食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项说课讲解
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项1菌落总数及测定菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。
当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数就是指食品检样经过处理,在一定条件下(如需氧性质、培养基成分、pH、培养温度和时间等) 1 mL ( g)检样中所含菌落的总数。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度、食品的新鲜度及卫生质量,它反映食品在生产、加工、销售过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
也可以应用这一方法观察食品中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态,菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣[ 1 ] 。
2菌落总数测定中的注意事项2. 1所用器皿及稀释液2. 1. 1检验中所用玻璃器皿,如培养皿,吸管、试管、移液器的吸头等必须是完全灭菌的,并在灭菌前彻底洗涤干净,不得残留有抑菌物质。
2. 1. 2用作样品稀释的液体,每批都要有空白对照。
如果在琼脂对照平板上出现几个菌落时,要查找原因,如可通过追加对照平板,以判定是空白稀释液,用于倾注平皿的培养基,还是平皿、吸管或空气可能存在的污染。
2. 1. 3检样的稀释液一般用灭菌盐水,如果对含盐量较高的食品(如酱品等)进行稀释,则宜用蒸馏水。
做醋时用20% ～ 30%碳酸钠调pH 至中性。
2. 2检样的稀释2. 2. 1检样稀释时,应以无菌操作称取(或量取)有代表性的样品25 g (或mL ) , 剪碎放于含有225 mL灭菌稀释液的玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠) ,经充分振摇作成1: 10 的稀释液。
如系肉、鱼等固体样品,先用自来水把表面冲洗干净,取可食部分(即鱼肉)剪细加入稀释液后,置均质器中以8 000 ～ 10 000 r /min 速度处理1 min,使做成均匀的1: 10稀释液。
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项一、什么是菌落及菌落总数菌落是由单个细菌细胞或者一群同种细胞在适宜的培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落，即数以万计的细菌的集合。
在食品微生物的检验过程中所检测到的1ml（g）样本中含有的菌落的数量称为菌落总数。
二、为什么要在食品微生物检验中测定菌落总数随着社会的进步、经济的发展，人民生活水平的不断提高，人们对食品安全越来越重视，国家层面对食品微生物的检测精度和力度也逐步加强，食品微生物的检验中菌落总数测定是其中的重要一项。
菌落总数是食品安全评判的重要指标，菌落总数测定可以用来评价食品被细菌污染的程度、食品的新鲜度和卫生质量，判定食品在加工过程中是否严格遵守国家相关规定。
食品安全与大众生命健康息息相关，国家相关部门也不断出台相关的法规政策，应用现代科技规范检测方法，更好的保障食品安全。
三、测定菌落总数有哪些注意事项食品微生物检测中菌落总数的测定能够表明细菌的繁殖情况。
菌落检测的具体过程是：处理、培养被检样品，测定1ml（g）被检样品中菌落总数。
为保障食品的衛生安全，在检测过程中要严格把控、格外注意检测事项。
具体注意事项如下：1.样品的前期处理（1）取样前：在对被检食品取样之前，首先应该确保在整个测定过程中使用到的仪器例如玻璃器皿、培养皿、吸管、试管、液器的吸头等都已经经过灭菌处理，而且不得残留抑菌物质。
工作人员也要严格遵守佩戴无菌手套、口罩的规定，这是为了保证在操作过程中不会使样品人为地感染细菌。
（2）制备稀释液：用于稀释样品的液体必须保留空白对照实验组。
对于盐含量较高的食品样本一般使用蒸馏水稀释;对于醋含量较高的食品一般使用碳酸钠溶液来稀释;其他的样本大多采用灭菌盐水来稀释。
稀释时，将无菌操作得到的25ml样品放在225ml制备好的灭菌稀释液中，充分混合均匀得到稀释液。
在加入样本的操作中应将样本沿试管壁缓缓滴入，注意整个过程不能使吸管触碰到瓶口，避免接触污染物，从而导致检测不准确。
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项发表时间：2019-05-06T15:59:27.560Z 来源：《工程管理前沿》2019年第02期作者：刘继东[导读] 本文就食品微生物检验中菌落总数测定进行研究，希望能够在一定程度上提高食品的安全性。
北安市质量技术监督检验检测中心 164000【摘要】近几年，随着经济发展速度的不断加快，人们对食品安全的重视也在逐渐提升。
因此，相关部门要想提高食品的安全性，就要加大对食品卫生检验的重视，结合先进的科学技术，对食品微生物检验设备进行优化。
本文就食品微生物检验中菌落总数测定进行研究，希望能够在一定程度上提高食品的安全性。
【关键词】食品微生物；检测；菌落；测定一直以来，食品安全问题都是人们非常管心的问题，食品的新鲜程度、卫生情况和污染情况都是人们关注的重点。
近几年，随着食品微生物检验技术的不断提升，国家对食品检验的重视度也在不断提升，现在我国食品微生物检验中，菌落总数测定仍旧存在很多问题，相关人员要加大对注意事项的重视。
1相关分析食品安全事件的不断出现，比如：瘦肉精、三聚氰胺、染色馒头等，在一定程度上降低了民众对食品安全检测体系的信任度，为了缓解这种状况，提高民众饮食的安全性，相关部门要加大对相关食品安全政策的重视，提高食品的安全性，改善其的检测方法，对食品中的微生物菌落总数进行科学的测定。
能够被肉眼观察到、在培养基上繁殖和生长的细菌被称之为菌落，一般情况下，菌落都是数以万计细菌的结合体。
在对食品进行检测时，能够检测到的菌落都是经过系统处理过的，在对菌落总数进行检测之前，菌落都是在一定条件下经过培养的。
菌落总数测定对在食品安全检测中发挥着非常重要的作用，其能够检测出食品是否严格按照国家规定的标准进行加工、生产，对食品是否达标进行科学的检测，并且在进行检测完成之后，还能对食品进行科学、合理的评价。
在对食品中的细菌的生产和繁殖进行科学测定时，可以根据细菌的生长情况，对食品的质量优劣进行检测，这个过程中对检测人员专业能力要求非常高。
食品微生物学检测中菌落总数和大肠菌群检验的质量控制
食品微生物学检测中菌落总数和大肠菌群检验的质量控制摘要：目的在对食品进行微生物学检测的时候菌落总数以及大肠菌群两项指标容易出现相应的检测问题，为了能够保证检测结果的科学性和正确性，就需要制定相关的质量控制措施，这样才能保证食品的安全。
本文阐述了两项指标检测的基本要求，并在此基础上对两个指标的控制分别进行了论述，以期能够加深人们对这两个指标质量控制的了解。
关键词：食品；菌落总数；大肠菌群；基本要求食品从生产到销售需要经过各个环节，在这些环节中很可能受到微生物的污染，从而造成腐败、产生毒性，为了能够保证人们能够吃到健康的食品，就需要对食品中菌落总数以及大肠菌群作为其主要的检测项目。
只有对其检测进行严格的把控，才能保证食品的安全，才能确保消费者的健康，才能更好地促进经济的发展。
1 质量控制的基本要求要确保对菌落总数和大肠菌群的检验能够更加准确，就需要对一些基本要求进行确保。
1.1 检验人员为了能够对食品的菌落总数和大肠菌群进行有效的检验，就需要检验人员具备相关的技术知识，这样才能确保检测结构更加准确。
作为食品的检验，首先就要求检验人员能够对食品微生物学理念以及相关的检验技术能够有比较深入的了解，并且在其参加工作之前需要对其进行必要的考核。
其次就是要了解相关的法律法规，我国的食品法对相关的标准有明确的规定，只有了解这些才能有更好地执行检验。
最后就是要了解计量学的内容，因为检验工作十分精细，只有了解计量学的基本知识才能更好地进行实验。
1.2 仪器设备为了能够保证检验能够正常的进行，需要准备好必要的仪器和设备，这样才能为检验的进行提供必要的基础。
1.3 试剂与培养基对菌落总数和大肠菌群的检验需要利用必要的培养基、染色剂以及一些必备的试剂，并严格按照相关的标准进行相关的操作。
1.4 检验环境由于空气中本身就存在着细菌和微生物，为了能够对菌落总数和大肠菌群进行有效的检测，需要在无菌室进行检验。
为了达到理想的检测效果，工作人员应该进行良好的卫生处理，这样才能达到很好的效果。
食品微生物检测：菌落总数测定标准要点解析
食品微生物检测：菌落总数测定标准要点解析一、称样（1）一般称量25g，由于称样量较大，标准中对于称样的准确性未作出明确规定，微生物室常用称样的电子天平最大允许误差为±0.1g，一般遵循“宜多不宜少”的原则，即实际称样时可根据样品情况称取超出25g（如硬质糖果等，检验人员应依据样品实际情况决定如何称样）；（2）对于部分食品添加剂已明确须称取1.0g的，则须严格精确称量。
二、样品稀释（1）固体或半固体：称取25g样品于均质袋中，加入已灭菌的生理盐水225g，稍捏碎（特别是糕点/面包及其他淀粉制品），放入拍击式均质器均质1min，此时即制备成1：10的样品匀液。
以移液器或灭菌吸取该液体至9mL灭菌生理盐水试管中，换上新的灭菌移液器枪头，缓缓吸取液体后反复吹打2次，此时即制备成1：100的匀液，以此类推，制备10倍系列稀释匀液。
（2）液体样品：直接吸取原液进行检验，稀释时可直接吸取1mL原液到9mL灭菌生理盐水试管中按照“固体或半固体”的方式稀释。
三、稀释度的选取液体样品可直接取原液进行检验；固体或半固体则必须依据检验经验，选取2-3个适宜稀释度进行检验（一般样品选取1：10，1：100，1：1000三个稀释度进行检验。
若遇到不常做的样品，可适当延长稀释度至1：100000甚至1：1000000）。
四、质量控制空白对照：分别吸取1mL灭菌生理盐水到平皿中做空白对照。
（若空白有菌落生长则该实验无效）。
五、平板计数琼脂（PCA）灭菌条件为121℃、15min。
一般情况下于500mL敞口锥形瓶（三角瓶）中配制400mL/瓶。
六、有时样品基质比较特殊，样品匀液有细小的颗粒与菌落不易区分，此时可采用如下方法进行区分：（1）配制1%的2,3,5-三苯基氯化四氮唑溶液（又称红四唑或红四氮唑，简称TTC），高压灭菌后避光冷藏备用。
红四唑灭菌条件为：121℃、20min；（2）待PCA琼脂培养基冷却至适宜倾注温度时，无菌加入上述TTC溶液2mL，充分摇匀（此时PCA中TTC浓度为0.005%）。
食品中菌落总数的国标法测定注意事项及微生物快速测试卡法检测
发生变化。采好样品后 ， 哚 、Ｎ ． 甲基 吲 哚 、ｐ 一 硝 基 苯 酚、Ｏ （ Ｐ ）一 硝基酚等的化合物。微 生物和这些化 学物质之 间 的相互作用的反应 物质 进入培 养基 中并 形成 特定 的颜
室进行检验 ，最 好 不超 过 ３ ｈ ，若样 品保存 于 ４ ￣ Ｃ条 件
细菌污染程度 的标记 。目前 ，食 品菌落总数的检测一般
琼脂容易凝 固，从 而与稀释液混合不充分 ，导致菌落无 法均匀生长 ；温度过 高则 会使 冷凝水 滴 落在 培养基 表
面 ，导致细菌蔓延生长 ，还可能会杀灭部分细菌 。 培养基性能的控制主要包括物理和生物学要求两方
是按照 Ｇ Ｂ ／ Ｔ ４ ７ ８ ９ ． ２ —２ ０ ｌ ０规定 的倾 注平板计数法进行 ，
其准确性 、灵敏性均较高 ，但涉及 的实验较多 、操作繁
琐 、耗时长。近年来发展起来的快 速测试卡 ，是 一种简
便 、快捷 、准确的快速微生物检测方法 ，以滤纸为载体
面 ，培养基的物理性状 主要是透 明度 、ｐ Ｈ等。培养基 应有较好的透 明度 ，如有浑浊、沉淀 ，则直接影响对细 菌生长情况 的观察 ；培 养基应严 格按照要 求校 正 ，ｐ Ｈ 的正误 直接影响细菌的反应结果 和对其进行判断。生物 学要求培养基除了对非 目的菌有抑制作用外 ，对 目的菌 或多或少也有一定的影响 ，因此就必须 了解 目的菌对该
食品安全问题 日 益受到人们的关 注。为了确保食 品
安全 ，政府部门除了要 出台相关法律法规外 ，更要加强
结果准确与否的基本保证 。
１ ． ２ 培养基的要求
培养基应冷却至 ４ ６ ￣ Ｃ 左右再倾注平皿 。温度过低则
科学高效的食品安全检测技术的建立 。食 品中菌落总数 是食 品卫生检测中的一项很重要 的指标 ，是判定食 品被
浅谈食品微生物检验中菌落总数和大肠菌群测定注意事项
理论研究·34· 食品安全导刊 2019年9月THEORY浅谈食品微生物检验中菌落总数和大肠菌群测定注意事项摘要：当今，食品安全问题已经成为关系广大人民群众健康利益的重大问题，我国食品安全问题形势严峻，引起了国家的高度重视，其中食品微生物污染问题历年来居于食品不合格问题的前列。
本文就食品微生物学检验中常检项目菌落总数和大肠菌群测定应注意的事项进行分析与探讨，希望对同行有所借鉴。
关键词： 食品微生物检验；菌落总数；大肠菌群；注意事项随着社会的发展，人们对食物质量要求也越来越高，“吃得好”已经成为大家的普遍需求，而食品质量安全又是“吃得好”的前提。
然而，食品企业在生产加工过程如果未能严格按照要求控制卫生条件，或者包装容器清洗消毒不到位，亦或储运过程不当，极易引起产品的微生物指标超标，从而使食用者健康受到危害。
当前，在我国食品安全监督抽检中微生物检验项目主要有菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母、致病菌4类。
菌落总数反映食品被细菌污染的程度；大肠菌群反映食品是否有被粪便污染；霉菌和酵母可使食品腐败变质，并产生真菌毒素危害人体健康；致病菌可能引起食物中毒。
其中，菌落总数和大肠菌群项目为科学评价食品卫生质量的重要指标，是绝大部分食品的必检项目。
在2019年上半年市场监管总局公布的不合格食品中，菌落总数超标和大肠菌群超标占微生物超标总数比例分别为60.78%和11.76%[[[] 王 嘉. 2019年上半年市场监管总局共公布不合格食品256批次，这七大类问题企业要关注 [N]. 中国质量报, 2019-06-28(6).]]。
因此，为保障人民群众的健康安全，必须提高菌落总数和大肠菌群检测的准确性。
笔者结合工作实际，就食品中菌落总数和大肠菌群测定应注意的事项进行阐述，希望对同行有所借鉴。
检验方法选择选择正确的检验方法是检验结果准确可靠的前提。
目前，食品中菌落总数测定的方法主要是GB 4789.2-2016，但是生活饮用水菌落总数测定方法却为GB/T 5750.12-2006。
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
Apr. 2020 CHINA FOOD SAFETY 121分析与检测1 检验前的准备事项1.1 器皿灭菌处理为了保证测定结果的精确性，应当对检验所用的各类器皿、设备（如吸管、移液器等）做严格的消毒处理，避免这些器皿、设备携带细菌、微生物而影响检验结果。
另外，检验人员进入实验室前，应当换上经过严格消毒的防护服，戴上无菌口罩等，排除外界干扰因素[1]。
1.2 材料准备待检测的食品种类多样，有的是固体，还有的是液体；在固体中有的是溶于水的，还有的是不溶于水的。
为了方便检验，需要对这些样品材料提前做好准备。
例如将固体食品研磨成粉，提高其溶解性，避免菌落堆积，使菌落总数测定结果更加精确。
对于一些液体样品，还要检验其pH 值，如果pH 值明显偏酸性或偏碱性，也有可能会导致菌落难以在培养基上存活。
针对这种情况，检验人员应提前调节样品溶液的pH 值，使其尽量保持中性，为下一步的菌落培养与微生物检验提供良好的条件[2]。
2 制备稀释液的注意事项在制备稀释液之前，首先要准备好25 mL 的样品以及225 mL 经过灭菌处理的稀释液，将这两者进行混合并且搅拌均匀。
而后结合样品受污染程度以及食品卫生标准，来判断选择何种稀释度，并且围绕这一稀释度进行连续的递增稀释，其递增的幅度为10倍，在稀释时，为了保证稀释倍数的准确性，使用1 mL 的灭菌吸管进行稀释。
3 平板接种与培养的注意事项3.1 注入稀释液选取一个带盖的平底器皿，将制备好的稀释液注入到器皿中。
注意不要将器皿的盖子完全打开，而是打开一个小口。
先使用量筒，量取2 mL 稀释液，然后使用吸管吸取量筒内的稀释液，将吸管的一端从缺口处插入，约1 cm，让稀释液从缺口位置沿着器皿侧壁流下[3]。
3.2 加热琼脂块琼脂块是制作培养基的主要材料，需要将固体琼脂块加热融化。
高温会破坏琼脂块的营养，因此加热时应当选择50 ℃的水浴，保证温度适宜。
升温过程要缓慢，温度升高的过快会造成水汽凝结，这些冷凝水滴入培养基上，会加速细菌的繁殖。
浅议食品菌落总数检测中的注意事项
浅议食品菌落总数检测中的考前须知浅议食品菌落总数检测中的考前须知摘要：通过对影响菌落总数检测结果的因素分析，进一步了解在菌落总数检测中，需要时时注意哪些关键事项，使检测结果更真实可靠。
关键词：菌落总数检测考前须知食品平安涉及千家万户，食品平安事件给老百姓带来了巨大的伤害。
而作为食品检验重要指标的菌落总数是用来判定食品卫生质量十分重要的指标，它直接反映食品是否符合卫生要求。
因此，做到准确检测食品菌落总数，对样品做出正确的卫生学评价就特别重要。
笔者通过长期的实践，对影响菌落总数检测结果的主要因素进行了综合分析，总结出检测中主要应注意的几个方面。
一、注意样品的采集与处理采集样品时要注意样品的代表性，特别是对于样品是固体状的，采样时应均匀地多采几个部位，切记不要只采一点。
为获取均匀的具有代表性的检测稀释液样品，采回的样品要放于已经灭好菌的均质容器中，最好以每分钟9000转左右的速度搅拌一分钟。
对于需要屡次地进行稀释的样品，要特别注意减少样品稀释时的误差，确保每次稀释要充分振荡均匀，每一稀释度要用不同的吸管，千万不要投简便一支吸管用到底。
检测样品的稀释液一般有四种可供选择：蒸馏水、灭菌盐水、磷酸缓冲盐水和0.1%蛋白栋水。
如果有条件的话选0.1%蛋白栋水最为适宜。
二、注意培养温度的选择培养温度不同，相同的样品检测后的平均菌落数明显不同，37℃培养温度比30℃培养温度时的检测平均菌落数要高。
通过不同培养温度的比照实验说明：37℃作为培养温度对多数样品是适宜用。
部份对环境温度较低的水产品30℃培养温度那么最适宜。
三、不同培养基对检测结果的影响在检测食品菌落数指标时，常用的培养基有四种，通过用四种不同培养基来检测同一样品进行比拟实验说明，不同的培养基测出的平均菌落数是不一样的。
平板计数琼脂检出的菌落数最少，其次是营养琼脂，再次是肉浸液琼脂，FDA标准平板上检测出的菌落数最高。
四、培养和倾注时间的撑握在做食品菌落数指标时，通常采用三种培养时间，然而究竟采用多长的培养时间为宜呢，通过三种不同的培养时间试验得出，培养时间越长，得出的平均菌落数有所增加，以72小时为标准培养时间的话，24小时培养时间的菌落数只能达72小时的27%左右，48小时培养时间的菌落数那么能达72小时的95%左右。
探究食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
探究食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项【摘要】食品微生物检验是保障食品安全的重要手段之一。
其中菌落总数检测是评价食品卫生质量的重要指标。
在进行菌落总数测定时，需要进行样本采集前的准备工作，注意保持实验环境的清洁。
在样本采集过程中，应注意避免污染，确保采样的准确性。
实验操作步骤需严格按照规程进行，以保证实验结果的准确性。
需注意实验过程中可能出现的常见问题，并及时解决。
根据实验结果进行分析并得出结论，强调严格遵守操作规程，保障实验结果的准确性，提高食品安全意识。
通过这些注意事项，可以确保食品微生物检验的准确性和可靠性。
【关键词】食品微生物检验、菌落总数测定、样本采集、操作步骤、常见问题、结果分析、准确性、食品安全、操作规程、意识提高。
1. 引言1.1 了解食品微生物检验的重要性食品微生物检验是保障食品安全的重要手段之一。
食品中可能存在着各种微生物，包括细菌、真菌和霉菌等，它们对人体健康造成潜在的威胁。
了解食品微生物检验的重要性，可以让我们认识到食品微生物检验对于保障公众健康和预防食源性疾病的重要性。
通过对食品中微生物的检测，可以及时发现并控制食品中的潜在危害，确保食品的安全和卫生。
只有在食品微生物检验方面做到科学合理、及时准确，才能有效防止食源性疾病的发生，保障公众健康。
了解食品微生物检验的重要性，可以提高我们对食品安全的认识，增强我们的食品安全意识，从而更好地保护自己和家人的健康。
1.2 菌落总数检测的意义菌落总数检测是食品微生物检验中非常重要的一项指标。
菌落总数反映了食品中细菌、霉菌和酵母菌等微生物的数量，可以直观地了解食品的卫生状况和质量安全情况。
菌落总数检测的意义主要体现在以下几个方面：菌落总数检测可以评估食品的卫生状况。
微生物的存在与数量直接关系到食品的卫生质量，高菌落总数可能意味着食品受到污染或不当处理，存在较高的安全隐患。
菌落总数检测可以指导生产加工过程。
通过监测菌落总数的变化，可以发现生产过程中可能存在的交叉污染、保质期问题等，及时采取相应措施，确保食品质量。
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
散的展开，否则会导致细菌在检测的过程中出现聚集， 对检测结果的精确度产生很大的影响。如果食品的酸 度较高，如在检测食醋或酸性饮料的过程中，在样品 的稀释环节，应分析样品的酸性值，确保样品的酸性 值处于中性，如果样品的酸性值过高，会导致菌落无 法在培养基正常生长。
（2）稀释液的制备。将 25 mL 样品置于 225 mL 的灭菌稀释液中，然后确保其均匀，通过分析样品的 污染程度和食品的卫生标准，可选择合适的稀释度连 续 10 倍递增稀释，然后再换 1 支 1 mL 的灭菌吸管以 确保稀释倍数保持准确性 [1]。在吸管进出装有稀释液 的玻璃瓶时，不能触及瓶口，以免导致污染物的接触，
稀释的过程中，应采用 1 mL 的平皿，将稀释液放入其 确保测定结果的精确性。在相同的样品中，采用相同
中，在操作过程中，不要将平皿完全打开，应揭开平 的稀释倍数，在平皿上菌落的数量应比较接近，随着
皿的部分并从侧面加入，在液体流出后，应多停留一会， 稀释倍数的增加，应确定好菌落的数量，菌落的数量
使管尖内剩余的液体排出，确保稀释度的均匀。
在无菌的状态下进行，空白实验对整个实验环节起到 至关重要的作用。在平板培养过程中，要合理控制好 培养箱的温度，培养箱的温度一般在 37 ℃，如果温度 过低，会导致细菌的污染。
２ 平板接种与培养基的倾注
３ 菌落计数结果
在连续稀释后，选择合适的稀释度，在 10 倍递增
在预定的培养时间结束后，应统计菌落的数量，
摘 要：菌落的总数可科学地评估食品的整体卫生情况，全面分析食品的新鲜程度和污染程度，因此采用菌 落总数测定的方式，可在一定程度上分析食品卫生情况。本文主要分析食品微生物检；菌落总数
Ａｂｓｔｒａｃｔ：The total number of colonies can scientifically evaluate the overall hygienic condition of food, and can analyze the fresh degree and pollution degree of food in a comprehensive way. Therefore, the method of total colony count can analyze the food hygiene situation to a certain extent. This paper analyses the food microbiological examination of the total number of colonies in the notes.
探究食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
探究食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项【摘要】食品微生物检验中菌落总数测定是一项重要的质量控制措施，有助于检测食品是否受到微生物污染。
在进行菌落总数测定时，需要注意样品采集、实验室操作、菌落计数仪器操作、数据分析和质量控制等方面的注意事项。
样品采集时应保持无菌操作，实验室操作时严格遵守操作规程，菌落计数仪器操作时应校准仪器并确保准确性，数据分析时要认真记录数据并进行正确的统计分析，质量控制方面要定期检验仪器和重复实验等。
这些注意事项对于确保菌落总数测定结果的准确性和可靠性至关重要。
通过严格遵守这些注意事项，可以有效提高食品微生物检验中菌落总数测定的准确性和实用性，保障食品安全。
未来，我们可以进一步深入研究和优化相关方法，不断提高检验水平，确保食品质量和消费者健康。
【关键词】食品微生物检验、菌落总数测定、注意事项、样品采集、实验室操作、菌落计数仪器、数据分析、质量控制、总结、展望1. 引言1.1 研究背景食品微生物检验是食品安全监管中非常重要的一个环节，其中菌落总数测定是评价食品卫生质量的重要指标之一。
菌落总数检测是指在特定培养条件下，培养48小时到72小时后，对产生单一培养基上的菌落进行计数的方法，能够反映食品中微生物的总体数量。
食品微生物检验的对象广泛，包括食品生产加工中的原料、半成品和成品，也包括餐饮业中使用的食品和食材。
食品微生物检验中菌落总数测定是评价食品卫生质量的重要手段之一，通过对食品中微生物总数的监测，可以及时发现食品中的污染源，并且评估食品的安全性。
研究背景：食品微生物检验中菌落总数测定的准确性关系到对食品安全的评估，因此在进行菌落总数测定时，需要注意一系列操作规范和注意事项，以确保测试结果的准确性和可靠性。
接下来将分别介绍样品采集注意事项、实验室操作注意事项、菌落计数仪器操作注意事项、数据分析注意事项以及质量控制注意事项。
1.2 研究意义食品微生物检验是食品安全监管的重要一环，菌落总数测定是其中的关键步骤之一。
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项食品微生物检验中，菌落总数测定是一个重要的指标，它能够反映食品中的微生物质量。
但是，进行菌落总数测定需要注意以下几点： 1. 样品的采集和处理要严格按照规定程序进行，避免污染和误差。
2. 选择适当的培养基和培养条件，以保证菌落的正常生长和形成。
3. 在进行菌落计数时，要注意避免菌落重叠和合并，否则会影响计数的准确性。
4. 为了保证结果的可靠性，应该进行多次测定，取平均值作为最终结果。
5. 在测定中，要注意消毒和清洁操作，避免交叉污染。
通过以上几点的注意，可以有效提高菌落总数测定的准确性和可靠性，保证食品的安全和质量。
- 1 -。
食品中菌落总数测定的注意事项
民以食为天，食以安为先。
菌落总数测定是判定食品被细菌污染程度及卫生质量、反映食品卫生状况的重要指标，要求检测人员严格按照GB 4789.2-2016[1]进行检验，但在实际检测过程很容易受各种因素影响。
笔者结合自身微生物检验工作经验，分析总结影响菌落总数结果的因素，以供参考。
1 无菌室检验前1.1 样品的采集与管理样品的采集和贮存过程中要充分了解GB 4789.1-2016[2]中分级采样方案的原理及含义，进行无菌取样，注意样品的贮存条件及有效期，尽早将样品送往实验室进行检验，特别是监督抽检工作中抽、检要分离，更要注意抽、检工作的协调联动，确保抽样后能够尽快开展检验工作，防止样品中微生物数量因客观条件的干扰而发生变化。
1.2 设施、材料与环境微生物检验员经过培训合格、具备相应的资质后才能上岗，要牢固树立无菌意识。
洁净室、检验用品、设备应按照GB/T 27405-2008[3]要求进行清洁、灭菌、维护以及校准。
及性能验证。
1.3 培养基和试剂实验室配置用水及培养基应按照GB 4789.28-2013[4]要求进行质量控制。
目前商品化的培养基已经很成熟，笔者建议使用知名厂家的商品化培养基开展检验工作，并按照供应商标的贮存环境、有效期和使用说明进行培养基和试剂的验收、保存和使用。
2 无菌室检验过程2.1 样品的前处理实验室收到样品后应按要求尽快检验，特别是保质期较短和散装食品应立即检验。
处理食醋等酸度偏高的样品时，需先用20%～30%的灭菌碳酸钠溶液将其pH值调至中性，再进行检验[5]。
2.2 样品的稀释2.2.1 稀释液的选择GB 4789.2-2016要求，稀释液为磷酸盐缓冲液或生理盐水。
这两种稀释液的检测结果一致性较高，偏酸或偏碱的样品则推荐使用磷酸盐缓冲液作为稀释液，因为磷酸盐缓冲液在提供正常渗透压的同时具有一定的酸碱缓冲能力，更能保证结果的准确性；如样品本身含高盐或高糖且稀释倍数较低时可使用蒸馏水作为稀释液，以降低样品稀释液的渗透压[6]。
探究食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
探究食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项作者：麦苗来源：《健康必读（上旬刊）》2019年第05期【摘 ;要】菌落总数是评估食品卫生情况、新鲜程度、污染程度的重要指标，对菌落总数的测定能够在一定程度上评判产品生产环境的卫生情况。
当前，社会范围内对菌落总数评定的安全性和准确性提出了更高的要求。
为此，文章在阐述食品微生物检验中菌落总数测定内涵和过程的基础上，食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项问题进行探究。
【关键词】食品微生物;检验;菌落总数;测定;注意事项【中图分类号】R155.5 ;;;;;【文献标识码】A？ ;;;;【文章编号】1672-3783（2019）05-0294-01在社会经济的不断发展下人们对产品安全问题予以了更多的关注。
国家对于是食品卫生的检测的力度也逐渐增强，在众多食品检测工作中，食品微生物的检验中菌落总数测定是对于食品的卫生情况、新鲜程度及污染程度检测的常用方法，通过这种方式能够帮助相关人员更好的了解产品的质量情况，为增强食品质量安全提供更多支持。
1 食品微生物檢验中菌落总数测定概述菌落总数主要是指被检测的样品，在经过处理之后，其在一定条件下培养之后能够获取一定数量样品中的菌落总数。
菌落总数是评价食品卫生情况、新鲜程度、污染程度的重要指标之一。
在食品微生物检验中，通过菌落总数的测定能够帮助相关人员更好的了解和观察细菌在食品中的繁殖生长情况，从而更为全面的反映食品在生产、加工、销售等方面是否符合卫生要求。
2 食品微生物检验中菌落总数的测量过程在无菌的条件下，将25ml 的待检测样品放置在25ml的生理盐水和其他灭菌稀释溶液中，在充分搅拌和稀释之后，再在其中加入一定量的稀释剂，将混合配置的溶液静置培养。
在溶液静置培养的过程中还需要按照灭菌标准来取出一定数量的稀释液，沿着被壁将其注入到装有生理盐水的试管内部，将这些配置的溶液均匀搅拌，获取配比为1：10的溶液。
按照以上的操作另取试管来配置溶液，将达到稀释要求的溶液转移到培养皿中，并在器皿中注入一定数量的营养琼浆，摇晃均匀，将稀释的溶液和营养琼脂充分融合。
食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
在 无 菌 条 件 下 进 行 操 作， 取 适 量 样品于经过杀菌的玻璃瓶中，剪碎， 振 荡 均 匀 后， 得 到 1/10 的 溶 液。 像 鱼、肉等固体样品，一般会对样品剪 碎、稀释后，用均质器再高转速下进 行处理，时间持续 1 min，最终也得到 1/10 的样品。在实际检测中，需要配 制逐渐递增 10 倍的稀释样品。每次稀 释时都要更换灭菌管，而且经过灭菌 的吸管不能与其他吸管相接触。为了 防止带入污染物，也不能触碰到装有
4 菌落计数
一 旦 培 养 时 间 达 到 要 求， 应 立 即 进行计数。如果此时不方便计数，可 以先将其放置在 5℃以下的环境中放置 24 h。对相同和不同稀释度的平皿分
别进行观察，记录每种菌落的生长状 态。一般情况下，两个平行实验具有 相似的菌落数。对于不同稀释度的被 检样品，稀释倍数越大则菌落数越少， 也就是说成反比例的关系。如果观察 到稀释度较高的样品中菌落数也很高， 则说明检测的过程出现了错误。
稀释液容器口的外侧；应该缓慢地加 入被检样品稀释液，避免稀释液被污 染；应该采用最小刻度在 0.1mL 以下 的吸管来取 1mL 的样品。
3 平板接种培养
在一定的器皿中，吸取 1mL 稀释 液加入样品中，配得 10 倍递增的稀释 液，在这个过程中要确保采用同样的 吸管，之后使吸管垂直以便稀释液完 全滴入。要提前加热融化器皿上的琼 脂，在 45 ℃的恒温水浴中保温，备用。 温度过低，则造成琼脂二次凝固，温度 过高，将会影响细菌的正常生长。器皿 的最佳侵入量应在 15mL 左右，要舍 掉带有沉淀的琼脂，以便于正常观察。
5 结论
民 以 食 为 天， 食 品 的 安 全 性 直 接 关系到人们的身体健康。如今，食品 检测技术迅猛发展，人们对检测的精 准度提出了更高的要求。检测人员应 采取谨慎的措施和认真的态度对菌落 总数进行检测，确保操作的精细化和 规范化，争取每个步骤零失误。实验 数据具有一定的可靠性，才能使检测 结果更有参考价值。 参考文献
菌落总数检测中的注意要点)
菌落总数检测中的注意要点菌落总数测定一、菌落总数的概念和测定意义菌落(colony)是指细菌在固体培养基上发育而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚集而成的，故又有细菌集落之称。
菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表面积(clni)内，、所含能于某种周体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。
菌落总数主要是作为判定食品被细菌污染程度的标记，也可以应用这一方法观察食一中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态．以便对被检样品进行卫生学评价时提供科学依据．二、茵落总数测定的几项说明1．菌落总数的测定。
是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后，每个细菌细胞都能形成一个可见的单独菌落的假定为基础的。
由于检验中采用37℃于有氧条件下培养(空气中含氧约20％)，因而并不能测出每g或ml检样中实际的总活菌数，厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不生长，有特殊营养要求的一些细菌也受到了限制，因此所得结果，只包括一群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。
2．鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个，成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重量、容量或表面积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units，CFU)报告之。
3．每种细菌都有它一定的生理特性，培养时，应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、PH、需氧性质等)去满足其要求，才能分别将各种细菌都培养出来。
因此，要得到较全面的细菌菌落总数，应将检样接种到几种不同的非选择性培养基上，并培养在不同条件下，如温度，氧气供应等。
但国家颁发的食品卫生标准对不同食品的菌落总数的规定，都是根据用普通营养琼脂进行需氧培养所得的结果确定的，因此在食品的一般卫生学评价中并不要用几种不同的非选择性培养基培养。
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食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项
1菌落总数及测定
菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别
的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。
当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数就是指食品检样经过处理,在一定条件下(如需氧性质、培养基成分、pH、培养温度和时间等) 1 mL ( g)检样中所含菌落的总数。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度、食品的新鲜度及卫生质量,它反映食品在生产、加工、销售过程中是否符合卫生要求,
以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
也可以应用这一方法观察食品中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态,菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣[ 1 ] 。
2菌落总数测定中的注意事项
2. 1 所用器皿及稀释液
2. 1. 1 检验中所用玻璃器皿,如培养皿,吸管、试管、移液器的吸头等必须是完全灭菌的,并在灭菌前彻底洗涤干净,不得残留有抑菌
物质。
2. 1. 2 用作样品稀释的液体,每批都要有空白对照。
如果在琼脂对照平板上出现几个菌落时,要查找原因,如可通过追加对照平板,以判定是空白稀释液,用于倾注平皿的培养基,还是平皿、吸管或空气可能存在的污染。
2. 1. 3 检样的稀释液一般用灭菌盐水,如果对含盐量较高的食品(如酱品等)进行稀释,则宜用蒸
馏水。
做醋时用20% ～ 30%碳酸钠调pH 至中性。
2. 2 检样的稀释
2. 2. 1 检样稀释时,应以无菌操作称取(或量取)有代表性的样品25
g (或mL ) , 剪碎放于含有225 mL灭菌稀释液的玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠) ,经充分振摇作成1: 10 的稀释液。
如系肉、鱼等固体样品,先用自来水把表面冲洗干净,取可食部分(即鱼肉)剪细
加入稀释液后,置均质器中以8 000 ～ 10 000 r /min 速度处理1 min,使做成均匀的1: 10稀释液。
2. 2. 2 根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,将上述1: 10的检样稀释液再做成几个适当的10 倍递增稀释液,每递增稀释一次,必须另换1 支1 mL 灭菌吸管或吸头,这样所得检样的稀释倍数方为准确。
2. 2. 3 从吸管筒内取出灭菌吸管时,不要将吸管尖端触及其他仍留在容器内的吸管的外露部分;而且吸管在进出装有稀释液的玻璃瓶和试管时,也不要触及瓶口及试管口的外侧部分;因为这些部分都可能
接触过手或其他沾污物。
当用吸管将检样稀释液加至另一装有9 mL
稀释液的试管内时,应小心沿管壁加入,不要触及管内稀释液,以防吸管尖端外侧部分黏附的检液也混入其中。
2. 2. 4 对吸管体积的要求是取1 mL的样品匀液使用的吸管的最小刻度应该不低于0. 1 mL。
2. 3 平板接种与培养
2. 3. 1 在作10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移lmL 稀释液加入皿内(从皿侧加入,不要揭去皿盖) ,最后将吸管直立使液体流毕,并在皿底干燥处再擦一下吸管尖将余液排出,而不要吹出。
每个稀释度应作2 个平皿。
2. 3. 2 用于倾注平皿的营养琼脂应预先加热使其融化,并保温于( 45 ±1) ℃恒温水浴中待用。
温度太高影响细菌生长,太低琼脂易凝固不能与检液充分混匀, 倾注平皿时, 每皿内倾入约15 mL,平板过厚可影响观察,太薄又易干裂,最后将琼脂底部带有沉淀的部分弃去。
为了防止细菌增殖及产生片状菌落,在检液加入平皿后,应尽
快倾注培养基并旋转混匀,可正反两个方向旋转,检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20 min[ 2 ] 。
琼脂凝固后,在数分钟内即应将平皿翻转予以培养,这样可避免菌落蔓延生长。
2. 3. 3 为了控制污染,需做空白对照实验,在取样进行检验的同时,于工作台上打开一块琼脂平板,其暴露的时间,应与该检样从制备、稀释到加入平皿时所暴露的最长的时间相当,然后与加有检样的平皿一并置于温箱内培养,以了解检样在检验操作过程中有无受到来自空气的污染。
2. 3. 4 培养温度,应根据食品种类而定。
一般用36 ℃培养,培养温度和时间有不同的区分,是因为在制定这些食品卫生标准中关于菌落总数的规定时,分别采用了不同的温度和培养时间所取得的数据,同时水产品因来自淡水或海水,水的温度较低,因而制定水产品细菌方
面的卫生标准时,系用30 ℃作为培养的温度[ 3 ] 。
2. 3. 5 加入平皿内的检样稀释液(特别是10- 1的稀释液) ,有时带有食品颗粒,在这种情况下,为了避免与细菌菌落发生混淆,可作一检样稀释液与琼脂混和的平皿,不经培养,而于4 ℃环境中放置,以便在计数检样菌落时用作对照。
2. 4 菌落记数与报告
2. 4. 1 到达规定培养时间,应立即计数。
如果不能立即计数,应将平板放置于0～4 ℃,但不得超过24 h。
从温箱内取出平皿进行菌落计数时,应先分别观察同一稀释度的两个平皿和不同稀释度的几个平皿内平板上菌落生长情况。
平行试验的2 个平板与菌落数应该接近,不同稀释度的几个平板上菌落数则应与检样稀释倍数成反比,即检样稀释倍数越大,菌落数越低,稀释倍数越小,菌落数越高。
如果稀释度大的平板上菌落数反比稀释度小的平板上菌落数高,则系检验工作中发生的差错,属实验室事故[ 4 ] 。
此外,也可能因抑菌剂混入样品中所致,均不可用作检样计数报告的依据。
2. 4. 2 如果平板上出现链状菌落,菌落之间没有明显的界限,这是在琼脂与检样混合时,一个细菌块被分散所造成。
一条链作为一个菌落计不要把链上生长的各个菌落分开来数。
2. 4. 3 检样如系微生物类制剂(如酸牛乳、酵母制酸性饮料) ,则平板计数中应相应地将有关微生物(乳酸杆菌、酵母菌)排除,不可并入检样的菌落总数内作报告。
一般在校正检样的pH 7. 6后,再进行稀释和培养,此类嗜酸性微生物往往即不易生长。
2. 4. 4 当检样的菌落数为1～100 时,按实有数报告;大于100时,只记录左面头两位数字(用两位有效数字作报告,可避免产生虚假的精确概念) ,左面第三位数字则用四舍五入法计算,从第二位数字之后都记为0,为了缩短数字后面的0数,也可用10 的指数来表示,固体检样以克( g)为单位报告,液体检样以毫升(mL)为单位报告,表面涂擦则以平方厘米( cm2 )报告。