2020年(生物科技行业)基础生物学作业

（生物科技行业）基础生物

学作业

摘要：随着生物技术的不断发展和成熟，基因遗传学领域研究的深入，基因治疗这壹新的医学手段走进了我们的生活。它能够纠正和补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以人体的靶细胞为工程载体，对其基因进行基因置换或增补，使其在体内表达达到治疗目的。基因治疗能够治疗许多以往医学不能解决的问题，为癌症等绝症的治疗开辟了新天地。

关键字：生物技术；基因治疗；研究；靶细胞；癌症；

一、什么是基因治疗

1．基因治疗的定义

狭义的概念：

指用具有正常功能的基因置换或增补患者体内有缺陷的基因，因而达到治疗疾病的目的。广义的概念：

指把某些遗传物质转移到患者体内，使其在体内表达，最终达到治疗某种疾病的方法。

基因治疗（genetherapy）是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗目的。也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说，基因治疗仍可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。

2．遗传病的基因治疗的定义

遗传病的基因治疗(genetherapy)是指应用基因工程技术将正常基因引入患者细胞内，以纠正致病基因的缺陷而根治遗传病。纠正的途径既能够是原位修复有缺陷的基因，也能够是用有功能的正常基因转入细胞基因组的某壹部位，以替代缺陷基因来发挥作用。基因是携带生物遗传信息的基本功能单位，是位于染色体上的壹段特定序列。将外源的基因导入生物细胞内必须借助壹定的技术方法或载体，目前基因转移的方法分为生物学方法、物理方法和化学方法。腺病毒载体是目前基因治疗最为常用的病毒载体之壹。基因治疗目前主要是治疗那些对人类健康威胁严重的疾病，包括：遗传病（如血友病、囊性纤维病、家庭性高胆固醇血症等）、恶性肿瘤、心血管疾病、感染性疾病（如艾滋病、类风湿等）。

基因治疗是将人的正常基因或有治疗作用的基因通过壹定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用，从而达到治疗疾病目的的生物医学高技术。基因治疗和常规治疗方法不同：壹般意义上疾病的治疗针对的是因基因异常而导致的各种症状，而基因治疗针对的是疾病的根源--异常的基因本身。基因治疗有二种形式：壹是体细胞基因治疗，正在广泛使用；二是生殖细胞基因治疗，因能引起遗传改变而受到限制。

3．基因治疗的靶细胞

基因治疗的靶细胞主要分为俩大类：体细胞和生殖细胞，目前开展的基因治疗只限于体细胞。生殖细胞的基因治疗是将正常基因直接引入生殖细胞，以纠正缺陷基因。这样，不仅可使遗传疾病在当代得到治疗，而且仍能将新基因传给患者后代，使遗传病得到根治。但生殖细胞的基因治疗涉及问题较多，技术也较复杂，因此，目前更多地是采用体细胞基因治疗。体细胞应该是在体内能保持相当长的寿命或者具有分裂能力的细胞，这样才能使被转入的基因能有效地、长期地发挥“治疗”作用。因此干细胞、前体细胞都是理想的转基因治疗靶细胞。以目前的观点见，骨髓细胞是唯壹满足之上标准的靶细胞，而骨髓的抽取，体外培养、再植入等所涉及的技术都已成熟；另壹方面，骨髓细胞仍构成了许多组织细胞(如单核巨噬细胞)的前体。因此，不仅壹些涉及血液系统的疾病如ADA缺乏症、珠蛋白生成障碍性贫血、镰状细胞贫血、CGD等以骨髓细胞作为靶细胞，而且壹些非血液系统疾病如苯丙酮尿症、溶酶体储积病等也都以此作为靶细胞。除了骨髓以外，肝细胞、神经细胞、内皮细胞、肌细胞也可作为靶细胞来研究或实施转基因治疗。

二、基因治疗的方法和技术

1、基因治疗的各种方法

(壹)基因矫正

纠正致病基因中的异常碱基，而正常部分予以保留。

(二)基因置换

指用正常基因通过同源重组技术，原位替换致病基因，使细胞内的DNA完全恢复正常状态。

(三)基因增补

把正常基因导入体细胞，通过基因的非定点整合使其表达，以补偿缺陷基因的功能，或使原有基因的功能得到增强，但致病基因本身且未除去

(四)基因失活

将特定的反义核酸(反义RNA、反义DNA)和核酶导入细胞，在转录和翻译水平阻断某些基因的异常表达，而实现治疗的目的。

(五)“自杀基因”的应用

在某些病毒或细菌中的某基因可产生壹种酶，它可将原无细胞毒或低毒药物前体转化为细胞毒物质，将细胞本身杀死，此种基因称为“自杀基因”

(六)免疫基因治疗

免疫基因治疗是把产生抗病毒或肿瘤免疫力的对应和抗原决定族基因导入机体细胞，以达到治疗目的。如细胞因子(cytokine)基因的导入和表达等。

(七)耐药基因治疗

耐药基因治疗是在肿瘤治疗时，为提高机体耐受化疗药物的能力，把产生抗药物毒性的基因导入人体细胞，以使机体耐受更大剂量的化疗。如向骨髓干细胞导入多药抗性基因中的mdr-1

2、基因治疗的总体策略

基因治疗按基因操作方式分为俩类，壹类为基因修正（genecorrection）和基因置换（genereplacement），即将缺陷基因的异常序列进行矫正，对缺陷基因精确地原位修复，不涉及基因组的其他任何改变。通过同源重组（homologousrecombination）即基因打靶

（genetargetting）技术将外源正常的基因在特定的部位进行重组，从而使缺陷基因在原位特异性修复。另壹类为基因增强（geneaugmentation）和基因失活（geneinactivation），是不去除异常基因，而通过导入外源基因使其表达正常产物，从而补偿缺陷基因等的功能；或特异封闭某些基因的翻译或转录，以达到抑制某些异常基因表达。

按靶细胞类型又可分为生殖细胞（germ-linecell）基因治疗和体细胞（somaticcell）基因治疗。广义的生殖细胞基因治疗以精子，卵子和早期胚胎细胞作为治疗对象。由于当前基因治疗技术仍不成熟，以及涉及壹系列伦理学问题，生殖细胞基因治疗仍属禁区。在现有的条件下，基因治疗仅限于体细胞。

3、基因治疗的基本程序

基因治疗的实施主要包括以下步骤：壹、选择用于治疗疾病的目的基因；二、基因载体的选择,目前应用于基因治疗的载体主要有病毒载体和非病毒载体俩种；三、靶细胞的选择,目前应用于基因治疗的细胞仅限于人的体细胞.用于基因治疗的靶细胞必须取材方便，易于在体外人工培养，而且细胞的寿命足够长；四、基因转移,在基因治疗中迄今所应用的基因转移方法可分为俩大类：病毒方法和非病毒方法，非病毒载体主要有直接注射、磷酸钙共沉淀法、脂质体法和生物化学法等；五、外源基因的筛检,能够利用基因表达产物的筛检方法,也能够利用分子生物学方法筛检外源基因；六、将目的基因导入体内,直接转导入人体的靶器官的靶细胞中,取出患者体细胞进行体外培养，将治疗性基因通过病毒载体或非病毒载体转染后，再移植到患者的特定部位和导入体内。

（壹）目的基因的选择和制备

基因治疗的首要问题是选择用于治疗疾病的目的基因。对遗传病而言只要已经研究清楚某种疾病的发生是由于某个基因的异常所引起的，其野生型基因就可被用于基因治疗，如用ADA基因治疗ADA缺陷病。但在当下的条件下，仅此是不够的。可用于基因治疗的基因需