月后，取叶样用流式细胞仪检测，多倍体诱导率达50%以上，其中95%以上为纯四倍体，嵌合体在4%以下。
复芽萌发后生长势强，第2年即可开花投入应用。
该方法简单，药剂可渗入芽体组织内部，诱导率高，嵌合率低，且可快速获得应用，适用于所有具复芽且易萌发的作物。
申请人：江西省农业科学院园艺研究所
地址：330200 江西省南昌市青云谱区南莲路602号
国籍：CN
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成熟果实未发育胚珠培养获得三倍体柑橘
成熟果实未发育胚珠培养获得三倍体柑橘
王子成;李忠爱
【期刊名称】《河南大学学报：自然科学版》
【年(卷),期】2007(37)2
【摘要】本研究中,对华农本地早柑橘成熟果实中未发育胚珠进行离体培养,通过胚状体发生途径,获得了32株再生植株.用流式细胞仪对这些再生植株进行倍性分析,发现有1株三倍体植株,并得到染色体计数确认,其三倍体发生频率为3.12%.这是柑橘成熟果实未发育胚珠离体培养获得三倍体植株的首例报道.
【总页数】3页(P174-176)
【关键词】柑橘;未发育胚珠;离体培养;三倍体
【作者】王子成;李忠爱
【作者单位】河南大学农业生物技术研究所
【正文语种】中文
【中图分类】Q343.244
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应用胚挽救技术获得三倍体柑橘植株
应用胚挽救技术获得三倍体柑橘植株刘可慧;于方明;张秋明;易干军【期刊名称】《广西植物》【年(卷),期】2010(030)002【摘要】以3个柑橘异源四倍体体细胞杂种(即四倍体粗柠檬与哈姆林甜橙体细胞杂种,简称"HR";酸柚与粗柠檬体细胞杂种,简称"SR";墨西哥来檬与伏令夏甜橙体细胞杂种,简称"KV")为父本,分别与二倍体单胚性沙田柚进行有性杂交,在有性胚还没有完全败育以前,通过胚抢救技术进行三倍体植株培养(以四季柚花粉亲本为对照).结果表明,处理的杂交组合直接成苗率极显著低于对照(P＜0.01),其中又以沙田柚×HR组合成苗率相对较高,达10.1%;较适合瘪籽沙田柚幼胚离体培养的培养基是MT+GA31.0 mg/L+蜂皇浆200 mg/L+水解乳蛋白250 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂0.7%;流式细胞分析仪检测结果显示,本试验成功获得了柑橘三倍体植株.【总页数】4页(P246-249)【作者】刘可慧;于方明;张秋明;易干军【作者单位】广东省农业科学院,果树研究所,广州,510640;桂林电子科技大学,应用科技学院,广西,桂林,541004;广西师范大学,环境与资源学院,广西,桂林,541004;湖南农业大学,园艺园林学院,长沙,410128;广东省农业科学院,果树研究所,广州,510640【正文语种】中文【中图分类】S662.5【相关文献】1.利用胚挽救技术获得三倍体葡萄植株研究 [J], 郭印山;郭修武;张海娥;李轶晖;李成祥2.三倍体葡萄胚挽救苗驯化及移栽技术研究 [J], 路凤珍;温晓敏;张娜;陈三春;黄建全;田淑芬3.三倍体葡萄胚挽救育种研究现状与展望 [J], 路凤珍;张娜;田淑芬;温晓敏;陈三春4.胚挽救技术进行无核葡萄及三倍体新种质创制 [J], 程琳琳;王跃进;张剑侠;唐冬梅5.三倍体葡萄胚挽救技术研究 [J], 杜万涛;郭印山;王英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大青杨三倍体诱导技术研究的开题报告
大青杨三倍体诱导技术研究的开题报告一、研究背景与意义大青杨（Populus deltoides Marsh）为一种重要的经济林木，在林业经济中具有重要的地位。
其性质适合于制材、纸浆、木材加工和燃料等方面的用途。
目前，大青杨的育种研究已经取得了较大的进展，但是在病虫害等方面的抗性还需要进一步提高。
三倍体植物具有良好的优势性状，如较大的器官、较强的光合作用能力和高度的耐逆性等等。
因此，三倍体植物作为新种质的制造者，已经成为育种研究和应用的热点。
利用三倍体诱导技术培育大青杨三倍体植物，有利于提高大青杨的生长速度、经济效益及抗病虫害性，进一步促进大青杨经济林木的研究与开发。
二、研究的主要内容1. 研究大青杨单倍体诱导技术，通过无菌培养、生物体外培养等技术，诱导获得大青杨单倍体。
2. 研究大青杨单倍体积累处理技术，通过植物生长调节剂的处理控制3倍体的合成，提高大青杨三倍体的产量及品质。
3. 研究大青杨三倍体的鉴别及性状表现，比较与二倍体的形态、生理生化特征的差异及其对环境的适应性表现。
4. 探究大青杨三倍体的遗传稳定性，通过实验研究大青杨三倍体的遗传稳定性及其后代遗传特性表现等方面的遗传变异情况。
三、研究的可行性分析1. 大青杨的单倍体诱导技术已经有了一定程度的研究基础。
2. 相关生物技术，如无菌培养、生物体外培养等技术已经日趋成熟。
3. 参考其他物种三倍体诱导技术的研究成果，可以对大青杨三倍体培育研究进行有益的借鉴。
四、研究的意义与创新点1. 大青杨三倍体植物的获得，进一步促进了大青杨的遗传育种研究。
2. 利用三倍体诱导技术培育大青杨三倍体，可以提高大青杨的生长速度、经济效益及抗病虫害性，具有广泛的应用前景。
3. 本研究的创新点在于针对大青杨三倍体的诱导、处理条件以及后代遗传特性表现的进一步研究，进一步推动了大青杨遗传育种研究领域的发展。
五、研究的步骤与时间规划1. 第一年：大青杨单倍体的诱导、获得及处理条件的调试优化。
利用体细胞杂种的花粉获取三倍体柑桔
利用体细胞杂种的花粉获取三倍体柑桔
Oiyama. I.;胡位荣
【期刊名称】《世界热带农业信息》
【年(卷),期】1992(000)001
【摘要】本文简述了利用柑桔与枸桔杂交所得的四倍体杂种与二倍体杂交获得三倍体柑桔的研究。
【总页数】1页(P36-36)
【作者】Oiyama. I.;胡位荣
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】S
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柑橘2个三倍体有性后代群体果实品质性状的遗传特点
柑橘2个三倍体有性后代群体果实品质性状的遗传特点管书萍;王婷婷;周阳广;朱虹娴;伍小萌;龙春瑞;高俊燕;郭文武;解凯东【期刊名称】《果树学报》【年(卷),期】2024(41)3【摘要】【目的】研究柑橘三倍体有性后代果实品质性状的遗传特点,为倍性杂交创制无核三倍体新种质科学选配亲本提供理论依据。
【方法】以柑橘二倍体品种秋辉橘、清见橘橙为母本,异源四倍体体细胞杂种橘柚+甜橙(NS)、甜橙+红橘(SD)为父本倍性杂交获得的2个三倍体有性后代群体成熟果实为材料,通过测定其果实横纵径、单果质量、果皮厚度、可溶性固形物和可滴定酸含量等性状,探究柑橘三倍体有性后代果实品质性状的遗传特点。
【结果】三倍体后代单果质量和果实横径平均值均介于双亲之间,呈趋中变异;果实纵径变化趋势在2个组合间有差异,秋辉橘×N S组合后代呈趋大变异,而清见橘橙×SD组合则呈趋中变异;果皮厚度平均值均大于亲中值且多数高于高值亲本,存在一定程度的超高亲本遗传现象;2个组合三倍体有性后代果实可溶性固形物含量平均低低亲比率分别为74.4%、66.88%,呈趋小变异;而2个三倍体有性后代群体果实可滴定酸含量平均值均低于亲中值,且不同年份间酸含量介于亲本间和低于低值亲本的后代比例较高。
【结论】推测柑橘三倍体有性后代果实单果质量、果实横径、纵径、果形指数、果皮厚度和可溶性固形物含量性状是由多基因控制的数量性状,可滴定酸含量性状可能存在主效控制基因。
【总页数】10页(P369-378)【作者】管书萍;王婷婷;周阳广;朱虹娴;伍小萌;龙春瑞;高俊燕;郭文武;解凯东【作者单位】华中农业大学园艺林学学院·果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室;云南省农业科学院热带亚热带经济作物研究所【正文语种】中文【中图分类】S666【相关文献】1.寒富×四倍体嘎拉苹果三倍体后代果实风味品质的研究2.三倍体苹果杂交后代及其亲本果实香气及品质分析3.柑橘体细胞杂种有性后代叶形态遗传变异研究4.富士杂交后代果实内在品质性状的遗传5.2个柑橘三倍体有性群体果实糖酸性状遗传评价因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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胚乳接种培养 ２ 周左右 ， 开始膨大 ， 在切 口及附近
表 面长出嫩绿色 （ 有 的略带淡黄色 ） 愈伤组织 。愈伤组
表 １ 低温处理对胚乳愈伤 组织诱导的影响 碰柑胚乳培养 来自材于浙江省柑桔研究所 山地试验
站 内 自然坐果后 ３ 个月左 右的柑桔幼果 。
１ ． ２ 试 验 方 法
织 结构紧凑 ， 表 面有颗粒状突起 。 不发生愈伤组织的胚 乳颜 色变白 ， 逐渐缩小 ， 最后死亡。
洗３ ～ ５ 次， 每次 ３ ￣ ５ ｍｉ ｎ 。于超 净工作 台上剥离种 皮 ， 取 出胚 囊 ， 剔除 幼胚 ， 分 离 出胚乳 ， 将其 接种于愈 伤组织 诱导 培养基诱导愈伤 。愈伤组织诱 导培养基 以 ＭＳ 培
（ 具体见表 ２ ） ， 在室内 ２ ５ ℃， 光 照时间 １ ４ ｈ ， 光 照强度为 ２ ０ ０ ０ ｋ的条件 下诱 导愈伤组织 ， ６ ０ ｄ后统计诱 导结果 。
１ ． ２ ． ２ 胚状体 的诱 导 。将获得 的碰柑胚乳愈 伤组织接 种于胚状体诱导培 养基 ， 诱导胚状体形成 。以 ＭＳ 、 Ｎ ５ 、 Ｂ ６以及 Ｎ ５和 Ｂ ６的混合培 养基为基 础培养基 ， 添加
关键词 ： 桂柑 ； 胚乳 ； 三 倍 体
国内柑 桔胚 乳培养早 在 ２ ０世纪 ８ Ｏ年代 已获得成 功 ［ １ １ ，随后 国内外开展 了大量柑桔胚乳培养方面 的研
１ ． ２ ． ３ 植株形成与鉴定 。 将胚状体接种于 ＭＳ 培养基上 形 成植株 ，利用流式细胞仪对 再生植株 的倍性进行鉴
２ ０ １ ４年第 ６期
现代 园艺
槿柑胚乳三倍体植株诱导研究
聂振朋 ， 柯甫 志 ， 罗君琴 ， 李 丽， 徐建 国
（ 浙 江省柑桔研究所 ， 浙江台州 ３ １ ８ ０ ２ ０ ）
摘 要： 简述 了桂柑胚 乳三倍 体植株的研 究过程 。 研 究了不 同培 养基 和激素配 比对挂柑 胚乳的影响 ， 结果表 明： 基本培 养基相 同 时， 激素配比对槿柑胚乳愈伤 组织诱 导影响很 大； 激素 配比相 同时， 不 同培养基对槿柑胚乳愈伤组织的胚状体诱 导差异较 大。
Ｄ Ｎ Ａ 的研 究 田． 西藏 科 技 ， ２ ０ １ ２ ， ２： ６ ６ — ６ ９
分子生物 学一实验手 册 ） 【 Ｍ 】 ． 北京 ： 高等教 育 出版社 ｖ ｓ 斯 普林格 出
不 同浓 度 的 ６ 一 Ｂ Ａ （ ６ 一 Ｂ Ａ ０ ． ５ ｍ ｇ ／ Ｌ 、 １ ， ０ ｍ ｇ ／ Ｌ 、 １ ． ５ ｍ ｇ ／ Ｌ ） ，
验 结果表 明 ： ６ － Ｂ Ａ浓度 对愈伤 组织诱 导 的影响呈抛
物 线状 ： ６ － Ｂ Ａ浓度 为 ０ ． ５ ｍ ｇ ／ Ｌ时出愈 率较低为 １ ． ３ ％； ６ 一 Ｂ Ａ浓度 为 １ ． ０ ｍｇ ／ Ｌ时 出愈 率最高 ，可达 １ ３ ． ３ ％； 当
定。 ２ 结果与分析
２ ． １ 愈 伤 组 织诱 导
究， 相关文章 时有 报道 ， 但真正在生产上推广应用 的柑 桔胚乳三倍体 品种 鲜有报道 。本文研究槛柑胚乳 三倍
体植株 的诱导 ， 以期 获得无核 的三倍体胚乳再生植株 ， 同时丰富现有柑桔 种质资源 。
１ 材料 与 方 法
６ － Ｂ Ａ浓度升至 １ ． ５ ｍ ｇ ／ Ｌ时 ，出愈率 呈现下降 的趋势 ， 为０ ． ６ ％，且形 成 的愈 伤组织结 构松 散 、颜 色暗淡 。 ２ ， ４ 一 Ｄ的浓 度为 ０ ． ２ ｍ ｇ ／ Ｌ 、 ０ ． ４ ｍｇ ／ Ｌ 、 ０ ． ６ ｍｇ ／ Ｌ时最大 出愈
科技， ２ ０ １ １ ， ８： ３ １ — ３ ４
【 ２ ］ Ｃｌ ａ ￣ ＭＳ Ｐ ｌ ａ ｎ ｔ Ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ Ｂｉ ｏ ｌ ｏ ￣ －Ａ ｈ ｂ ｏ ｒ ａ ｍ￣
版社， １ ９ ９ ８ ， ８ ， ４ － ７ ．
Ｍａ ｎ ｕ ￣（ 植 物
【 ５ ５ 】 肖智 样， 白冠章 ， 张玲 ， 等． 改进 的 Ｃ Ｔ Ａ Ｂ 法提 取 胡杨 （ Ｐ ｏ ｐ ｕ ｌ ｕ ｓ ｅ — ｕ ｐ ｈ ＝ ｄ ｃ ａ ） 总Ｄ Ｎ ＾ ０ ］ ． 塔 里木 大学学报， ２ ｏ ｏ ９ ， ２ １ （ ２ ） ： ２ ９ — ３ ２ ． 【 ６ 】 李惠波， 倪 书邦， 贺 熙勇． 适于 Ａ Ｐ Ｌ Ｐ分析 的澳 洲坚果 Ｄ ＮＡ提取 方 法Ⅱ 】 ． 热带农业科技， ２ ０ ０ ５ ， ２ ８ ： １ － ３ ． 【 ７ ｌ吕永磊 ． 改进 的 ｃ Ｔ Ａ Ｂ 法提取 高寒 植物 长鞭红景 天基 因组
养基 为基础 培养基 ，添 加不 同浓度 的 ６ － Ｂ Ａ和 ２ ， ４ 一 Ｄ
２ ． １ ． １低温处理对胚乳愈伤组织诱 导的影响。 从表 １ 的 结果 可以看 出 ，低温预处理对 槛柑胚乳愈伤组织诱导 有 一 定 的 时效 性 ，以 ５ ｄ为宜 ，诱 导 效 果最 佳 可 达
１ １ ． ４ ％， 处理时间超过或不足 ５ ｄ的诱导效果不好 。 ２ ． １ ． ２不 同激素种类及配 比对 愈伤组织诱 导的影响 。 试
低温预处理采 摘的碰柑幼果 ，接种 于愈伤组织诱
导培养基诱 导愈伤 ， 愈伤组织诱导形成胚状体 ， 胚状 体
诱 导形成植株 。 １ ． ２ ． １愈伤组织诱导 。 将经 过 （ ） ￣ ４ ℃低温预处理 的碰柑
种 子消毒 ，切取其胚乳 分别接种 于愈伤组织诱导培养
基 。消毒采用 ０ ． １ ％的升汞 ， 时间 为 ５ － ７ ｍ ｉ ｎ ， 无 菌水 冲
诱导胚状体 的形成 ， ６ ０ ｄ后统计胚状体发生 隋况 。
供各位科研工作者在实践 中应用和参考 。
（ 收稿 ： ２ ０ １ ４ — ０ ３ ～ １ ８ ）
参考文献 … 李永明， 赵 玉琪． 实用分子 生物学方 法手 册 ［ Ｍ】 ． 北京： 科 学 出版社，
１ ９ ９ ８． ６： １ ７ ３ －１ ７ ８ ．