单核增生李斯特氏菌检测综述
核增生李斯特氏菌检测概述ppt课件
Api® Listeria或BAM等方法中的传统 鉴定中用到MICRO-
生化反应;协同溶血
ID® 、Api®、
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致病机理
• 单增李氏菌的抗原结构与毒力无关,它的致病性
与毒力机理如下: 1、寄生物介导的细胞内增生,使它附着及进入肠
细胞与巨噬细胞; 2、抗活化的巨噬细胞,单增李氏菌有细菌性过氧
化物歧化酶,使它能抗活化巨噬细胞内的过氧物 (为杀菌的毒性游离基团)分解; 3、溶血素,即李氏杆菌素O,可以从培养物上清液 中获得,有α和β两种,为毒力因子。
血清学检验;小鼠毒力试验*
筛选、鉴定都可以使 用快速方法
USDA
UVM (30±2℃,
22±2h)
FB (35±2℃, 26-48±2h)
MOX (35±2℃,26-
48±2h)
筛选用的快速方法必
初步鉴定:纯菌菌落形态;典型运动; 须经过确认后才可使
生化鉴定:MICRO-ID® Listeria或
用
30℃ 4hr
加入萘啶酮酸、盐酸吖锭黄、放线菌酮
30℃ 24hr和48hr
划线接种OXA平板
科玛嘉李氏菌显色培养基
35℃ 24hr-48hr
TSA-YE分纯
35℃ 24hr
35℃ 24-48hr
过氧化氢酶试验、革兰氏染色、溶血试验、糖发 酵试验(木糖、鼠李糖)
35℃ 18-24hr
API Listeria
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动 力 试 验
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血平板
单核增生李斯特氏 菌 ATCC 19117
36h,35℃培养
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血平板
无害李斯特氏菌 ATCC 33090
36h,35℃培养
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单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定
单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定引言单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是一种常见的食源性致病菌,可引起严重的食物中毒和感染疾病。
为了及时诊断和控制该菌的传播,对其进行准确的生化鉴定非常重要。
本文将介绍单核细胞增生李斯特氏菌的生化鉴定方法及相关实验步骤。
实验材料与方法实验材料•单核细胞增生李斯特氏菌培养基•Listeria Enrichment Broth(LEB)•Listeria Agar Base(LAB)•乳清素蛋白水解物培养基(Trypticase Soy Broth,TSB)•乳清素蛋白水解物琼脂培养基(Trypticase Soy Agar,TSA)•碱性亮绿液实验方法1.取一份食物样品,如肉类、奶制品等,加入适量LEB中,并在37℃孵育24小时。
2.取0.1ml培养液,在TSB中进行预培养,37℃孵育24小时。
3.从TSB中取出适量菌液,用胶体金法进行菌落计数,并将菌液稀释至10-4倍。
4.取适量的稀释液分别接种于LAB和TSA琼脂培养基上,并在37℃孵育24小时。
5.观察菌落形态、颜色等特征,并记录下来。
生化鉴定实验单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定步骤如下:1.琼脂凝胶双扩散试验:将单核细胞增生李斯特氏菌抗原与相应的抗血清共同扩散于琼脂凝胶板上,观察是否发生免疫反应。
若有明显的线条或沉淀形成,则说明存在抗原-抗体反应,可以初步判断为单核细胞增生李斯特氏菌。
2.碱性亮绿液试验:将培养基中的单核细胞增生李斯特氏菌与碱性亮绿液接触,观察是否产生绿色荧光。
若产生绿色荧光,则说明菌株具有单核细胞增生李斯特氏菌的特性。
3.单核细胞增生李斯特氏菌脂多糖(LPS)鉴定:采用酚-硫酸法或酚-硝基苯法,将培养基中的单核细胞增生李斯特氏菌进行LPS提取,然后进行比色反应。
若出现红色或紫色沉淀,则说明存在LPS,可以进一步确认为单核细胞增生李斯特氏菌。
结果与讨论通过上述实验方法,我们可以对食物样品中的单核细胞增生李斯特氏菌进行生化鉴定。
单增李斯特氏菌能力验证结果与分析
I FOOD INDUSTRY I 75单增李斯特氏菌能力验证结果与分析得出现“假阳性”的结果。
一旦实验室出现“假阳性”“假阴性”“与参考值范围不符”等情况时,实验室的负责人员应该针对整个实验室进行溯源。
从人员、环境、设备、培养基和试剂等各个方面进行详细地追溯和分析,从而纠正不利因素,确保检验结果的科学性和准确性。
我院于2020年5月底参加了由中国食品药品检定研究院组织的“NIFDC-PT-248 食品中单增李斯特氏菌检出能力验证”试验,按照后期返回的结果来看,检验结果为“满意”,现将具体试验情况汇报如下。
1.材料与方法1.1样品实验室共收到2份单增李斯特氏菌样品,样品为白色球状、真空包装于西林瓶,样品编号分别为FC02220011、FC02220030;2袋奶粉样品,每袋重量为25g ,编码与菌球编码对应。
1.2仪器与材料A C 2-6S 1型E S C O 生物安全柜(新加坡艺思高公司);GR-85致微高压灭菌器(厦门致微公司);MJ-250-Ⅲ型霉菌培养箱(上海跃进);HH.B11.600BY 型恒温培养箱(上海跃进);VITEK2 Compact 30型全自动微生物鉴定及药敏分析系统(法国梅里引言单核细胞增生李斯特氏菌是普遍存在于自然环境中的革兰氏阳性、嗜冷、兼性厌氧细菌。
同时,也是一种食源性的人畜共患病的病原菌,欧美国家曾多次暴发由于食用了受单增李斯特氏菌污染的肉制品、奶制品、蔬菜及水果等而引发的严重的食物中毒事件。
在《GB 29921-2021 食品安全国家标准 食品中致病菌限量》中,对乳制品、肉制品(包括熟肉制品和即食生肉制品)、水产制品、即食果蔬制品、冷冻饮品均有五份样品中均不得检出单增李斯特氏菌(n=5,c=0,m=0)的规定;同样,在2022年3月7日实施的《GB 31607-2021 食品安全国家标准 散装即食食品中致病菌限量》中“部分或未经热处理散装即食食品”:单核细胞增生李斯特氏菌限量为0/25g (mL )。
食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测分析
食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测分析作者:***来源:《食品安全导刊》2022年第03期摘要:目的:分析食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测结果,以及时发现食品安全隐患,为食品安全监管提供参考依据。
方法:严格按照《全国食源性致病菌监测工作手册》中的单核细胞增生李斯特氏菌检验标准,对某市2021年1—12月定期采样的10类常用食品进行单核细胞增生李斯特氏菌检测,分析其阳性检出率。
结果:897份10类常用食品中,检出单核细胞增生李斯特氏菌36份,阳性检出率为4.01%,结论:食品中存在单核细胞增生李斯特氏菌污染的风险,其中以凉拌菜及冷藏食品的污染风险最高,应加强该方面的防控,确保食品安全。
关键词:单核细胞增生李斯特氏菌;食品安全;检测Detection and Analysis of Listeria Monocytogenes in FoodSHI Hongxia(Ulanqab Center for Disease Control and Prevention Inner Mongolia, Ulanqab 012000,China)Abstract: Objective: To analyze the detection results of Listeria monocytogenes in food,find the hidden dangers of food safety in time, and provide reference basis for food safety supervision. Methods: The detection of Listeria monocytogenes in the national manual for the monitoring of foodborne pathogens shall be strictly followed. According to the test standard, 10 kinds of common foods regularly sampled in a city from January to December 2021 were tested for Listeria monocytogenes, and the positive detection rate was analyzed. Conclusion: There is a risk of Listeria monocytogenes contamination in foods, among which cold dishes and refrigerated foods have the highest risk of contamination. Prevention and control in this regard should be strengthened to ensure food safety.Keywords: listeria monocytogenes; food safety; testing单核细胞增生李斯特氏菌广泛存在于土壤、蔬菜、粪便及多数食品中,该病菌对低温环境具有较好的耐受性,在5 ℃时可大量繁殖,当该病菌进入生物表层后会形成生物膜,并能提高对理化因素的抵抗力,是食源性疾病的主要致病菌之一,可通过粪便或食物进行传播。
食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验能力验证结果分析
食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验能力验证结果分析作者:彭怡许红玉黄厚强张曲来源:《中国食品》2024年第02期单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM),简称为单增李斯特氏菌,是一种需氧兼性厌氧的食源性病原菌、革兰氏阳性短杆菌,广泛存在于自然界中。
其中,奶制品、肉制品、水产品、海产品、禽类食品、蔬菜等容易受到该菌污染,误食用含有该菌的新生儿、老年人等免疫力低者易患脑膜炎、败血症,孕妇则易发生早产或流产,致死率高达20%-30%,给食品安全造成严重威胁。
近年来,国内外关于单增李斯特氏菌的主要检测方法包括国标法、免疫学检测法、生物传感器检测法等,这些方法各有优缺点。
能力验证通过对实验室间的检验能力进行比对,评价参加者的能力,是证明实验室检验能力的重要方式之一。
资阳市食品药品检验检测中心生物检验科参加了由四川省食品检验研究院组织的“食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验能力验证”,采用国标法《GB 4789.30-2016 食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》第一法对样品进行定性检验。
一、材料与方法1.样品。
由四川省食品检验研究院提供3份单核细胞增生李斯特氏菌样品,每份样品包括一瓶白色球状西林瓶装和一袋质量约为25g的奶粉,样品编号分别为LM-029、LM-177和LM-307。
2.菌种。
单增李斯特氏菌ATCC 19115、斯氏李斯特氏菌ATCC 35967、伊氏李斯特氏菌ATCC 19119、英诺克李斯特氏菌ATCC 33090,均由广东环凯生物科技有限公司提供。
3.主要试剂。
脑心浸出液肉汤(BHI)、李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础、PALCAM 琼脂、李斯特氏菌显色培养基、SIM生化管、HBI单增李斯特氏菌生化鉴定条(GB),购自青岛高科技工业园海博生物技术有限公司;李斯特氏菌显色培养基、PALCAM琼脂、含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE)、血平板、革兰氏染色液试剂盒、3%过氧化氢、单增李斯特氏菌干制生化鉴定试剂盒,购自北京陆桥技术股份有限公司。
单核细胞增生李斯特菌检测技术是什么
龙源期刊网 单核细胞增生李斯特菌检测技术是什么作者:周林来源:《学习与科普》2019年第31期单核细胞增生李斯特菌包含在食源性致病菌范围当中。
就目前来看,免疫学检测方法和分子学检测方法是很多单增李斯特菌检测方法中使用最频繁的两种方法。
免疫学检测方法具有操作简便、时间短的特点,然而其非常依赖高特异性的抗体,结果容易出现失误,需要对检测结果进行详细判定。
和免疫学检测法相比,分子学检测方法具有灵敏度高、省时省力等特点,然而分子学检测方法在使用过程中需要较多的操作经验,同时不能在大批量检测中应用。
一、单核细胞增生李斯特菌概述(一)生物学特征单核细胞增生李斯特菌是一种革兰阳性短杆菌,其对营养的需求量较少,生长温度通常最低不能低于2摄氏度,最高不能超过42摄氏度,同时可以在弱酸、弱碱和6.5%NaCl肉汤中得到快速成长,并且能够形成β-溶血。
在其生长过程中还可以发酵出很多种糖类物质,按照O抗原以及H抗原能够分解成十三中血清型,其中1/2a与4b这两种类型在致病菌株中的占比最大。
(二)污染源及流行病学单核细胞增生李斯特菌是自然界中常见的一种致病菌,抗冻能力非常强,其主要传播路径是通过粪-口这种方式进行。
健康人粪便中的单核细胞增生李斯特菌携带率通常为0.6%至16.0%,然而奶制品、水产品以及家禽中均携带相应的单核细胞增生李斯特菌。
另外,单核细胞增生李斯特菌通过胎盘、黏膜、性以及产道鞥部位都可以进入到体内,从而导致感染。
单核细胞增生李斯特菌的致病性与其具有的毒作用、宿主的免疫状况以及年龄具有密不可分的关系,宿主的细胞免疫可以有效的解除单核细胞增生李斯特菌中存在的病菌。
各种免疫力弱的人群都属于易感人群,比如新生儿、四十岁以上的成人等。
健康成人感染后会出现和感冒相似的情况,然而其他免疫力功能较低的人可能会出现更加严重的症状,乃至会直接死亡。
二、相关检测技术(一)聚合酶链反应技术就目前来看,聚合酶链反应技术得到了广泛的普及与运用。
乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌能力验证结果与分析
乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌能力验证结果与分析单核细胞(monocytes)是一类存在于人体血液和组织中的白细胞(leukocytes)。
它们作为免疫系统中的重要成分,具有很强的吞噬能力和免疫调节功能。
李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是一种革兰氏阳性杆菌,它能够引起严重的人类食物中毒,尤其是婴儿和免疫缺陷患者。
乳粉作为婴幼儿的主要食物,其安全性尤为重要。
为了对乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌的能力进行验证,可以进行以下步骤:1.材料准备:-乳粉样品- 特定培养基(如Listeria Enrichment Broth)-李斯特氏菌(已知培养物)-离心管-培养皿2.试验步骤:a.预处理乳粉样品:-取适量的乳粉样品,加入适量的特定培养基-将混合物在摇床上以适当速度摇匀-使用离心机将样品离心,以除去悬浮的杂质b.培养李斯特氏菌:-取一定量的已知培养物,加入特定培养基中-在适当的温度和湿度下,培养李斯特氏菌至适宜的生长期c.接种乳粉样品:-取适量的乳粉样品,加入特定培养基中-添加已培养的李斯特氏菌(适量)到乳粉样品中-使混合物充分混合d.孵化和观察:-将接种混合物接种到适当的培养皿中-将培养皿置于适当的环境中(温度、湿度等)-在一定时间内观察培养皿中是否有李斯特氏菌的生长3.结果与分析:通过观察培养皿中的生长情况,可以得出以下结论和分析:-如果培养皿中出现了李斯特氏菌的生长,说明乳粉样品中存在单核细胞增生的李斯特氏菌能力。
-如果培养皿中未观察到李斯特氏菌的生长,说明乳粉样品中不存在单核细胞增生的李斯特氏菌能力。
-结果应与对照组进行比较,以确定是否存在显著差异。
需要注意的是,这是仅仅通过培养方法进行初步验证,不能判断乳粉样品的感染风险和食用安全性。
为了更准确地评估乳粉中李斯特氏菌的存在和潜在传播风险,还需要进一步的实验和分析方法,如PCR检测、测定菌群数量等。
同时还应结合临床和流行病学调查数据,做出综合评估和判断。
单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定
单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定
李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是一种革兰氏阳性杆菌,是一种常见的细菌性食物中毒病原体。
单核细胞增生组织均为生化鉴定的一种常见方法。
以下是李斯特氏菌生化鉴定的一些特征:
1. 嗜冷性:李斯特氏菌生长适宜温度为2-45℃,菌株能够在4℃下生长,并在冷藏食品中繁殖。
2. β-溶血素产生:李斯特氏菌能够产生β-溶血素,可以通过血琼脂(Blood agar)培养基上的溶血环进行观察。
3. 乳酸发酵:李斯特氏菌是一种革兰氏阳性乳酸菌,能够进行乳酸发酵。
可以使用乳糖发酵基质(Lactose fermentation medium)进行鉴定,如果产生乳酸则为阳性。
4. 半胱氨酸脱羧:李斯特氏菌具有半胱氨酸脱羧酶活性,可以将半胱氨酸转化为硫代氨基酸。
可使用兰氏差异培养基(LDC medium)进行鉴定。
5. 半乳糖酶活性:李斯特氏菌具有半乳糖酶活性,可以将乳糖转化为半乳糖。
可使用半乳糖发酵基质(Rhamnose fermentation medium)进行鉴定。
此外,李斯特氏菌还可以进行PCR扩增目标基因进行鉴定,
如16S rRNA基因、Internal Transcribed Spacer(ITS)区域等。
需要指出的是,单纯进行生化鉴定可能存在一定的误判率,结合其他检测方法可以提高鉴定的准确性。
此外,由于李斯特氏菌在环境中广泛存在,饮食中也常常带菌,所以对于临床病例的确诊还需要结合患者的临床表现、流行病学调查等综合分析。
单核增生李斯特氏菌检测概述
单核增生李斯特氏菌检测概述单核增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是一种革兰氏阳性的致病菌,能够在低温下生存繁殖,并在恶劣环境中形成生物被膜,使其对抗不良条件。
该菌可引起人类的李斯特菌病(Listeriosis),也是一种可以通过食品传播的重要病原体。
李斯特菌病在免疫功能低下的人群中很容易引起严重感染,包括孕妇、老年人、免疫抑制患者和新生儿。
检测单核增生李斯特氏菌的方法主要包括传统的培养方法和现代的分子生物学方法。
1.传统培养方法传统的培养方法是检测单核增生李斯特氏菌的主要方法之一、常用的培养基包括PALCAM(Polymyxin, Acriflavine, Lithium chloride and Cycloheximide)和OXOID Listeria Selective Agar等。
培养温度通常在30-37℃之间,因为单核增生李斯特氏菌可以在低温下生长。
在培养过程中,从食品样品或其他可能受污染的样品中提取菌落,并在培养基上进行培养。
培养时间通常为1-2天,培养过程中需要注意去除其他菌落的干扰。
2.分子生物学方法分子生物学方法是现代检测单核增生李斯特氏菌的常用方法,主要包括聚合酶链反应(PCR)和实时荧光定量PCR等。
这些方法的优势在于其高度敏感性和特异性。
通过检测单核增生李斯特氏菌特有的基因或序列,可以快速准确地鉴定与检测其存在。
3.培养与分子生物学相结合的方法为了更好地检测单核增生李斯特氏菌,有些方法将传统培养与分子生物学相结合。
这种方法通常先进行培养,然后使用PCR或实时荧光定量PCR等技术进行进一步检测和鉴定。
这种方法较为耗时,但能够进一步提高检测的准确性。
需要注意的是,由于单核增生李斯特氏菌能够在低温下生存,因此在食品或样品中的检测非常重要。
常见的食品样品包括生肉、海鲜、冷冻食品、奶制品等。
对于食品企业来说,建立完善的食品安全管理体系和进行规范的监测是防止单核增生李斯特氏菌传播的重要措施。
食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测分析
食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测分析石红霞(内蒙古乌兰察布市疾病预防控制中心,内蒙古乌兰察布 012000)摘 要:目的:分析食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测结果,以及时发现食品安全隐患,为食品安全监管提供参考依据。
方法:严格按照《全国食源性致病菌监测工作手册》中的单核细胞增生李斯特氏菌检验标准,对某市2021年1—12月定期采样的10类常用食品进行单核细胞增生李斯特氏菌检测,分析其阳性检出率。
结果:897份10类常用食品中,检出单核细胞增生李斯特氏菌36份,阳性检出率为4.01%,结论:食品中存在单核细胞增生李斯特氏菌污染的风险,其中以凉拌菜及冷藏食品的污染风险最高,应加强该方面的防控,确保食品安全。
关键词:单核细胞增生李斯特氏菌;食品安全;检测Detection and Analysis of Listeria Monocytogenes in FoodSHI Hongxia(Ulanqab Center for Disease Control and Prevention Inner Mongolia, Ulanqab 012000, China)Abstract: Objective: To analyze the detection results of Listeria monocytogenes in food, find the hidden dangers of food safety in time, and provide reference basis for food safety supervision. Methods: The detection of Listeria monocytogenes in the national manual for the monitoring of foodborne pathogens shall be strictly followed. According to the test standard, 10 kinds of common foods regularly sampled in a city from January to December 2021 were tested for Listeria monocytogenes, and the positive detection rate was analyzed. Conclusion: There is a risk of Listeria monocytogenes contamination in foods, among which cold dishes and refrigerated foods have the highest risk of contamination. Prevention and control in this regard should be strengthened to ensure food safety.Keywords:listeria monocytogenes; food safety; testing单核细胞增生李斯特氏菌广泛存在于土壤、蔬菜、粪便及多数食品中,该病菌对低温环境具有较好的耐受性,在5℃时可大量繁殖,当该病菌进入生物表层后会形成生物膜,并能提高对理化因素的抵抗力,是食源性疾病的主要致病菌之一,可通过粪便或食物进行传播。
食品中单核增生细胞李斯特氏菌快速检测研究
食品中单核增生细胞李斯特氏菌快速检测研究单核细胞增生李斯特氏菌在病原学上作为一种人畜共患和食源性疾病的致病菌已得到世界范围普遍的公认。
近年来,如何分离和鉴定食品中单核细胞增生李斯特氏菌已成为研究热点。
本文结合近十年的各种该病菌的快速检测方法作了系统综述,介绍了针对该病菌的快速检测方法,如显色培养基快速检测方法、酶联免疫试验检测方法、结合单克隆抗体技术的免疫学检测方法、反转录-PCR 检测方法、生物芯片,以期对食品中单核细胞增生李斯特菌的检测起到帮助和指导作用。
标签:单核增生细胞李斯特氏菌;检测方法单核细胞增生李斯特氏菌是一种短小的革兰氏阳性无芽孢杆菌[1],它能引起人畜的李氏菌的病,该病发病率较低,但致死率高达20%~30%[2],感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。
单核细胞增生李斯特氏菌广泛存在于自然界中,食品中存在的单核细胞增生李斯特氏菌对人类的安全具有危险,该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一,因此,在食品卫生微生物检验中,必须加以重视。
本文拟对单核细胞增生李斯特氏菌的检测方法及其当前存在的问题等作系统介绍,以期为进一步深入研究提供参考。
1快速检测方法1.1 显色培养基快速检测方法显色或荧光鉴别培养基的基本原理是针对李斯特氏菌的β-D-葡萄糖苷酶和毒力因子PI-PLC酶,设计相应的底物,加入到常规选择性培养基中,利用酶对底物的分解,产生荧光或显色物质,使其菌落形态或颜色不同于其他李斯特氏菌和非李斯特氏菌,从而实现对李斯特氏菌快速定性鉴定和菌落数目快速定量。
张淑红等[3]检测了显色培养基的特异性和灵敏度。
实验证明此种检测方法具有较高灵敏度、特异性和选择性,是非常有价值的分离平板。
1.2 免疫学检测方法1.2.1 酶联免疫试验检测方法(ELISA)早期起初人们采用简单直接的细胞计数法进行检测,运用细胞计量术对牛奶中的单核细胞增生李斯特氏菌进行检测。
但是由于病原微生物的含量很低,仅通过细胞计数的方法检测灵敏度无法达到。
单核增生李斯特氏菌检测
在固体培养基上,菌落初始很小,透明,边缘整 齐,呈露滴状,但随着菌落的增大,变得不透明。 在5-7%的血平板上,菌落通常也不大,灰白色, 刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。 在0ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)琼脂上, 用45°角入射光照射菌落,通过解剖镜垂直观察, 菌落呈兰色、灰色或兰灰色。
单核增生李斯特氏菌 检测概述
李斯特氏菌属
李斯特氏菌属(Listeria )普遍存在于环境中,最新的分类 学研究表明,其分为六个种: 单核增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes) 绵羊(伊氏)李斯特氏菌(Listeria ivanovii) 英诺克(无害)李斯特氏菌(Listeria innocua) 斯氏李斯特氏菌(Listeria seeligeri) 威氏李斯特氏菌(Listeria welshimeri) 格氏李斯特氏菌(Listeria grayi) 在李斯特氏菌属的六个种中,只有两种致病菌:单核增生 李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌可以引起老鼠和其他动物发 病。但是,其中通常只有单核增生李斯特氏菌和人类的李 斯特氏菌症(listeriosis)相关。因此,李斯特氏菌中最有检 测意义的是单核增生李斯特氏菌。
LB和BLB
只有选择性没有区别性
LEB是在TSB-YE的基础上加入盐酸吖啶黄、 萘啶酮酸和放线菌酮等选择性因子;加入 的丙酮酸钠,有助于受损细胞的恢复;不 含七叶灵和柠檬酸铁铵,无颜色反应 BLB是在LB基础上加入缓冲体系:磷酸二 氢钾和磷酸氢二钠
检测程序---分离
分离培养基有:OXA、PALCOM、LPM、MOX 等。分离原理主要是基于李斯特氏菌具有β-D- 葡萄糖苷酶的活性,能水解培养基中的七叶灵, 产生七叶苷,与铁离子产生颜色反应而使菌落为 棕褐色,并带有褐色晕圈,而致病性和非致病性 李斯特氏菌病都能发生这种反应
单核细胞增生李斯特氏菌的研究进展资料
单核细胞增生李斯特氏菌的研究进展摘要:单核细胞增生性李斯特氏菌是人类一种重要的食源性致病菌,单核增生李斯特氏菌的危害近年来引起世界各国食品和卫生部门的广泛关注. 本文主要阐述了单核细胞增生性李斯特氏菌的生长特性,包括生物学特性、流行病学、致病性的一些研究,以及对该菌的传统分离方法、免疫学检测方法、核酸检测等方法的最新进展进行了综述,为进行该菌的准确、快速检测奠定了基础.关键词:单核细胞增生性李斯特氏菌 , 生物学特性 , 检测方法Research Advance on Listeria Monocyto--genesDong QianCollege of Food Science, Southwest University, Chongqing 400715, ChinaAbstract: listeria monocytogenes is one of the important food-derived pathogens for human, and listeria monocytogenes have been paid close attention by public health and food bureaus the world over. The growth characteristic including biological characteristics, epidemiological, pathogenic, epidemiology, and recent advances of listeria monocytogenes detection methods, including traditional detection procedures, immunity detection patterns and nuclear acid assays were reviewed. Thus, a foundation of rapid and accurate detection methods of the bacteria were laid.Key word: Listeria monocytogenes , Biological characteristics , Detection method由近年来关于单核增生李斯特氏菌的相关消息可知,李斯特菌病尤其是由单核增生李斯特氏菌引起的各类疾病已日益成为全球性疾病,引起了国际上的高度重视。
《食品单增李斯特菌检测研究国内外文献综述4300字》
食品单增李斯特菌检测研究国内外文献综述目录1.食品安全问题现状 (1)2.单增李斯特菌存在现状 (2)3.食源性致病菌的检测技术 (3)参考文献 (4)1.食品安全问题现状由于恶劣的自然环境和时间的变化,人类的饮食生活习惯也发生了很大的变化。
食品加工和销售方式也发生了很大的转折和变革,随着我国开展全球性的食品贸易迅猛增长,食品的流通速度加快,然而安全性下降,食物中毒的现象屡屡发生,食源性疾病的患者和发病率也呈现出明显的上升倾向[10]。
无论是发达国家还是在发展中国家,食源性疾病已经极大地损害了人类的身体健康与生命安全,也对经济产生了重要的冲击。
所以,食源性疾病已逐渐成为我们当前必须面对的严峻挑战[11]。
由于受到社会经济效益的驱使,食品企业在生产、销售中屡屡使用各种违规或其他非法的手段。
比如,使用大量的剧毒性农药或者喷洒各种蔬菜、水果等方式进行除虫:或者使用瘦肉精等一些非违禁的激素进行饲养,从而增加瘦肉的产量;随意地使用一个吊白块的方式来添加新鲜的白面粉;把稻草水兑颜料+黄色的带绿勾盐作为酱油卖给企业获利的现象,不胜枚举。
随着企业时代的不断进步和企业改革史的变迁,食品安全企业在批量生产和规模经营这个过程中产品规模的逐步扩大和不断普及以至我国食品安全贸易逐渐逐步呈现走向国际化,世界上所有国家和地区都在不断发生重大食品安全污染事件。
例如,2006年比利时"二嗯英英事件"、英国"疯牛病"、日本的大肠杆菌0157:h7食物细菌中毒[12],以及被人在我国广泛媒体曝光的安徽阜阳劣质生鲜乳制品("大头娃娃事件")、霉变菌中毒米、苏丹红鸭蛋污染事件、孔雀石虾等绿色海藻鱼虾的排放养殖和其他各类污染事件,都已经逐渐使得我国食品安全突出问题逐渐成为了社会众人广泛密切关注的一个热门话题,再次向人敲响了对我国食品安全领域存在突出问题的重要警钟。
"民以食为天,食以安为先"已成为当今人类对食品质量最基本的诉求[13]。
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生物学特性
---培养特性
在固体培养基上,菌落初始很小,透明, 边缘整齐,呈露滴状,但随着菌落的增大, 变得不透明。
在5-7%的血平板上,菌落通常也不大,灰 白色,刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶 血环。
在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)琼脂 上,用45°角入射光照射菌落,通过解剖镜 垂直观察,菌落呈兰色、灰色或兰灰色。
单核增生李斯特氏菌检测综述
生物学特性
---培养特性
兼性厌氧;
在20--25℃培养有动力,穿刺培养2-5天可见 倒立伞状生长,肉汤培养物在显微镜下可 见翻跟斗运动。
生长温度范围为2-42℃(也有报道在0℃能 缓慢生长),最适培养温度为30--37℃。
pH范围pH4.4-pH9.6。
单核增生李斯特氏菌检测综述
在李斯特氏菌属的六个种中,只有两种致病菌:单核 增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌可以引起老鼠和其他动 物发病。但是,其中通常只有单核增生李斯特氏菌和人类 的李斯特氏菌症(listeriosis)相关。因此,李斯特氏菌中 最有检测意义的是单核增生李斯特氏菌。
单核增生李斯特氏菌检测综述
生物学特性
---菌体形态及染色特征
单核增生李斯特氏菌检测综述
致病机理
单增李氏菌的抗原结构与毒力无关,它的致病性 与毒力机理如下:
1、寄生物介导的细胞内增生,使它附着及进入肠 细胞与巨噬细胞;
2、抗活化的巨噬细胞,单增李氏菌有细菌性过氧 化物歧化酶,使它能抗活化巨噬细胞内的过氧物 (为杀菌的毒性游离基团)分解;
3、溶血素,即李氏杆菌素O,可以从培养物上清液 中获得,有α和β两种,为毒力因子。
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生物学特性---抵抗力
该菌对理化因素抵抗力较强,在土壤、粪便、青 储饲料和食品中能长期存活;
对碱和盐抵抗力强,60-70℃经5-20min可杀死, 70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、 2.5%福尔马林20min 可杀死此菌;
湿热灭菌(121℃,至少15min)和干热灭菌(160170℃,至少1hr)可杀灭该菌,对紫外线和γ射线 敏感;
该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素(已产生抗 性)、氨基糖苷类单、核增生氯李斯霉特氏素菌检测均综述敏感。
流行病学
分布:广泛存在于自然界中,土壤、地表 水、污水、废水、青储饲料、动植物及其 食品中均有该菌存在,所以动物很容易食 入该菌,并通过口腔-粪便的途径进行传播
寄主范围:哺乳动物、鸟类、鱼类、甲壳 类和昆虫
革兰氏阳性;
小的、类似球形杆菌,0.4~0.5×0.5~2µm,在有 些培养基中稍弯,两端钝圆,单个、成短链、细 胞彼此连成V形,或成群的细胞沿长轴方向平行 排列,在较老的或生长不良的培养物中,可能形 成丝状;
20-25℃周生鞭毛运动,在37℃只有较少的鞭毛或1 根鞭毛;
无芽孢、无荚膜。 单核增生李斯特氏菌检测综述
易感者: ✓ 孕妇/胎儿—围产期和新生儿的感染; ✓ 接受皮质激素、抗癌剂治疗、器官移植 治疗、
艾滋病患者等免疫缺损者; ✓ 癌症病人— 尤其是白血病的患者; ✓ 不太常见的报道—糖尿病、肝硬化、哮喘和溃疡
性结肠炎的患者; ✓ 年纪较大的人; ✓ 没有免疫缺陷的健康的人,食用污染该菌尤其是
大量污染该菌的食品后,也有患病的危险。
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生物学特性
---生化反应
氧化酶阴性。
能发酵多种糖类,产酸不产气,如发酵葡萄糖、 乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶苷、蔗糖 (迟发酵)、山梨醇、海藻糖、果糖,不发酵木 糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉 子糖、卫矛醇和纤维二糖。
不利用枸橼酸盐,40%胆汁不溶解,吲哚、硫化 氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟 氨酸均阴性,VP、甲基红试验和精氨酸水解阳性。
内容
简介李斯特氏菌属 单核增生李斯特氏菌生物学特性 流行病学 致病性 实验室危害及其预防 检测程序 快速检测方法
单核增生李斯特氏菌检测综述
李斯特氏菌属
李斯特氏菌属(Listeria )普遍存在于环境中,最新的分 类学研究表明,其分为六个种: ➢ 单核增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes) ➢ 绵羊(伊氏)李斯特氏菌(Listeria ivanovii) ➢ 英诺克(无害)李斯特氏菌(Listeria innocua) ➢ 斯氏李斯特氏菌(Listeria seeligeri) ➢ 威氏李斯特氏菌(Listeria welshimeri) ➢ 格氏李斯特氏菌(Listeria grayi)
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生物学特性
---血清型
根据菌体(O)抗原和鞭毛(H)抗原,将单 增李氏菌分成13个血清型,分别是1/2a、 1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、 4d、4e 和“7”。
致病菌株的血清型一般为1/2b、1/2c、3a、 3b、3c、4a、1/2a和4b,后两型尤多。
肉、各种生的肉类、生的和烟熏的鱼肉。
约有85-90%的病例是由被污染的食品引起
的。
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致病性及其治疗
该病的临床表现,健康成人个体出现轻微类似流 感症状,新生儿、孕妇、免疫缺陷患者表现为呼 吸急促、呕吐、出血性皮疹、化脓性结膜炎、发 热、抽搐、昏迷、自然流产或死婴、脑膜炎、败 血症直至死亡。
由该菌造成的脑膜炎的致死率可高达70%,败血 症的死亡率达50%,围产期或新生儿感染的死亡 率超过80%,怀孕期妇女的感染,母亲通常能存 活下来。
抗生素治疗,用青霉素或氨苄青霉素注射给药, 或与氨基糖苷类抗生素一起用药。
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感染人群
感染剂量未知,但与该菌的毒力和易感人群的年 龄、免疫状态有关。
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流行病学
据报道,有1-10%的人类肠道中存在单核增 生李斯特氏菌,4-8%的水产品、5-10%的奶 及其产品、30%以上的肉制品及15%以上的 家禽均被该菌污染。
相关食品:鲜奶、巴氏消毒奶、奶酪(尤
其是软奶酪)、冰激凌、生的蔬菜、发酵
过的生肉制作的香肠、生的和加工过的禽