维生素C含量的测定
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食品保鲜技术课程实验报告
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维生素C含量的测定一、实验目的与原理
维生素C又称抗坏血酸，分子式C
6H
8
O
6
还原型维生素C是新鲜果蔬营养成分
的重要部分。
（一）二氯酚靛酚法：天然的抗坏血酸有还原型和脱氢型两种，还原型抗坏血酸分子结构中有烯醇（COH=COH）存在，故为一种极敏感的还原剂，它可失去
两个氢原子而氧化为脱氢型抗坏血酸。染料2,6—二氯酚靛酚钠（C
12H
6
O
2
NCl
2
Na）
作为氧化剂，可以氧化抗坏血酸而其体身亦被还原成无色的衍生物。2,6—二氯酚靛酚钠盐易溶于水，其碱性或中性水溶液呈蓝色，在酸性溶液中呈桃红色，这个变化用来鉴别滴定的终点。由于抗坏血酸在许多因素影响下都易发生变化，因此，取样品时应尽量减少操作时间，并避免与铜、铁等金属接触以防止氧化。
（二）碘量法：抗坏血酸具有还原性，可被I
2定量氧化，因而可用I
2
标准
溶液直接测定。通过消耗碘溶液的体积及其浓度，计算试样中维生素C的含量。化学反应式如下：
KIO
3+5KI+3H
2
SO
4
=3K
2
SO
4
+3I
2
+3H
2
O
二、仪器和用品
1、实验材料
果蔬样品、维生素C标准溶液，1%草酸溶液、2,6-二氯靛酚溶液、10%KI溶液，淀粉液、0.001N标准
3
KIO溶液
2、仪器
滴定管、容量瓶、移液管、烧杯、研钵、漏斗、分析天平容量瓶，滴管
三、实验步骤
1.试剂制备与标定
①标准抗坏血酸溶液：精确称取抗坏血酸20mg，用1％草酸溶解于100ml容量瓶中，用1%草酸定容。用移液管移取5ml到50ml容量瓶中，并加1％草酸定容。
②2,6—二氯酚靛酚溶液配制及标定：称取2,6—二氯酚靛酚即2,6—二氯吲哚酚
纳50mg ，溶于200ml 热水中（热水中溶解52mgNaHCO 3），冷却后加水50ml ，过滤后盛于棕色药瓶内，避光保存。
标定：吸取标准抗坏血酸溶液5ml ，加1％草酸5ml 、20ml 蒸馏水，以2,6—二氯酚靛酚染料溶液滴定，至桃红色15秒不褪即为终点。滴定的溶液的体积相当于0.1mg 维生素C ，计算出每一毫升染料溶液能氧化的抗坏血酸毫克数。 ③待测液的制备：取10g 磨碎的样品液，加1％草酸溶液稀释后无损地移入100ml 容量瓶，加1％草酸溶液定容至2500ml ，过滤，备用。 2.样品Vc 的测定 （1）二氯酚靛酚滴定法
样品10g 研成浆状
定容至100ml 容量瓶
（2）碘量法
将定容后的样品待测液用移液管吸取10ml 于碘量瓶，用移液管准确加入2ml2NH 2SO 4溶液，1ml10%KI 溶液及1ml 淀粉液，摇匀加塞，避光静置2min ，用0.001N 标准3KIO 溶液滴定至终点（淡蓝色30s 内不褪色），记录并计算。 3.计算
（1） 二氯酚靛酚滴定法
Vit.C(mg/100g)=(V*T*100)/W
式中：V-滴定样品所用的2，6-二氯酚靛酚体积-空白滴定所用的2，6-二氯酚靛酚体积，ml
T-1毫升2，6-二氯酚靛酚染料溶液相当的抗坏血酸毫克数。 W-滴定时吸取的样品重，g （2）碘量法
Vit.C(mg/100g)=0.088*y*b/(a*x)*100
20g 1%草酸液 1%草酸液
过滤
250ml 容量瓶，草酸定容 200ml 锥形瓶
移取10ml
20ml 蒸馏水
2,6—二氯酚靛酚
滴至终点（淡红色，15s 内不褪去）
式中：y-消耗的0.001N标准
KIO溶液体积，ml
3
X-移取的滤液体积，ml
0.088-1ml0.001N标准
KIO溶液相当于0.088mg Vit.C
3
a/b-样品稀释倍数
四、实验数据记录
样液重：10.0080g
样液重：10.1510g
2，6-二氯酚靛酚染料标定
五、计算过程：
1、2，6-二氯酚靛酚染料标定
1ml 2，6-二氯酚靛酚染料溶液相当的抗坏血酸毫克数 T=0.1/（（3.30+3.50+3.40）/3）=0.0294mg 2、蔬菜相关计算 二氯酚靛酚滴定法
Vit.C(mg/100g)=(V*T*100)/W
=）
（）（g mg 100/91.3510
250
3
/0080.101000294.015.0-78.1=⨯⨯⨯ 碘量法
Vit.C(mg/100g)=0.088*y*b/(a*x)*100
=
）
（）（g mg 100/00.33250
0080.1010100
10.0-60.1088.0=⨯
⨯⨯ 3、橙汁的相关计算 二氯酚靛酚滴定法
Vit.C(mg/100g)=(V*T*100)/W
=)100/(99.14250
3/1510.10101000294.015.0-84.0g mg =⨯
⨯⨯）（
碘量法
Vit.C(mg/100g)=0.088*y*b/(a*x)*100
g mg 100/22.13250
1510.1010100
10.0-71.0088.0=⨯
⨯⨯）（
五、实验讨论
1.实验汇总表