药物中有机残留溶剂的测定方法概述
残留溶剂测定法
残留溶剂测定法残留溶剂测定法1 简述药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用过，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。
药物中常见的残留溶剂及限度参照《中国药典》2015年版四部通则0861附表1的规定，除另有规定外，第一、第二、第三类溶剂的残留量应符合其规定；对其他溶剂，应根据生产工艺的特点，制订相应的限度，使其符合产品质量标准的要求。
本法照气相色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0521测定。
本测定方法适用于对各论项下未收载残留溶剂检测方法的品种中残留溶剂的检验，也可用于指导建立各论项下具体品种的残留溶剂检查方法。
2 仪器和用具2.1 气相色谱仪，带FID检测器，顶空进样器。
2.2 计算机，安装工作站软件。
2.3 色谱柱2.3.1 毛细管柱除另有规定外，极性相近的同类色谱柱之间可以互代使用。
2.3.1.1 非极性色谱柱固定液为100%的二甲基聚硅氧烷的毛细管柱。
2.3.1.2 极性色谱柱固定液为聚乙二醇(PEG-20M)的毛细管柱。
2.3.1.3 中极性色谱柱固定液为(35%)二苯基-(65%)二甲基聚硅氧烷，(50%)二苯基-(50%)二甲基聚硅氧烷，(35%)二苯基-(65%)二甲基亚芳基聚硅氧烷，(14%)氰丙基苯基-(86%)二甲基聚硅氧烷，(6%)氰丙基苯基-(94%)二甲基聚硅氧烷的毛细管柱。
2.3.1.4 弱极性色谱柱固定液为(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷，(5%)二苯基-(95%)二甲基亚芳基硅氧烷共聚物的毛细管柱。
2.3.2 填充柱以直径为0.18~0.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他适宜的填料作为固定相。
3 供试品溶液和对照品溶液的制备3.1 供试品溶液的制备3.1.1 顶空进样除另有规定外，精密称取供试品0.1~1g；通常以水为溶剂；对于非水溶性药物，可采用N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其他适宜溶剂；根据供试品和待测溶剂的溶解度，选择适宜的溶剂且应不干扰待测溶剂的测定。
气相色谱法测定药物中有机溶剂残留量
验证性实验实验二十五 气相色谱法测定药物中有机溶剂残留量一、目的要求1.掌握内标法、外标法计算杂质含量。
2.熟悉气相色谱-氢火焰离子化检测器法（GC-FID ）测定原料药中残留有机溶剂的方法。
3.熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法。
4.了解顶空气相色谱仪的作用原理。
二、仪器与试药气相色谱仪（弱极性或中等极性气相色谱柱，1～5μL 微量注射器）甲醇 乙腈 二 氯甲烷 三氯甲烷 丙酮 正丙醇 地塞米松磷酸钠原料药三、实验方法1.地塞米松磷酸钠（Dexamethasone Sodium Phosphate ）中甲醇和丙酮的检查（1）色谱条件 色谱柱：3% OV-17 玻璃柱，柱长 2m ，内径 3mm ；检测器：FID ；柱温：50℃；气化室温度：120℃；检测器温度：140 ℃；载气：N 2；流速：30mL/min ；空气：0.5 kg/cm ；灵敏度：102；进样量：2μL 。
（2）溶液制备与测定 精密量取甲醇 10µL （相当于 7.9mg ）与丙酮 100µL （相当于 79mg ）， 置 100mL 量瓶中，精密加 0.1%（mL/mL ）正丙醇（内标物质）溶液 20mL ，加水稀释至 刻度，摇匀，作为对照溶液；另取本品约 0.16g ，精密称定，置10mL 量瓶中，精密加入上述内标溶液 2mL ，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
取上述溶液，照气相色谱法，按正丙醇计算的理论板数应大于700。
含丙酮不得过 5.0%（g/g ）， 并不得出现甲醇峰。
（3）计算 按下式计算定量校正因子（f ）和检品中丙酮的含量（g/g ）：A /A /C f C 正丙醇正丙醇甲醇甲醇校正因子（）＝ 2.顶空气相色谱法测定有机溶剂甲醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷（1）色谱条件 色谱柱：HP-5 毛细管柱（5% phenyl methyl siloxane, 30m×0.25mm ）；柱温：45℃；气化室温度：180℃；检测室温度：200℃ (FID)；氢气流速：40 mL·min －1；空气：450 mL· min －1，氮气：1mL·min －1；分流比：31׃；样品液：90℃，加热10min ，（自动）顶空进样。
顶空气相色谱测定有机溶剂残留法_概述及解释说明
顶空气相色谱测定有机溶剂残留法概述及解释说明1. 引言1.1 概述顶空气相色谱测定有机溶剂残留法（简称顶空法）是一种常用的分析技术，广泛应用于工业生产和环境监测领域。
该方法通过将样品中的有机溶剂在升温下转化为气态，然后利用气相色谱技术进行定性和定量分析。
顶空法具有无需前处理、操作简便快捷、灵敏度高等优点，因此被广泛认可并得到了广泛的实际应用。
1.2 文章结构本文将首先对顶空法的原理进行介绍，包括有机溶剂从液态转化为气态的过程以及气相色谱技术的基本原理。
然后介绍了使用顶空法所需的设备和方法，并展示了其在不同领域的应用案例。
接着讨论了当前研究进展以及存在的局限性，并提出了改进方向。
最后对该方法进行优点与局限性对比分析，并探讨其可行性和未来发展前景，给出实际工作中的应用建议和注意事项。
1.3 目的本文旨在全面概述和解释顶空气相色谱测定有机溶剂残留法，向读者介绍该方法的原理、设备和方法、应用领域以及研究进展。
通过讨论与分析，希望能够准确评估顶空法的优点与局限性，并为实际工作提供可行性探讨和发展前景展望。
最终总结该方法的主要观点和结果，并指出其在未来研究中的意义和启示。
2. 顶空气相色谱测定有机溶剂残留法2.1 原理介绍顶空气相色谱（Headspace Gas Chromatography, HSGC）是一种用于分析液体或固体样品中挥发性成分的方法。
它通过将样品封装在闭合容器中，利用温度升高和压力调节，使样品中的挥发性成分转移到顶空（即气相空间）中，并通过气相色谱技术进行分析和检测。
该方法适用于检测有机溶剂在样品中的残留量。
当使用有机溶剂在溶剂型反应、合成或处理过程中时，可能会残留在最终制得的产品或样品中。
由于有机溶剂可对人体造成潜在危害，因此需要准确可靠地确定其残留量。
2.2 设备和方法顶空气相色谱测定有机溶剂残留法主要包括以下步骤：首先，将待测试的样品置于密封的头空瓶内，并加入适量的内标物质。
然后将头空瓶安装到顶空进样系统中。
0861残留溶剂测定法
0861残留溶剂测定法药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。
药品中常见的残留溶剂及限度见附表1，除另有规定外，第一、第二、第三类溶剂的残留限度应符合附表1中的规定；对其他溶剂，应根据生产工艺的特点，制定相应的限度，使其符合产品规范、药品生产质量管理规范（GMP）或其他基本的质量要求。
本法一般采用色谱法，如照气相色谱法（通则0521）测定。
色谱柱1. 毛细管柱除另有规定外，极性相近的同类色谱柱之间可以互换使用。
（1）非极性色谱柱固定液为100%的二甲基聚硅氧烷的毛细管柱。
（2）极性色谱柱固定液为聚乙二醇（PEG-20M）的毛细管柱。
（3）中极性色谱柱固定液为（35%）二苯基-（65%）甲基聚硅氧烷、（50%）二苯基-（50%）二甲基聚硅氧烷、（35%）二苯基-（65%）二甲基聚硅氧烷、（14%）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚硅氧烷、（6%）氰丙基苯基-（94%）二甲基聚硅氧烷的毛细管柱等。
（4）弱极性色谱柱固定液为（5%）苯基-（95%）甲基聚硅氧烷、（5%）二苯基-（95%）二甲基硅氧烷共聚物的毛细管柱等。
2. 填充柱以直径为0.18～0.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他适宜的填料作为固定相。
系统适用性试验（1）用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的理论板数一般不低于5000；填充柱的理论板数一般不低于1000。
（2）色谱图中，待测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
（3）以内标法测定时，对照品溶液连续进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比的相对标准偏差（RSD）应不大于5%；若以外标法测定，所得待测物峰面积的RSD 应不大于10%。
供试品溶液的制备1. 顶空进样除另有规定外，精密称取供试品0.1～1g；通常以水为溶剂；对于非水溶性药物，可采用N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其他适宜溶剂；根据供试品和待测溶剂的溶解度，选择适宜的溶剂且应不干扰待测溶剂的测定。
残留溶剂的测定方法
• （2）配制浓度的确定 • 限度检查：对照品溶液浓度一般配制成要求的限度浓
度即可。 • 定量测定：对照品溶液的浓度应根据被测样品中残留
溶剂的实际浓度而定。浓度相差最好不超过两倍为宜。 必要时，应重新调整 。 • 药典上规定供试品取样量为0.1～1g，最好不超过0.5g， 取样量越大，灵敏度越高，但回收率越不容易符合要 求。
▪ 缺点：需要特定的顶空进样装置，成本较高，对沸点 较高的溶剂检测灵敏度不够，一般多应用于沸点100℃ 以下的溶剂
• 现一般采用自动顶空进样器
（2）直接进样
• 指将样品定量溶解于适当溶剂中,准确量取适量注入气 相色谱仪测定溶剂残留量的进样方法。进样体积一般 为2μL 以下。本法为通常采用的方法,适用于受热不易 分解的样品
通风的主要目的是为了置换室内的空气， 改善室内空气品质，是以建筑物内的污染物 为主要控制对象的。
根据换气方法不同可分为排风和送风。排 风是在局部地点或整个房间把不符合卫生标 准的污染空气直接或经过处理后排至室外； 送风是把新鲜或经过处理的空气送入室内。
对于为排风和送风设置的管道及设备等装 置分别称为排风系统和送风系统，统称为通 风系统。
• 2.进样方式 （1）顶空进样 • 顶空进样又分为溶液顶空和固体顶空。一般采用溶液
顶空，就是将样品溶解于适当溶剂中,置顶空瓶中保温 一定时间,使残留溶剂在两相中达到气液平衡,定量取气 体进样测定。
▪ 优点：在较低温度下进行，避免组分分解；减少溶解 样品的溶剂量和样品本身对色谱系统的干扰和污染， 缩短分析时间，增加色谱柱的寿命。
（二）.如何根据已有的方法进行残留溶剂 的检测？
• 1.根据质量标准确定实验方案
• 主要是实验条件的选择（选择测定方法，选择色谱柱、 检测器、进样器等，选择合适的检测方法）
残留溶剂gc方法
残留溶剂gc方法
残留溶剂GC方法是一种用于检测有机溶剂残留的方法，其主要包括以下步骤：
１．确定被测的有机溶剂：根据制备工艺确定被测有机溶剂的范围。
２．色谱柱选择：按照相似相溶的原理选择色谱柱。
３．进样方法：GC法包括溶液直接进样和顶空进样两种进样方法。
通常情况下，沸点低的溶剂建议采用顶空进样法，沸点高的溶剂可以采用溶液直接进样法。
４．供试品溶液和对照品溶液的配制：对于固体原料药，如采用溶液直接进样法，需先用水或合适的溶剂使原料药溶解，以使其中的有机溶剂释放于溶液中，才能被准确测定。
药品包装材料中残留溶剂的测定
药品包装材料中残留溶剂的测定
包装知识12月31日讯，本法以气一固平衡为基础，取一面积的试样置于密封容器内，在一定的湿度和时间条件下，试
样中残留的有机溶剂受热挥发，达到平衡后，取定量顶空气气体注入色谱仪中分析，以保留时间定性，峰面积(或峰高)定量。
结果以mg/m2表示。
色谱条件与系统适用性试验
色谱柱可选用能满足待测溶剂分离要求的填充色谱柱或毛细管色谱柱。
填充色谱柱：一般用聚乙二醇PEG-20M。
理论板数：不得低于1000。
毛细管色谱柱除另有规定外，极性相近的同类色谱柱之间要吧互代使用。
理论板数：不得低于5000。
1、非极性色谱柱：100%的二甲基聚硅氧烷。
2、极性色谱柱：聚乙二醇PEG-20M。
3、中极性色谱柱：6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷。
4、弱极性色谱柱：5%苯基-95%甲基聚硅氧烷。
一般选用：
色谱柱：100%的二甲基聚硅氧烷0.53mm1.2m30m
检测器：氢火焰离子检测器
测定条件(供参考)：柱温70℃，汽化温度180℃，检测温度190℃。
分流比：5：1
氮气5ml/min，氢气40 ml/min，空气450 ml/min
分离度：大于1.5
可分离乙醇、异丙醇、要酮、乙酸乙酯、甲苯、乙酸丁酯、二甲苯。
供试品的制备
按内表面积3~5cm2/ml，的比例取样，按产品项下规定制备供试品，置于适宜体积的玻璃。
残留溶剂测定的要求和测定方法
企标控制溶剂 DMF
实际检出 乙醇
A B C D
无
乙醇
DMF 甲醇、氯仿、甲 苯
乙醇、甲苯 无
30040701 30040702 30040703
E
041101 041102 041103
甲醇、乙醇、环 乙醇、乙醚 己烷、DMF、 DMSO
盐酸头孢他美酯残留溶剂的控制
厂家 A B C D E F G 申报生产工艺中涉及的溶剂 甲苯、二氯甲烷 甲苯、二氯甲烷 乙醇、丙酮 乙酸乙酯 实际检出的残留溶剂 异丙醇 异丙醇、石油醚 异丙醇 异丙醇
色谱条件 柱 温 先 在 30℃ 维 持 7min, 再 以
8℃/min 的速度升至 120℃, 维持 15min ；以
氮 气 为 载 气 ， 流 速 为 2.0ml/min, 分 流 比
1:1 ；顶空瓶温度为 70℃, 顶空时间 30 －
60min ；进样口温度为 200℃；采用FID 检测 器，温度为250℃。
• 第二法（顶空进样法） 精密量取标准溶液和供试品溶液各3～ 5ml，分别置于容积为8ml的顶空取样瓶中, 瓶外径17mm，长60mm，带螺扣具孔盖。 瓶口带隔膜垫，与顶部空气接触的隔膜垫 上应有聚四氟乙烯膜使与橡胶垫隔开，各 瓶在60℃的水浴中加热40～80分钟，用在 同一水浴中的空试管中加热的注射器抽取 顶空气适量(通常为1ml)，进样，重复进样3 次，按第一法中所述方法测定、计算与处 理。
药品中残留溶剂分析 的技术要求和测定方法
王 玉 江苏省药品检验所
技术要求
• ICH(人用药品注册技术要求国际协调会)已经通过
了控制药品中残留溶剂的指导原则，将药品生产
中常用的69种有机溶剂按照对人体和环境的危害
中国药典溶剂残留检测方法
中国药典溶剂残留检测方法药典是一种规范化的文献，用于确保药品的质量、安全和有效性。
中国药典（Chinese Pharmacopoeia，简称ChP）是中国药物及医疗器械行业的权威标准，其中包含了对药品质量的要求和检测方法。
溶剂残留检测是其中一个重要的方面，主要用于检测药品中可能残留的有机溶剂。
下面是一般用于中国药典中药品溶剂残留检测的一些常见方法：气相色谱法（Gas Chromatography，GC）：使用气相色谱仪检测有机溶剂的残留。
药物样品通常在高温条件下蒸发，然后通过气相色谱柱进行分离，最后使用检测器进行检测。
气相质谱法（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）：结合气相色谱和质谱技术，可提高对溶剂残留的分析灵敏度和准确性。
液相色谱法（High-Performance Liquid Chromatography，HPLC）：使用液相色谱仪检测溶剂残留。
药物样品在高压液相色谱柱中进行分离，然后通过检测器进行检测。
液相质谱法（High-Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry，HPLC-MS）：结合液相色谱和质谱技术，也是一种常用的高灵敏度、高准确性的检测方法。
头空气色谱法（Headspace Gas Chromatography，HS-GC）：样品在封闭的容器中加热，挥发出来的气体通过气相色谱进行分离和检测。
适用于挥发性有机物的检测。
核磁共振法（Nuclear Magnetic Resonance，NMR）：虽然不是常规的溶剂残留检测方法，但核磁共振技术也可用于一些特殊情况下的有机溶剂残留的定性和定量分析。
这些方法可以根据药物的性质和具体要求进行选择。
检测结果需要符合中国药典中规定的合格标准，以确保药品在生产和使用过程中不含有害的有机溶剂残留。
这些检测方法的选用通常受到法规、行业标准以及具体产品的特点等多方面因素的影响。
顶空气相色谱-质谱法测定药品包装材料中40种有机溶剂残留量
顶空气相色谱-质谱法测定药品包装材料中40种有机溶剂残留量付蒙;陈晓莉;周姝;江燕【期刊名称】《中国药品标准》【年(卷),期】2023(24)1【摘要】目的:建立测定药品包装材料中正辛烷、丙酮、辛烯、乙酸乙酯等40种有机溶剂残留量的方法。
方法:采用顶空气相色谱-质谱法,色谱条件为Agilent VF-WAX MS毛细管气相色谱柱(60 m×0.32 mm,1.00μm),柱温为程序升温(起始温度45℃,保持5 min,以5℃·min^(-1)升温至150℃,再以20℃·min^(-1)升温至220℃,保持4 min),进样口温度:220℃;载气为高纯氦气,流速为1.0 mL·min^(-1),分流比为10∶1;进样体积为1 mL;质谱条件为电子轰击离子源(EI),轰击电压70 eV;离子源温度为280℃,接口温度250℃;扫描方式:定性SCAN(质量数范围29~650),定量SIM。
结果:所建立的方法呈良好的线性关系,相关系数r为0.9953~0.9996,各有机溶剂平均回收率均在94.25%~107.46%范围内,RSD为0.06%~1.92%。
药用复合膜、药用复合硬片、药用铝箔的有机溶剂残留量检测结果分别为0.011~1.688、2.631~24.586、0.084~18.663 mg·m^(-2)。
结论:本法适用于药品包装材料中有机溶剂残留量的检测。
【总页数】8页(P96-103)【作者】付蒙;陈晓莉;周姝;江燕【作者单位】湖北省药品监督检验研究院【正文语种】中文【中图分类】R921.2【相关文献】1.顶空气相色谱法与顶空气相色谱串联质谱法对化妆品中二噁烷残留量测定的方法比较2.顶空-气相色谱-质谱法测定再生纤维素薄膜涂层中的有机溶剂残留量3.静态顶空气相色谱-质谱法测定盐酸沃尼妙林中有机溶剂残留量4.顶空气相色谱法与顶空气相色谱串联质谱法对化妆品中二噁烷残留量测定的方法比较5.顶空气相色谱-质谱法同时测定蜂蜜中57种挥发性有机溶剂残留因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
药物中有机溶剂残留的研究与检测
合临床特ｌ 生 来分析。原料药制备工艺中可能涉及的残留溶剂主要有三 数要超过两次， 最终测得峰面积。 （ ２ ） 计算法： 在检查限度的时候 ， 除了有 要按 照品种类型要求 的溶液浓度来测 试。使用 内标 法 种来 源 ： 合成 原料反应 溶剂 、 反应 副产物 、 由合成 原料 或反应 溶剂引 入 。 特殊 的规定之 外 ， 有很 多的要素都 会影响到残 留溶 剂 。 的时候 ，供 试品溶液所 得被测溶 剂峰面积 与内标 峰面积之 比不得大 于 对照品溶液 的相 应 比值 。 使用外 标法的时候 ， 供试 品溶 液所得被测溶 剂 １ ． ２类型划分 结合溶剂对 我们的身体 和生态带 来的负 面效 益 ，可将 其分 成四个 峰面积不得 大于对 照品溶液 的相 应峰面积 。 类型： 第一 种溶剂对人 体和生 态的危 害较高 ， 毒性 较强 。由于它 的毒性 ２ ． ６注意事项 非常高 ， 而 且会对生 态带来 很恶劣 的影 响 ， 所 以在 原料 的生产过程 中严 ２ ． ６ ． １除非是有单独 的规 定 ， 否 则在选取顶空 条件的时候要按 照如 （ １ ） 要结合供试品里的残留溶剂本身的沸点选取平衡温。 针对 禁使用。如果在分析的时候， 牵扯到该类物质的话， 要弃用此类方案或 下来进行 ： 是用别 的代 替。假 如必须要使用 的话 ， 就 要认真 的掌控 好残 留数 。第二 那些沸点很高的溶剂 ， 要选取较高温度。 不过这时候要考虑到供试品本 ２ ） 通 常顶空平衡 的时间控制在 ３ ０ 至４ ５ 分钟 。假如 种溶剂 的毒 『 生 和上述类 型 比对来看要小 一些 ， 也要限制应用 。第三类溶 身 的热分 解 性质 。（ 就会导致 顶空瓶本 身的气密 性受到影 响 ， 进而影 响 到 剂的毒ｆ 生 是低毒的， 对人和生态的负面影响不大。 第四种是目前还没有 超过 该时 间的话 ， 被证 明有 毒性的溶剂 。 此类 溶剂在生产 活动 中会应用 ， 不 过如今并没有 定量 的精 准 眭。 深人 的毒性学分 析 。所 以研发人员 最好是 结合生产 步骤 以及 溶剂 的性 ２ ． ６ ． ２验证定量法 则 质， 在需要 的时候对其分 析 。 如果使用顶 空进样 的话 ， 此时两种 物品所处 的基质是不 一样 的 ， 所 ２测试残 留量 以要分析基质效益。因为使用标准加入措施的话能够降低两种液体的 基 质不一样 而导致 的后果 ， 因此一般使 用标准加 入 措施 。 ２ ． １仪器与用具 Ｇ Ｃ 一 １ ４ Ｃ气相色谱仪 ｌ 台、色谱柱、 ｌ Ｏ ｕ ｌ 微量注射器 １ 支、 ０ — １ ０ ０ ℃ ２ ． ６ ． ３排除 干扰 温度计 １ 支、 容量瓶 、 移 液管若干 。 供试品中未知杂质易对残留溶剂的测定产生干扰。干扰作用包括 ２ － ２测试系统 的适应能力 在测定 的色谱 系统中未知杂 质与待测 物的保 留值 相 同。如 果测试 的残 ２ ． ２ ． １用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的理论板数要大于 存溶剂大于规定的数值 ， 但是不能明确供试品里是不是有未知物质的 时候 ， 要 通过测试 来降低干 扰。对第一类 干扰作 用 ， 通常采 用在另 一种 ５ ０ ０ ０ ； 填充柱的理论板数要大于 １ ０ ０ ０ 。 ２ ． ２ ． ２色谱图中，待测物的色谱峰与相邻色谱峰的分离度应大于 极性不同的色谱柱系统中对相同供试品在进行测定 ，比较不同色谱系 １ ． ５。 统 中测 定结 果的方法 。 假 如得到 的数 值相同 ， 那 么就能 够排 除共 出峰产 ２ ． ２ ． ３使用 内标法分 析的时候 ， 对照 品溶 液连续进样 ５ 次， 所得待 测 生的影响。 假如不同， 就表明存在共出峰影响。 针对第二类， 一般是测试 物与 内标 物峰面 积之 比的标准偏 差应不 大于 ５ ％； 如 果使用外 标措施 的 已知没有该溶剂添加 的对照 品进行 测定 。 ２ ． ６ Ａ 含氮碱 Ｉ 生 化 合物的测定 话， 所得待测 物峰面积 的 Ｒ Ｓ Ｄ应不大 于 １ ０ ％。 常见 的测试 仪器 中的零 件会吸 附含 氮碱性 的物质 ，导致 灵敏性 不 ２ ． ３配 制供试 品 ２ ． ３ ． １顶空进样 ： 除非 有特殊 的要求 ， 一 般是用水溶解 。结合供试 品 高， 所 以要使用惰性的零件。如果用溶液直接的测试的话， 要确保其不 防止发生 反应 。 以及溶剂溶解指数等，选取合理的溶液 ，它的浓度要合乎体系测定规 是酸 胜的 ， ２ ． ６ ． ５选取 检测设 备 定。 ２ ． ３ ． ２溶液 直接进样 ： 认真 的称 重供试 品 ， 然后用水 等将其溶解 。结 对含卤族元素的残留溶剂 ， 应使用电子类型的设备 ， 这样能确保灵 合 规定 的溶 剂指数调配溶液 ， 保 证浓度合 乎体 系规定 。 敏 性优 秀。 ２ ． ６ ． ６因为 不一样 的实 验 中心在 测试相 同产 品 的时候 或许 用 到 的 ２ ． ４调配对照 品 认真称量 规定 的溶 剂。 假如使用 的是 水 的话 ， 要按 照规 定的溶解指 措施不一样 ，如果结局处在合格和不合格之间的话 ，最好是使用 内标 数对其溶解 。 假 如是 限度 检查的话 ， 要结合相关 要求 明确对 照品液体 的 法 。 浓度。假如是定量测定的话， 为了确保其结局的精准性 ， 应根据供试品 ２ ． ６ ． ７顶 空平衡 温度 一般应 低 于溶解 供试 品所用 溶剂 的沸 点 Ｉ Ｏ ￣ Ｃ 以下 ， 可 以确保检测设备 的灵敏 陛就行 。针对 那些有着较 高沸点 的溶剂 中残 留溶 剂的实 际残 留量确定对 照品溶液 的浓度 。 ２ ． ５测定 法 来讲， 使 用该措施 的效果 不是很好 。 ２ ． ６ ． ８利用保留值定 是气相色谱中最常用的定 洼方法。体系里的 ２ ． ５ ． １ 第 一法 ： 毛细管 柱顶空进样等温 法 。 该措施适 合用到溶剂 的总 载气流速 以及气 温等的改变都会 作用于保 留数 ， 进 而影响定性 内容 。校 数较 少 ， 而且 级 『 生 差别不 是很大 的时候 。 （ １ ） 色谱 条件 ： 柱温 一般为 ４ ０ ～ １ ０ ０ ￣； 常 以氮气为载 气 ， 流速为 每分 正相对保 留时间 只受柱温和 固定相性 质的影响 ，以此作 为定性分析 参 钟１ ． ０ － － ２ ． Ｏ ｍ ｌ ； 以水为溶 剂时 ， 顶空 瓶平衡 温度为 ７ ０ ￣ ８ ５ ￣ Ｃ ， 顶空瓶平 衡时 数较可靠 。 间为 ３ ０ － － ６ ０ 分钟 ； 进样 口温度 为 ２ ０ ０ ￣ １ ： 。 ３结束语 （ ２ ） Ｎ 定法 ： 取对 照 品溶液 和供 试 品溶 液 ， 分 别 连续进 样不 少 于 ２ 当进行药物合成的时候， 一般会用到许多的溶剂 ， 如今对其开展的 次， 测定待 测峰 的峰面积 。在 鉴定色谱 图里 的不 明溶剂 的时候 ， 可 以对 控制活动一般是确保单一溶剂的残存低于本身的溶度。不过因为如今 的浓 度限度是 以每 日 摄取 量为 １ ０ ｇ 计算 得到 的，但 真实情 况 中该 摄取 比２ ０ １ ０版《 中国药典》 中的相 关内容分析 。 ２ ． ５ ． ２第 二法 ： 毛细管柱顶 空进 样系统程 序升温法 。 此 法适用 于溶剂 数要低于上述数值 ， 因此如今的控制措施也是合理的。 不过如果溶剂较 总数较 多 ， 并 且级 性差别很 高的时候 。 多的话 ， 要分析到多类溶剂的共同作用。 （ １ ） 色谱 条件 ： 如 为非极 性色 谱系 统 ， 柱 温一般 先在 ４ ０ ％维 持 ８ 分 参考文献 １ １ 溶 剂残留课 题研 究组 Ｇ Ｐ Ｈ ７ — １ ． 药物残 留溶 剂研 究技术指 导原 则『 ｓ ］ ． 钟， 再 以每分钟 ８ ｃ Ｃ 的升温速率升至 １ ２ ０ ￣ Ｃ， 维持 １ ０ 分钟； 以氮气为载 ｆ 体， 流 速为每分钟 ２ ． Ｏ ａ ｒ ｌ ； 以水为溶剂 时 ， 顶 空瓶平衡 温度 为 ７ ０ ￣ ８ ５ ￣ Ｃ ， 顶 ｆ ２ １杂质分析课题研 究组． Ｇ Ｐ Ｈ ３ — １ ． 化 学药物 杂质研 究的技 术指导原 则 空瓶 平衡 时 间为 ３ ０ － ￣ ６ ０ 分钟； 进 样 口温度 为 ２ ０ ０ ％； （ ２ ） Ｎ 定法 ： 取对 照 ［ ｓ ］ ． 品溶液 �
药物中有机残留溶剂分析仪 气相色谱仪检测溶剂残留
药物中有机残留溶剂—气相色谱法南京科捷分析仪器有限公司药品中的残留溶剂是指在合成原料、辅料或制剂生产过程中使用或产生的挥发性有机化学物质。
他们在生产过程中未能被全部清除,服用后对人体有毒性和致癌作用,近年来日益引起各方面的重视,在新药研究中要求越来越严格。
我国在1995 年药典也规定7种限制溶剂残留项2 ,在2000 年药典中3 ,根据ICH 的限度要求对这7 种溶剂残留限量进行调整。
ICH 要求检测的溶剂就有69 种,虽然我国药典并未要求按ICH的规定实施,但在新药研究中对于残留溶剂的要求事实上是参照ICH 的规定执行的。
这是SDA 对新药研究从严从高要求的体现,也是与国际接轨,适应WTO规则的需要。
在实际工作中,药品的合成、制剂、消毒工作涉及到的有机溶剂有上百种,气相色谱法是中国药典对有机残留溶剂测定的法定检测方法,也是检测有机溶剂的最常用、最适用的方法之一.1 气相色谱法111 样品的处理一般是将样品溶于适当的溶剂中,能达到的浓度越高越好,以利于残留量极微溶剂的测定。
由于样品复杂多样,为提高样品浓度,所用溶剂也是多种多样。
一般常用溶剂为水、二甲基甲酰胺(DMF) 、二甲亚砜(DMSO) ,也有用四氯化碳4 、二甲基乙酰胺、乙醇5 、正己烷、二氧六环、乙酸、甲氧基乙醇6 、氢氧化钠溶液7 、十二烷基磺酸钠溶液8 等的,不一而足。
大部分为单独使用,也有的混合使用,主要目的就是增加样品溶解度。
所用溶剂与所测溶剂应达到较好的分离。
其中二甲基甲酰胺、二甲亚砜因其溶解范围广,溶解性好,素有“能溶剂”之称,是最常用的溶剂。
需要注意的是,样品一定要溶清,保证所测组分都溶解在溶剂中。
在一段时间里,曾将不溶性样品用水等溶剂超声提取、离心,取上清液进样9 ,10 ,后来发现这样不能提取完全,影响测定结果,不尽合理。
所以在后来的新药报批中均要求将样品溶清后进样,这在溶剂残留测定中是一大发现和进步。
直接进样的样品取一定量溶液进样测定即可,顶空进料的样品需要在进样前保温一定时间,使气液或气固两相达到分配平衡,然后再进行测定。
残留溶剂测定法
残留溶剂测定法药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。
药品中常见的残留溶剂及限度见附表1，除另有规定外，第一、第二、第三类溶剂的残留限度应符合附表1中的规定；对其他溶剂，应根据生产工艺的特点，制定相应的限度，使其符合产品规范、药品生产质量管理规范(GMP)或其他基本的质量要求。
本法照气相色谱法、（通则0521)测定。
色谱柱1.毛细管柱除另有规定外，极性相近的同类色谱柱之间可以互换使用。
(1)非极性色谱柱固定液为100%的二甲基聚硅氧烷的毛细管柱。
(2)极性色谱柱固定液为聚乙二醇（PEG―20M)的毛细管柱。
(3)中极性色谱柱固定液为(35%)―二苯基―(65%)甲基聚硅氧烷、(50%)二苯基―(50%)二甲基聚硅氧烷、(35%)二苯基―(65%)二甲基聚硅氧烷、(14%)氰丙基苯基―(86%)二甲基聚硅氧烷、(6%)氰丙基苯基―(94%)二甲基聚硅氧烷的毛细管柱等。
(4)弱极性色谱柱固定液为(5%)苯基―(95%)甲基聚硅氧烷(5%)二苯基―(95%)二甲基亚芳基硅氧烷共聚物的毛细管柱等。
2.填充柱以直径为0.18～0.25mm的乙二烯苯―乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他适宜的填料作为固定相。
系统适用性试验(1)用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的理论板数一般不低于5000；填充柱的理论板数一般不低于1000。
(2)色谱图中，待测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5 。
(3)以内标法测定时，对照品溶液连续进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比的相对标准偏差(RSD)应不大于5%；若以外标法测定，所得待测物峰面积的RSD应不大于10%。
供试品溶液的制备1.顶空进样除另有规定外，精密称取供试品0.1～lg;通常以水为溶剂；对于非水溶性药物，可采用N, N-二甲基甲酞胺、二甲基亚砜或其他适宜溶剂;根据供试品和待测溶剂的溶解度，选择适宜的溶剂且应不干扰待测溶剂的测定。
药品中残留溶剂的测定及控制
2019.16科学技术创新本文介绍了生物蛋白衬底的性质及制备方法，采用射频磁控溅射方法在低温下基于生物蛋白质衬底成功实现了氧化物半导体ZnO 薄膜材料，并利用XRD 和SEM 表征了薄膜的性质。
项目支持情况：吉林省大学生创新创业训练计划项目2018S1108，吉林省科技厅科技项目20170101111JC ，吉林省教育厅科技项目JJKH20170243KJ。
图2玉米蛋白基ZnO 薄膜的SEM 图1概述药品中的残留溶剂指的是在制作药品以及原料药、辅料和制剂生产过程中使用的有机化合物，在生产工艺中没能完全去除、剩余在药品内的部分。
如果药品内部的残留溶剂高于安全值，对人类身体和周围的环境都会造成一定的危害，因此现阶段药品中残留溶剂的含量以及有效测量控制手段已经越来越受到人们的重视。
1997年7月国际人用药品注册技术协调会将药品生产过程中的常见的有机溶剂按照对人体、环境影响程度的大小，分为了四类，并细致的规定了每种溶剂的残留安全值。
这四类溶剂的划分原则为：第一类为严禁使用的有机溶剂，它们会诱发人类内部癌细胞的发展，被称为人体致癌物，或者会对环境造成严重不可逆的污染。
第二类溶剂是应限制使用的有机溶剂，是指能够导致生物体内发生不可逆毒性反应的试剂。
第三类有机试剂是毒性相对较低的试剂，通常情况下如果药品内存在少量的此类试剂不会对人体造成危害影响。
第四类是尚缺少相关毒性资料的试剂。
随着科学技术水平的不断发展，人们对试剂的划分已经进行了数次分类修改，当前药品残留溶剂的控制已成为药品质量控制的重要组成部分，本人将以药品残留溶剂控制的难点作为切入点，对药品残留溶剂的检测理念和方法进行必要的分析。
2药品残留溶剂控制的难点一般来说同一品种的药品中含有的残留溶剂具有很大的不确定性，这种不确定性是药品残留溶剂控制和检测的难点之一。
由于药品中残留溶剂是根据药品生产中使用的有机溶剂确定的，因此即便同一种药，在不同等生产厂家生产，其中残留的溶剂也存在差异，因此对于这种情况，无法对某一种药品规定出统一的检测方法和安全范围，给检测工作带来了一定的难度。
药物合成过程中有机溶剂残留量的检测
表 ４ ３批 样 品 有 机 溶 剂 残 留 量 测 定 的 峰 面 积
分 别 取 上 述 溶 液 １ Ｉ 样 ， 定 其 峰 高 。 以 信 进 测
噪 比 ３：１ 算 各有 机 溶 剂 的 最小 检 测 限 。 计
计 算 公 式 为 ： Ｉ＝３ × ／ ＤＦ Ｄ Ｎ
式中， Ｄ—— 检 测 量 ； Ⅳ—— 基 线 噪 音 ； —— 有 机
１ 成 都科 技大 学 分析 化学 教 研室 编． 析化 学 手册 ． ４分 分 第
２ 周海 钧 主译． 品注 册 的 国际技术 要求 ． 量 部 分． 京 ： 药 质 北
人 民 卫 生 出版 社 ，０ ０ ８ ￣ ９ ． ２ ０ ． ７ ０
Ｐｒ ｃ ｉ ｅ ｏｆ Ｃｈｅ ｋｉ ｅ ｈｏ ｏｆ Ｓ ｅ ｍ ａ ｎｄ ｒ ｉ ｈｅ ａ ｔｃ ｃ ｎｇ Ｍ ｔ ｄ ｏｌ ｎｔ Ｒｅ ｖ ｉ ｅ ｎ ｔ Ｐｒ ｅ ｓ ｏ ｒ ｎｉ ｙ ｈｅ ｉ ｏｃ ｓ ｆ Ｏ ｇａ ｃ Ｓ ｎｔ ｓ ｓ
５ ２ ． ０ｍＬ， 别 加 二 甲基 亚 砜 溶 剂 稀 释 至 １ ０ｍＬ。 分 ０
表 １ 乙醇 、 乙蘑 、 氯 甲 烷 线 性 关 系 考 察 结 果 二
乙醇
１ ４ ３ ５ ８ ６ １ ５ ４ １ ８ ０ １５ ９ ８ ２ １ １５ ｌ８ ４ ２ １ ５ ６ ４ ７ ８ ６ ２ ． ４， １ ５ ． ６， ４ ３ ． ７， Ｏ ８ ． ４， ３ ６ ． ６
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第 ２ 卷第 ４ ２ 期
许 同桃 ， 物合 成过 程 中有机 溶 剂残 留量 的检 测 药
册 ． 京 ： 学 工 业 出版 社 ，９ １ ６ １ ． 北 化 １８．～ ９
残留溶剂的测定方法
• 考察指标：分离度（≥1.5）、理论塔板数（≥5000）、 和拖尾因子（≤2.0）
• 4.系统适应性
• 每次分析前应进行系统适应性的考察
• 考察方式：混合对照品溶液连续进样5~6针 （顶空进样法和直接进样法的不同）。
• 定义:药物中的残留溶剂（ Residual Solvent ）系指 在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使 用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。
• 研究的性质：杂质研究的范畴 • 研究的目的:控制药物质量，保障病人用药安全。 • 在原料药合成中，溶剂的选择是合成中非常关键的因
素,选择适当的溶剂可提高得率或决定药物的性质，如 晶型、纯度和溶解度，从而影响疗效。同时，在某些 特定的制剂生产中，其工艺也要求使用特定的溶剂。 • 但由于溶剂没有疗效，故所有残留溶剂均应尽可能除 去，以使产品符合其规范、GMP或其他基本的质量要 求。
▪ 优点：简便、无需专用设备，绝对进样量大
▪ 缺点：污染进样口及柱子，溶剂峰响应大，样品分解 产物或溶剂杂质峰可能影响测定，对溶剂的纯度要求 高
• 3.检测器
在药物溶剂残留检查中，一般选用氢焰离子化检 测器（Hydrogen Flame Ionization Detector，FID），该 检测器对烃类、芳烃类化合物有普遍响应，适合于分 析多种溶剂残留，灵敏度高，是最常用的气相检测器 之一。但该检测器对卤代烃类溶剂响应较差，检测灵 敏度不高，在检测四氯化碳、二氯乙烷、氯仿等浓度 限量较低的溶剂时可能会达不到仪器的检测器，因而 在这些溶剂的检测时一般不建议使用该检测器。 电 子捕获检测器（Electron Capture Detector， ECD） 是 电负性有机化合物的专属检测器，对含X、S、O、 NO2、CN等溶剂有较高的检测灵敏度，微量ECD检测 器的检出水平可达fg级，较适合分析卤代烃等溶剂。 多数情况下建议采用该检测器检测四氯化碳、二氯乙 烷、氯仿等溶剂。
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药物中有机残留溶剂的测定方法概述张俊伟(天津药物研究院制剂研究及工程中心 天津 300193)摘 要 本文综合介绍各种药物中残留溶剂测定的多种方法,包括气相色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法剂及多种方法的联合应用等。
关键词 药物 残留溶剂 测定方法药品中的残留溶剂是指在合成原料、辅料或制剂生产过程中使用或产生的挥发性有机化学物质。
他们在生产过程中未能被全部清除,服用后对人体有毒性和致癌作用,近年来日益引起各方面的重视,在新药研究中要求越来越严格。
从1994年起,IC H(人用药物技术要求国际协调会议)着手编撰关于溶剂残留量的指导原则。
1997年美国FDA根据此原则发布题为 杂质:残留溶剂(Q3C)的指导原则(草案) 。
IC H 程序委员会广泛征求意见后通过此原则,欧盟、美、日三方签字后正式生效1。
我国在1995年药典也规定7种限制溶剂残留项2,在2000年药典中3,根据IC H的限度要求对这7种溶剂残留限量进行调整。
IC H要求检测的溶剂就有69种,虽然我国药典并未要求按IC H的规定实施,但在新药研究中对于残留溶剂的要求事实上是参照IC H的规定执行的。
这是SD A对新药研究从严从高要求的体现,也是与国际接轨,适应W TO规则的需要。
在实际工作中,药品的合成、制剂、消毒工作涉及到的有机溶剂有上百种,气相色谱法是中国药典对有机残留溶剂测定的法定检测方法,也是检测有机溶剂的最常用、最适用的方法之一,但其他现代分析手段的应用,比如比色法、HPLC法、核磁共振法、热重分析法以及多种方法联合应用,是对气相色谱法的补充,也是残留溶剂测定新方法有益尝试。
最近十多年,残留溶剂测定的文献报道越来越多,为加强学习,也为使初学者对残留溶剂的测定方法有一个全面的了解,作者查阅各种文献,结合自己的工作经验稍做总结,对残留溶剂的测定方法作一简要介绍,希望能给读者一点启示。
1 气相色谱法1 1 样品的处理一般是将样品溶于适当的溶剂中,能达到的浓度越高越好,以利于残留量极微溶剂的测定。
由于样品复杂多样,为提高样品浓度,所用溶剂也是多种多样。
一般常用溶剂为水、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(D MSO),也有用四氯化碳4、二甲基乙酰胺、乙醇5、正己烷、二氧六环、乙酸、甲氧基乙醇6、氢氧化钠溶液7、十二烷基磺酸钠溶液8等的,不一而足。
大部分为单独使用,也有的混合使用,主要目的就是增加样品溶解度。
所用溶剂与所测溶剂应达到较好的分离。
其中二甲基甲酰胺、二甲亚砜因其溶解范围广,溶解性好,素有 万能溶剂 之称,是最常用的溶剂。
需要注意的是,样品一定要溶清,保证所测组分都溶解在溶剂中。
在一段时间里,曾将不溶性样品用水等溶剂超声提取、离心,取上清液进样9,10,后来发现这样不能提取完全,影响测定结果,不尽合理。
所以在后来的新药报批中均要求将样品溶清后进样,这在溶剂残留测定中是一大发现和进步。
直接进样的样品取一定量溶液进样测定即可,顶空进料的样品需要在进样前保温一定时间,使气液或气固两相达到分配平衡,然后再进行测定。
对于液体样品来说,可以将对照品定量加入到样品中制成对照品溶液,与样品溶液同时进样,要求样品溶液的残留溶剂峰面积的两倍不得超过对照峰面积。
蒋海松、关大卫用此法测定壬苯醇醚中二恶烷的残留量11,何培孝、樊庆银测定壬苯醇醚中二氧六环的限量12,结果与部颁标准一致,相比而言方法更加简便、准确、可靠。
有的样品需要经过萃取、吹扫-捕集等富集,浓缩方法处理,使待测组分达到一定的浓度后再进样测定,可以使结果更准确,一般用于微量残留溶剂或限度要求较高的溶剂如苯的测定。
蔡春、关景华用吹扫-捕集方法13,测定硬膏剂中甲苯残留量。
具有自动化程度高,回收率好等优点。
陈晓莉在吉非罗齐中残留醚化物及其它杂质的定量分析中,先将样品溶解于氢氧化钠溶液中,再用正己烷提取,取得满意的结果14。
1 2 定量方法用色谱峰定量的标准技术分为四种15,分别为面积归一化法、标准物添加法、外标法、内标法。
前10两种方法很少见到,一般用后两种方法。
中国药典2000年版规定两种方法均可,美国药典24版(US PXXIV)16、英国药典2000年版(BP2000)17均要求用外标法。
内标法不要求所有组分都完全分离、流出和检测出来。
它只需将要分析的峰与内标物完全分离即可。
内标物必须符合下列要求:在样品中原来没有内标物的存在;内标物必须与所有样品组分完全分离;内标物的流出时间应尽量接近待分析组分;内标物应与待分离的物质具有相近的浓度、物化特性和检测器的响应值;内标物必需稳定、不起化学反应、纯度高、挥发性应很低以允许长期保存并且在注样过程中损失最小。
待测样品可以是一个或一个以上。
本方法可以消除仪器与操作造成的误差。
外标法是用待测组分的峰面积和峰高与一系列已知的(或外加的)标准样相比较。
标准浓度与待测组分浓度的浓度量级应相同。
样品与标准品进样浓度与色谱条件应完全一致,标准曲线的浓度范围应包括全部样品中待测溶剂的浓度。
标准曲线应由同样体积的标准物作出。
一般适用于进样重复性较好的样品。
1 3 进样方式气相色谱法的进样方式一般分顶空进样和直接进样两种。
顶空进样又分为溶液顶空和固体顶空。
前者就是将样品溶解于适当溶剂中,置顶空瓶中保温一定时间,使残留溶剂在两相中达到气液平衡,定量取气体进样测定。
固体顶空就是直接将固体样品置顶空瓶中,置一定温度下保温一定时间,使残留溶剂在两相中达到气固平衡,定量取气体进样测定。
在文献报道中,溶液顶空应用较多,而固体顶空应用较少。
一般进样体积2mL以下。
近年来顶空进样法的应用越来越多,其优点是可以使残留溶剂气化后进样,浓度与溶液相比有很大增加。
进样室在较低温度下操作,可避免组分分解。
顶空进样也可大大减少溶解样品的溶剂和样品本身对色谱系统带来的干扰和污染,缩短分析时间,增加柱子寿命,而且提高样品的重现性18。
但是顶空进样只对那些蒸汽压足够高以至他们在顶空中的浓度大到足以使检测器有响应的物质才能产生色谱峰。
加大进样量虽可以增加较不挥发物质的量,但会带来峰变宽或重叠、分离度变差等问题,所以一般只应用于沸点100 以下的低沸点溶剂19。
另外,一般顶空进样都需要采用自动的顶空进样器,费用昂贵,成本较高。
董英、战祥友自制顶空装置20,顶空法测定胆红素中乙醇和氯仿的残留量,孟德贤、郭向勇用自制的顶空瓶测定合成药佐匹克隆中的残留溶剂21,测定结果满意,可以借鉴。
吕志华等分别用溶液顶空和固体顶空的方法比较22,测定几丁糖酯中的乙醇、丙酮的溶剂残留量,两种方法测定结果一致,经显著性检验无显著差别。
在本试验中顶空进样法检测限低,精密度高,主要是因为以水为溶剂进行的顶空进样受平衡温度波动的影响较大。
王伟、韩光智用气固顶空法测定伊索拉啶中乙醇的残留量,方法可靠准确23。
固体顶空不受样品溶解度影响,适合蒸汽压高、沸点低、含量低的残留溶剂且不易溶解的样品。
在用毛细管柱时,一般又选择分流法进样。
分流法是指在气化室出口分两路,绝大部分放空,极小部分进柱子。
这两部分比例叫分流比。
又分为动态进样和静态进样,一般应用较多的是动态进样24。
溶液直接进样是指将样品定量溶解于适当溶剂中,准确量取适量注入气相色谱仪测定溶剂残留量的进样方法。
进样体积一般为2 L以下。
本法为通常采用的方法,适用于受热不易分解的样品,约占发表文章总数的四分之三。
溶液直接进样的方法绝对进样量大,可以弥补检测器灵敏度的不足,操作也简便易行。
最大的缺点是污染进样口和色谱柱,需要及时清洗。
另外由于进样量大,除溶剂峰响应值大,分析时间较长外,还有各种分解产物和溶剂杂质峰干扰测定。
一般需选用程序升温快速除去溶剂并选用纯度较高的溶剂。
但在毛细管柱的应用中,本方法的长期使用有可能堵塞毛细管柱口而使色谱柱无法正常使用,姚倩、李章万、张强等在建立大口径毛细管柱测定药物中有机溶剂残留方法的研究中25,利用自制的玻璃二通接口在分析柱前接一根3~5m长的空心未涂层大口径毛细管柱作为前柱,使样品中难挥发成分保留在前柱中,避免了它们对分析柱的污染,当色谱峰形变差时,更换前柱。
创造性的解决这个问题。
中国药典2000年版、美国药典24版(US PXXI V)、英国药典2000年版(BP2000)规定溶液直接进样与顶空进样两种方法均可。
1 4 色谱柱的选择气相色谱柱是样品中残留溶剂测定的理论与物质基础,所以对色谱柱的选择也是最关键的步骤。
气相色谱柱可分为填充柱和毛细管柱两大类,其中填充柱又分玻璃柱和不锈钢柱;毛细管柱按柱11口直径一般又有0 53mm和0 32mm两种规格,前者又叫大口径毛细管柱,柱容量大,在残留溶剂测定中应用较多。
由于毛细管柱造价高,中国药典2000年版结合中国国情,用填充柱测定,美国药典24版(USPXXIV)和英国药典2000年版(BP2000)要求用毛细管柱。
从填料来分,填充柱一般选用高分子多孔小球系列(GDX101,GDX102,GDX103,GDX301,GDX401)直接测定。
GDX的表面积大(1~500m2/g),有一定的机械强度,可在250 以下应用。
无论极性还是非极性物质,在这种固定相上的拖尾现象都降到最低限度;它和羟基的化合物亲和力极小,可使水、醇类物质大大提前流出柱子;氧化氮、HCN、NH3、SO2、COS等活泼气体可以很快流出,不干扰测定,这些优点对残留溶剂测定来说是比较理想的。
这类填料的应用约占填充柱测定残留溶剂的文献的90%。
GDX既是性能优良的吸附剂,能直接作为气相色谱的固定相,直接用于气固分析,也能作为担体涂布PEG系列(PEG20M,PEG2M,PEG10000,PGE5000), DEGS(丁二酸二乙二醇酯),DG(缩二甘油),丙二醇乙二酸聚酯,OV-225,SE52(苯基甲基硅酮)等固定液,用于残留溶剂测定,当然担体的选择也有多种,如6201、硅藻土、Porapark Q等。
在柱子的选择上,一般选用GDX系列就能解决问题,但对于某些样品,就需要用某些固定液来进行分离才能满足要求,如二甲基甲酰胺26。
选择原则是相似相溶,对于醇、胺等能形成氢键的物质,除上面介绍的GDX外,也可选择极性固定液。
另外也可将不同极性的固定液混合涂布在担体上进行分离27。
毛细管柱的种类也很多,如OV-101,SE-54, CP-Sil-5CB28,AC-20,SE-30,HP-5,HP-20M, 100%二甲基硅氧烷,AT-624,TFAP等,一般长10~ 30m不等。
填充柱价格便宜,易得,一直占据溶剂残留量检测的主导地位,只是柱效较低,只有500~1000左右,分离复杂样品的能力差。
杨绍英、陈志华在测定心痛定中两种残留溶剂时就分别用两种色谱条件,比较麻烦29。
但填充柱仍然是我们的首要选择。