高中生物《第三章 第一节 菊花的组织培养》课件4 新人教版选修1
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人教版高二生物选修一 3.1 菊花的组织培养 (共54张PPT)
（三）接种 1、接种室消毒
污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关 重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 70％的酒精擦拭工 作台并用紫外线照射20分钟
2、无菌操作要求
所有的接种操作要在酒精灯火焰旁完成。 每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。 接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
（三）是否进行了统计、对照与记录
做好统计和对照，填好结果记录表，从第一步开始做好实 验记录。可以分组配制不同培养基，如诱导愈伤组织直接分化 丛芽的培养基，做不同培养基配方的实验比较。
（四）生根苗的移栽是否合格
关键是既要充分清洗根系表面的培养基，又不能伤及根系。 一般先使用无土栽培的办法，培养基要提前消毒。苗壮后再移 植到土壤。可通过统计成活率来衡量移栽水平。
三、结果分析与评价
（一）对接种操作中污染情况的分析
一般情况下，细菌污染可能是由接种人员造成的，如未戴 口罩，接种时说话，或手及器械消毒不严等。
（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化
观察实验结果，看是否培养出愈伤组织，记录愈伤组织的 出现时间。统计更换培养基后愈伤组织进一步分化成根和芽的 比例和时间。
思考：同专题2中微生物培养基的配方相
比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？
微无生机物物培养基以有机营养有为主机。物植物组
织培养MS培养基则以无机营养为主。
牛肉膏蛋白胨培养基
在MS培养基MS配培养制基好之后，常常需要加入植物激素
3、植物激素的影响
①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素
生长素类：2（，I4AA－）二、氯萘苯乙氧酸乙（酸N（AA2），、4－吲D哚）丁、酸吲（哚I乙BA酸） 细胞分裂素类：激 （动6素－（BAK）T）、、玉6米－素苄（基Z嘌T）呤 赤霉素类： 赤霉酸（GA3）
人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》 课件 (共45张PPT)
C．AaBb水稻单倍体育种育出的二倍体水稻， 有两种基因型
D．试管苗高度不育
二、实验操作 （一）制备MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般 使用4。C保存配制好的培养基母液来制备
1、配置各种母液
MS固体培养基成分及比例
①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓 缩100倍，常温保存
不同植物的组织培养难度不同
烟枸草杞和愈胡伤萝组卜织的的组芽织诱培导养比较较为难容易
同一种植物的不同组织培养难度不同
同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影 菊响 花实的验组结织果培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
（2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括：
A.有丝分裂
B.分化
C.减数分裂
D.全能性
例题2、（2004年广东模拟题）植物细胞表 现出全能性的必要条件是
A.导入其他植物细胞的基因 B.将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中 C.用适当浓度的秋水仙素处理 D.脱离母体后，给予适宜的营养和适宜的温
度等外界条件
2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择
生产实践中的重要价值。
通过必修课的学习，我们已经了解到大 多绿色开花植物都可以靠种子来繁殖的。那 么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？
扦插
营养繁殖
嫁接
压条
ห้องสมุดไป่ตู้
组织培养
扦插
嫁接 压条
一、基础知识 1、植物的组织培养
（1）细胞的分化
①概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形 态、结构、生理功能上发生稳定性差 异的过程
2.防污染：葡萄糖是微生物最合适的碳源， 而较少利用蔗糖，所以可一定程度上减少微 生物污染。
生物：3.1《菊花的组织培养》课件新人教版选修1
No MS salts
No sign of regeneration from explant at all.
MS salts reduced to 0.47 g. l-1
Some root growth but reduced development of shoots
MS salts increased to 9.52 g. l-1
2018/5/22
Sucrose increased to 5%
Shoots have developed over the surface of the explant, along with roots from the lower surface. The result is comparable with the control medium
2018/5/22
27
四、试剂和器材
1、材料 新鲜胡萝卜茎 2、试剂 MS培养基 10%亚硫酸溶液
2018/5/22
28
四、试剂和器材
MS培养基配制方法
2018/5/22
29
四、试剂和器材
3、仪器 高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养箱 4、玻璃器皿 试剂瓶(50、100、1000ml)、三角瓶(100ml)、 刻度吸管(0.5、1、5、10ml)、培养皿 5、用具 镊子、解剖刀、接种针、记号笔、封口膜
五、操作步骤
培养基配制(I )—母液配制：
2、微量元素母液(100倍液) 分别称取 100 倍用量的微量无机盐，依次溶解 于800ml重蒸水中，加水定溶到1000ml。 3、铁盐母液（100倍液） 称取 100 倍用量的 Na2-EDTA( 乙二胺四乙酸钠 ) 和 FeSO4· 7H2O ，溶于 800ml 重蒸水中，最后定容 到1000ml。
高中生物专题三课题1菊花的组织培养课件新人教版选修
组织培养的应用领域
• 农业：用于大规模繁殖优良植株。 • 医学：用于生产药用植物和药物的提取物。 • 研究：用于研究植物生长和发育的分子机制。
菊花的组织培养步骤
1. 材料准备：收集健康的菊花植株和实验所需的器具。 2. 杀菌消毒：对器具和培养基进行消毒处理。 3. 培养基的制备：制作适合菊花生长的培养基。 4. 组织的提取：从菊花中提取所需的组织。 5. 培养条件控制：控制温度、湿度和光照等条件，促进组织生长。
菊花的组织培养研究案例
菊花花蕊的组织培养实验
通过离体培养菊花的花蕊细胞， 研究花蕊的发育和花色形成的分 子机制。
菊花叶片的组织培养实验
利用组织培养技术来研究菊花叶 片生长的调控机制，以及养分吸 收和光合作用。
菊花茎段的组织培养实验
将菊花的茎段进行离体培养，研 究茎的分化和再生能力，以及植 物生长激素的作用。
高中生物专题Байду номын сангаас课题1菊花的 组织培养课件新人教版选修
什么是组织培养
组织培养是一种通过离体培养组织细胞，以促进细胞生长和发育的技术。
组织培养的原理
1 无菌条件
通过在无菌环境下进行培 养，防止外来微生物的污 染。
2 培养基
使用富含营养物质的培养 基来提供组织细胞所需的 生长因子和养分。
3 激素控制
添加适当浓度的激素来调 节组织的生长和分化。
高中生物 3.1 菊花的组织培养课件 新人教版选修1
D．人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困
难或发芽率低等问题
第十四页，共29页。
学习(xuéxí)·探究区
解析 在植物脱分化的 b 过程中，利用植物生长素、细胞分
裂素等植物激素可以诱导植物细胞脱分化，因此植物在此过
本 课
程中激素发挥重要作用。
时 栏
答案 A
目
开
关
第十五页，共29页。
学习(xuéxí)·探究区
使用顺序
实验结果
本
课
先生长素，后
时 栏
细胞分裂素
有利于细胞(xìbāo)分裂，但细胞(xìbāo)不
目
开 关
先细胞分裂
细胞既分裂也分化
素，后生长素
同时使用
分化频率提高
第十页，共29页。
学习(xuéxí)·探究区
②用量比例的影响
生长素/细胞分裂素比值与结果
本
比值高时
促根分化，抑芽形成
课 时
比值低时
促芽分化，抑根形成
括温度、光照、pH 等，而培养基的成分、外植体的选取和
消毒是否严格等也影响组织培养。
第二十四页，共29页。
自我(zìwǒ)·检测区
2．下列对植物组织培养过程中的脱分化的叙述，正确的是
(C )
本
A．植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞的过程
课
时 栏
B．体内分化的细胞形态、结构和功能发生改变的过程
目
2．一个高度分化的植物细胞经过细胞 分裂 和细胞 分化 ，
最终形成了完整的植物体，这说明已分化的植物细胞具有
全能性 。
第三页，共29页。
知识(zhī shi)·储备 区
3．细胞分化的概念:个体发育中,细胞在形态(xíngtài)、结构和生理功能
高中生物《第三章 第一节 菊花的组织培养》课件 新人教版选修1
①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓 缩100倍，常温保存
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一 般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液
③用母液配制培养基时，需要根据各种母液 的浓缩倍数，计算用量
50
2、配置培养基 ① 配制培养液 配制1LMS培养基，先将称好的琼脂加800ml蒸 馏水，加热使琼脂溶化，然后加入蔗糖30g，取 配制好的大量元素、微量元素、有机物和植物激 素的母液，依次加入，加蒸馏水定容至1000ml ② 调PH ③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此 不必添加植物激素
3.植物激素浓度、使用的先后顺序以及 用量的比例等，会影响实验结果。
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细 胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。 按照不同的顺序使用这两类激素，会得到 不同的实验结果。
当同时使用这两类激素时，两者用量的比例决定着发 育的方向，是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进 芽器官的分化，应除去或降低生长素的浓度，或者调 整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。
生长素/细胞分裂素
高 低
有利于根的分化、抑制芽的形成 有利于芽的分化、抑制根的形成
组织培养与常规繁殖相比优点众多
同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速繁殖法主要 具有以下优点： （1）快速。 采用常规的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生产几株 或几十株，但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万 甚至数百万的小植株。 （2）周年生产。花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行， 因条件可控，所以不受季节限制，可以全年进行连续生 产。而常规的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长 季节进行繁殖。 （3）经济效益高。花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小， 在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。 如按每株1元计算，每年产值上百万元。 （4）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。 所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。
人教版高二生物选修一 3.1菊花的组织培养(课件) (共40张PPT)
用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右
② 酒精处理
放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续 6－7s
③消毒液处理
放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min
实验操作流程
制备MS固体培养基 1.配制母液 2.配制培养基 3.灭菌 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培
接种注意事项 ①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分 数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒 精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种 ②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体 数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－ 4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充 分利用培养基中的营养成分和光照条件 ③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分
3. 环境因素 5. 灭菌技术
回忆：在倒平板和平板划线过程中，哪些步骤 与灭菌有关？ 1.培养基、锥形瓶、所有玻璃器皿 2.接种环、接种针 3.所有操作都要在酒精灯火焰旁进行 4.实验者的双手，实验台面消毒 6.外植体？
外植体消毒 1.选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2.消毒 ①流水冲洗（洗衣粉）
植物激素 蔗糖
使用顺序 先使用生长素，后 使用细胞分裂素 先使用细胞分裂素 后使用生长素 同时使用
实验结果 有利于细胞分裂， 但不利分化 细胞既分裂、也 分化 分化频率高
使用比例 实验结果 生长素/细胞分裂素＞1 有利于根的分化 生长素/细胞分裂素＜1 有利于芽的分化 生长素/细胞分裂素=1 促进愈伤组织的生长
3.关于花药培养产生花粉植株的途径，下列叙 述错误的是 D A．花粉可通过愈伤组织发育成植株 B．花粉可通过胚状体进一步分化成植株 C．主要由培养基中激素的种类及用量决定途径 D．产生胚状体是花药离体培养中特有的途径
② 酒精处理
放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续 6－7s
③消毒液处理
放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min
实验操作流程
制备MS固体培养基 1.配制母液 2.配制培养基 3.灭菌 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培
接种注意事项 ①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分 数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒 精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种 ②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体 数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－ 4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充 分利用培养基中的营养成分和光照条件 ③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分
3. 环境因素 5. 灭菌技术
回忆：在倒平板和平板划线过程中，哪些步骤 与灭菌有关？ 1.培养基、锥形瓶、所有玻璃器皿 2.接种环、接种针 3.所有操作都要在酒精灯火焰旁进行 4.实验者的双手，实验台面消毒 6.外植体？
外植体消毒 1.选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2.消毒 ①流水冲洗（洗衣粉）
植物激素 蔗糖
使用顺序 先使用生长素，后 使用细胞分裂素 先使用细胞分裂素 后使用生长素 同时使用
实验结果 有利于细胞分裂， 但不利分化 细胞既分裂、也 分化 分化频率高
使用比例 实验结果 生长素/细胞分裂素＞1 有利于根的分化 生长素/细胞分裂素＜1 有利于芽的分化 生长素/细胞分裂素=1 促进愈伤组织的生长
3.关于花药培养产生花粉植株的途径，下列叙 述错误的是 D A．花粉可通过愈伤组织发育成植株 B．花粉可通过胚状体进一步分化成植株 C．主要由培养基中激素的种类及用量决定途径 D．产生胚状体是花药离体培养中特有的途径
生物：3-1菊花的组织培养(选修1)(优秀课件)
光照等
植株
植物激素 (3)对营养、环境等条件有相对特殊的要求，一般用 细胞发育
培养基；
、
条件对组织培养也很重要。
[思维激活1] 启动细胞分裂、脱分化、再分化的关键性植物激素是什么？ 提示
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的 关键性激素。
1．植物组织培养的理论基础 (1)植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。 (2)植物细胞全能性表达的条件： ①离体状态；
答案
D
菊花茎段培养的实验操作与评价
1．制备MS固体培养基 可分为配制 用的方法是 2．外植体消毒
各种母液
、配制 高压蒸汽灭菌 。
培养基
、灭菌。其中，灭菌常
70%的酒精
将外植体用流水冲净后，先用 消毒，再用无菌 0.1%的氯化汞溶液 水清洗，然后用 消毒，最后再用无菌水 清洗。
处理措施 将所污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压 蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清理
【巩固2】 生物工程的研究成果已经广泛应用于各个领域，目前科学家利 用植物的茎尖或叶片、茎段等，在无菌条件下，培养在玻璃器皿中人工配 制的培养基上，使之发育成完整的植株。下图是运用该技术培养兰花植株 的示意图。下列关于这种生物工程技术的叙述，错误的是 ( )。
②无菌操作(防止杂菌污染)；
③适宜物质的诱导和调节(激素主要是生长素、细胞分裂素等)。
2．植物组织培养的过程及影响因素 (1)植物组织培养的一般过程分析(见下表) 过程 形成体特点 条件
过程名称 脱分化
再分化
由外植体形 排列疏松、高度液泡 ①离体 成愈伤组织 化的薄壁细胞团 ②提供营养物质(有 机物、无机物) 由愈伤组织 有根、芽或有生根发 ③提供激素 形成幼苗或 芽的能力 胚状体结构 ④提供其他适宜条 件
植株
植物激素 (3)对营养、环境等条件有相对特殊的要求，一般用 细胞发育
培养基；
、
条件对组织培养也很重要。
[思维激活1] 启动细胞分裂、脱分化、再分化的关键性植物激素是什么？ 提示
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的 关键性激素。
1．植物组织培养的理论基础 (1)植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。 (2)植物细胞全能性表达的条件： ①离体状态；
答案
D
菊花茎段培养的实验操作与评价
1．制备MS固体培养基 可分为配制 用的方法是 2．外植体消毒
各种母液
、配制 高压蒸汽灭菌 。
培养基
、灭菌。其中，灭菌常
70%的酒精
将外植体用流水冲净后，先用 消毒，再用无菌 0.1%的氯化汞溶液 水清洗，然后用 消毒，最后再用无菌水 清洗。
处理措施 将所污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压 蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清理
【巩固2】 生物工程的研究成果已经广泛应用于各个领域，目前科学家利 用植物的茎尖或叶片、茎段等，在无菌条件下，培养在玻璃器皿中人工配 制的培养基上，使之发育成完整的植株。下图是运用该技术培养兰花植株 的示意图。下列关于这种生物工程技术的叙述，错误的是 ( )。
②无菌操作(防止杂菌污染)；
③适宜物质的诱导和调节(激素主要是生长素、细胞分裂素等)。
2．植物组织培养的过程及影响因素 (1)植物组织培养的一般过程分析(见下表) 过程 形成体特点 条件
过程名称 脱分化
再分化
由外植体形 排列疏松、高度液泡 ①离体 成愈伤组织 化的薄壁细胞团 ②提供营养物质(有 机物、无机物) 由愈伤组织 有根、芽或有生根发 ③提供激素 形成幼苗或 芽的能力 胚状体结构 ④提供其他适宜条 件
人教版高二生物选修一教学课件《专题3课题1菊花的组织培养》(共29张PPT)
生长素类：2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、 吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、 吲哚丁酸（IBA）
细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤 （ 6－BA）、玉米素（ZT）
赤霉素类： 赤霉酸（GA3）
②生长素和细胞分裂素作用
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
细胞的分化 脱分化 再分化
愈伤组织: 细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、 成无定形状态的薄壁细胞
人参的愈伤组织
2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影响实验结果
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
通过必修课的学习，我们已经了解到大 多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么， 有没有不用种子来培育植物的方法呢？
扦插
营养繁殖
嫁接
压条
组织培养
专题3 植物组织培养技术
课题一 菊花的组织培养
一、基础知识
1、植物的组织培养的过程
1）植物组织培养的原理 植物细胞具有全能性
①定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的 潜能
（三）接种 1、接种室消毒 用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁 尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后， 都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
（四）培养
1、愈伤组织的培养
从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2 周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白 色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温 箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈 伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽， 必须更换培养基，进行继代培养
细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤 （ 6－BA）、玉米素（ZT）
赤霉素类： 赤霉酸（GA3）
②生长素和细胞分裂素作用
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
细胞的分化 脱分化 再分化
愈伤组织: 细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、 成无定形状态的薄壁细胞
人参的愈伤组织
2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影响实验结果
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
通过必修课的学习，我们已经了解到大 多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么， 有没有不用种子来培育植物的方法呢？
扦插
营养繁殖
嫁接
压条
组织培养
专题3 植物组织培养技术
课题一 菊花的组织培养
一、基础知识
1、植物的组织培养的过程
1）植物组织培养的原理 植物细胞具有全能性
①定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的 潜能
（三）接种 1、接种室消毒 用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁 尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后， 都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
（四）培养
1、愈伤组织的培养
从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2 周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白 色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温 箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈 伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽， 必须更换培养基，进行继代培养
【人教版】生物选修一：3.1《菊花的组织培养》ppt课件
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《菊花的组织培养》课件4(新人教版选修1)
基础知识
• 植物组织培养的基本过程
选取植物组织 形成愈伤组织
长出丛芽
移栽
生根
• 影响植物组织培养的因素
植物材料的选择、适宜的培养基、植 物激素中生长素和细胞分裂素的使用 顺序、pH、温度以及光照等条件都会 影响植物组织培养的效果。
附图：生长素和细胞分裂素使用顺 序和实验结果
科书 生物选修1 生物技术实践
专题3 植物的组织培养技术
课题1 菊花的组织培养
课题背景
• 科学研究表明，当植物细胞脱离了原来所在 植物体的器官或组织而处于离体状态时，在 一定的营养物质、激素和其他外界条件的作 用下，就可能表现出全能性，发育成完整的 植株。
• 科学家用植物组织培养的方法，已经把许多 种植物的离体的组织或细胞，培养成了完整 的植物体。
• 两周后观察茎段的分化情况，填好结果记 录表，并及时分析结果。
• 幼苗移栽到露地后，能够正常生长吗？
课题延伸
查阅资料，探究生长素和细胞分裂素的使用 比例对植物组织培养的影响。
先使用细胞分裂素， 后使用生长素
同时使用
实验结果 有利于细胞分裂，但细 胞不分化 细胞既分裂也分化
分化频率提高
实验操作
• 制备MS固体培养基
制备各种母液 配制培养基 灭菌
• 外植体消毒
选取生长旺盛的嫩枝，冲洗干净。用 无菌水吸干外植体表面的水分，放入 体积分数70%的酒精中摇动2—3次， 持续6—7s，立即将外植体取出，在 无菌水中清洗。吸干表面水分，放入 质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1—2 min。取出后，在无菌水中至少清洗3 次，漂洗消毒液。
• 栽培
将幼苗移栽后， 每天观察并记录 幼苗的生长情况， 适时胶水、施肥， 直至开花
人教版高中生物 选修1专题3课题1菊花的组织培养(课件) (共18张PPT)
微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提 供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主 要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。微生物培养基以 有机营养为主。MS培养基则需提供大量无机营养。
3.不同植物激素浓度、使用顺序和使用量
使用顺序
先生长素，后细 胞分裂素 先细胞分裂素后 生长素 同时使用
例如：菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 2.培养基的配制(MS培养基)
大量元素： N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素： B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
有机物： 甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素： 生长素、细胞分裂素、赤霉素等
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基 的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？
愈伤组织继续进行培养重新 分化成根或芽等器官的过程。
愈伤组织：
丛芽
（二）影响植物组织培养的因素
1.外植体的选取 ① 不同植物的组织培养难度 例如：烟草和胡萝卜的组织培养较容易，枸杞愈伤组织的芽诱导较难。 ②同一植物材料、材料的年龄、保存时间的长短 一般选择植物的幼嫩部分（生命力旺盛，分裂分化能力强；含有的 病毒少），比如茎尖、根尖、幼嫩的叶片等； 保存时间越短，材料生命力越旺盛；保存时间越长，越容易受到污染。
一、基础知识
(一)植物的组织培养的基本过程 1.植物组织培养的原理 （1）细胞分化： 个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 根本原因： 在特定的时间和空间条件下，基因的选择性表达。
（2）细胞全能性： 生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。
植物细胞表现全能性条件：
离体、营养物质、激素和其他外界条件。
3.不同植物激素浓度、使用顺序和使用量
使用顺序
先生长素，后细 胞分裂素 先细胞分裂素后 生长素 同时使用
例如：菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 2.培养基的配制(MS培养基)
大量元素： N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素： B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
有机物： 甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素： 生长素、细胞分裂素、赤霉素等
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基 的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？
愈伤组织继续进行培养重新 分化成根或芽等器官的过程。
愈伤组织：
丛芽
（二）影响植物组织培养的因素
1.外植体的选取 ① 不同植物的组织培养难度 例如：烟草和胡萝卜的组织培养较容易，枸杞愈伤组织的芽诱导较难。 ②同一植物材料、材料的年龄、保存时间的长短 一般选择植物的幼嫩部分（生命力旺盛，分裂分化能力强；含有的 病毒少），比如茎尖、根尖、幼嫩的叶片等； 保存时间越短，材料生命力越旺盛；保存时间越长，越容易受到污染。
一、基础知识
(一)植物的组织培养的基本过程 1.植物组织培养的原理 （1）细胞分化： 个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 根本原因： 在特定的时间和空间条件下，基因的选择性表达。
（2）细胞全能性： 生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。
植物细胞表现全能性条件：
离体、营养物质、激素和其他外界条件。
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本课题内容小结
细胞分化 植物体的 组织培养 细胞全能性 组织培养过程 营养 影响培养
实验操作
MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培
作业：P36
1、在植物组织培养过程中，为什么要进行一系 列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。 2、在选取菊花茎段是，为什么要选取生长旺盛 的嫩枝？
·
植物组织培养过程示意图
2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？ 没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。
3、结合录像外植体灭菌与接种操作，谈谈组织培养污染 的主要途径及怎样预防污染？
1、外植体带菌
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
4、环境不清洁
污染的预防措施
（一）防止外植体带菌
菊花的组织培养
通过必修课的学习，我们已经了解到大 多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么， 有没有不用种子来培育植物的方法呢？
扦插
营养繁殖
嫁接
压条
组织培养
嫁接 扦插 压条
一、植物组织培养的概念
指植物的离体部分（包括任何器官、 组织、细胞或原生质体），在人工控制的 培养基及环境条件（温度及光照）下，得 以生长和分化成完整植株的一种无菌培养 技术。 又称：植物离体培养
思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？
生长素
/
细胞分裂素
高
利于根和愈伤组织的形成
适中 利于根芽的分化
5、pH、温度、光照（菊花组培）
pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h
6、消毒
在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境
组织培养与常规繁殖相比优点众多
同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速繁殖法主要 具有以下优点： （1）快速 采用常规的方法如分株法，一棵花卉一年一 般只能生产几株或几十株，但用组织培养的方法则每年 可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。 （2）周年生产 花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行， 因条件可控，所以不受季节限制，可以全年进行连续生 产。而常规的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长 季节进行繁殖。 （3）经济效益高 花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小， 在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。 如按每株1元计算，每年产值上百万元。 （4）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因所 以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。
（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌
（三）操作人员严格遵守无菌操作规程
（四）保证接种与培养环境清洁
二、植物组织培养的基本过程
离体器官、 脱分化 再分化 愈伤组织 根、芽 组织或细胞
植物体
愈伤组织
三、影响植物组织培养的因素：
1、外植体的选取
未开花植物的茎上 不同植物的组织培养难度不同 部新萌生的侧枝
结果分析与评价
（一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格
课题延伸（略）
练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、 抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物 组织培养的培养基同样适合于某些微生物的 生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养 物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前 功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养 的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况 好，容易诱导脱分化和再分化。
3、不同植物激素使用顺序
使用顺序 先生长素， 后细胞分裂素 先细胞分裂素， 后生长素 同时使用 实验结果 有利于细胞分裂但不分化 细胞既分裂也分化 分化频率提高
4、不同植物激素使用量
生长素/细胞分裂素比值
比值高时 比值低时 比值适中
结果
促根分化， 抑芽形成 促芽分化， 抑根形成 促进愈伤组织生长
植物组织培养原理：
植物细胞的全能性
概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有 发育成完整个体的潜能。 原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种 所特有的全套遗传物质
二、植物组织培养的基本过程
阅读32页解决下列问题：
基因的选择性表达
1. 2. 3. 4.
什么叫分化？其实质是什么? 什么叫脱（去）分化、再分化？ 愈伤组织的细胞有什么特点？ 如何控制细胞的脱分化与去分化？
同一种植物的不同组织培养难度不同
2、培养基的配制(MS培养基)
大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S
微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
MS固体培养基成分及比例
阅读课文，思考以下问题
1. 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？
四、实验操作
制备MS固 体培养基
配制各种母液 配制培养基 灭毒
外植体消毒
接种
冲洗—酒精—无菌水冲洗— 氯化汞—无菌水冲洗至少三 次之上
培
养
栽
培
移
栽
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？
1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不 同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包 括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 2、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的 适宜条件是什么？ 组织的脱分化及愈伤组织的再分化。 植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分 化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间 的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。