〖医学〗高效液相色谱法测定血清中维生素A、E、β-胡萝卜素
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多数起病急骤，常有受凉淋雨、劳累、 病毒感 染等诱 因，约1/3患病 前有上 呼吸道 感染。 病程7~ 10天。 （一 ）寒战 、高热 ：典型 病例以 突然寒 战起病 ，继之 高热， 体温可 高达39℃~40℃，呈 稽留热 型，常 伴有头 痛、全 身肌肉 酸痛， 食量减 少。抗 生素使 用后热 型可不 典型， 年老体弱者可仅有低热或不发热。
高效液相色谱法测定பைடு நூலகம்清中 维生素A、E、β-胡萝卜素
南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心
一、原理
本实验应用HPLC法测定人血清中维生 素A、维生素E及β-胡萝卜素；
血清样品用有机溶剂处理、提取后经 HPLC色谱柱分离，根据保留时间和峰 面积(或峰高)与标准比较，便可定性和 定量。
二、操作方法
3. 在测定中，可用标准血清进行质量 控制，保证测定结果的可靠性。
标准血清至少要在测定开始和结束 时各测定一次；
当样品较多时，可隔若干个样(如 12个)测定一次，最后取标准血清 测定的平均值即可。
4. 样品保存时间： 血清样品在本法的制备与贮藏温度下， 可保存6个月不发生变化； 维生素A和维生素E的无水乙醇贮备 液及应用液贮于冰箱(2~l0℃)，分别 可稳定2个星期和1个星期； β-胡萝卜素遇光和氧会被迅速破坏， 所以应临用新配，并注意避光保存。 样品的提取液比较稳定，可以隔夜后 进行分析。
多种 肺炎
细菌均可引起大叶性肺炎，但绝大多 数为肺 炎链球 菌，其 中以Ⅲ 型致病 力最强 。肺炎 链球菌 为革兰 阳性球 菌，有 荚膜， 其致病 力是由 于高分 子多糖 体的荚 膜对组 织的侵 袭作 用。少数为肺炎杆菌、金黄*色葡萄球 菌、溶 血性链 球菌、 流感嗜 血杆菌 等。肺 炎链球 菌为口 腔及鼻 咽部的 正常寄 生菌群 ，若呼 吸道的 排菌自 净功能 及机体 的抵抗 力正常 时， 不引发肺炎。当机体受寒、过度疲劳 、醉酒 、感冒 、糖尿 病、免 疫功能 低下等 使呼吸 道防御 功能被 削弱， 细菌侵 入肺泡 通过变 态反应 使肺泡 壁毛细 血管通 透性增 强，浆 液及 纤维素渗出，富含蛋白的渗出物中细 菌迅速 繁殖， 并通过 肺泡间 孔或呼 吸细支 气管向 邻近肺 组织蔓 延，波 及一个 肺段或 整个肺 叶。大 叶间的 蔓延系 带菌的 渗出液 经叶支 气管 播散所致。 编 辑 本 段 临 床表现
1．样品处理
血清样品在采血后立即离心，分离 血清；
置5ml塑料试管中，充氮、密封，于 -40℃保存备用。
三、数据处理
将样品中三种待测组分平行测定的峰面 积均值分别代入各自的工作曲线，求得 测定样液中各自的含量;
再乘以样品处理时的稀释倍数，即得到 血清样品中维生素A、维生素 E及β-胡 萝卜素的含量。
四、质量控制
1. 配制标准液时：
若有条件应对配制好的标准稀释液 维生素A、维生素E、β-胡萝卜素 200～600nm扫描，观察最大吸收峰 的波长；
如果所用HPLC仪能作波长变换，则 在测定组分的最大吸收波长下测定 可取得较高的灵敏度。
2. 吸取上清液时：
注意不可触及界面；
否则： 一方面会吸入水，影响分析和柱 的分离能力； 另一方面，界面上的脂肪层可能 会影响分析结果。
五、思考题
1. 维生素A、D 、E的生理作用、缺乏表 现及食物来源。
2. 哪些B 族维生素与能量代谢有关？
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高效液相色谱法测定பைடு நூலகம்清中 维生素A、E、β-胡萝卜素
南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心
一、原理
本实验应用HPLC法测定人血清中维生 素A、维生素E及β-胡萝卜素；
血清样品用有机溶剂处理、提取后经 HPLC色谱柱分离，根据保留时间和峰 面积(或峰高)与标准比较，便可定性和 定量。
二、操作方法
3. 在测定中，可用标准血清进行质量 控制，保证测定结果的可靠性。
标准血清至少要在测定开始和结束 时各测定一次；
当样品较多时，可隔若干个样(如 12个)测定一次，最后取标准血清 测定的平均值即可。
4. 样品保存时间： 血清样品在本法的制备与贮藏温度下， 可保存6个月不发生变化； 维生素A和维生素E的无水乙醇贮备 液及应用液贮于冰箱(2~l0℃)，分别 可稳定2个星期和1个星期； β-胡萝卜素遇光和氧会被迅速破坏， 所以应临用新配，并注意避光保存。 样品的提取液比较稳定，可以隔夜后 进行分析。
多种 肺炎
细菌均可引起大叶性肺炎，但绝大多 数为肺 炎链球 菌，其 中以Ⅲ 型致病 力最强 。肺炎 链球菌 为革兰 阳性球 菌，有 荚膜， 其致病 力是由 于高分 子多糖 体的荚 膜对组 织的侵 袭作 用。少数为肺炎杆菌、金黄*色葡萄球 菌、溶 血性链 球菌、 流感嗜 血杆菌 等。肺 炎链球 菌为口 腔及鼻 咽部的 正常寄 生菌群 ，若呼 吸道的 排菌自 净功能 及机体 的抵抗 力正常 时， 不引发肺炎。当机体受寒、过度疲劳 、醉酒 、感冒 、糖尿 病、免 疫功能 低下等 使呼吸 道防御 功能被 削弱， 细菌侵 入肺泡 通过变 态反应 使肺泡 壁毛细 血管通 透性增 强，浆 液及 纤维素渗出，富含蛋白的渗出物中细 菌迅速 繁殖， 并通过 肺泡间 孔或呼 吸细支 气管向 邻近肺 组织蔓 延，波 及一个 肺段或 整个肺 叶。大 叶间的 蔓延系 带菌的 渗出液 经叶支 气管 播散所致。 编 辑 本 段 临 床表现
1．样品处理
血清样品在采血后立即离心，分离 血清；
置5ml塑料试管中，充氮、密封，于 -40℃保存备用。
三、数据处理
将样品中三种待测组分平行测定的峰面 积均值分别代入各自的工作曲线，求得 测定样液中各自的含量;
再乘以样品处理时的稀释倍数，即得到 血清样品中维生素A、维生素 E及β-胡 萝卜素的含量。
四、质量控制
1. 配制标准液时：
若有条件应对配制好的标准稀释液 维生素A、维生素E、β-胡萝卜素 200～600nm扫描，观察最大吸收峰 的波长；
如果所用HPLC仪能作波长变换，则 在测定组分的最大吸收波长下测定 可取得较高的灵敏度。
2. 吸取上清液时：
注意不可触及界面；
否则： 一方面会吸入水，影响分析和柱 的分离能力； 另一方面，界面上的脂肪层可能 会影响分析结果。
五、思考题
1. 维生素A、D 、E的生理作用、缺乏表 现及食物来源。
2. 哪些B 族维生素与能量代谢有关？
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