维生素c的定量测定——2,6-二氯酚靛酚法
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生物化学实验
实验三维生素c的定量测定——2,6-二氯酚靛酚法
预习思考题
1、为了测得准确的维生素C浓度,实验过程中应注意哪些操作步骤?为什么?(1)在操作过程中某些步骤一定要快,避免Vc的氧化,因为Vc具有还原性,还要向样品中加入草酸溶液,保护Vc;
(2)对于Vc标准溶液要现用现配,尽量精确,避免Vc氧化,避免因为标准溶液的误差造成的误差;
(3) 整个操作过程要迅速,防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所用的染料不应小于1ml或多于4ml,如果样品含维生素C太高或太低时,可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。
(3) 本实验必须在酸性条件下进行。在此条件下,干扰物反应进行得很慢
2、为什么样品溶液要用2%草酸提取,而且整个滴定过程要快速?
(1)维生素C在空气中极易被氧化,尤其是在碱性条件下更快,而在酸性介质中,它受空气氧化的速度稍慢,较为稳定,而且草酸具有很强的还原性,能与空气中的氧气发生反应,所以用2%的草酸来配制维生素C标准溶液是为了减慢它的氧化速度,减少实验误差;
2%草酸有抑制抗坏血酸氧化酶的作用。
(2)因为维生素C在空气中很容易被氧化,所以整个滴定过程要快速进行。