尿液检验PPT课件
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尿胆原+对二甲氨基苯甲醛→樱红色化合物
酸性条件 ↓
方法学评价
①简单快速,分析仪,定性或定量; ②不同试带灵敏度不同(1-4mg/L)。 ③偶氮反应试带不受胆红素影响,对尿胆原特异。
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【操作】(详见实验课本 P99 )
1.加入氯化钡除去胆红素: 尿液与Bacl2比例为 4:1
2.加尿液:加尿液`shang qing ye 2ml
实验一 尿酮体改良rothera法定性检查
【原理】
亚硝基铁氰化钠法(改良rothera法)
碱性条件
丙酮 +亚硝基铁氰化钠 → 紫色化合物 乙酰乙酸
本法对
乙酰乙酸
灵敏度为80mg/L
丙酮
灵敏度为 1000mg/L
3
【操作】(详见实验课本 P96 )
1.加酮体粉 : 2.滴加尿液 : 3.观察结果 :
尿液检验
1.尿酮体检查 2.尿胆红素检查 3.尿胆原检查 4.尿血红蛋白检查 5.尿肌红蛋白检查 6.乳糜尿检查
2016 Mar.
龙岩市第一医院 邱群凤
1
实验一 尿酮体改良rothera法定性检查
(罗瑟拉)
当机体能量代谢发生障碍,脂肪
分解代谢增加,血中酮体升高,过多 的酮体从尿中排出,称为酮尿。
2
易热性触酶
3. 烘干滤纸: 应少量多次并保证标本量足够 4.保证试剂有效
5.控制试剂剂量
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实验五 尿肌红蛋白邻联甲苯胺法定性检查
【原理】
肌红蛋白和血红蛋白一样,分子中含血红素基因, 具有类过氧化物酶活性能用联苯胺和邻联甲苯胺与 过氧化氢反应检出. 肌红蛋白能溶于80%饱和度的硫酸铵溶液中而血红 蛋白则不能,因而可鉴别.
4.判断结果
8
【结果判断】
①沉淀即刻变为蓝绿色 ②沉淀变为绿色 ③沉淀逐渐变为淡绿色 ④长时间不变色 强阳性 阳性 弱阳性 阴性 +++ ++ + -
9
【干扰因素】
假阳性 水杨酸、阿司匹林、牛黄→紫红色→
干扰Harrison法.
假阴性 ①标本保存不当(未避光) ②Fouchet试剂加入的量不准确
酸性条件 ↓
胆红素+氯化钡→沉淀+三价铁→胆青素/胆绿素/胆黄素 (蓝绿色/绿色或黄绿色)
7
【操作】(详见实验课本 P97 )
1.加尿液: 加尿液5ml 2.吸附胆红素: 加2.5ml氯化钡溶液于尿中→
混匀→离心3~5min→弃上清液
3.加试剂: 向沉淀表面加Fouchet试剂2滴→放
置片刻,观察沉淀表面颜色变化
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【操作】(详见实验课本 P102 )
1. 以磺基水杨酸定性尿蛋白
2. 以邻联甲苯胺法定性血红蛋白
3. 加尿液,加入硫酸铵沉淀血红蛋白 4. 再次定性血红蛋白 5. 判断结果
①血红蛋白 ②肌红蛋白 沉淀为蓝色, 上清液正常 上清液为蓝色, 无蓝色沉淀
③血红蛋白肌红蛋白 上清液出现蓝色, 沉淀亦出现蓝色
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【结果判断】
①加入试剂后立即出现黑褐色 ②加入试剂后立即出现蓝褐色 ③加入试剂后由浅蓝褐色逐渐变为明显的蓝褐色 ④加入试剂后10s由浅蓝色逐渐变为蓝色 ⑤加入试剂2min后仍不显色 ++++ +++ ++ + -
20
【注意事项】
1.器材合格: 滤纸质量优良,试验用具无血迹或脓液
2.标本新鲜: 可先煮沸,以破坏白细胞中的过氧化氢酶及其他
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【注意事项】
1.尿液标本避光收集
2. 尿胆原与饮水量,排尿时间,pH的关系 3. 控制试剂与标本比例 4. 注意实验温度 5. 尿液标本中含有影响结果的物质
6. 稀释阳性标本时不高于1:160
7. Ehrlich试剂与尿液的比例应控制在10:1
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实验四 尿血红蛋白邻联甲苯胺法定性检查
• 正常人血浆中游离Hb微量(50mg/L),与结合珠 蛋白形成Hb-Hp复合物,在单核-巨噬细胞系 统代谢,故尿中Hb极微。定性:阴性 • 尿液中Hb来源: ①血管内溶血 ②尿路出血 • 验证尿液潜在出血的试验: 隐血试验(occult blood test)
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【干扰因素】 Ehrlich醛反应
干扰因素 评 价 标本因素 ①标本久置,尿胆原氧化为尿胆素--假阴性
②尿胆原含量 与饮水量、排尿时间、尿液PH有关
药物因素 ①假阳性:吩噻嗪类、氯丙嗪类、磺胺类、普鲁
卡因
②假阴性:大量VitC、长期服用广谱抗生素。
内源性物 假阳性:卟胆原、吲哚、胆红素→红色。 质
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【注意事项】
1. 使用新鲜尿液,避光收集,碱性尿液先酸化;
2. 保证硫酸根离子充足,确保能产生沉淀; 3. 严格控制加入Fouchet试剂量; 4. 注意可能影响结果药物的因素; 5. 改实验法优点:灵敏度较高,0.9umpl/L
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实验三 尿胆原改良Ehrlich法定性检查
(埃利希)
【原理】
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【注意事项】
1. 标本新鲜
5
【注意事项】
1.试剂配制要准确,易受潮,应密闭、干燥保存; 2.乙酰乙酸不稳定,丙酮易挥发,使用新鲜尿液; 3.控制反应温度,实验室温度过低时在30℃水浴箱中 完成; 4.存在大量非结晶尿酸盐时,可能出现橙色反应影 响结果判断,离心除去。
6
实验二
尿胆红素Harrison法定性检查
(哈里森)
【原理】
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【原理】
亚铁血红素
H2O2 ───→
(色素原)
O(氧化)
邻甲苯胺─→邻甲偶氮苯(蓝色)
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【操作】(详见实验课本 P101 )
1.滴加尿液:先滴1滴在滤纸上 2.烘干滤纸:烘干后痕迹处继续滴1滴尿液,反复3~4次
3.加试剂:邻联甲苯胺冰醋酸溶液2~3滴,再滴3%过氧化氢
2~3滴
4.观察结果:立即观察颜色变化
3.加试剂:加Ehrlich试剂0.2ml,室温下静置10min
4.观察结果:在白色衬纸下,从管口向管底观察颜色变化 5.稀释阳性标本并重复操作 ( P99 )
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【结果判断】
①不变色,加温后无反应 ②10min后呈微红色 ③10min后呈樱红色 ④立即呈深红色 阴性 弱阳性 阳性 强阳性 + ++ +++
①立即出现深紫色 ②立即呈现淡紫色后渐转深紫色 ③逐渐呈现淡紫色 ④5min内无紫色出现
1小勺 2~3滴,没过酮体粉为宜 如下规则
强阳性 阳性 弱阳性 阴性 4
+++~++++ ++ +
【干扰因素】
假阳性 较多肌酐、肌酸,高色素尿, 酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物 假阴性 ①标本收集和保存不当; ②亚硝基铁氰化钠对温度、热度或光线很 灵敏; ③试带受潮失活。