人类免疫缺陷病毒检验
全国人类免疫缺陷病毒检测技术规范(2023年修订版)
全国人类免疫缺陷病毒检测技术规范(2023年修订版)引言本文档是全国人类免疫缺陷病毒（HIV）检测技术规范的修订版，旨在规范全国范围内HIV检测的质量和准确性，以提高HIV 感染者的早期发现和治疗。
1. 范围本技术规范适用于全国范围内所有医疗机构、疾病预防控制中心、实验室等单位进行HIV检测。
2. 术语定义- HIV：Human Immunodeficiency Virus，人类免疫缺陷病毒。
- HIV抗体：人体对HIV感染产生的免疫反应所产生的抗体。
- HIV抗原：HIV感染人体内HIV病毒产生的抗原。
- HIV核酸：HIV病毒的遗传物质（RNA）。
3. 检测方法3.1 HIV抗体检测- 检测方法应使用经国家药品监督管理部门批准的HIV抗体检测试剂盒。
- 检测过程应严格按照检测试剂盒说明书进行操作。
- 检测结果应根据检测试剂盒说明书的判断标准进行解读。
3.2 HIV抗原检测- HIV抗原检测可作为HIV感染早期诊断的辅助方法。
- 检测方法应使用经国家药品监督管理部门批准的HIV抗原检测试剂盒。
- 检测过程应严格按照检测试剂盒说明书进行操作。
- 检测结果应根据检测试剂盒说明书的判断标准进行解读。
3.3 HIV核酸检测- HIV核酸检测可作为HIV感染确认和病毒负载监测的方法。
- 检测方法应使用经国家药品监督管理部门批准的HIV核酸检测试剂盒。
- 检测过程应严格按照检测试剂盒说明书进行操作。
- 检测结果应根据检测试剂盒说明书的判断标准进行解读。
4. 质量控制4.1 检测设备- 检测设备应符合国家标准和相关法规的要求。
- 设备应定期进行校准和维护，确保其准确性和稳定性。
4.2 检测人员- 检测人员应具备相关专业知识和技能，经过专业培训并持有相关资质证书。
- 检测人员应定期参加质量控制和技术培训，保持技术能力和水平。
4.3 质量控制物质- 检测过程中应使用经国家质量控制中心认证的质控物质，以保证检测结果的准确性和可靠性。
hiv胶体金法原理
HIV胶体金法（HIV colloidal gold assay）是一种常用于检测人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的诊断试剂盒。
它基于胶体金技术，利用特定抗原与HIV抗体之间的免疫反应来检测HIV感染。
该方法的原理如下：
1. 准备试剂：试剂盒中包含两个主要组分：胶体金颗粒和特定的HIV 抗原。
胶体金颗粒是微小的金纳米颗粒，其表面被某种生物活性物质包覆，使其呈现出稳定的胶体状态。
特定的HIV抗原则能与HIV感染者体内产生的抗体发生特异性结合。
2. 样本处理：将待测血清或血浆样本与试剂中的HIV抗原混合，使其充分接触。
3. 抗原-抗体结合：如果样本中存在HIV抗体，那么它们将与试剂中的HIV抗原发生特异性结合。
这种结合形成了抗原-抗体复合物。
4. 胶体金标记：在抗原-抗体复合物形成后，胶体金颗粒会与复合物结合，形成更大的复合物。
这一过程被称为胶体金标记。
5. 可视化结果：将混合物滴在试剂盒提供的试纸上，胶体金颗粒会沿着试纸流动。
当复合物通过试纸上的检测线时，复合物中的胶体金
颗粒会与试纸上固定的抗体发生结合，形成可见的彩色线条。
如果样品中存在HIV抗体，则出现相应的阳性结果线条。
否则，只会显示一个阴性结果线条。
通过观察试纸上的线条形成情况，可以初步判断样本是否含有HIV抗体，从而进行HIV感染的初步筛查。
需要注意的是，HIV胶体金法是一种辅助诊断方法，阳性结果需要进一步进行确认和确诊。
人类免疫缺陷病毒(HIV1+2)抗体诊断试剂盒(胶体金法)标准操作规程
人类免疫缺陷病毒（HIV1+2）抗体诊断试剂盒（胶体金法）标准操作规程一. 预期用途本试剂盒定性检测人血清、血浆或者全血样品中可能存在的HIV-1/HIV-2抗体，作为HIV感染的辅助诊断方法。
二. 检测原理本试剂盒利用免疫层析原理，采用双抗原夹心法检测，在硝酸纤维膜上的检测区域包被HIV-1和HIV-2区段抗原，用胶体金标记同样含有的HIV-1和HIV-2区段的标记抗原，用抗HIV抗体作为对照线原料包被到硝酸纤维膜上形成对照线。
检测时，如果样品内还有HIV抗体时，样品中的HIV抗体可与纸条前段的“胶体金-抗原”结合，形成免疫复合物，复合物由于层析作用沿膜带移动，并在包被了抗原的检测区形成一条红色线，判为阳性；如果样品内不含有HIV抗体，检测区不会形成红色线，判为阴性。
三. 试剂1.生产厂商：北京万泰生物药业股份有限公司2.规格： 1人份/袋 10人份/盒3.试剂组成：测试卡、铝箔袋、干燥剂、说明书、样品稀释液。
测试卡主要成分：塑料卡、塑料底板、吸水滤纸、硝酸纤维膜（包括包被有HIV-1和HIV-2抗原的检测线和包被有抗HIV抗体的对照线），金垫（附着有胶体金标记的HIV-1和HIV-2区段抗原）。
四. 仪器加样器五. 样品要求：1、本试剂检测人血清、血浆或全血2、血清、血浆样品3日内检测的，置2-8℃冰箱保存；超过3日不检测的样品，应低温保存。
3、全血样品建议在采血后立即检测，不可长期放置后检测。
六. 检验方法：1、检测血清或血浆样品，用加样器取80ul血清或血浆样品，缓慢滴加在测试卡加样端中心。
2、检测全血样品：在测试卡加样端中心滴加1滴（约40ul）全血样品，后立即滴加1-2滴（约40-80ul）样品稀释液。
七. 质量控制：出现阳性对照线实验结果有效，不出现阳性对照线实验结果无效。
八. 参考值：加样完毕，室温放置30分钟观察结果，出现两条红色线为阳性，只出现一条对照线为阴性。
九. 检验结果的解释阴性：只出现一条对照线阳性：出现两条红色线。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程
1、 检验申请单独检验项目申请：人类免疫缺陷病毒抗体{缩写抗HIV （1+2）]测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2、 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml ，不抗凝，置普通试管中，或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆，用肝素、EDTA 或枸橼酸盐抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml 的全血标本，或少于0.1ml 的血清或血浆。
2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h 后将标本离心分离出血清或血浆，避免溶血。
离心必须达到3000rpm 15min ，离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间：室温（15-25℃）下可稳定48h ，普通冰箱中（2-8℃）稳定7d ，在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
不可使用热灭活的标本。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4-8℃冰箱内保存7d 。
2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛，避免剧烈活动。
医院检验科免疫室 体诊断试剂盒（酶联免疫法）标准操作规程 生效日期： 年 月 日版本：第1版第 页，共 页3．方法原理本实验采用HIV 特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板，用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。
当待测标本中存在HIV 抗体时，该抗体和固化的抗原结合于反应板上，并进一步与酶结合物相结合，在TMB 底物参与反应的情况下，产生显色反应。
检验科传染病四项胶体金法标准操作程序
传染病四项通常指的是乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、人类免疫缺陷病毒（HIV）和梅毒螺旋体（Syphilis）的检测。
胶体金法是一种快速、简便的免疫层析检测方法，常用于临床实验室进行这些传染病的初筛检测。
以下是检验科进行传染病四项胶体金法标准操作程序的大致步骤：1. 准备阶段：确认胶体金试剂盒的有效期、批号，并按照说明书储存条件保存。
准备必要的器材，如移液器、测试板、计时器、记录表格等。
确保操作环境符合生物安全要求。
2. 样本采集：遵循相关的生物安全规程，采集患者的血液样本，通常为指尖血或静脉血。
确保采血器具的清洁和无菌。
3. 样本处理：根据胶体金试剂盒的说明书，将血液样本加入特定的试剂中，并按照规定的程序进行混合。
等待试剂反应规定的时长，通常为1520分钟。
4. 结果判读：在胶体金测试板上，根据对照线和测试线的出现情况判断结果。
通常，如果对照线和测试线同时出现，判定为阳性；只有对照线出现，判定为阴性；对照线不出，测试线出现，判定为无效，需要重新检测。
5. 结果记录和报告：记录检测结果，并填写检测报告。
如果检测结果为阳性，需要按照实验室规定进行复检，并采取相应的生物安全措施。
6. 废弃物处理：按照规定处理使用后的试剂、样本和废弃物，确保符合环保和生物安全要求。
7. 质量控制：定期进行质量控制检查，包括使用已知阴性和阳性的质控样本进行检测，确保检测系统的准确性。
请注意，以上步骤仅供参考，具体的操作程序应遵循实验室的标准操作规程和胶体金试剂盒的说明书。
操作过程中应严格遵守实验室安全规范，确保检测结果的准确性和安全性。
人类免疫缺陷病毒(HIV) 检测
④检测时，先将硝基纤维素膜细条恢复室温，再与待检血清（用稀释 液稀释后）共同浸泡，37℃孵育60min（需用振荡摇床）。 ⑤取出硝基纤维素膜细条，用洗涤液洗涤5次，每次5min（用振荡摇 床）。 ⑥加酶标记抗人IgG 抗体，于37℃孵育60min（需用振荡摇床）。 ⑦洗涤同⑤。 ⑧加酶底物，显色10～20min。终止反应（放置于室温观察）。
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（1）ELISA 间接法检测HIV 抗体：将待测的血清稀释后按HIV 酶标诊断试剂盒的说明进行操作；该法的特异性和敏感性强， 操作简单、快速安全，比较适合大批量标本和筛选实验，但对 HIV 感染初期病人不能检测到抗体是其不足之处。
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（2）蛋白印迹试验：ELISA 法确诊的阳性标本应做蛋白印迹试 验以确证。
人类免疫缺陷病毒（HIV） 检测
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人类免疫缺陷病毒（HIV）是引起人类艾滋病（获得性免疫缺 陷综合征，AIDS）的病原体。
第 2页1.方法第 Nhomakorabea页有检测HIV 抗原和检测HIV 抗体两种。前者可用组织细胞培养 法、核酸检测法及免疫酶标法；后者有凝集试验、免疫荧光试 验、蛋白印迹试验及放射免疫试验和免疫酶标技术等。 目前世界上常用酶联免疫吸附试验（ELISA）间接法作为经典筛 选试验，蛋白印迹试验作为确证试验。
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（2）蛋白印迹试验：AIDS病人血清中的抗HIV 抗体与HIV的 多肽片段（外膜蛋白与核心蛋白）特异性结合后可形成多条蛋 白区带。强阳性反应显示HIV 几个基因组编码的全部蛋白带， 弱阳性反应显示两条或几条显色较弱的蛋白带，阴性反应则无 任何蛋白带显示。
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3.注意事项 （1）使用公认的HIV 酶标诊断试剂盒，不同厂家的试剂盒有可 能操作有异，应严格按说明书操作；不同厂家的产品有不同的 阳性判断标准，应按说明书慎重判断。 （2）鉴于HIV 及有关试验过程的特殊危险性，应严格规范实验 室操作规程，增加试验结果的准确性；严格规范安全防范措施， 防止感染；阳性结果应重复试验。
人类免疫缺陷病毒抗体检测
人类免疫缺陷病毒抗体检测（ELISA）1. 原理在微孔条上预包被纯化基因工程人类免疫缺陷病毒I型和II型（HIV-1/HIV-2）抗原（合成肽或基因重组蛋白），采用双抗原夹心法检测血清或血浆中人类免疫缺陷病毒抗体。
样品加入包被抗原反应孔，在随后的温育过程中，若样品中含特异抗体，则该抗体与包被抗原形成抗原抗体复合物被吸附到固相，再加入酶标记的HIV-1/HIV-2抗原，最终形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，洗涤除去未结合的游离酶，加入显色剂后显色。
2. 标本采集2.1 采集前病人准备：受检者应空腹2.2 标本种类：血清或血浆2.3 标本要求：采集病人静脉血2ml（可用EDTA抗凝），室温放置不超过4小时，分离血清备用。
3. 标本储存：2-8°C保存不应超过48小时，-20°C不应超过3个月，-70°C 长期保存，应避免反复冻融。
4. 标本运输：密封，室温运输。
5. 标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。
6. 试剂6.1 试剂名称：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒6.2 试剂生产厂家：北京万泰生物工程有限公司。
6.3 包装规格：96Test/Kit6.4 试剂盒组成：包被反应板，HIV酶标记物，阳性对照血清，阴性对照血清，浓缩洗涤液，底物A，底物B，终止液，封口膜，密封袋。
6.5 试剂储存条件及有效期：2-8°C避光保存，有效期6个月。
7. 仪器设备7.1 仪器名称：自动酶标仪7.2 仪器厂家：Rayto7.3 仪器型号：RT-61008. 操作步骤8.1 平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温（18-25°C），微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。
8.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。
8.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。
8.4 加样：用加样器在微孔反应条板孔中加入样品100l；空白孔不加任何液体；阴性对照孔和阳性对照孔，每孔分别加入阴阳对照各100l，标好位置。
人类免疫缺陷病毒标准操作规程(胶体金法)
人类免疫缺陷病毒（胶体金法）标准操作程序1.检验目的用于体外定性检测人全血、血清或血浆样本中人类免疫缺陷病毒(HIV) 1/2型艾滋病。
2.检验程序的原理和方法采用胶体金免疫技术和层析原理，定性检测人全血、血清或血浆样本中的人类免疫缺陷病毒(HIV) 1/2型抗体。
检测阳性样本时，样本中HIV抗体与胶体金标记抗原(大肠杆菌中表达)结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组HIV-Ag(大肠杆菌表达) 结合形成“Au-HIV(1+2) -Ag-HIV-Ab-HI(1+2) -Ag”夹心物而凝聚显色，游离的胶体金标记重组Au-HIV(1+2) -Ag则在对照线处与鼠抗HIV单克隆抗体结合而富集显色。
阴性样本则仅在对照线处显色，30分钟内观察结果即可。
3.性能特征3.1用国家参考品或经国家参考品标化的企业参考品进行检定。
3.1.1阴性参考品符合率：用HV抗体阴性参考品(N1~N20)测定，要求阳性反应不得多于2份，阴性符合率(-l-)应≥18/20。
3.1.2阳性参考品符合率：HV-1型阳性参考品符合率：用HIV-1型阳性参考品(P 1~P 18) 测定，要求应全部为阳性反应， HIV-1型阳性符合率(+/+) 应为18/18；且P 18显色强度应不低于P 17； HIV-2型阳性参考品符合率：用HV-2型阳性参考品(P 19~P 20) 测定，要求应全部为阳性反应， HIV-2型阳性符合率(+/+) 应为2/2。
3.1.3最低检出限：用最低检出限参考品(S1~S3)测定，要求阳性反应不得少于1份(≥1/3)且基质血清(S1)为阴性反应。
3.1.4重复性：用重复性参考品平行检测10次，应均为阳性反应且显色度均一。
3.1.5稳定性：37℃放置20天后，其阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出限、重复性应符合要求。
3.2本试利盒测定类风湿因子阳性血清、乙型肝炎病毒(HBV) 、甲型肝炎病毒(A) 、梅毒螺旋体(TP)感染者血清不会引起干扰。
人类免疫缺陷病毒血清学检测方法研究
人类免疫缺陷病毒血清学检测方法研究人类免疫缺陷病毒（HIV）是一种自体免疫系统攻击的病毒，它会破坏人体的免疫功能并导致艾滋病。
艾滋病是一种慢性疾病，严重影响了患者的生活质量和寿命。
因此，对HIV进行血清学检测是至关重要的。
本文将介绍一些关于HIV血清学检测的方法和技术。
传统上，HIV检测是通过检测抗体来实现的。
HIV抗体是人体免疫系统对HIV感染的反应，它们可以在感染后数周到数月内出现。
通过检测血液中的HIV抗体，可以确定一个人是否感染了HIV。
传统的HIV血清学检测方法包括ELISA和Western blot。
ELISA（酶联免疫吸附试验）是检测HIV抗体的常见方法。
在这个过程中，被测人的血清与HIV特定蛋白质结合，这表明免疫系统已经识别该病毒。
如果抗体存在，则会导致颜色变化，这表明个体已经感染了HIV。
Western blot是ELISA的补充测试，它可以检测更多的HIV蛋白质。
Western blot测试只在ELISA测试呈阳性时进行，以确保准确性。
它通过将血清蛋白电泳到薄膜上，然后使用HIV抗体检测薄膜上的病毒。
虽然传统的血清学检测方法已经被广泛使用并且是可靠的，但它们还有一些问题。
例如，它们需要进行两次测试，这需要更长的时间和更高的费用。
此外，ELISA测试虽然可靠，但出现假阳性结果的风险仍然存在。
为了解决这些问题，研究人员已经开发了许多新的测试方法。
例如，HIV核酸测试可以在感染了HIV但尚未形成抗体时检测病毒的存在。
这种测试使用分子生物学技术来检测HIV的基因组。
近年来，研究人员还开发了一种新的HIV检测方法，称为第四代HIV检测。
此种检测方法不仅可以检测HIV抗体，还可以检测病毒本身。
第四代HIV检测可以在病毒进入人体之后仅几天内检测到，而传统的ELISA测试则需要几周时间才能获得准确的结果。
此外，研究人员正在研究一种称为“追溯免疫学”的新技术，该技术利用了单个免疫细胞的反应以检测HIV感染。
人类免疫缺陷病毒抗体检测
人类免疫缺陷病毒抗体检测一、标本收集及处理：人血清或血浆类标本。
二、测定原理：用基因工程（含HIV-1gp160、gp41、p24,HIV-2gp36）包被反应板，当待测标本中存在抗-HIV抗体时，该抗体与固相化的抗原结合于反应板上，然后用酶标记的抗人IgG 与抗原结合的抗体反应，最后加入底物显色。
三、试剂来源：上海荣盛生物药业有限公司四、试验器材：（一）、试验试剂：1. 预包被反应条1袋7.显色剂B (TMB) 1瓶2. 酶结合物1瓶8.终止液1瓶3. 阳性对照1瓶9.封胶纸1片4. 阴性对照1瓶10.说明书1份5. 浓缩洗涤液1瓶11.自封袋1只6. 显色剂A（TMB）1瓶（二）、试验仪器：1.洗板仪：2.酶标仪：五、试剂制备：1、洗涤液使用前按要求用蒸馏水作1： 20稀释。
2、其他试剂按说明可直接使用。
六、操作程序：1、每次试验设阴性、阳性对照各两孔，分别加入阴性、阳性对照血清1^1,再设一孔空白对照，其余孔加入1^ 1被测样本，置37C孵育30分钟。
2、洗板：1）手工洗板：弃去反应板条孔内液体，拍干；用洗涤液注满每孔，静置5-10秒，弃去孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。
2）洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，最后拍干。
3、每孔加酶结合物1^1 （空白对照孔不加），置37.。
孵育30分钟，同上法洗反应板5次。
4、每孔加显色剂A液、B液各50^1,轻轻振荡后，37C避光静置15分钟。
七、结果判断：1.终止反应：每孔加入终止液50微升，混匀。
2.测定：用酶标仪读数，可选择单波长450 nm （以空白孔校零）或双波长450/630 nm,读取各孔OD值。
3.若阴性对照读数小于0.05时，按0.05计算。
4.临界值（Cut off value）=阴性对照平均值+0.10.测试标本的计算值小于Cut off value则为HIV抗体阴性。
测试标本的计算值等于或大于Cut off value则为HIV抗体阳性。
人类免疫缺陷病毒抗体测定SOP模版
目录1．实验方法2、检测原理3.标本要求4.检测试剂5.储存条件及有效期6 检验仪器7、检验方法8、质控9、结果计算10、参考值11、产品性能指标12、处理及报告13、临床意义14、验方法得局限性15、注意事项1实验方法采用双抗原夹心法、化学发光免疫测定(CLIA)技术定性检测人血清或血浆中人类免疫缺陷病毒1型与2型抗体得含量2检测原理以HIV抗原包被磁微粒,辣根过氧化物酶标记HIV抗原制备酶结合物,通过免疫反应形成抗原－抗体－酶标记抗原复合物,该复合物催化发光底物发出光子,发光强度与HIV抗体得含量成正比。
3 标本要求1)、应用正确医用技术收集血清或血浆样本。
血浆样本推荐使用EDTA、枸橼酸钠或肝素得抗凝血浆。
2)、样本中得沉淀物与悬浮物可能会影响试验结果,应离心除去。
3)、严重溶血、脂血或浑浊得样本不能用于测定。
4)、样本收集、处理后在室温放置不可超过8小时;如果不在8小时内检测需将样本放置在2~8℃得冰箱中;若需48小时以上保存或运输,则应冻存于-20℃以下,避免反复冻融。
使用前恢复到室温,轻轻摇动混匀。
4 检测试剂5储存条件及有效期:1)、试剂盒应保存于2～8℃,防止冷冻,避免强光照射,有效期为12个月。
2)、试剂机载稳定性•试剂包(磁微粒混悬液、酶结合物、样品稀释液)竖直向上存放,在2～10℃环境下冷藏保存2小时后,才可上机使用。
首次使用后,机载或在2～10℃ 环境下稳定期为28天。
•阴阳性对照开瓶后保存于2～8℃,稳定期为1个月;若需使用更长时间,应分装冻存。
6检验仪器AutoLumo A2000化学发光分析仪。
7 检验方法7、1、消耗品检查:•根据仪器说明装载或检查消耗品就是否充足。
•参考相应得仪器系统操作说明。
7、2、试剂包装载:•试剂包首次上机前,轻轻地倒转试剂包多次以混合新试剂包内得成分,避免产生气泡。
不要倒转已经打开得试剂包。
•仪器通过扫描试剂包条码自动获取测试所需得参数。
人类免疫缺陷病毒抗体检测(乳胶法)
人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体检测(乳胶法)【样本要求】静脉采血后离心获得血清、血浆样本，不同的抗凝剂如柠檬酸钠，肝素钠，EDTA，草酸钠，枸橼酸钠的血浆标本均可，在2-8℃条件下可保存一周，长期保存需-20C冷冻，应避免反复冻融，发臭、溶血等异常样本请勿使用。
【检验方法】在进行检测前必须先完整阅读使用说明书，并将试剂、样本和缓冲液恢复至室温(20℃-30℃)1.从原包装铝箔袋中取出试剂。
2.将试剂放在干净的平台上，用一次性塑料吸管吸取1滴血清、血(25 Ul)于加样孔(S)中，随后加入1滴缓冲液(的40ul)，开始计时。
3.等待红色条管的出现，检测结果应在15-20分钟判读，20分钟后判读结果无效【检验结果的解释】阳性(+)：两条红色条出现。
一条带位于检测区内(T)，另一条带位于质控区内(C)。
阴性(-)：仅质控区(C)出现一条红色条，在检测区内(T)无红色条带出现。
无效:质控区(C)未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。
在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂新检测。
如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系【检验方法的局限性】1.本试剂仅用于体外诊断2.本试仅用于检测人血清、直浆样本，用其它样本或溶液检测的结果可能有误。
3.本试剂为定性检测。
无法确定样本中HIV抗体的水平。
4.本试剂仅用于HIV抗体初筛检测，HIV抗体确认应遵循相关法规和标准在有资质的HIV确认实验室进行。
5.阳性结果须经相关确证方法的确认或经过国家法定的其他方式处理。
6.受分析灵敏度所限，阴性结果不能完全排除艾滋病毒感染的可能性，可能系样本中抗体浓度低于本产品的灵敏度所致，对于有怀疑的结果建议采用灵数度更高的其他类方法进行复核。
人类免疫缺陷病毒(I型)HIV-RNA核酸定量检测SOP
人类免疫缺陷病毒（I型）核酸定量检测系统标准操作程序1. 目的：规范超敏PCR仪器配置系统及人类免疫缺陷病毒（HIV-I RNA）的检测过程，确保检测结果的准确性和重复性。
2. 检测方法和原理2.1 检测方法：TaqMan探针荧光定量PCR法。
2.2 检测原理：人类免疫缺陷病毒（I型）核算定量检测试剂盒（PCR-荧光法）采用核酸扩增技术，定量检测人血浆中HIV-I RNA。
该方法包括三个主要步骤：（1）样品制备以分离HIV-I RNA；（2）靶RNA的逆转录形成互补DNA（cDNA）；（3）靶（cDNA）的PCR扩增以及裂解的、靶特异性的、双标记寡核苷酸探针的检测。
3. 标本要求3.1 标本类型：血浆（EDTA抗凝）。
3.2 标本的采集与处理3.2.1 标本采集量：采集患者静脉血6 mL（EDTA抗凝真空采血管）。
3.2.2 标本处理：标本采集后应在2小时内送至实验室，实验室收到标本后在1小时内处理标本。
3.2.2.1签收：门诊、住院以及CDC标本签收条码，并做好相关登记工作。
3.2.2.2编号：对标本进行唯一编号，内容如下：“年月日6位数字+标本号3位数字”，例如2018年1月1日收到一个HIV-RNA标本即编号为：“180101401”。
3.2.2.3离心：800-1600g,20min离心标本。
3.2.2.4标本保存：血浆在室温（25-30℃）最多存储1天；2-8℃最多存储6天；-20℃—-80℃可存储6周。
将待检血浆以2管每管1200 uL量存储于2.0mL戴螺旋盖的无菌聚丙烯管，在管壁编写如3.2.2.2的编号。
未检标本放置于专用样本盒中，冻存于-80 ℃冰箱。
已检血浆置-80ºC冰箱保存2个月，到期后按科室有关程序作废弃标本处理。
4.仪器和试剂4.2 试剂：（配套封闭试剂）4.2.1 试剂盒（包含核酸提取试剂、质控品及阳性定量参考品组分、PCR 检测试剂组分）保存于2-8℃环境下，有效期22个月。
免疫缺陷诊断标准
免疫缺陷诊断标准免疫缺陷病毒（HIV）感染是一种严重的传染病，可以导致免疫系统功能受损，从而容易受到各种感染的侵袭。
因此，及时准确地诊断免疫缺陷病毒感染对于患者的治疗和预防具有至关重要的意义。
为了规范免疫缺陷病毒感染的诊断，制定了一系列的诊断标准，以便医生和患者能够及时了解自身感染情况，采取相应的治疗措施。
首先，免疫缺陷病毒感染的诊断需要进行血清学检测。
血清学检测是目前诊断HIV感染的金标准，包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫印迹分析（Western Blot）等。
这些检测方法能够检测出HIV抗体或抗原的存在，从而判断是否感染了HIV病毒。
此外，还可以进行核酸检测，检测HIV病毒的RNA或DNA，以确认感染情况。
其次，临床表现也是诊断免疫缺陷病毒感染的重要依据。
HIV感染后，患者可能出现发热、乏力、体重下降、反复呼吸道感染等非特异性症状，以及念珠菌感染、卡氏肺囊虫肺炎等特定感染症状。
这些临床表现结合血清学检测结果，能够更加准确地诊断HIV感染。
此外，流行病学史也是诊断HIV感染的重要参考。
通过了解患者的性行为史、输血史、静脉注射史等，能够帮助医生更好地判断患者的感染风险，从而及时进行诊断和干预。
最后，免疫缺陷病毒感染的诊断还需要排除其他相关疾病。
有些疾病在临床表现上和HIV感染相似，比如巨细胞病毒感染、结核病等，因此需要通过相关检查和鉴别诊断，排除其他相关疾病的可能性，确保诊断的准确性。
总的来说，免疫缺陷病毒感染的诊断需要综合运用血清学检测、临床表现、流行病学史以及排除其他相关疾病等多种方法，以确保诊断的准确性和及时性。
只有及时准确地诊断HIV感染，患者才能够及时接受相应的治疗和干预措施，减少并发症的发生，提高生活质量。
因此，医生和患者都应该重视免疫缺陷病毒感染的诊断工作，及时进行检测，确保自身健康。
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人类免疫缺陷病毒检验
人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency vi-rus，HIY）又称艾滋病毒，是获得性免疫缺
陷综合征即艾滋病（acpuired immunodeficiency syndrome，AIDS）的病原体，属逆转录病毒科（retroviridae）的慢病毒（lentivinrs）亚科，形态为典型的D病毒，主要通过性传播途径、
血液传播途径和母婴传播途径传播。
HIV有HIV-1和HIV-2两种类型，目前在世界广泛流行的
是HIV-1型。
HIV基因有高度的变异性，目前在全球流行的HIV-1毒株已出现3个组，即M 组、O组和N组，其中M组又分为A到J十个基因型。
HIV-2是逆转录病毒中的另一个病毒，也可引起人患上艾滋病，但症状多较HIV-1引起的为轻，HIV-2主要在西非国家流行，其与
HIV-1在血清学上有一定的交叉反应。
艾滋病是以机会感染及局部肿瘤为特点的致死性传染病。
截止2000年底，我国累计报告
HIV/AIDS22517例（AIDS880例），死亡496例，估计实际感染人数远超过已发现的感染者人数，加强艾滋病的预防与控制是我国以及全世界面临的一个紧迫的问题。
1 样本采集
1.1血清（浆）样本
1.1.1抗原、抗体检测静脉采血，血液样品应在l2h内做到：①送到初筛实验室；②分离出
血清；③装入一干净试管内，盖上试管盖；④按标准编号贴上标签。
分离出的血清应立即进行筛查实验。
若因故不能立即检测，应将血清放置－20℃低温保存；
无条件时亦可放置4℃，但不得超过3d。
检测后的血清应于－20℃或更低温保存，以用于确
认实验。
1.1.2核酸检测使用EDTA抗凝血浆标本，抗凝后6h内分离血浆；如使用血清标本，则需在
2h内分离血清，标本的保存应在－70℃下，并避免反复冻融。
1.2全血标本
全血标本主要用于提取基因组核酸和病毒核酸，静脉取血后可于4℃下短期保存，如用于提
取病毒RNA，则应在取血后尽快提取。
1.3淋巴细胞
淋巴细胞主要用于提取核酸，可从抗凝全血制备，主要有两种方法：一是使用淋巴细胞分离
液分离制备；二是使用红细胞裂解液，裂解全血中的红细胞，经生理盐水数次洗涤，即可得
到淋巴细胞。
淋巴细胞如暂不提取核酸，可保存于－70℃下。
1.4样品采集的注意事项
1.4.1用于ELISA法检测的血浆或血清样本勿用叠氮化钠防腐。
1.4.2本应无微生物污染，避免溶血。
1.4.3核酸检测用的血液标本严禁使用肝素抗凝，因其对PCR扩增有抑制，且无法在核酸提
取过程中去除。
2 检验方法
HIV感染最直接的检查方法是从受检者的血液中分离培养HIV或检测HIV特异性抗原、HiV
核酸。
但HIV分离培养操作繁琐，费用较高，技术难度大，实验场地要求严格（P3实验室）；
HIV抗原检测的敏感性不如抗体检测；核酸检测需要较高的实验操作水平和实验室条件。
因而，目前最常用的HIV检测技术是抗体检测。
HIV感染后的检测存在“窗口期”，“窗口期”是指从HIV感染后到用现有方法能检出HIV抗原、抗体和核酸前的一段时间。
个体差异、检测方法的种类和试剂的敏感性是影响“窗口期”长短
的主要因素。
每种检测都要等到“窗口期”之后再进行，否则会得到假阴性结果。
2.1 HIV分离培养
用脐血或已建立的T淋巴细胞，经PHA刺激后培养，3～5d后接种标本，每周加强PHA刺激。
如有病毒生长可观察到细胞病变，用电镜观察病毒颗粒，也可用ELISA或免疫荧光法检查病
毒抗原，或测定细胞培养上清液中逆转录酶的活性来判断标本中是否存在感染性HIV。
病毒
分离培养检测HIV的“窗口期”约为7d左右，对于HIV感染的早期诊断有重要意义。
2.2 HIV抗原检测
P24抗原是人体感染HIV后最早出现于血液中的病毒成分，通常在感染后2周即开始出现，
因此，P24抗原检测可以在感染者血清抗体阳转前即作出早期报告，大约可以使“窗口期”缩
短一周。
P24抗原检测在新生儿感染的早期诊断和AIDS病程进展的监测上有重要作用。
但应
该注意到，P24抗原作为HIV-1的感染指标的作用是有限的，因为在HIV感染者血液中检测
到P24抗原的比例不高，因而，P24抗原检测目前只是HIV辅助诊断手段。
2.3 HIV抗体检测
HIV抗体检测是卫生部认可的HIV感染诊断方法，由于HIV检测中任何漏诊、误诊都可能导
致极为严重的后果和法律纠纷，为了防止检测工作可能出现的问题，卫生部专门制定了《全
国艾滋病检测工作规范》，对开展HIV抗体检测的单位、人员、场地和检测试剂等制定了严
格的标准。
HIV抗体检测分为初筛试验和确认试验两个阶段，初筛试验阳性的血清一定要进行确认试验，确认试验为阳性的才能肯定为被HIV感染。
HIV初筛试验要求敏感性接近100％，不能出现假阴性，对特异性要求不太严格。
初筛试验由取得资格的HIV抗体初筛实验室或确认实验室进行，初筛呈阳性反应的标本不得向受检者公布其结果。