酵母菌的培养与分离
酵母菌菌体离心实验步骤
酵母菌菌体离心实验步骤以酵母菌菌体离心实验步骤为标题，写一篇文章如下：酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于自然环境中，被广泛应用于食品发酵、酿造和生物学研究等领域。
离心实验是一种常用的分离和纯化生物物质的方法，下面将介绍以酵母菌菌体离心实验步骤。
实验所需材料和仪器：1. 酵母菌培养液：含有大量酵母菌菌体的培养液。
2. 离心管：用于离心实验的管状容器。
3. 离心机：用于离心实验的设备，能够以高速旋转离心管。
实验步骤如下：步骤一：准备工作1. 将离心管清洗干净，并确保没有任何杂质。
2. 用无菌技术取出适量的酵母菌培养液，注意避免外界的污染。
3. 准备好离心机，确保离心机内部的离心管是干净的。
步骤二：装样品1. 将取出的酵母菌培养液缓慢倒入离心管中，避免产生气泡。
2. 确保离心管中液体的高度不超过离心管的容积的70%。
步骤三：离心实验1. 将装有酵母菌培养液的离心管放入离心机中。
2. 调节离心机的转速和离心时间。
一般来说，酵母菌的离心转速为3000-5000转/分钟，离心时间为5-10分钟。
3. 启动离心机，使其以设定的速度旋转。
步骤四：离心结束1. 离心结束后，停止离心机的运转。
2. 注意离心管内可能产生的沉淀，避免晃动或颠倒离心管。
步骤五：收集上清液1. 将离心机中的离心管取出，并小心地将上清液倒入另一个干净的容器中。
2. 注意避免将沉淀带入上清液中。
通过以上实验步骤，我们可以将酵母菌菌体从培养液中分离出来，得到较为纯净的上清液。
离心实验通过利用离心力将悬浮在液体中的颗粒物分离出来，其原理是根据颗粒物在离心力作用下的不同沉降速度来实现分离。
在酵母菌菌体离心实验中，酵母菌菌体由于其较大的体积和密度，会向离心管底部沉积，形成沉淀，上清液中则是相对较为纯净的液体。
需要注意的是，在进行酵母菌菌体离心实验时，应注意使用无菌技术，以避免外界的污染。
此外，在实验过程中，离心机的转速和离心时间的选择也需要根据具体的实验要求和酵母菌的性质进行调整。
酵母分离培养
YPD培养基YPD 或YPED，：Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L)，又叫酵母浸出粉胨配方：1% Yeast Extract（酵母膏），2% Peptone（蛋白胨），2% Dextrose (glucose)（葡萄糖），若制固体培养基，加入2%琼脂粉配制方法：1 .溶解10gYeast Extract（酵母膏）, 20gPeptone（蛋白胨）,20g琼脂粉于900ml水中2 .高压 115度 20min3.加入100ml 10×Dextrose (glucose)（葡萄糖），(葡糖糖溶液灭菌后加入) ,注：葡萄糖，yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应，导致培养基成分变化，所以要分别灭菌后再混合。
酵母的分离与纯化1、接种：取酵母0.5克，加入到5ml的YPD培养液中，在30℃摇床中过夜培养，可见培养液变浑浊。
2、计数：将酵母菌液稀释到合适的倍数（约102-103倍）以每小格的菌数可数为度，涂于血球计数板上，在高倍显微镜下计数酵母菌数。
3、涂皿：将培养基溶化后制成平板，用无菌吸管取0.1ml稀释合适倍数的菌液到平板中，用涂棒涂匀后培养24h。
做平行样。
4、分离纯化：用接种环挑取单个酵母菌菌落，在平板上三区划线，培养后分离得到单个菌落。
5、镜检：挑取单菌落，制片观察其形态。
6、菌种保藏：接种酵母菌到马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基上，长出菌苔后冰箱保藏。
血球计数板使用1.取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。
将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液，然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。
2.静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。
酵母生产工艺
酵母生产工艺酵母是生物酶工中最常使用的微生物之一，其用途广泛，包括面包、啤酒、酒精等食品和饮料的发酵过程。
下面介绍一下酵母的生产工艺。
首先是酵母菌的培养。
酵母菌的培养是以酵母菌体最大生长速率为目标，会选择最适宜条件的发酵培养基，包括碳源、氮源、无机盐、微量元素等。
碳源有葡萄糖、果糖、麦芽糖等，氮源有酵母浸出物、酵母膏等，其余成分包括磷酸盐、硫酸盐、镁盐等。
通过调配不同的配方，可以获得适合不同酵母菌株的发酵培养基。
接种酵母菌体。
接种是将培养好的酵母菌体引入到发酵产业中的第一个步骤。
常见的接种方式有液体接种方法和固体接种方法。
液体接种法是将酵母菌体培养物加入发酵液中，使其迅速繁殖。
固体接种法则是将酵母菌体培养物分散撒在发酵料中，使酵母菌体通过吸附固定在发酵料的表面。
酵母菌体的发酵。
酵母菌体的发酵是指将酵母菌体在发酵液中进行代谢活动，产生所需的物质。
发酵过程中需要控制好温度、pH值、氧气和营养物质的供给等因素，以保证产酵母菌体生长和产酵素的效果。
一般发酵过程分为三个阶段：增殖阶段、稳定阶段和产物合成阶段。
增殖阶段是指酵母菌体在发酵液中迅速繁殖，需提供充足的营养物。
稳定阶段是指酵母菌体生长速度趋于平稳，需保持适宜的温度、pH值和氧气供应。
产物合成阶段是指酵母菌体开始合成所需产物，如酒精、酶等。
酵母菌体的分离和提纯。
经过发酵的酵母菌体需要进行分离和提纯，以获得纯净的酵母菌体。
通常会采用离心、滤纸过滤、滴定法等方法进行分离和提纯。
以上就是酵母的生产工艺。
酵母生产工艺的改进和优化是提高酵母产量和质量的关键。
酵母菌的分离纯化
酵母菌的分离纯化-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN酵母菌的分离纯化、固定化和酒精发酵第一部分酵母菌的分离纯化一、实验目的应用酵母菌的生理生化和生态学的特点，从自然环境中分离酵母菌，并掌握微生物分离纯化的基本方法。
二、实验原理酵母菌常见于含糖份比较高的环境中，如果园土、菜园土及果皮等的表面。
多数酵母菌喜欢偏酸条件，最适pH为酵母菌生长迅速，容易分离培养。
在液体培养基中，酵母菌比霉菌生长快，利用酸性条件则可以抑制细菌的生长。
因此常用酸性液体培养基获得酵母菌的加富培养，然后在固体培养基上划线分离纯化。
三、器材和用品1、甘蔗、苹果皮、葡萄皮、果园土、菜园土等。
2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基：马铃薯200g（煮开10min后过滤取汁），葡萄糖20g，琼脂20g，水1000ml，pH自然。
分装三角瓶；试管斜面1支/组3、乳酸马铃薯葡萄糖培养液：配方同上，不加琼脂加乳酸，按1000ml培养基加入5ml乳酸，pH为左右，再分装试管9ml2支/组。
4、无菌吸管3支/组、无菌培养皿、100ml无菌水1瓶/组、涂棒、美兰染液、显微镜、接种环等。
四、实验方法1、接种：取果皮（不需冲洗）或土壤5克，加入到100ml无菌水中，充分搅拌后，用无菌吸管取1ml接入到9ml乳酸马铃薯葡萄糖培养液中，在28-30℃培养箱中培养24h，可见培养液变浑浊。
2、加富培养：用无菌吸管取上述培养液1m l，注入另1管乳酸马铃薯葡萄糖培养液中，在28-30℃培养箱中培养24h。
3、镜检：用无菌操作法用接种环取少量菌液置于载玻片上，中央滴一滴美兰染液，混合均匀后制成水浸片，在高倍镜下观察酵母菌的形态及出芽方式，并可根据菌体是否染色来区分酵母菌的死活细胞，因活细胞使美兰染液还原，故菌体不着色。
4、涂皿：用马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶化后制成平板，用无菌吸管取加富培养液到平板中，用涂棒涂匀后培养24h。
5、分离纯化：用接种环挑取单个酵母菌菌落，在平板上四区划线，培养后分离得到单个菌落。
微生物实验报告
酵母菌的分离,接种和培养摘要:200人类认识和利用酵母菌的历史悠久，早在史前时期，先人们就学会酿酒。
约在6000年前，就发明发面的方法。
直到十九世纪有了显微镜，人们才窥探到醉母菌的真面目。
对酵母菌做纯系培养分类研究的是与巴斯德同时代的丹麦人汉斯，他是为寻求酿造高品质啤酒的途径才去深入研究酵母菌的。
本文将在实验室酵母菌的分离，接种和培养方面做详细论述。
关键词:酵母菌；分离；接种；培养前言:酵母菌属真菌。
体呈圆形、卵形或椭圆形，内有细胞核、液泡和颗粒体物质。
通常以出芽繁殖；有的能进行二等分分裂；有的种类能产生子囊孢子。
广泛分布于自然界，尤其在葡萄及其他各种果品和蔬菜上更多。
是重要的发酵素，能分解碳水化合物产生酒精和二氧化碳等。
酵母菌在治疗消化系统疾病，作为发酵和繁殖的供体等方面有着重要的作用。
所以了解酵母菌的分离，接种和培养的方法也是很有必要的。
1.材料与方法1.1样品及玻璃器皿手提式不锈钢蒸汽消毒器DF205电热鼓风干燥箱SW-CJ-2FD双人单面净化工作台DHP-500型电热恒温培养箱(酵母菌30°左右)1.2方法1.2.1 培养基的配制及灭菌葡萄糖酵母培养基:蛋白胨10g,葡萄糖20g , 酵母膏5g琼脂15~18g ,蒸馏水1000ml1.2.1.1称量药品根据培养基配方依次准确称取各种药品，放入适当大小的烧杯中，琼脂不要加入。
蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。
1.2.1.2溶解用量筒取一定量(约占总量的1/2)蒸馏水倒入烧杯中，在放有石棉网的电炉上小火加热，并用玻棒搅拌，以防液体溢出。
待各种药品完全溶解后，停止加热，补足水分。
如果配方中有淀粉，则先将淀粉用少量冷水调成糊状，并在火上加热搅拌，然后加足水分及其它原料，待完全溶化后，补足水分。
1.2.1.3调节pH根据培养基对pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液调至所需pH。
测定pH可用pH 试纸或酸度计等。
1.2.1.4溶化琼脂固体或半固体培养基须加入一定量琼脂。
酵母菌纯培养的实验步骤
酵母菌纯培养的实验步骤
酵母菌纯培养的实验步骤如下：
1. 取少量酵母菌样品，使用选择培养基（例如固体葡萄糖、面粉琼脂培养基，添加有特殊药液和增菌剂的选择培养基有利于酵母菌的筛选）进行分离纯化。
2. 筛选出发酵力良好的菌落并进行纯培养。
在酒精发酵实验中发现典型的酵母菌菌落可移种至综合生化管培养箱中进一步鉴定。
3. 使用液体培养基进行酵母菌扩大培养，准备好无菌吸管和无菌锥形瓶，将酵母菌从锥形瓶中转移到试管中。
4. 对酵母菌进行计数，准备血液培养皿和牛肉膏琼脂培养基，接种菌液到培养基中使其生长并繁殖，观察生长情况并进行计数。
通过以上步骤，就可以对酵母菌进行纯培养，请确保所有使用到的工具和试剂都经过灭菌处理。
以上步骤仅供参考，建议您咨询专业人士获取更具体的信息。
酵母菌的分离纯化实验方案
酵母菌的分离纯化•实验目的1.了解培养基的配置与灭菌技术；2.无菌操作技术；3.工业微生物的分离与纯化技术；4.工业微生物的检测及保藏。
•基本原理1、培养基是人工配置的用于培养、分离、鉴定和保存各种微生物的营养基质。
也适合微生物在生命活动中积累各种代谢产物。
由于微生物种类不同，营养类型各异以及实验目的不同，因此培养基的种类也很多。
不同微生物对营养的要求不同，在配置时根据微生物对PH 的要求选择合适的PH。
由于本次实验主要是分离纯化酵母菌，所以配置的培养基是适合酵母菌生长麦芽汁平板培养基，同时添加抗生素抑制霉菌及其它菌的生长。
2、接种和培养过程中必须保证不被其它微生物所污染，关键在于严格进行正确的无菌操作，但是绝对无菌是不可能的，只能人工创造相对无菌的环境。
所以本次实验无菌操作是在超净工作台的酒精灯火焰旁进行。
3、把特定微生物从混杂的微生物群体中分离出来而获得某一种或某一株微生物的过程叫微生物的分离与纯化。
首先根据其生长特性设计只利于此菌生长的条件，再根据各种稀释法使他们在固体培养基上单独长成菌落。
分离纯化的方法通常有：稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法和平板划线。
此次实验采用梯度稀释涂布平板法。
4、微生物检测项目最常用的是细胞数的检测，方法比较多，主要有显微镜直接计数法、平板菌落计数法（CFU）、光电比浊计数法等。
本次实验设计酵母菌的数量检测，选用显微镜直接计数法和平板菌落计数法。
实验器材仪器设备恒温水浴锅、电热干燥箱、蒸汽灭菌锅、超净工作台、恒温培养箱、恒温摇床、水浴锅、电炉、铜锅、酒精灯、接种环、电子天平、研钵、光学显微镜、血细胞计数器玻璃器皿烧杯、锥形瓶、大小试管、培养皿、漏斗、三角涂棒、吸管、试管架、玻璃涂棒、盖玻片试剂与材料苹果、大麦芽、琼脂、蒸馏水、碘液、抗生素、染色液其它纱布、滤纸•实验内容及操作步骤(一)、样品的选择酵母菌一般在果园的土壤中或者水果的表面含量较多，因此选择苹果为样品。
土壤中酵母菌的分离与纯化实验报告结果
土壤中酵母菌的分离与纯化实验报告结果实验步骤：
1.实验前准备：准备好所需的培养基、试剂和实验器材。
2.取一定量的土壤样品，加入无菌水中制备土壤悬浮液。
3.对土壤悬浮液进行预处理：将悬浮液通过过滤器过滤，以去除大颗粒杂质。
4.制备培养基：根据酵母菌的生长要求，配制适宜的培养基。
5.接种培养基：将过滤后的土壤悬浮液均匀地接种在培养基表面，避免接种过多的菌落。
6.培养条件：将接种好的培养基培养于适宜的温度和湿度条件下。
7.观察培养结果：在培养一定时间后，观察培养皿上是否出现酵母菌菌落。
8.分离纯化：选择单个菌落，用无菌技术将其移至新的培养基上，重复培养步骤，直到获得纯种的酵母菌培养物。
实验结果：
经过培养和分离纯化的酵母菌培养物显示出单一的菌落形态，颜色为白色或乳白色。
观察下显微镜下，酵母菌呈现为球形或椭圆形的单细胞结构，直径约为5-10微米。
酵母菌菌落在培养基上呈现出光滑、湿润的表面，并具有边缘清晰的特点。
实验结论：
通过土壤中酵母菌的分离与纯化实验，成功地从土壤样品中分离出纯种的酵母菌培养物。
这些酵母菌菌落形态规整、单一，符合酵母菌的特征。
该实验结果为进一步深入研究酵母菌的生理特性和应用提供了基础。
酵母菌的分离
酵母菌的分离酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于自然界中的土壤、水体、果实等环境中。
酵母菌以其独特的代谢特性被广泛应用于食品工业、制药业、酿酒业等领域。
为了深入了解酵母菌的特性和应用潜力，科学家们对酵母菌进行了大量的分离研究。
酵母菌的分离是指从样本中筛选出纯种的酵母菌，并将其进行培养和研究。
在分离酵母菌的过程中，科学家们需要采集样本，如土壤、果实等，将样本经过一系列处理后进行培养。
首先，样本会经过物理处理，如振荡、搅拌等，以分散其中的酵母菌。
然后，样本会被培养在富含营养物的培养基中，提供适宜的环境条件，使酵母菌能够生长繁殖。
接下来，科学家们会进行菌落计数，通过观察和统计菌落的数量和形态，筛选出单一的酵母菌菌种。
最后，分离得到的酵母菌菌种会被进行进一步的鉴定和培养，以确保其纯度和活力。
酵母菌的分离研究对于酵母菌的应用具有重要意义。
首先，分离得到的酵母菌菌种可以用于酿酒和发酵产业。
不同的酵母菌菌种具有不同的发酵特性和产物特性，通过分离和筛选，可以获得更适合特定产品的酵母菌菌种，从而提高产品的质量和产量。
其次，分离得到的酵母菌菌种可以用于制药工业。
酵母菌可以被用于生产多种药物，如抗生素、维生素等，分离研究可以为制药工业提供更多的菌种资源和新的应用途径。
此外，分离酵母菌还可以用于食品工业。
酵母菌可以被用于发酵食品的制作，如面包、啤酒等，通过分离和培养研究，可以获得更适合特定食品的酵母菌菌种，提高食品的品质和口感。
当前，酵母菌的分离研究正处于不断深入的阶段。
科学家们通过采集不同样本，如极端环境、农产品等，寻找更多的酵母菌菌种。
同时，利用现代生物技术手段，如基因工程、高通量筛选等，加速酵母菌的分离和鉴定过程。
这些研究不仅有助于发现新的酵母菌菌种，还可以为酵母菌的应用提供更多的可能性。
酵母菌的分离是一项重要的研究工作，对于酵母菌的应用具有重要意义。
通过分离研究，科学家们可以获得纯种的酵母菌菌种，并将其应用于食品工业、制药业、酿酒业等领域。
分离观察酵母菌实验报告
1. 学习微生物分离纯化的基本原理和方法。
2. 掌握酵母菌的分离纯化技术。
3. 观察酵母菌的形态和培养特征。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，广泛存在于自然界中。
本实验通过平板划线法将混合菌液中的酵母菌分离纯化，并在适宜的培养基上培养，观察其形态和特征。
三、实验材料1. 菌种：啤酒酵母菌2. 培养基：酵母膏葡萄糖琼脂培养基（YGA）3. 工具：接种环、酒精灯、无菌试管、无菌棉签、培养皿、显微镜等四、实验方法1. 菌种活化：将啤酒酵母菌菌种接种于YGA培养基中，在28℃恒温培养箱中培养24小时。
2. 分离纯化：取活化后的酵母菌菌液，用无菌棉签涂布于YGA平板上，用接种环进行平板划线，划线时注意不要划破菌落。
将平板倒置于28℃恒温培养箱中培养24小时。
3. 观察与计数：观察平板上的菌落，记录菌落形态、大小、颜色等特征。
用无菌棉签挑取单个菌落，接种于新的YGA平板上，重复上述操作，直至获得纯化的酵母菌。
4. 酵母菌形态观察：将纯化的酵母菌接种于YGA培养基中，在28℃恒温培养箱中培养24小时，用无菌吸管吸取少量菌液，滴加于载玻片上，用无菌盖玻片覆盖，在显微镜下观察酵母菌的形态。
五、实验结果1. 菌落特征：酵母菌菌落呈圆形，表面光滑，湿润，边缘整齐，颜色为乳白色。
2. 酵母菌形态：酵母菌为单细胞，呈椭圆形或卵圆形，细胞核明显，细胞壁较厚。
1. 通过平板划线法，成功分离纯化了酵母菌，表明该方法适用于微生物的分离纯化。
2. 酵母菌在YGA培养基上生长良好，菌落特征明显，便于观察和识别。
3. 显微镜下观察酵母菌的形态，有助于了解其生物学特性。
七、实验结论1. 本实验成功分离纯化了酵母菌，掌握了酵母菌的分离纯化技术。
2. 通过观察酵母菌的形态和培养特征，了解了酵母菌的基本生物学特性。
3. 平板划线法是一种简单、有效的微生物分离纯化方法，适用于实验室研究。
八、实验注意事项1. 实验过程中要注意无菌操作，防止杂菌污染。
酵母分离纯化实验报告
一、实验目的1. 掌握酵母菌分离纯化的基本原理和方法。
2. 学习使用显微镜观察酵母菌的形态特征。
3. 熟悉微生物实验室的基本操作技能。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，广泛分布于自然界。
本实验采用稀释涂布平板法从混合样品中分离纯化酵母菌。
该方法基于菌落形成的原理，通过稀释样品，使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 酵母菌混合样品- 营养琼脂培养基- 无菌水- 灭菌器械（接种环、酒精灯等）- 显微镜2. 实验仪器：- 研钵- 玻璃棒- 离心机- 培养箱四、实验步骤1. 制备平板：- 将营养琼脂培养基加热融化，冷却至约50℃。
- 将融化后的培养基倒入培养皿中，待凝固后备用。
2. 样品稀释：- 将酵母菌混合样品用无菌水进行10倍稀释，制成不同浓度的稀释液。
3. 涂布平板：- 用无菌吸管吸取适量稀释液，滴加到平板中央。
- 用无菌玻璃棒轻轻涂抹，使样品均匀分布在平板表面。
4. 培养：- 将平板倒置，放入培养箱中培养。
5. 挑取菌落：- 在适宜的温度下培养，观察菌落生长情况。
- 根据菌落特征（如大小、形状、颜色等）挑取单菌落。
6. 纯化：- 将挑取的单菌落接种到新的平板上，重复培养和挑取过程，直至获得纯化后的酵母菌。
7. 观察与鉴定：- 将纯化后的酵母菌制片，用显微镜观察其形态特征。
- 根据酵母菌的形态特征（如细胞大小、形态、芽殖方式等）进行鉴定。
五、实验结果与分析1. 菌落观察：- 经过培养，平板上形成了不同形状、大小的菌落。
- 通过挑取和纯化，获得了纯化后的酵母菌。
2. 显微镜观察：- 在显微镜下观察，纯化后的酵母菌呈现为球形或椭圆形的单细胞结构，直径约为5-10微米。
3. 鉴定：- 根据酵母菌的形态特征，初步鉴定为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）。
六、实验讨论1. 本实验采用稀释涂布平板法成功分离纯化了酵母菌，该方法简单易行，适用于实验室常规操作。
酵母菌的纯培养实验原理
酵母菌的纯培养实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，广泛存在于自然界各种环境中，包括土壤、水体和植物表面等。
酵母菌的纯培养实验是一种基本的实验手段，用于研究酵母菌的生长、代谢以及其他生物学特性。
本文将探讨酵母菌的纯培养实验的原理和方法。
酵母菌的纯培养实验是指将酵母菌分离出单个纯种，使其在培养基上单独生长。
这样可以避免不同种类的酵母菌相互干扰，从而更好地研究其生物学特性。
纯培养实验的关键是分离出单个酵母菌，实验过程大致分为以下几个步骤。
需要选择适当的培养基。
常用的培养基有酵母抽提物培养基、酵母营养盐琼脂培养基等。
培养基应提供适当的碳源、氮源和其他必需的营养物质，以满足酵母菌的生长需求。
需要从自然环境中分离出酵母菌。
可以通过取样、稀释和涂布等方法，将样品均匀地分布在培养基表面。
然后，将培养皿放置在适当的温度和湿度条件下，等待酵母菌的生长。
接下来，需要进行单菌分离。
当培养皿上出现酵母菌生长的斑点时，可以使用显微镜和接种针等工具，将单个酵母菌菌落转移到新的培养基上。
这个步骤需要非常细心和准确，以确保每个菌落只含有一个酵母菌。
需要进行鉴定和纯化。
通过观察酵母菌的形态特征、生长性状和代谢产物等，可以初步鉴定酵母菌的种类。
然后，可以将纯培养的酵母菌菌落转移到新的培养基上，进行进一步的培养和研究。
酵母菌的纯培养实验不仅可以研究其基本生物学特性，还可以应用于酵母菌的育种和工业生产等领域。
例如，通过培养高产酵母菌株，可以提高酵母菌的发酵产物的产量和质量；通过培养抗逆性强的酵母菌株，可以提高发酵过程的稳定性和效果。
酵母菌的纯培养实验是一种重要的实验手段，用于研究酵母菌的生物学特性和应用价值。
通过适当的培养基和实验方法，可以成功地分离和纯化酵母菌，并进行进一步的研究和应用。
酵母菌的纯培养实验对于推动酵母菌研究的发展和应用具有重要意义。
实验室培养酵母菌的方法
实验室培养酵母菌的方法
实验室培养酵母菌的方法如下：
1. 样品处理：对种子样品进行表面灭菌处理，并使用无菌研钵进行粉碎，然后将粉末加入到一定量的无菌水中形成原液，一般稀释到10^-6即可。
2. 酵母菌的分离：在无菌条件下，取样品稀释液微升至培养基中，使用无菌涂布器将其接种于培养基中（酵母菌常用培养基包括MEA培养基、PDA培养基、YPD培养基等），每个梯度2-3个平行，28℃培养48-72小时。
3. 纯化培养：在平行平板中选取菌株分布均匀、数量适宜的平板，挑取其中的单菌落将其以平板划线方式接种于新的MEA培养基中，28℃培养48-72小时。
然后挑取单菌落接种至新鲜的MEA斜面上与4℃进行保藏。
以上步骤仅供参考，建议咨询专业人士获取更准确的信息。
酵母菌的分离筛选方法
酵母菌的分离筛选方法酵母菌多数为腐生，一般生长在含糖较高，偏酸的环境中，在通气条件下，液体培养比霉菌快。
菌落与细菌相似，较大而厚，多数不透明，菌落光滑湿润粘稠，乳白色，少数干皱，边缘整齐，呈红色或粉红色，圆形椭圆卵形，液体培养基生长会生成沉淀或菌膜。
含高糖浓度（45%），分离蜂蜜酵母，球拟酵母属等嗜高渗透压的酵母。
1.培养基：葡萄糖 50g/L 尿素1g/L （NH4）2SO41g/L L L MgSO41g/LFeSO4 L 酵母膏 L 孟加拉红 L （富集用）★乳酸-马铃薯-葡萄糖培养基：马铃薯200g/L 葡萄糖（霉菌用蔗糖）20g/L 乳酸5ml马铃薯去皮切片200g，加水煮沸30min，纱布过滤，补足蒸馏水1L，PH自然。
（去掉乳酸可用于酵母菌和霉菌培养用）（富集用）★麦芽汁培养基：1：4水60-65℃水浴3-4小时，4-6层纱布过滤，可加一个蛋清加水20mL调均生泡沫，倒入糖化液中，煮沸过滤，10-15波林，氯霉素L 121℃ 20min （分离保存用）灭菌后加入300u/ml硫酸链霉素（集菌用）★虎红（孟加拉红）培养基：蛋白胨L 葡萄糖10g/LL L 孟加拉红L 氯霉素L 琼脂15g/L PH自然（分离纯化用）★豆芽汁培养基：黄豆芽100g/L 葡萄糖50g/L PH自然。
100g黄豆芽，加水煮沸30min，纱布过滤，补足蒸馏水1L察氏培养基：主要培养霉菌观察形态用蔗糖30g/L 硝酸钠3g/L 磷酸氢二钾1g/L 氯化钾L 硫酸镁L 硫酸亚铁L 琼脂15-20g/L 121℃ 20min PH自然一般分离黄酒酵母酒精酵母使用曲汁培养基，啤酒酵母用酒花麦汁培养基，葡萄酒酵母用葡萄汁培养基。
2.集菌：研究酵母菌生态和某种基物或样品中的酵母菌区系，一般不进行集菌，以免改变其中不同种类数量间的对比，将样品制成菌悬液按常规法分离。
若从样品中分离特定种类时先集菌。
集菌发酵力强菌株，加酸性含糖的培养基，酸性豆汁，必要时注入高浓度的酒精（13-17%），霉菌在液体中形成菌丝体，酵母不形成菌丝，25-28℃2-3d，遇到菌丝体用接种环挑去烧掉，去掉上清液，取沉淀酵母一至两环移植另一液体培养基中，集菌连续两至三次才能完成，要配合镜检。
酵母菌的培养与分离
酵母菌的培养与分离实验目的】学习培养和分离酵母菌的技术和方法【实验原理】大多数酵母菌为腐生，其生活最适pH为4.5一6，常见于含糖分较高的环境中，例如果园土、菜地土及果皮等植物表面。
酵母菌生长迅速，易于分离培养，在液体培养基中，酵母菌比霉菌生长得快。
利用酵母菌喜欢酸性环境的特点，常用酸性液体培养基获得酵母菌的培养液（这样做的好处是酸性培养条件则可抑制细菌的生长），然后在固体培养基上用划线法分离之。
【实验材料和用具】1、甘蔗、成熟葡萄或苹果等果皮、0.1%美蓝染液、1ml的无菌吸管、无菌培养皿等。
2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基：原料：马铃薯（200克）、葡萄糖（20克）、琼脂（15-20克）、蒸馏水（1000ml）。
配制方法：（1）先将马铃薯去皮，切片，称200克并加蒸馏水1000ml，煮沸半小时，用纱布过滤，补足蒸馏水量至1000ml ，制成20%的马铃薯汁。
（2）在20%的马铃薯汁中加入琼脂，煮沸溶化，补足水分并在115摄氏度条件下高压灭菌20分种。
（3）加入葡萄糖，制成培养酵母菌的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
3、乳酸马铃薯葡萄糖培养液：配方同上，但不加琼脂而加乳酸，按每1000ml培养液中含5ml乳酸的量加入，并分装试管。
【实验步骤】l、接种：取一小块果皮，不需冲洗，直接接入乳酸马铃薯葡萄糖培养液管中，置28一30℃，培养24小时，可见培养液变混浊。
2、培养，用无菌吸管取上述培养后培养液0.lml，注入另一管乳酸马铃薯葡萄糖培养液中，置28一30℃再培养24小时或稍长(过长则霉菌长出)。
3、观察：用无菌操作法取少许菌液置于载玻片中央的0.l%美蓝染色液中，混匀后加盖玻片制成水浸片，先用低倍镜后换高倍镜观察酵母菌的形态和出芽生殖情况。
活酵母菌可使美蓝还原，从而使菌体不着色，用此方法可判断酵母菌的死活。
4、分离：马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶化后制成平板。
用划线法分离酵母菌培养液，从而得到单个菌落。
挑取单个菌落反复再次划线分离纯化，最终可获得纯培养。
酵母菌的分离与培养条件的优化
2、设备空消
2.1空消前，将控制系统退出自动运行状态，小心取出 PH电极和DO电极，进行清洗、校检、备用，并装好 电极堵头。 2.2打开夹套排污阀，同时打开夹套蒸汽阀进汽，在同 时向罐内排光冷凝水之后，关闭夹套蒸汽阀，直至空 消结束。 2.3缓慢打开进气阀及底阀处的蒸汽阀进汽，待压力升 至0.01Mpa后，打开罐面排气阀进行排气。 2.4调节罐面排气阀，保持罐压0.01Mpa,维持温度在 120℃~125℃之间，计时空消30min
稀释10倍
0.117A 0.105A 0.097A 0.061A 0.130A 0.143A 0.178A
原液
1.018A 0.863A 0.889A 0.830A 0.845A 0.836A 1.180A
测发酵瓶的PH值OD值 及残糖量
• 一小时后（12：30） • PH值均为5 • OD值 • 稀释 （NH4）2SO4 2% 0.210A （NH4）2SO4 4% 0.167A NH4NO3 2% 0.192A • NH4NO3 4% 0.106A • NaNO3 2% 0.167A • NaNO3 4% 0.161A • 对比 0.262A
2.5空消完毕，关闭进气阀及底阀处的蒸汽阀，打开 底阀开始排污。 2.6开大罐面排气阀，卸去罐压后，打开罐盖上的进 料口加入培养基。
3 、加培养基
3.1 投料前，应校正并安装PH电极和OD电极。 3.2 按工艺要求配置好培养基原液，加入发酵罐内。 3.3 加水定容至60%-65%左右后，启动电机搅拌 5min
• 3.4 按工艺要求调整好PH后，拧紧进料口螺盖。 • 操作注意；实消时蒸汽冷凝水约占培养基体积 10%左右，固定容是必须扣除此容积。
• 4 、培养基实消
• 4.1 投料结束后，启动电机。慢速搅拌。 • 4.2 微开夹套排污阀，打开夹套蒸汽阀，保持夹 套压力为0.11mpa左右，待培养基预热达到95℃ 以上时停搅拌，关闭夹套蒸汽阀，开大夹套排污 阀。 • 4.3 培养基温度达到95 ℃后，缓慢打开进气阀及 底阀处的蒸汽阀，同时向罐内进气，待罐压升至 0.11mpa后，打开罐面排气阀进行排气。
制作酵母菌过程
制作酵母菌过程
酵母菌制作过程主要包括以下步骤：
1. 酵母菌种植：从食品厂或研究机构购买酵母菌培养基，选用适合的菌种进行预培养，使其活跃起来。
2. 加入基质：将预培养好的酵母菌加入基质中进行进一步培养。
基质可以选用糖水、面粉、麦芽等材料，也可以直接用酒、酸奶等天然发酵物作为基质。
3. 发酵：将加有酵母菌和基质的发酵罐保持在适宜的温度和湿度下，让其进行发酵。
通常发酵时间为1-2天。
4. 分离纯化：将发酵液离心分离，去除杂质，得到纯化后的酵母菌。
这一步可以使用离心机、过滤器等工具进行操作。
5. 干燥：将纯化后的酵母菌通过喷雾、真空干燥等方法进行干燥处理，制成酵母粉。
6. 包装：将酵母粉包装好，贴上标签，进行存储和销售。
以上就是制作酵母菌的主要步骤。
不同的酵母菌制作过程有所差异，但基本上都是以上几个步骤的组合使用。
酵母菌培养与分离的方法
酵母菌培养与分离的方法嘿，朋友们！今天咱来聊聊酵母菌培养与分离那些事儿，这可有意思啦！你想想看，酵母菌就像一群小小的精灵，在我们看不见的地方活跃着。
要培养它们呀，就好像给这些小精灵搭个温暖舒适的家。
首先呢，得准备好合适的培养基。
这就好比是给小精灵们准备的美食盛宴。
常用的培养基就有麦芽汁培养基之类的，营养丰富得很呢！把这些培养基调配好，就等着酵母菌们大快朵颐啦。
然后呢，就是接种啦。
这就像是邀请小精灵们来家里做客。
可以从现有的酵母菌培养液中取那么一点点，轻轻地放到培养基上。
哎呀，这可千万得小心，别把小精灵们吓跑咯！接下来，就是要给它们提供适宜的环境啦。
酵母菌喜欢温暖的地方，温度可不能太低啦，不然它们会不高兴的。
还要注意保持一定的湿度，就像我们人也喜欢在舒服的环境里待着不是？等培养了一段时间后，你就会发现培养基上出现了好多酵母菌啦。
那一团团的，不就是小精灵们的聚会嘛！要把它们分离出来呢，也有办法。
可以用稀释涂布平板法呀，把含有酵母菌的培养液稀释后，均匀地涂在平板上。
就好像是把小精灵们均匀地撒在一个大广场上，这样它们就能各自占一块地方啦。
或者还可以用平板划线法呢，用接种环在培养基上划来划去，就像给小精灵们划分地盘一样。
培养和分离酵母菌可不简单呢，这需要我们的耐心和细心。
就好像照顾小婴儿一样，得时刻关注着它们的需求。
你说，这酵母菌是不是很神奇呀？我们通过一些小小的操作，就能让它们在我们的掌控下生长、繁殖、分离。
这难道不是很有成就感的一件事吗？想想看，我们可以通过自己的努力，观察到酵母菌的点点滴滴，了解它们的生活习性，这多有趣呀！所以呀，大家不妨都试试，自己动手培养和分离酵母菌，去探索这个小小的微生物世界。
说不定你会发现更多奇妙的事情呢！就大胆地去尝试吧，别害怕失败，就像我们走路也会摔跤，但总会站起来继续走一样。
让我们一起在酵母菌的世界里畅游吧！。
接种和分离酵母菌注意事项
接种和分离酵母菌注意事项酵母菌是一种单细胞真菌，广泛应用于工业发酵和食品生产中。
接种和分离酵母菌是进行这些应用的必要步骤，也是酵母基因工程研究的基础。
接下来，我们将从以下几个方面给出接种和分离酵母菌的注意事项。
一、实验前准备在进行接种和分离酵母菌实验之前，需要进行一系列的准备工作：1.培养基准备：考虑到不同酵母菌的生长和代谢需求不同，需要根据具体的实验目的制备不同的培养基。
2.实验器材准备：常用的实验器材有无菌操作台、离心机、显微镜、恒温培养箱等，需要在实验前确保这些器材都已经准备好并检查是否处于正常工作状态。
3.试剂准备：涉及到接种和分离酵母菌实验的试剂有无菌移液管、磁力搅拌器、配体、琼脂、冰醋酸等。
二、酵母菌的接种酵母菌接种主要是指将酵母菌菌丝或培养基中的活细胞接种到新的培养基或液体培养基中，以便于酵母菌的扩增和维持纯度。
接下来我们介绍一些接种酵母菌的注意事项：1.无菌操作：接种酵母菌要求无菌操作，否则可能会引入细菌等杂质，影响实验结果。
2.选择培养基：酵母菌属于真菌，需要复杂的生长条件。
因此，在选择培养基时，需要考虑酵母菌的生长和代谢需求。
3.接种密度：接种密度应该是适当的，过高的密度会导致菌落之间的竞争，而过低的密度则会影响生长速率和细胞数量。
4.接种方式：接种方式可以采用研磨法、洗菌液法和划线法等，具体方式取决于实验设计和需要。
三、酵母菌的分离在酵母菌分离实验中，我们需要将混合细胞分离成单个克隆。
下面我们介绍一些分离酵母菌的注意事项：1.选择基质：在分离酵母菌时，需要选择合适的基质，该基质应该能够提供充足的营养物质，支持酵母菌单个克隆的生存和繁殖。
2.运用选择性压力：在分离酵母菌时，可以使用含有特定抗生素或毒素的培养基，将特定的酵母菌分离出来。
3.鉴定酵母菌：在分离酵母菌前，要对混合菌群的酵母菌进行鉴定，以确定需要分离的酵母菌种类。
4.单克隆的分离：使用鉴定酵母菌的标记，可以在培养皿上很容易地区分单个克隆，将单个菌落切取涂抹在新的培养基上，直到获得单个克隆。
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微生物学大实验实验指导编者:生物技术教研室200７。
3目录实验一酵母菌得培养与分离‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥2 实验二酵母菌得鉴定‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥７实验三酵母菌耐受能力得测定‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥19 实验四酵母菌发酵工艺条件得优化‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥2２实验五耐高温酵母菌株得诱变选育‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥24 实验六酿酒酵母细胞固定化与酒精发酵‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥２７耐高温酒精酵母菌得选育及发酵条件得研究实验一酵母菌得培养与分离一、实验目得学习培养与分离酵母菌得技术与方法二、基本原理大多数酵母菌为腐生,其生活最适pH为4。
５－６,常见于含糖分较高得环境中,例如果园土、菜地土及果皮等植物表面。
酵母菌生长迅速,易于分离培养,在液体培养基中,酵母菌比霉菌生长得快。
利用酵母菌喜欢酸性环境得特点,常用酸性液体培养基获得酵母菌得培养液(这样做得好处就是酸性培养条件则可抑制细菌得生长),然后在固体培养基上用划线法分离之。
三、实验主要内容与要求(一)本次实验得方案由同学们自己制定,实验包括:１.马铃薯葡萄糖培养基, 乳酸马铃薯葡萄糖培养液得配制。
2、菌株得筛选,根据一定得生产目得并从特定得样品筛选出高产酒精得适宜得酵母菌株。
3。
酵母菌得分离,要求接种一次, 2８-３０℃,培养24小时,转接一次,２8－30℃,培养２4小时,并用镜检得方法独立判定所分离菌株就是否为酵母菌、4、用划线分离法对酵母菌进行纯化,要求每组挑取单个菌落,连续划线分离4代,镜下为单一纯菌株,每组扩繁10支斜面菌种,备用、四、实验得准备1、甘蔗、成熟葡萄或苹果等果皮、0.1％美蓝染液、1ml得无菌吸管、无菌培养皿等。
２、马铃薯葡萄糖琼脂培养基:原料:马铃薯(２０0克)、葡萄糖(20克)、琼脂(15－20克)、蒸馏水(１000ｍｌ)。
配制方法:(1)先将马铃薯去皮,切片,称20０克并加蒸馏水10０0ml,煮沸半小时,用纱布过滤,补足蒸馏水量至1000mｌ ,制成2０%得马铃薯汁。
(2)在20%得马铃薯汁中加入琼脂,煮沸溶化,补足水分并在1１5℃条件下高压灭菌20分种。
(3)加入葡萄糖,制成培养酵母菌得马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
３、乳酸马铃薯葡萄糖培养液:配方同上,但不加琼脂而加乳酸,按每１000ｍl培养液中含５ml乳酸得量加入,并分装试管。
五、实验设计l、接种:取一小块果皮,不需冲洗,直接接入乳酸马铃薯葡萄糖培养液管中,置28－３0℃,培养24小时,可见培养液变混浊。
2、培养,用无菌吸管取上述培养后培养液0。
ｌmｌ,注入另一管乳酸马铃薯葡萄糖培养液中,置２8一30℃再培养24小时或稍长(过长则霉菌长出)。
3、观察:用无菌操作法取少许菌液置于载玻片中央得0、l％美蓝染色液中,混匀后加盖玻片制成水浸片,先用低倍镜后换高倍镜观察酵母菌得形态与出芽生殖情况。
活酵母菌可使美蓝还原,从而使菌体不着色,用此方法可判断酵母菌得死活。
４、分离:马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶化后制成平板、用划线法分离酵母菌培养液,从而得到单个菌落。
挑取单个菌落反复再次划线分离纯化,最终可获得纯培养。
六、实验注意事项1。
配制培养基时,应注意琼脂得加量,不同规格及批次得琼脂得加量应由实验确定,不能照搬书上得加量、2。
对培养基加热时应注意琼脂得糊底与暴沸、3、灭菌锅操作时,首先应注意水一定要加足够,排气要彻底,其次灭菌期间不要离开人,灭菌结束后,关闭电源,拔掉插头,最后放气一定要缓慢,均匀,气放彻底才能开锅,取锅内物品,应小心,防止烫伤。
４。
接种前应注意无菌工作台得消毒与杀菌,接种时应注意手与接种工具得消毒。
七、实验结果得观察及记录1。
24小时,观察试管内培养液得情况并作记录,每组转接２支试管。
2。
4８小时,观察试管内培养液得情况,镜检培养液内菌得数量,粗略判断就是否为酵母菌并作记录,每人蘸取培养液进行划线分离,并作记录。
３、72小时后,观察培养皿内菌得生长得情况,挑取单个菌落进一步划线分离,直到为纯菌落。
４.每组转接10支斜面试管,备用、八、实验得延伸自然条件下酿造苹果酒,葡萄酒、猕猴桃酒。
七实验报告要求1、实验完毕后,每位同学都应独立作出实验报告,实验报告应类似于小型论文格式。
２、实验报告内容包括:(１)立题意义。
(2)实验设计、(３)实验步骤详细记录。
(4)对实验结果得分析讨论与总结。
(5)实验延伸。
(6)实验心得体会。
附１:果酒得酿制方法—、目得要求了解果酒酿制原理,学习苹果酒酿制技术。
二、基本原理果酒就是一类营养丰富、含酒精度低得上乘饮料。
它就是用含一定糖分与水分得果实压汁,经微生物发酵而成、其生化作用,除酒精发酵得主产物外,还有甘油、醋酸、琥珀酸、杂醇油等得形成;同时,陈酿期中,各种酸类与醇类得酯化反应,赋予果酒特殊得香味;果酒中得单宁、色素、果屑微粒及蛋白质(包括酵母尸体)等得氧化与下沉,使酒液澄清、风味增浓。
各种果酒以原料而称名。
除坚果外,所有栽培果,野生果均可做酿果酒得原料。
本实验以苹果酒为例,学习其酿制方法。
三、实验材料１、菌种在７°Be’麦芽汁琼脂斜面培养基上得葡萄酒酵母(ｓ。
ceｒeviｓaｅｅｌlipsｏieleus)、2、器材苹果汁培养基,７°Be’麦芽汁培养基,10ｍl／管、１０0ml/三角瓶等装量,白糖,食用酒精,亚硫酸,果胶酶,发酵缸,破碎机,果汁分离器等、a。
苹果汁培养基粗滤新鲜果汁(蔗糖调至１3°Bｅ,酸度0。
5%以下)1000mｌＫ2ＨPO4 0.1ｇ MgSO4·7H2O 0.1g配好后,加热煮沸３～5分钟,静置1０小时以上,过滤、分装,0.７Kg／cm2灭菌２0分钟。
四、实验步骤(一)酒母培养1、菌种活化(一级种) 取装有10ｍl苹果汁或７°Ｂｅ’麦芽汁培养基1支,按无菌操作法接种葡萄酒酵母菌一环,混匀后置28~30℃下培养2～5天(用苹果汁活化菌种时需培养5天以上),镜检酵母繁殖良好,无杂菌即可。
2、母发酵剂制备(二级种) 在装有100mｌ苹果汁培养基得三角瓶中,接1～２ml经活化得葡萄酒酵母菌液,于２８℃下培养２～３天,当培养液表面有气泡产生,嗅之有酒香味、取样镜检无杂菌时使用。
3、生产发酵剂得制备(三级种) 方法与母发酵剂相同,只就是采取更大得容器。
一般采用5０0～100０ml得三角瓶或卡氏罐,盛装占容积１／2~3/５得果汁培养液,灭菌冷却后,按１0%接种量接人母发酵剂,在25～2８℃下培养24～48小时,待发酵正常,镜检无杂菌方可使用。
4、如果使用活性干酵母,添加量为20ｇ/Ｌ发酵醪,复水用水量就是干酵母重量得5～10倍、复水用水得温度应保持在4０℃左右(38~43℃),将酵母静置５~１０min后搅拌,酵母在水中得时间不能超过30min。
然后使酵母溶液缓慢冷却到与将被接种发酵醪得温差小于1０℃,然后直接加入发酵醪。
(二)果酒生产工艺流程如下:果胶酶↓苹果→分选除杂下清洗→破碎→压榨→粗果汁→果楂、苹果酸、丹宁↑活化酵母→母发酵剂→生产发酵剂↓蔗糖→发酵→皮渣分离→后发酵→原酒→→换捅除渣→贮存陈酿→配制→贮存→澄清过滤→装瓶→巴氏灭菌→封口→成品、(2~3次) 操作要点:1、分选取成熟苹果,除去腐烂、干疤与伤果。
2、清洗清水充分洗涤,除去果皮上得污物、杂质及药剂,以保证原料干净卫生。
3、破碎为易于压榨,提高出汁率,需进行破碎、用破碎机破碎至果块粒度0、5cm3左右,并除去果籽。
4、压榨分离破碎后立即进行压榨分离。
分离出得果汁中不得夹带果肉,同时需添加适量苹果酸调整含量(要求果汁总酸含量为５g／Ｌ),并加入0.1～0.15ｇ／L得果胶酶,促进果胶分解,使果汁澄清并提高酒得风味。
由于苹果汁易被自身含有得多酚氧化酶氧化,故需加SO2还原剂抑制酶活性,同时SO２也具有杀菌、防腐与澄清果汁作用。
ＳO2来源,除工厂应用液态ＳO2外,实验室常加入亚硫酸钠(Na2ＳＯ3)与偏重亚硫酸钾(K２Ｓ2Ｏ５),其用量为果汁量得0、02％即可、５、前发酵取澄清果汁放入经干热灭菌得发酵缸中,装量占缸容积得4／5,按３～5%得接种量接入酵母生产发酵剂进行发酵,保持品温在1８～2２℃之间,最高勿超过25℃,发酵应在7～1２天内结束。
一般苹果汁糖分约为11%,经发酵后,酒精含量约达６％以上,前发酵结束后,原酒酒度应大于8％(V),残糖<２0g／L,总酸(苹果酸)>5g/L。
６、后发酵前发酵结束后,迅速将酒液与皮渣分离,酒汁转入经干热灭菌得发酵缸中,进行后发酵,使残糖继续分解。
期间,控制品温在18~22℃之间,不要超过25℃,时间1个月,即得原酒。
要求残糖含量小于2g／L以下,挥发酸(以醋酸计)小于０。
６g／L,总酸(以苹果酸计)大于5ｇ/Ｌ。
７、换桶除渣为使已澄清得原酒与其酒脚(沉淀物)及时分离,以免酒脚产生异味而影响酒质,故需进行换桶(缸)、换桶次数新酒每年换三次。
8、贮存陈酿应满桶贮存。
陈酿即酒得老熟,经长期密闭贮存,可使酒质澄清、风味醇厚。
贮存室温8~16℃,存期半年以上。
９、配制原酒贮存半年后可开始配制、配制时,按工艺规定将不同原酒按一定配比相混,然后添加适量得糖、酒精、继续贮存半年以上、10、澄清过滤可采用冷冻法使其澄清,即于-4℃左右存放7天,然后冷过滤。
澄清后得酒置-5～—7℃下冷冻３天不发生混浊沉淀,或暴露空气中氧化4天不变混浊即为合格。
11、装瓶灭菌装瓶后需进行巴氏灭菌,即在63℃下处理１5分钟,冷却后封口保存。
五、实验报告1、简述苹果酒得酿制法。
2、二氧化硫在果酒酿制中得作用就是什么?六、思考题1、酵母菌酿酒得原理就是什么？2、果酒酿制中为何要加入果胶酶？实验二酵母菌得鉴定酒精生产中所用酵母菌在微生物学中得分类依据就是什么？微生物学得类别分门、纲、目、科、属、种,生产酒精用酵母菌属于微生物中得真菌门、子囊菌纲、原子囊菌亚纲、内孢霉目、内孢霉科、啤酒酵母属、卡尔斯伯酵母属等。
酵母菌得分类依据就是根据它得形态特征、生理生化反应特征来确定得、在分类前将菌体细胞进行分离纯化,得到由单细胞长成得菌落,然后再进行形态特征与生理生化鉴定。
(一)形态特征得鉴定把酵母菌接种到麦芽汁固体培养基上,让它长成菌落,观察其菌落得形态、颜色、质地、边缘、表面等特征。
把它再接种到液体麦芽汁培养基中,观察就是否能产生醭、试管或培养仪器表面壁上能否形成菌环,培养液中就是否产生沉淀、混浊程度等。
另外,还要取样在显微镜下观察其单细胞得形态、大小、能否形成孢子、孢子得大小以及繁殖方式等。
(二)生理生化特征得鉴定酵母菌得生理生化特征主要表现为发酵葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖等糖类得能力。
同时,还需测定利用其它碳水化合物、同化酒精、耐酒精,利用硝酸盐还就是硫酸盐,发酵产酸、产醋、耐温、耐酸、抗重金属离子、抗杂菌性等得能力、最后,根据以上得出得形态特征与生理生化特征,查阅有关资料,把具有相同特征得一类酵母菌,就可以归属于某一属。