西地兰对心肌收缩力的影响

西地兰对心肌收缩力的影响

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西地兰对心肌收缩力的影响

【原理】西地兰，又名毛花苷C，是治疗急性心力衰竭时最常用的洋地黄类强心药。其具有较强的加强心肌收缩力的作用。目前被广泛接受的机制学说是该药物直接作用于心肌Na+,K+-ATP酶，使酶失活，Na+泵出减少，从而使质膜两侧Na+浓度差减小，降低了Na+-Ca2+交换（Na+进Ca2+出）的驱动力，造成胞内Ca2+增加，Ca2+浓度增加又引发了一系列的生化反应，最终导致心肌收缩力增强，即正性肌力作用。但高剂量的易导致中毒（Ca2+浓度过高），出现心动过缓和心律失常等。

本实验是利用离体蛙心灌流的方法，观察西地兰的强心作用和过量后的中毒症状。

【目的】1、观察药物西地兰对离体蛙心收缩力的影响；2、掌握离体蛙心的实验操作过程。

【实验对象】蟾蜍

【实验器材】蛙类手术器械一套。生物信号采集处理系统，张力换能器，铁支架，双凹夹，试管夹，蛙心插管，蛙心夹，滴管，丝线。

【药品】西地兰（0.02mg/ml）、任氏液

【实验步骤和观察项目】

一、离体蛙心的准备

1、用探针捣毁脑和脊髓，将其仰卧固定在蛙板上。用镊子夹起皮肤，然后将胸部剑突软骨下方的皮肤剪出一个“v”字形切口，暴露出剑突。用镊子夹起剑突下端，在肌肉层上剪出“v”形切口。再用粗剪刀沿正中线剪开胸骨，并把左右两侧胸骨完全剪掉，眼科剪仔细剪开心包膜，暴露心脏。

2、仔细识别心房、心室、动脉圆锥、主动脉、静脉窦、前后腔静脉等。

3、结扎血管在左右主动脉下穿一根线备用，用玻璃分针将心尖向上翻至背面，以备用线将前后腔静脉和左右肺静脉一起结扎，将心脏恢复至原位。在左主动脉远心端穿线结扎并在左右主动脉下穿根线备用。

4、蛙心插管提起左主动脉远端缚线，用眼科剪在左主动脉上靠近动脉圆锥处剪一“v”形切口，将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉，插至动脉圆锥时，略向后退，在心室收缩时沿心室后壁方向下插，经主动脉窦插入心室腔内。若插管成功进入心室，管内液体会随着心室搏动而上下移动。用左右主动脉下的备用线结扎插管，并将结扎线固定在插管侧面的小突起上。

5、游离心脏提起插管，在结扎线远端分别剪断主动脉左右分支，剪断左右肺动脉和前后腔静脉，将心脏离体。用滴管吸尽插管内的余血，加入新鲜任氏液反复冲洗数次，直至液体完全澄清。保持灌流液面高度恒定（1—2ml），即可进行下面的实验。

6、仪器连接用试管夹将制备好离体蛙心固定于支架上，在心脏舒张期用蛙心夹夹住心尖部，并连接到张力换能器上（勿让心脏受到过度牵拉）。将张力换能器的输出线与生物信号采集处理系统相连。

二、观察项目

1、描记未用西地兰处理的蛙心收缩曲线

2、观察西地兰的影响

（1）在插管内任氏液中滴加0.02ml西地兰注射液，观察心跳曲线变化并记录。待效应明显后，吸出灌流液，用新鲜任氏液换洗数次，直至心跳曲线恢复正常。

（2）然后分别以0.01ml为梯度依次递增西地兰溶液的滴加量并重复上述操作，对比观察全部心跳曲线，讨论分析结果。

【注意事项】

1、蛙心插管一定要插入心室。切勿用力过大，插入过深，损伤心肌，手指不要碰到心脏，以免造成心肌缺血影响后面实验。

2、结扎静脉时，要远离静脉窦（起博点），以避免结扎住静脉窦。

3、换液时，插管内液面应保持相同高度，保证心脏前后负荷相同。加药时用吸管充分混匀。

4、每个实验观察项目都应有前后对照，并注意避免通过滴管造成所用试剂之间的相互污染。

5、固定换能器时，头端应稍向下倾斜，以免自心脏滴下的液体流入换能器。