过碘酸雪夫AB-PAS染色试剂盒
过碘酸雪夫反应(PAS)显示糖元和其它多糖物质一、试剂配制1过碘酸
部分细胞或组织小块,以染料溶液浸染,染料被选择固定在活细胞的某种结构上而显色。
活体染料之所以能固定、堆积在细胞内某些特殊的部分,主要是染料的“电化学”特
性起重要作用。碱性染料的胶粒表面带阳离子,酸性染料的胶粒表面带有阴离子,而被染的
部分本身也是具有阴离子或阳离子,这样,它们彼此之间就发生了吸引作用。但不是任何染
实验五 线粒体和液泡系的超活染色与观察
实验目的
一、观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布。
二、学习一些细胞器的超活染色技术。
实验原理
活体染色是指生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种染色方法。它的目的是
显示生活细胞内的某些结构,而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起
实验用品
一、器材
显微镜、恒温水浴锅、触剖盘、剪刀、镊子、双面刀片、载玻片、凹
面载玻片、盖玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。
二、试剂
1.Ringer 溶液
氯化钠
0.85g(变温动物用 0.65g)
氯化钾
0.25g
氯化钙
0.03g
蒸馏水
100ml
2.10%、1/3000 中性红溶液
称取 0.5g 中性红溶于 50ml Ringer 液,稍加热(30-40℃)使之很快溶解,用滤纸过滤,装
一、材料 1.Carnoy 液固定的鼠肝石蜡切片。 2.Carnoy 液固定的洋葱根尖或蚕虫根尖切片。 二、试剂 1.Carnoy 固定液 3 份 95%酒精加入 1 分冰醋酸。 2. 1mol/L HCI。 取比重 1.18 的浓 HCI 82.5ml,加水至 100ml。 3.Schiff 试剂 先将 200ml 蒸馏水煮沸,由火上取下,加入碱性品红 1g,充分搅拌,有 助于溶解。待溶液冷到 50℃时,过滤到磨口棕色试剂瓶中。加入 1 mol/L HCI 20ml,冷却到 25℃时加入 1g偏亚硫酸钾(K2S2O2)或偏亚硫酸钠(NaS2O5)充分振荡后盖紧瓶塞,放于暗处 过夜。次日取出,呈现淡黄色或近于无色,加中性活性炭一勺,约 0.5g,剧烈振荡 1min, 过滤后即得无色品红。 无色品红配成后须塞紧瓶塞。外包黑布或黑纸,贮存在冰箱或黑暗低曙处。 4.亚硫酸水溶液(漂白液) 10%偏重亚硫酸钠水溶液 5ml,蒸馏水 100ml,1 mol/L HCI5ml,摇匀,塞紧瓶塞。此 溶液在使用前配制,否则会因 SO2 的逸出而失效。 5. 5%三氯醋酸 6. 0.5%固绿酒精溶液(95%酒精溶解)。
特殊染色:阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色实验案例
特殊染色:阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色实验案例1、临床应用用于胃标本组织切片的胃粘膜上皮肠化生分类、糖原和粘液物质形态观察前的染色。
主要应用于胃粘膜上皮化生分类。
在胃粘膜活检时,判别肠化生的类型较之受累程度可能更为重要。
在判别完全或不完全性肠化生时,一般的HE染色即可辩认,但判别是大肠型或小肠型,必须采用AB、PAS及HID粘液的组化染色。
阿利新蓝染色液(PH2.5)用于显示酸性粘液物质,主要应用于粘液性疾病的鉴别诊断。
PAS过碘酸雪夫氏染色液用于糖原和黏液物质染色,主要应用于鉴别细胞内的空泡状变性及心肌病变和心血管方面的疾病,还可用于鉴别观察缺血缺氧早期心肌坏死或梗死区的糖原和糖原累积疾病,糖尿病器官,某些肿瘤的(如:肝细胞瘤、胆管瘤、横纹肌等)诊断及研究。
主要用于糖元、中性粘液的染色。
2、适用范围适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片、火棉胶切片、树脂切片等染色3、原理方法阿利新蓝-过碘酸雪夫氏套染法3、PAS染色液A试剂(高碘酸) B试剂(Schiff氏试剂)4、染色方法切片脱蜡水洗后:1)AB染色液(阿利新蓝染色液PH2.5)染色5~10分钟,水洗;2)PAS染色液A试剂(高碘酸)染色5分钟,蒸馏水洗;3)PAS染色液B试剂(Schiff氏试剂)染色5~10分钟,水洗;4)脱水、透明、封固、镜检。
结果参考:硫酸化粘液呈黑色,酸性粘液呈兰色,中性粘液呈红色。
5、AB染色液(阿利新蓝染色液PH2.5)做酸性粘液物质染色时操作说明染色方法:切片脱蜡水洗后:1)阿利新蓝染色液染色5~10分钟,水洗至无染料脱落;2)脱水、透明、封固、镜检。
结果参考:酸性粘液物质呈蓝色。
6、PAS染色液(过碘酸雪夫氏染色液)做糖元、中性粘液染色时操作说明染色方法:切片脱蜡水洗后:1)高碘酸染色5分钟,蒸馏水洗;2)Schiff氏试剂染色5~10分钟,水洗;3)脱水、透明、封固、镜检。
结果参考:糖元、中性粘液物质呈红色。
AB-PAS染色
AB-PAS染色某些细胞如胃肠的杯状细胞能分泌粘稠的分泌物,含有大量的糖称粘多糖。
中性粘液物质含有氨基己糖和游离的己糖基,酸性粘液物质也含有氨基己糖并含有各种酸根。
此方法先染阿利新蓝染酸性粘液物质为蓝色,并阻断酸性粘液物质的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生产二醛而着红色。
只有中性粘液物质的乙二醇基被高碘酸生成二醛后与雪夫试剂中的无色品红作用生成红紫色复合物。
染色实验步骤:1、切片脱蜡至水。
2、阿利新蓝染液浸染或滴染5-10min。
稍水洗。
3、0.5%高碘酸水溶液氧化5-10min。
4、流水冲洗数分钟蒸馏水换洗两次。
5、雪夫试剂暗处浸染或滴染15~30min。
6、流水冲洗5-10min。
7、苏木素复染核1min左右,盐酸酒精分化,氨水返蓝。
8、95%酒精I 5min-95%酒精II 5min-无水乙醇I 5min-无水乙醇II 5min脱水,二甲苯透明中性树胶封固。
(一定要湿封,在组织上的二甲苯未挥发完组织变干之前封片,否则易出现黑色的结晶状物即空气结晶)。
染色结果:糖原、中性粘液物质呈红色,酸性粘液物质呈蓝色,混合性粘液物质呈蓝紫色或紫蓝色,胞核呈蓝色。
1、高碘酸溶液为透明溶液,长时间染色如果没有带入杂质的话此溶液一直是透明的,所以无法从常规的颜色辨别高碘酸的好坏,只有定期更换,根据标本的多少1~2月更换一次。
2、雪夫试剂要放入冰箱保存,临用前半小时取出恢复至室温,用后又倒回原瓶内放冰箱保存;雪夫试剂出现淡红色就不能继续使用了。
3、如果没有要求,可以不染核,要染核的话染色一定要浅。
因为酸性粘液物质着蓝色,如果核蓝色太深对比不明显。
4、一定要先染阿利新蓝后染PAS,否则蓝色着染少而浅结果不准确,原因是酸性粘液物质的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生产二醛与雪夫试剂中的无色品红作用生成红紫色复合物后再难跟阿利新蓝结合。
糖原PAS染色试剂盒使用方法及注意事项
自备材料:
1、 10%福尔马林固定液
2、蒸馏水
3、乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、 常规固定,常采用 10%的福尔马林,常规脱水包埋。
7、 自来水冲洗 10min。
8、 样本置于苏木素染色液中,染细胞核 1~2min。
9、 酸性乙醇分化液分化 2~5s。
10、 自来水冲洗 10~15min 后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。
11、 逐级常规乙醇脱水。 二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果: PAS 反应阳性物质 细胞核 细胞质
红色或紫红色 蓝色 深浅不一的红色
4×100ml 100ml 100ml 100ml 100ml
Storage 4℃ 避光 4℃ 避光 RT 避光
RT
产品说明:
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus 在 1946 年最先使用高碘酸-雪夫技术显 示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏 液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
5、 在过碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织的 类别等决定。
6、 本染色液常用于常规组织切片染色,对于真菌、细胞、极其薄的切片,建议采购糖 原 PAS 染色试剂盒(细胞真菌专用), 因为其过碘酸溶液和苏木素溶液浓度更低,不 宜过染。
7、 冷冻切片染色时间尽量要短。
备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用时间的长 短。 阴性对照(可选):
过碘酸-雪夫(PAS)染色
过碘酸-雪夫(PAS)染色实验原理胞浆内存在糖原或多糖类物质(如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等)中的乙二醇基(CHOH-CHOH)经过碘酸(periodicacid)氧化,转变为二醛基(CHO-CHO),与雪夫(Schiff)试剂中的无色品红结合,形成紫红色染料而沉积于细胞内多糖所在处。
该反应称为过碘酸-雪夫(PAS)阳性反应,以前也称为糖原染色。
实验方法材料:1.高碘酸氧化液:HIO4·2H2O1g,蒸馏水加至100ml。
此液溶解后保存于冰箱中待用。
2.Schiff试剂:将1g碱性品红溶于200ml煮沸的蒸馏水中。
摇荡5分钟,冷却至600C左右,过滤,并向滤液中入1mol/LHCl20ml,混匀。
冷至 250C时,加2g偏重亚硫酸钠(或钾)(Na2S2O5)。
将此液置带塞的棕色玻璃瓶中,放暗处24小时。
加1g活性碳,摇动1分钟,滤纸过滤。
保存于冰箱中。
3.亚硫酸液100g/L偏重亚硫酸钠6ml1mol/L盐酸5ml蒸馏水100ml每次用前新鲜配置。
4.20g/L甲绿甲绿2g蒸馏水加至100ml5.淀粉酶嚼石蜡刺激分泌唾液离心取上清液,内含淀粉酶,将麦芽糖淀粉酶0.1~1.0g溶于0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0)100ml中。
方法:1.固定新鲜干燥的涂片用品5%乙醇固定10min,蒸馏水冲洗,待干;2.如涂片需要消化,可加唾液或麦芽糖淀酶,置室温消化60min,然后用蒸馏水冲洗;3.10g/L高碘酸氧化15~20min,蒸馏水冲洗,待干;4.置雪夫染液中室温染色30~60min;5.用亚硫酸溶液冲洗3次后,再用自来水冲洗2~3min,待干;6.20g/L甲绿复染10~20min;7.水洗,待干,镜检。
实验结果计算(1)中性粒细胞糖原含量参考标准:(-)胞质无颗粒(+)胞质呈淡红色,无颗粒(++)胞质呈红色,有少量颗粒(+++)胞质呈暗红色,颗粒较密(++++)胞质呈紫红色,颗粒极密(2)淋巴细胞系:大多数淋巴细胞呈阴性反应,少数为(+)的阳性反应。
钙盐染色液配方及使用方法
钙盐染色液,钙盐染色产品编码产品名称产品规格保存条件北京华越洋5NF061 钙盐染色液(茜素红S法) 2×50ml 室温,避光,6个月北京华越洋5NF062 钙盐染色液(改良茜素红S法)3×50ml 4℃,避光,6个月北京华越洋5NF063 钙盐染色液(硝酸银法) 2×50ml 4℃,避光,6个月用途:钙盐染色注意事项:钙沉积物成橘红色,染色时间取决于钙的含量,检测少量钙时更有效。
复染液为固绿。
MTT溶液过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色试剂盒过碘酸-雪夫(快速)染色试剂盒糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒Bennhold刚果红染色试剂盒钙盐染色液(FeH)染色试剂盒Gordon-Sweets银氨溶液100ml 结缔染色网状纤维染色,可区分胶原纤维网状纤维染色试剂盒(改良Gomori氨银法) 5×100ml 结缔染色网状纤维染色,可区分胶原纤维网状纤维染色试剂盒(改良Gomori氨银法) 5×50mlGomori氨银溶液500ml 结缔染色网状纤维染色,可区分胶原纤维羟胺溶液(1.5mol/L,pH8.5) 100ml 135 室温,3个月细胞其他青霉素-链霉素混合溶液(100×双抗) 100ml 68 —20℃,12个月抗生素青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗) 100ml 195 —20℃,12个月抗生素秋水仙碱溶液(Colchicine,10mg/ml) 5ml 143 4℃,避光,6个月药物去离子甲酰胺100ml 120 4℃,避光,12个月RNA溶液任氏液500ml 128 4℃,3个月细胞其他溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml) 5ml 90 —20℃,12个月核酸提取鞣酸/单宁酸水溶液(5%) 100ml 68 室温,12个月结缔染色乳酸酚棉蓝染色液100ml 180 室温,避光,12个月微生物染色乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法) 2×50ml 375 4℃,避光,6个月酶类染色乳酸脱氢酶染色液(M型,四唑盐法) 2×50ml 375 4℃,避光,6个月酶类染色乳酸脱氢酶染色液(四唑盐法) 2×50ml 360 4℃,避光,6个月酶类染色乳酸银显影液100ml 105 室温,避光,6个月免疫组化瑞氏-姬姆萨复合染色液2×100ml 188 室温,12个月微生物染色瑞氏-姬姆萨复合染色液2×500ml 630 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain) 2×50ml 75 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain,) 2×100ml 113 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain,) 2×500ml 390 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain,即用型) 100ml 105 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain,即用型) 500ml 375 室温,12个月微生物染色弱磷酸盐缓冲液(LoPBS,pH7.0) 100ml 120 4℃,12个月蛋白其他噻嗪红染色液(0.1%) 100ml 90 室温,避光,12个月染色其他噻嗪红染色液(0.2%) 100ml 105 室温,避光,12个月染色其他三磷酸腺苷溶液(ATP,10mmol/L) 10ml 75 —20℃,12个月PCR相关三氯化铁水溶液(10%) 100ml 53 室温,12个月常规其他三羟甲基甘氨酸加样缓冲液(2×) 10ml 75 4℃,6个月蛋白电泳沙黄/藏红T水溶液(2%) 100ml 83 室温,避光,6个月微生物染色山梨醇-磷酸盐溶液(1.2mol/L,pH7.5) 100ml 68 室温,6个月细胞组分分离山梨醇-磷酸盐溶液(1.2mol/L,pH7.5,无菌) 100ml 128 室温,6个月细胞组分分离山梨醇溶液(1.1mol/L,无菌) 100ml 113 室温,6个月细胞组分分离山梨醇溶液(1mol/L) 100ml 60 室温,6个月细胞组分分离山梨醇溶液(1mol/L,无菌) 100ml 105 室温,6个月细胞组分分离神经HRP示踪显色液(DAB法) 50T 165 4℃,避光,6个月神经染色神经HRP示踪显色液(TMB法) 50T 165 4℃,避光,6个月神经染色生理盐水(1×NS,无菌) 500ml 45 室温,12个月常规其他生理盐水(10×NS,无菌) 500ml 53 室温,12个月常规其他石碳酸复红染色液100ml 135 室温,避光,18个月微生物染色双链DNA变性缓冲液100ml 75 室温,12个月核酸杂交双缩脲法蛋白定量试剂盒500T 150 4℃,12个月蛋白检测双缩脲法蛋白定量试剂盒1000T 255 4℃,12个月蛋白检测双缩脲总蛋白试剂100ml 75 4℃,12个月蛋白检测水饱和酚(Phenol Water) 100ml 90 4℃,避光,3个月核酸提取顺丁稀二酸缓冲液(MAB,pH7.5) 500ml 90 室温,36个月核酸电泳苏丹Ⅲ酒精饱和溶液100ml 120 室温,避光,12个月脂类染色苏丹Ⅲ脂肪染色液3×50ml 240 室温,避光,12个月脂类染色苏丹Ⅳ染色液3×50ml 225 4℃,避光,12个月脂类染色苏丹Ⅳ染色液-A液100ml 120 室温,避光,12个月脂类染色酸性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 2×50ml 885 4℃,避光,6个月酶类染色酸性磷酸酶染色液(硝酸铅法) 2×50ml 300 4℃,避光,6个月酶类染色酸性乙醇分化液(0.5%) 500ml 75 室温,12个月染色其他。
AB-PAS染色实验报告
AB-PAS染色实验报告一、实验器材及试剂1、实验器材名称厂家型号脱水机武汉俊杰电子有限公司JJ-12J包埋机武汉俊杰电子有限公司JB-P5病理切片机上海徕卡仪器有限公司RM2016冻台武汉俊杰电子有限公司JB-L5组织摊片机浙江省金华市科迪仪器设备有限公司KD-P烤箱天津市莱玻瑞仪器设备有限公司GFL-230载玻片Servicebio正置光学显微镜日本尼康NIKON ECLIPSE E100成像系统日本尼康NIKON DS-U32、主要实验试剂试剂名称厂家货号无水乙醇国药集团化学试剂有限公司100092683二甲苯国药集团化学试剂有限公司10023418AB-PAS染液套装Servicebio G1049苏木素染液servicebio G1004分化液servicebio G1005-3返蓝液servicebio G1005-4中性树胶国药集团化学试剂有限公司10004160二、实验步骤1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、阿利新蓝染色:切片入阿利新蓝染液中染色5min,自来水洗2min;3、高碘酸染色:切片入高碘酸染液中15min,自来水洗,蒸馏水洗两遍;4、雪弗染色:切片入雪弗染液避光染色30min,,流水冲洗5min;5、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。
6、脱水封片:切片依次入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
7、显微镜镜检,图像采集分析。
三、结果判读:酸性粘液物质呈蓝色,糖原,中性粘液物质呈紫红色,混合黏液物质呈紫蓝色或蓝紫色。
四、注意事项:1、染液配制的量需要根据实际情况来定,配制过多易造成浪费。
2、染液一定要避光保存,并且实验过程中的每一步操作都要求避光。
PAS染色试剂盒说明书
PAS染色试剂盒说明书货号:G1280规格:2×50ml/2×100ml保存:2-8℃保存,避免光照,复检期为6个月。
试剂盒组成:名称2×50ml2×100ml Storage氧化剂50ml100ml4℃,避光Schiff染液50ml100ml4℃,避光产品说明:PAS染液(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上主要用来检测组织中的糖原或其他多糖物质。
氧化剂是高碘酸,能将多糖分子中相邻的二醇基氧化成二醛基,醛基能与希夫试剂(Schiff reagent)反应生成红色不溶性复合物。
操作说明:(仅供参考)1、染色步骤1)切片脱蜡至水;2)氧化剂处理5-10分钟;3)流水冲洗5分钟,擦干切片上多余水分;4)滴加Schiff染液,染色10-15分钟;5)流水清洗5-10分钟;6)Mayer苏木素复染;7)分化、水洗;返蓝、水洗;8)常规脱水,二甲苯透明;9)中性树胶封片。
2、显微镜观察结果:糖原、中性粘液物质呈红色,细胞核呈蓝色。
第1页,共2页注意事项:1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2.试剂均应低温保存,临用前半小时取出恢复室温。
3.氧化剂处理温度以不高于20℃为宜,室温高时,处理时间可适当缩短。
Schiff染液染色时间可随温度调整,室温高可减少染色时间,冬季室温低,可延长至20分钟左右。
4.第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
相关产品:G1010姬姆萨染色液G1040瑞氏染色液G1120HE(苏木素-伊红)染色试剂G1080Mayer'苏木素染液G1260饱和油红O染色液G1220甲苯胺蓝染色液第2页,共2页。
实验四 过碘酸雪夫反应
其它细胞均呈阴性。
(2)判断标准及分级: (-) 0分:胞浆呈淡红色,无任何棕黑色颗粒。 (+) 1分:胞浆呈均匀浅色,无颗粒或有少量棕黑色颗粒,但不超过胞浆总面积的1/4。
(++) 2分:全部胞浆呈均匀棕黑色或出现较粗的黑色颗粒,不超过胞浆1/2。 (+++) 3分:胞浆中已基本充满棕黑色颗粒,但密度较低。 (++++) 4分:全部胞浆充满粗大棕黑色颗粒而呈深黑色甚至掩盖其胞核。 (3)计算积分值:油镜下计数100个中性杆状核、分叶核粒细胞,分别记录其分级
(+++):有很多的铁颗粒、小珠和少数小块状。
(++++):有极多铁颗粒、小珠,有很多的小块,密集成堆。
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4.用蒸馏水冲洗后用2g/L核固红-硫酸铝溶液复染10~15min。
5.流水冲洗、待干、镜检。
6.结果
(1)在红色背景下铁粒呈蓝绿色。
(2)细胞外铁:用低倍镜观察涂片,特别是涂片尾部和髓粒附近,注意翠蓝色颗粒的 存在,可分五级标准。
(-):无颗粒所见。
(+):有少数铁颗粒或偶见铁小珠。
(++):有较多的铁颗粒和小珠。
[实验器材和试剂]
1. 甲醇 2.200g/L亚铁氰化钾溶液 3.浓盐酸 4. 2g/L核固红-硫酸铝溶液
8过碘酸-雪夫(PAS)染色液(化学染色法)
红河州第一人民医院检验科质量管理体系文件 SOP文件1.检验原理血细胞内含乙二醇的糖类物质(PAS)能被过碘酸氧化,形成双基醛类物质。
后者与无色品红结合,形成紫红色沉淀物,沉淀物的显色深浅与乙二醛的含量成正比。
2.主要组成成分2.1、PAS固定液:2.5ml×5(含甲醇等)2.2、PASI液:2.0ml×5(含过碘酸等)2.3、PASII液:30ml×5(含碱性品红、偏重亚硫酸钠等)2.4、苏木素复染液:2.5ml×5(含苏木精等)2.5、说明书:1份注:不同批号试剂盒中PASS固定液,苏木素复染液可以互换。
2.储存条件及有效期有效期:一年(十二个月)。
储存条件:本试剂盒应储存于2~8℃低温环境。
4.检验方法4.1、涂片滴加固定液5-8滴盖满血膜即可。
5分钟水洗待干。
4.2、滴加I液十分钟水洗待干。
4.3、置入II液内室温(20-25℃为宜)暗处放置30分钟,流水冲4.4、洗数分钟。
4.5、苏木素复染1-2分钟,水洗待干,镜检。
5.临床意义用于营养性巨幼细胞贫血与红(白)血病的鉴别,前者的正常红细胞及有核红细胞常为阴性,而后者可呈强阳性反应.用于鉴别急性淋巴细胞性白血病与急性非淋巴细胞性白血病,前者的原淋巴细胞和幼稚淋巴细胞可见大块红色物质.后者的原始阶段细胞常为阴性.高雪氏细胞呈强阳性,而尼曼匹克氏细胞呈微弱阳9.49g溶解于1L水中80ml,再加0.07MKH2PO4(即9.08g溶解于1L水中)20ml,混匀.6.注意事项6.1、本产品仅供体外诊断使用。
6.2、样本和使用器材应避免带醛基和还原性的物质污染,以免出现假阳性。
6.3、滴加I液后水洗应充分,然后待涂片完全干燥后才能置入II液内。
6.4、涂片染色后,复染时可采用血膜纵向一半复染,另一半勿复染,以利于弱阳性的检出。
6.5、PAS II液保存不当或时间过久将会变红,并使阳性强度降低,且不能反复使用。
亚历山大染色液配制与使用
亚历山大染色液
编码名称规格保存条件
北京华越洋QC061亚历山大染色液
100ml
室温,避光,12个
月
北京华越洋QC062亚历山大染色液
50ml
室温,避光,12个
月
亚历山大染色液是植物花粉染料,常用于细胞核染色,对于植物花粉,染色后成紫红色。
主要由孔雀绿,酸性品红,苯酚等组成,显酸性,是较好的花粉粒染色剂。
自备材料:1载玻片,盖玻片
2光学显微镜
亚历山大染色液操作步骤:
1取新鲜花朵,去除花瓣和雌蕊
2将花粉物质置于载玻片,滴加2-3滴染色液。
3充分混合,立即盖上盖玻片染色5-10h。
4吸去多余液体,显微镜下观察。
注意:1染色后立即显微镜下观察。
四组化痰类方剂对LPS_致小鼠急性肺损伤的作用研究
Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2023, 13(5), 8675-8681 Published Online May 2023 in Hans. https:///journal/acm https:///10.12677/acm.2023.1351213四组化痰类方剂对LPS 致小鼠急性肺损伤的 作用研究兰爱琳1,2,张 颖1,2,汪思齐1,2,3,楼迪栋1,2,3*1贵州省法医中药毒理学特色重点实验室,贵州 贵阳 2贵州中医药大学司法鉴定所,贵州 贵阳3贵州中医药大学基础医学院法医学教研室,贵州 贵阳收稿日期:2023年4月28日;录用日期:2023年5月21日;发布日期:2023年5月30日摘 要为研究四组化痰类中药方剂对LPS 致小鼠急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的疗效,本实验拟通过脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)刺激KM 小鼠模拟肺部损伤,模型建立后采用桔梗甘草汤、贵州新冠痰湿质推荐方、五苓散、小柴胡汤进行灌胃处理,结果显示,通过LPS 雾化处理成功构建小鼠ALI 模型,四组方剂均可改善LPS 诱导的小鼠ALI 和肺部炎症反应情况。
关键词LPS ,ALI ,桔梗甘草汤,贵州新冠痰湿质推荐方,五苓散,小柴胡汤Study on the Effect of Four Groups Dissipating Phlegm Prescriptions on Acute Lung Injury by LPS in MiceAilin Lan 1,2, Ying Zhang 1,2, Siqi Wang 1,2,3, Didong Lou 1,2,3*1Guizhou Provincial Key Laboratory of Forensic Medicine Toxicology, Guiyang Guizhou 2Judicial Appraisal Center, Guizhou University of Traditional Chinese Medicine, Guiyang Guizhou 3Department of Forensic Medicine, College of Basic Medicine, Guizhou University of Chinese Medicine, Guiyang Guizhou Received: Apr. 28th , 2023; accepted: May 21st , 2023; published: May 30th , 2023*通讯作者。
AB-PAS染色试剂盒操作步骤及注意事项
AB-PAS 染色试剂盒操作步骤及注意事项AB-PAS 染色试剂盒货号:G1285有效期:6个月有效。
产品简介:糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus 在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质。
阿利新蓝和PAS 技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。
这种技术也常用作广泛检测黏蛋白的手段。
该技术染色阴性,可明确断定该物质不是黏蛋白。
在大多数方法中,切片先经标准的阿利新蓝(pH 值为2.5)染色,在使用PAS 技术。
阿利新蓝可将唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成蓝色。
PAS 技术可将中性黏蛋白染成深红/红紫色,同时将既含中性黏蛋白有含酸性黏蛋白的组织和细胞染成深浅不同的紫色,这是有于阿利新蓝与Schiff 试剂结合并反应。
上述染色常可出现在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小肠杯状细胞中。
阿利新蓝是类铜钛花青染料,这种阳离子染料与酸性基团结合,也即阿利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。
分子中带正电荷的盐键与酸性黏蛋白多糖物质中带负电荷的酸性基团结合形成不溶性的复合物而呈蓝色,再于PAS 进行复合染色,就编号名称6×50ml 6×100ml Storage 试剂(A )阿利新蓝染色液50ml 100ml 4℃避光试剂(B )过碘酸溶液50ml 100ml 4℃避光试剂(C )Schiff Reagent 50ml 100ml 4℃避光试剂(D )苏木素染色液50ml 100ml 4℃避光试剂(E )酸性分化液50ml 100ml RT 试剂(F )Scott 蓝化液50ml100mlRT能显示三种不同黏液物质成分。
自备材料:1、蒸馏水2、系列乙醇操作步骤(仅供参考)1、脱蜡至水,蒸馏水水洗2min。
2、阿利新蓝染色液染色10-20min。
人结肠切片三种特殊染色的比较
人结肠切片三种特殊染色的比较李甜;陈红香;廖礼彬;冯树梅;秦纹;白生宾【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2015(024)001【摘要】目的比较人结肠组织切片阿利辛蓝AB染色(Alcian Blue)、过碘酸雪夫氏PAS染色(Periodic Acid Schiff)及洋红三种染色方法及镜下特点.方法取人结肠,Carnoy氏固定液固定,对结肠组织进行阿利辛蓝AB染色、PAS染色及洋红染色,光学显微镜下观察染色效果.结果三种染色都能清晰显示结肠组织的结构,尤其对结肠的粘膜层进行了观察.阿利辛蓝染色使结肠上皮吸收细胞的细胞核染为红色,杯状细胞中的黏液染为蓝紫色;洋红染色使结肠上皮吸收细胞的细胞核染为蓝紫色,杯状细胞中的黏液染为红色.结论阿利辛蓝和洋红染色均能清楚显示杯状细胞中的黏液,且染色后的细胞质和细胞核成为互补色,结构清晰,对比明显.【总页数】3页(P109-111)【作者】李甜;陈红香;廖礼彬;冯树梅;秦纹;白生宾【作者单位】新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室,乌鲁木齐830011;新疆维吾尔自治区人民医院妇科,乌鲁木齐830000;新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室,乌鲁木齐830011;新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室,乌鲁木齐830011;新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室,乌鲁木齐830011;新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室,乌鲁木齐830011【正文语种】中文【中图分类】R329【相关文献】1.三种特殊染色法显示不脱钙骨切片中新生骨的比较研究 [J], 王东胜2.三种特殊染色方法在显示系统性硬化症小鼠肺组织胶原纤维的比较 [J], 胡谋波;吕军影3.三种小鼠眼球组织石蜡切片固定液固定效果的比较 [J], 孙良; 徐林4.三种冰冻切片冷冻组织块标记方法的比较 [J], 黄燚彬5.三种TRACP染色法检测CIA大鼠关节切片中破骨细胞的比较 [J], 徐慧慧;刘红;李艳;潘静华;王少君;曹金凤;赵宏艳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
医学真菌生化鉴定方法
医学真菌生化鉴定方法关键词:真菌生化试剂甲醇亚甲蓝假丝酵母标准溶液化学试剂北京标准物质网医学真菌的生化鉴定主要指通过生化试剂对真菌进行着色,随后显微镜下检测其菌丝和孢子的形态特征,进行分类鉴定。
常用的医学真菌染色方法如下:1.吉姆萨染色主要用于组织或血涂片中的荚膜组织胞质菌和马尔尼菲青霉菌酵母细胞染色。
将血液样本推片或组织涂片,自然干燥:100%甲醇脱水固定后,滴加吉姆萨染色剂,蒸馏水洗片后自然干燥后镜检。
2.乳酸酚棉蓝染色用于多种真菌的染色,显微观察真菌时,乳酸酚棉蓝溶液常作为固定液。
将接种物在载玻片上涂片:滴加乳酸酚棉蓝染色剂;彻底分散真菌,加盖玻片,进行镜检。
3.亚甲蓝染色主要用于检测汗斑皮屑的病原菌。
将感染皮屑置于载玻片上,滴加亚甲蓝染液:混合充分,加盖玻片进行镜检,可进行油镜检测。
4.过碘酸雪夫(PAS)染色主要用于组织内真菌染色,在PAS染色下真菌为淡红色或紫红色。
使用清蛋白涂布载玻片,制备的玻片可长期保存。
5.显色鉴别培养是近年来真菌诊断的新技术,其原理是利用真菌特异的生化反应,即真菌分解培养基中的底物,致使真菌菌落呈现不同的颜色,因此也属于医学真菌生化鉴定方法的范畴。
该种方法可以方便快速地分离鉴定主要的致病性真菌,同时不影响药敏实验结果,目前在临床上被应用于假丝酵母等真菌的检测。
科玛嘉念珠菌显色培养基(CHROMagar)结合VITEK2Compact-YBC全自动微生物鉴定仪可以实现医学真菌的快速高通量的鉴定。
采取患者的痰、尿、分泌物、咽拭子等标本,于沙保弱培养基上37℃培养1~2天,初步镜检确定有孢子和菌丝的真菌阳性标本。
将阳性标本分别接种CHR显色培养基和VITEK2Compact-YBC 鉴定卡,37℃培养1~2天记录结果,比照CHROMagar直接鉴定法与VITEK2Compact仪器法的鉴定结果,可以确定医学真菌的鉴定结果。
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过碘酸雪夫AB-PAS染色试剂盒
产品简介:
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质。
阿尔辛蓝和PAS技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。
这种技术也常用作广泛检测黏蛋白的手段。
该技术染色阴性,可明确断定该物质不是黏蛋白。
在大多数方法中,切片先经标准的阿尔辛蓝(pH值为2.5)染色,再使用PAS技术。
阿尔辛蓝可将唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成蓝色。
PAS技术可将中性黏蛋白染成深红/红紫色,同时将既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的组织和细胞染成深浅不同的紫色,这是由于阿尔辛蓝与Schiff试剂结合并反应。
上述染色常可出现在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小肠杯状细胞中。
阿尔辛蓝是类铜钛花青染料,这种阳离子染料与酸性基团结合,也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。
分子中带正电荷的盐键与酸性黏多糖物质中带负电荷的酸性基团结合形成不溶性的复合物而呈蓝色,再与PAS进行复合染色,就能显示三种不同黏液物质成分。
主要成分:
试剂(A): 主要有阿利新蓝、弱酸等组成。
试剂(B): 主要由过碘酸组成。
试剂(C): 主要由碱性品红、偏重亚硫酸钠等组成。
试剂(D): 主要由苏木素、乙醇等组成。
试剂(E): 主要由酸、乙醇等组成。
试剂(F): 主要由氨水、蒸馏水组成。
自备材料:
1、蒸馏水或去离子水
2、95%乙醇
3、无水乙醇
4、染色缸
操作步骤(仅供参考):
1、脱蜡至水洗。
2、蒸馏水洗2 min。
3、用阿利新蓝溶液染色10~20 min。
4、蒸馏水洗3次,每次1~2min。
5、放人过碘酸溶液中进行氧化5min。
6、用Leagene Schiff Reagent浸染10~20min。
7、倾去Schiff Reagent,流水冲洗10min。
8、用Lillie Mayer苏木素染色液染核1~2min。
9、用酸性乙醇分化液分化。
10、水洗。
11、用氨水溶液进行返蓝。
12、水洗3min。
13、逐级常规乙醇脱水。
14、二甲苯透明。
15、中性树胶封固。
染色结果:
糖原、中性黏蛋白、各种糖蛋白 红紫色
酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白) 蓝色
蛋白多糖和透明质酸 蓝色
备注:含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的细胞或组织可染成不同程度的蓝紫色至紫色。
注意事项:
1、切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。
2、过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以18-22℃最佳。
3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。
使
用前,最好提前30min取出恢复到在室温后,避光暗处使用。
4、酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙
醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。
5、切片在过碘酸和Schif f Reagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织的类别
等决定。
6、如复染核,细胞核一定要淡染,以免影响阳性物质观察,如AB-PAS合染最好不复染细
胞核,因为会影响AB的观察。
7、研究表明,阿尔辛蓝-PAS联合技术的染色顺序可影响最终结果。
PAS技术在阿尔辛蓝
染色之前时,中性黏蛋白和糖原可染成紫色。
与此相反,阿尔辛蓝染色在PAS技术之前时,则可将这些物质染成预期的红紫色。
PAS染色后,中性碳水化合物获得亲阿尔辛蓝能力的原因不明。
然而,有人认为过碘酸氧化后形成的醛基可能与Schiff试剂中的亚硫酸盐反应形成一个阴离子,再与随后的阿尔辛蓝结合。
8、苏木素淡染非常重要,目的是防止胞浆或黏蛋白着色而掩盖阿尔辛蓝的颜色。
9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月有效。
相关产品:
产品编号 产品名称
DA0082巴氏染色试剂盒(Papanicolaou EA50)
DC0032Masson三色染色试剂盒
DG0004Schiff试剂(雪夫/希夫试剂)。