第七章-食用菌菌种生产

2.种子罐和发酵罐 许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为 提取药物成分或生化制品的材料。
3.空气净化设备 4.培养基连续灭菌设备 包括配料罐、连消塔、维持塔、喷淋冷却器等。 5．供气设备 主要是蒸气锅炉及附属设备
第四节 菌种的接种
一、无菌操作
二、母种的接种
(一）分离法
1.组织分离 2.孢子分离 （二）转管法
一、制培养基设备
（一）原料处理设备
铡 草 机
切片粉碎两用机
粉 碎 机
拌料机
（二）培养基分装设备 装袋机
装瓶机
挖瓶机
菌种袋
颈圈
菌种瓶
二、灭菌设备 外锅：装水 高 内锅：装物（有壁管） 压 安全阀 锅 锅盖 排气阀 压力表
常压灭菌
常压
三、接种设备 （一）接种环境 1. 接 简易、利移动 特 种 点 对人体低害 箱 效果好、工效低 喷雾 用 熏蒸 法 清洁、放物品→ 消毒 紫外灯 要 密闭性好 求
④
摆斜面
灭菌结束后锅盖开1/5的小缝，用余热烘干报纸和 棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2。
（二）原种、栽培种培养基制作 1、常见原种配方
①木屑培养基配方 细木屑 80% ，麸皮 12% ，玉米面 1% ，黄豆粉 2% ，过磷 酸钙1.5%，红糖0.5%，尿素0.4%，硫酸镁0.1%，石灰 1% ，石膏 2% ，料：水 =1 ： 1.0-1.2 。此配方适合香菇 、黑木耳、平菇原种生长，菌丝粗壮洁白。 ②玉米芯培养基配方 玉米芯 80% ，麸皮 14% ，糖 0.5% ，过磷酸钙 1% ，石灰 2% ，尿素 0.5% ，玉米面 2% ，料：水 =1 ： 1.4-1.5 。此 配方适合于培养平菇原种，菌丝生长速度快，且菌丝 粗状。
未达到固态而呈粘稠状态。
特性
条状
属天然植物多糖 融点96℃以上 凝点40 ℃以下 冷水中不溶 透明度好、粘着力强 不被微生物分解利用
粉状
二、各级菌种的培养基
（一）母种培养基 1、通用配方 马铃薯200g、葡萄糖20g
PDA
琼脂15~20g、水1000ml
2、制作方法
①营养液制作 a 准备工作
匀）；湿混（将石灰和溶于水的辅料制成母液，加入
所需水量稀释后拌料）。
③ 装瓶：闷1-2个小时（夏季时间不宜过长）
待料充分吸足水后装瓶，装料至瓶肩，上紧下松，
压平料面，擦净瓶口，打1.5cm粗接种孔至瓶底
封口。
④灭菌：同谷料培养基制作
⑤出锅、冷却：同谷粒培养基制作
(三)栽培种制作
制作方法基本同于原种制作。需要注意的是栽培
酸）浸泡24小时，隔夜换水。
③煮沸、沥干捞出
泡好后，漂洗干净（去杂），煮至饱胀无白心，切
忌煮开花，沥干水分后捞出。 ④拌料 用煮小麦水拌木屑、棉籽壳、麸皮，最后再一起与 麦粒拌匀。
⑤装瓶
a.装料量应为1/3或1/2罐头瓶，便于培养时摇动
基料促进丝均匀生长。
b.擦净并封瓶口
封口塑料袋采用规格为13cm×13cm×0.004cm高
氧含量，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，
并控制适宜的外界条件，获得大量的菌丝体或代 谢产物。
（二）液体菌种制作的特点
1.原料来源广泛
2.菌丝体生长快速
3.生产周期短
食用菌深层发酵一般仅需2-7d就可获得大量的菌丝体，而固
体培养则需30-60d。 4.工厂化生产、无季节性 食用菌深层发酵是在发酵罐内、控制最佳条件来培菌 体的，不受季节性限制。
3、三级种（栽培种）
将原种扩大至粗放培养基上 概念 形成的菌种 菌种袋、较粗放的 培养环境 概况 液体或固体培养基
用途
栽培生产
特点 菌丝多而壮、适应性强
食用菌生产总过程
子实 体
母种
栽培 栽培 种
原种
（三）状态不同的菌种 1、固体 菌种 概念 特点
用固体基质培养的菌种 设备、工艺简单 菌龄长而不一 发酵率较低 用液体基质培养的菌种
压聚丙稀袋，二层，里层在中央剪一3cm宽菱形
口。至少二个皮套。
⑥装锅灭菌 高压灭菌于126℃左右维持2小时；常压灭菌于100℃ 维持10-12小时，夏季时间可酌情延长。 ⑦出锅 、冷却 冷却至30℃以下待接种。
木屑、玉米芯料培养基制作方法 ①按配方称料。 ②拌料：干混（将石膏和不溶于水的主料和辅料混
6．右手小指、无名指及手掌拔掉棉塞，用 火焰灼烧试管口并不断搅动。
概念 2、液体 菌种
设备、工艺较复杂 特点 菌龄短而一致 发酵率高 易老化和自溶
生 长 势 的 区 别
液体菌种
固体菌种
第一节 食用菌制种的条件
一、菌种生产程序
四大步骤
制培养基
灭菌
接种
培养
制种程序
二、主要生产设备
一、制培养基设备 二、灭菌设备 三、接种设备 四、培养设备 五、保藏设备 六、菌种厂布局
②营养液分装
a用注射器分装 b分装标准:分装量为试管长度的1/4—1/5。注意培养基 不能沾污试管口。
c塞棉塞 棉塞松紧适度，1/3在管外，2/3在管内。 d扎捆 7-10 支试管捆在一起，棉塞上包好防水纸，直立放 入高压灭菌锅中。
③灭菌处理 在1.0—1.5 kg/cm2压力下维持20--30min。
双人
单 人
4.接种工具
要求:前端为导热性好的金属材料
环 枪 匙 钩 铲 针
接种
镊
耙
液体菌种接种枪
固 体 菌 种 接 种 枪
四、菌种培养没备 1.培养箱
培养少量菌种的恒温电器（20~40℃）
2.培养室
光线暗
要求
密闭好、通风性强 能升温、降温 有培养架
五、菌种保藏设备 保藏母种：冰箱（4℃）左右 保藏原种、栽培种：
一、培养基的概述
（一）概念及要求
概念
人工配制的适于菌种生长 的营养基质
要 求
营养种类、比例、水分、pH适宜； 保持无菌状态。
（二）培养基的类型
l、按营养物质种类分类
①天然培养基 母等。 ②合成培养基 ③半合成培养基 是指用已知成分和数量的化合物 利用天然物质作为碳、氮源 常用的生物材料有马铃薯、胡 萝卜、蚕蛹粉、豆芽汁、花生饼粉、玉米粉、酵
米面5%，石膏1.5%，石灰1%，糖0.5%，过磷酸钙1.5%，尿 素 0.5% ，料，水 =1 ： 1.2 左右。适用于金针菇，滑子蘑等 分解基质能力较弱的品种使用。
⑤麦粒、木屑培养基配方
新鲜、优质小麦 80% ，阔叶树木屑 20% ，木屑：水
=1：1左右，拌木屑用煮小麦水，或在此基础上，加 入总量0.5%的过磷酸钙，0.5%的蔗糖,1%的石灰，在 麦粒煮好后连同木屑拌入。 ⑥玉米粒培养基配方
要点
必 备
母种转管无菌操作程序：
1.将接种用品及原始母种放入接种箱内。 2.用菇保1号、气雾消毒盒（2g/m3）或甲醛进行熏蒸， 时间要在30分钟以上。 3.手、台面、接种工具、试管用酒精棉球擦试消毒。 4.点燃酒精灯，火焰灼烧接种镐至烧红后冷却，凡能 伸进试管的杆部均过火灭菌。
5．左手大拇指和其他四指并拢握住菌种管和待 接试管，斜面向上，并保持水平。
③玉米芯、木屑混合培养基配方 玉米芯 42% ，木屑 20% ，豆秸 20% ，麸皮 10% ，过磷酸钙 1.4-1.5。此配方适合于培养平菇原种。生长健壮，也可
1.5% ，石灰2% ，石膏 1% ，糖 0.5% ，玉米面 3% ，料：水 1=1 ：
培养金针菇，滑子蘑原种。
④软质木屑配方
椴木屑75%（木线厂下脚料，颗粒较大），麸皮15%，玉
紫外灯 操作孔 观察窗
2.接种室
高2.2~2.5m 要求 面积7~9m2 缓冲间：2~3m2 接种间：5~6m2
6个面平滑 两门错开、平拉式 顶装紫外灯 清洁→物品放缓冲间→消毒 使用 →移物至接种间→ 喷消毒液 → 10min 后接种→消毒液清洁
3.超净工作台
使一定工作区达到相对无菌、无尘状态的电器
优质新鲜玉米 100% ，或后期加入 0.5% 过磷酸钙，
0.5%的糖,1%的石灰。
玉米粒培养基制作的原种，具备麦粒原种的优点，
后劲更足，接种扩繁量更大。
2、原种培养基的制作方法
谷粒培养基制作
①按配方称量各营养物质 配方一：优质新鲜小麦 65% ，木屑 15% ，棉籽壳 15%，麸皮5%，石膏1%，过磷酸钙0.5%，糖0.5%， 尿素0.5% ②谷粒浸泡吸水 冬季浸泡24-48小时，夏季加1%石灰（以防变
三、原种、栽培种的接种
菌种分离
将有价值的子实体的局部组织、孢子或基
内菌丝移接到斜面试管培养基上，获得纯培养 菌丝的操作称为菌种分离。菌种分离可以分为
孢子分离、组织分离和菇木分离三种。
接种
概念：菌种移至新培养基上的过程 关键：无菌操作
一、无菌操作
概念 在严格消毒灭菌条件下进行的操作 接种环境消毒灭菌 酒精棉球消毒双手 开启的管口、瓶口靠近灯焰 拔出的棉塞勿触及任何地方 动作快，接种时间勿太长
种培养基制作一般选用丰富的培养料，而且含水
量要较原种加大，更利于菌种快速吃料。容器可
以用500ml罐头瓶，也可以用（17-18）X（30-35）
X（0.04-0.05）cm低压聚乙烯袋。
栽培种的装袋
三、培养基的灭菌
（一）母种培养基的灭菌 灭菌与摆斜面 1kg/cm2(103kpa、121℃）
摆斜面 无菌检验 约30℃条件下→空白培养2~3天
第七章
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节
食用菌菌种生产
菌种概述 菌种生产设备 菌种培养基 接种 菌种培养与质量鉴定 菌种保藏与复壮
第一节
菌种概述
一、菌种概念 二、菌种类型 三、菌种生产程序