砷盐检查标准操作规程

制药GMP管理文件

一、目的：建立砷盐检查标准操作规程。

二、依据：《中华人民共和国S药典》2005年版。

三、适用范围：适用于药品中砷盐的检查。

四、职责：检验员对本标准的实施负责。

五、正文：

1 简述：

1.1砷盐检查法适用于药品中微量砷盐(以As计算)的限量检查。

1.2 二乙基二硫代氨基甲酸银法既可检查药品中砷盐限量，又可测定含量。

1.3 二乙基二硫代氨基甲酸银法是将生成的砷化氢气体导入盛

有二乙基二硫代氨基甲酸银试液的管中，使之还原为红色

胶态银，与同一条件下定量的标准砷溶液所制成的对照液

比较，或在510nm波长处测定吸收度，以判定含砷盐的限

度或测定含量。

2 仪器与用具：

二乙基二硫代氨基甲酸银法按S药典规定(图2)。B磨口塞应密闭，以防砷化氢泄漏；与标准磨口塞B相连的导气管C一

端长度应不低于80mm，便于装醋酸铅棉花后达到80mm，另一

端长度应不低于180mm，尖端内径不可超过lmm，以保证产生

的砷化氢吸收完全；D管的标准管与样品管要一致。管内径、

色泽、刻线要相同。

3 试药与试液：

3.1 标准砷溶液：精密称取105℃干燥至恒重的三氧化二砷

0．132g，置1000m1量瓶中，加20％氢氧化钠溶液5m1

溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10m1，用水

稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前，精密量取贮备液loml，置1000m1量瓶中，加稀硫酸10m1，用水稀释至刻度，摇匀即得(每1m1相当

于1．0ug的As)。

3.2 碘化钾试液：按S药典规定，应临用新配：

3.3 酸性氯化亚锡试液：按S药典规定，配成后3个月即不适用。

3.4 锌粒：以能通过1号筛的细粒无砷锌为宜，如使用锌粒较

大时，用量酌情增加，反应时间亦应延长为1小时。

3.5 醋酸铅棉花：取脱脂棉，浸入醋酸铅试液与水的等容混合

液中，湿透后，滤去过多的溶液，并使之疏松，在100℃

以下干燥后，贮于磨口塞玻璃瓶中备用。

3.6 二乙基二硫代氨基甲酸银试液：按S药典规定，本液应置

棕色玻璃瓶中，密塞，置阴凉处保存。

4 操作方法：

4.1 标准砷对照液的制备：

4.1.1 装置的准备：取醋酸铅棉花适量(80—100mg)，撕成疏

松状，每次少量，用细玻璃捧均匀地装入导气管C中，

松紧要适度，装管高度约80mm。精密量取二乙基二硫

代基甲酸银试液5ml置D管中。

4.1.2 精密量取标准砷溶液5m1，置A瓶中，加盐酸5m1与水

21m1，再加碘化钾试液5m1与酸性氯化亚锡试液5滴，

在室温放置10分钟后，加锌粒2g，立即将准备好的导

气管C与A瓶密塞，使生成的砷化氢气体导入D管中，

并将A瓶置25—40℃水浴中反应45分钟，取出D管，

添加氯仿至刻度，混匀，即得。

4.2 检查法：准备好C管装置，取照该药品项下规定方法制成

的供试液，置A瓶中，照标准砷对照液的制备，

自“再加碘化钾试液5m1”起依法操作。将所

得溶液与标准砷对照液同置白色背景上，从D

管上方向下观察，比较，即得。必要时，可将

所得溶液与标准砷对照液分别转移至lcm吸收

池中，用分光光度计，在510nm波长处，以二

乙基二硫代氨基甲酸银试液作空白对照，分别

测定吸收度。

5 注意事项：

5.1 药品中存在的微量砷盐常以三价的亚砷酸盐或五价的砷

酸盐存在，五价状态的砷生成砷化氢比三价砷慢，故先加

入碘化钾和氯化亚锡为还原剂，使五价砷还原为三价砷。

5.2 如供试品中存在锑盐，将干扰砷盐检查，所以本法不适用

供试品为锑盐中砷盐检查。但在S药典规定的实验条件

下，100灿g的锑存在不致于干扰测定。实验中加入氯化

亚锡不仅有效地抑制锑的干扰，防止锑化氢与二乙基二硫

代氨基甲酸银试液反应，干扰砷盐检查，还可与锌作用，

在锌粒表面形成锌锡化合物，发生极化作用，从而使氢气

均匀连续地发生，使产生的砷化氢气体一致，有利于反应

进行。

5.3 供试品和锌粒中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中产生

H2S气体，干扰实验，故用醋酸铅棉花吸收除H2S；因此，

导气管中的醋酸铅棉花，要保持疏松、干燥，不要塞入紧

下端。

5.4 锌粒大小影响反应速度，为使反应速度及产生砷化氢气体

适宜，选2mm左右粒径的锌粒。对应温度一般控制在30℃

左右，冬季可置温水浴中。如反应太快，宜适当降低反应

温度，使砷化氢气体能被均匀吸收。

5.5 如供试品为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将高铁离子

还原为低价铁而除去干扰。

5.6 有机药品中的砷盐检查：可溶于水的脂肪族有机酸如枸椽

酸、乳酸及其盐、氨基乙酸与葡萄糖酸钙等，一般可不经

有机破坏而直接依法检查砷盐。多数环状结构的有机药物

与杂环分子可能以共价键结合，需先进行有机破坏，否则

检出结果偏低或难以检出。有机破坏时，所用试剂的含砷

量如超过lug，除另有规定外，对照标准液应取同量的试

剂按供试品同样处理，最后加入砷标准液一定量，与供试

品比较所生成溶液的颜色。

5.7 如供试品为硫化物、亚硫酸盐或硫代硫酸盐等，则在酸性

溶液中可生成大量硫化氢或二氧化硫气体，干扰检查；可

加硝酸使氧化成硫酸盐以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐

检查。

5.8 在二乙基二硫代氨基甲酸银法中。需要加入一定量有机碱

以中和反应中的二乙基二硫代氨基甲酸；USPXXII配制成

0．5％二乙基二硫代氨基甲酸银的吡啶溶液．其缺点是吡

啶有恶臭；采用含1．8％三乙胺和0．25%二乙基二硫代

氨基甲酸银的氯仿溶液．呈色稳定性及试剂稳定性均好，

低毒、无臭。与砷化氢产生的颜色在510nm波长处有最大

吸收；如遇室温低，按法操作，标准砷对照液不显色．可

将D管置25—40℃水浴加温使显色。