FACS细胞表型染色操作

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细胞表型染色分析/表面抗原染色

*Stain Buffer:PBS+2%FBS+0.2%NaN3

*抗体为BD荧光标记一抗,标准用量为20uL/test(~106细胞/100uL)

1.弃去培养基,消化收集细胞,低温4度300g离心5分钟;

2.弃上清,适量Stain Buffer重悬,计数;

3.取0.5-1 X 106细胞至1.5mL离心管,低温4度300g离心5分钟;

4.弃上清,加入100uL Stain Buffer,加入20uL各抗体,吹打混匀;

5.避光,冰上孵育30分钟;

6.加入1mL Stain Buffer,低温4度300g离心5分钟;

7.弃上清,加入1mL Stain Buffer,低温4度300g离心5分钟;

8.弃上清,500uL Stain Buffer重悬,过滤,置于冰上,避光,上机;

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